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第三军医大学学报

第三军医大学学报杂志

Journal of third military medical university 제삼군의대학학보

统计源期刊
  • 主管单位: 第三军医大学
  • 主办单位: 第三军医大学
  • 影响因子: 1.01
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1000-5404
  • 国内刊号: 50-1126/R
  • 发行周期: 半月刊
  • 邮发: 78-91
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1979
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 第三军医大学学报编辑委员会
  • 出版地区: 重庆
  • 主编: 王正国
  • 类 别: 医药卫生综合
期刊荣誉:
  • 幽门螺杆菌CagA抗原性多态性分析

    作者:周建嫦;张建中;徐采朴;何利华;张茂俊;盛涛;郭浩岩

    目的了解我国幽门螺杆菌CagA抗原性的多态性,为临床血清学诊断CagA阳性菌株感染提供实验依据,以及是否存在特定胃十二指肠疾病相关的CagA抗原性型提供线索.方法采用Western blots方法,比较38株我国幽门螺杆菌分离株的CagA与3种不同胃肠疾病分离株兔免疫血清的反应强度.分析不同抗原性类型CagA与疾病的关系.结果任何一种血清均不能识别所有CagA,但任一CagA至少可被一种血清识别,多数菌株CagA的抗原性与CAPM N62接近;抗原性与NCTC11637接近的CagA可能与消化性溃疡相关,但不显著.结论我国不同幽门螺杆菌菌株CagA抗原性存在明显多态性,血清学方法诊断CagA阳性菌株感染时应至少使用3种抗原或抗体,不同抗原性类型CagA与胃十二指肠疾病的关系有待进一步研究.

  • 胃癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星DNA不稳的关系

    作者:房殿春;罗元辉;刘为纹

    目的探讨胃癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星不稳(MSI)的关系.方法采用PCR为基础的方法检测MSI;采用二维DNA电泳和DNA测序技术检测hMLH1突变.结果 68例胃癌中检出hMLH1基因突变3例,突变率为4.4%.hMLH1突变与肿瘤大小、分化程度、组织学类型、浸润深度和临床病理分期无显著相关.至少有1 个位点发现MSI 者17例(25.0%).将MSI分为高频率MSI(MSI-H,≥2个位点)8例、低频率MSI(MSI-L,仅为1个位点)9例和MSI阴性(MSS)51例3组,4例hMLH1基因突变均发生于MSI-H组,而MSI-L和MSS组未见有突变者.结论 hMLH1基因突变仅是部分MSI发生的原因,MSI的发生可能还涉及到hMLH1 以外错配修复基因改变.

  • 胃癌组织hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化状态研究

    作者:房殿春;罗元辉;刘为纹

    目的探讨hMLH1 和hMSH2基因启动子区的甲基化状态与微卫星DNA不稳的关系.方法采用甲基化特异性PCR方法检测hMLH1 和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,采用PCR为基础的方法检测微卫星DNA不稳.结果正常胃粘膜未见hMLH1 和hMSH2基因启动子区的高甲基化.68例胃癌中检出hMLH1高甲基化11例,占16.2%,而且均为去甲基化和高甲基化并存,未见有hMSH2高甲基化者.将MSI分为高频率MSI(MSI-H,≥2个位点)8例、低频率MSI(MSI-L,仅为1个位点)9例和MSI阴性(MSS)51例3组,结果MSI-H组hMLH1高甲基化的检出率显著高于MSI-L和MSS组(P<0.01).结论 hMLH1高甲基化可能参与了MSI病理途径,而hMSH2甲基化状态可能与MSI途径无关.

  • 幽门螺杆菌感染与胃粘膜炎症反应和IL-8活性的关系

    作者:凌贤龙;房殿春;周晓东;杨仕明;罗元辉;鲁荣

    目的评价幽门螺杆菌(Hp)感染与胃粘膜炎症反应和组织IL-8活性的关系.方法采用改良Giemsa染色、Hp免疫组化染色和PCR方法检测Hp感染并对Hp分类;组织IL-8含量测定采用ELISA方法.结果十二指肠溃疡(DU ,95%)、胃溃疡(GU,80%)和慢性萎缩性胃炎(CAG,70%)组Hp感染率显著高于正常对照组(30%),而慢性浅表性胃炎(CSG,37.5%)组与正常对照组相比则无显著差异;DU(85%)、GU(60%)和 CAG(50%)组cagA+ Hp感染率显著高于正常对照组(15.0%),而 CSG组(15.6%)与对照组相比则无显著差异;Hp感染率和IL-8水平随炎症程度的加重而增高.Hp感染和cagA+ Hp感染胃粘膜IL-8水平分别显著高于非Hp感染和cagA- Hp胃粘膜.结论胃粘膜Hp 感染以及Hp cagA的表达状态与胃粘膜炎症反应程度以及胃粘膜IL-8含量密切相关.

  • 胃癌前组织和胃癌中Fas基因表达及其与细胞凋亡的关系

    作者:刘海峰;刘为纹;房殿春

    目的探讨胃癌前组织及胃癌中Fas基因表达状况及其与细胞凋亡的关系.方法应用原位杂交和免疫组织化学技术检测10例正常胃粘膜、72例慢性胃炎和53例胃癌中Fas基因的表达,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较.结果正常胃粘膜无Fas基因表达.Fas mRNA在肠化生组织中的表达率为75.00%,显著高于萎缩性胃炎(37.50%,P<0.01)和胃癌(52.83%,P<0.05).Fas蛋白在肠化生组织中的表达率为80.56%,显著高于萎缩性胃炎(37.50%,P<0.01)、异型增生(55.00%,P<0.05)和胃癌(45.28%,P<0.01) .χ2检验表明两种方法检测阳性率差异无显著性.凋亡细胞原位检测结果显示,Fas蛋白表达阳性萎缩性胃炎、肠化生和胃癌组织中的凋亡细胞指数显著高于Fas蛋白阴性组(P<0.05及P<0.01),Fas蛋白表达状态与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.393,P<0.01).结论 Fas基因对胃癌前组织及胃癌细胞凋亡具有促进性调控作用,细胞凋亡调控异常在胃癌发病中可能起重要作用.

