心脏间隔及周围结构的薄层断面解剖学研究

目的探讨心脏间隔的薄层断面解剖结构,为临床影像学及外科手术提供一定的参考.方法经肉眼观察无器质性病变的正常成人心脏标本16例,血管灌注,经5%的甲醛固定,明胶包埋后低温冰冻1周,再于低温实验室中用数控铣床铣切,并逐层定焦数码照相.结果共获取层厚0.2 mm的图片1608张,从心尖到心底,心脏中隔及其周围相关结构显示清晰,结缔组织及肌组织分界明显,并在Photoshop 6.0下测得心尖、卵圆窝、室间隔肌部、左、右心室及左、右纤维三角等的径线值.结论图像清晰,显示结构细小,并可对一定结构进行测量,能为临床影像学和外科手术提供一定的参考.

入肝血流阻断对肝硬变大鼠肝脏能量代谢的影响

目的探讨选择性入肝血流阻断对肝硬变大鼠肝脏能量代谢的影响.方法观察门静脉转流与非门静脉转流条件下阻断入肝血流不同时程后肝脏能量代谢的变化,检测指标包括肝细胞线粒体呼吸控制率(repiratory controa ratio, RCR)、肝组织三磷酸腺苷(adenosine tirphosphate, ATP)含量、动脉血酮体比值(arterial blood ketone body ratio, AKBR),并与假手术组对照.结果缺血后肝组织ATP、 RCR及AKBR均明显下降(P<0.05).再灌注后上述指标逐惭恢复,但随缺血时间延长,升高幅度明显降低,甚至难以恢复.结论选择性入肝血流阻断对肝硬变大鼠肝脏能量代谢的改变与恢复过程有积极作用.

甘草酸18α体调节梗阻性肾病大鼠肾间质中CTGF和TGF-β1表达的实验研究

目的探讨甘草酸18α体对梗阻性肾病大鼠肾间质中CTGF和TGF-β1蛋白表达的影响.方法 100只Wistar大鼠数字表法随机分成实验组(甘草酸预防组、甘草酸治疗组、生理盐水组)和对照组(假手术组).实验组大鼠结扎单侧输尿管建立梗阻性肾病模型.分别于术后7、14、28和56 d处死实验动物,切取肾皮质部位组织,用光镜、电镜观察肾间质的病理形态学变化;用免疫组织化学染色检测肾间质中CTGF、TGF-β1蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达,并用EIG综合图象分析系统对其表达进行半定量分析.结果模型显示肾间质呈进行性纤维化.半定量分析发现,手术后7 d,甘草酸治疗组和预防组与假手术组相比较,肾间质中CTGF、TGF-β1和Ⅲ型胶原蛋白表达呈进行性显著增多(P<0.01),与生理盐水组相比较呈进行性显著减少(P<0.01),但甘草酸治疗组和预防组之间无明显差异(P>0.05).相关分析发现,肾间质中CTGF的表达量与TGF-β1和Ⅲ型胶原的表达呈显著性正相关(r=0.63和0.6 g, P<0.01).结论甘草酸可能通过下调梗阻性肾病大鼠肾间质CTGF和TGF-β1的表达,抑制肾间质纤维化的发生.

肺减容术对肺气肿兔膈肌生物力学的影响

目的探讨肺减容术对肺气肿兔膈肌生物力学特性的影响.方法新西兰大白兔40只,10只为正常对照组,30只熏香烟加气管内滴入弹性蛋白酶方法制备肺气肿模型,10只行双肺减容术(肺减容组),10只仅做正中切口开胸(假手术组),10只为肺气肿未做手术(肺气肿未手术组).饲养16周全部活杀取膈肌条测定其抗拉强度、屈服强度、断裂伸长率等生物力学特性.结果与正常对照组相比,肺气肿未手术组和假手术组膈肌条的抗拉强度,屈服强度,断裂伸长率较正常对照组显著降低(P＜0.05),而肺减容组较对照组无显著差异(P＞0.05),较肺气肿未手术组和假手术组显著升高(P＜0.05).结论肺减容术是治疗慢性阻塞性肺气肿的有效方法,它除可能通过恢复肺的弹性回缩外还能通过恢复肺气肿膈肌生物力学特性而改善肺功能.

