第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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神经病理性痛大鼠背根神经节P2X3受体表达及电生理学特性的改变
目的 观察坐骨神经缩窄性损伤(CCI)致神经病理性痛后大鼠背根节神经元P2X3受体的表达和电生理学特性的变化.方法 应用免疫组化技术观察CCI后不同时间相应节段(L4、L5、L6)脊髓及背根神经节P2X3受体表达的变化;全细胞膜片钳技术观察CCI后不同时间L4、L5、L6节段背根节神经元ATP反应电流的变化.结果 CCI后7、14 d,损伤同侧L4、L5、L6节段背根节P2X3免疫阳性神经元数量明显增加,而且染色加深,相应节段的脊髓背角浅层P2X3免疫反应性亦明显增加.CCI后7、14 d,损伤同侧相应节段背根节产生ATP快反应电流的细胞数量明显增加,电流幅度亦增强.应用非选择性P2X受体拮抗剂Suramin能明显抑制ATP反应电流.结论 坐骨神经缩窄性损伤致神经痛后同侧对应节段的背根节神经元P2X3受体表达明显增加,ATP快反应电流明显增强.
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干扰组蛋白乙酰化引发间充质干细胞心肌定向分化特定蛋白的异常表达
目的 利用组蛋白乙酰化修饰关键因子Gcn5 shRNA重组质粒转染经5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导后的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并检测心肌早期发育相关结构和功能蛋白表达情况,探讨组蛋白乙酰化修饰在MSCs定向分化过程中的调控作用.方法 ①以组蛋白乙酰化修饰关键因子Gcn5为靶点,用带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GrP)基因的pGenSil-1作为载体,构建Gcn5 shRNA质粒.②MSCs体外扩增,5-aza诱导后,不同的时间点用脂质体包载Gcn5 shRNA共转染大鼠MSCs,24 h后相差显微镜下观察细胞生长状况,电镜下观察染色质的形态变化,采用Western blot法分别检测Gcn5、心肌结构重链蛋白(myosin heavy chain,MHC)和连接蛋白(Connexin 43,Cx43)的表达状况.结果 电镜示经通用阴性质粒HK转染的MSCs细胞,形态与正常MSCs无明显差别,染色质仍以边集状态为主;经干扰质粒转染的MSCs细胞在形态上与正常MSCs细胞无明显差别,但其染色质出现明显的浓缩紧密现象.以β-actin为内参,比较干扰组和阴性对照组Gcn5、Cx43、MHC蛋白,计算出沉默效率分别为86%、58%和67%.结论 转染Gcn5 shRNA质粒可干扰组蛋白乙酰化平衡,进而影响MSCs体外分化中心肌发育特定蛋白的表达.
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脂多糖结合蛋白的B细胞抗原表位预测及其效应初步分析
目的 预测人脂多糖结合蛋白(LBP)的B细胞抗原表位.方法 采用生物信息软件和互联网服务器,预测LBP的二级结构和分析LBP表面特性(亲水性、可塑性、可及性和抗原性),再计算平均抗原指数(AI),预测LBP的B细胞抗原表位.结果 LBP存在多个潜在的抗原表位,247～260序列(FKGEIFHRNHRSPV)的AI(0.040 7)明显高于其他片段,370～379序列(LPSSSKEPVF)和303～325序列(ITDDMIPPDSNIRLTTKSFRPFV)的AI分别是0.033 6和0.029 5.247～260序列是LBP潜在的B细胞优势抗原表位.结论 应用多参数预测到LBP的B细胞抗原表位.
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幽门螺杆菌感染与Barrett食管关系的研究
目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter priori,Hp)与Barrett食管发生的关系.方法 共收集206例患者,其中Barrett食管患者106例(肠化型36例),GERD患者50例,另选无上诉疾病者50例作为正常对照.采用快速尿素酶法(rapid urease test,RUT)及Warthin-Starry银染两种方法检测Hp感染.结果 正常对照组、GERD组、Barrett食管组以及Barrett食管肠化组食管下段黏膜Hp检出率分别为10.0%(5/50)、20.0%(10/50)、15.1%(16/106)和16.7%(6/36).虽然后3组食管下段Hp检出率略高于对照组,但各组间Hp检出率无显著性差异(P>0.05).胃窦部Hp的检出率在正常对照组为60.0%(30/50),GERD组为32.0%(16/50),Barrett食管组为31.1%(33/106),Barrett食管肠化组为30.6%(11/36).GERD和Barrett食管胃窦部Hp检出率显著低于正常组.结论 Hp对GERD及Barrett食管可能有保护作用.