  • 胃粘膜癌前病变Hp感染与bax蛋白表达及细胞凋亡的关系

    作者:刘海峰;刘为纹;房殿春

    目的研究幽门螺杆菌(Hp)感染后胃粘膜癌前病变中bax蛋白表达状态及其与细胞凋亡的关系,了解Hp在胃癌发生过程中的作用.方法采用免疫组织化学等方法检测83例经病理证实为慢性胃炎病人胃粘膜上皮细胞中bax蛋白的表达情况,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较.结果在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生及异型增生中,bax蛋白表达率分别为26.67%、45.45%、70.00%、56.25%,bax蛋白在肠化生组织中的表达率显著高于浅表性胃炎(P<0.01).Hp感染者bax蛋白表达率为64.28%,显著高于未感染者的29.62%(P<0.01).在萎缩、肠化生及异型增生等癌前病变中,Hp感染者与未感染者bax蛋白表达率分别为70.21%及33.33%(P<0.01).凋亡细胞原位检测结果显示,bax蛋白表达阳性肠化生和异型增生组织中的凋亡细胞指数显著高于bax蛋白阴性组(P<0.05及P<0.01).结论 Hp感染对bax蛋白表达有一定的影响,bax基因对胃粘膜上皮细胞凋亡具有促进性调控作用,Hp感染可促进bax蛋白表达增加,这可能是Hp感染诱导胃粘膜上皮细胞凋亡的机制之一.

  • 胃粘膜幽门螺杆菌感染与线粒体DNA微卫星不稳的关系

    作者:凌贤龙;房殿春;周晓东;罗元辉;鲁荣

    目的探讨胃粘膜幽门螺杆菌(Hp)感染与线粒体DNA微卫星不稳(mtMSI)的关系.方法采用改良Giemsa染色、免疫组化染色和PCR方法检测Hp,并对Hp进行分型;采用限制性片段多态性(PCR-SSCP)方法检测胃粘膜细胞mtMSI.结果 30例胃癌检出mtMSI 11 例(36.7%),15例肠化中有4例(26.7%)检出mtMSI,10例异型增生胃粘膜有3例(30%)检出mtMSI.mtMSI主要发生于D-loop闭环区.Hp感染胃粘膜mtMSI发生率显著高于非Hp感染组(P<0.01).mtMSI发生与cagA+ Hp似乎没有密切关系(P>0.05).结论 Hp感染可能与胃粘膜细胞mtMSI发生有关,而mtMSI的发生可能参与了胃癌的发生过程.

  • As2O3对胃癌细胞周期及端粒酶活性的影响

    作者:杨仕明;房殿春;罗元辉;鲁荣;刘为纹

    目的探讨三氧化二砷(As2O3)对SGC-7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响及其机制.方法细胞凋亡、细胞周期分布及相关蛋白的表达采用流式细胞术;端粒酶活性的检测采用端粒末端重复序列扩增-ELISA法(TRAP-ELISA),端粒酶亚单位mRNA及c-myc mRNA的表达采用RT-PCR技术.结果 As2O3可明显抑制SGC-7901细胞的生长,细胞凋亡率明显增加,G0/G1期细胞减少,S和G2/M期细胞增加,Bcl-2、c-myc、PCNA蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加,端粒酶活性明显下降;端粒酶亚单位hTR和TP1 mRNA无明显变化,hTRT mRNA表达减少,同时,c-myc mRNA的表达亦减少.结论 As2O3对SGC-7901细胞的抑制作用可能是通过二条途径实现:一个是诱导细胞凋亡,另一个是通过下调hTRT mRNA的表达来下调端粒酶活性,其机制有可能与c-myc和Bcl-2基因的减少以及Bax基因的增加有关.

  • 胃粘膜细胞线粒体DNA核内整合及其与幽门螺杆菌感染的关系

    作者:凌贤龙;房殿春;周晓东;罗元辉;鲁荣

    目的探讨胃粘膜细胞核内mtDNA整合与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系.方法采用PCR、免疫组化和Giemsa染色法检测Hp;采用原位杂交方法对胃粘膜细胞核内mtDNA序列进行检测.结果胃癌细胞核内mtDNA序列的检出率为20%、癌旁粘膜为16.7%、异性增生为20%、肠上皮化生粘膜为10%、萎缩性胃炎为10%,浅表性胃炎未发现有mtDNA序列整合.胃粘膜细胞核内mtDNA序列的检出率在Hp+组为21.1%显著高于Hp-组(5.3%);在cagA+ Hp感染组(24.4%) 显著高于cagA- Hp感染组(7.4%).结论①胃粘膜细胞mtDNA序列核内整合可能参与了胃癌的发生;②胃粘膜mtDNA序列整合可能与Hp感染有关.

  • 反义hTRT转染对SGC-7901胃癌细胞株形态学的影响

    作者:杨仕明;房殿春;杨金亮;罗元辉;鲁荣;刘为纹

    目的探讨人端粒酶蛋白催化亚单位(hTRT)反义基因转染对SGC-7901胃癌细胞株形态学的影响;方法采用脂质体法将hTRT正、反义真核表达载体导入SGC-7901胃癌细胞株中,从光镜、电镜水平观察转染细胞形态学的变化.结果与未转染细胞相比,光镜下hTRT反义基因转染的SGC-7901胞体增大,胞浆丰富,分裂相减少,核浆比增大,异型性减小;透射电镜下反义基因转染细胞细胞器丰富,胞浆内出现分泌泡样结构及胞质内微囊;扫描电镜下反义基因转染细胞表面微绒毛增多,胞体周围可见大量颗粒样物质,根据AB/PAS染色结果,这些颗粒样物质有可能是其分泌的粘液颗粒.结论 hTRT反义基因有促进SGC-7901细胞分化的作用.