反义annexinⅡ对人肺腺癌细胞系SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的分析annexinⅡ基因反义表达载体对裸鼠移植瘤生长的影响.方法在裸鼠皮下分别接种SPC-A-1(亲代组)和SPC-A-1-annexinⅡ(反义组)细胞,测定成瘤时间、肿瘤体积及重量,显微镜下观察肿瘤细胞及其对周围组织的影响.结果成瘤时间反义组明显晚于亲代组.反义组接种后形成的肿瘤体积、重量均显著低于亲代组,且无一例出现局部侵犯,而亲代组则有2例侵犯周围组织.结论 annexinⅡ基因在促进肿瘤细胞生长及对周围组织的侵袭方面具有重要作用.

油酸/脂多糖致伤老年大鼠多器官功能障碍综合征脏器损害规律及TNF-α作用的研究

目的观察油酸/脂多糖致老年大鼠多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome in the elderly rats, MODSE)脏器损伤的规律,探讨肺损伤在这一过程中的作用,以及TNF-α在MODSE发生、发展中的作用.方法 80只SD大鼠(20月龄和3月龄各40只)分为老年组及青年组,予油酸(OA,0.25 ml/kg)和脂多糖(LPS,3.5 mg/kg)分次静脉注射(间隔4 h),建立二次打击MODSE和青年MODS(MODSY)模型.观察对照组及伤后2、6、24 h,重要器官(肺、心、肝、肾)病理及功能的变化,同时检测血清及肺、心、肝和肾组织中TNF-α含量.结果相同剂量的OA+LPS均能导致青年及老年鼠发生MODS.OA+LPS致伤后2 h,老年组和青年组PaO2即显著降低[分别为(67.5±8.66)、(59.3±7.41) mmHg,P<0.01],提示肺脏损害出现早、程度重.伤后6 h,心、肝、肾生化指标达峰值(P<0.05),且老年组脏器损害较同时相点的青年组明显为重(P<0.05).伤后2 h,血清及肺、心、肝和肾组织中TNF-α含量即达峰值,且持续高于正常对照组(P<0.05),其中以肺脏中TNF-α升高幅度大.老年组TNF-α含量均显著高于同时相点的青年组(P<0.05).结论油酸+脂多糖所致老年鼠多器官功能障碍重于青年鼠,其中以肺损伤出现早、程度重.致伤早期肺组织TNF-α含量的迅速升高在MODSE的发病机制中可能起重要作用.

信号肽重组hβD2在A549细胞中表达纯化及抗菌活性测定

目的通过构建在A549细胞中高表达人防卫素hβD2的表达体系,获得人源化hβD2.方法构建pLNCX2-CEA信号肽-hβD2成熟肽逆转录病毒表达载体,经逆转录包装细胞PT67包装后获得含融合基因的侵袭性病毒,该病毒感染宿主细胞A549后将融合基因整合入宿主基因组中,收集培养基上清,分离纯化获得目的蛋白hβD2,测定目的蛋白的抗菌活性.结果收集转染有融合基因的A549细胞培养基上清,经Western Blot和质谱仪分析,纯化后的目的蛋白为hβD2,具有较强的抗菌活性.结论将CEA信号肽重组hβD2基因转染A549细胞后,细胞具有表达分泌型hβD2的功能.

膀胱癌T-24细胞系中细胞角蛋白20的分离纯化及鉴定

目的分离纯化细胞角蛋白20(Cytokeratin20, CK20)并加以鉴定,为进一步研制抗CK20单克隆抗体奠定基础.方法培养人膀胱肿瘤T-24细胞系并用免疫组化检测CK20表达,然后大量培养并收集细胞,超声波细胞粉碎后,先用萃取、高速离心、透析等方式进行蛋白初分离,然后利用以DE52为介质的阴离子交换层析分离纯化CK20蛋白,以电泳示踪,后采用SDS-PAGE、HLPC和Western-blotting加以鉴定.结果在阴离子交换层析时出现3组洗脱峰,CK20主要存在第二组峰中,该峰在SDS-PAGE和Western-blotting上均呈现单一条带,HLPC分析显示CK20蛋白主峰呈正态分布,仅见一个较低峰度的蛋白质杂峰.结论该纯化方法简便、可行、效果好、获得的蛋白纯度高,提取的蛋白可确认为CK20 并且具有较高的免疫生物活性.

