坐骨神经结扎大鼠脑脊液补体异常活化与痛觉过敏的关系

目的 观察坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)后补体的变化特点,探讨脊髓补体异常活化与大鼠痛觉过敏的关系.方法 健康雄性SD大鼠40只分为假手术组、CCI组、生理盐水组和CVF组,对CCI组、生理盐水组和CVF组大鼠左侧坐骨神经进行松结扎,而假手术组只暴露左侧坐骨神经但不予任何处理,CVF组大鼠在术后腹腔注射眼镜蛇毒因子(CVF)进行干预,生理盐水组大鼠在术后腹腔注射等量的生理盐水作为对照CCI组.于术前和术后1～7 d每天测定大鼠的热痛阈值,采用免疫比浊法测定4组大鼠血清和脑脊液补体C3含量,并在第7天处死大鼠取L4～L6段脊髓,匀浆后测其补体C3含量.结果 ①CCI组大鼠在坐骨神经结扎后出现热痛觉过敏,而假手术组大鼠则无此变化,给予生理盐水并不能影响坐骨神经结扎后出现的热痛敏感现象,而给予CVF却能抑制CCI大鼠热痛敏感的发生;②假手术组、CCI组及生理盐水组大鼠血清补体C3含量手术前后无统计学差异;与术前相比,CCI组和生理盐水组术后大鼠脑脊液补体C3浓度升高显著(P＜0.01),CVF组大鼠血清和脑脊液补体C3含量明显减低;③术后第7天,CCI组大鼠脊髓中补体C3含量显著高于假手术组,生理盐水组大鼠脊髓中补体C3含量与CCI组相当,CVF组明显低于CCI组;④大鼠热痛阈值与血清补体含量无相关性,与脑脊液补体含量呈负相关.结论 外周神经损伤后,中枢神经系统存在补体异常活化现象,补体的这种变化特点与痛觉过敏的形成密切相关.

NF-κB及bcl-xL在口腔鳞癌引流淋巴结中的表达及意义

目的 研究核转录因子κB(nuclear transcription factor kappα,NF-κB)及其靶基因bcl-xL在口腔鳞癌引流淋巴结(炎性淋巴结、转移性淋巴结)中的表达及意义.方法 将所选口腔鳞癌病例引流淋巴结石蜡标本按病检结果分为炎性淋巴结组、转移性淋巴结组,应用免疫组织化学S-P法,检测NF-κB(p65)及bcl-xL在两组间的表达差异.结果 NF-κB(p65)在炎性淋巴结、转移性淋巴结中的阳性表达率分别为30.8%、76.9%,两组有显著性差异(P＜0.01);bcl-xL在炎性淋巴结、转移性淋巴结中的阳性表达率分别为33.3%、73.1%,两组有显著性差异(P＜0.01).结论 口腔鳞癌引流淋巴结从炎性淋巴结向转移性淋巴结的转变可能和NF-κB、bcl-xL表达变化有关.

TCF4/pcDNA3.0表达载体的构建及其在毛乳头细胞中的表达

目的 构建TCF4/pcDNA3.0表达载体,为深入研究T细胞因子4(T cell factor4,TCF4)基因在毛乳头细胞生物学功能调控中的作用和机制奠定基础.方法 从凝集性生长毛乳头细胞中提取总RNA,RT-PCR获得带有酶切位点的TCF4基因,亚克隆入pCDNA3.0载体中,并通过双酶切和测序确定序列和阅读框正确.稳定转染到毛乳头细胞中进行表达,检测稳定转染前后TCF4表达的变化.结果 从人毛囊毛乳头细胞中获得TCF4基因克隆;成功构建了真核表达载体.经过稳定转染在毛乳头细胞中上调了TCF4基因mRNA和蛋白水平表达,促进了毛乳头细胞的增殖和外分泌功能.结论 TCF4/pcDNA3.0表达载体能在真核细胞中表达.TCF4基因可以促进毛乳头细胞增殖.

