HCV核心区增强和抑制性多肽对小鼠CTL相互作用研究

目的建立细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,CTL)检测体系,探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染者体内CTL功能缺陷的原因.方法选择HCV核心区多肽中对CTL有抑制作用和增强作用的多肽各2条,交叉组合后共同皮下注射免疫BALB/c小鼠,用乳酸脱氢酶释放实验检测小鼠脾细胞CTL活性.结果用DH检测HCV核心区多肽免疫BALB/c小鼠的CTL活性,CTL活性可被CPA10(5～23位氨基酸)增强及被CPA9(39～74位氨基酸)抑制.CPB2+CPB8、CPB6+CPB8组中效靶比10:1,20:1的CTL活性显著高于对照组,CPB2+CPB7、CPB6+CPB7组与对照组无明显差异,双因素方差分析显示HCV核心区抑制性多肽和增强性多肽有交互作用.结论 DH可稳定检测BALB/c小鼠的CTL活性,HCV核心区抑制性和增强性多肽有相互作用.

人胰岛素原基因突变体的构建

目的完成人胰岛素原基因的定点突变,使之能在普通细胞中被Furin蛋白酶识别去除C肽分泌成熟胰岛素.方法采用PCR体外定点突变技术(PCR site-directed mutagenesis,PCR-SDM),设计4对引物,引入5个Furin识别的突变位点,通过重叠延伸法PCR扩增,使人胰岛素原编码基因B10密码子由CAC突变为GAC;C3密码子由GAA突变为AAA;C4密码子由GCT突变为CGT;C32密码子由CTT突变为CGT,将扩增片段克隆入T载体并测序.结果 DNA测序结果表明在预期位点突变符合要求.结论应用PCR诱导突变技术,在体外能准确、简便有效的诱导胰岛素原基因突变,使体外应用非内分泌细胞构建高效分泌成熟胰岛素的细胞克隆成为可能.

长江流域某市饮用水雌激素污染物初步研究

目的了解饮用水雌激素污染物污染状况.方法应用气相色谱/质谱(GC/MS)分析技术、人乳腺癌(MCF/7)细胞增殖试验和子宫湿重实验,对某市饮用水雌激素污染物进行检测.结果 GC/MS分析表明,水源水中有机污染物100余种,出厂水中80余种;其中作为可疑雌激素物质的邻苯二甲酸二(2-甲基丙基)酯、邻苯二甲酸二丁酯检出率分别为100%和90%.此外,还检出2,4-二甲基酚等酚类物质.嘉陵江水源污染重于长江,出厂水均为丰水期污染重于枯水期,而以C厂和E厂出厂水水质较好.生物学评价结果显示,水源水、出厂水有机提取物均刺激MCF/7细胞增殖和大鼠子宫生长,而且这种作用可被tamoxifen抑制.丰水期水源水水质比枯水期水源水水质好;丰水期水质是长江优于嘉陵江,枯水期水质则是嘉陵江优于长江.丰水期水源水经水厂处理后,对MCF/7细胞增殖的刺激作用均增加,而枯水期则相反.枯水期A厂和B厂的出厂水水质是较好的.结论某市饮用水中存在雌激素污染物,但尚不构成对人体的危害.

低氧大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液尾加压素Ⅱ的变化

目的观察慢性低氧性肺动脉高压实验大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液(BALF)中尾加压素Ⅱ(urotensin,UⅡ)的动态变化,探讨低氧对UⅡ合成分泌的影响及UⅡ与肺动脉压力(mPAP)、动脉血氧分压(PaO2)的相互关系.方法将雄性Wistar大鼠完全随机分段分为对照组和低氧10、20、30d组,制备常压慢性低氧性肺动脉高压模型,右心导管法测量mPAP和右心室收缩上升大速率(RVdp/dtmax),常规测PaO2;采用放射免疫分析方法检测血浆和BALF中UⅡ含量.结果 低氧组实验大鼠mPAP和RVdp/dtmax明显高于对照组(P＜0.01),PaO2明显低于对照组(P＜0.05);血浆及BALF中UⅡ含量明显高于对照组(P＜0.05),20d时达高峰(P＜0.01),30d时呈下降趋势,但仍高于对照组;血浆UⅡ含量与mPAP呈正相关(r=0.614,P＜0.01),与PaO2呈负相关(r=-0.620,P＜0.01);BALF UⅡ含量明显高于血浆UⅡ含量(P＜0.01),二者存在较好的相关性(r=0.820,P＜0.01).结论低氧可刺激大鼠UⅡ合成和分泌增多,UⅡ可能不仅是局部激素,也可能是全身激素,在低氧性肺动脉高压形成过程中发挥病理生理作用.