内毒素预处理对大鼠全脑缺血后海马内生性IL-1Rα的影响

目的探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血/再灌注后海马内生性白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Rα)的影响及意义.方法采用大鼠全脑/缺血再灌注模型,动态观察内毒素预处理后海马组织IL-1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化.结果内毒素预处理后脑组织内生性IL-1Rα表达及含量显著增加,海马CA1区神经元计数下降幅度减少.结论内毒素预处理对全脑缺血/再灌注后神经元的损伤有明显保护作用;其机制可能与诱导了中枢神经系统内生性抗损伤蛋白IL-1Rα的合成有关.

酪氨酸激酶相关蛋白-2(180-188)表位的修饰和初步鉴定

目的修饰人黑色素瘤分化抗原酪氨酸激酶相关蛋白-2的HLA-A2.1限制性的优势表位(180-188)(SVYDFFVWL),提高其与HLA-A2.1分子的结合能力.方法采用MHC主要和次要锚着位的优势氨基酸替换天然表位的相应位点,用多项式方案、量化基序法和QSAR法初步扫描并筛选出与HLA-A2.1亲和力可能较高的多肽,进一步在体外鉴定多肽与HLA-A2.1分子的结合亲和力和结合稳定性.结果与天然肽相比,SML多肽与HLA-A2.1分子的亲和力和结合稳定性较天然表位显著提高.结论 SML多肽可能是TRP-2(180-188)天然表位的激动剂.

人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞的分离培养与体外血管生成特性

目的建立人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞(glioma-derived microvascular endothelial cells, GDMEC)体外培养体系并观察其体外毛细血管样结构形成特性.方法采用胰酶、胶原酶联合消化法分离人脑恶性胶质瘤微血管片段,利用结合CD105抗体的MACS MicroBeads免疫磁珠内皮细胞分选系统纯化GDMEC;应用光镜、透射电镜和免疫细胞化学等技术对所获得的GDMEC进行鉴定;采用三维培养模型,观察GDMEC受血管内皮生长因子(VEGF)诱导下的小管样结构(TLS)形成的特性.结果所获GDMEC呈FⅧ-RAg阳性,细胞纯度可达98%;电镜下见Weibel-Palade小体;生长状态良好、可传代培养.这些细胞对VEGF刺激具有良好的反应性,体外易于形成TLS.结论本研究摸索并建立了人脑GDMEC的分离培养方法,所获GDMEC对肿瘤血管生成研究具有重要价值.

Survivin反义核酸真核表达载体的构建及在胶质瘤细胞中的表达

目的构建survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SVVas,并检测其在恶性胶质瘤细胞SHG-44中的表达.方法构建survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SVVas,并用脂质体介导转染入SHG-44细胞,通过RT-PCR及western blot检测细胞中survivin mRNA和蛋白的表达.结果构建了survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SVVas,并成功导入SHG-44细胞中,且有效表达,使SHG-44细胞中survivin mRNA和蛋白表达水平均降低.结论 Survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP -SVVas可以降低SHG-44细胞survivin基因的表达.

细菌16S rDNA基因T碱基特异的PCR产物片段化

目的探讨细菌16S rDNA检测芯片杂交前的样本处理优化方法.方法设计针对细菌16S rDNA基因全长的通用引物,通过PCR时掺入一定比例的dUTP替代dTTP,扩增长度为1.5 kb的片段,用尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)消化处理掺入到双链上的dUTP后,再经浓氨水特异性断开DNA双链上原dUTP处的磷酸二酯键,然后用聚丙烯酰胺凝受胶电泳(PAGE)和琼脂糖电泳确认片段化的效果.结果本实验选用的基因当dUTP与dTTP的比例在3∶7～1∶1时,都能够获得比较理想的片段化结果.结论通过控制一定的dUTP掺入比例再经UDG及氨水处理能够得到稳定的片段化结果.

