第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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RNA干扰CA916798基因真核表达载体的构建与鉴定
目的 构建CA916798基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法 以CA916798为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的CA916798基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计2条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析.用脂质体2 000将重组质粒转染A549/CDDP细胞并用G418筛选,MTT法测定药物敏感性并绘制细胞增殖曲线.结果 构建针对CA916798的pRNAi-CA916798shRNA,经限制性内切酶酶切、PCR和DNA测序证实与设计完全一致;在荧光显微镜下观察到A549/CDDP细胞表达绿色荧光蛋白(GFP)证实重组质粒已转染入细胞并用G418剔除了未转染质粒的细胞,1.0μg/ml顺铂作用后pRNAi-CA916798shRNA转染组细胞增殖受到明显抑制(P＜0.01).结论 成功构建CA916798基因的shRNA表达载体,并筛选出转染了CA916798shRNA的A549/CDDP细胞.
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淋巴增强因子-1在大鼠触须毛囊生长周期中的表达
目的 研究淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)在大鼠触须毛囊生长周期中表达及其重要作用.方法 选取处于毛发周期各阶段的触须毛囊,采用免疫组织化学的方法检测LEF-1在各时期毛囊中的表达及变化.结果 生长期,LEF-1主要表达于毛囊的毛母质和外根鞘的细胞核内,随着生长的推进,核表达逐渐转化为细胞质表达;退化期,LEF-1表达明显减弱,毛母质中弱表达,外根鞘内表达消失;静止期,LEF-1重新出现在bulge区的外侧,在内根鞘中的表达明显增强.结论 LEF-1参与毛干和内根鞘的分化,并且在毛囊周期的维持中起到重要的作用.
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大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶的交叉免疫活性
目的 探讨大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶之间是否存在交叉免疫反应性.方法 首先利用生物信息学方法分析不同昆虫间丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列的保守性,尤其是大劣按蚊与烟草天蛾间丝氨酸蛋白酶的序列相似性;然后,PinPoint Xa-1表达载体对大劣按蚊丝氨酸蛋白酶进行体外原核表达,利用Western blot方法检测表达产物与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶抗血清之间的免疫反应性.结果 生物信息学分析结果显示,不同昆虫间(包括大劣按蚊与烟草天蛾)丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列具有较高保守性;成功进行了大劣按蚊丝氨酸蛋白酶的体外原核表达,western blot结果显示,烟草天蛾丝氨酸蛋白酶抗血清能够能够识别表达产物.结论 大劣按蚊与烟草天蛾丝氨酸蛋白酶具有交叉免疫活性,利用烟草天蛾丝氨酸蛋白酶抗血清研究大劣按蚊丝氨酸蛋白酶是可行的.这将为下一步从蛋白水平研究大劣按蚊丝氨酸蛋白酶的生物学特性奠定基础.
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柳氮磺胺吡啶诱导HSC-T6肝星状细胞凋亡及其机制
目的 观察柳氮磺胺吡啶及其分解产物对肝星状细胞株HSC-T6增殖和凋亡的影响,并对其分子机制作初步探讨.方法 用CCK-8比色法检测细胞增殖;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染检测HSC-T6细胞凋亡率;AO/EB染色法观察细胞凋亡形态,Western blot检测NF-κB P65、P-IKK、P-IκB蛋白的表达,激光共聚焦显微镜观察P65核转位.结果 柳氮磺胺吡啶能剂量依赖性的抑制HSC-T6肝星状细胞的增殖;AO/EB染色法、AnnexinV/PI染色结果证明柳氮磺胺吡啶能诱导HSC-T6肝星状细胞的凋亡;而5-氨基水杨酸和磺胺吡啶对HSC-T6的增殖和凋亡无影响.Western blot结果表明柳氮磺胺吡啶不是5-氨基水杨酸和磺胺吡啶抑制IKK、IκB的磷酸化、细胞核NF-κB P65的表达(P＜0.05),激光共聚焦显微镜下观察到,柳氮磺胺吡啶组P65核转位被抑制.结论 柳氮磺胺吡啶可抑制HSC-T6的增殖并诱导凋亡,其机制可能与其抑制Rel/NF-κB/IκB/IKK信号通路有关.
