第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
视网膜母细胞瘤中基因杂合缺失现象的研究
目的由于Rb1基因的失活可能不是引发视网膜母细胞瘤(RB)的唯一因素,因此,此项课题中我们通过探索第13号染色体上基因杂合缺失(LOH)现象发生的机率以及通过家系分析确定标记位点缺失的遗传学来源,试图探明其它可能参与RB发生发展的基因存在的位点,并试图寻找和确定具有诊断及预后价值的LOH检测指标.方法 16个RB患者成对的肿瘤与其相应血清标本在13号染色体上14个微卫星标记处通过荧光PCR进行扩增,分析测定LOH;并通过对患者家庭进行分析确定标记位点缺失的遗传学来源.结果 16个RB患者中,12个在13号染色体上一个或一个以上位点发生LOH.其中三个位点,D13S265、D13S263和D13S153(位于Rb1基因内), LOH发生机率高,分别是8个、8个和9个.12个LOH阳性标本中有10个标记位点的缺失被确定发生在父系来源的染色体中.LOH阳性及阴性组肿瘤的发生时间分别为504 d和1 086 d.结论在位点D13S263 (13q14.1-14.2)和 D13S265 (13q31-32)处可能含有某些未知基因参与RB的发生发展;在我们的实验群体中标记位点缺失大多选择性地发生在父系来源的染色体中;此外,LOH阳性组的患者RB确诊时间早于LOH阴性组,其中D13S263和D13S265两个位点的LOH现象可能对RB的早期诊断具有一定提示作用.
-
基因传感器表面两种探针固定法的比较
目的比较基因传感器表面两种探针固定法的优劣.方法分别用巯基固定法及生物素-亲和素固定法将人类乳头瘤病毒(Human Papilloma Virus, HPV)的探针固定在基因传感器的金膜表面,比较不同探针浓度、不同靶序列浓度下反应所引起的频率的变化以及所用的时间.结果两种固定方法检测靶序列的灵敏度相当.生物素-亲和素法反应所需的时间较短,且具有放大效应,能结合上更多的探针并检测到更多的靶序列,但操作较为繁琐.巯基法操作较为简单,但所需的反应时间较长.结论两种探针固定法各有利弊,实际操作中应根据不同的需要选择合适的固定方法.
-
链置换扩增(SDA)压电DNA传感器
目的构建链置换扩增(SDA)压电DNA传感器,研究其响应特性.方法①将SDA与压电DNA传感器结合,建立SDA压电DNA传感器结合技术;②以结核菌IS6110片段为检测对象,研究SDA压电DNA传感器的响应特性.结果①SDA压电DNA传感器的响应信号达到500 Hz左右;②SDA压电DNA传感器出现频率下降的时间长度(响应时间)与加入的检测核酸的浓度相关;③不同浓度检测核酸(靶核酸)导致的频率下降绝对值差别不大.结论 SDA压电DNA传感器能直接检测基因组DNA;其响应时间与检测物(靶核酸)的加入量相关,可以用作定量依据.
-
链置换扩增(SDA)压电DNA传感器阵列
目的构建SDA压电DNA传感器阵列,解决SDA压电DNA传感器的检测通量不足问题.方法①采用传感器集成技术将10个SDA压电DNA传感器制成2×5的传感器阵列芯片;②以结核菌IS6110片段为检测对象,研究SDA压电DNA传感器阵列的特性.结果传感器阵列芯片的各传感器微单元能够相互独立工作,互不干扰.结论 SDA压电DNA传感器的阵列化不影响传感器性能,同时在一定程度上提高了SDA压电DNA传感器的检测通量,使SDA压电DNA传感技术更具临床实用性.
-
链延伸反应提高压电基因传感器的灵敏度的实验研究
目的利用链延伸反应的原理延长引物链以提高压电基因传感器表面的质量负载,从而提高传感器的灵敏度.方法基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌mecA及femA两种探针片段,待杂交上相应的靶序列片段后,加入Klenow酶,室温下(20 ℃左右)进行链延伸反应8 h.结果 50 nmol/L单链mecA在杂交反应及链延伸反应的过程中,频率的下降值分别为(99.2±8.5)Hz、(192.9±13.3)Hz.而femA则分别下降了(142.4±11.2)Hz、(222.6±16.6)Hz.mecA、femA在链延伸反应前的检测灵敏度为0.5 nmol/L,但经链延伸反应后检测灵敏度提高到了0.05 nmol/L.结论链延伸反应有效地提高了压电基因传感器的灵敏度,可用于微量DNA的检测、核酸同源性分析等方面.
