第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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新基因RS1在辐射损伤小鼠的组织表达谱研究
目的探讨新基因RS1在辐射损伤小鼠的组织表达谱情况,为RS1的克隆和功能研究提供更多的线索.方法利用半定量RT-PCR的方法研究RS1在辐射损伤小鼠肠上皮、肝、肾、脾脏的表达情况,利用原位杂交的方法观察RS1在辐射损伤小鼠肝、肾、脾脏和心肌的表达情况.结果 RS1在辐射损伤小鼠除在肠上皮表达以外,在肾、肝、脾等多处表达,其中脾脏和肾脏的表达较高.结论 RS1具有广泛的组织表达谱.可以利用肾脏和肝脏来源的,RS1表达丰度高的总RNA为模板进行全长cDNA克隆.
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TRAIL与5-Fu合用对结肠癌细胞系SW480杀伤作用的研究
目的观察TRAIL与5-Fu联合应用对结肠癌SW480细胞的作用.方法采用MTT法检测TRAIL与5-Fu联合应用对结肠癌SW480细胞存活分数的影响;TUNEL法检测TRAIL与5-Fu联合应用对结肠癌SW480细胞凋亡率的影响.结果 MTT法证实30～300 ng/ml的TRAIL与3.0 mmol/L 5-Fu联合应用对结肠癌SW480细胞存活分数的影响有协同作用,TUNEL法表明3.0 mmol/L 5-Fu可显著增强TRAIL诱导结肠癌SW480细胞凋亡的作用.结论 5-Fu可提高结肠癌SW480细胞对TRAIL的敏感性.
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亚甲蓝光化学效应对血液中大肠杆菌的灭活效果及对血细胞生物学功能影响
目的观察特定条件下,亚甲蓝(MB)光化学效应对血液中大肠杆菌的灭活效果及对血细胞生物学功能的影响.方法血液样本以15 μmol/L的MB在40 000 lx卤钨灯照射下,加入0.35 mmol/l的芸香苷,作用10～40 min,观察对血液中大肠杆菌的灭活效果,并采用多聚赖氨酸粘附试验、ATP酶促反应和中性粒细胞吞噬试验等技术观察血细胞某些生物学功能的变化.结果处理40 min,血液中大肠杆菌下降近5个对数级,亚甲蓝与卤钨灯照射两因素的T/E值大于1,具有协同增效作用.血细胞形态无明显变化,红细胞膜表面负电荷下降了11.23%～25.49%,Na+-K+ATP酶活性在处理的20～30 min时增加了7.60%～20.07%.中性粒细胞的NBT吞噬显色反应呈增高趋势,20 min时阳性率增加9.00%.结论亚甲蓝光化学效应可以有效灭活血液中的大肠杆菌.在有效灭活血液中细菌的特定条件下,血细胞的形态和功能无显著变化,但红细胞粘附力升高了11.23%～25.49%.
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大鼠发育过程中视皮层神经元电学特性的研究
目的研究大鼠发育过程中视皮层神经元的电生理学特性,探讨相邻神经元之间的相互作用和局部神经元网络的整合功能.方法应用脑片膜片钳全细胞记录技术(盲法)获得4～28 d龄SD大鼠视皮层神经元的全细胞记录,在电压钳下应用强度为0.1～1.0 mA刺激来引起神经元的突触后电流(Post synaptic currents, PSCs).结果 156个大鼠视皮层神经元的PSCs可分为无反应型、单突触反应型和多突触反应型3种类型.大鼠睁眼后多突触反应型细胞所占的百分率显著增加.某些细胞在不同的刺激强度下有不同的突触反应;个别细胞在相同刺激强度下,多突触反应的曲线不同.双脉冲刺激视皮层神经元引起的时间整合作用的形式表现为突触反应增强型、压抑型和无影响型3种类型.结论多突触反应的神经元可接受两个或多个延时不同的突触输入.视皮层神经元在出生后发育过程中,其功能的成熟表现为在视觉刺激下,视觉依赖性突触的重新分布,表明了相邻神经元之间的相互作用和局部神经元网络的整合功能.