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成年大鼠缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作及海马苔藓纤维出芽
目的 探讨缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作的病理生理机制.方法 采用成年雄性SD大鼠,充以8％氧氮混合气体缺氧后,监测大鼠脑电活动,检测海马组织苔藓纤维出芽(mossy fiber sprouting,MFS)的变化.结果 大鼠缺氧损伤后痫样放电的发生率为19.67％,亚临床痫性发作组缺氧后7 d海马CA3区下锥体细胞层棕黑色颗粒逐渐增多:14 d呈束状、斑片状颗粒沉积;28 d呈现明显颗粒沉积条带,亚临床痫性发作组海马CA3区苔藓纤维出芽评分明显高于非亚临床痫性发作组和对照组,而3组齿状回(dentate gyrus;DG)内分子层苔藓纤维出芽评分无差异(P＞0.05).结论 成年大鼠缺氧性脑损害后可出现痫样放电并在海马CA3区形成苔藓纤维出芽,而海马CA3区苔藓纤维出芽可能与缺氧性脑损伤后痫性发作有关.
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RNA干扰逆转肝细胞癌多药耐药
目的 筛选高效dsRNA/mdr1,以备研究RNA干扰逆转肝细胞癌多药耐药之用.方法 首先根据siRNA设计原则,以多药耐药基因(mdr1)为靶基因,设计并选择4～5条siRNA/mdr1,经BLAST后体外转录法合成dsRNA/mdr1,用Oligofectamine试剂分别转染HepG2/mdr1,然后从mRNA、蛋白(P-gp)表达水平和细胞功能变化评价HepG2/mdr1耐药性被逆转的程度,比较各个dsRNA/mdr1的逆转效率,筛选出有效的siRNA/mdr1.结果 成功合成5条dsRNA/mdr1(其中1条为阴性对照),dsRNA/mdr1-4 mRNA表达(18.73±1.33)%、蛋白表达变化(79.1±1.6)%～(16.8±0.4)%与其他各组细胞比较,有显著性差异;细胞内柔红霉素(DNR)累积量也较其他组明显增加(平均荧光强度79.58,阳性率84.25%,P＜0.05).结论 体外转录法结合脂质体转染适用于筛选高效siRNA,肯定了siRNA干扰序列能够有效阻抑mdr1基因编码蛋白p170的功能.
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低频微电场对细菌繁殖和生长的影响
目的 研究奇异变形杆菌和绿脓杆菌在低频微电场作用下的复苏、繁殖和生长情况.方法 将相同细菌和相同培养基的平板放置在同一个培养箱,一个平板用电场仪进行刺激,另一个平板紧靠刺激源放置,后一个离刺激源较远.在固体培养基中观察细菌的复苏快慢和繁殖速度,在液体培养基中观察生长快慢情况,结果发现在微弱低频电场(重复频率0.2～9.8 Hz占空比为0%～100%,电流强度为0～100 μA)的刺激作用下,直接受到刺激和近靠刺激源平板内的细菌繁殖速度以及长势超过无刺激对照组,远离刺激源的细菌生长繁殖速度不受电场的影响.结论 低频脉冲微电场对细菌的生长有一定的促进作用.
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大鼠毛囊干细胞的纯化培养鉴定及其生物学特性
目的 采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性.方法 显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分别收集CD34+细胞和CD34-细胞,检测细胞活性后进行细胞培养并绘制细胞生长曲线.扫描电镜观察毛囊干细胞表面形态,透射电镜观察干细胞内部结构形态.免疫细胞化学检测培养细胞中β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达.结果 用Vario MACS法有效分离并成功培养CD34+毛囊干细胞,分选后的细胞仍具有较好的活性,细胞生长曲线表明,CD34+毛囊干细胞增殖速度快,增殖期长,而CD34-细胞则较快进入平台期.培养的CD34+细胞中干细胞标记物β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达均强于CD34-细胞.获得电镜观察毛囊干细胞表面形态学特征及内部结构特征资料.结论 Vario MACS法能有效分离获得的CD34+毛囊干细胞,该细胞具有良好的生物学性能.
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重组融合蛋白rTMP-GH对体外培养巨核细胞增殖的影响
目的 探讨TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(growth hormone,GH)的重组融合蛋白rTMP-GH对体外培养巨核系细胞增殖的影响,以及对血小板生成有显著调控作用的球蛋白转录调节因子(globin transcription factor-1,GATA-1)表达的调控作用.方法 体外培养Dami细胞,100 ng/ml的重组融合蛋白rTMP-GH作用7 d后,观察巨核细胞集落形成能力,分析rTMP-GH对Dami细胞增殖的影响.同时,采用Western blot和RT-PCR方法分别检测Dami细胞中GATA-1的蛋白水平和mRNA表达变化,探讨rTMP-GH对巨核细胞生成血小板的调节作用.结果 rTMP-GH处理后Dami细胞的集落形成能力显著增强,转录因子GATA-1的mRNA和蛋白表达水平显著上调,其调节作用明显强于空白对照组和GH组.结论 rTMP-GH能够刺激巨核细胞增殖分化和上调GATA-1的表达,具有促进血小板生成的作用.