  • 反义hTR基因瘤内注射对荷瘤鼠肿瘤治疗作用的初步观察

    作者:杨金亮;房殿春;杨仕明;罗元辉;罗昆仑;鲁荣

    目的观察反义人端粒酶RNA(hTR)基因瘤内注射对荷瘤鼠肿瘤的治疗作用.方法人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠背部皮下接种,成瘤后于瘤内多点注射FuGENETM6/反义hTR表达质粒复合物,设FuGENETM6稀释液为对照,观察肿瘤生长情况和肿瘤组织学结构变化.结果治疗组肿瘤生长速度明显减慢,治疗1月后瘤体较对照组小23%,瘤组织中的瘤细胞排列较稀疏并形成较多的腺样结构,显示有分化倾向. 结论反义hTR基因瘤内注射对荷瘤鼠肿瘤有一定的治疗作用,值得进一步研究.

  • 人反义端粒酶RNA转染SGC-7901细胞后细胞周期调控基因表达的改变

    作者:杨金亮;房殿春;杨仕明;罗元辉

    目的: 观察反义人端粒酶RNA(Human telomerase RNA components, hTR)转染的SGC-7901胃癌细胞(7901-ahTR)细胞周期调控基因表达的变化.方法采用RT-PCR、Western印迹和免疫组化方法检测SGC-7901和 7901-ahTR细胞p21、p27、p16、c-myc等基因mRNA和蛋白的表达.结果反义hTR转染的7901细胞p21和p27表达增加,PCNA和c-myc 表达下调,而cyclinD1和 p16 mRNA表达无明显变化.结论抑制端粒酶活性能调节多种细胞周期调控基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖和诱导分化.

  • 多重PCR和DNA测序技术检测胃癌APC基因15外显子突变

    作者:房殿春;罗元辉;杨仕明;李小安;凌贤龙;方丽;刘为纹

    目的探讨APC基因突变在胃癌发生中的作用及与微卫星DNA不稳的关系.方法采用多重PCR、DGGE电泳和DNA测序技术检测APC15外显子突变,采用PCR为基础的方法检测微卫星DNA不稳.结果 68例胃癌中检出APC基因15外显子突变15例(22.1%),APC基因突变在肠型胃癌的检出率显著高于弥漫型胃癌(P<0.05),而与肿瘤大小、分化程度、浸润深度和临床病理分期无显著相关.至少有1 个位点发现MSI 者17例(25.0%).将MSI分为高频率MSI(MSI-H,≥2个位点)8例、低频率MSI(MSI-L,仅为1个位点)9例和MSI阴性(MSS)51例3组,结果APC基因突变均发生于MSI-L和MSS组,而MSI-H未见有突变者.结论 APC基因可能是肠型胃癌的易感基因,APC基因突变可能参与了LOH病理途径,而与MSI途径无关.

  • 人类线粒体tRNAs基因在CagA阳性Hp培养滤液诱导转化的胃上皮细胞中表达

    作者:陈洁平;沈鼎明;杨致邦

    目的研究CagA阳性Hp培养滤液对人胃粘膜上皮细胞(GES-1)作用的机制.方法将CagA阳性Hp培养滤液诱导恶性转化的GES-1细胞与CagA阴性Hp培养滤液处理的GES-1细胞进行mRNA差异显示,以寻找Hp致胃癌发病的相关基因.结果 mRNA差异显示片断之一命名为PFN2,仅在Hp(CagA+)培养滤液处理的GES-1细胞中表达,斑点杂交结果与之一致.与Gene Bank资料序列同源性比较分析提示PFN2与人类线粒体tRNAs同源性100%,即为人类线粒体tRNAs基因的一部分.结论人类线粒体tRNAs基因可能参与了Hp 的CagA诱导的胃上皮细胞恶性转化过程.

  • Smad4蛋白在胃癌组织中表达的研究

    作者:张朋彬;徐采朴;史景泉

    目的了解Smad4蛋白在胃癌组织中的表达情况及其意义.方法应用免疫组织化学方法,对10例正常胃粘膜组织和61例胃癌组织(高中分化腺癌22例,低分化腺癌29例,粘液腺癌3例,印戒细胞癌7例)中的Smad4的表达进行检测.结果在正常胃粘膜组织,Smad4蛋白主要存在于腺体体底部细胞胞浆中.在胃癌组织,Smad4表达于胞浆及少量细胞核中,它在低分化胃癌组织中的表达明显减少(与正常胃粘膜和高分化腺癌相比,P<0.01,P<0.05),而且分化越差的胃癌组织,其表达越少.提示在胃癌发生、发展中起了重要作用.结论 Smad4在低分化胃癌组织中表达明显减少,可能在胃癌的发生发展过程中起了一定作用.

  • 人肝细胞生成素受体的确定及特性

    作者:王阁;房殿春;刘为纹;冷恩仁;胡辂;王军;杨晓明;张咏;贺福初

    目的研究人重组肝细胞生成素(rhHPO)特异性刺激肝细胞增殖的信号转导是否通过特异性受体结合介导.方法通过受体结合和特异性竞争抑制实验及Scatchard分析原代培养大鼠肝细胞、人胎肝细胞和肝癌细胞的特性.结果原代培养大鼠肝细胞、人胎肝细胞和肝癌细胞存在HPO受体,受体数量分别为10 000个/细胞、20 000个/细胞和55 000个/细胞,平衡解离常数(Kd)分别为2、1.4及0.7 pmol,HPO与受体结合的复合物分子量约为90×103,推算出HPO与该受体结合具有饱合性和特异性,此结合不能被EGF、TGF-α和胰岛素所竞争抑制.通过交联反应在SDS-PAGE电泳上显示此受体分子量约75×103.结论 HPO促肝细胞增殖作用是通过肝细胞表面这种特异性膜受体介导的.