创面局部应用CTLA4Ig重组腺病毒延长异体皮移植存活期的临床应用

目的观察创面局部应用CTLA4Ig重组腺病毒延长异体皮存活期的临床效果.方法 12例大面积烧伤切痂创面应用CTLA4Ig重组腺病毒自体微粒皮和异体皮移植.临床观察异体皮存活时间、微粒皮封闭创面情况、用EP-Ⅰ型水蒸仪测定创面水分蒸发量及组织学观察.结果创面应用CTLA4Ig重组腺病毒能显著延长异体皮移植物的成活期[对照组(16.9±3.7)d,实验组(25.6±5.5)d],淋巴细胞浸润较少,自体微粒皮移植创面愈合率明显增高;实验部位水分蒸发量保持较低水平,而对照部位于术后9 d逐渐升高.结论局部应用CTLA4Ig-重组腺病毒是一种有效延长烧伤创面异基因移植皮肤存活期的方法.

大豆异黄酮对 UUO大鼠TGF-β1的抑制作用

目的探讨大豆异黄酮对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠梗阻肾脏肾间质纤维化的防治作用及机制.方法观察大鼠结扎侧肾脏的病理改变,应用HE和PAS染色观测肾间质容量,应用RT-PCR法检测肾组织内TGF-β1 mRNA的表达.结果异黄酮组梗阻肾肾间质容量明显低于对照组;异黄酮组TGF-β1 mRNA表达明显低于对照组,统计学分析差异显著(P＜0.05),异黄酮组肾间质纤维化程度轻于对照组.结论大豆异黄酮对UUO大鼠梗阻肾肾间质纤维化有一定的抑制作用,其机制与大豆异黄酮可抑制TGF-β1 mRNA的表达有关.

大鼠星形胶质细胞体外分泌雌激素的检测

目的测定大鼠星形胶质细胞(astrocyte,AST)培养液中雌激素的浓度.方法取新生2 d大鼠大脑皮层进行AST原代及传代培养,分别于传代培养的第0、7、14、21天进行细胞计数,同时ELISA方法测定培养液中雌二醇(E2)浓度.结果细胞数量分别为1×104/ml、1.1×106/ml、1.4×l06/ml、1.5×106/ml;培养液中雌激素(E2)浓度分别为(pg/ml):0、(117.03±21.32)、(266.91±22.03)、(252.62±27.99).第0天(换液当天)培养液中未检测出雌激素,随着培养时间的延长雌激素浓度迅速增加,14 d左右达到高峰,以后逐渐降低,但21d时培养液中雌激素仍然保持较高的浓度.结论体外培养新生大鼠大脑皮层AST可以分泌雌激素.

Canstatin基因表达载体的构建及其生物学效应研究

目的构建可表达人血管生成抑制素(canstatin)蛋白的真核表达载体,探索canstatin对人脐静脉内皮细胞系(HUVEC)和人肺腺癌A549细胞株的生物学效应.方法 RT-PCR法从胎儿肝组织中获取canstatin cDNA全长,并将其克隆到真核蛋白表达载体pCMV-Script上.阳离子脂质体介导该重组载体转染HUVE细胞系、A549细胞株.RT-PCR法检测其对canstatin mRNA的表达.台盼蓝拒染法活细胞记数,3H-TdR掺入法检测细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期.结果成功构建pCMV-Script-Cans真核表达重组载体,并在转染该表达载体的A549及HUV-EC-C细胞株中均检测到canstatin mRNA的表达.HUV-EC-C细胞株pCMV-Script-Cans载体转染组比空载体组3H-TdR掺入量明显减低(P＜0.01),细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),A549细胞株转染组与空载体组3H-TdR掺入量无显著差异(P＞0.05),细胞凋亡率无显著差别(P＞0.05).结论 pCMV-Script-Cans重组载体能在转染的哺乳动物细胞中表达canstatin,并抑制内皮细胞增殖,诱导内皮细胞凋亡,但对肿瘤细胞没有直接抑制作用.