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人重组蛋白P311的原核表达纯化与鉴定
目的 原核表达人增生性瘢痕新候选相关蛋白P311,并对该重组蛋白进行纯化、鉴定.方法 通过PCR方法扩增人P311基因,利用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点将其克隆至谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-s-transferase,GST)融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-β-D-5-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE、Western blotting等方法鉴定表达产物,并用谷胱甘肽-琼脂糖小珠亲和纯化表达的GST-P311蛋白.结果 重组载体pGEX-4T-P311经酶切与测序鉴定证实构建成功.导入大肠杆菌进行表达,表达产物相对分子量为34KD左右,与预期值相符.该条带经免疫印迹检测鉴定为GST抗体阳性,获得了纯化的GST-P311蛋白.结论 构建了pGEX-4T-P311原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,亲和纯化获得较高纯度的GST融合蛋白,为下一步继续研究P311的生物学功能奠定了基础.
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大鼠第一腮弓细胞构建组织工程牙本质-牙髓复合体样结构
目的 观察胚胎12.5 d(E12.5 d)大鼠第一腮弓上皮及外胚间充质细胞离散后肾被膜下移植的成牙能力.方法 切取E12.5 d大鼠第一腮弓(下颌突),酶消化离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,4周后收获移植物,对移植物进行组织学观察和免疫组化抗牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)检测.结果 种植4周,植入细胞在肾被膜下形成牙本质-牙髓复合体样结构.DSP在新生的牙本质组织中呈阳性表达.Masson三色法显示绿色矿化基质形成.结论 E12.5 d大鼠第一腮弓细胞部分保留了牙齿自然发育的遗传信号,在肾被膜下可以构建形成牙本质-牙髓复合体样结构.
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基于中国数字化可视人体喉区细小结构分割数据集的建立
目的 建立数字人体喉区细小解剖结构的分割数据集.方法 利用Photoshop图像处理软件提供的磁性套索和多边形选择对中国数字化可视人体喉区数据的细小器官和结构进行数据分割,建立喉区解剖结构的分割数据集;分割数据集经图像格式转换后,在Amira 4.1软件中利用域值分割方法自动提取分割区域,进行三维显示,并通过三维结果来验证分割数据.结果 对喉软骨、喉肌、声带等细小解剖结构进行了分割,建立了基于数字人体的喉区数据集,基于分割数据建立三维模型真实、可信.结论 喉区的分割数据准确、完整,为喉区精细模型的建立奠定了数据基础,同时提供了实用的彩色图像分割方法.
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支气管肺泡灌洗液和血清肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值
目的 探讨支气管肺泡灌洗液和血清中肿瘤标志物,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角质蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)在肺癌早期诊断中的临床价值.方法 采用电化学发光法测定70例肺癌住院患者及40例肺部良性疾病患者支气管肺泡灌洗液和血清中CEA、NSE、CYFRA21-1水平.结果 肺癌患者支气管肺泡灌洗液和血清3项肿瘤标志物平均含量均高于肺部良性疾病患者(P＜0.01).支气管肺泡灌洗液中3种标志物的含量明显高于血清中的含量(P＜0.05).联合检测两项及3项阳性者均使支气管肺泡灌洗液和血清诊断肺癌的敏感性和准确性得到提高.Ⅲ、Ⅳ期肺癌组支气管肺泡灌洗液和血清中3项肿瘤标志物的表达水平均高于Ⅰ+Ⅱ期患者(TNM分期),Ⅰ+Ⅱ期肺癌组支气管肺泡灌洗液中3项肿瘤标志物的表达水平高于肺良性病组(P＜0.05).结论 支气管肺泡灌洗液CEA、CYFRA21-1、NSE检测对肺癌的早期诊断价值优于血清,联合检测支气管肺泡灌洗液和血清中的肿瘤标志物能大大提高临床诊断肺癌的阳性率.