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川芎嗪对PC12细胞抗凋亡作用的实验研究
目的探讨川芎嗪对多巴胺诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制.方法用多巴胺(DA)刺激PC12细胞使其发生细胞凋亡,用流式细胞仪检测PC12细胞二倍体比率表征细胞凋亡率,用MTT法测定细胞活性,用Griess法间接测定NO的浓度,比较分析加入不同剂量的川芎嗪后对上述指标的影响.结果加入0.30、0.60 mmol/L的DA两组的PC12细胞的凋亡率、培养上清NO含量均显著高于无DA组(P<0.05),细胞活性显著低于无DA组(P<0.05).加入川芎嗪后,细胞凋亡率、NO含量均显著低于未加入川芎嗪组(P<0.05)、细胞活性显著高于未加入川芎嗪组(P<0.05).结论川芎嗪可抑制DA引起的PC12细胞凋亡,此作用可能与降低NO生成有关.
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大鼠创伤性脑损伤后NGF mRNA表达变化及外源性IL-1β对其影响
目的观测大鼠脑损伤后NGF mRNA表达变化及IL-1β对其的影响,探讨NGF及IL-1β在脑创伤中的作用机制.方法在建立流体脑创伤模型的基础上,采用RT-PCR、分子杂交及免疫细胞化学等技术,观测脑创伤后NGF mRNA的表达变化以及外源性IL-1β对其的影响.结果 NGF mRNA在伤后12 h脑伤灶及其周围即出现表达的增加,在脑致伤后24 h及3 d NGF mRNA的表达明显增加,达到峰值,其后逐渐降低但表达仍然高于对照组.IL-1β处理组致伤后3 h即出现NGF mRNA表达的增加,NGF mRNA的含量明显高于单纯致伤组及对照组(P<0.01),并在伤后24 h达到峰值.结论脑创伤后NGF mRNA表达的增加可能和创伤早期对神经细胞的保护作用和修复机制有关.IL-1β mRNA的表达增加早于脑创伤后NGF mRNA的表达增高.外源性IL-1β能提高脑创伤后 NGF mRNA的表达水平.
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成人先天性巨结肠1例
患者,男性,60岁,因反复腹痛、腹胀5年,加重1年入院.缘于5年前因食不洁食物后出现腹痛、腹胀、腹泻,为黄色稀水样便,无脓血、粘液,无里急后重感,在重庆市某医院诊断为"急性胃肠炎",给予抗炎、补液治疗后症状缓解.其后,上述症状无明显诱因出现3次,均行结肠镜和钡灌肠检查,诊断为"慢性结肠炎",口服"结肠炎丸",症状缓解出院.
关键词： 先天性巨结肠 -
正畸治疗中年龄对支抗牙根吸收影响的临床研究
正畸治疗中引起的牙根吸收被认为是正畸治疗的一个不良后果,特别是支抗牙的牙根吸收是一个很严重的问题.国内开展正畸以来,人们不但对正畸目标的追求越来越高,有很多时候成年人的正畸治疗比例越来越大.这个群体不但医疗法律意识强,而且对正畸目标的追求也越来越高,使得对正畸治疗中牙根吸收的研究,特别是年龄因素产生的影响,就变得更加必要.其实正畸治疗中所出现的牙根吸收现象是一个很复杂的生理过程,它和很多因素相关.而关于正畸治疗年龄与牙根吸收之间的关系目前仍存在争议.
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颈部静脉异常1例
作者在解剖一成年男性尸体时,发现其右侧颈部静脉变异较为罕见,现报告如下.
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MRI诊断男性原发性乳腺癌1例
患者,男,62岁,发现右胸壁无痛性包块3年,包块增大并疼痛7个月.查体:右侧乳房外上象限近乳头处扪及一3.0 cm×4.0 cm包块,质硬,有中度触痛,表面欠光滑,活动度较差;包块呈球状突出胸壁,表面皮肤发红,无破溃及"酒窝征"、"桔皮征",乳头无凹陷,挤压乳头无溢液.双侧腋窝未扪及肿大淋巴结.
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纵隔转移性黑色素瘤1例
患者,女,25岁.2000年5月24日因右侧胸痛2个多月,加重1周入院.入院前胸部胀痛,伴吞咽困难,无发热、寒战等.
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前列腺素E1治疗慢性肾功能不全的疗效观察
1 资料与方法1.1 资料本院1999年至2001年住院的慢性肾功能不全病人70例,男性44例,女性26例,年龄19～65岁,平均(42±9)岁,所有病例均符合慢性肾功能不全的诊断标准[1],并排除感染、体液丢失、低血压存在.肱动脉平均动脉压(MAP)78～160 mmHg,平均(135±25)mmHg;血肌酐(Cr)210.51～671.39 μmol/L,平均(340.60±95.04) μmol/L;血红蛋白(Hb)61.2～124.7 g/L,平均(81.0±18.1) g/L.其中氮质血症期(血Cr 178～450 μmol/L)46例,肾功能衰竭期(血Cr 450～707 μmol/L)24例.将70例患者分为PGE1组40例与对照组30例.PGE1组与对照组治疗前以上指标除男女外,经统计学t检验差异不显著.
