兔心肌梗死后心室肌细胞钙电流变化及比索洛尔的影响

目的本研究观察心肌梗死(myocardial infarction,MI)后3周,兔心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的改变及比索洛尔的影响.方法采用Langendoff灌流法获得单个心室肌细胞,利用膜片钳技术全细胞记录模式,记录心室肌细胞L型钙电流(ICa-L).结果本实验记录了3组心室肌细胞的ICa-L的电流的变化.MI组ICa-L电流峰值显著高于伪手术组(Sham组)(2.19±0.84)nA vs(1.57±0.56)nA,(P＜0.05),比索洛尔组(β-B组)(1.78±0.53)nA与Sham组间无显著差异.但经膜电容标化后,ICa-L电流密度3组间无显著差异[MI组(12.60±3.74)pA/pF、β-B组(12.57±2.69)pMpF、Sham组(12.49±4.21)pA/pF],Ⅰ～Ⅴ曲线呈典型"铃型"曲线.结论比索洛尔可减轻MI非梗塞区心室肌细胞ICa-L的变化.

角膜酸烧伤后新生血管形成与上皮缺损和白细胞渗出关系的初步研究

目的研究大鼠角膜酸烧伤后新生血管形成与角膜上皮缺损和白细胞渗出的关系.方法建立轻、中、重度大鼠角膜酸烧伤新生血管模型,裂隙灯下动态观察角膜上皮缺损直径及新生血管形成情况,计算新生血管的面积与角膜面积的比例;各组分别于烧伤后不同时间点取眼球行HE染色,光镜下计算角膜白细胞浸润的数量.采用Pearson相关分析法分析新生血管形成与上皮缺损和白细胞浸润的关系.结果角膜不同程度酸烧伤后上皮愈合速度不同,损害程度越重上皮愈合越慢.烧伤后可引起白细胞渗出,烧伤程度越重白细胞渗出越明显,有显著的差异(P＜0.01).轻度酸烧伤角膜未见新生血管形成,中重度酸烧伤在伤后第3天可观察到新生血管形成.不同程度酸烧伤新生血管形成有显著的差异(P＜0.01).酸烧伤后新生血管形成与上皮缺损(r=0.330 0,P＜0.01)及白细胞渗出(r=0.177 9,P＜0.05)有显著的相关性.结论大鼠角膜酸烧伤后CNV的发生与烧伤程度与角膜上皮缺损和白细胞渗出有密切关系.

小鼠小肠Cajal间质细胞的分布与c-kit mRNA表达初步研究

目的观察Cajal间质细胞在BALB/c小鼠小肠中的分布及c-kit mRNA表达的研究.方法选取成年BALB/c小鼠,采用免疫组化法鉴定Cajal间质细胞,采用RT-PCR及mRNA提取法检测c-kit mRNA的表达情况.结果Cajal间质细胞主要分布在小肠环肌层纵肌层间以及浆膜下区,小肠肌条中c-kit mRNA表达量很低,需经过mRNA提取后方能检测出.结论明确了Cajal间质细胞在BALB/c小鼠小肠中的分布,探讨了c-kit mRNA表达情况并进一步提出了研究c-kitmRNA表达的方法,为更深入研究Cajal间质细胞奠定了基础.

甘遂配伍甘草对大鼠肝脏CYP2E1表达及活性的影响

目的通过检测细胞色素氧化酶CYP2E1的表达和活性变化,从分子水平探讨中药配伍禁忌"十八反"理论中甘遂配伍甘草的药理机制.方法利用RT-PCR检测大鼠肝脏CYP2E1 mRNA水平;通过Western blot检测大鼠肝脏CYP2E1蛋白表达;采用高效液相色谱(HPLC)法测定CYP2E1酶活性.结果甘遂组、甘草组和甘遂甘草配伍组均明显诱导大鼠肝脏CYP2E1的表达与活性上升,并发现甘草组和甘遂甘草配伍组对CYP2E1活性的诱导作用显著高于甘遂组.结论甘遂可能通过诱导肝脏CYP2E1的表达与活性上升,促使其所含的前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物,导致对机体的毒性作用;甘遂甘草配伍使用时,甘草对CYP2E1活性的诱导能力更强,故而甘草可促进甘遂所含前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物的过程,并导致对机体毒性作用的增强,从而表现出"十八反"中药物配伍禁忌的特征.

腺苷受体激动剂预处理对保存大鼠心脏的影响及其与NF-κB的关系

目的探讨腺苷Al受体激动剂预处理延迟效应对低温St.Thomas液保存大鼠心脏的影响及其与心肌核转录因子-κB(nuclearfactor kb,NF-κB)的关系.方法Wistar大鼠随机分6组:A、C、D组以高选择性A1受体激动剂CCPA(2-chloro-N6-cyclopen-tyladenosine)预处理,其中D组在预处理前15 min注射NF-κB抑制剂(pyrrolidindiethyldithiocarbamate,PDTC);B、E组仅注射生理盐水;F组注射PDTC后再注射生理盐水.24h后A、B组4℃St.Thomas液保存4 h,复灌1 h,而另4组低温缺血3 h,复灌1 h.观测心功能、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、三磷酸腺苷(ATP)等.结果A组左室内压上升与下降大速率恢复率(±dp/dtmax)为(62.83±17.27)%、(66.81±18.99)%,心肌ATP含量(3.67±1.42)×10-3μmol/g;而B组±dp/dtmax分别为(40.41±18.29)%、(44.70±25.14)%,ATP含量(1.46±0.54)×10-3μmol/g;A组明显高于B组,差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05).C组±dp/dtmax恢复率、ATP都明显高于D、E、F组(P＜0.01,P＜0.05),而D、E、F组间无明显差异.结论以腺苷A1受体激动剂能诱导预处理的延迟效应,改善低温St.Thomas液保存离体大鼠心脏的保存效果,而该效应的信号传递与心肌核转录因子-κb的活化有关.