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脂多糖上调CRH及其结构相关肽Ucn在大鼠腹腔巨噬细胞的表达
目的 观察促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)及其结构相关肽urocortin(Ucn)在大鼠腹腔巨噬细胞的表达及LPS对它们表达的影响.方法 体外培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,共收集脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理0、1、2、4、8 h组细胞,每组含8份分别来自不同大鼠的细胞样本.收集细胞总mRNA(n=8)及总蛋白(n=6),利用RT-PCR及ELISA技术分别检测各组细胞CRH及Ucn mRNA转录水平及胞溶多肽含量.结果 RT-PCR结果显示,正常大鼠腹腔巨噬细胞中即有一定水平的CRH及Ucn mRNA,LPS刺激后二者水平均显著增高,刺激4 h二者均达峰值,约为对照组的2倍.ELISA结果显示,正常大鼠腹腔巨噬细胞即可表达CRH[(0.07±0.01)ng/107细胞]及Ucn[(1.00±0.48)ng/107细胞];LPS刺激促进了二者的表达,CRH水平在2 h达高峰[(0.30±0.07)ng/107细胞],Ucn水平在8 h达高峰[(8.68±1.25)ng/107细胞].结论 大鼠腹腔巨噬细胞同时表达CRH及Ucn,注适量LPS刺激后,两者表达水平均会显著上调,但Ucn多肽水平显著高于CRH.因此,炎症条件下的巨噬细胞可能是局部CRH家族特别是Ucn的潜在来源细胞.
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氨溴索对铜绿假单胞菌生物膜结构的影响
目的 建立铜绿假单胞菌生物膜(biofilm,BF)模型,探讨氨溴索对粘液型铜绿假单胞菌成熟BF的结构影响.方法 平板培养法培养铜绿假单胞菌7 d,得到成熟BF,用扫描电镜(scannmg electron microscope,SEM)观察氨溴索对BF形态结构的影响;激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)结合BF图像结构分析软件(image structure analyer,ISA)对BF结构参数分析;荧光显微镜定性观察氨溴索对BF内活菌的作用,并测定氨溴索单独作用以及与环丙沙星联用后BF内活菌的荧光强度.结果 氨溴索作用后电镜观察可见BF被破坏,基质样物变稀疏,仅见少量散在细菌.ISA软件定量分析显示:2 mg/ml氨溴索作用后,BF厚度、平均扩散距离(average diffusion distance,ADD)和结构熵(textual entropy,TE)均减少(P＜0.05);区域孔率(areal porosity,AP)增加(P＜0.05).0.75 mg/ml氨溴索干预后,有同样趋势,但效应不如高浓度明显.用荧光显微镜定性观察,当氨溴索浓度大于0.49 mg/ml时,BF内活菌数减少.同时,氨溴索与环丙沙星存在协同作用(F=15.1,P＜0.05),且随着氨溴索浓度升高,协同作用增强.结论 氨溴索可影响铜绿假单胞菌成熟BF形态结构,从而增强抗生素的杀菌活性.
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NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态特征
目的 研究NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态差异.方法 应用免疫组化SABC法,观察成年大鼠大脑皮质、海马、齿状回、丘脑、下丘脑等区域NG2免疫反应阳性细胞.采用Image-Pro Plus 5.0图像分析软件计数单位面积阳性细胞数量,并进行统计学分析.结果 NG2胶质细胞在成年大鼠多个脑区均有表达,其中大脑皮质的灰质、白质,海马、齿状回,丘脑室下区、下丘脑室周区等区域表达比较集中.成年脑内NG2胶质细胞突起丰富、有较多分支,细胞体呈星形但是在各脑区形态不完全一致.结论 NG2细胞是成年脑内另一类特殊胶质细胞,数量较多且一部分脑区集中表达.