鼠骨髓间充质干细胞在缺氧缺血性脑病新生鼠脑内的分布及分化

目的探讨鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在缺氧缺血性脑病新生鼠脑内的分布及分化.方法采用全骨髓贴壁筛选法分离培养鼠骨髓间充质干细胞,移植前加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)连续标记72 h.采用Rice法制备新生鼠缺氧缺血性脑病模型,24 h后经前囟旁缓慢注射4×106个MSCs入缺氧缺血性脑性脑病新生鼠右侧脑内,4周后进行免疫组化检测MSCs的分布并鉴定神经元巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 Rice法可制备新生鼠单侧脑损伤为主的缺氧缺血性脑病模型,MSCs移植入脑后主要分布在患侧大脑,呈弥散性分布于皮层、海马等部位,细胞计数左侧为(2 781±254),右侧为(4 708±281),双侧比较t=18.70, P<0.001,并神经性分化,左、右侧Nestin分化率为(1.56±0.47)%, (71±0.42)1% (t=1.741,P>0.05);NSE为(3.79±0.95)%,(5.69±1.48)% (t=3.404, P<0.05);GFAP为(2.06±0.89)%,(2.47±1.75)% (t=0.855, P>0.05).结论 MSCs颅内直接移植后主要分布在患侧大脑,MSCs 移植后28 d可分化为神经干细胞、成熟神经元和星型胶质细胞.

放射性碘标记人工合成RGD肽拮抗物的设计与分子特性的计算机分析与模拟研究

目的设计一种可用于放射性碘标记的含RGD基序的粘附分子αvβ3的肽拮抗物.方法采用氨基酸替代的方法,构建所需的含有RGD结构和可被放射性碘标记的多肽分子,应用生物信息学和计算机模拟的方法,对该多肽分子的结构和性能进行分析,并由此预测该分子的生物学性能.结果所设计可用于放射性碘标记的分子与已知的αvβ3的肽拮抗物在结构和生物学性能方面具有相似性.结论该分子符合放射性标记的要求,可能与已有的αvβ3的肽拮抗物具有相似的生物学性能.

活性氧在急性尿潴留大鼠膀胱功能损害中的作用研究

目的探讨活性氧在急性尿潴留大鼠膀胱功能损害中的作用.方法健康雌性Wistar大鼠分为5组(n=5):正常对照组(C组);其余4组为实验组,并以2倍于正常膀胱容量生理盐水过度充盈2 h,分别于排空后0 h (E0组)、排空后1 h (E1组),排空后2 h(E2组)行充盈性膀胱测压和膀胱组织ATP酶活力与丙二醛(MDA)含量测定;治疗组在膀胱排空前10 min心内注射过氧化物歧化酶(SOD)500U(SOD组, n=5),余处理同E2组.结果膀胱过度充盈后其顺应性降低,不稳定收缩增多(P<0.01).ATP酶活力在排空后1 h显著降低,而MDA在排空后1 h上升至高水平.膀胱排空前注射SOD,MDA含量较E2组显著降低,膀胱功能显著改善(P<0.01).结论活性氧在急性尿潴留对大鼠膀胱功能损害中起着重要作用,抗氧化剂可以保护活性氧对膀胱功能的损害作用.

肾后段下基底部加肾窦内肾盂联合切开治疗复杂性肾结石28例

随着ESWL的普及,腔镜微创手术在泌尿外科的深入开展,开放性手术治疗泌尿系统结石日趋减少,但临床上有一部分复杂性结石仍需开放手术治疗.我院从1998-2004年4月采用肾后段下基底部加肾窦内肾盂联合切开治疗28例效果较好,现报告如下.