  • 大鼠真皮多能间充质干细胞的分离培养

    作者:史春梦;程天民

    目的探讨发育成熟高等动物真皮组织中是否存在多能间充质干细胞,对其进行分离培养并初步研究其基本生物学性状.方法以新生大鼠为研究对象,依据间充质干细胞的黏附特性采用酶消化法对其分离,通过传代培养进行筛选;流式细胞技术检测细胞周期,MTT法检测细胞对生长因子的反应性,免疫组织化学法检测细胞表面分子的表达.结果早期贴壁的大鼠真皮细胞经过连续传代培养至第3代,细胞形态较为均一,超过88%的细胞处于G0/G1期,细胞表面波形蛋白表达阳性,但Ⅷ因子和角蛋白表达阴性;体外培养细胞增殖旺盛,对bFGF有良好反应性,但对EGF和KGF反应不明显;地塞米松诱导分化实验证实该细胞可向成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞分化,具有多向分化潜能.结论本实验证实发育成熟大鼠真皮组织中存在多能干细胞,成功地分离得到真皮来源的间充质干细胞并通过其基本生物学特性进行了鉴定.上述结果提示真皮有可能是间充质干细胞的又一重要来源途径.这为深入研究真皮间充质干细胞在组织修复与再生中的意义与应用提供了基础.

  • 内源性一氧化氮与胃电节律失常关系的实验研究

    作者:龙庆林;王振华

    目的探讨内源性一氧化氮与胃电节律失常的关系.方法 36只大鼠分为:①正常对照组(12只);②胃电节律失常模型组(8只);③白芍组(8只)和④药物作用组(8只).①②③组喂养4周后,先记录胃电、再行胃窦肌间神经丛氮能神经染色,药物组观察注射不同剂量一氧化氮合酶抑制剂左型精氨酸甲酯(L-NAME)后的胃电变化.结果药物组大鼠注射大剂量L-NAME后出现了明显的胃电节律失常,异常节律指数(ARI)明显增加;与正常对照组相比,模型组大鼠胃电节律失常和胃窦肌间神经丛的氮能神经含量明显增加,异常节律指数(ARI)和慢波频率变异系数(CV)显著增加;白芍组胃电节律失常和胃窦肌间神经丛的氮能神经含量与正常组相似,异常节律指数(ARI)和慢波频率变异系数(CV)变化不明显.结论内源性一氧化氮增多或过少均可导致明显的胃电节律失常.

  • 一氧化氮在急性出血坏死性胰腺炎大鼠胰肾损伤中的作用

    作者:任晓葆;何振平;文亮

    目的探讨一氧化氮(NO)在不同时机及剂量条件下对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)胰、肾损伤的作用.方法观察不同时机、不同剂量的L-精氨酸(L-Arg)催化NO生成后的AHNP大鼠血浆淀粉酶、肌酐、尿素氮、内毒素、NO,胰、肾组织NO及血流变化,并分析动物死亡情况.结果小剂量L-Arg即时给予明显降低AHNP大鼠血淀粉酶,改善胰、肾血循环、保护肾功能、降低大鼠死亡率,延时给予对AHNP病情无影响,大剂量L-Arg无论即时或延时给予,明显加重胰、肾血循环紊乱,肾功能明显受损,大鼠死亡率明显增加.结论 AHNP大鼠产生的NO对胰、肾组织具有截然不同的生物学作用,这种作用与NO产生明显存在着时机与量的关系,对于临床应用NO供体治疗AHNP具有重要意义.

  • EGF对小鼠角质形成细胞中组织型纤溶酶原激活剂表达的调节

    作者:连小华;杨恬

    目的探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中,EGF对组织型纤溶酶原激活剂(tPA)表达的影响.方法应用免疫组化及原位杂交技术,结合图像分析,定性及定量检测在EGF作用下的小鼠表皮角质形成细胞中,tPA mRNA/蛋白质的表达.结果小鼠表皮KC经EGF处理12、24、48、72 h后,tPA mRNA/蛋白质的量均增加(P<0.01),tPA mRNA 表达的高峰出现于EGF作用24 h 时,tPA蛋白质表达的高峰则出现于EGF作用48 h时.EGF联合0.5、1.0、1.5 mmol/L Ca2+作用小鼠表皮KC 48 h,与EGF单独作用小鼠表皮KC 48 h时,tPA mRNA/蛋白质的表达,均显著降低(P<0.001).结论小鼠表皮KC中,EGF可以时间依赖方式促进tPA mRNA/蛋白质的表达,但受Ca2+浓度的影响.

    关键词: TPA EGF 表达调节
  • 丙型肝炎病毒核心蛋白对HePG2细胞增殖和细胞周期的影响

    作者:刘重阳;刘为纹;杨建民;陈东风;房殿春

    目的观察核心蛋白对细胞增殖和细胞周期调控的影响.方法观察表达HCV核心蛋白的细胞株HePG2-C和作为对照的细胞株HePG2-CMV的细胞形态;绘制细胞生长曲线;检测细胞周期;用流式细胞仪、免疫组化染色检测PCNA,P16,P27,P53;半定量RT-PCR检测 P16,P27,P53mRNA.结果转染重组质粒PBK-HVCC 的HePG2-C细胞与转染空载体PBK-CMV的HePG2-CMV细胞相比细胞形态未见明显变化.生长曲线显示HePG2细胞在转染PBK-HCVC和空载体PBK-CMV后,生长速度无明显变化.检测转染空载体的细胞HePG2-CMV 81.3%进入G0/G1期,7.7%进入S期;而转染PBK-HCV C的细胞HePG2-C 73%进入G0/G1期,13.7%进入S期.在进一步分子机制的探讨中发现HePG2-C细胞 PCNA、P53表达显著增加,P16、P27表达显著降低.同样的变化也发生在转录水平.结论 HCV核心蛋白可能通过调节某些基因的转录与表达,增加细胞DNA合成,扰乱细胞周期,进而参与致癌过程.