SOCS3基因转染对人肺腺癌细胞株A549裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察细胞因子信号负调控因子3(suppressors of cytokine signaling 3,SOCS3)对人肺腺癌细胞株A549裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将A549细胞、稳定转染空载体的A549细胞、稳定转染SOCS3载体的A549细胞分别接种至裸鼠皮下,复制A549裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤率,测量肿瘤体积、瘤质量并绘制肿瘤生长曲线;免疫组织化学法和Western blot法检测肿瘤组织中信号转导和转录活化因子3(signal transduction and activators of transcription 3,STAT3)酪氨酸磷酸化水平.结果 与未转染组、空质粒转染组相比,SOCS3稳定表达组细胞裸鼠移植瘤生长缓慢,细胞成瘤数、瘤体体积和瘤质量显著降低(P＜0.01);瘤组织标本中酪氨酸磷酸化STAT3水平显著降低(P＜0.01).结论 SOCS3能显著抑制A549细胞在体内的生长能力,其机制可能与下调细胞内STAT3活性水平有关.

LRIG1诱导人胶质瘤细胞凋亡与表皮生长因子受体基因关系

目的 研究LRIG1诱导神经胶质瘤细胞的凋亡作用,探讨LRIG1对表皮生长因子受体信号转导通路抑制效应的分子机制.方法 采用Lipofectamine介导的基因转染技术,将质粒pcDNA3.1-LRIG1转染原代神经胶质瘤细胞,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测转染后胶质瘤细胞LRIG1和EGFR mRNA与蛋白水平的变化,Western blot方法检测神经胶质瘤细胞PKCα、Bax、bcl-2蛋白水平的变化.MTT法和流式细胞技术分析细胞的增殖和凋亡的变化.结果 细胞中转染pcDNA3.1-LRIG1组中以LRIG1 mRNA和蛋白质的表达水平较未处理组和转染空载体组明显升高,而EGFR mRNA和蛋白质的表达水平较对照组和转染空载体组明显降低,PKCα、Bax表达上调,bc1-2表达下降,胶质瘤细胞生长受到抑制,凋亡显著增强.结论 LRIG1可能通过参与形成EGFR的负反馈环,从多种途径抑制了肿瘤的生长.

皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的 进一步明确天然糖皮质激素对巨噬细胞免疫功能的影响及其时效和量效关系.方法 收集大鼠腹腔巨噬细胞,分别用10～1 000 ng/ml的皮质酮(corticosterone,CORT)刺激,检测细胞的黏附、趋化和吞噬功能;使用ELISA试剂盒检测细胞培养上清中TNF-α的含量.结果 50 ng/ml的皮质酮显著增强巨噬细胞的黏附功能(P＜0.05),10 ng/ml和50 ng/ml的皮质酮刺激细胞后,其趋化功能均显著增加(P＜0.05).同时,50 ng/ml的皮质酮还可显著增强巨噬细胞的吞噬功能(P＜0.05)和促进巨噬细胞分泌TNF-α(P＜0.01),而使用高浓度皮质酮(500 ng/ml和1 000 ng/ml)处理时,巨噬细胞的上述功能增强趋势减弱或无增强;在0.5～5 h范围内,皮质酮处理1 h时细胞的吞噬功能和分泌TNF-α的功能增强明显,刺激更长时间后其功能的增强趋势逐渐减弱.结论 一定剂量的天然糖皮质激素急性刺激可明显增强免疫功能.

CXCR4在VEGF-C介导的胃癌淋巴道转移中的作用

目的 探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与胃癌淋巴道转移的关系,为研究干预胃癌淋巴转移的新方法提供理论依据.方法 采用RT-PCR方法检测86例胃癌组织中趋化因子受体CXCR4 mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与胃癌淋巴结转移的关系;Boyden趋化小室法检测CXCR4不同表达状态胃癌细胞的趋化活性和趋化抑制性.结果 86例胃癌组织均有不同程度的CXCR4 mRNA和VEGF-C mRNA的表达.53例CXCR4 mRNA呈高表达,表达率为61.63%,VEGF-C mRNA高表达率为56.98%(49/86);VEGF-C mRNA高表达组中的CXCR4 mRNA的表达率也较高;CXCR4 mRNA的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关(P＜0.05);CXCR4的配体SDF-1对胃癌细胞的平均趋化率为81%,经抗CXCR4单克隆抗体处理后癌细胞的平均趋化率下降至30%,CXCR4被特异性抗体封闭前后的癌细胞趋化活性有显著性差异(P＜0.05).结论 胃癌CXCR4的表达和VEGF-C的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关;CXCR4的功能状态影响胃癌细胞的迁移活性.通过干预趋化因子受体CXCR4和VEGF-C的活性可能成为阻断胃癌淋巴转移的新靶点.