急性颈髓损伤顽固性低钠血症的观察

颈髓损伤患者急性期常出现低钠血症,并与颈髓损伤程度有关[1],其机制尚不十分清楚.现就1999年10月至2003年8月收治的21例颈髓损伤病例进行研究,通过观察其水钠代谢及血浆心钠素的变化,讨论其发生机制.

晚孕穿透性胎盘植入致子宫破裂1例

患者,32岁,因"间断性右侧腰部疼痛1年,加重1 d,伴尿频尿急,停经29+1周."诊断以"右输尿管结石"入住本院泌尿外科.患者入院前无外伤史,无阴道流血流液,未诉阵发性下腹痛.无尿痛及肉眼血尿.

异位妊娠中整体治疗的研究

异位妊娠是妇科常见病. 随着生活方式的转变和现代诊断技术的提高,我院就治的异位妊娠患者也逐年增多.异位妊娠的治疗包括手术、药物、及期待疗法.这些治疗方法各有特点,而患者对不同治疗方法会有不同的认知.因此如何选择治疗方式,达到对每一位患者的身心同治,是临床迫切需要解决的问题.对异位妊娠患者,我们采取了与患者共同选择治疗方案的医患共同参与的整体治疗,收到了较好的效果.

重症有机磷中毒进行血液灌流的临床观察

自2000年以来我院开展血液灌流疗法共治疗重度有机磷中毒32例,与同期常规治疗重度有机磷中毒32例进行对比性观察,疗效显著.

9例血液系统并发甲状腺自身免疫性疾病临床分析

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP)、自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia, AIHA)是血液系统常见的自身免疫性疾病,毒性弥漫性甲状腺肿(grave disease, GD)和桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis, HT)是甲状腺的自身免疫性疾病,并发两个系统的自身免疫疾病在临床工作中少见,我们在临床遇到9例患者,现结合文献分析如下.

下颌升枝巨大囊肿1例报告

患者,男,30岁,因左下牙痛伴左面部肿痛3月余入院.近3月来感左下后牙反复疼痛伴左面部肿胀,曾在当地医院依照冠周炎"抗炎"治疗有效,未作影像学检查.我院门诊就诊时口腔全景X光片检查发现,左侧下颌升枝囊性改变,范围包括整个升枝区域,向上至髁状突颈部,向下至D8,D8牙冠包含在升枝囊性病变内,囊腔内未见明显分隔样改变.以"左侧下颌升枝成釉细胞瘤伴感染"收入院.

高血压脑出血颅内血肿微创清除术后再出血的观察与护理

我院于1998年5月至2004年4月共行高血压脑出血颅内血肿微创清除术69例,并发再出血11例,再出血发生率为15.9%.现将临床观察及护理体会报告如下.

应力性尿道压力测定在女性真性压力性尿失禁诊断中的应用

目的探讨应力性尿道压力测定(stress urinary pressure profile, SUPP)在女性真性压力性尿失禁(genuine stress urinary incontinence, GSI)诊断中的应用价值.方法对18例临床诊断为GSI的患者进行应力性漏尿点压测定(stress leak point pressure, SLPP)、静态尿道压力测定(rest urinary pressure profile, RUPP)及SUPP测定,比较其结果,以15例正常女性作为对照.结果患者压力传导率(pressure transmission ratio, PTR) 及尿道关闭压(urethral close pressure, UCP)以多次咳嗽的平均值计算,GSI组PTR及UCP各为(0.63±0.24)与((26.58±21.43) cmH2O,而正常组PTR及UCP各为(1.78±0.12)与(83.42±37.23) cmH2O.两组间上述指标的差异均有显著性意义(P<0.01).结论 SUPP在GSI的诊断中均具有一定意义,尤其是对于症状较轻的尿失禁患者的诊断,临床应用时与SLPP结合使用,可以提高诊断水平.

