第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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测定黄连中5种生物碱含量的高效液相色谱法研究
目的 建立高效液相色谱法测定黄连中生物碱含量的方法.方法 色谱柱为C18柱(3.9 mm×300 mm,10 μm),流动相为乙腈:0.05 mol/L磷酸二氢钾(40∶60,内含0.015 mol/L十二烷基磺酸钠),检测波长为345 nm.结果 在以上色谱条件下,小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和药根碱分离效果好.结论 方法灵敏度高,重现性好,可用于黄连等含小檗碱型生物碱中药材及制剂的质量控制.
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人HT036蛋白的原核表达及鉴定
目的 原核表达人HT036蛋白并鉴定其正确性.方法 采用PCR技术,扩增人HT036蛋白编码序列,克隆至原核表达载体pET30a(+)中,用IPTG诱导表达,免疫印迹鉴定.结果 PCR扩增得到了目的DNA片段,克隆至原核表达载体后经酶切与测序鉴定正确,并在大肠杆菌中获得高效表达,用抗His抗体鉴定融合蛋白表达正确.结论 成功构建了重组原核表达载体并正确表达了HT036蛋白.
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重组VIP腺病毒载体的构建及其在293细胞的表达
目的 构建血管活性肠肽重组腺病毒载体,以期用于体内实验研究.方法 利用RT-PCR扩增小鼠大脑VIP mRNA,亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,在pAdeasy内同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确,线性化后脂质体法转染293 细胞进行包装、扩增,利用报告基因EGFP对病毒滴度进行监测.PCR、免疫荧光鉴定pAdeasy-VIP感染293 细胞后VIP基因的表达,ELISA检测重组病毒转染后293细胞上清中的表达.结果 测序、酶切证实VIP基因重组腺病毒载体构建成功.RT-PCR,免疫荧光检测pAdeasy-VIP病毒感染的293细胞,均有VIP的表达.与对照组相比,重组病毒转染后293细胞上清中VIP多肽的表达明显增高.结论 成功构建了含小鼠VIP基因的重组腺病毒载体,并成功表达VIP多肽.
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TGF-β1在复发性尿道狭窄发生中的作用
目的 研究复发性尿道狭窄组织的病理学特点,观察转化生长因子-β1 ( TGF-β1) 在其组织中的表达和分布,探讨其在复发性尿道狭窄形成过程中的作用及意义.方法 收集手术切除的复发性尿道狭窄段组织11例以及脑死亡患者的正常尿道组织5例作为研究标本.分别对标本行苏木精-伊红染色、胶原纤维染色、弹力纤维染色和免疫组织化学法检测胶原纤维、弹力纤维的分布、含量和TGF-β1 的表达,并与5 例正常尿道组织进行对照研究.结果 复发性尿道狭窄段组织以大量致密的纤维结缔组织代替海绵体组织,二者互相交错,无明显分界;细胞外基质中胶原纤维增多,弹性纤维减少.复发性尿道狭窄段组织中TGF-β1蛋白为高表达,阳性表达率100%,主要表达于成纤维细胞及血管内皮细胞.正常尿道组织中TGF-β1为低表达,阳性表达率仅为20.0%.两组比较差异有显著性(P＜0.05).结论 复发性尿道狭窄组织中的成纤维细胞增殖旺盛、细胞外基质过度沉积形成增生性瘢痕是导致尿道再次狭窄的主要原因,TGF-β1高表达和尿道增生性瘢痕形成关系密切,抑制TGF-β1过度表达将有助于预防和降低尿道再次狭窄的发生率.
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腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染人骨髓间充质干细胞成骨特性研究
目的 通过腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染人骨髓间充质干细胞(human marrow mesenchymal stem cells, hMSCs),观察被修饰细胞CTLA-4Ig蛋白表达情况,以及基因修饰对hMSCs诱导成骨特性的影响.方法 采用荧光显微镜观察腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染hMSCs的绿色荧光蛋白表达,流式细胞术检测确定转染率,观察对比转染前后细胞形态和细胞周期,用免疫细胞化学方法检测转染hMSCs的CTLA-4Ig蛋白表达,转染hMSCs成骨诱导培养3周后进行成骨特异性标记检测.结果 分离培养的hMSCs CD105表达阳性, CD34表达阴性.重组腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染hMSCs的转染率为81.14%, CTLA-4Ig基因转染hMSCs(CTLA-4Ig-hMSCs)的形态无明显变化,生长良好.免疫细胞化学结果显示,CTLA-4Ig-hMSCs的CTLA-4Ig蛋白表达阳性,诱导培养3周的CTLA-4Ig-hMSCs,碱性磷酸酶染色呈强阳性,免疫细胞化学检测骨钙素表达阳性,钙的四环素荧光标记法显示细胞间有钙的沉积.结论 腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染hMSCs能够分泌CTLA-4Ig蛋白,并保持了成骨分化潜能,可用于异基因hMSCs作为骨组织工程种子细胞的应用研究.