人乳腺癌细胞HYAL1基因真核表达载体的构建及其在MCF-7和ZR-75-30细胞中的表达

目的 构建人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体并稳定转染HYAL1基因低表达的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞株,为进一步探讨HYAL1基因在乳腺癌的侵袭和转移中的作用奠定基础.方法 采用RT-PCR技术从高表达HYAL1的人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S中扩增透明质酸酶HYLAL1基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建的重组表达质粒经脂质体介导转染HYAL1基因低表达的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞.结果 用RT-PCR成功地扩增出1条1 332 bp的DNA片段,经限制性内切酶酶切分析和DNA测序证明已经成功构建了人乳腺癌HY-AL1基因的真核表达载体.RT-PCR证明转染了重组质粒的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞可以高效稳定的表达HYAL1基因,且其穿透细胞外基质的能力增强.结论 成功构建了人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体,获得了稳定表达人HYAL1基因的MCF-7和ZR-75-30细胞克隆,且其侵袭能力增强.

人工锌指蛋白真核表达载体的构建及表达

目的 构建人工锌指蛋白ZFP基因的真核表达载体,检测其在真核细胞的表达情况,从而探讨人工锌指蛋白作为人工转录因子DNA结合域的可能性.方法 全基因合成人工锌指蛋白(putative zinc finger protein,ZFP)的核酸序列并克隆入pEGFP-N1及pIRES2-EGFP真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-N1/ZFP及pIRES2-EGFP/ZFP-Flag,通过酶切、菌落PCR及测序来鉴定重组载体的正确性.脂质体DOTAP体外转染重组质粒于COS-7细胞中,用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot方法鉴定ZFP在该细胞中的表达.结果 正确构建了pEGFP-N1/ZFP、pIRES2-EGFP/ZFP-flag重组表达质粒,并且在COS-7细胞中成功进行了人工锌指蛋白ZFP的表达.结论 采用生物信息学手段获得的假定的锌指蛋白基因序列可以在真核细胞内正常表达.

人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定

目的 构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况.方法 用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,利用脂质体介导的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-BMP-7转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒Ad5-BMP-7,并在其中包装扩增病毒.采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HKC细胞感染效率的检测.结果 酶切鉴定及PCR结果证明BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达1.25 × 1010PFU/ml,对HKC有较强感染能力.结论 应用细胞内同源重组方法成功构建了含人BMP-7基因的重组腺病毒载体.

前列腺结石患者结石中纳米细菌的分离和16S rRNA基因的鉴定

目的 检测纳米细菌在前列腺结石中的分布情况,探讨其在前列腺结石发病中的作用.方法 采集前列腺结石患者的前列腺结石标本,分离培养纳米细菌,采用PCR法对纳米细菌16S rRNA基因进行扩增,电泳分析结果并测序.结果 将PCR得到的特异性片段的测序结果与已知纳米细菌16S rRNA序列进行比较,相似度为98%:分值=2 480 bits(1290),期望值=0.0;相似度=1387/1409(98%),缺失=4/1409(0%);链=正/正.结论 PCR法和测序可以作为纳米细菌16S rRNA基因的检测手段;前列腺结石患者的结石中存在着纳米细菌的感染.

TNF-α对体外培养豚鼠耳蜗血管纹微血管内皮细胞通透性的影响

目的 研究TNF-α对体外培养豚鼠耳蜗血管纹微血管内皮细胞通透性的影响.方法 体外分离培养豚鼠耳蜗血管纹微血管内皮细胞并建立耳蜗血管纹微血管内皮细胞通透性体外模型,实验分TNF-α组和对照组.依据作用时间和浓度不同,检测其对伊文思蓝的通透率变化.结果 TNF-α能显著增加耳蜗血管纹微血管内皮细胞的通透性,使伊文思蓝的通透率显著升高(P＜0.01),且随TNF-α浓度升高和作用时间的延长而升高.结论 TNF-α可以显著的增加耳蜗血管纹微血管内皮细胞的通透性.