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重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征表现为扩张型心肌病1例
患者,男 ,32岁,教师.因咳嗽4个月余,加重伴活动后气促、双下肢浮肿2个月,于2001年1月10日入院.2000年9月上旬因受凉后出现鼻塞、咽痛和咳嗽,并逐渐出现心悸、气促、双下肢浮肿等.X线胸片示:"心影增大,肺淤血",但未住院诊治,随后出现夜间阵发性呼吸困难、腹胀、下肢浮肿加重等.既往史:一贯体胖,23岁时体质量已达80 kg ;打鼾16年,夜间张口呼吸,白天精神差;无胸闷、晕厥、高血压病史.
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儿童眼球摘除的病因分析及护理
我院在1997至2002年期间,行儿童眼球摘除87例,现将其主要病因分析如下.
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阴道原发性横纹肌肉瘤1例
1 病例报告患者,21岁,女.阴道肿块伴血性白带6个月,于2001年8月15日入院.患者6个月前无意中发现阴道口有核桃大肿块,有不适感,且白带呈粉红色,未重视.病情渐加重,阴道颗粒状胶质肿物迅速增大,排液伴出血量较多.既往身体健康,未婚,月经正常,无特殊病史及家族史.查体:一般状况良好,发育正常,心、肺、腹均未见异常.妇科检查:阴道口可见一个巨大葡萄状肿物脱出, 约12 cm×8 cm×4 cm,灰红色,质脆,表面有溃疡及出血,主要在后壁生长,前壁不平.宫颈光滑,宫体后位,正常大小,活动度良好.病理检查:肉眼所见组织表面灰红,切面灰白,质中.镜检:瘤细胞排列密集,胞浆深染,核偏向一侧,部分胞浆内可见横纹.
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皮肤及骨关节结核误诊1例
患者,男,21岁,因发热,肘、腕、膝关节疼痛伴关节下包块,在某医院诊断为多发性脓肿,予以青霉素治疗无效,后诊为韦勃-克莱斯坦病.经用地塞米松15 mg静脉滴注,10 d后体温降至正常,包块消退,改强的松15 mg/d口服15 d后,上诉症状再次出现,到另一医院仍诊断为韦勃-克莱斯坦病,予以甲基强的松龙1 g/d静脉滴注3 d体温至正常,但关节包块仍在,继续服用强的松40 mg/d,10 d后出现咳嗽咳痰,于2000年4月12日转入我院.
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66例女性自发性气胸临床分析
自发性气胸是呼吸科的常见急诊,发现率约5～47/10万,女性发病率远低于男性.由于其病因多,发病急,易复发,仍为临床上一个较为棘手的问题.本研究分析了我科1981年至2000年共813例自发性气胸中的66例女性病例,结果如下.
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252锎中子放疗对宫颈癌细胞凋亡的影响
目的研究宫颈鳞癌患者252锎中子照射前后肿瘤细胞凋亡的变化,初步探讨252锎中子治疗宫颈癌的机制及临床意义.方法采用TUNEL法检测20例宫颈鳞癌患者中子放疗前后的肿瘤细胞.结果发现凋亡指数(AI)和肿瘤细胞凋亡阳性的患者分别由放疗前的(4.22%±4.14)%和35%(7/20)上升至放疗后的(34.64±24.36)%和85%(17/20)(P<0.01),无论放疗前后,平均AI在各分期和各级间未见明显差别(P>0.05),经随访,全部患者中仅1例Ⅲb期患者出现复发,再次给予放疗后控制良好.并发症主要为放射性直肠炎,发生率10%.结论 252锎中子照射后可引起肿瘤细胞较强的凋亡反应,诱导细胞凋亡在252锎中子近距离照射治疗机制中具有重要意义.