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近视眼视网膜神经纤维层厚度与屈光因素关系的研究
目的 测定不同程度近视眼患者的视网膜神经纤维层厚度(retinal nerve fiber layer thickness,RNFLT),探讨其屈光度数、矫正视力和中央角膜厚度(central cornea thickness,CCT)对RNFLT可能的影响及相关性,以了解近视眼RNFLT的变化规律.方法 随机抽取2003年7月-2005年5月在我院就诊的近视眼患者90例(90眼),根据屈光度数分为3组:低度近视组:≤-3.00 D(14眼),中度近视组:-6.00～-3.00 D(47眼),高度近视组:＞-6.00 D(29眼,其中5眼＞-9.00 D).采用光学相干断层成像仪(OCT 3000,RNFLT 3.4)测定RNFLT,Pachymeter-SP-3000角膜测厚仪测定CCT,同时进行散瞳验光.结果 3个研究组的年龄、性别、矫正视力、CCT、上下方及鼻侧RNFLT经单因素方差分析无显著性差异(P＞0.05);低度近视组与高度近视组的颞侧RNFLT有显著性差异(P=0.012).各组RNFLT规律:下方＞上方＞颞侧＞鼻侧.参数法和非参数法相关性分析结果显示:高度近视组的总体平均RNFLT与等效球镜值显著正相关(r=0.372,P=0.047),其余参数的相关性不显著(P＞0.05).结论 近视眼RNFLT存在独特的变化规律,高度近视的RNFLT受等效球镜值影响.
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TH和GDNF双基因表达载体的构建及其在MES23.5细胞中的表达
目的 构建酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)双基因表达载体并检测其在体外的表达,为帕金森病提供新的治疗措施.方法 采用分子克隆技术,从pWAV2-TH质粒酶切获得人TH基因片段,将其克隆入真核表达质粒载体pIRES的上游,构建出pIRES-TH.PCR法扩增小鼠GDNF基因片段,克隆入pIRES-TH的下游,构建出携带TH和GDNF双基因的重组质粒pIRES-TH-GDNF.用酶切电泳验证重组结果的正确性,测序检测质粒重组后的序列.随后将重组质粒用Lipofectamine2000转染至MES23.5细胞,经G418筛选后,以RT-PCR及免疫荧光法检测TH和GDNF基因在mRNA及蛋白水平的表达.结果 重组质粒酶切后其片段大小与预期结果相同,测序发现基因序列完全正确.转染后MES23.5细胞中TH和GDNF基因的水平明显升高(P＜0.05).结论 重组pIRES-TH-GDNF质粒构建成功并能在体外正确表达TH和GDNF基因.
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拉米夫定对慢性重型乙型肝炎患者生存率的提高
目的 观察抗病毒药物拉米夫定对慢性重型乙型病毒性肝炎患者生存率的影响.方法 采用配对的回顾性队列研究方法,对1999年10月至2003年12月住院的慢性重型乙型病毒性肝炎患者,根据年龄、性别和病程3个变量对应用拉米夫定和未用拉米夫定治疗的患者进行匹配,比例为1:1.配对结果为拉米夫定治疗组103例,未用拉米夫定组103例.对研究对象进行随访并比较两组中位生存时间及生存率的差别.结果 拉米夫定治疗组中位生存时间为85 d,3年生存率为42.7%;未用拉米夫定组中位生存时间为35 d,3年生存率为23.4%,两组之间生存率有明显差异(P＜0.01).结论 应用拉米夫定治疗可提高慢性重型乙型病毒性肝炎患者的生存率.
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缺氧对大鼠白细胞粘弹性的影响
目的 研究急、慢性缺氧对中性粒细胞粘弹性的影响.方法 低压舱模拟高原复制缺氧模型,成年Wistar大鼠15只,随机分为常氧组、急性缺氧组(5 000 m减压3 d)和慢性缺氧组(5 000 m减压30 d).微管吸吮技术分析粒细胞粘弹性变化,标准线性固体模型拟合结果.结果 常氧组粒细胞弹性模量K1为(39.52±16.06)Pa,K2为(148.85±9.06)Pa,粘性系数μ为(2.28±1.11)Pa·s;急、慢性缺氧组各参数均显著增大(P＜0.05),K1为(86.66±26.84)Pa和(179.61±26.31)Pa,K2为(399.89±22.03)Pa和(472.12±30.36)Pa,μ为(4.23±1.82)Pa·s和(9.21±2.65)Pa·s;急性缺氧初始变形长度、大变形长度和时间常数较对照组显著减小(P＜0.05),但慢性缺氧组时间常数较对照组已无明显差异(P＞0.05).结论 急、慢性缺氧对粒细胞生物力学特性有明显影响,表现为细胞膜刚性增大,细胞变形性下降.