-
压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶原时间及其初步应用
目的 建立一种压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶原时间(PT)的方法。方法 采用AT切向、结果①该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(г=0.97),批内CV=0.78%,批间CV=2.38%。结论 压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶原时间，血浆凝集反应起点和终点确定方便、可靠。且操作简单、快速、成本低廉，检测结果准确，是一种敏感性高、重复性好的血浆凝血酶原时间检测新方法，可用于常规检测。
-
应用抑制性消减杂交筛选失血性休克所致大鼠心肌差异表达基因
目的失血性休克可导致大鼠心肌的缺血、缺氧,进而对心肌细胞造成严重损伤,本实验将利用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH),研究失血性休克大鼠心肌的差异表达基因,以期通过基因线索寻找其损伤机制.方法建立失血性休克大鼠模型,选其心肌,提取总RNA,构建cDNA文库,应用抑制性消减杂交技术筛选其差异表达基因.通过反向Northern杂交验证差异表达基因阳性克隆,并进行测序分析,登陆Genbank寻找同源性基因.结果获得42个阳性结果,25个为高表达基因,17个为低表达基因, 其中发现5个新的cDNA片段.结论 SSH技术是一种高效的筛选差异基因的方法,本实验发现失血性休克可导致大鼠45S rDNA 基因转录起始区域、鼠半胱氨酸富含蛋白61及鼠血清诱导激酶等基因的差异表达,今后的工作中我们将进一步研究它们与失血性休克所致损伤的关系.
-
压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究
目的探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性.方法收集临床64株葡萄球菌标本,对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA基因扩增后应用压电传感器阵列进行检测,并以PCR电泳检测作参照,与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析.结果传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致.而此两种方法与常规培养加药敏法比较,结果略有差异.所有64株葡萄球菌中,2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的mecA 为阴性;2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的mecA 为阳性.1株耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的mecA 为阴性;2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)的mecA 为阳性.结论以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因,既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌,又可判断其耐药类型,能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据.
-
细胞膜表面标志CD系列抗体蛋白芯片制备及应用的研究
目的本研究利用抗原抗体免疫反应的原理,研制一种可同时快速检测多种蛋白的蛋白芯片,用于细胞膜表面抗原的检测.方法将抗细胞表面标志CD抗原的CD系列抗体蛋白固定在醛基玻片上形成微阵列,从样品细胞中抽提膜蛋白抗原并用FSE标记, 然后与固定在芯片上的CD抗体阵列反应,扫描仪检测反应结果.结果本研究选用HL-60,K562,NB4,Jurkat细胞株为代表,测定到细胞膜表面蛋白质CD抗原HL-60、K562、NB4、Jurkat细胞CD13均为阳性,HL-60、NB4、Jurkat细胞CD4阳性,NB4 细胞CD38阳性,K562细胞CD7阳性.所得结果与免疫印迹及免疫组织化学验证等方法一致.结论 HL-60,K562,NB4,Jurkat细胞膜表面蛋白质CD抗原有差异.蛋白芯片方法具有的高信息通量、低成本、制备、测定快速简单的优点,展示了良好的应用前景.
-
链置换扩增技术的影响因素研究
目的:探索限制酶、聚合酶、缓冲体系和DTT等对链置换扩增(SDA)实验的影响,以期在商品化试剂条件下组建SDA系统.方法以结核菌IS6110序列为扩增对象设计SDA引物,利用商品化的BsoBI和exo-Bst为实验用酶建立SDA实验系统.对比在不同BsoBI、exo-Bst浓度条件下SDA产物的电泳条带亮度来观察限制酶、聚合酶对SDA效率的影响;对比SDA在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和以Tris-HCl为缓冲体系的NE Buffer2、ThermoPol Buffer和EcoPol Buffer中的产物电泳条带的方法来观察不同缓冲体系对SDA效率的影响;对比加入DTT和不加DTT时 SDA产物的电泳条带亮度来观察DTT对SDA效率的影响.结果①在0.1～0.4U/μl浓度范围内,SDA的扩增率与BsoBI含量正相关,而0.8 U/μl BsoBI反而使SDA受到抑制.②在0.08～0.32U/μl浓度范围内exo-Bst用量对SDA的扩增能力没有显著影响;③SDA可以在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和ThermoPolBuffer中进行,而不能在NE Buffer2 和EcoPol Buffer中进行;④DTT对SDA的扩增率和特异性都没有显著影响.结论以上实验结果表明在商品化试剂条件下可以构建SDA系统,并得到良好的扩增效果.