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心脏不停跳心内直视手术对血浆NSE和S-100b及脑电图的影响
目的比较心脏不停跳与心脏停跳心内直视手术患者,围手术期血浆中神经元特异性烯醇化酶(NSE)与S-100b蛋白的含量及脑电图的变化,探讨它们造成脑损伤的差异.方法 40例接受心内直视手术患者,随机分为A组(n=20),在心脏停跳下施行手术;B组(n=20),在心脏不停跳下施行手术;两组先天性心脏病和风湿性心脏病各10例.全组均在术前、CPB开始后20 min、CPB结束后1 h和24 h采取血样本,运用酶联免疫吸附法测定血浆中NSE和S-100b蛋白含量;结合患者术前与术后7 d的脑电图检查,评价两种方法造成脑组织损伤的差异.结果 CPB开始 20 min两组患者血浆中的S-100b均明显升高(P<0.01),而且一直持续到CPB后24 h仍高于术前水平(P<0.01);CPB 开始20 min , A组中先心病患者血浆S-100b升高程度高于B组中先心病患者(P<0.05).在CPB 开始20 min A组患者血浆NSE升高的程度高于B组患者(P<0.05);血浆NSE水平在CPB 开始20 min先心病组明显升高(P<0.01),一直持续至CPB 结束后1 h达到高点,至CPB后24 h降至术前水平(P>0.05);风心病组患者在CPB 开始20 min NSE升高(P<0.05),在CPB后1 h明显升高,一直持续到CPB后24 h仍较术前高(P<0.01).术后两组患者EEG结果较术前明显差异(P<0.01);但两组间的异常率无显著差异(P>0.05).结论浅低温体外循环心脏不停跳心内直视手术没有造成较常规中低温体外循环心脏停跳心内直视手术更严重的脑组织损伤.
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控制性肺膨胀对急性肺损伤患者肺机械力学及血流动力学的影响
目的探讨控制性肺膨胀(SI)同小潮气量通气模式结合对急性肺损伤(ALI)患者的肺复张作用及其对血流动力学的影响.方法选择严重创伤并发ALI的患者,先予基础通气1 h,然后分别给予20 cm H2O×30 s(SI1)、30 cm H2O×30 s(SI2)、40 cm H2O×30 s(SI3)、50 cm H2O×30 s(SI4)的SI各通气1 h,在基础通气1 h、SI后1 h以及回到基础通气1 h各时点监测肺机械力学和血流动力学指标.结果与基础通气模式相比,SI1及SI2后各指标无明显变化,SI3和SI4后EELV显著增加,Cst显著提高,而Paw、PAP和PVRI则显著降低,SI对HR、AP、CI等血流动力学指标均无显著影响.结论 SI同小潮气量通气模式结合治疗ALI患者时,具有肺复张作用,能改善肺顺应性,且对血流动力学无明显不良影响.
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胃癌术前介入化疗的病理分析
目的评估胃癌术前介入的疗效.方法对14例胃癌患者术前行经股动脉穿刺置管到达腹腔干或肝总动脉,注入化疗药氟尿嘧啶脱氧核苷(FUDR)0.8 g/m2、表阿霉素40 mg/m2、奥沙利铂80 mg/m2,化疗后5～7 d行根治性切除术,将每例病人术前取的组织标本与术后取的组织标本进行病理学对照观察.结果术后组的肿瘤细胞坏死程度明显高于术前组(P<0.001),术后组肿瘤细胞坏死多位于血管周围,而术前组肿瘤细胞的坏死与血管没明显关系明显(P<0.05).术后组的细胞凋亡指数明显高于术前组(P<0.001).结论术前介入化疗对胃癌明显的治疗作用,主要是通过引起肿瘤细胞坏死和诱导肿瘤细胞凋亡引起的.
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GP方案治疗50例晚期非小细胞肺癌的疗效观察
目的观察GP方案治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效及毒副反应.方法 50例晚期非小细胞肺癌患者采用GP方案:吉西他滨(GEM)1 000 mg/m2,静脉注射,30～60 min,第1,8天;顺铂(DDP)80 mg/m2,静脉滴注,2 h,第1天,21 d为1周期.结果 GP方案治疗非小细胞肺癌总有效率56.0%,其中CR 1例(2.0%),PR 27例(54.0%),SD 16例(32.0%),PD 6例(12.0%),19例初治者和31例复治者近期有效率分别为63.1%和51.6%,中位生存期8.5个月(4～18个月),1年生存率为32.2%.主要毒副反应为中度骨髓抑制和胃肠道反应.结论 GP治疗方案对晚期非小细胞肺癌有较好的疗效且用药安全.
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二类新药地洛他定治疗过敏性鼻炎临床疗效及安全性随机对照双盲试验
目的考察二类新药地洛他定治疗过敏性鼻炎的疗效和安全性,并将其治疗结果与母药氯雷他定进行分析比较.方法选择临床确诊的急慢性过敏性鼻炎共50例,随机分为对照及试验组,双盲法试验,服药前、服药后14 d进行临床症状评分、鼻腔检查、血和尿常规、肝肾功能、心电图等各项检测,所得资料做统计学分析.结果两组受试者临床资料具有可比性;服用地洛他定者疗效好,总有效率为95.45%,且无明显毒副作用.结论地洛他定治疗过敏性鼻炎效果显著,有较高的安全性,总体效果优于氯雷他定,可以在临床推广使用.