转化生长因子β1诱导人肾小管上皮细胞表达结缔组织生长因子

目的研究转化生长因子β1(transforming growthfactorβ1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞(human proximaltubular epi-thelial cells,HTECs)表达结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)的影响.方法体外培养的HTEC被根据随机数字表分为3组:对照组(C组):无血清培养基(free serum medium,FSM)培养;TGFβ1a和TGFβ1b组(Ta组和Tb组):分别用含不同浓度TGFβ1(Ta组:20ng/ml,Tb组:40ng/ml)的FSM培养,96h后,分别用RT-PCR和免疫组化方法检测HTEC表达CTGFm-RNA和蛋白.结果①C组:CTGFmRNA和蛋白表达为阴性;②Tb组和Ta组:CTGFmRNA和蛋白表达皆呈阳性.Tb组和Ta组相比,CTGF的mRNA和蛋白表达量皆显著增加(P＜0.01).结论 TGFβ1能呈剂量依赖性地诱导HTEC合成CTGF.

生长激素在梗阻性黄疸大鼠围手术期应用的意义

目的探讨生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)在梗阻性黄疸(obstructivejaundice,OJ)大鼠胆流复通术前、术后应用对手术耐受性、安全性以及术后恢复的意义.方法将146只Wistar大鼠分为假手术组(SHAM)、胆总管结扎组(CBDL)、胆流复通组(REF),CBDL-GH组和REF-GH组.测定各时相点血清肝功能指标、前白蛋白(PA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及尿样DBIL的水平.结果 REF-GH组大鼠术后7d病死率明显低于REF组(P＜0.05);给予rhGH的大鼠各项指标明显优于未用rhGH者(P＜0.05).结论围手术期应用rhGH能明显改善OJ大鼠胆流复通术前的肝功能,降低TNF-α水平,增强手术耐受性,提高手术安全性,并能促进术后的恢复.

糖尿病大鼠小肠Cajal间质细胞超微结构的改变

目的明确糖尿病大鼠小肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)超微结构的变化,探讨糖尿病小肠运动功能改变原因.方法用链尿佐菌素建立大鼠糖尿病模型,3个月后测定小肠传输速度,对小肠组织进行透射电镜观察.结果糖尿病大鼠小肠传输速度明显延迟,Cajal质细胞与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散;细胞器变性、减少;胞质广泛溶解;核周间隙增宽.结论糖尿病Cajal间质细胞变性可能是导致小肠运动功能低下的一个重要原因.

FATP4在大鼠非酒精性脂肪肝中的作用

目的研究脂肪酸转运蛋白(fatty acid transport protein4,FATP4)基因在大鼠非酒精性脂肪肝形成中的作用.方法建立高脂饮食脂肪肝模型,用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse translation polymerase chain reaction,RT-PCR)与蛋白质印迹(Western blot)方法测定脂肪肝肝组织中FATP4表达变化.结果高脂饮食脂肪肝大鼠肝脏中FATP4于2周时其mRNA及蛋白表达增强,于12周时表达为明显,与正常组比较相差显著(P＜0.05).结论高脂饮食引起FATP4表达增强,初是一种适应性反应,随着FATP4表达进一步增强,导致脂肪酸代谢失衡,可能引起脂肪肝的发生.