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大鼠蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性变化
目的 探讨大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)后血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性变化.方法 雌性SD大鼠80只,分为生理盐水对照组(NS组)和SAH组.采用经额叶底面蛛网膜下腔插管至Willis环注血法建立SAH模型,在SAH后6、12、24、36、48、60、72 h等不同时间点,应用荧光分光光度计和荧光显微镜方法分别检测大脑皮质BBB对伊文思蓝(Evans Blue, EB)的通透性,同时利用透射电镜观察BBB超微结构变化.结果 与NS组比较,大脑皮质EB含量和漏出量的大值均出现在SAH后36 h时(P＜0.05),于60 h时恢复至正常水平(P＞0.05).BBB超微结构改变在SAH后36 h时明显.结论 BBB通透性改变发生在SAH急性期,是由多种因素共同所致,而且SAH后BBB具有自我修复特性.
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应用RP-HPLC/TOF-MS技术识别肝癌血浆差异蛋白质
目的 应用RP-HPLC/TOF-MS技术筛选肝癌血浆差异蛋白质.方法 9例肝癌和8例正常组血浆采用Agilent高丰度蛋白质分离系统(multiple affinity removal system, MARS)洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品首先采用RP-HPLC法分离分析,然后采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定差异蛋白质相对分子质量.结果 肝癌血浆和健康志愿者血浆的RP-HPLC图谱中存在3组差异蛋白质,相对分子质量为(15～50)×103的蛋白质在健康志愿者中有较高表达,而相对分子质量为(50～90)×103的蛋白质在肝癌患者中有较高表达.结论 RP-HPLC/TOF-MS技术可以发现肝癌发生发展过程中血浆蛋白表达谱质或量的变化.
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不同脂肪酸构成比对大鼠血脂影响的研究
目的 探讨不同膳食脂肪酸构成对大鼠血脂水平的影响.方法 用含15%脂肪 (质量分数)的半合成饲料喂养雌性SD大鼠.大鼠48天龄时,按体质量随机分成6组喂养6种不同膳食脂肪酸组成的饲料,即饱和脂肪酸组(SFA)、单不饱和脂肪酸组(MUFA)、n-6多不饱和脂肪酸组(n-6 PUFA)、n-3多不饱和脂肪酸组(n-3 PUFA)、1:1 n-6/n-3组及普通饲料喂养组,持续喂养18周.观察各组大鼠每周的体质量增长情况,并在实验8周和18周检测各组大鼠的血脂水平.结果 除n-3 PUFA喂养组大鼠在实验6周后出现体质量增长受阻外,其余各组大鼠体质量在实验期内均无明显差异(P＜0.05).实验第8周,与对照组相比较,SFA组大鼠血清LDL-C水平显著升高(P＜0.05),n-3 PUFA组、1:1 n-6/n-3组血清TG、TC、LDL-C、TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C均显著降低(P＜0.05),且血清HDL-C水平显著升高(P＜0.05),n-6 PUFA组血清TG、LDL-C、TC/HDL-C的水平显著降低(P＜0.05).至实验末期,与对照组比较,SFA组大鼠血清TG、TC、LDL-C、TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C水平均显著升高,且HDL-C水平显著降低(P＜0.05),MUFA组、n-6 PUFA组、n-3 PUFA组血清TG、TC、LDL-C、 TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C均显著降低(P＜0.05),同时血清HDL-C水平显著升高(P＜0.05),而1:1 n-6/n-3组变化更加显著(P＜0.01);同时,1:1 n-6/n-3组大鼠血清的LDL-C/HDL-C值显著低于MUFA组及n-6PUFA组 (P＜0.05).结论 1:1 n-6/n-3 PUFA的脂肪酸摄入比例能有效地调节血脂水平,从而有利于预防心血管疾病的发生.
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观察大鼠血管平滑肌细胞与间充质干细胞直接接触培养对细胞的诱导分化
目的 观察血管平滑肌细胞与骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)直接接触对MSCs向血管成分细胞的诱导分化.方法 分别将MSCs(DAPI标记)与血管平滑肌细胞按一定的比例混合直接接触培养;MSCs加血管平滑肌细胞条件培养液或单独常规培养后,用平滑肌细胞抗体SM-α-actin、Calponin及内皮细胞抗体CD31免疫荧光染色,并观察MSCs的细胞形态变化,检测MSCs的分化情况.结果 MSCs与血管平滑肌细胞混合培养3 d后免疫荧光染色,可见胞核蓝染的MSCs与抗SM-α-actin(绿色),抗Calponin、CD31(红色)的双标细胞出现;5 d后阳性表达率增加.而加血管平滑肌细胞条件培养液或常规单独培养的MSCs抗SM-α-actin阳性,抗Calponin、CD31均为阴性.结论 与血管平滑肌细胞直接接触可以诱导MSCs向血管成分细胞分化.