重组生长激素对兔血脂及肝脏LDL受体mRNA的影响

目的研究重组生长激素(recombinant growth hormone,rGH)对高胆固醇饮食的新西兰兔的血脂调节作用及rGH对肝脏低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)受体mRNA表达的影响.初步探讨rGH影响血脂的机制.方法①健康新西兰白兔,均为雄性,兔龄4个月,体质量(2.2±0.3)kg,随机分组观察高胆固醇饮食的条件下,rGH对血脂的影响.②RT-PCR技术测定兔肝低密度脂蛋白受体(low density lipoprorein receptor,LDL-R)mRNA的表达情况.结果①rGH组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)低于对照组(P＜0.01)但对甘油三酯(TG)无明显影响.②rGH组LDL-RmRNA的表达高于对照组(P＜0.01).结论rGH能够有效的降低高胆固醇饮食条件下的TC、LDL-C,2.rGH降血脂的作用,可能与rGH促进LDL-R mRNA表达上调有关.

低氧对大鼠小肠上皮细胞辐射损伤修复的影响

目的探讨低氧对辐射损伤修复的影响及其可能机制.方法以大鼠空肠上皮细胞(IEC-6细胞株)为研究对象,分正常对照组、单纯照射组和照后低氧组;60Co-γ射线12Gy一次性照射,低氧为5%氧处理6 h.MTT法检测细胞存活率;3H-TdR掺入法检测细胞增殖;UDS和SCGE实验测定DNA损伤和修复情况;流式细胞仪检测细胞周期.结果与单纯照射组比,照后低氧组细胞修复加快、增殖明显、存活率提高约10%(P＜0.01);G1、G2期阻滞延长(P＜0.01).结论适当低氧能够促进细胞修复,提高存活率,其机制可能与细胞周期阻滞延长有关.

肝再生增强因子重组质粒对肝纤维化大鼠的实验治疗作用

目的研究肝再生增强因子真核表达质粒对免疫性肝纤维化大鼠的治疗作用并探讨其分子机制.方法制作猪血清诱导的免疫性肝纤维化大鼠模型,将成模大鼠随机分成模型组、秋水仙碱治疗组(Col)、ALR治疗1组(ALR1)、ALR治疗2组(ALR2),分别给予生理盐水、秋水仙碱、pcDNA3-ALR重组质粒治疗.用药4周后处死大鼠,留取血标本和组织标本,免疫组织化学测定Ⅰ、Ⅲ型胶原、TIMP-1和ALR在肝组织的表达,RT-PCR测定TIMP-1 mRNA的表达.结果两个ALR治疗组的肝纤维化分级明显改善.免疫组化结果显示,Ⅰ、Ⅲ型胶原和TIMP-1在肝组织的表达在两个ALR治疗组明显低于模型组,而ALR的表达要明显强于模型组.TIMP-1 mRNA在两个ALR治疗组肝组织中的表达明显低于模型组.结论ALR重组质粒对免疫性肝纤维化大鼠有改善作用,并可能通过抑制TIMP-1活性表达而促进肝细胞外基质降解.

RCS大鼠病变发育过程中视网膜神经节细胞形态学变化的研究

目的研究皇家外科学院大鼠(royal college of surgeon rat,RCS)病变发育过程中视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)形态学变化.方法取RCS大鼠、RCS-rdy+大鼠3、5、7、9、11周龄视网膜,固定后行视网膜平铺片,甲酚紫染色,使用LEICA DM TRET显微镜及自带的LEICA Q WIN系统软件,观察视网膜神经节细胞层细胞数量总数及RGCs亚群数量上的变化.结果RCS大鼠病变发育过程中,其节细胞层中细胞横径≥12μm的细胞在数量上,7、9、11周龄段相较与3周龄段出现显著减少(P＜0.01).相同周龄段上的视网膜节细胞层中,RCS大鼠与RCS-rdy+大鼠在横径≥12μm的细胞数量上相互比较,可见RCS大鼠从5周龄段开始相较于RCS-rdy+大鼠出现显著减少(P＜0.05),7、9、11周龄段相较与RCS-rdy+大鼠减少更为显著(P＜0.01).但是节细胞层细胞总数及横径≥9 μm的细胞数量上,RCS大鼠自身发育前后对照以及与RCS-rdy+大鼠相比较没有显著差异.结论RCS大鼠视网膜色素变性过程中,随着光感受器细胞的变性和缺失,虽然视网膜节细胞层细胞在整体数量上没有明显变化,但是RCS大鼠视网膜病变发育早期,其节细胞层中胞体横径≥12μm的RGCs在数量上开始出现明显缺失.