胶体金标记/银染信号放大法在寡核苷酸芯片检测人HCM突变中的应用

目的验证胶体金标记/银染信号放大法在寡核苷酸芯片检测人肥厚型心肌病(HCM)基因突变中对单碱基错配的灵敏性和特异性.方法不对称PCR扩增、生物素标记待检测的人β-肌凝蛋白重链基因片断,与构建的低密度HCM寡核苷酸芯片杂交,胶体金标记/银染放大法检测7种HCM恶性突变位点,观察胶体金标记/银染信号放大法对单碱基错配形式的判别率.结果胶体金标记/银染信号放大法在寡核苷酸芯片中的单硝基突变的平均判别率为16.2,可以鉴别所有的单碱基错配和三碱基缺失.结论胶体金标记/银染信号放大法代替荧光标记法用于寡核苷酸芯片靶标分子的标记和结果检测,可以区分所有的单碱基错配形式,实现了芯片杂交结果的普通光学显微镜检测,提高了DNA芯片的实用性.

K562细胞影响BMSCs生长及MIP-1α表达的实验研究

目的研究K562细胞在与正常骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)接触和隔离培养条件下对BMSCs生长特性及造血负调因子MIP-1α表达的影响.方法加入K562细胞与BMSCs直接接触与用隔离膜两种方式培养,第2、4、7、12天观察BMSCs生长增殖情况;检测培养上清的MIP-1α含量和BMSCs中MIP-1αmRNA的表达;TUNEL法检测BMSCs的凋亡.结果加入K562细胞培养后BMSCs在第12天时数量显著减少;接触培养BMSCs的凋亡在第4天后显著高于对照组(P＜0.01);MIP-1α水平升高到4 d与对照组有显著差异(P＜0.01);BMSCs胞浆MIP-1αmRNA阳性率升高到第4天后与对照组有显著差异(P＜0.01).结论 K562细胞可抑制正常BMSCs生长,促进其凋亡,上调其MIP-1α的表达,可能是造成正常造血的抑制和白血病细胞导致造血微环境损伤的主要原因之一.

米非司酮终止"早早孕"40例的效果分析

米非司酮联合米索前列醇用于终止早孕,是较好的药物流产方法,但这一配伍方案使用的前提,是B超能够确定宫腔内孕囊.如何有效的处理B超能够确定宫腔内孕囊或者异位妊娠包块之前的更早期的妊娠,是值得临床探讨的课题.我们对这部分患者,采用米非司酮进行催经止孕,收到了较好的效果.

高原现场家兔肝细胞体外培养气相条件初探

动物细胞体外培养在医学、生物学等研究领域中已成为一种基本实验技术.高原由于低大气压等特定物理条件,体外细胞培养可能有其特殊性.本研究拟通过家兔肝细胞的体外原代培养,初步探索在高原现场进行体外细胞培养的培养方式及气相条件.

有症状的心肌桥患者临床及影像学特点

冠状动脉及其分支通常行走在心外膜组织的表面,当冠状动脉的某个节段行走于心肌中时,此现象称为心肌肌桥.冠脉造影报道心肌桥的检出率为0.5%～2.5%[1],心肌桥引起心肌缺血的机制及临床意义目前尚无定论.本研究对16例心肌桥患者的临床表现及影像学特点进行分析,旨在探讨心肌桥的临床意义.

肺癌肾上腺转移的螺旋CT诊断价值

肺癌有无远处转移对临床治疗方法的选择,尤其是能否手术、手术方法的选择及其预后判断起决定性的作用.肾上腺是肺癌肺外常见的转移部位.笔者搜集28例肺癌肾上腺转移的临床及螺旋CT的相关资料,对其规律及特征进行分析总结.

OK镜矫治近视153例296眼疗效观察

角膜塑形术(ortho-keratology)是用角膜接触镜将角膜重新塑形,增大曲率半径、减少角膜屈折力,从而降低近视屈光度、提高远视力的方法,简称OK镜.1999年8月至2001年3月我院引进美国CONTEXT公司的OK镜片对153例近视患者进行了近视治疗,并对其进行了跟踪观察,报告如下.