慢性盆腔疼痛综合征对精液质量的影响

目的探讨慢性盆腔疼痛综合症对精液质量的影响.方法分析25例慢性盆腔疼痛综合症患者及25例年龄匹配的正常男性的精液常规及分析资料,将这些资料进行对比,观察他们之间的区别.同时,分析慢性盆腔疼痛综合症患者精液参数与症状持续时间的关系.结果慢性盆腔疼痛综合症组和正常对照组之间在射精量、精子活力及果糖浓度之间差别显著;其他参数差别不显著.慢性盆腔疼痛综合症组有2例无精子,对照组没有发现无精子患者.前列腺痛持续时间与精液参数无关.结论慢性盆腔疼痛综合症患者精子活力及果糖浓度较对照组显著下降,此结论支持慢性盆腔综合症是器质性病变,而不是心理性病因所致.

吡那地尔预处理对过氧化氢损伤心肌细胞保护作用的研究

目的观察不同浓度的H2O2对心肌细胞的损伤作用,以及吡那地尔对H2O2损伤的保护作用.方法胰酶消化法分离和培养KM乳鼠心肌细胞,按照1×105/ml的密度接种于96孔培养板.分为正常对照组,H2O2 组,观察400、600、800 μmol/L H2O2对心肌细胞处理1、3、6、12、24 h后MTT比色A值影响;用400 μmol/L H2O2处理心肌细胞后MTT A值的改变,以及1×10-4、1×10-5、1×10-6 mol/L吡那地尔对心肌细胞保护作用的观察.结果 H2O2对心肌细胞的损伤作用,随H2O2浓度的增加和作用的时间的延长而加重.以1×10-5、1×10-6 mol/L吡那地尔预处理可以提高经H2O2处理心肌细胞的MTT A值,其中以1×10-6mol/L的浓度佳.结论心肌细胞对H2O2引起的损伤呈明显的剂量及时间依赖关系.小剂量的吡那地尔(1×10-6mol/L)预处理可明显减轻H2O2对心肌细胞的损伤.表明吡那地尔预处理对心肌的过氧化损伤有保护作用.

革兰阴性杆菌耐药与产AmpC酶的检测及其与耐药的关系分析

目的了解274株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析.方法采用microscan walkaway-4.0 鉴定274株革兰阴性杆菌的药敏情况,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶.结果 32株细菌产AmpC酶(占11.7%),其中阴沟肠杆菌13株(占30.2%)、产气肠杆菌2株(占22.2%)、不动杆菌6株(占21.4%).274株菌对IPM 、AK 、CIP 、FEP、CN、SXT、CAZ、ATM、CRO、PIP 的药物敏感率从高到低依次为: 89.4%、78.8%、 69.3%、 55.5%、45.9%、39.1%、 36.9%、31.4%、30.3%、18.2%.结论革兰阴性杆菌的耐药状况严重,检测AmpC酶有助于临床抗菌药物的选用.

先天性食管闭锁伴气管食管瘘围术期的呼吸管理

目的探讨先天性食管闭锁伴气管食管瘘围术期的呼吸管理,以减少肺部并发症发生,提高治愈率.方法回顾性分析8例先天性食管闭锁伴气管食管瘘病儿术前、麻醉术中、术后的呼吸管理过程.结果 6例采取了慢诱导气管内插管保留自主呼吸,气管食管瘘管钳闭后完全控制呼吸管理,术后胸片显示,无明显肺不张及肺炎加重.2例快诱导病例出现胃胀气,气道阻力逐渐增加,术后胸片显示肺炎加重并出现肺不张.8例均无麻醉死亡.7例治愈出院,1例因核黄疸放弃治疗.结论早诊断、禁食、置胃管、积极有效吸引是减少吸入性肺炎的关键;术中麻醉采用慢诱导气管内插管保留自主呼吸与气管食管瘘管钳闭后完全控制呼吸相结合的呼吸管理能有效减少术后肺部并发症.

CT定位与模拟定位经皮肺活检的比较

我院1995年11月至2004年5月为诊断周围性肺病变模拟定位、CT定位经皮肺活检的临床价值进行回顾性分析,对诊断肺周围性局造性病变进行比较性研究报告如下.