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经支气管肺活检结合免疫组织化学方法对肺间质纤维化的诊断价值
目的评价经支气管肺活检(Transbronchial lung biopsy, TBLB)结合免疫组织化学方法对不同原因肺间质纤维化诊断价值.方法在X线透视下,对20例不同原因导致的肺纤维化患者,包括9例特发性肺纤维化(IPF)和11例COPD继发肺纤维化(PF-COPD),行纤维支气管镜肺活检取得肺组织,切片行HE染色, Masson三色染色及免疫组化检测I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达,比较IPF与PF-COPD之间在病理形态学、胶原纤维增生程度、类型及分布特点方面的区别.结果 IPF胶原纤维增生程度明显高于PF-COPD(P<0.01),IPF以较粗大的Ⅰ型胶原纤维增生为主;而PF-COPD则以较纤细的Ⅲ型胶原纤维为主.结论 IPF与PF-COPD在临床特点、病理表现、纤维增生程度及胶原纤维类型等方面均有很大的区别;TBLB结合免疫组化方法对肺间质纤维化具有一定的诊断价值.
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三氧化二砷诱导结肠癌LS-174T细胞凋亡及其抑制增殖作用
结直肠癌是当前常见的消化道恶性肿瘤之一,癌细胞的早期浸润和转移特别是肝转移使其预后一直无显著的改善.三氧化二砷(As2O3)已成功地应用于临床治疗急性早幼粒细胞性白血病(Acute promyelocytic leukemia,APL),取得良好的效果[1].本实验研究As2O3作用于人结肠腺癌细胞株LS-174T,观察其体外诱导肿瘤细胞凋亡和抑制增殖作用,为临床上应用As2O3治疗结直肠癌提供实验依据.
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病态窦房结综合征与冠状动脉性心脏病关系的探讨
1996年1月至2002年3月我院对26例因病态窦房结综合征(Sick sinus syndrome, SSS)而接受起搏器治疗的患者行冠状动脉造影术,并对3例5支血管进行了经皮冠状动脉腔内成形术(Percutaneous transluminal coronary angiography,PTCA)和支架植入术治疗.本研究总结SSS患者的冠状动脉造影结果及介入治疗后患者窦房结的功能,探讨SSS与冠状动脉病变的关系.
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经皮髓核切吸术治疗腰51骶1椎间盘突出症
自动式经皮腰椎间盘切除术(Automatic percutaneous lumbar diskectomy, APLD)于20世纪80年代始西方国家广泛应用于临床治疗腰椎盘突出症,据国内外多数报道,疗效满意.我院采用国产APLD系统治疗腰51骶1椎间盘突出症患者30例,疗效满意,报告如下.
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Breslow算法非容许误差校正
目的对多元生存分析Breslow 算法的基础生存率So(t)的估计会在实用中产生与概率意义不相符的非容许误差进行校正.方法根据Cox比例危险度概率模型原理,利用参数极大似然估计法对So(t)做推导分析.结果导出了So(t)的无偏计算公式.结论纠正了原估So(t)计公式的非容许误差,并通过不同算法对比的算例,说明新估计公式的合理性.
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流式细胞仪双色术检测机采血小板活化方法
目的探讨一种流式细胞仪检测机采浓缩血小板悬液活化状态的方法.方法用CD41-FITC、CD62-PE双色标记,避光反应15 min后加入1 ml 1%多聚甲醛固定,上机分析.结果采用此方法测定22 ℃保存下不同时间的血小板CD62P表达,表明随着时间的延长CD62P阳性率增加,保存达到3 d及以上,CD62P阳性率增加非常显著.标本以多聚甲醛固定在24 h对CD62P测试结果无明显影响,样品不固定处理,不同时间测定对结果影响非常大.结论双色标记流式细胞术检测机采血小板活化敏感、特异,重复性好,操作简便, 能较好地反映储存中血小板的CD62P的变化.可方便应用于血小板的保存及输注的质量监控.