22例腰椎间盘突出症术后早期并发症分析

1临床资料1994年5月至2004年3月,我院共行950例腰椎间盘突出症手术治疗,其中男性401例,女性549例,年龄21～65岁,平均48岁,其中腰4、5椎间盘突出症462例,腰5骶1椎间盘突出症425例,腰4、5腰5骶1均突出者63例,男女比例无显著差异,多发于40岁以上.在入院治疗的950例病人中,术后未能正常出院及出院3个月内再次入院治疗的患者共22例,其中术后腰痛.腿痛不缓解或加剧者共12例,术后双下肢出现感觉障碍、肌力下降、腹股沟平面以下不全瘫共3例,术后出现切口部包块和脑膜刺激征1例,术后切口窦道形成2例,术后大小便障碍、会阴麻木4例.

冠状动脉内支架植入对P波离散度的影响

1998年Dilaveris等首次提出了P波离散度(Pd)的概念,认为Pd反映心房非均质性电活动的离散程度,认为该指标能预测房性心律失常及房颤[1.2].本研究旨在探讨冠状动脉内支架植入对Pd的影响.

拉米夫定疗程中慢性乙型肝炎患者血清IL-12水平和Th平衡变化及其意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前后血清IL-12水平和辅助性T细胞(Th)平衡变化及其临床意义.方法根据患者对拉米夫定治疗的应答情况分组进行回顾性研究,利用双抗体夹心ELISA法检测治疗前后不同时相点血清IL-12、γ干扰素(IFNγ)、IL-4水平,以与正常对照校对后的IFNγ/IL-4作为Th平衡指标,取健康献血员作对照.结果治疗前血清IL-12水平低于健康对照,Th平衡表现为Th2优势应答;治疗后HBeAg阳性完全应答组在治疗的第3个月有明显的血清IL-12水平高峰,Th平衡得以恢复并保持Th1优势应答,HBeAg阳性部分应答组和HBeAg阴性组Th平衡仍以Th2为优势应答.结论拉米夫定治疗应答和血清IL-12水平及Th平衡的恢复程度有关,治疗后慢性乙型肝炎患者抗HBV免疫有所恢复,血清IL-12水平可作为早期预测拉米夫定疗效的免疫学指标,治疗后Th平衡的恢复是完全应答实现的保证.

代谢综合征肾脏损害及其相关因素的研究

目的研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)患者肾脏损害的特征及其相关因素.方法 334例患者分为高血压组(EH)、糖尿病组(DM)和MS组,比较3组患者的肾功能指标及相关因素.结果 MS组尿微量蛋白(microalbumin-uria,MA)高于EH组和DM组,内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)低于EH组和DM组(P＜0.05);相关分析表明,MS组中MA与年龄、收缩压(SBP)、脉压(PP)、高血压病程、糖尿病病程、尿酸有不同程度的正相关,Ccr与年龄、收缩压、脉压、高血压病程、糖尿病病程、血糖有不同程度的负相关(P＜0.05).EH组MA和Ccr与上述因素无显著相关,而DM组仅血糖水平与MA显著相关.结论多种心血管危险因素聚集对MS患者肾功能损害有显著的影响.

心房颤动对风湿性心脏病心房肌细胞Cx40、Cx43表达的影响

目的研究风湿性心脏病(风心病)伴与不伴心房颤动(房颤)患者左、右心房肌细胞Cx40、Cx43的表达,探讨房颤与Cx40、Cx43之间的关系.方法 31例换瓣病人分为3组:①实验Ⅰ组(11例)为阵发性房颤或房颤持续时间≤6个月;②实验Ⅱ组(12例)为房颤持续时间均＞6个月;③对照组(8例)为窦性心律.手术中分别切取左、右心耳处心房肌组织.用免疫印迹法和免疫组化技术检测左、右心房肌Cx40、Cx43的表达与分布.结果①每例患者左、右心房肌以及每组中左、右心房肌Cx40、Cx43表达量均值无显著性差异.②实验Ⅰ组与对照组比较,Cx40表达量明显降低(P＜0.05),而实验Ⅱ组与对照组比较其降低更加明显(P＜0.01).③Cx43的表达量在3组间均无显著差异;④实验组Cx40阳性染色较对照组明显减少,且分布紊乱(除细胞头尾部外,细胞侧面染色增多).⑤3组间Cx43阳性染色的分布无明显差别.结论 ①左、右心房肌Cx40、Cx43的表达与分布均无显著差异.②有房颤者心房肌Cx40表达量下调及分布不均可能与房颤的发生与维持有关.