连二亚硫酸钠在建立培养细胞的无氧环境中的应用

目的无氧环境是我们在用细胞进行研究的过程中经常会需要的.利用连二亚硫酸钠清除氧的能力,我们希望得到简便适用的方法制造培养细胞的无氧气、液相环境.方法 2 mmol的连二亚硫酸钠可完全清除溶液里的氧气,我们用血气分析的方法检测连二亚硫酸钠溶液的性质,以及装有连二亚硫酸钠溶液的密闭容器内的气体成分的变化.结果 2 mmol的连二亚硫酸钠溶液可保持无氧状态1 h左右,溶液的pH值并无变化.含2 mmol的连二亚硫酸钠的溶液可消耗密闭容器内的氧气,使容器内的氧含量接近与零.结论连二亚硫酸钠可帮助我们得到简便使用的方法制造培养细胞的无氧气、液相环境.

Tbx3基因功能研究及其在肿瘤演进中的作用

Tbx3(T-box 3)基因是T-box(Tbx)基因家族的成员之一,该家族属发育调控相关转录因子基因家族,表达产物作为真核生物的转录调控因子,有20多个成员,其共同特征是编码具有高度保守的N末端DNA结合区(T区)的转录因子,广泛存在于多细胞生物,具有重要的发育调控功能,在脊椎和非脊椎动物胚胎的形态和组织发生中发挥着重要作用.Tbx3基因的异常表达将导致尺骨-乳腺综合症(ulnar-marmary syndrome, UMS),后者是一种严重的家族性显性遗传性疾病.近年来的研究已经证实,Tbx2基因在乳腺癌有变异表达,而Tbx3基因也和Tbx2一样主要参与的p19ARF-p53途径等信号传导,由此推测Tbx3的变异可能与肿瘤的发生也密切相关.

骨髓基质细胞移植治疗缺血性心脏病

缺血性心脏疾病是对所有由于心肌供血供氧障碍而产生的心脏病症的总称,包括冠状动脉粥样硬化性心脏病,以及其它心脏疾病引发的心肌缺血.这些疾病共同特点是由于各种原因引起心肌血供发生障碍或心肌需氧增加超过了冠脉供血能力,从而使心肌发生缺血甚至坏死,严重损害心脏功能.尽管现有的内外科治疗手段可以改善冠脉血供,挽救缺血心肌,但对已坏死或无功能的心肌尚无办法.骨髓中存在一群具有多向分化潜力的干细胞,被称为骨髓间充质干细胞,目前,大量扩增人骨髓间充质干细胞而不丧失其多向分化能力的技术已逐渐完善,这些干细胞在修复因心肌缺血而破坏或丧失的心肌细胞方面有广阔的应用前景.应用干细胞移植入心脏,诱导分化为有功能的心肌组织替代坏死及无功能的心肌,已成为目前心肌细胞成形术研究的新方向.

内皮细胞特异性RTK受体与血管生成

血管生成(angiogenesis)是指在原有的毛细血管和/或微静脉基础上通过血管内皮细胞的迁移和增殖,从已存在的血管处以芽生或非芽生(套迭)的形式生成新的、以毛细血管为主的血管系统的过程,在成人,它至少包括6个连续的步骤:已存在的周细胞的分离;内皮细胞分泌的蛋白酶降解细胞外基质;内皮细胞迁移;增殖;形成管腔;周细胞粘附、血管的稳定.在此过程中涉及多种分子的作用,目前研究得较多的有两类内皮细胞表面特异性、具有受体酪氨酸激酶活性(receptor tyrosine kinase,RTK)的受体:Tie-2受体和VEGF受体.