PTTG ESP1在A549 SPC-A-1细胞株S G2/M期的表达

目的探讨PTTG(pituitary tumortransforming gene)、ESP1(estradiol-stimulated protein 1)在A549、SPC-A-1细胞S、G/M期的表达.方法用双胸苷同步化法同步化A549、SPC-A-1细胞及MRC-5细胞,分别收集S、G2/M期总RNA,做Realtime PCR.结果PTTG在A549细胞和SPC-A-1细胞的S期表达比G2/M期表达高,在MRC-5细胞的在S、G2/M期中P1TG均无表达;ESP1在A549细胞与SPC-A-1细胞及MRC-5细胞的S期表达均比G2/M期表达低.结论PTTG在MRC-5的S、G2/M期都无表达,在A549、SPC-A-1的S期比G2/M期表达增高,提示肿瘤细胞的染色体非整倍体与PTTG的表达增高有关;ESP1在MRC-5和A549、SPC-A-1的S期比G2/M期表达低,说明细胞中姐妹染色体的分离主要依靠于ESP1在G2/M期被激活,而导致姐妹染色体的分离.

带J链的α-防御素-1的基因重组和表达载体的构建

目的将α-防御素-1(HNP-1)改建为一种杀菌分子J链α-防御素-1(J-HNP-1),这种杀菌分子具有与细胞膜上具备的多聚IgA受体(PIgR)相结合而进入粘膜上皮细胞的能力,发挥其杀菌作用.即克隆人J chain-HNP-1嵌合基因DNA,并构建真核表达载体.方法将从pCH质粒中获取的J链片段,采用人工连接方法与HNP-1片断相连接,并将其构建于新型哺乳动物细胞质粒表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-HisC中,进行序列测定.结果经过重组得到的J链防御素-1的目的片断为786bp,序列分析与GenBank中报道的编码J链及HNP-1成熟肽的序列完全一致.结论J chain-HNP-1嵌合基因DNA的克隆和哺乳动物细胞表达载体的构建,为进一步进行抗菌肽的研究及制备奠定了基础.

LC-MS和HPLC法测定人血浆中格列本脲和二甲双胍方法的建立

目的建立人血浆中盐酸二甲双胍的高效液相色谱和格列本脲的液相色谱-质谱测定方法.方法二甲双胍血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白进样.分析柱:EC 250/4.6 NUCLEOSIL 100-5(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03 mol/L(NH4)H2P04:乙腈(75:25,pH 7.0),流速1.0 ml/min;检测波长240 nm.格列本脲血浆中加入格列吡嗪为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC-MS测定.色谱柱为ORBAX SB300C18柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈:0.1%乙酸铵(55:45),流速为0.2 ml/min;ESI选择性正离子检测.结果格列本脲浓度为2～200 ng/ml线性关系良好(r=0.999 8),盐酸二甲双胍浓度为6.25～4 000 ng/ml线性关系良好(r=0.999 9).二甲双胍和格列本脲方法的日内和日间RSD＜5%.结论所建立的人血浆中格列本脲的HPLC-MS测定方法和二甲双胍的HPLC测定方法灵敏、准确、简便,可用于格列本脲、二甲双胍的人体药代动力学研究.

MMP-2/PCNA在模拟介入治疗后的兔VX2肝癌中的表达及意义

目的研究MMP-2/PCNA在兔VX2肝癌中表达的意义以及模拟介入治疗对其表达的影响.方法建立兔VX2肝癌的动物模型,将实验动物分为介入组和对照组,比较两组的肝功能变化、肿瘤生长率,用原位杂交和免疫组化法研究各组的MMP-2/PCNA表达情况.结果介入组在1、2、3、4周的门冬氨酸转氨酶(AST:IU/L)分别为(13±2)、(96±25)、(68±13)、(48±10),而同时间段对照组分别为(16±3)、(103±23)、(131±34)、(146±36);介入组在1、2、3、4周的丙氨酸转氨酶(ALT:IU/L)分别为(36±5)、(130±31)、(78±18)、(64±13),而同时间段对照组分别为(33±5)、(145±26)、(160±32)、(186±42).对照组的AST和ALT分别高于同一时间段介入组.各组肿瘤随着时间延长体积均增大,介入组和对照组在术后1、2、3周的肿瘤生长率分别为(102±88)%、(238±96)%、(285±94)%、(164±88)%、(568±120)%、(886±455)%.其中介入组在术后2、3周的肿瘤生长率明显低于同期对照组,差异有显著性(P＜0.05).介入组MMP-2 mRNA及蛋白表达的阳性率分别为66.7%、54.2%,较对照组(41.7%,33.3%)明显减少(P＜0.05),转移组MMP-2 mRNA及蛋白表达的阳性率分别为68.9%、51.7%,较无转移组(31.6%,26.3%)明显增加(P＜0.05),PCNA的表达趋势与MMP-2一致.结论介入治疗能改善肝功能、延缓肿瘤生长、减少转移.MMP-2/PCNA的增高预示着肿瘤的高转移和增殖潜能.