社区获得性下呼吸道重症感染病原菌及耐药性分析

目的了解社区获得性下呼吸道重症感染病原菌的主要种类分布及耐药情况.方法收集我院呼吸重症监护室2002年6月至2003年6月的80例社区获得性下呼吸道重症感染患者的65株病原菌及其药敏实验结果,进行分析.结果 65株细菌中革兰阳性球菌36株(55.4%),革兰阴性杆菌24株(36.9%),真菌5株(7.7%).革兰阳性球菌主要为肺炎链球菌(13.9%,),表皮葡萄球菌(12.3%),金黄色葡萄球菌(12.3%),粪肠球菌(7.7%),其中青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP)占11.0%,甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)占11.0%.革兰阴性杆菌主要为铜绿假单孢菌(12.3%),大肠埃希菌(7.7%),鲍曼氏不动杆菌(7.7%),非发酵菌检出率高达20%,以铜绿假单孢菌为主,发现嗜麦芽窄食单孢菌4株(6.2%),对多数常见抗生素耐药.真菌感染中白色念珠菌4例,烟曲菌1例.结论本研究收集的社区获得性下呼吸道重症感染65株致病菌以革兰阳性球菌为主,其次为革兰阴性杆菌,亦有少量的真菌感染.多数病原菌具有多重耐药性,回顾性分析细菌耐药性对临床经验性用药具有重要参考价值.

胃癌前病变组织和胃癌中hTERT的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨胃癌前病变组织及胃癌中人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)的表达状况及其与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的关系.方法应用免疫组织化学技术检测45例慢性胃炎和19例胃癌中hTERT蛋白的表达,用快速尿素酶法和Warthin-Starry银染色法检测Hp.结果 hTERT蛋白的表达率在胃癌组织(78.95%)中显著高于异型增生(64.29%,P＜0.05)、肠化生(46.67%,P＜0.05)和萎缩性胃炎组织(25.00%,P＜0.05),在异型增生组织(64.29%)中显著高于肠化生(46.67%,P＜0.05)和萎缩性胃炎组织(25.00%,P＜0.05),在肠化生组织(46.67%)中显著高于萎缩性胃炎组织(25.00%,P＜0.05).Hp阳性患者中hTERT蛋白的表达率为77.42%,Hp阴性患者中hTERT蛋白的表达率为33.33%,二者之间差异非常显著(P＜0.01).结论在胃癌和胃癌前病变阶段,端粒酶(telomer-ase)均可能发挥重要作用,促进了胃癌的发生、发展.Hp可能是胃粘膜上皮细胞端粒酶激活的主要机制之一.

卡介苗多糖核酸对肺结核患者肺泡巨噬细胞功能的调节

目的探讨肺结核患者肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)分泌IL-10、IL-12水平的变化及卡介苗多糖核酸(bacillus calmette guerin-polysaccharide nucleic acid,BCG-PSN)对AM吞噬功能及其分泌细胞因子能力的干预作用.方法 从43名肺结核患者和20名健康者的支气管肺泡灌洗液(bronchoalvedarlavagefluid,BALF)中获取AM,用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定经脂多糖刺激AM培养上清液中IL-10、IL-12的水平.肺结核患者AM培养液中加入BCG-PSN,观察其对AM吞噬功能及分泌IL-10、IL-12能力的影响.结果肺结核患者AM分泌IL-10水平显著高于正常人,而IL-12则无升高优势.BCG-PSN能增强肺结核患者AM的吞噬功能,同时提高其分泌IL-12的能力,降低IL-10的分泌水平.结论 BCG-PSN能增强肺结核患者AM的吞噬功能,同时提高细胞免疫功能.是一种对AM活性有显著效果的免疫调节剂,对于肺结核的辅助治疗有良好的应用前景.