类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞的差异蛋白质谱分析

目的 应用双向凝胶电泳-质谱法分析正常人及类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜成纤维细胞蛋白质组表达差异,探讨差异蛋白在类风湿关节炎发病中的作用.方法 采用固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离正常人及类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞总蛋白质,银染显色,PDQuest软件分析图像,比较两种细胞蛋白质组表达差异,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定,并用Western blot验证部分表达差异蛋白质.结果 ①采用窄范围的pH 4～7 IPG胶条进行2-DE分析,正常人及RA患者滑膜细胞蛋白胶图上分别平均显示852、837个点.有49个蛋白点在正常、RA滑膜细胞间有2倍以上的显著性量变.②分别在胶图上共选取40个表达水平存在明显差异的蛋白质点进行质谱鉴定,鉴定出23个在RA患者滑膜细胞中表达上调蛋白质.Western blot验证Enolaseα、Annexin Ⅰ、Cathepsin D、SOD2、Peroxiredoxin 2在RA滑膜细胞中表达显著升高.结论 正常人及类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞表达蛋白质组存在差异.这些差异蛋白可能参与类风湿关节炎的发病.

唑来膦酸联合单次或多次分割放射治疗转移性骨痛的临床分析

目的 观察唑来膦酸联合单次或多次分割放射治疗转移性骨痛的疗效和毒副反应.方法 98例骨转移患者分A和B两组.A组为唑来膦酸联合单次分割(8 Gy/1F)照射组,共48例.B组为唑来膦酸联合多次分割(30 Gy/10F)照射组,共50例.结果 A组和B组疼痛缓解率分别为91.7%和92.0%,活动能力改善总有效率为89.6%和90.0%,毒副反应率相似,两组间比较无统计学差异(P＞0.05).结论 唑来膦酸联合单次与多次分割放射治疗转移性骨痛的疗效相似.推荐临床采用唑来膦酸联合单次分割放射治疗转移性骨痛,其安全、有效、经济、方便.

TSG101-siRNA对肝癌耐药细胞株QGY/CDDP的逆转作用

目的 构建TSG101(tumor susceptibility gene101)小干扰RNA(TSG101-siRNA)的真核表达载体,观察RNA干扰沉默TSG101基因后化疗药物顺铂(CDDP)对肝癌耐药细胞株QGY/CDDP增殖的影响.方法 根据小干扰RNA的设计原则由计算机软件辅助设计TSG101的靶序列,应用DNA重组技术将目的序列克隆入小干扰RNA的表达载体;RT-PCR检测TSG101-siRNA对QGY/CDDP细胞tsg101mRNA表达的影响;Western blot检测TSG101-siRNA对TSG101基因表达蛋白的抑制效率;采用MTT法测定TSG101-siRNA联合化疗药物CDDP对QGY/CDDP的增殖抑制作用.结果 测序显示干扰载体构建成功,TSG101-siRNA能抑制tsg101 mRNA表达,使QGY/CDDP细胞TSG101蛋白的表达下降,抑制QGY/CDDP细胞的增殖,明显增强CDDP对QGY/CDDP的增殖抑制.结论 TSG101-siRNA的真核表达载体能有效地抑制QGY/CDDP细胞的增殖,提高化疗药物CDDP对QGY/CDDP的抑制率,能逆转肝癌耐药细胞株QGY/CDDP对CDDP的耐药性.

内毒素结合蛋白样分子p48体内外生物学活性的初步研究

目的 以LBP为对照,对比研究p48的体内、外生物学功能.方法 采用生物传感器、流式细胞分析技术研究p48与LPS及Lipid A的结合力.通过体外培养人单核细胞(U937)和小鼠体内TNF-α的分泌实验,研究p48的生物学功能.采用ELISA方法初步探索p48与LBP是否具有一定相似的空间结构.结果 p48能促进LPS与PBMC结合,其活性为LBP的81%.p48能与LPS及Lipid A结合,其亲和常数(KD)分别为1.59×10-6、1.48×10-6mol/L.体内外实验中p48均能促进TNF-α的分泌,其生物学活性约为LBP的77%.高浓度抗NH-LBP Fab抗体能与p48特异性结合,p48部分空间结构与LBP可能有一定的相似性.结论 p48具有与LBP相近似的生物学功能,在机体炎症反应中也发挥较重要的作用.