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小鼠微小RNA miR-22真核表达载体的构建及功能初步研究
目的 从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段并克隆到pIRES2-EGFP,构建miR-22的真核表达载体.方法 利用PCR技术从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段,克隆到质粒pUCm-T,测序正确后构建到真核表达载体pIRES2-EGFP中,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,并进行序列测定.脂质体Lipofectamin 2000法转染Hela细胞后G418筛选获得稳定转染克隆,提取总RNA,通过RT-PCR方法对neo片段进行鉴定,采用Northern blot技术检测miR-22的表达.结果 PCR扩增得到的334 bp片段与预期的miR-22前体对应的基因组片段序列一致;成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/miR-22,测序结果正确.重组质粒转染Hela细胞后,经G418筛选成功获得阳性克隆.Northern blot分析显示miR-22在Hela细胞内高效表达.结论 本实验成功克隆了miR-22的前体对应的基因组片段,构建其真核表达载体,并在Hela细胞内获得高表达,为深入研究微小RNA miR-22的功能奠定了基础.
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大肠杆菌双杂交系统筛选与AMPKα2相互作用的蛋白质
目的 利用大肠杆菌双杂交系统筛选脑组织中与大鼠AMP激活的蛋白激酶α2(AMP-activated protein kinase α2,AMPKα2)相互作用的蛋白质,以期进一步探讨AMPKα2在脑内的生物学功能及调节机制.方法 以重组质粒pBT-AMPKα2作为诱饵,应用大肠杆菌双杂交系统筛选大鼠胎脑cDNA文库,并对结果进行生物信息学分析.结果 筛选出与AMPKα2结合的蛋白7个,包括聚合泛素、热休克蛋白8(heat shock protein 8, HSP8)、磷酸果糖激酶、细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunit Ⅰ, COXⅠ)、人类白细胞抗原B关联性转录物3 (HLA-B-associated transcript 3,BAT3)异构体1、蛋白酪氨酸磷酸酶受体型D(protein tyrosine phosphatase receptor type D, Ptprd)、岛-脑蛋白1(islet-brain1,IB1).结论 寻找到了脑内与AMPKα2相互作用的7种蛋白:聚合泛素、HSP8、磷酸果糖激酶、COXⅠ、BAT3异构体1、Ptprd、IB1.
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分布式并行计算对数字化人体图像重采样时间的影响
目的 探讨不同客户机规模的分布式并行计算对数字化人体图像重采样时间的影响.方法 将计算机分为1个串行计算组与5个并行计算组,对同一个数字化人体数据集重采样生成冠状面与矢状面图像,比较各组重采样时客户机与服务器的处理时间,以及并行计算加速比.结果 ①并行计算组与串行计算组比较,客户机重采样时间均显著减少(P＜0.01).②16台客户机组与8台客户机组、24台客户机组与16台客户机组比较,客户机重采样时间均显著减少(P＜0.01),但32台客户机组与24台客户机组、40台客户机组与32台客户机组比较,客户机重采样时间无显著差异(P＞0.05).结论 分布式并行计算能够大幅度减少数字化人体数据集重采样生成冠状面与矢状面图像的时间,但串行处理和通信开销制约了进一步并行化的规模.
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鱼藤酮对大鼠纹状体谷氨酸转运体及谷氨酰胺合成酶的影响
目的 研究鱼藤酮染毒大鼠纹状体谷氨酸转运体表达及谷氨酰胺合成酶活性的变化.方法 应用HPLC荧光法检测鱼藤酮染毒大鼠纹状体谷氨酸(glutamate, Glu)浓度,RT-PCR与Western blot技术观察谷氨酸转运体基因及蛋白表达的变化,采用谷氨酰胺合成酶检测试剂盒观察其活性.结果 1.2 mg/kg鱼藤酮染毒大鼠纹状体Glu浓度明显升高,谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate/aspartate transporter, GLAST)基因和蛋白表达均显著降低,而谷氨酸转运体-1(glutamate transporter-1, GLT-1)蛋白表达升高,谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)活性明显增强.结论 GLAST表达下调可能是鱼藤酮诱导脑内谷氨酸含量增加的主要原因之一,而GLT-1上调及GS活性增强可能为神经细胞自我保护机制,以限制谷氨酸的神经毒作用.
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腰3椎体恶性骨巨细胞瘤快速复发1例
患者,女性,50岁.因"腰痛1个月伴左大腿、漆部疼痛4 d"入院.2005年12月患者无明显诱因出现腰部持续性疼痛,夜间加剧.自服"芬必得"无明显缓解.
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国产羟基磷灰石义眼座植入术35例临床观察
我院自1997年6月起,采用国产珊瑚多孔羟基磷灰石(hydryoxyapatite, HA)义眼座,对有正常大小眼球壁存在的患者实行自体巩膜包裹,对无眼球、小眼球或自体巩膜不宜应用者采用带线的义眼台,分别行Ⅰ期或Ⅱ期植入术共35例,术后效果满意,现报告如下.