烟雾和弹性蛋白酶诱导大鼠肺气肿模型的实验研究

阻塞性肺气肿是一种常见的、以气流受限为特征的呼吸道疾病[1],其发病机制和动物模型仍在探讨中.本研究旨在观察烟雾和弹性蛋白酶在肺气肿形成过程中的作用及相互影响,为相关的实验研究复制出较理想的阻塞性肺气肿动物模型.

兔肾体外灌注的形态学变化及损伤机制

由于目前待移植肾脏采取单纯冷藏法保存[1],其较短的保存时限以及低温状态使得目前在实验研究中非常有效的以基因治疗为主减轻移植器官排斥反应和诱导受者免疫耐受状态的方法不能在临床实施.本实验即对待移植肾脏进行常温下体外灌注,观察不同灌注液对肾脏的形态学影响并探讨其损伤机制,为进一步的常温下待移植肾脏的免疫修饰条件研究提供实验依据.

抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿关节炎中的意义

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种致畸性自身免疫性疾病,在发病2年内即可出现不可逆的骨关节破坏,全世界有5%的人群患有此疾病,女性患者是男性患者的近两倍.近年来认为早期诊断并给予缓解病情药(DMARDS)能及时控制病情,减少骨关节破坏并改善预后[1].

脑静脉窦血栓形成的临床研究

近10年来,由于新的影像诊断技术不断发展及普及,对脑静脉血栓形成(cerebral venous thrombosis,CVT)的认识也有很大提高.现将我院1980-2000年收治的25例CVT患者,结合有关文献共76例报告如下[1].

全膀胱切除及尿流改道术43例临床分析

临床上膀胱癌行全膀胱切除后的尿流改道手术方式很多[1],主要可分为3类:①正位排尿的新膀胱术(代膀胱术),如正位回肠新膀胱术;②不可控性尿流改道,如输尿管腹壁造口、Bricker膀胱术;③可控性尿流改道,如可控性回盲肠膀胱术.1991-2002年我们对本院43例患者分别施行了输尿管腹壁造口、Bricker膀胱术、可控性回盲肠膀胱术、正位回肠新膀胱术.现报告如下.

听神经瘤手术入路探讨

本研究总结我院从1994年1月至2002年3月31例听神经瘤手术经验,在争取全切除基础上,对减少及减轻术后并发症、颅神经损伤,尤其是面神经损伤进行探讨,现报告如下.

几种培养方法对ES/GFP小鼠胚胎干细胞系增殖和分化能力作用比较

目的观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响.方法分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培养基和Buffalo条件培养基培养ES/GFP细胞系.N2无血清培养基诱导ES/GFP小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞,Nestin免疫组化染色.结果小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层,常规LIF培养液和Buffalo条件培养基均能较好维持ES/GFP细胞的高增殖能力和全能分化能力,对绿色荧光蛋白的表达和胚体形成、神经前体细胞的分化无明显差异.结论人胚胎成纤维细胞可替代小鼠胚胎成纤维细胞作为ES/GFP饲养层,减少饲养层制备的工作量和污染的机会.Buffalo条件培养基可完全替代LIF培养基,降低细胞培养的成本.

Vesica悬吊术治疗女性压力性尿失禁的疗效

目的总结Vesica经皮膀胱颈悬吊治疗女性压力性尿失禁的临床经验.方法 10例女性压力性尿失禁患者,应用Vesica经皮膀胱颈悬吊技术,通过特制器械将阴道前壁做Z形悬吊,固定于耻骨.结果 10例患者术后尿道平均延长1.41cm,尿垫实验阴性.平均随访11.2个月,10例患者均无尿失禁及排尿困难.结论该术式操作简单,临床效果满意,创伤小,恢复快,悬吊稳定可靠.