-
RHO基因突变在视网膜色素变性中的分子遗传学分析
目的探明我国RP患者视紫红质(rhodopsin, RHO)基因突变的特征和意义.方法在98例RP患者中运用构象敏感凝胶电泳(conformation sensitive gel electrophoresis,CSGE)和DNA直接测序方法检测RHO基因全编码区范围内的点突变.结果一个ADRP家系的4名患者第347密码子发生点突变,Pro347Leu;另一个ADRP家系中一名晚发型患者及其目前还未出现症状的女儿在第327密码子出现点突变,Pro327(1-bp del),而对照组100例健康成年人未发现上述两种突变.此外在1名患者和2名对照者中还检出一非致病的点突变,Ala299Ser,属单个碱基多态现象(single nucleotide polymophism,SNP).结论 98例RP先证者中检出2例携带RHO基因突变,由此可初步预测RHO基因在我国RP患者中的突变频率约为2%(95%的可信区间为0.2%～7.0%).Pro347Leu突变改变了视蛋白C末端一段高度保守的氨基酸序列,致使该蛋白在胞内的运输发生障碍.Pro327(1-bp del) 使突变蛋白的羧基末端失去了原有的磷酸化位点及上述一段高度保守的功能区,其可能的致病机制有待在今后的研究中通过建立相应的转基因模型或细胞培养系统来阐明.
-
组合靶基因自动检测仪应用软件的设计
目的研制与开发组合靶基因自动检测仪应用软件.方法应用VB6.0编程语言及Access 97数据库实现压电石英谐振频率的实时检测与分析.结果实现了组合靶基因自动检测仪压电石英谐振频率的实时检测、数据分析、结果保存与数据转换等.结论组合靶基因自动检测仪应用软件是一类可实时检测与分析压电石英谐振频率的新型实用性软件,可广泛应用于压电石英谐振频率的检测.
-
压电石英晶体传感器液相检测的影响因素
目的探讨压电石英晶体传感器液相检测的影响因素.方法采用AT切向镀金膜的石英晶体制成2×5型石英晶体微阵列,观察晶体振荡频率在不同粘度和密度的甘油PBS(0.15mol/L pH 7.0)溶液、不同浓度的NaCl溶液、不同pH的PB溶液(0.067 mol/L)及不同体积的PBS溶液(0.15 mol/L pH 7.0)中的变化规律以及机械冲击和重新加样对晶体振荡频率的影响.结果石英晶体振荡频率随溶液粘度和密度、离子浓度、pH的增大而降低.溶液体积、机械冲击和重新加样对晶体频率基本无影响.结论石英晶体传感器所处溶液体系的性状如粘度、密度、离子浓度、pH等因素对其振荡频率有较大的影响,石英晶体传感器用于生物反应检测时应减少和避免上述因素的干扰.
-
靶DNA长度对压电传感器基因杂交效应的影响
目的:探讨靶DNA长度对压电传感器基因杂交效应的影响.方法在压电传感器阵列上固定20碱基的巯基DNA序列作为探针后分别与不同长度的含互补片段的靶序列进行杂交,计算机采集并分析传感器频率数据,比较各靶DNA长度下杂交达到平衡所需时间,杂交前后频率差,并计算杂交动力学参数.结果随靶DNA长度增加,杂交时间有延长趋势.在靶DNA长度为20～108个碱基时,其频率变化值与碱基数呈线性关系,而225、379、654个碱基时的频率变化反应则明显降低.结合常数变化不明显,而解离常数呈增大趋势变化,使平衡常数逐渐减小.结论在石英晶体传感器阵列上,频率变化值随靶序列长度增长而增大,但反应效率不一样.
-
离子强度对压电传感器基因杂交动力学的影响
目的探讨盐离子浓度对压电传感器基因杂交动力学的影响.方法设计并合成金黄色葡萄球菌耐药基因探针及与其完全互补的靶序列,在石英谐振压电传感器阵列上进行杂交,杂交缓冲液中含5种NaCl浓度.计算机采集并分析传感器频率数据得出杂交动力学参数,同时比较各盐离子浓度下杂交达到平衡所需时间,杂交前后的频率差,平衡后频率波动幅度大小.结果随NaCl浓度增加,结合速率常数、杂交平衡常数、大杂交量均呈现明显增大趋势,而离解速率常数呈下降趋势,杂交前与杂交平衡后的频率差值增大,同时,杂交平衡后频率波动幅度相应、增大,杂交达平衡所需时间延长.结论一定的盐离子浓度促进基因杂交,但盐离子浓度过高则对晶体振荡性能产生负面影响.
-
石英谐振靶基因组合检测仪振荡电路的研究
目的研制石英谐振组合靶基因检测仪自激式振荡电路.方法电路设计满足石英谐振相位和幅度两个基本驱动条件,在振荡电路后加一级放大电路,使输出的信号幅度能够达到TTL电平,并经过波形变换和整形后,输出方波信号,送到计算机上的频率计数卡.结果设计的振荡电路稳定性好、液相中起振能力强.结论该振荡电路能满足石英谐振组合靶基因检测仪的需要.