  • 两种不同脑损伤后星形胶质细胞反应性变化的比较研究

    作者:杨忠;李红丽;蔡文琴;孙榆

    目的探讨不同类型脑损伤后星形胶质细胞(AST)活化的时空分布及形态学变化特征.方法本实验建立Wistar大鼠短暂性全脑缺血30 min再灌注模型及脑皮质针刺伤模型,采用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)单克隆抗体免疫组化方法及图像分析技术对两种脑损伤后AST的反应进行对比观察.结果①脑缺血1 d后可见AST活化,5 d即达高峰.脑皮质针刺伤后AST的活化开始于第5~7天,第14天达高峰.②两种脑损伤后不同部位反应性AST的形态有明显差异.结论本实验表明不同类型脑损伤后AST的反应不同,活化AST在形态上的差异可能与神经营养因子的运输,神经的修复与再生等功能相适应.

  • 约氏疟原虫卵囊黑化期间大劣按蚊血淋巴蛋白的分析

    作者:徐文岳;黄复生;况明书;段建华

    目的初步探讨大劣按蚊(Anopheles dirus) 黑化包被约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)卵囊相关蛋白.方法挤压法分别收集血餐后第1、3、4、5天时不吸血组、吸正常血组和感染组的雌大劣按蚊血淋巴,经SDS-PAGE分离后,银染显色.同时,用烟草天蛾(Manduca Sexta)前酚氧化酶(Prophenoloxidase, PPO)亚基1 IgG检测正常雌大劣按蚊血淋巴中的PPO.结果 SDS-PAGE发现感染约氏疟原虫后,部分大劣按蚊的血淋巴蛋白带增强,而部分血淋巴蛋白带却减弱,免疫印迹发现大劣按蚊血淋巴PPO有87×103、67×103、63×105 3条蛋白带,而相应分子量的3条蛋白带在约氏疟原虫感染后第4、5天开始增强,其中尤以87×103的增强为明显.结论大劣按蚊在对约氏疟原虫卵囊黑化包被期间诱导合成的某些血淋巴蛋白与前酚氧化酶级联反应主要成分有关联.

  • NOS1免疫阳性细胞在猕猴中枢神经系统内的分布

    作者:谢兴国;蔡文琴;张吉强;李成仁

    目的研究神经元型一氧化氮合酶(NOS1)在灵长类动物中枢神经系统中的表达.方法采用免疫组织化学技术,观察了一氧化氮合酶在正常猕猴脑和脊髓中的表达.结果 NOS1阳性神经元分布于中枢神经系统的广泛区域,包括大脑皮质、海马、齿状回、尾壳核、纹状体、小脑皮质、脊髓前角、后角和中央灰质.结论 NOS1在神经系统内有广泛的分布,其产物一氧化氮可能参与了对多种神经功能如学习记忆等的调节.

  • TRAIL蛋白的表达、纯化和抗肿瘤活性

    作者:李小安;房殿春;杨仕明;罗元辉

    目的利用大肠杆菌表达出TRAIL蛋白,并观察分离纯化后的TRAIL蛋白的抗肿瘤活性.方法采用CaCl2法将带有TRAIL(氨基酸114-281,含六聚组氨酸尾)基因的pET-d质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导蛋白表达;使用Ni-NTA层析柱分离纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot法鉴定TRAIL蛋白的表达;MTT法检测TRAIL蛋白的抗肿瘤活性.结果我们分离纯化出分子量为20.1×103的蛋白,Western blot法证实为TRAIL蛋白,MTT法检测出其有较高的抗肿瘤活性,呈现出较好的时效和量效关系.结论成功地利用大肠杆菌表达、Ni-NTA层析柱分离纯化出具有抗肿瘤活性的TRAIL蛋白,并证明其具有抗肿瘤活性.

  • 昆明种系小鼠胚胎干细胞的分离培养及特性鉴定

    作者:秦茂林;蔡文琴;姚忠祥

    目的提高昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)建株的成功率.方法收集小鼠3.5 d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,经两次亚克隆分离培养ES细胞;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定.结果获得两个稳定ES细胞集落,传至第11代.ES细胞呈集落样生长,碱性磷酸酶染色强阳性,体外分化的细胞沿拟胚体外向性生长,形态多样,在体分化可形成来源于3个胚层的组织.结论两次亚克隆法获得的细胞具有ES细胞主要的生物学性状,有助于提高昆明小鼠ES细胞建株的能力.

  • 新型LXRs配体--环氧胆烷酸甲酯一类物的化学合成

    作者:郑辉;徐长荣;周向东

    目的合成两个新设计的具有环氧胆烷酸甲酯结构的化合物:3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯、3β-羟基-5β,6β-环氧胆烷酸甲酯,以期从中发现新的LXRs亚型选择性配体.方法用我国丰富的甾体资源--猪去氧胆酸为原料,分别经三步和四步化学反应合成.结果以76%和42%的总收率合成了两个目标化合物,并经波谱分析证实.结论用高立体选择性高收率地成功合成了目标化合物.为研制治疗动脉粥样硬化等心脑血管疾病的新药打下了基础.