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穿膜肽TAT-p38αG融合基因的构建、表达及穿膜特性的鉴定
目的 构建穿膜肽TAT-p38αG融合基因,进行原核表达及穿膜特性鉴定.方法 提取人EVC304细胞总RNA,巢式PCR扩增p38αG基因片段,T-A克隆,测序证实片段无误后,将p38αG基因片段亚克隆入原核表达载体pTAT-HA,获得pTAT-p38αG融合基因表达载体.将表达载体转化大肠杆菌,IPTG诱导表达获得TAT-p38αG融合蛋白,并行Ni-NTA柱过柱和超滤纯化,抗His抗体免疫印迹法鉴定.采用荧光素FITC体外标记TAT-p38αG融合蛋白,与EVC304细胞共培养,荧光显微镜下观察其穿膜特性.结果 成功构建了融合基因原核表达载体pTAT-p38αG,并表达出大小约30×103的蛋白产物,与融合蛋白TAT-p38αG理论计算值相符.细胞实验结果显示,TAT-p38αG能呈浓度依赖性方式转导进入EVC304细胞.结论 TAT-p38αG融合蛋白具有良好的穿膜特性,研究为下一步鉴定TAT-p38αG融合蛋白对p38α激酶的抑制作用奠定了良好的实验基础.
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原位全肝移植术后肝内胆管狭窄的病因及诊治
目的 探讨原位全肝肝移植术后肝内胆管狭窄(intrahepatic biliary stricture,IBS)的发生原因及诊断和治疗方法.方法 回顾性分析自1999年2月至2007年2月间收治407例次原位全肝肝移植患者的临床资料.结果 407例次原位全肝肝移植术后共发生IBS 22例(5.4%).所有患者均通过核磁共振胆胰管成像(MRCP)和胆道造影获得诊断.供肝冷保存时间超过12 h(107例)、供受体ABO血型不符(13例)、术后肝动脉病变(5例)和原发病为重型乙型病毒性肝炎(91例)与肝移植术后IBS的发生显著相关(P＜0.05),其IBS的发生率分别为10例(9.3%)、4例、3例和10例(11.0%).肝移植术中放置胆道外引流管可降低IBS的发生率(2.5%).22例患者采用药物、内镜、放射介入、胆道外科手术及再次肝移植等方法治疗,有效率为77.3%(17例),治愈率为45.5%(11例),IBS相关的病死率为22.7%(5例),与IBS相关的移植物失功发生率为41.0%(9例).结论 供肝冷保存时间过长、供受体ABO血型不符、术后肝动脉病变及原发病为重型乙型病毒性肝炎等4项因素是肝移植术后IBS发生的高危因素.胆道造影和MRCP是诊断IBS的重要手段.根据胆管树的病变情况选择合适的治疗方法,是原位肝移植术后IBS患者获得良好疗效的关键.
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Survivin在先天性心脏病肺动脉高压发生机制中的作用
目的 研究抗凋亡因子存活素(survivin)在左向右分流性先天性心脏病肺动脉高压的致病过程中的作用和凋亡因素的作用机制.方法 应用免疫组化及原位缺口末端DNA标记技术,检测肺组织细胞凋亡情况.用免疫组化及Western blot检测凋亡相关蛋白survivin、bcl-2和bax的表达.结果 中、重度肺动脉高压患者肺组织血管的结构发生明显改建;先天性心脏病肺组织都有凋亡的细胞,但中、重度肺动脉高压患者凋亡细胞明显减少.Survivin、bcl-2在中、重度肺动脉高压组中表达强度明显增高,而bax表达明显减少.Survivin与凋亡及肺血管组织结构重构有明显的相关性.结论 在左向右分流血流作用下,Survivin等基因表达发生变化,使肺组织细胞凋亡减少,造成细胞堆积,参与肺血管结构改建,是肺动脉高压形成机制之一.
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低毒力菌株小鼠细菌性腹膜炎模型的建立
目的 将无菌鼠粪提取物(sterile rat fecal extracts,SRFE)应用于低毒力菌株小鼠急性细菌性腹膜炎模型的构建并评价其应用效果.方法 用SRFE和/或5%高活性干酵母液将菌液稀释至感染动物所需终浓度,每只小鼠腹腔注射0.5 ml菌液,比较添加前后低致死剂量的变化;比较SRFE浓度改变及与5%高活性干酵母液配伍体积比改变时小鼠死亡率的变化.结果 添加20%SRFE后,细菌的低致死剂量降低了78%～90%.增加SRFE的浓度,可提高小鼠死亡率.单用SRFE的效果并不理想,仍需与5%高活性干酵母液配伍使用.SRFE和5%高活性干酵母液不同体积比(2∶1或3∶1)时的小鼠死亡率无显著性差异(P＞0.05).结论 在建立低毒力菌株小鼠急性细菌性腹膜炎模型时SRFE的添加可有效降低细菌的低致死剂量.