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低氧与应激蛋白研究进展
无论单细胞生物还是多细胞生物,应激都是一种重要的对外界环境的一种适应性反应.应激反应使机体产生一些非特异性的产物,即应激蛋白(Stress response proteins,SRP),对于机体适应外界环境起到重要的保护作用,其结构具高度的保守性.应激蛋白的分类也未统一,有学者把它分为热休克蛋白(Heat shock proteins,HSP)、糖调蛋白(Glucose-regulated proteins,GRP)及泛素(Ubiquitin).其分子量为(8～110)×103[1].但有的学者把糖调蛋白和泛素都归为热休克蛋白家族,因而应激蛋白与热休克蛋白这两个词在一些文章中经常互换[2].
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Cyclin B1与肿瘤发生发展
近年研究表明细胞周期与细胞癌变已不再是人们所认为的两个分割的细胞事件.在细胞发生恶性转化过程中,除了癌基因/抑癌基因的正负调节失控外,细胞周期调控因子也是参与癌变过程的调节位点.肿瘤的发生、发展和恶变与细胞周期的调控失调密切相关.参与细胞周期调控的因子主要有:细胞周期蛋白(Cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent kinase,CDK)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(Cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI).根据分子结构,生物学特性的不同,已知的细胞周期蛋白(Cyclin)有10类:CyclinA、B、C、D、E、F、G、H、I及J,各个亚型共15种.在这些周期蛋白内部都有100～150个氨基酸的保守区,称为细胞周期蛋白盒,能与CDK结合来调节细胞周期的进程.研究表明:Cyclin B1在多种肿瘤中表达异常,且与其生物学行为相关.作者结合相关研究就Cyclin B1在肿瘤发生、发展中作用作一综述.
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输卵管妊娠治疗研究进展
异位妊娠是妇产科常见的急腹症,可导致继发不孕甚至危及生命.近年来,各国异位妊娠的发病率逐年上升,文献报道不一,20年来异位妊娠在美国增加了6倍,在英国增加了4倍,目前占所有妊娠的2%.随着辅助检查技术的提高及其在妇产妇的应用,80%异位妊娠可以在破裂前得到诊断.异位妊娠的治疗包括期待治疗、药物治疗和手术治疗.早期诊断为保守治疗创造了条件,目前的处理多趋向于保守治疗.有学者[1]认为在不久的将来,保守治疗将成为异位妊娠的首选治疗方法,手术治疗将仅作为保守治疗失败时的一种补缀措施.异位妊娠中以输卵管妊娠多见,占95%以上,故本综述主要讨论输卵管妊娠治疗的现状.
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烧伤早期损害防治研究近况
烧伤早期损害是影响大面积烧伤治愈率的关键因素,是烧伤防治研究的重大课题[1,2].近年来,国内外对此进行了深入广泛的研究.我室在国家"973"创伤基础研究项目和国家杰出青年基金等项目的资助下,就烧伤早期损害的分子机制与防治进行了较深入的研究, 提出了一些新的认识和见解,拓宽了临床防治的思路.
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大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔状态改变及其机制
目的探讨大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔(PTP)状态改变及其机制.方法 Wistar大鼠48只随机分为正常对照组、烧伤1、3、6、12、24 h组(30%Ⅲ度烫伤).所有大鼠处死前5 min均从颈外静脉推注0.5 mmol/L 2-[3H]去氧葡糖([3H]DOG),测定伤后各组大鼠心肌线粒体[3H]DOG、cyt c、MDA含量及[Ca2+]m.结果①大鼠烧伤后1 h心肌线粒体[3H]DOG及cyt c含量与正常对照组无明显差异,但3、6、12、24 h心肌线粒体[3H]DOG含量明显高于正常对照组,cyt c含量明显低于对照组,分别是对照组的68.8%、50.0%、77.1%、72.9%.②大鼠烧伤后3、6、12、24 h心肌线粒体 MDA含量及[Ca2+]m显著高于正常对照组.③伤后心肌线粒体[3H]DOG含量与[Ca2+]m、MDA均呈显著正相关,相关系数分别为0.854 7、0.911 7(P<0.01).结论烧伤后1 h心肌线粒体PTP状态无明显改变,但伤后3、6、12、24 h PTP开放明显增加,线粒体Ca2+超载及自由基增加可能是烧伤后PTP开放的重要原因.