胃癌细胞中端粒位置效应研究

目的研究插入端粒片段的荧光素酶报道质粒在胃癌细胞的转染及它对相邻荧光素酶报道基因表达的影响,探讨胃癌细胞中端粒位置效应的存在.方法将pTET-OFF调节质粒和携带荧光素酶报道基因的pTRE2-Hyg-Luciferase反应质粒共转染胃癌细胞SGC7901,经强力霉素(deoxycyline)诱导24h后检测报道基因活性,观察强力霉素诱导的抑制反应.然后将插入有端粒片段的荧光素酶报道质粒pBX质粒和对照质粒pBX-nfl(no teloemere fragment)分别与pTET-OFF调节质粒共转染细胞,在强力霉素诱导下,检测报道基因活性的改变.结果共转染pTET-OFF和pTRE-Hyg-Luciferase质粒的SGC7901细胞,在强力霉素作用下荧光素酶报道基因的活性逐渐降低.强力霉素诱导分别共转染有pTET-OFF和pBX质粒或pTET-OFF和pBX-nfl的细胞时,前者荧光素酶活性较后者降低4倍.结论转染TET-OFF基因表达调控系统的胃癌细胞SGC7901受强力霉素的诱导抑制;转染入胃癌细胞中的端粒片段降低了存在它附近荧光素酶报道基因的表达水平.

28℃条件下短期培养新生广西巴马小型猪肝细胞的初步观察

目的对28℃条件下短期培养猪肝细胞的可行性进行初步评价.方法将刚分离的新生广西巴马小型猪肝细胞采用28℃条件下的短期培养1～3 d后,恢复37℃继续培养,观察升温前后肝细胞的形态及LDH、AST的释放量,检测28℃短期培养后肝细胞的氨清除率和尿素合成量.结果在28℃短期培养的肝细胞,用倒置相差显微镜观察到典型的形态特征,细胞未见明显增殖,恢复37℃继续培养后,肝细胞迅速增殖并维持典型的肝细胞形态;经28℃短期培养后的肝细胞和未经28℃短期培养的肝细胞均保持较强的尿素合成和氨清除能力,但在28℃培养2 d和3 d后的肝细胞尿素合成量较在28℃培养1 d后的肝细胞尿素合成量显著降低(P＜0.01);培养期内LDH、AST漏出量较少.结论28℃短期培养能较好地维持猪肝细胞的形态学特征和功能,有望成为一种有效的保存和运输生物人工肝细胞材料的方法.

逼尿肌不稳定大鼠中RyR通道对自发性收缩影响的实验研究

目的为探索逼尿肌不稳定(detrusor instability,DI)自发收缩过度活跃的肌源性基础,观察RyR(ryanodine receptor,RyR)通道在DI及正常逼尿肌中对自发收缩调节的影响,以及RyR表达差异.方法手术形成大鼠部分膀胱出口梗阻(partial bladder outlet obstruction,BOO),8周后进行充盈性测压获得DI模型.新鲜膀胱镜下分离肌条,离体收缩实验用相应试剂干预记录收缩变化;RyR蛋白表达差异用Western blot分析.结果RyR阻滞剂Ryanodine干预后,正常肌条收缩频率明显增加,但此效应在DI没有发现.Western blot分析提示RyR在DI逼尿肌表达显著减少.结论研究提示RyR通道在逼尿肌自发收缩中负性作用机制可能在于RyR通道释放Ca2+激活膜上钙敏感钾通道而降低收缩活性,此机制在DI明显减弱;这可能导致DI逼尿肌收缩过度活跃.

人白介素-10在NIH3T3细胞中的表达及生物学效应的初步观察

目的观察IL-10的免疫抑制作用.方法将构建好的pLXHIL-10载体,经包装细胞PA317包装后感染小鼠成纤维细胞株NIH3T3,用ELISA和原位杂交的方法检测hIL-10的表达,并对其生物学活性进行初步观察.结果检测到感染细胞中有hIL-10 mRNA的表达,感染细胞培养上清中存在hIL-10,证实感染细胞培养上清对混合淋巴细胞培养反应有明显的抑制作用.结论hIL-10可抑制混合淋巴细胞反应.

丹参对AngⅡ刺激鼠HSCs活化Ca2+效应抑制作用的随机对照试验

目的研究丹参药物血清是否具有抑制肝星状细胞(HSCs)胞浆游离钙([Ca2+]i)增高的作用.方法健康SD大鼠32只,按随机数字表随机分为4组:肝纤维化模型丹参组(8只)给予用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周后灌服丹参6 d;肝纤维化模型对照组(8只)给予用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周后灌服生理盐水6 d;正常大鼠丹参组(8只)仅给予等量精制橄榄油9周,然后灌服丹参6 d;正常对照组(8只)仅给予等量精制橄榄油9周后灌服生理盐水6 d.结束后,经下腔静脉取血并分离血清.采用盲法,用上述10%血清培养HSCs24 h并负载好Fluo-3/AM后使用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测HSCs[Ca2+]i.结果①经正常大鼠丹参组及肝纤维化模型丹参组的血清预处理的HSCs,其[Ca2+]i荧光强度相对值均明显低于肝纤维化模型对照组(P＜0.05);且二者与正常对照组相比也均有显著性差异(P＜0.05).②经正常大鼠丹参组及肝纤维化模型丹参组血清预处理HSCs后加入AngⅡ(1.1×10-7mol/L),HSCs[Ca2+]i荧光强度变化百分数显著低于肝纤维化模型对照组(P＜0.01).结论丹参能抑制肝星状细胞活化[Ca2+]i的升高,可能是其发挥抗肝纤维化作用的重要途径之一.