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2005年重庆市60 168例围产儿出生缺陷监测分析
出生缺陷是指婴儿出生时存在的人类胚胎在结构和功能方面的异常,是导致胎儿早期流产、死胎、死产、儿童死亡和致残的重要原因之一.
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马凡综合征Bentall手术联合冠状动脉架桥术的围手术期护理
马凡综合征是指原因不明的以结缔组织缺陷为基本特征的遗传性疾病,表现为骨骼肌、眼和心血管系统的结缔组织(主要是胶原和弹力纤维)异常,其预后险恶[1].
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老年直肠癌患者经腹会阴联合直肠癌切除术的危险因素分析
目的 分析影响老年直肠癌患者经腹会阴联合直肠癌切除术的危险因素.方法 对1995年7月至2005年7月60岁以上的137例直肠癌患者行经腹会阴联合直肠癌切除术(Miles式)的资料进行回顾性分析,确定影响老年直肠癌患者Miles手术的危险因素.结果 术前并有疾病、血红蛋白质低于70 g/L、身体质量指数(BMI)低于18.5 kg/m2、术中失血量大于或等于1 000 ml、手术时间6 h以上是老年直肠癌患者Miles手术的危险因素,发生死亡的相对危险度分别为4.76、 5.85、6.49、5.47、3.90,发生并发症的相对危险度分别为2.02、2.27、1.83、2.01、1.70.结论 老年直肠癌患者行直肠癌切除时应综合考虑以上危险因素,以便提高手术的安全性.
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阑尾脐部造口可控性回结肠膀胱术后远期并发症
目的 探讨阑尾脐部造口可控性回结肠膀胱术后远期并发症及其处理方法.方法 回顾分析阑尾脐部造口可控性回结肠膀胱术后患者临床资料37例,并进行长期随访观察,随访时间85～136个月,平均109个月.结果 随访37例中出现远期并发症15例(40.5%),其中贮尿囊内结石形成2例、输出道狭窄插管导尿困难3例、输尿管吻合口狭窄致肾积水7例、贮尿囊内异物2例、输出道黏膜外翻1例;均作出相应处理,症状得到控制.结论 阑尾脐部造口可控性回结肠膀胱术后并发症与术中设计及术后日常护理不当相关,术后日常护理对预防减少远期并发症有重要作用.
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食管癌贲门癌切除胃食管胸内吻合口瘘的预防
我院自1989年3月至2006年5月对234例食管癌和贲门癌患者进行外科治疗,手术切除205例,切除率为87.6%,其中191例胸内吻合中无吻合口瘘发生,全组无死亡,现分析报告如下.
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电视胸腔镜诊断和治疗顽固性胸腔积液的体会
胸腔积液病因复杂常为临床诊断困难的疾病之一,给治疗带来困难及延误.恶性胸腔积液多见于晚期肺癌、乳腺癌、淋巴瘤、恶性间皮瘤、食管癌、恶性纵隔肿瘤和胃癌等胸膜侵犯或转移,以往多采用胸腔穿刺、放置胸腔闭式引流、胸腔内注射黏连剂等方法治疗.
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胃代食管术治疗食管腐蚀伤后瘢痕狭窄的效果
1976年1月至2006年8月,我科采用胃代食管术治疗食管腐蚀伤后瘢痕狭窄28例,效果良好,现将治疗体会报告如下.
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人血清乙型肝炎表面抗体定量测定化学发光免疫分析方法的建立及应用
目的 建立人血清抗-HBs化学发光免疫分析方法并在临床检测中应用.方法 使用自行研制的化学发光免疫定量分析方法检测530例临床血清标本中的抗-HBs,并与抗-HBs电化学发光全自动免疫分析方法进行对比,探讨其临床应用价值.结果 本方法对国家抗-HBs参考品,20份阴性参考品均检定为阴性;精密性参考品变异系数小于15%;定量参考品检测结果均在规定范围内;灵敏度参考品能检测出10 mIU/ml血清,完全达到国家参考品对定量方法的要求.与甲肝、丙肝、HIV、梅毒等患者血清无交叉反应;样本中抗凝剂量的柠檬酸钠、肝素、EDTANa2对测定结果没有影响.该方法正常参考值为10 mIU/ml.ECLIA测定结果与本方法相比,临床总符合率为95.09%.结论 该方法灵敏度高,特异性好,稳定性强,检测范围宽,有良好的准确性和重复性,完全可以替代进口化学发光试剂用于临床样本的检测.
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重症肌无力胸腺中CD4+CD25+ Treg细胞分布与数量变化的临床意义
目的 探讨重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者胸腺内CD4+CD25+天然调节性T细胞(nTreg)的分布和数量变化及其临床意义.方法 采用免疫组化染色观察50例MG胸腺和20例正常胸腺CD25的表达, 同时采用流式细胞技术检测10例MG患者胸腺与外周血中CD4+CD25+T细胞在CD4+ T细胞中的比例.结果 MG增生胸腺中CD25表达与对照胸腺相比显著升高(P＜0.05),与MGFA分期呈正相关.增生胸腺中CD4+CD25+细胞占CD4+细胞比例明显高于对照胸腺(P＜0.05),而外周血中CD4+CD25+ T细胞比例无显著变化(P＞0.05).结论 胸腺内nTreg细胞数量的下降与MG自身耐受的破坏有重要的关系,进一步研究胸腺内nTreg细胞数量和功能的变化有助于了解MG的发病机制.