关键词： 无菌鼠粪提取物 小鼠急性细菌性腹膜炎 -
丘疹样汗斑1例
1 临床资料患者,男,36岁,因胸、腹部及双上肢近端黄褐色丘疹3年,于2007年9月27日来我院就诊.患者3年前无诱因胸、腹部及双上肢出现多个绿豆大小圆形扁平状白色丘疹,无痒感,在我院就诊,真菌镜检阳性,外用抗真菌药物治疗1周后,皮疹全部消退,此后患者病情多次复发,多与闷热环境有关.
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经输尿管镜离体处理亲体供肾结石2例
供体肾结石因其潜在的导致尿路梗阻的风险,既往曾作为亲属供肾的明确禁忌证.近年来,随着腔内泌尿外科技术的发展,供肾结石有可能通过输尿管镜下取石和弹道碎石得到清除,从而有效扩大供肾来源,促进亲体肾移植的开展.
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52例结肠黑变病临床分析
结肠黑变病(melanosis coli,MC)是指结肠固有膜内巨噬细胞含有脂褐素样物质的一种黏膜色素沉着性病变,是一种少见的非炎症性的、良性可逆性疾病.近年来,随着便秘发病率的增加和结肠镜的应用,在中国人群中的检出率逐年上升.
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荨麻疹患者血清特异性IgE检测结果分析
为了解重庆地区荨麻疹患者过敏原情况,对近期送检至我科320例荨麻疹患者血清11类常见过敏原IgE抗体水平的检测分析,结果报告如下.
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脑胶质细胞瘤患者血清IGF-1表达的生物学意义
脑胶质细胞瘤的诊断主要依靠影像学检查,但病变早期影像学表现往往不明显.脑胶质细胞瘤的预后与其生物学行为特性密切相关,早期诊断、早期治疗对于改善患者预后有重要意义.临床上亟需某种指标用于早期诊断及预后评估,这对于脑胶质细胞瘤的防治有重要意义.
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昆布多糖硫酸酯抑制结肠癌细胞增殖
现行用于治疗结肠癌的化疗药物都存在一定的缺陷,昆布多糖硫酸酯(laminarin sulphate,LAMS)是一具有多种生物功能的多糖酯[1].现报告LAMS对抑制体外培养人结肠癌细胞株(human colon carcinoma cell line,LOVO)细胞的增殖、诱导凋亡及有关基因表达的影响,为LAMS用于治疗结肠癌提供理论依据.
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心脏外伤急诊体外循环冠状动脉搭桥1例
患者,男,26岁,因左前胸部刀砍伤后出现失血性休克后急送当地医院,入院查体患者面色苍白,意识模糊,呼吸浅快,约30次/min,血压70/50 mmHg,脉搏细速,心率140次/min,胸骨中下1/3处可见一横行大小约30 cm大小伤口,胸骨横断,伤口深达胸腔.
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B超引导下经皮穿刺置管治疗腹腔残余感染
腹腔残余感染是外科手术后及重症急性胰腺炎后期常见的并发症,临床上患者多表现为难以控制的高热、腹部胀痛及血象增高,我们采用B超引导下经皮穿刺置管引流治疗腹腔残余感染65例,疗效满意.
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约氏疟原虫红内期18S UrRNA和Pir基因扩增实验条件的研究
目的 扩增红内期约氏疟原虫相关基因方法的建立和优化.方法 收集约氏疟原虫感染昆明株小鼠抗凝全血,不处理或分别用淋巴细胞分离液去除白细胞、分离后破碎红细胞,提取总RNA,分别用Olig(dT)15和随机引物进行常规反转录,在不同的MgCl2浓度条件下,PCR扩增约氏疟原虫18S UrRNA和Pir基因.结果 经过淋巴细胞分离液分离处理组提取的RNA的纯度相对较高,可达1.9以上,但是3种处理方式在MgCl2浓度大于等于2 mmol/L条件下,可成功扩增出约氏疟原虫的Pir基因,但是只有随机引物进行反转录组才能成功扩增出18S UrRNA.结论 不处理疟原虫感染全血提取的RNA纯度较低,但是能在2 mmol/L MgCl2条件下成功扩增疟原虫相关基因;18S UrRNA只能从随机引物进行反转录组中成功扩增.