人原始生殖细胞的迁移及表面标志物变化的实验研究

目的探讨人胚胎原始生殖细胞向生殖嵴迁移及其细胞标志物改变.方法人胚生殖嵴或生殖腺经石蜡切片;HE染色,光镜观察;免疫组化方法检测阶段特异性胚胎抗原SSEA-4和SSEA-1的表达;钙-钴法检测碱性磷酸酶(AP)活性;RT-PCR检测4.5、7、9、11周人胚胎生殖嵴中转录因子Oct-4的表达.结果人胚胎第4.5周生殖嵴未见有碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞,且不表达转录因子Oct-4;第5～11周胚胎生殖嵴中持续存在碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞,且表达转录因子Oct-4;第12周胚胎生殖嵴中阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞数量明显减少,但存在碱性磷酸酶阳性细胞.结论人胚胎原始生殖细胞自第5周后开始迁移至生殖嵴,直至第11周后完全分化,其形态学特征为碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性,且表达转录因子Oct-4.

半月节后根甘油阻滞术治疗三叉神经痛的实验研究

目的探讨甘油注射阻滞术治疗三叉神经痛的机制.方法在慢性压迫性损伤大鼠眶下神经致三叉神经痛模型基础上,经颞下窝入路显露三又神经半月节,实验组行半月节后根甘油注射阻滞术,对照组注射生理盐水,观察其电镜改变和体感诱发电位变化.结果甘油注射组神经纤维轴索变性萎缩,神经传导功能明显下降,10周后神经轴索再生.结论甘油注射阻滞术治疗三叉神经痛可能是通过破坏粗的有髓神经纤维而发挥阻滞作用,这种破坏作用是可逆的.

野生型及突变型survivin基因重组逆转录病毒的构建及表达研究

目的构建含绿色荧光蛋白和野生型及第34位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达.方法用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG.酶切鉴定重组子,脂质体介导下转染包装细胞Phoenix E,病毒上清感染NIH3T3细胞,RT-PCR检测外源基因mRNA的表达、流式细胞仪检测GFP的表达从而确认外源基因的转录.结果经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功的连接到pMIG载体上.载体转染NIH3T3细胞,RT-PCR显示目的片段mRNA能够表达,流式细胞仪检测GFP获良好的表达.结论成功构建了人survivin基因野生型及突变型逆转录病毒,并在NIH3T3细胞进行了表达,为下一步的研究工作提供了有效的分子工具,并且为将来能在体内应用抑制survivin基因表达的肿瘤治疗奠定基础.

登革病毒诱导血管内皮细胞凝血和纤溶系统相关分子变化

目的为研究登革病毒感染血管内皮细胞所引起的凝血和纤溶分子表达变化.方法应用D2V感染生长良好的第2、3代脐静脉内皮细胞以观察内皮细胞在表达组织纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)、凝血酶调节蛋白(TM)等分子变化.结果D2V可以显著上调内皮细胞的t-PA的表达并显著提高血浆可溶性凝血酶调节蛋白(sTM)和IL-6水平,而不影响PAI-1.抗IL-6抗体抑制D2V感染对内皮细胞表达t-PA和sTM的增强效应.结论血管内皮细胞是D2V的靶细胞之一,D2V可以诱导内皮细胞表达t-PA和IL-6并提高血浆中sTM水平,IL-6能有效地增强D2V诱导的纤溶和抗凝分子表达,高水平的t-PA和sTM可诱导纤溶亢进和抗凝效应增强,在IL-6诱导血管内皮细胞渗透性升高的前提下,有助于DHF/DSS患者出现血浆渗漏、血容量丢失甚至出血.

去氧皮质酮醋酸盐高血压大鼠模型中GTPCH-1和GFRP表达和活性的变化及其意义

目的检测DOCA盐高血压大鼠模型主动脉上,Ⅰ型GTP环化水解酶及其反馈调节蛋白的合成及活性改变,并探讨其对四氢生物喋呤/内皮一氧化氮合成酶(BH4/eNOS)系统生成一氧化氮过程的影响.方法以DOCA盐高血压大鼠模型主动脉组织为标本,以Griess试剂测定亚硝酸盐浓度的方法检测NO的水平;采用Western blot检测eNOS蛋白表达水平;应用高效液相色谱法(HPLC)测定BH4水平和GTPCH-1活性;并通过RT-PCR检测GFRP和GTPCH-1的mRNA表达水平.结果与对照大鼠相比较,在DOCA盐高血压大鼠的主动脉上,NO水平明显下降,eNOS蛋白表达水平和BH4水平明显降低,GTPCH-1活性及mRNA表达水平显著下降,而GFRP的mRNA表达水平明显增高.结论GTPCH-1的合成减少、活性降低,及其活性负调节蛋白GFRP表达增加,可能对DOCA盐高血压大鼠主动脉血管BH4合成减少、eNOS活性下降及NO水平降低起关键作用.而该机制可能是导致高血压患者动脉血管功能损伤的一个重要原因.

初发性复发性高原肺水肿血浆VEGF变化的研究

高原肺水肿(HAPE)是快速进入高原后,由于缺氧引起的以肺间质或/和肺泡内液体聚集过多的急性重症高原病.其发病机制尚不完全清楚,主要有缺氧性肺动脉高压,钠水潴留、肺毛细血管栓塞及其应激衰竭[1]等.血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能增加微血管的通透性,使血管内皮细胞分裂与增殖,促进血管再生,在许多疾病的病理生理过程中发挥特殊作用[2].为此对HAPE的VEGF进行了测定,分析如下.