-
压电石英晶体微阵列免疫传感器检测hCG的实验研究
目的:构建一种新型压电石英晶体人绒毛膜促性腺激素(hCG)免疫微阵列传感器.方法抗hCG-β单克隆抗体采用蛋白A(SPA)法固定在2×5的AT切向、基频10MHz的石英晶体微阵列金膜电极表面制成抗体敏感膜,构成压电石英晶体hCG免疫微阵列传感器.结果构建的hCG压电石英晶体微阵列免疫传感器对hCG的响应特性良好,其检测线性范围为2.5～250mIU/ml,TSH、FSH、LH对hCG的检测基本无干扰;60例临床标本检测结果与荧光免疫检测法符合(P＞0.05),两种方法的相关系数为0.92.结论研制的压电石英晶体hCG免疫微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、省时、操作简单、不需标记、能在线实时检测等优点,对比实验表明其检测结果准确,能用于临床实验诊断检测.
-
大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究
目的构建重组大鼠γ-干扰素真核表达载体,探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞(AM)和气道上皮细胞的可行性及表达水平.方法采用RT-PCR技术克隆了大鼠γ-干扰素,并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上,构成真核表达重组载体.将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞.用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中.并检测细胞培养上清中γ-干扰素浓度和活性.结果 DNA测序证明,构建的重组载体中γ-干扰素的基因方向正确,DNA序列与GeneBank中大鼠的γ-干扰素cDNA序列相同.转染后AM和气道上皮细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的重组载体DNA片段条带.pLXSN-IFN载体组的AM和气道上皮细胞培养上清中大鼠γ-干扰素浓度和活性显著高于pLXSN空载体组(P<0.01).结论本研究构建的大鼠γ-干扰素重组表达载体可成功地转染大鼠AM和气道上皮细胞,整合入基因组DNA,并分泌有活性的γ-干扰素,为进一步的体内基因转染研究奠定基础.
-
CO作用后大鼠肺血管细胞增殖和凋亡状况的研究
目的通过研究CO和低氧作用后大鼠肺血管细胞增殖和凋亡状况,探讨低氧肺动脉高压的发病机制及防治措施.方法应用免疫组织化学、原位末端标记及Western杂交等方法检测常压低氧大鼠肺血管壁细胞增殖、凋亡及c-myc基因的表达状况.结果正常组、低氧和锡原卟啉组、低浓度CO和血晶素组大鼠肺动脉均存在增殖和凋亡的阳性细胞,两类细胞在肺内呈不均匀散在分布.低氧和锡原卟啉组大鼠肺血管增殖细胞数显著升高而凋亡细胞数显著减少,细胞增殖凋亡比值分别为对照组的5倍或4倍,而低浓度CO和血晶素组肺血管增殖细胞和凋亡细胞系数均显著增加,细胞增殖凋亡比值均为1.2.c-myc在低氧和锡原卟啉组大鼠肺内表达显著增加,在低浓度CO和血晶素组大鼠肺内表达减少.结论增殖和凋亡现象共存在于正常和处理大鼠的肺血管细胞中,也许c-myc等基因的异常表达导致了细胞增殖和凋亡的失衡,进而调节了慢性低氧肺血管结构的改建.
-
牛磺酸和茵陈素对顺铂引起的原代培养肾小管上皮细胞内游离Ca2+浓度变化的影响
目的研究牛磺酸、茵陈素对顺铂引起的原代培养肾小管上皮细胞(PTC)内游离Ca2+浓度变化的影响.方法在体外培养PTC、顺铂与PTC共同保温24 h,牛磺酸、茵陈素分别提前与PTC作用24 h,然后再加入顺铂(26 μmol·L-1)共同保温24 h.采用Fura-2/AM测细胞内游离Ca2+浓度.结果顺铂(13, 26, 52 μmol·L-1)升高PTC细胞内游离Ca2+浓度,牛磺酸(1,10 g·L-1)和茵陈素(4,8 mg·L-1),可拮抗顺铂导致的PTC细胞内游离Ca2+浓度超载.结论顺铂可引起原代培养肾小管上皮细胞内Ca2+超载,牛磺酸、茵陈素能拮抗顺铂导致的细胞内Ca2+超载,起到细胞保护作用.
-
人骨骼肌TnI-fast基因克隆和体外表达
目的构建人骨骼肌TnI-fast基因分泌型真核表达载体,为利用TnI-fast基因进行抗肿瘤血管生成基因治疗奠定基础.方法采用PCR和RT-PCR制备TnI-fast cDNA,构建TnI-fast基因克隆质粒,测序证实后将TnI-fast cDNA插入到pSecTag2 B构建分泌型重组真核表达质粒.然后用TnI-fast基因重组表达质粒转染COS-1细胞,检测TnI-fast基因体外表达.结果 DNA测序证实,我们从人骨骼肌总RNA和cDNA文库中扩增的TnI-fast cDNA序列与NCBIGenebank TnI-fastcDNA序列完全一致.ELISA检测证实,TnI-fast/pSecTag2 B转染后目的基因可在真核细胞中分泌表达.结论本研究成功地构建了TnI-fast基因重组表达质粒,可进一步用于抗肿瘤血管生成基因治疗动物实验.