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重症肌无力胸腺Foxp3基因转录表达水平及其临床意义
目的 探讨抑制性转录调节因子Foxp3在重症肌无力(myasthenia gravis, MG)胸腺内表达及其临床意义.方法 收集本科2003年1月至2006年6月手术切除的MG胸腺组织50例,采用免疫组织化学、Western blot以及RT-PCR技术,检测Foxp3在胸腺内组织定位,蛋白及mRNA转录表达水平以及与MG胸腺病理、临床特征间关系.结果 Foxp3阳性细胞主要位于胸腺内髓质及血管周围间质,少量见于皮质区;MG胸腺组织中Foxp3显著低于对照胸腺组织;其中胸腺瘤组织中仅有少量表达,与增生胸腺差异显著;Foxp3表达水平与MG临床分型负相关.结论 MG胸腺Foxp3基因转录与表达异常,可能参与MG自身免疫的发生.
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可取出式食管支架预防烧伤后瘢痕狭窄的实验研究
目的 探讨可取出式食管支架(retrievable esophageal stent,RES)置入烧伤家犬食管内4个月后能否顺利取出及对食管烧伤后瘢痕狭窄的预防作用.方法 24只家犬根据随机数字表法分为对照组(未烧伤)、烧伤组(烧伤后不给予任何治疗)及治疗组(伤后2周置入RES,4个月后拔管),治疗组又根据拔管后观察时间分为治疗Ⅰ组(拔管后立即处死)及治疗Ⅱ组(拔管后2个月处死).测定离体食管的狭窄指数,观察其显微及超微结构,比色法检测食管组织羟脯氨酸含量,分别采用原位杂交及ELISA法测定食管组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白水平,检测食管顺应性及生物力学特性,RT-PCR及Western blot 分别测定TGF- β1、Smad3、Smad7的mRNA表达及蛋白水平.结果 RES置入4个月后能顺利取出.烧伤组伤后3周发生吞咽困难,仅1只家犬存活至实验完毕,治疗Ⅰ、Ⅱ组实验中无死亡,RES置入后进食无异常,处死前体质量与实验前无显著性差异.与烧伤组相比,治疗Ⅰ、Ⅱ组食管狭窄指数、组织羟脯氨酸水平和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白水平均显著减低(P＜0.05);食管顺应性及弹性明显增加,组织学检查胶原纤维较细,排列较规则;食管组织TGF-β1、Smad3 mRNA表达及蛋白水平下调,而Smad7升高(P＜0.01).结论 RES置入烧伤家犬食管内4个月能顺利取出,取法简便.RES能有效预防食管烧伤后瘢痕狭窄形成.食管组织TGF-β1、Smad3增加及Smad7降低可能是RES预防烧伤瘢痕狭窄的分子机制之一.
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APE1在非小细胞肺癌中的表达特点及其与预后的关系
目的 探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease, APE1) 在非小细胞肺癌中的表达特点及其与患者预后的关系.方法 应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织和36例正常肺组织中APE1的表达情况,按染色强度将其分为低表达组和高表达组,并分析APE1在非小细胞肺癌表达情况与临床病理及患者预后的关系.结果 正常肺组织及肺癌组织均有APE1表达,但正常肺组织以细胞核表达为主,肺癌组织主要在细胞质表达;APE1的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移及组织类型无明显关系;生存分析显示APE1的表达强弱与患者的预后明显相关.结论 APE1蛋白表达增强与定位的改变与肺癌发生及发展有关,APE1基因表达增强可能是非小细胞肺癌患者预后不良的指标之一.
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电视胸腔镜与胸骨部分劈开胸腺切除治疗重症肌无力症的比较
目的 探讨经右胸电视胸腔镜手术(VATS)与胸骨部分劈开胸腺切除治疗重症肌无力的优缺点.方法 2001年8月至2006年9月我科32例重症肌无力患者用VATS经右胸前侧径路行胸腺切除及纵隔脂肪清除(VATS组),并与40例胸骨劈开胸腺切除(胸骨部分劈开组)比较.结果 VATS组中31例顺利完成手术,1例因电凝钩伤及头臂静脉干而中转开胸止血,术后无1例发生肌无力危象,亦无手术死亡.胸骨部分劈开组术后5例发生肌无力危象,呼吸机支持后恢复,1例术后2 d因急性心肌梗死死亡.与胸骨劈开组相比,VATS组手术时间和住院时间均明显缩短,危象的发生率显著降低.两组术后MGFA 评分和溴化吡啶斯的明用量均较术前明显下降(P＜0.01, P＜0.05).结论 VATS经右胸前外侧径路行胸腺切除安全、可行,与胸骨部分劈开径路相比具有创伤小、并发症少、恢复快等优点.