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严重烧伤大鼠肝脏葡萄糖转运体1蛋白表达的实验研究
目的探讨严重烧伤大鼠早期肝脏葡萄糖转运体1(Glucose transporter 1,GLUT-1)蛋白及其转录活性的变化和意义.方法采用30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,以正常大鼠为参照,Western Blot法检测伤后0.5、1、2、4、8、16 h肝脏总蛋白中GLUT-1的表达;体外转染含有大鼠GLUT-1全长调控序列的报告基因构建体A,24 h后,1%氧浓度诱导表达,以β-半乳糖苷酶为参照,分析报告基因表达强度的变化.结果①与正常对照相比,严重烧伤后1 h大鼠肝脏Glut-1蛋白表达明显增加(增加约1.32倍) (P<0.05),在伤后4～8 h变化为明显,约为正常对照的2倍(P<0.05),烧伤后16 h,GLUT-1蛋白含量降低(P<0.05);②构建体A转染24 h后,缺氧处理3 h,报告基因的表达明显升高,增高约3.19倍(P<0.05),缺氧6 h,报告基因的表达增强2.23倍,与3 h相比无明显差异(P>0.05).本试验观察期内,缺氧处理12 h报告基因的表达强度大,诱导表达倍数约5.34倍,与缺氧3、6 h存在显著差异(P<0.01).结论①严重烧伤以后,大鼠肝脏的GLUT-1蛋白含量增加.②缺氧诱导了大鼠GLUT-1基因5′侧翼区全长序列介导的报告基因的表达.
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精氨酸营养干预对严重烧伤家兔免疫功能的影响
目的研究精氨酸营养干预对严重烧伤家兔免疫功能的影响及其机制.方法采用30%体表面积Ⅲ度烧伤家兔模型,26只日本长耳白兔随机分成3组:正常对照组(n=8)、烧伤对照组(n=9)及精氨酸喂养组(n=9).精氨酸组予L-醋酸精氨酸1.2 g*kg-1*d-1(精氨酸净重0.89 g),烧伤对照组予等量的L-酪氨酸,观察给药7 d后精氨酸对烧伤家兔淋巴细胞转化率、白细胞吞噬率、白细胞趋化指数、CD4/CD8比值、血浆免疫球蛋白及动物死亡率的影响.结果烧伤7 d后两组动物免疫功能均明显下降,两组相比,精氨酸组家兔免疫功能明显优于烧伤对照组,各项免疫指标的变化均有显著意义(P<0.05,P<0.01).结论严重烧伤家兔机体免疫功能下降,经肠道补充精氨酸能有效提高伤后免疫功能,降低动物死亡率.
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p38激酶途径介导缺氧复合烧伤血清所致乳鼠心肌细胞损害
目的观察缺氧复合烧伤血清对心肌细胞p38激酶和JNK活化的影响,探讨p38激酶在缺氧复合烧伤血清损伤心肌细胞中的作用.方法免疫印迹化学发光法检测缺氧复合烧伤血清作用培养心肌细胞前后p38激酶及JNK磷酸化程度,观察p38激酶抑制剂SB203580预先处理,对心肌细胞p38激酶磷酸化、心肌细胞活力、培养液中LDH活性及凋亡的影响.结果缺氧复合烧伤血清使心肌细胞p38激酶迅速、持续活化,而JNK活化不明显;10 μmol/L SB203580可有效抑制p38激酶活化,并显著降低细胞培养液中LDH活性及细胞凋亡率,改善心肌细胞活力.结论 MAPKs家族两条应激活化的信号途径当中,p38激酶途径是缺氧复合烧伤血清作用条件下心肌细胞主要被激活途径,并较早参与介导心肌细胞损害.
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HSP70基因静脉注射对严重烧伤大鼠肠粘膜保护作用的实验研究
目的为严重烧伤后肠粘膜损伤的防治提供可行性的基因治疗途径.方法大鼠静脉注射含HSP70基因的重组腺病毒载体,通过严重烧伤后肠粘膜病理形态学改变、损伤指数统计及血清中乳酸脱氢酶含量的变化观察基因转染后保护效应.结果静脉转染HSP70基因的大鼠烧伤后肠粘膜组织病理改变较单纯烧伤组减轻,损伤指数明显降低,血清中乳酸脱氢酶含量明显下降.结论大鼠静脉注射含HSP70基因的重组腺病毒载体可保护严重烧伤后肠粘膜的缺血缺氧性损伤.为严重烧伤早期缺血缺氧性损伤的防治提供可行性的基因治疗途径.