新生儿脐血单个核细胞ICOS与转录因子表达的观察

新生鼠及人脐血的研究均表明,新生儿T细胞有向Th2细胞发育的潜能.可诱导共刺激因子(inducible co-stimulate factor,ICOS)是近年来发现表达在活化T淋巴细胞表面的一种新型膜分子,转录因子T-bet、GATA-3和Foxp3分别是Th1、Th2和CD4+CD25+调节性T细胞的特异性转录因子,它们均可影响T细胞分化的上游调节.

腮腺区域切除术在腮腺良性肿瘤治疗中的临床应用

手术切除是腮腺良性肿瘤目前有效的治疗方法,经典术式为了减少肿瘤的复发[1],手术范围大,面神经损伤明显,面部凹陷畸形明显,同时忽略了手术对患者的社会心理的影响.

垂体促甲状腺素瘤1例

垂体促甲状腺素(thyroid-stimulating hormone,TSH)瘤是一种罕见的垂体肿瘤.我院确诊垂体TSH瘤1例,现报告如下.

原发性眼眶淋巴瘤的CT、MRI表现

眼眶淋巴瘤(orbital lymphoma)在眶部肿瘤发病中占10.33%[1],结膜受累的患者具有特征的鱼肉样外观,临床诊断较容易,而眶深部的淋巴瘤诊断困难,主要通过病理诊断,影像学研究的积累较少,少见将MRI信号表现与CT密度对照观察的文献报道.

16排螺旋CT血管成像技术在主动脉疾病中的应用价值

目的 评价16排螺旋CT血管成像技术在主动脉疾病中的应用价值.方法 20例临床怀疑主动脉疾病的患者进行平扫,再用追踪触发技术,进行增强扫描和图像重建.结果 主动脉夹层13例,主动脉瘤7例,均能显示主动脉夹层范围及主动脉瘤与周围组织的关系.结论 16排螺旋CT在主动脉疾病的诊断中占有重要的地位.

气态甲醛吸入诱导大鼠急性肺水肿的实验研究

目的 探讨大鼠吸入气态甲醛诱导急性肺水肿动物模型的方法.方法 大鼠随机分为对照组和甲醛组,甲醛组大鼠放入鼠笼并置于正方体染毒箱中盖好,内置一定量钠石灰吸收CO2和水蒸气,以加氧泵连接导管插入盛有甲醛原液的烧杯通气供氧并促进甲醛挥发,并定期向箱内喷入一定甲醛雾化气体,让大鼠持续吸入高浓度甲醛诱发急性肺水肿.2 h后取出大鼠,5 h后处死称体质量及心、肺质量,计算心肺系数和肺指数,并取肺组织作病理切片.对照组大鼠处理同上,但甲醛换为生理盐水.结果 与对照组比较,甲醛组肺肿大,边钝圆,切开有红色液流出,病理切片显示肺组织肿胀,肺间质增厚,毛细血管和肺泡结构破坏;甲醛组心肺系数显著增大(P＜0.01),肺指数也显著增大(P＜0.01).结论 大量气态甲醛吸入可造成大鼠急性肺水肿.

加强肾脏病一体化治疗的基础和临床研究

西南医院肾科是1998年将肾移植与原肾内科合并成立的内外科结合科室,经过近10年的运行,逐渐建立并完善了肾脏病一体化治疗的人才队伍,在肾脏病诊断治疗、血液净化、肾移植等肾脏病一体化治疗基础研究和临床实践中取得了一些成绩.