生物可吸收"胃背心"在门奇断流术中的临床应用与近期观察

为减少门奇静脉断流术后创面粘连而导致的侧支血管再通,我们于2001年12月至2003年2月在断流术中加用生物可吸收医用膜"胃背心"方法共11例,报告如下.

尸解1例脑血管造影阴性的动脉瘤患者报告

我院2004年3月收入1例自发性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)患者,行二次脑血管造影均为阴性,后患者再次出血死亡.死亡后行尸体解剖证实为动脉瘤破裂.现报告如下.

POEMS综合征6例临床报告

POEMS综合征是一种临床少见的多系统损害综合征.它的命名是由5个主要临床症状的第一个英文字母组成的,即多发性神经病变(polyneuropathy,P),器官肿大(organomegaly,O),内分泌障碍(endocrinopathy,E),单克隆免疫球蛋白病(M-protein,M)和皮肤损害(skin changes,S).1984年采用五大症状首位字母缩写,首次命名POEMS综合征.也称为Crow-Fukase综合征[1].

经皮腔内血管成形和支架植入术成功治疗大脑后动脉狭窄1例

椎基底动脉系统血管狭窄常常好发于椎动脉和基底动脉[1].是导致椎基底动脉系统卒中和供血不足的重要原因,经皮腔内脑血管成形和支架植入术(percutaneous transluminal cerebral angioplasty and stenting,PTCAS)治疗症状性椎基底动脉已初步应用于临床[2].然而,经文献检索目前尚少见大脑后动脉(posterior cerebral artery,PCA)血管狭窄PTCAS治疗报道.我们于近期成功实施1例,现报告如下.

实时荧光定量PCR在献血员筛检中的应用

我科2002年1月至2003年12月在部队进行无偿献血5 260人次,其中125人份不合格.作者将其中ALT单项不合格的75份标本进行了 HBV-DNA实时荧光定量PCR检测分析,阳性率达4.0%.现报告如下.

宫腔镜下取绝经后难取宫内节育器21例分析

宫内节育器(intrauterine device,IUD)通过干扰孕卵着床部位的子宫内膜而达到避孕作用,因其具有安全、有效、长效、可逆、简便、经济和不影响性生活等优点[1],全世界约有8 000万妇女使用该节育器[2].20世纪60年代以来,我国广泛应用宫内节育器,使用者约占采取避孕措施育龄妇女的40%,占国际上使用者总数的80%,但宫内节育器在上环、带环、取环过程中可以产生IUD变形、断裂、嵌顿、残留、移位等并发症,其中少数患者,尤其是绝经后的患者取环困难,多次取环失败.我院采用宫腔镜下取环处理绝经期取环失败者,获得满意效果,现报告如下.

耳后岛状皮瓣修复外耳道黑色素瘤术后皮肤缺损1例

患者,女,15岁,因"发现右外耳道黑色新生物12年"于2003年9月入院.

椎管内肠源性囊肿的诊治

目的提高对肠源性囊肿的诊治水平.方法回顾分析11例肠源性囊肿的临床表现、磁共振(MRI)特点和手术结果.结果发现11例均有不同程度的肢体活动障碍,病理征阳性,9例伴有神经根痛,2例病程大于3年者,症状发作性出现,可自行缓解.MRI可清晰显示囊肿及其周围结构.囊肿通常表现为稍长T1、长T2均匀信号.11例中8例全切,3例次全切,残留与脊髓粘连甚紧之小片囊壁.所有病例术后神经功能恢复良好.结论肠源性囊肿是少见的先天性疾患,多发生于颈段椎管硬膜下脊髓腹侧,常伴有脊椎畸形.MRI是方便有效的检查工具.手术切除囊肿,神经功能多能恢复.

PAI-3在正常成人皮肤中的表达及作用的初步研究

目的探讨PAI-3在成人皮肤中的表达,为进一步研究PAI-3在皮肤表皮增殖、分化中的作用及机制提供基础.方法采用免疫组织化学技术和RT-PCR检测PAI-3和uPA在成人皮肤中的表达.结果检测到PAI-3 mRNA及uPA mRNA的表达,PAI-3在正常成人皮肤组织中主要位于表皮的基底层、颗粒层和棘层,在分化程度较高的表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中,其表达增强,而uPA主要位于皮肤表皮的基底层.结论PAI-3在正常成人皮肤中有表达并与表皮KC的分化有关.

死后5～36 h人脑细胞DNA降解含量的图像分析

目的通过对死后5～36 h脑细胞降解后残存DNA含量的定量分析来推断其早期死亡时间.方法选取32例已知死亡时间的人体脑组织,在死后5～36 h内每小时进行细胞学涂片、Feulgen-Vans染色,采用图像分析技术检测反映脑细胞核DNA含量的平均光密度、积分光密度、平均灰度等灰度参数,分析脑细胞残存DNA的含量与其对应的死亡时间的变化规律.结果在5～36 h内平均光密度、积分光密度随死亡时间的延长而逐渐减小、平均灰度逐渐增大,且其均值均与死亡时间显著性相关,并得出对应的回归方程.结论反映人脑细胞DNA含量改变的灰度参数均与死亡时间有明显的相关性,是推断早期人体死亡时间的有效的定量指标.