  • 固相萃取法用于生物样品中头孢克肟浓度测定的样品准备

    作者:刘松青;代青;马文秀;林彩;唐先哲

    目的建立反相固相萃取法,用于血浆和支气管肺胞灌流液(BAL)中头孢克肟(CFX)浓度测定的准备,并以HPLC法测定CFX含量.方法用Sep-pak C18固相萃取柱富集、提取生物样品中CFX,对固相萃取的上样速度、洗脱用缓冲液pH值、洗脱用甲醇体积对回收率的影响进行了研究,并选择了佳样品处理条件.结果 CFX血浆浓度在0.1~4.0 μg/ml,BAL中浓度在0.0125~0.4 μg/ml范围内具有良好线性关系;CFX在血浆和BAL中的回收率分别为(99.2±2.36)%和(97.9±2.77)%;血浆及BAL样品的日内、日间RSD均小于5%.结论本法简单、灵敏,适用于生物样品中CFX浓度的测定.

  • TGF-β抑制剂(Decorin)抗滤过泡瘢痕形成及毒副作用的实验研究

    作者:谢琳;贺翔鸽

    目的观察Decorin抑制结膜瘢痕形成,降低眼压效果和对兔眼的毒副作用.方法模型采用Reichel结膜瘢痕模型,Schiotz氏眼压计测量眼压变化,结合光镜、电镜观察兔眼病理改变.结果 Decorin可使滤过泡形态良好,维持较长时间低眼压,而且无毒副作用.结论 Decorin可作为抑制滤过泡瘢痕形成的辅助药物之一.

  • IGF-ⅠR、IGF-ⅡR反义基因对SMMC-7721肝癌细胞生物学行为的影响

    作者:刘志鹏;杨建民;陈文生;罗元辉

    目的研究胰岛素样生长因子Ⅰ型及Ⅱ型受体(IGF-ⅠR、IGF-ⅡR)反义基因对SMMC-7721肝癌细胞生物学行为的影响.方法应用反义技术,在已转染了IGF-ⅠR反义基因的肝癌SMMC-7721(7721-IGF-ⅠR-AS)细胞基础上,继续利用IGF-ⅡR反义基因真核表达系统,通过DOTAP脂质体介导的转染技术,将IGF-ⅡR反义基因导入该细胞,经G418及潮霉素双重筛选获得稳定表达IGF-ⅠR、IGF-ⅡR反义基因的7721-IGF-R-AS细胞.采用光镜、电镜观察形态学变化,双层软琼脂克隆形成实验、MTT细胞生长曲线实验及裸鼠皮下接种实验观察转染后细胞体外生长情况.结果 7721-IGF-R-AS细胞在光镜、电镜下的肿瘤细胞形态恶性程度减低;在软琼脂培养基中的生长能力降低(P<0.01);在裸鼠体内的致瘤能力也降低(P<0.05);但细胞生长曲线与对照组比较则无明显差异.结论 IGF-ⅠR、IGF-ⅡR反义基因对SMMC-7721肝癌细胞株的恶性行为有明显抑制作用.利用反义技术干预肝癌细胞生长因子受体基因表达可能给肝癌的基因治疗提供新的途径.

  • 马凡综合征心血管病变的影像诊断

    作者:邹利光;孙清荣;梁开运

    本研究收集手术或/和临床证实的马凡综合征(Marfan syndrome)心血管病患者9例,回顾分析超声心动图、X线平片、心血管造影、CT及MR表现,比较不同检查方法的诊断价值.

  • C5a对血管内皮细胞表达P-选择素的影响

    作者:黎庶;汪正清

    中性粒细胞与血管内皮细胞间的粘附及跨内皮移行是炎症反应的关键环节,选择素等粘附分子在其中发挥着重要的作用.炎症局部产生的TNF、凝血酶、激活的补体片段等多种因素都能上调粘附分子的表达,但C5a对P-选择素表达的影响尚不十分清楚,本实验在体外用不同浓度C5a与培养的人脐静脉内皮细胞用,测定P-选择素及中性粒细胞粘附率的动态变化,研究C5a对P-选择素表达和对中性粒细胞粘附的影响.

  • 青年与老年消化性溃疡的临床特点分析

    作者:秦光梅;杨天文;王新;张成芳;郑洁

    消化性溃疡是临床常见病,但年龄不同,其溃疡特点亦各异.本研究收集了我科1988-01-1999-12月确诊的消化性溃疡7 845例,对同期收治的青年人与老年人进行对比分析,藉以明确两类人群消化性溃疡的不同特点.

  • 口腔软硬腭交界性恶性黑色素瘤1例报告

    作者:蒋金妍;肖文华

    患者,女,56岁,1999-10因"双颈包块进行性增大1周”到本院就诊,考虑恶性肿瘤.行鼻咽镜检查未见异常.胸片发现:双肺多个类圆形结节影考虑肺转移癌.入院查体扪及双颈多个包块,直径2~4 cm,不活动,无压痛.口腔软、硬腭交界处见4 cm×5 cm包块,向口腔突出、呈淡紫色、表面溃烂.考虑口腔恶性肿瘤.遂于10月下旬行活检,病理示:"送检腭部组织,大部分为癌组织,癌细胞呈卵圆形、短梭形,核呈圆形、卵圆形,大小不等,可见核分裂像,胞浆少,部分细胞呈空泡状,癌细胞呈弥漫性排列,癌组织中可见色素沉积.免疫组化染色:S-100蛋白阳性,CK散在弱阳性,Vimentin阳性,HMB45阳性.病理诊断口腔软硬腭交界处恶性黑色素瘤(追问病史,曾于10年前看中医舌诊时发现软硬腭交界处有胡豆大紫色斑).遂于1999-11初行1次化疗.化疗后双颈包块无变化,上腭紫色区无改善.因体质差,未再次化疗.1月后出现腰痛,X线片示:胸腰椎骨质破坏.予局部姑息放疗,腰痛稍缓解.