参考文献类型及标识

我校2007年度重要科技成果奖励项目简介(一)

小剂量干扰素α联合利巴韦林治疗肾移植术后继发丙型病毒性肝炎患者的疗效观察

目的 观察小剂量干扰素α联合利巴韦林对肾移植术后继发丙型病毒性肝炎患者的疗效及安全性.方法 采用小剂量干扰素α 50 μg每周1次皮下注射,同时口服利巴韦林600 mg/d治疗5例肾移植术后继发丙型病毒性肝炎患者,并每月复查血常规、肝功能、肾功能和HCV-RNA.结果 在治疗12周后,有4例出现血清ALT转为正常,HCV-RNA阴性(＜100拷贝/ml)的早期应答,在治疗结束时这些患者出现完全应答,1例患者出现部分应答;治疗过程中,5例患者血肌酐均在正常范围内波动,并未见急性排斥反应;副反应主要为不同程度的白细胞、血红蛋白降低及低热、肌痛,但均未影响治疗.结论 小剂量干扰素α联合利巴韦林治疗肾移植术后继发丙型病毒性肝炎具有较好的临床疗效,未诱发移植肾排斥反应,副反应较轻,值得临床进一步使用.

供体特异性输血在亲体肾移植的初步分析

目的 探讨供体特异性输血对亲体肾移植患者围手术期并发症和术后人肾存活率的影响.方法 将我院2005-2007年收治的52例亲体肾移植患者按是否进行供体特异性输血分为供体输血组和对照组,供体输血组于术前3 d采集全血200～400 ml,术中用于受者;对照组术中随机使用库存血.对比分析两实验组在肾移植后移植肾的功能(血肌酐测定)、急性排斥反应发生率、移植肾功能延迟恢复(delayed graft function,DGF)发生率.结果 供体输血组和对照组在供肾GFR、HLA配型、供者和受者年龄方面无显著差异(P＞0.05).供体输血组术中输供体全血(334±56.4)ml,随机输注浓缩红细胞(238±105)ml;对照组输注浓缩红细胞(698±243)ml.供体输血组与对照组术后1周血肌酐水平无显著差异(P＞0.05),术后急性排斥反应和DGF发生率低于对照组(分别为3.57%、16.67%).结论 供体特异性输血可明显减少移植术中库存非亲体血使用量,减少术后急性排斥和DGF发生率,有效提高了移植受者围手术期的成功率.

还原型谷胱甘肽对维持性血液透析患者氧化应激和微炎症状态的影响

目的 探索药物预处理透析器的临床应用价值以及使用还原型谷胱甘肽的佳方案.方法 2006年1-6月我院住院和门诊接受维持性血液透析患者51例,分为口服还原型谷胱甘肽组、透析前还原型谷胱甘肽预处理组、口服+预处理双重干预组进行6周治疗.同时设立健康对照组.治疗6周后检测血中超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)的变化并进行分析.结果 无论采用还原型谷胱甘肽口服还是预处理透析器,均能有效地减少患者血中CRP、IL-6、TNF-α、AOPP、MDA水平.而同时采用这两种措施干预则疗效更佳.结论 使用还原型谷胱甘肽预处理透析器能够有效改善患者的氧化应激和微炎症状态,而且与口服治疗的疗效相当.而同时采用两种方式干预疗效好于单独使用,且观察期间无明显不良反应.

具有肾小球弥漫结节样改变的肾脏病理诊断

目的 探讨肾小球弥漫结节样改变的病理学诊断特征.方法 回顾性总结分析127例肾小球以弥漫结节样改变为主的肾活检患者的病理诊断.结果 肾小球弥漫结节样改变在糖尿病肾病、淀粉样变性肾损害、膜增生性肾炎、Ⅳ型狼疮性肾炎中为常见,还可见于轻链沉积病、冷球蛋白血症肾损害等少见疾病中.结论 肾小球弥漫结节样改变可有多种不同的肾脏病理诊断,我们应结合临床和实验室数据进行相应的鉴别诊断.