腹腔镜直肠癌根治性切除术对中性粒细胞呼吸暴发功能的影响

目的探讨腹腔镜及开腹手术后,二者中性粒细胞呼吸暴发(respiratory burst)功能的变化,了解腹腔镜手术对中性粒细胞杀菌功能的影响.方法选取"直肠恶性肿瘤"患者20例,随机分为两组各10例,腹腔镜组(Laparoscopy)行经腹腔镜直肠癌根治性切除术,开腹组(Open)行开腹直肠癌根治性切除术作为对照.于术前、术后即刻、术后24h及72 h,抽取外周静脉血,行血常规检查,并分离中性粒细胞,经佛波酯(PMA)刺激后,用流式细胞仪检测呼吸暴发强度.结果腹腔镜直肠癌根治性切除术后,患者白细胞总数及中性粒细胞升高幅度及呼吸暴发强度在术后24及72 h明显低于开腹直肠癌根治性切除术后(P＜0.05).结论腹腔镜直肠癌根治性切除术后,中性粒细胞杀菌功能低于开腹直肠癌根治性切除术后.

大肠癌VEGF-C和VEGF-D的表达及其相关性的研究

目的探讨血管内皮生长因子-C和-D(VEGF-C和-D)在大肠癌组织中的表达特点及其临床意义.方法应用免疫组化S-P法检测96例大肠癌及正常大肠组织中VEGF-C和-D的表达,并分析其与大肠癌临床病理参数及预后的关系.结果大肠癌组织VEGF-C和-D阳性率明显高于正常大肠组织(P＜0.01),而且两项指标间表达率呈显著正相关(r=0.466,P＜0.01).大肠癌VEGF-C或-D表达率在大肠癌分化程度、Dukes分期、淋巴结转移及患者预后间差异显著.(P＜0.01,P＜0.05).大肠癌原发灶与淋巴结转移灶中VEGF-C和-D表达相一致(P＜0.01,r=0.429和P＜0.01,r=0.511).结论大肠癌VEGF-C和-D高表达可能在肿瘤发生中起一定作用,并且可以作为判断大肠癌淋巴结转移和评估患者预后的重要参考指标.

复杂型小儿高热惊厥转化为癫痫的影响因素分析

目的探讨复杂型小儿高热惊厥转变为癫痫的影响因素.方法对162例复杂型高热惊厥患儿的临床资料,进行调查及回顾性分析.结果162例患儿发展为癫痫的共32例(19.75%),其中有癫痫家族史的35例,转化为癫痫的15例(42.86%);有影响神经系统发育因素的55例,转化为癫痫20例(36.36%);发热距惊厥发作的时间越短转化为癫痫的比例越高.结论有癫痫家族史及有影响神经系统发育因素的、发热与出现惊厥的间隔时间均为复杂型高热惊厥发展成癫痫的重要因素.

慢性吉兰-巴雷综合征32例临床分析

目的总结慢性吉兰-巴雷综合征(CIDP)的临床表现、电生理、病理学等特点.方法对32例CIDP病例进行回顾性分析.结果多为亚急性或慢性起病,首发症状以肢体麻木或感觉异常、肢体无力为多见,也有以复视、视物模糊、构音障碍和吞咽困难起病.常见的临床表现为进行性或复发性肌无力和感觉障碍,可合并有自主神经、颅神经受损,多数患者临床表现为对称性,少部分为非对称性.肌电图呈神经性受损改变,以运动及感觉神经传导速度减慢为主,部分伴有波幅下降.腓肠神经活检可见髓鞘脱失、髓鞘及胶原纤维增生.静脉滴注人血免疫球蛋白(IVIG)及糖皮质激素治疗有效.结论CIDP为广泛的周围神经损害,多数合并有自主神经损害,颅神经受损者并非少见.神经电生理表现为以脱髓鞘为主,部分伴有轴索变性.腓肠神经活检对CIDP具有重要的诊断价值.IVIG及糖皮质激素是目前治疗CIDP的有效方法.

自体与同种异体骨-髌腱-骨重建前交叉韧带术后胫骨骨隧道演变过程的MRI对比研究

目的利用MRI比较自体与同种异体骨-髌腱-骨(bone-patellar tendon-bone,B-PT-B)重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)术后胫骨骨隧道的变化过程.方法将50例B-PT-B重建ACL患者,分成A、B两组,A组为自体组20例,B组为同种异体组30例.分别于术后1、6周、3～4、5～6、7～8、9～10、12～13、15～16、18～19、21～22个月进行磁共振(magnetic resonance image,MRI)检查,采用胫骨骨隧道斜轴状位扫描技术,扫描序列包括:T1WI、T2WI、GE-T1WI、GE-STIR.动态观察骨隧道内的MRI信号变化,并比较术后6周、3～4、5～6个月骨隧道扩大情况.结果术后6周骨隧道扩大增幅为显著(P＜0.05).术后3个时间段上比较两组骨隧道扩大程度均无显著性差异(P＞0.05).MRI动态观察发现,A组术后5～8个月,移植物与骨隧道之间已发生骨性愈合;而B组将延迟到术后7～13个月.结论MRI是准确评价骨隧道的一种无创手段;同种异体B-PT-B在胫骨骨隧道内的愈合相对延迟;自体组与同种异体组术后胫骨骨隧道扩大的程度基本相当.