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HSP70在严重烧伤大鼠心肌中的表达及其保护作用的研究
目的研究热休克蛋白70(HSP70)在严重烧伤大鼠心肌中的表达变化规律,并观察诱导热休克反应对烧伤后心肌损害的保护作用.方法 72只Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组(B组)、亚砷酸钠预处理组(SA组),于致伤前及30%TBSAⅢ度烫伤后3、6、12、24、48 h检测血清心肌钙蛋白I含量变化,Western blot检测心肌组织HSP70蛋白表达情况.结果大鼠严重烧伤后3 h心肌组织HSP70蛋白表达显著升高,伤后48 h达高峰.大鼠烫伤后3 h血清心肌钙蛋白I(cTnI)含量即开始明显升高,伤后12 h达高峰.亚砷酸钠预处理可显著诱导机体的热休克反应,SA组伤后多数时相点血清cTnI含量显著低于B组,且波动幅度较小.结论严重烧伤早期即可引起心肌组织HSP70蛋白表达显著增强,HSP70蛋白可能在烧伤后早期心肌损害中发挥其内源性抗损伤机制.
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LPS对血管内皮细胞的直接损伤作用的初步研究
目的探讨烧伤后早期内毒素对血管内皮细胞(Vasculancndothelial cells, VEC)的直接损伤作用.方法采用RF/6A135猴血管内皮细胞株和ECV-304人脐静脉内皮细胞株为模型,将细胞分为正常对照组和细菌脂多糖(Lipopolysacoharide, LPS)浓度梯度组.观察不同时相点LPS对内皮细胞形态、脱氢酶活性的影响、VEGF表达、VE-cadherine的表达和LPS 与VEC结合能力及对VEC中MAPK信号传导系统磷酸化的影响.结果 LPS对VEC的形态影响明显.2.0 μg/ml LPS可明显激活内皮细胞的线粒体脱氢酶活性,并有时间依赖性;刺激内皮细胞2～12 h,可诱导VEGF的表达;刺激内皮细胞6～48 h,VE-cadherine表达进行性下降.激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析显示LPS能与内皮细胞结合.免疫细胞化学和Western blotting分析显示LPS可诱导ERK1/ERK2和P38MAPK磷酸化.结论 LPS能与VEC结合并损伤VEC的功能和形态.LPS 对VEC 的作用还伴有MAPK系统信号ERK1/ERK2和P38的磷酸化, 说明LPS可以诱导VEC 的跨膜信号传导.
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内皮活化相关新基因EOLA1的体外表达及亚细胞定位
目的研究内皮细胞高表达脂多糖相关因子1(Endothelial-over-expressed lipopolysaccharide-associated factor 1, EOLA1)基因的体外表达和亚细胞定位,为进一步功能研究打下基础.方法通过偶联转录/翻译系统体外表达EOLA1蛋白,并用变性凝胶电泳进行产物检测;构建EOLA1-EGFP(绿色荧光蛋白)融合蛋白表达质粒,转染内皮细胞后瞬时表达,在激光共聚焦显微镜下观察EOLA1蛋白的亚细胞定位.结果体外表达的EOLA1蛋白分子量约18×103,与预测结果相符合;EOLA1蛋白主要定位于细胞浆,少量表达于细胞核.结论 EOLA1属细胞内结构蛋白,可能是参与了炎症时细胞内信号转导.
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c-fos反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理大鼠心肌细胞保护作用的实验研究
目的探讨c-fos反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞的保护作用.方法烧伤血清采自30%TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠;采用含1%O2的混合气体作为缺氧模型;采用基因重组技术构建c-fos反义基因重组体;由Lipofectamine kit介导心肌细胞转染;于缺氧复合烧伤血清处理1,3,7 h不同时相点采用RT-PCR检测c-fos mRNA的表达变化,采用Western blot检测c-fos蛋白,肌钙蛋白-T(TnT)和β-微管蛋白(β-Tubulin)的表达变化.结果加入烧伤血清并造成缺氧的非转染心肌细胞(下文称非转染组),c-fos mRNA和蛋白显著表达,3 h达到高峰,与正常对照组比较,TnT和β-Tubulin表达显著下降,7 h降至低水平;转染c-fos反义基因重组体(下文称转染组)后,c-fos mRNA和蛋白表达显著下降,TnT和β-Tubulin表达却显著回升.结论缺氧复合烧伤血清处理产生的c-fos会引起心肌细胞损伤,c-fos反义基因重组体转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞具有保护作用.
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烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究
目的探讨40%Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义.方法采用40%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型,蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定HIF-1α蛋白水平表达,免疫组化法定位显示HIF-1α表达.结果烫伤后大鼠心肌组织内HIF-1α蛋白表达量明显升高.左、右心室HIF-1α蛋白表达不同,HIF-1α蛋白表达增加主要定位于细胞核.结论严重烧伤可以诱导心肌组织HIF-1α蛋白表达增加.左心室对照组HIF-1蛋白含量明显高于右心室.HIF-1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内,诱导下游因子表达.