-
多抗原肽免疫血清体外阻断丙型肝炎病毒感染树鼩肝细胞的初步研究
目的探讨多抗原肽(MAP)免疫血清在体外能否阻断丙型肝炎病毒(HCV)感染树鼩肝细胞,为研制HCV分子疫苗提供实验基础.方法用兔抗MAP血清分别与两份感染血清按一定比例混合后接种于原代培养的树鼩肝细胞中,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化、原位杂交分别检测细胞内或上清中正负链RNA,细胞内HCV NS3抗原的表达情况,以及原位检测细胞内HCV负链RNA. 结果 1份HCV RNA阳性血清与兔抗MAP血清按1∶1混合后接种于培养的树鼠句肝细胞中,细胞内可检出HCV 正负链RNA,并有HCV NS3抗原的表达,而另外1份HCV RNA阳性血清与兔抗MAP血清按1∶1、5∶1、10∶1混合后接种于培养的树鼩肝细胞中,细胞内未检测出HCV正负链RNA,也未见特异性抗原表达.结论兔抗MAP血清在体外能部分阻断HCV感染.
-
小鼠骨髓间质干细胞的生物学特点及分化潜能鉴定
目的建立一种体外分离、培养和鉴定小鼠骨髓间质干细胞的方法,探讨体外培养中间质干细胞的一些生物学特点,为利用MSCs促进创伤修复提供实验基础.方法分离5～6周龄的小鼠胫骨、股骨,用预冷的IMDM培养基冲洗出骨髓,经密度梯度离心得到骨髓单个核细胞,接种后12～16 d形成单层贴壁的成纤维状细胞.体外多向诱导分化鉴定分离的细胞,用传代的细胞进行生长曲线的测定、观察其接种贴壁率、检测细胞周期和超微结构.结果体外传代培养的MSCs具有分化形成成骨和成脂细胞的能力;MSCs倍增时间约为38 h,传代后12 h贴壁达90%以上,细胞周期显示有80%细胞处于G0/G1期,并用电镜照片显示其超微结构.结论在本实验条件下,体外培养的MSCs具有多向分化潜能,体外生长稳定,传代后的细胞适应性强,增殖较快,超微结构和细胞周期表现出较早期细胞特点.可望用于自体创伤促愈.
-
抗人BPI抗体对猪源BPI体外生物活性的增强作用
目的确认抗人杀菌性/通透性增加蛋白(Bactericidal/permeabilityincreasing protein , BPI)多克隆抗体和单克隆抗体对猪源BPI杀菌及结合内毒素活性的增强作用.方法采用肉汤培养法测定BPI在有或无抗人BPI抗体存在情况下猪源BPI对大肠杆菌J5的杀菌率变化;采用鲎基质显色法测定BPI与抗体孵育30min后其结合内毒素能力的改变.结果抗人BPI多克隆抗体和单克隆抗体加入后,猪源BPI的杀菌活性不仅不降低,反而增加,而抗体本身并不具有杀菌性,非抗BPI抗体也无此效应;同时抗人BPI多克隆抗体和单克隆抗体可增加猪源BPI的结合内毒素活性.结论抗人BPI多抗或单抗不仅能增加猪源BPI的杀菌活性,而且能增加其结合内毒素活性.
-
Genistein体外抑瘤效应及其对不同细胞作用选择性的研究
目的研究Genistein与放射是否具有协同抑瘤作用及其毒副作用如何. 方法利用MTT法和集落计数研究Genistein对5种不同细胞的选择性抗增殖作用,在此基础上运用活细胞计数、3H-Td0R掺入法、流式仪检测等技术分析Genistein和/或放射对肿瘤细胞增殖的影响及可能的机制.结果与对造血等正常细胞比较,Genistein对肿瘤细胞有较好的选择性;Genistein照后给药可引起明显的G2/M细胞周期阻滞,并诱发大量细胞凋亡,其抑瘤作用大于两单一措施之和,并显著高于照前给药组. 结论 Genistein对骨髓造血细胞有着突出的安全低毒的优点,其照后给药与γ射线具有协同抑瘤效应.
-
GAP-43基因及TH基因治疗帕金森病的实验研究
目的利用基因工程化细胞及双基因表达的方式对生长相关蛋白质(Growthassociated protein,GAP-43)基因及酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因在治疗帕金森病(Parkinson's disease,PD)中的作用进行探讨.方法将GAP-43及TH基因分别构建入逆转录病毒载体中,再将含重组DNA的病毒上清感染培养的星形胶质细胞后移植入PD大鼠脑内,了解PD鼠旋转行为的改善情况. 结果 TH基因治疗组及TH+GAP-43基因治疗组PD鼠旋转行为改善明显,GAP-43基因治疗组无明显治疗作用.结论 TH对PD有明显的治疗作用,GAP-43可促进TH的疗效.