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低剂量内毒素诱导兔非显性弥散性血管内凝血
目的 用低剂量内毒素诱导兔非显性弥散性血管内凝血,观察凝血、纤溶变化及肝素抗凝治疗的效果.方法 12只雄性新西兰兔按完全随机设计方法分为内毒素组和内毒素加肝素治疗组,每组6只,采用内毒素10 μg/kg由颈内静脉注入,其中肝素组在注入内毒素同时加用肝素100 U/kg抗凝治疗.以实验前样本作自身对照,实验后1、2、3、6 h分别采取静脉血进行凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(aPTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)含量及D-二聚体含量测定、血栓弹力图(TEG)各参数变化以及肺、肾脏病理改变.结果 内毒素组PT、aPTT、TT均延长,Fib含量降低,D-二聚体含量明显增加,TEG示凝血因子消耗、血小板减少,肺、肾内有微血栓形成;肝素组凝血象变化不明显,D-二聚体含量有增加,TEG示轻微低凝状态,肺、肾内未见微血栓形成.结论 低剂量内毒素能诱导兔非显性弥散性血管内凝血,且抗凝治疗有效.
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电视胸腔镜辅助下87例肺切除术临床分析
目的 总结电视胸腔镜(video assisted thoracoscopic surgery, VATS)辅助下肺切除术治疗肺部疾病的经验.方法 回顾分析本科1993年4月至2006年9月在VATS辅助下行肺切除术治疗肺部疾病87例.其中原发性支气管肺癌38例,均在辅助小切口下行肺叶切除术;炎性假瘤17例、结核瘤21例、错构瘤3例和转移性肺癌8例,均行肺部病变局部切除术.结果 本组无手术死亡,2例术后血胸再次行VATS下止血,4例发生肺部感染,其余均恢复顺利.结论 电视胸腔镜行肺切除手术,具有创伤小,恢复快和安全可靠的优点,但要注意掌握手术指征.
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93例胸腺瘤按WHO组织分型结果回顾性分析
目的 探讨WHO胸腺瘤病理组织分型临床应用的意义.方法 按新的WHO胸腺瘤组织分型标准对我科手术治疗的93例胸腺瘤进行了回顾性分析,总结本组病例的组织分型、Masaoka分期及预后.结果 93例胸腺瘤中,WHO组织分型的A、AB、 B1、B2、B3、C型分别有6例(6.45%)、28例(30.11%)、15例(16.13%)、22例(23.66%)、9例(9.68%)、8例(8.60%);复合型5例(5.38%).Masaoka分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa、Ⅳb期分别为45、23、14、9、2例.组织分型与分期有较高的相关性.随访病例中有6例复发,B2及以上分型占5例.结论 WHO胸腺瘤组织分型方案能较好地指导临床治疗和判断预后,有较高的临床应用价值.
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人DeltaNp73α基因重组腺病毒载体的构建及其鉴定
目的 利用Adeasy腺病毒载体系统构建含人DeltaNp73α cDNA的重组腺病毒并在293细胞中扩增制备重组病毒.方法 从pcDNA3-DeltaNp73α-HA中酶切出DeltaNp73α基因,并插入pAdTrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒;pAdTrack-CMV-DeltaNp73α线性化后电穿孔法转化到含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的E.coli.BJ5183菌株内同源重组.筛选正确的重组质粒,PacⅠ线性化后脂质体法转染293T细胞包装成重组病毒颗粒;并在293T细胞中反复扩增;增强离心法转染树突状细胞,Western blot检测目的蛋白的表达.结果 经限制性内切酶酶切鉴定、PCR筛选、基因测序和GFP表达证实成功构建了携带DeltaNp73α cDNA的重组腺病毒载体并制备出高滴度的重组病毒;Western blot检测出预期相对分子质量为67×103的特异条带.结论 成功构建了携带DeltaNp73α cDNA的重组病毒.
关键词： 重组腺病毒 DeltaNp73α -
二氮嗪与1,6-二磷酸果糖心麻痹液对大鼠心肌细胞的保护作用
目的 观察含二氮嗪(DZ)与1,6-二磷酸果糖(FDP)心麻痹液对冷保存大鼠心脏心肌细胞凋亡的影响.方法 SD大鼠24只,分为3组(n＝8):对照组、STH组和DF组.离体心脏在4 ℃条件下保存6 h后,在Langendorff装置灌注20 min,转为离体左心脏工作模型10 min.实验终了取心肌组织,检测心肌细胞凋亡指数;心肌丙二醛(MDA)含量,心肌线粒体钙离子含量([Ca2+]m)、细胞质细胞色素C(Cyt c)含量、细胞质caspase-3活性;部分心肌液氮保存,采用RT-PCR检测心肌细胞caspase-3 mRNA含量.结果 与对照组比较,STH组与DF组再灌注后心肌细胞凋亡指数较明显升高(P＜0.01),但DF组明显低于STH组(P＜0.01).STH组心肌MDA含量、[Ca2+]m、细胞质 Cyt c 含量显著增高,细胞质caspase-3 mRNA表达增加,caspase-3活性明显高于对照组(P＜0.01).DF组较STH组各项指标显著改善(P＜0.01).结论 含二氮嗪与1,6-二磷酸果糖心麻痹液能减少缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡.