M乙酰胆碱受体在缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤中的作用研究

目的探讨毒蕈碱样乙酰胆碱受体(M受体)在缺氧复合梭曼中毒脑损伤中的作用.方法实验大鼠随机分为正常对照组、梭曼中毒组、缺氧组和缺氧复合梭曼中毒组.利用受体放射性配基结合法、Western blot、放射免疫和酶放射化学分析分别检测皮层、海马和纹状体M受体密度和亲和力、Giα蛋白含量、cAMP浓度及PKA活性.结果与平原中毒组相比,缺氧复合梭曼中毒组皮层和纹状体Bmax增加,海马和纹状体Kd值降低;复合致伤组皮层、海马和纹状体Giα蛋白含量分别比单纯梭曼中毒组降低了15.48%、8.56%和28.20%;各脑区cAMP浓度及PKA活性显著升高,分别较梭曼中毒组升高了79.51%、84.75%、52.92%和78.93%、44.32%、39.05%;M受体阻断剂阿托品可部分阻断梭曼中毒和/或缺氧所致的PKA活性的升高.结论复合致伤引起的M受体上调,cAMP-PKA信号系统的异常增强,在缺氧复合梭曼中毒脑损伤中可能是缺氧复合梭曼中毒毒性效应增强的重要原因之一.

广州2002年登革病毒流行株的分离鉴定及进化分析

目的从2002年广州采集的可疑登革病人血清中分离登革病毒, 明确流行株的血清型及基因型,并鉴定该分离株的毒力.方法采集疑似登革热患者血清20份,应用C6/36细胞体外培养的方法进行病毒分离,并合成登革病毒通用引物,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 后,将PCR扩增产物克隆到T载体进行序列测定和比对.确定血清型后,进一步扩增在病毒进化上有代表意义的病毒血清型特异性E/NS1连接区基因片段,测序后用邻位相连(N-J)法构建登革病毒进化树,分析此次登革病毒流行株的来源.通过乳鼠脑内接种及空斑实验,测定分离株的毒力.结果上述20份血清标本中,5份标本出现明显的细胞病变,主要表现为细胞融合,形成大小不一的空泡和网状结构.RT-PCR扩增、序列测定证实为登革病毒Ⅰ型.E/NS1连接区基因序列片段分析表明,2002年广州分离株(DEN-1/GZ2002)的核苷酸序列与基因型Ⅳ型的DEN-1/T14株(澳大利亚,1981)同源性高,达98%.N-J法构建进化树显示:11株DEN-1病毒分成3个基因群,分别与Rico-Hesse 1990分型中的Ⅰ, Ⅳ和Ⅴ型以及Ana P. Goncalvez 2002年分型中的亚洲型,南太平洋型和美洲/非洲型相符,本室分离的DEN-1/GZ2002株属于Ⅳ型或者称南太平洋型.DEN-1/GZ2002株脑内接种乳鼠11 d左右导致乳鼠弓背,后肢麻痹、瘫痪,直至死亡.感染Vero细胞8 d后可见小而不透明的空斑,病毒滴度可达106 pfu/ml,TCID50为 4.37 log pfu/0.2 ml.结论 2002年广州登革热流行为登革病毒Ⅰ型感染所致,病毒基因型为Ⅳ型,本实验虽然未明确毒力相关基因,动物实验及细胞感染实验证实该分离株的毒力较弱.

全身照射大鼠骨髓提取液对真皮多能干细胞趋化作用的实验研究

目的观察5Gy γ射线全身照射后大鼠骨髓提取液对真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells, dMSCs)的趋化作用,并定量分析尾静脉输注的dMSCs在大鼠体内的分布.方法在Transwell培养体系中,观察骨髓提取液对dMSCs的趋化作用. 3H-TdR标记dMSCs,经尾静脉输注到大鼠体内后,液闪法测量各组织内dMSCs的含量.结果 Transwell培养体系中,照射组骨髓提取液组从上层迁移到下层的细胞明显多于不照射的正常对照组和生理盐水组(P<0.01).照射后1周始,照射组骨髓dMSCs含量明显高于正常对照组(P<0.01);伤后3周和4周,照射组单位重量骨髓dMSCs含量也明显高于同组的肺脏、肝脏等组织.结论全身照射大鼠骨髓提取液对dMSCs有很强的趋化作用,从而促进静脉输注的dMSCs偏向分布于损伤的骨髓.

作者书写数字须知

参考文献中英文作者名的著录方法

关于修回稿件附软盘的说明

关于医学符号的使用