-
糖尿病大鼠主动脉零应力状态与几种元素含量的关系
目的了解糖尿病时主动脉零应力状态与几种元素含量的关系.方法用原子吸收光谱法测定四氧嘧啶糖尿病4周大鼠(n=12)及对照大鼠(n=12)主动脉组织中钙(Ca)、钼(Mo)、锂(Li)、锰(Mn)、镉(Cd)、镁(Mg)、铅(Pb)、钴(Co)、铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)及铬(Cr)的含量;用测定切开后主动脉环展开角度数的方法对大鼠主动脉零应力状态进行观察;并对元素含量与主动脉环展开角度数之间的相关性进行分析.结果糖尿病4周大鼠主动脉Ca、Pb、Cu、Fe及Cr含量显著高于对照(P<0.001).糖尿病大鼠主动脉环展开角度数显著高于对照(P<0.01);糖尿病大鼠主动脉Ca含量与主动脉环展开角度数呈显著正相关(r=0.762,P<0.01).结论糖尿病时主动脉存在Ca、Pb、Cu、Fe及Cr代谢异常; Ca含量增加影响主动脉零应力状态.
-
利复星和头孢曲松治疗肺部感染70例
利复星为新一代氟喹诺酮类抗菌药，该药抗菌谱广，疗效好，不良反应少，本试验对利复星进行临床疗效验证、细菌学检查及不良反应观察，选用头孢曲松作为随机对照治疗肺部感染70例，结果报告如下。
-
子宫内膜异位症患者外周血及腹腔液中NK细胞活性及细胞因子的测定分析
许多研究表明，子宫内膜异位症与患者全身及腹腔内一系列细胞因子的改变有关，影响其发生和发展［1］。本研究通过测定34例内异症外周血及腹腔液内NK细胞活性及IL-6、IL-8、TNF-α水平，旨在了解它们的改变，并探讨其与内异症的关系。
-
术前选择性门静脉栓塞治疗肝癌的护理体会
原发性肝癌是一种常见的消化系统肿瘤，手术切除是肝癌患者首选的治疗措施，但仍有相当部分患者因肿瘤巨大而失去手术机会；另一方面，广泛的肝切除会导致患者出现严重的肝功能不全、出血、感染等严重并发症，进而增加手术的死亡率。术前选择性门静脉栓塞（Preoperativeselective portal vein embolization,POSPVE）是近年来才兴起的肝癌治疗方法，其能使栓塞侧肝组织血流量减少，对侧增多，促进对侧肝脏细胞增生，预留肝体积（Future remainingliver volum,FRLV）增大，进而扩大了肝癌肝切除的指征，提高了手术的安全性［1,2］。我科2000年10月至2001年4月对26例失去手术机会的原发性肝癌患者进行POSPVE治疗，现将护理体会报告如下。
-
钙离子再灌注后两种胶质细胞凋亡规律比较研究
近年来,凋亡现象与神经系统疾病之间的关系正随着研究的不断深入而得到更多的认识；神经胶质细胞是中枢神经系统结构和功能的重要组成部分，在病理条件下其凋亡的特性和规律必然影响到其功能实现。目前，对于星型胶质细胞和少突胶质细胞在钙离子再灌注条件下的凋亡发生规律尚无明确报道。本实验在对星形胶质细胞和少突胶质细胞分离培养、纯化的基础上，用钙离子再灌注法诱导凋亡，观察在相同凋亡诱导因素作用下两种细胞凋亡发生发展的规律及其间的差异。
-
全血有形成份减少与感染关系的临床分析
全血有形成份减少包括外周血液中白细胞、红细胞、血小板低于正常，常见于急性白血病、再障、恶性组织细胞病等；部分非血液系疾病如结缔组织病、感染等在病程中亦可出现，导致误诊，其机制不清。1988-2000年收治了19名因感染致全血有形成份降低患者，其临床特点如下。
-
静脉注射人血丙种球蛋白治疗病毒性脑炎疗效分析
病毒性脑炎是一类常见的中枢神经系统感染性疾病。目前治疗主要为抗病毒，免疫治疗，对症，支持［1］。IVIG具有广泛细菌及病毒抗体谱，能有效防治各种细菌及病毒引起的感染，同时对病毒感染引起的免疫缺陷状态有很好的调节作用。近年来国内外文献报道临床上使用IVIG治疗各种病毒感染及免疫性疾病取得较好疗效，国外也有文献报道IVIG对治疗脑炎后癫痫有益［2］。我科使用IVIG治疗病毒性脑炎15例，现将结果报告如下。
-
多发性骨髓瘤30例临床分析