VEGF165基因转染EPCs移植对大鼠阿霉素肾病组织学的影响

目的 构建含血管内皮生长因子165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF165),转染血管内皮祖细胞(EPCs)后,观察其对阿霉素肾病大鼠肾脏组织学的影响.方法 用细菌内同源重组法构建含VEGF165基因的重组腺病毒Ad-VEGF165,通过PCR和Western blot鉴定所构建的腺病毒.贴壁法体外培养获得大鼠骨髓来源的EPCs,Ad-VEGF165体外转染EPCs,检测转染后目的基因的蛋白表达.大鼠阿霉素肾病模型形成过程中,尾静脉注射转染Ad-VEGF165的EPCs,在第16周时观察肾脏组织学变化.结果 PCR和Western blot证实构建的重组腺病毒含有目的基因,滴度为1.4×1010PFU/ml;培养第6天的EPCs用于Ad-VEGF165转染,转染后24 h,培养上清中VEGF蛋白表达较对照组和转染前增加.转染了VEGF165基因的EPCs移植后第12周(切肾术后16周),转染组的肾小球硬化和肾小管间质纤维化的程度明显较肾病组轻.结论 转染了VEGF165基因的EPCs可以减轻阿霉素肾病的肾小球和肾小管的损伤程度,为VEGF在慢性肾脏病治疗提供了实验基础.

静脉麻醉下无痛肾活检759例的有效性及安全性评价

目的 测量评价短暂静脉麻醉下经皮肾活检方法(无痛肾活检)的有效性及安全性.方法 我院自2006年5月始采取短暂静脉麻醉下进行非移植肾经皮肾活检,选取至2007年7月,12岁以上肾活检者共759例.同时回顾我科2005年3月至2006年4月12岁以上局麻下肾活检病例共757例.比较两组肾活检患者肾活检穿刺成功率、术后并发症、标本肾小球数量等.结果 两组平均年龄无显著性差异[分别为(26.84±11.47)、(27.35±11.82)岁,P＞0.05].无痛组单针取材成功率高于局麻组(分别为94.9%、92.0%,P＜0.05).无痛组标本肾小球数量多于局麻组[分别为(21.5±5.72)、(17.4±4.67),P＜0.05].无痛组穿刺后肉眼血尿4例,肾周血肿2例;局麻组肉眼血尿6例,肾周血肿3例;无痛组穿刺后腰痛发生率低于局麻组(分别为18.3%、35.2%,P＜0.05).结论 短暂静脉麻醉下无痛肾活检术是一种更有效、更安全的肾活检方法,可行性好,值得临床推广.

晚期氧化蛋白产物诱导血管平滑肌细胞表达MCP-1及其信号转导通路的研究

目的 研究p38有丝分裂素激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,MAPK)在晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)诱导的鼠血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1表达中的作用.方法 使用200和400 μmol/L AOPP分别以不同时间刺激培养的鼠血管平滑肌细胞,在阻断实验中加入特异性p38MAPK阻断剂SB203580阻断p38MAPK信号转导通路.采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞中MCP-1和磷酸化p38MAPK的表达情况.结果 用特异性p38MAPK阻断剂SB203580预处理后,400 μmol/L AOPP刺激4 h的鼠血管平滑肌细胞MCP-1表达(平均灰度值)从42.00±0.95降至9.35±1.35受到显著抑制(P＜0.01).结论 ①p38MAPK信号转导途径参与了AOPP诱导的鼠血管平滑肌细胞MCP-1的表达.②晚期氧化蛋白产物促进平滑肌细胞MCP-1 mRNA和蛋白表达可能是其致动脉粥样硬化机制之一.

肾脏病理对2型糖尿病患者合并原发性肾脏病的诊治意义

目的 探讨肾脏病理对2型糖尿病患者合并原发性肾脏病诊治的指导意义.方法 我科2004年1月至2007年8月收治的49例合并肾脏损害行肾活检的2型糖尿病患者,回顾性分析其肾脏病理类型、临床表现及治疗情况.入选标准:糖尿病病程小于5年;无明显糖尿病视网膜病变;肾功能快速恶化;短期内出现大量蛋白尿;明显血尿;排除其他可能导致肾损害的继发性疾病者.根据其不同的病理类型进行治疗、观察其治疗结果.结果 ①49例患者中43例(87.76%)伴发不同病理类型的原发性肾脏病;②2型糖尿病伴原发性肾脏病患者相同的临床表现可有不同的肾脏病理类型;③根据患者不同病理类型及临床表现,在严格控制血糖基础上,予不同的激素和/或特殊免疫抑制剂治疗方案,患者多可得到有效缓解.结论 通过肾活检明确肾脏病理类型对2型糖尿病患者原发性肾脏病的早期诊断及治疗方案的选择具有指导意义.