  • 经皮穿刺腰椎间盘切吸术的护理配合

    作者:陈洁;游箭;陆明

    自Hijikata[1]首次报道用经皮穿刺腰椎间盘切吸术(Automated percutaneous lumbar disctomy,APLD)治疗腰椎间盘突出症以来,近年因设备器材的不断改进和完善,使该法得到了迅速的发展[2,3],为顺利的完成该手术,手术前后的护理准备和术中配合是十分重要的,现将我科20例APLD护理配合的初步体会介绍如下.

  • 维生素D中毒致肾钙质沉着1例

    作者:吴晓云;熊丰

    患儿,男,4月,因反复低热1月余入院.1月余前反复低热,伴精神、食欲差,恶心、呕吐,症状加重1周,烦躁、无力,不能抬头及认人,无惊厥、昏迷等表现,当地医院抗感染、对症治疗无效.查体:体温:38 ℃,血压:11.31/7.98 kPa (85/60 mmHg),心率:135次/min,呼吸:40次/min.神清,反应差,不能竖颈,前囟0.5 cm×0.5 cm,稍饱满,枕骨骨缝重叠,四肢肌张力降低,腱反射减弱.拟诊"发热待查,脑发育不全?”.追问病史,患儿于生后半月因多汗疑佝偻病曾用维生素D3 60万 U im每月1次,连用3次,l周前给予葡萄糖酸钙静滴,每天1 g,连用5 d.化验检查:血钙3.37 mmol/L,血钾2.9 mmol/L,尿钙阳性,24 h尿钙定量为1.67 mmol,尿密度固定为1.005,血1,25-(OH)2D3浓度显著增高达131.43 mmol/L(正常值17.25~63.03 mmol/L).X线片检查见头颅人字缝周骨密度增强,双股骨远端及胫腓骨近远端临时钙化带增厚致密>1 mm.心电图提示高钙血症及心肌缺血.双肾B超见实质回声增强,肾乳头回声增强似花瓣状,提示肾钙质沉着.诊断维生素D中毒.采取避免日光照射、低钙饮食、补液、利尿、激素等综合性治疗,3周后患儿全身情况基本恢复,尿钙阴性,血钙为2.43 mmoL/L.3月后头颅及长骨摄片正常,5月后血1,25-(OH)2D3浓度降为63.54 mmoL/L.肾脏B超随访5年肾钙质沉着无明显变化,肾功能及尿常规正常.

  • 自制气囊内镜直视下扩张治疗贲门失弛缓症

    作者:王振华;李向红;杨建民;彭贵勇;肖天利

    1996年以来我们应用自制气囊,内镜直视下扩张治疗贲门失弛缓症36例,取得良好疗效.现将应用体会报告如下.

  • 药物性肝病92例临床分析

    作者:赵丽;房殿春

    近年随着临床用药种类的增加,药物性肝病(Drug-induced hepatic disease,DIHD)的发生率也有增加的趋势.迄今为止,国内外报道的大约有1 000余种药物可能导致肝损害[1].为提高对本病诊治水平 ,本研究对1990-2000年我院临床诊断的药物性肝病92例患者进行了回顾性总结和分析.

    关键词: 肝疾病 肝炎 中毒性
  • 人端粒酶催化亚单位诱饵融合蛋白表达载体的构建及初步鉴定

    作者:周平;陈兵;刘为纹;房殿春;张雪;黄庆;杨仁明

    端粒是真核细胞染色体末端的一个特殊结构,由一段具有特定重复序列的DNA和端粒结合蛋白组成,是维持染色体结构稳定的重要因素.正常细胞随着细胞分裂活动的进行,端粒DNA逐渐缩短,当缩短到一定程度时,染色体结构被破坏,细胞进入衰老期并以死亡而告终.但肿瘤细胞似乎丧失了这种能力,表现出永生化而无限制增殖的特性.尽管端粒研究为肿瘤、衰老难题提供了一个重要的研究方向,但有关端粒蛋白组分的结构及其调控机制仍不十分清楚.因此,寻找新的、关键性的端粒、端粒酶调控分子是非常重要的[1].本课题拟以已发现的端粒相关蛋白中较为重要的人端粒酶催化亚单位(Human telomerase reverse transcriptase, hTRT)为诱饵,构建hTRT诱饵融合蛋白表达载体,为从cDNA文库中筛选与hTRT作用的端粒相

  • 镍钛记忆合金网状带膜支架治疗食管恶性狭窄的疗效及护理

    作者:刘龙碧;赵晓晏

    我科自2000-01开展胃镜下放置国产镍钛记忆合金网状带膜支架(简称支架)治疗食管恶性狭窄15例,取得了较好的近期效果,现报告如下.

  • 食管颗粒细胞瘤1例

    作者:袁亮;周子成;于冬梅

    食管颗粒细胞瘤临床病例较少见,易误诊为其它疾病.现将我科经内镜及病理确诊1例报告如下.

  • 胃电节律失常大鼠胆碱能神经及cAMP的变化及意义

    作者:赵晶京;王振华;罗元辉

    乙酰胆碱作为胃窦肌间神经丛内重要的兴奋性神经递质,在调节胃电节律中发挥重要作用[1],但其调控胃电节律的机制尚不明确。有研究报道,环磷酸腺苷(cAMP)在胃肠慢波的产生和调控中发挥作用[2]。乙酰胆碱、cAMP对胃电节律的调控有无关联性尚未见报道。我们通过建立胃电节律失常大鼠模型,观察肌间神经丛胆碱能神经和胃平滑肌组织cAMP含量变化,探讨乙酰胆碱与cAMP在调控胃电节律中的关系,进一步揭示胃电节律失常的发生机制。

  • 宫角足月妊娠2例报告

    作者:王琳;常青

    例1: 28岁,孕39周,孕2产1临产,于1993-07-02入院.妊期无腹痛及阴道流血史,入院4 h后顺产一女活婴,重3 450 g,评10分.胎儿娩出后即给产妇静脉推注麦角0.2 mg以促进宫缩,但产后30 min胎盘仍未娩出,手取和卵圆钳取胎盘均告失败.因阴道流血较多,考虑胎盘部份植入,立即行剖腹探查术,术中见子宫收缩好,子宫右侧角明显突出,圆韧带位于包块外侧,其表面肌层菲薄,血管充盈,即行子宫次全切除术,手术顺利.术后剖视子宫,发现胎盘位于右宫角,轻轻剥离即娩出胎盘,未发现胎盘植入,术后诊断:右宫角妊娠.