小儿体外循环围术期炎症因子释放规律及机制探讨

目的探讨体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)期间炎症因子的释放规律及机制.方法对20例低温CPB下房间隔或室间隔缺损修补术患儿,在CPB预充液中均加入相应剂量的地塞米松及抑肽酶,通过放射免疫分析法检测在肝素化前、CPB开始至主动脉阻断时、CPB结束前、CPB结束后1 h及24h血中IL-6、TNF-α、ET-1、TXB2及6-Keto-PGF1α浓度.结果IL-6、TNF-α浓度在CPB期间及CPB结束后无明显变化(P＞0.05).ET-1浓度在CPB结束后1h有增高(P＜0.05).TXB2、6-Keto-PGF1α浓度在CPB期间明显增高(P＜0.05),TXB2/6-Keto-PGF1α比值在CPB期间及CPB结束后无明显变化(P＞0.05).结论CPB预充液中加入地塞米松及抑肽酶可明显抑制由CPB介导的IL-6、TNF-α的释放,但不能阻断CPB介导的ET1、TXB2、6-Keto-PGF1α的大量释放.

沙美特罗替卡松治疗儿童中重度哮喘的肺功能及安全性观察

目的观察吸入沙美特罗替卡松干粉剂(salmeterol/fluticasone propionate,SM/FP)6个月治疗中,重度儿童哮喘的肺功能改变和安全性.方法4～14岁中、重度哮喘患儿145例,按病情轻重分别给予沙美特罗替卡松干粉剂治疗,剂量如下:中度组50/100μg2次/d吸(早、晚各1次),重度组50/100μg3次/d吸(早1次、晚2次),疗程6个月.开始治疗时测定基础肺功能指标FEV1、PEF、V75、V50、V25及患儿身高,治疗后第2个月、第6个月时复查肺功能,测定患儿身高.治疗结束时部分患儿查清晨血浆皮质醇和骨密度.结果145例患儿治疗后2个月和6个月FEV1、PEF、V75、V50和V25及其占预计值的百分比与治疗前比较均明显改善(P＜0.001),治疗6个月后未见清晨血浆皮质醇和骨密度减低及生长发育落后现象.结论沙美特罗替卡松联合防治儿童中、重度哮喘,能有效改善患儿肺功能,无明显全身副作用.

人脐血单个核细胞中Nestin阳性细胞表达及其临床意义

目的观察脐血单个核细胞是否表达nestin抗原及表达量的多少;探讨人脐血单个核细胞(human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)对神经系统疾病治疗的潜能.方法采集正常分娩胎儿的脐血.以淋巴细胞密度梯度离心法分离人脐血细胞(human cord blood cells,HUCBCs).用免疫组化法测定HCMNCs及外周血细胞(human peripheral blood cells,HPBCs)中nestin阳性细胞;流式细胞仪(flow cytometer,FCM)分析HCMNCs中nestin阳性细胞的比例及细胞周期.结果脐血中有nestin阳性细胞,约占HCMNCs的(4.32±0.66)%.HCMNCs的G1/0期细胞显著少于外周血而S期细胞则显著多于外周血,G2/M期细胞无显著差异.结论人脐血单个核细胞确能表达nostin抗原.这将为HCMNCs在神经系统应用提供一定的理论依据.

内毒素诱导急性肺损伤幼鼠血NO、ET-1含量和肺NOS活性及mRNA表达的研究

本研究通过内毒素(LPS)诱导的ALI模型,动态观察血浆NO和ET-1浓度变化、肺组织NOS活性改变、以及肺组织内源型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达,探讨NO、NOS和ET参与ALI的作用机制.

单克隆抗体修饰玻璃表面制备蛋白质芯片的初步研究

目的探讨应用单克隆抗体修饰玻璃表面制备蛋白质芯片的方法.方法用不同浓度的抗6X His单克隆抗体修饰玻璃表面,从蛋白质固定效率和固定蛋白质的反应活性两个方面,对修饰效果进行评价.结果初步观察到单克隆抗体修饰玻片对蛋白质的固定量较醛基化修饰的玻片没有明显增加,但其固定蛋白质中有反应活性的蛋白质的比例较高.结论单克隆抗体修饰的玻片也适合于制备蛋白质芯片.

O型全血及红细胞异型输注回顾与展望

失血和失血性休克是阵亡和伤死的主要因素,有效的输血是战伤救治的关键措施.伊拉克战争中,美军每5名受伤的士兵中就有1名死亡,其中半数是因为失血过多.美军"二战"中死于休克的伤员35%在术前没有输血,45%在术中和术后没有输血.朝鲜战争美军平均伤死率为2.2%,腹部伤死亡率比"二战"低约1倍,主要的原因是有充足的血液供应[1].美军在越南战争中沿用了朝鲜战争的输血经验,其阵亡与伤员之比达到1:5.2,显示了较高的救治水平.由于现代国际军事冲突中美军没有出现大量人员伤亡,所以从大规模救治伤员的输血经验讲,美军朝鲜战争和越南战争的经验有很好的借鉴价值.快速大量的补足维持机体生命活动的携氧红细胞不是一件容易的事情.首先,必须有充足的血液供应.其次,同种异体输血要冒很大风险,包括输血反应及血源性传播疾病.第三,伤员要求短时间内进行血液输注,失血时间越长对伤员的损伤越重,而这种损伤往往是不可逆的,所以在失血后短时间补足红细胞成为伤员救治成功的关键.

血压计量单位恢复mmHg表示法

参考文献中英文作者名的著录方法

关于修回稿件附软盘的说明

作者书写数字须知