邻苯二甲酸酯类化合物的毒理学效应及对人群健康的危害

邻苯二甲酸酯(phthalate acid esters,PAEs)是世界上生产量大,应用面广的人工合成的有机化合物之一,是一类全球性的环境污染物,广泛存在于空气、水体、土壤及生物体内.该类化合物与我们的日常生活密切相关,可通过饮水、进食、皮肤接触(化妆品)和呼吸进入人体,对人群健康产生不同程度的危害作用.现针对PAEs的毒理学效应及其对人群健康的危害作一综述.

硫芥诱导小鼠染色体畸变和微核形成作用的研究

目的研究硫芥对中国仓鼠肺成纤维细胞(chinese hamsterfibroblast cell line,CHL)染色体的诱变作用及对小鼠骨髓微核率的影响.方法培养CHL细胞(±S9),以不同浓度硫芥处理24h后常规方法制备染色体,观察畸变类型并计算畸变率.KM小白鼠皮下注射硫芥染毒,24h后处死动物,取双侧股骨,行骨髓涂片和姬姆萨染色,计数含微核嗜多染红细胞(polychromatic erythrocyte,PCE)数.结果硫芥处理的CHL细胞染色体畸变率显著增加,出现裂隙、断裂、缺失、多倍体等多种类型畸变,并呈量效依赖趋势.S9不影响硫芥诱导的CHL细胞染色体畸变形式和畸变率.与对照组比较,注射硫芥小鼠骨髓PCE微核率显著增加(P＜0.01),硫芥剂量越大,微核形成率越高.结论硫芥能直接诱发细胞染色体损伤.

缺氧对Egr-1启动子辐射诱导活性的影响及机制的初步探讨

目的探明缺氧对早期生长反应基因-1(early growth response gene-1,Egr-1)启动子辐射诱导活性的影响及机制.方法利用基因重组构建Egr-1启动子调控的荧光素酶报告质粒,脂质体介导转染肺癌A549细胞,在0.1%、0.5%、1%、2.5%、5%等氧浓度下给转染细胞以2、4、6、8、10 Gyγ-线照射,观察照射后荧光素酶表达水平及过氧化氢产量变化;观察过氧化氢浓度对Egr-1启动子转录活性的影响.结果成功构建了Egr-1启动子报告载体,转染A549细胞,发现当氧浓度＜2.5%时,Egr-1启动子活性明显低于常氧对照组(P＜0.01),并随氧浓度的下降而降低.照射后的过氧化氢产量呈现类似的变化特征,结果还表明Egr-1启动子的活性与过氧化氢浓度密切相关.结论缺氧(O2＜2.5%)导致Egr-1启动子辐射诱导活性下降,可能与氧自由基产量减少有关.

创伤愈合过程中伤口组织内SP、NO和NOS表达变化及其可能作用

目的探讨创伤愈合过程中周围神经末梢分泌的P-物质(SP)与一氧化氮(NO)及一氧化氮合成酶(NOS)在创伤愈合过程中的作用及其相互间可能的关系.方法采用鼠背部皮肤全层切割伤模型,动物分为实验组和人工去感觉神经(对照)组,其中实验组分别于伤后1、3、6、9、12d切取伤口组织,应用免疫组化测定SP的表达并测定伤口组织中NO及NOS含量.对照组则利用大剂量辣椒素皮下注射人工毁损感觉神经以阻止SP的分泌后以同样的方法进行实验.结果 实验组伤口愈合情况明显好于对照组.实验组伤后第1天时,SP表达在伤缘皮肤毛囊及皮脂腺细胞.伤后第3天时肉芽组织中SP有明显的表达,以后逐渐降低;伤口组织中NO及NOS含量于伤后第1天从较低水平逐渐升高,至第6天时达高,然后明显降低.对照组伤口组织中SP、NO/NOS含量于伤后始终处于较低的水平.结论创伤愈合中,SP及NO/NOS在创伤愈合过程中能促进伤口的愈合,且SP可能部分地通过刺激NO/NOS的活性而产生作用.

血压计量单位恢复mmHg表示法

关于数字的用法

作者书写数字须知