多发性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM）是一种骨髓浆细胞异常增生的恶性肿瘤。现将我科1984年5月至1998年8月收治的30例MM临床病历资料总结如下。男性22例，女性8例，年龄31～69岁，均符合诊断标准［1］。首发症状：头昏、乏力22例，骨痛13例，肾脏病变9例，肺部感染6例，鼻出血4例，皮疹1例，单纯球蛋白增高1例。血沉均增高。据Durie和Salmon分期标准：Ⅰ期4例、Ⅱ期18例、Ⅲ期8例。65岁以上13例，给予VMCP或MP方案化疗。65岁以下17例，给予CTHPOP方案化疗。以骨痛缓解、肾功能好转、异常免疫球蛋白降低、瘤细胞比例降低作为疗效判断指标。完全缓解3例、显效19例、有效8例,总有效率达100%。中位生存期(月)。CTOP组为：Ⅰ期118、Ⅱ期75、Ⅲ期11，总中位生存期44。VMCP、MP组为：Ⅰ期132、Ⅱ期58、Ⅲ期9，总中位生存期32。
-
晚期食道恶性狭窄的带膜金属内支架治疗
对于失去手术机会的晚期食道癌应用内支架治疗，可较好的改善患者饮食，延长生存时间，提高生存质量。我们采用以国产支架为主，进口支架为辅，同时辅以化、放疗，对37例恶性晚期食道狭窄的患者进行治疗，取得了较好的疗效，报告如下。
-
GE ADVANTX-DLX血管造影机的使用体会
血管造影设备及DSA技术在近几年发展很快。新一代的各类数字减影机在提高图像信息检测能力，改善信噪比以及血管心脏的测量等功能方面已大大提高,有许多值得总结的经验与使用技术［1］。血管狭窄分析在扩张用球囊及支架选择上的应用：利用狭窄分析所得数据以确定球囊和支架大小是介入治疗中常用的方法，与狭窄血管段相近的正常血管的直径大小即所需支架的直径，球囊的选择可以参考狭窄血管的直径大小和血管狭窄的程度，即狭窄率，特别是在冠状动脉的PTCA技术中，准确的狭窄分析可以为介入操作的医生提供有效的帮助。另外，血管狭窄分析还在选择血管造影的导管及导丝的选择上有参考作用。通过血管分析所得的血管及狭窄血管直径大小，可以进行球囊导管大小的选择，如测得血管直径2.6 mm,狭窄血管直径1.5 mm,提示可选2.8 mm球囊。虽然目前数字减影设备的分析参数的准确性较以往有很大提高，但在一些血管影重迭.交叉处，以及移动伪影影响时，分析误差仍然较大。
-
0.2%罗哌卡因硬膜外分娩镇痛的临床观察
罗哌卡因是一新型长效酰胺类局麻药，低浓度时具有感觉运动分离的特点［1］，适用于分娩镇痛。我院用0.2%罗哌卡因硬膜外持续输注进行分娩镇痛，取得了较好的效果。
-
1例气管断裂伤员的抢救体会
作者成功抢救1例氧管断裂的病员，现将抢救体会报告如下。一般情况：患者，男，20岁，因爆炸致颈部受伤，以紧急包扎10 min后急送到卫生所。当时伤员口唇轻度紫绀，不能平卧，喘息样呼吸，30次/min，血压平稳。手术中所见：伤员紧急送进手术室，患者平卧，肩部抬高，消毒铺单后手术探查，见颈前及右侧胸锁乳突肌断裂，甲关软骨粉碎性骨折，其中有一碎骨片位于甲状软骨左侧，呈三角形，大小约0.5 cm×0.8 cm×1.0 cm，环状软骨断裂，破裂部位有气体溢出，但无法插进吸痰管，紧急分开其前方肌肉，暴露气管，氧管只有其后方少部筋膜与环状软骨相连，显露出氧管口后，插进氧管套管，吸痰，固定后包扎伤口，紧急送大医院进一步处理。
-
一次性密度梯度超速离心分离人血清脂蛋白及无脂血清
本研究采用角度转头和一次性密度梯度超速离心法，从正常人血清中将VLDL，LDL，HDL和无脂血清相互分离，效果满意，并成功应用于脂蛋白和胆固醇代谢的研究。1.1.1 仪器 超速离心机为BeckmanL8-55型，55.2-Ti角度转头，容量38.5×10 ml。分析天平为TG-328型（浙江温州天平仪器厂）。
-
细胞同步化能显著提高逆转录病毒载体的转染效率
人胃癌细胞株SGC-7 901、逆转录病毒包装细胞PA317和NIH3T3细胞由本室冻存保种，前者培养于含10%小牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的RPMI 1640培养液中,后二者培养于DMEM培养液中,培养条件为37℃\5% CO2和饱和湿度,每隔3～4d消化传代1次.