    关键词: 宫角妊娠 异位妊娠
  • 穿透性角膜移植联合白内障摘除人工晶体植入术的临床探讨

    作者:曹建琴;周丽钧;董凌峰

    随着眼科显微手术的发展,穿透性角膜移植术联合白内障摘除人工晶体植入术(三联术)日益成熟.我院自1997年以来,对11例患者行三联术,现将临床结果报告如下.

  • 胰腺癌167例临床分析

    作者:郭红;赵晓晏;李宜辉;达四平

    胰腺癌的发病率有逐年增高的趋势,其恶性程度高,进展较快,确诊时多为中晚期病人.经手术探查约70%~80%为晚期.而且,其手术切除率低,治疗效果又不满意.我院从1992-2001年共收治的胰腺癌患者167例,其中7 d内确诊者占81.4%(136/167),超过7 d确诊者共31例,占18.6%,而首诊误诊率为23.9%(40/167).

  • 结肠钩虫病3例报告

    作者:刘明涛;杨建民;肖天利;王振华;李向红

    例1:患者女性,41岁,农民,因间歇性脐周腹痛4月余,加重伴腹泻、血便20 d入院.查体:慢性病容,贫血貌,扶入病房,心肺检查无异常,腹平软,无压痛、反跳痛.胃镜检查示胃、十二指肠均未见异常,结肠镜检查发现:结肠各段见众多寄生虫吸附在肠壁上,虫体呈线形,大小约0.2 cm×1.0 cm,吸附处粘膜有活动性出血及充血水肿.虫体经我校寄生虫学教研室鉴定为十二指肠钩虫.经复方甲苯咪唑等治疗,痊愈出院.

    关键词: 钩虫病 结肠
  • 重庆市631例高尿酸血症疾病分布分析

    作者:王秀丽;邵丽丽

    现对重庆市631例高尿酸血症的疾病分布情况及部分疾病发病机制进行了分析,报告如下.

    关键词: 尿酸 疾病分布
  • 胃粘膜相关组织淋巴组织淋巴瘤8例临床分析

    作者:毕小刚;杨建民;李向红;阎晓初

    胃粘膜相关淋巴组织(Mucosa-associated lymphoid tissue , MALT)淋巴瘤临床少见,误诊率高.我院自1973-01-2001-03,经胃镜、手术及病理确诊8例,现报告如下.

  • 离子交换层析微柱法及亲和电泳法与液相色谱分析法对糖化血红蛋白含量测定的比较

    作者:陈斌;黄庆;府伟灵

    目的探讨微柱法对HbA1C定量检测的意义.方法采用微柱法、电泳法与HPLC法分别对同一标本进行HbA1C含量测定,比较3种方法对HbA1C含量检测结果.结果微柱法精确度和重复性好(批内变异系数CV<1.5%,批间CV<5%),与参比方法HPLC经相关处理,其相关系数r=0.945,两法具有高度的相关性(P<0.001).结论采用微柱法对HbA1C定量测定,无须贵重仪器设备,是一种简便快速的测定方法,能在大多数临床实验室广泛推广.

  • 贺斯对脊柱手术血液流变特性影响的临床研究

    作者:郭晓丽;葛衡江;刘怀琼

    贺斯(HydroxyEthyl Starch,HES)是中分子羟乙基淀粉(200/0.5),是目前临床上常用的胶体型血浆代用品之一.6%贺斯为等渗液,能增加血浆容量,改善血容量不足及休克病人的器官功能[1].本研究报告40例脊柱手术患者术中输注贺斯后血液流变特性的变化.

  • 全结肠镜诊断大肠癌458例分析

    作者:肖天利;蒋光吉;李向红

    对近11年来(1990年1月至2001年5月)我院消化内镜室7 845例全结肠镜检查中,检出的大肠癌458例进行分析,旨在探讨全结肠镜检查大肠癌的临床意义.

  • 结肠、直肠大息肉的内镜治疗

    作者:韩毅;熊会;李向红;王振华

    自1992年以来,我科共做纤维或电子结肠镜检查7 367例, 发现结肠、直肠息肉533例(7.2%),其中直径大于2 cm者106例,现报告如下.

  • 上消化道出血急诊胃镜检查20年回顾分析

    作者:李宜辉;达四平;凌贤龙;赵晓晏;胡淑碧;丁玉;胡扬腾

    上消化道出血是临床常见急症之一,准确地判定出血原因对预后有重要意义.急诊胃镜作为上消化道出血诊断的首选、有效的方法,其应用越来越广泛.我院自1980~1999年20年间,对1 116例上消化道出血患者在24~48 h内行急诊胃镜检查,确诊率91.7%,现报道如下.

    关键词: 上消化道出血 胃镜
  • 胃癌发生的分子基础

    作者:房殿春

    近20年来,由于分子生物学技术的发展,人们从原来注重分析癌细胞本身的生物学特性,开始更注重对正常细胞演变为癌过程中基因水平的分析.认识到细胞癌变及恶性肿瘤发生、发展的根本原因可能在于细胞内部基因结构及表达的异常改变.大量研究表明,胃癌的发生发展是由多因素引起、多基因参与并经历了多阶段的演变过程.

    关键词: 胃肿瘤 遗传学
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