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颈阔肌皮瓣修复颈部食管狭窄的研究
目的 总结颈阔肌皮瓣修复颈部食管狭窄经验.方法 29例颈部食管长2.0～4.5 cm的狭窄患者,其中结肠代食管术后颈部吻合口狭窄21例(17例由他院术后转入),胃代食管术后颈部吻合口狭窄2例,食管烧伤后局限性颈段食管狭窄3例,医源性损伤狭窄2例,颈段食管利刃横断伤后食管闭锁1例.纵行切开狭窄,上、下各超过1 cm,切取(4～5)cm×(6～7) cm大小的颈阔肌皮瓣内翻缝合于狭窄切开边缘.结果 肌皮瓣全部成活,无术后死亡,发生瘘3例,更换敷料愈合.全组随访6～192个月,平均78个月,2例发生狭窄,1例行食管扩张,另1例食管成形治愈;均能正常经口进食.结论 术中注意颈阔肌皮瓣解剖及切取,保证肌皮瓣的血供是手术成功的关键.
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风心病合并肺动脉高压体外循环后前列腺素E1抵抗现象的研究
目的 探讨风心病合并肺动脉高压患者在围术期治疗中前列腺素E1(PGE1)的作用规律,为临床提供理论依据.方法 28例分为2组:实验组(A组)14例,于术中停体外循环(CPB)后开始应用PGE1,20 ng·kg-1·min-1,之后每10分钟增加20 ng·kg-1·min-1,直至100 ng·kg-1·min-1维持10 min,连续观察体肺循环压力变化,间隔10 min测量心脏指数(CI)1次,共测量6次;其中7例(A1)术后24 h重复上述操作1次,其余7例(A2)采用生理盐水作为对照;对照组(B组)14例,术中及手术当日均不使用前列腺素E1,其中7例(B1)术后24 h按A组方法给药1次,其余7例(B2)采用生理盐水作为对照.术后24 h实验组14例(C组=A1+B1),对照组14例(D组=A2+B2).结果 术中A组和B组平均肺动脉压(MPAP)下降比较相差不显著(P＞0.05),心脏指数(CI)、体循环阻力(SVR)、肺循环阻力(PVR)、肺动脉楔压(PAWP)变化均无显著性差异(P＞0.05);术后24 h C、D组平均肺动脉压(MPAP)下降相差显著(P＜0.05),两组心脏指数(CI)变化相差非常显著(P＜0.01).结论 风心病合并肺动脉高压患者在瓣膜置换术后,麻醉状况下对前列腺素E1存在抵抗现象,而在清醒状况下前列腺素E1能扩张肺血管,降低肺动脉压,提高心脏指数,改善心功能.
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肺癌食管癌开胸手术患者术中凝血功能改变及其临床意义
目的 应用血栓弹性描记仪观察肺癌、食管癌开胸手术患者围术期凝血功能的改变.方法 择期行手术治疗的肺癌患者10例,中段或上段食管癌患者10例,观察麻醉前5 min(T0)、手术开始后1 h(T1)、手术结束后30 min(T2)血栓弹性描记仪参数中反应时间(reaction time, R)、凝血形成时间(clotting time, K)、α角(α angle)和大振幅(maximum amplitude, MA)等指标的变化.10例健康志愿者为对照组.结果 与正常对照组相比,肺癌患者和食管癌患者术前R值缩短,相差显著(P＜0.05).肺癌患者T1时间点R值、K值延长,α角和MA减小,与T0比较相差显著(P＜0.05),术后T2时间点仍然有MA减小,与T0比较相差显著(P＜0.05);肺癌患者与食管癌患者相比在T1时间点R、K延长,α角和MA减小,相差显著(P＜0.05),T2时间点α角和MA减小,两组比较相差显著(P＜0.05);纤溶指数LY30值在T1、T2时间点与T0比较以及同时间点与食管组比较相差显著(P＜0.05).食管癌患者术中、术后TEG变化与T0比较相差均无显著性(P＞0.05),T2时间点CI(coagulation index)值与T0比较相差显著(P＜0.05);T1时间点与肺癌组比较,R、K有缩短.结论 两组恶性肿瘤患者术前可能存在高凝状态,肺癌组患者术中、术后凝血功能逐渐趋于低凝状态,而食管癌组患者术中、术后继续有高凝的趋势.