-
枕大池蛛网膜囊肿的诊治
我科自1986年有CT诊断至今，共收治枕大池蛛网膜囊肿8例，手术治疗8例9次，术后死亡2例，现总结报告如下。一般资料：男6例，女2例，年龄7～59岁，病程半月至2年；入院前有误诊史4例，其中1例巨大枕大池蛛网膜囊肿误诊为椎动脉型颈椎病达1年半，直到出现明显小脑共济运动失调才经影像学确诊。临床表现：病史中头痛头晕6例，恶心呕吐2例，双眼视力下降1例，右上肢震颤1例，左上下肢无力1例，癫痫发作1例；神经系统查体阴性者4例，小脑共济运动失调3例，双侧眼震1例，右上肢震颤1例，左侧面部浅感觉减退1例。
-
尿毒症患者心理卫生状态与性格特征的相关分析
尿毒症即慢性肾功能衰竭，是慢性肾功能不全的严重阶段，为各种肾脏疾病持续发展的共同转归。患者随着肾脏功能的逐渐衰退，经历了保守治疗、透析治疗乃至肾移植，会存在不同的心理障碍［1］，这些心理障碍又加重病情，如不治疗会影响疾病的康复。关于尿毒症患者心理卫生状态的研究，国内外都有报道，但是关于尿毒症患者的心理卫生状态与性格之间的关系，国内尚未见报道，因此本研究旨在对尿毒症患者的心理状态与性格特征之间的关系作一相关研究，从而为临床护理提供心理学依据。为此我们对63名尿毒症患者进行艾森克个性问卷调查（简称EPQ）及SCL-90临床症状自评量表测定，并与国内常模比较分析［2］，现报告如下。
-
ABO异型外周血干细胞移植后血型抗原、抗体变化的观察
外周血造血干细胞移植（PBSCT）包括自体和异体，异体包括ABO同型和异型。我们对我院两例ABO同种异型，O型患者接受A型供者的外周血干细胞进行移植，现将受者接受异型后，抗-A、抗-B抗体效价、A抗原的变化报道如下。
-
HPLC-电化学法检测细胞培养液中的多巴胺及其代谢产物
目的 对低含量儿茶酚胺检测方法的探索，以测定PC12细胞及微囊化PC12细胞培养液中多巴胺及其代谢产物的分泌量。方法 常规条件下，培养PC12细胞及微囊化的PC12细胞，在不同时间收集细胞培养液。氧化铝吸附、提取其分泌多巴胺及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸，HPLC-电化学测定其分泌量。结果 多巴胺及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸完全与基线分离，不受杂峰干扰。平均回收率大于80.9%，变异系数小于3.4%。培养到24 d，PC12细胞及微囊化PC12细胞分泌儿茶酚胺的量达到大值。结论 HPLC-电化学能准确、灵敏地分析PC12细胞分泌的多巴胺及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸。
-
偏二甲基肼在大鼠灌流肝中代谢产物的SPE-HPLC分离法
目的 建立偏二甲基肼在大鼠灌流肝中代谢产物的SPE-HPLC分离法。方法 以大鼠原位肝脏灌流为实验模型，收集染毒前后的灌流液做自身对照，用固相萃取法进行样品预处理，HPLC做梯度洗脱分析。结果 采用目前建立的SPE-HPLC法分离偏二甲基肼在大鼠灌流肝中代谢产物的效果良好。结论 建立了偏二甲基肼在大鼠灌流肝中代谢产物的SPE-HPLC分离法。偏二甲基肼(Unsymetrical dimethylhydrazine，UDMH)是我国液体火箭推进剂的主要成分之一，在化工、医药和农业生产等领域也有广泛的应用。其沸点低（63 ℃），易挥发，因泄漏等原因发生急性中毒事件。其急性中毒机制目前还不十分明确［1,2］，实际应用的救治措施疗效也不理想，且毒副作用较大［3，4］。我室与本校中心实验室理化组合作，在大鼠原位肝脏灌流实验模型上收集染毒前后的灌流液做对比分析，建立了UDMH在大鼠灌流肝中代谢产物的SPE-HPLC分离法。
-
生物芯片概述
21世纪是生命科学的世纪。人类基因组计划已经完成。蛋白质组计划已经启动。基因序列数据及蛋白质序列数据正在以前所未有的讯速增长。然而，怎样去研究如此众多基因及蛋白质在生命过程中所担负的功能就成了全世界生命科学工作者共同的课题。生物芯片正是在这样的背景下应运而生的。生物芯片不仅在高通量基因测序、基因表达研究方面已经发挥了重要作用，也将在后基因组时代研究蛋白质功能及蛋白质间的相互作用方面发挥极其重要的作用；也必将在临床基因诊断中占据重要的地位。生物芯片技术是生命科学研究中继基因克隆技术、基因自动测序技术、PCR技术后的又一次革命性技术突破。