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18F-FLT在小鼠肺癌和炎症模型中的生物分布及PET显像研究
目的 研究3'-脱氧-3'-18F-氟代胸苷(18F-FLT)在肺癌模型和炎症模型的生物分布和PET显像,以评价18F-FLT 作为一种新的PET示踪剂在肺部恶性肿瘤诊断中的作用.方法 16只荷肺腺癌T739小鼠和12只T739炎症模型小鼠均根据不同示踪剂[18F-FLT和18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)]被随机分为两组,在经尾静脉注药后60 min用井型探测仪测量小鼠18F-FLT和18F-FDG的生物分布,并行PET显像.结果 在肺癌模型18F-FLT的生物分布研究中,发现肿瘤部位有较高的放射性摄取,肿瘤对血、肌肉及肺的T/NT比值均大于2.应用18F-FLT和18F-FDG的肿瘤PET显像均非常清晰.在炎症模型的研究中,18F-FDG组炎性组织对肌肉的放射性比值(2.25±0.39)明显高于18F-FLT组(1.26±0.19)(P＜0.01).炎性组织摄取18F-FDG而不摄取 18F-FLT.结论 肺部恶性肿瘤组织中18F-FLT摄取高于正常组织.炎性组织在18F-FLT PET扫描中未见显像,表明18F-FLT在两种疾病模型的鉴别中有特异性.
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二氮嗪预处理对缺血再灌注大鼠心肌NF-κB和caspase-3表达的影响
目的 研究二氮嗪(Diazoxide, DZ)开放线粒体ATP敏感性钾通道对缺血再灌注损伤所致大鼠心肌组织NF-κB和caspase-3表达的影响.方法 采用离体工作心脏灌注模型,大鼠随机分为正常对照组,缺血再灌注组,DZ治疗组, DZ抑制剂-格列苯脲组.采用TUNEL 法检测心肌细胞凋亡,Western印迹法测定心肌NF-κB活性, 酶标法测caspase-3活性.结果 DZ组大鼠心肌细胞凋亡指数明显低于I/R组,高于对照组.与正常对照组相比, 心肌组织NF-κB和caspase-3活性在缺血再灌注后有显著性增加(P＜0.01).DZ处理后, NF-κB和caspase-3活性与缺血再灌注组相比有明显下降(P＜0.01); 格列苯脲组NF-κB和caspase-3活性明显高于DZ治疗组(P＜0.01).结论 心肌缺血再灌注损伤使凋亡指数,NF-κB和caspase-3活性明显升高, 二氮嗪(DZ)开放线粒体ATP敏感性钾通道可下调心肌组织NF-κB和caspase-3的表达,这可能有助于减轻缺血再灌注所致心肌细胞凋亡的发生.
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放射治疗对犬颈阔肌皮瓣修复食管的影响
目的 观察放射治疗对犬颈阔肌皮瓣修复食管的影响.方法 11只健康成年家犬行颈阔肌皮瓣修复食管后,按随机数字表法分为预防放射剂量(4 800 cGy)、根治性放射剂量(6 400 cGy)及对照组.观察犬饮食情况、早期放射反应,吻合口通畅情况,活杀后测定吻合口顺应性、肌皮瓣组织生物力学特性、羟脯氨酸含量,光学及电子显微镜观察肌皮瓣结构改变.结果 死亡3只,放射治疗两组摄食能力及体质量无显著下降.放射早期食管与皮瓣轻度充血、红肿,皮瓣有少量毛发生长,吻合口无明显狭窄,颈阔肌皮瓣吻合口部顺应性,羟脯氨酸含量以及生物力学特性各组间均无显著差异,病理及超微结构见肌皮瓣胶原排列比颈部伤口皮肤胶原紊乱且较粗大,其余结构无明显改变.结论 实验犬颈阔肌皮瓣修复食管后,能够耐受预防及根治剂量的放射治疗.
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人DeltaNp73α基因修饰的树突状细胞抗瘤免疫学效应研究
目的 研究DeltaNp73α重组腺病毒转染树突状细胞诱导的特异性免疫抗瘤作用.方法 人脐静脉血经梯度离心及IL-4、GM-CSF诱导培养树突状细胞;DeltaNp73α重组腺病毒增强离心法转染树突状细胞,观察DeltaNp73α对树突状细胞活化、凋亡的影响;同时检测其所诱导的DeltaNp73α特异性细胞毒性T淋巴细胞对不同DeltaNp73α表达水平肿瘤细胞的细胞毒性作用.结果 Western blot证实重组腺病毒转染树突状细胞后DeltaNp73α的有效表达;DeltaNp73α修饰的树突状细胞凋亡率显著低于对照组;DeltaNp73α修饰树突状细胞诱导的细胞毒性T细胞可以有效的杀伤DeltaNp73α高表达的A549/DeltaNp73α细胞、K-562细胞;且这种免疫抗瘤作用可能与靶肿瘤细胞DeltaNp73α水平相关.结论 DeltaNp73α修饰的树突状细胞,其凋亡率降低;并可以有效诱导针对DeltaNp73α高表达肿瘤细胞的特异免疫抗瘤作用.