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人α-防御素5在毕赤酵母中分泌表达的研究
目的 探索人α-防御素5成熟肽(mHD5)在酵母中高效分泌表达的可行性.方法 PCR扩增获得酵母菌偏好的mHD5密码子序列,应用基因重组方法构建表达质粒,电击转化酵母菌株GS115,应用G418浓度梯度、表型和PCR技术筛选高拷贝转化株.经摇瓶发酵和甲醇诱导,Tricine-SDS-PAGE分析重组mHD5(rmHD5)表达量,并采用Western blot鉴定.选用琼脂扩散法检测rmHD5的抑菌活性.结果 构建了pPIC9K-mHD5酵母表达质粒.筛选得到3株His+/Mut+表型,且耐受8 mg/ml G418的多拷贝转化酵母菌株,成功获得表达量约120 mg/L的发酵上清.rmHD3对大肠杆菌(EC25922)和金黄色葡萄球菌(SA25923)2种标准菌株均具有明显的抑菌活性.结论 防御素基因可以在毕赤酵母中实现分泌型离表达,此策略可能是抗菌肽工业化开发的有效途径之一.
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导HeLa细胞凋亡的差异蛋白质组分析
目的 比较分析肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡前后蛋白质组中的差异表达蛋白,以进一步了解TRAIL的作用机制.方法 以TRAIL诱导人宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡为模型,用双向电泳技术分离HeLa全细胞蛋白质,MALDI-TOF质谱鉴定,MS-FIit数据库分析,RT-PCR半定量方法检测JNK2的表达.结果 鉴定得到12个明显的差异蛋白点,其中8个蛋白点上调,4个蛋白点下调.JNK2的表达与TRAIL有良好的量效关系.结论 JNKK、MAPKAPK-2、Dip13 beta、SHPS-1、DDBb、JEM-1、Macoilin、Leucine-rich repeat-containing protein 14、Ena/VASP-like protein、PTPase-MEG2,GRB10 adaptor protein、THUMP domain-containing pro-tein 1为TRAIL诱导HeLa细胞凋亡的新的相关蛋白.
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缓激肽B1受体在严重烫伤大鼠内脏血管通透性变化中的作用
目的 探讨严重烫伤大鼠内脏血管通透性的变化及缓激肽B1受体在其过程中的作用.方法 成年SD大鼠90只,体质量250～300 g,分为正常对照组(N组)、假烫伤组(S组)、单纯烫伤组(B组)、假烫伤+缓激肽B1受体特异性抑制剂组(SI组)和烫伤+缓激肽B1受体特异性抑制剂组(BI组).s组仅补液不烫伤,B组和BI组大鼠均造成30%Ⅲ度烫伤并补液后,分别于伤后0、3、6、12、24 h和48 h取肺、心、肾、小肠,通过伊文思蓝(Evan's Blue,EB)法测定各脏器血管通透性变化.结果 与S组比较,B组大鼠各脏器组织中EB含量显著增加,在伤后3 h达高峰,24 h内均处于较高水平,伤后48 h内基本恢复到正常水平;静脉注射缓激肽B1受体特异性抑制剂后,BI组与各时相点单纯烫伤组比较,各脏器EB含量显著降低.结论 缓激肽B1受体特异性抑制剂可有效降低严重烫伤大鼠伤后主要脏器血管通透性.
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重复经颅磁刺激对帕金森模型小鼠纹状体VMAT-2和SYN表达的影响
目的 探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic,rTMS)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型鼠纹状体多巴胺(dopamine,DA)含量及Ⅱ型单胺囊泡转运体(vesicular monoamine transporter-2,VMAT-2)和突触体素(synaptophysin,SYN)表达的影响.方法 65只雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组、PD模型组、假磁刺激组、rTMS-1组、rTMS-2组,每组13只.小鼠皮下注射MPTP(15 mg·kg-1,每小时注射1次,注射4次)复制帕金森病模型,重复经颅磁刺激干预,利用高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)测定纹状体DA含量;免疫组织化学染色检测VMAT-2和SYN的表达变化,并借助图像分析系统对其进行定量分析.结果 rTMS-1组和rTMS-2组纹状体DA含量较对照组明显减少(P<0.01),但显著高于PD模型组和假磁刺激组(P<0.01);rTMS-1组和rTMS-2组纹状体VMAT-2和SYN表达均明显少于对照组且显著高于PD模型组和假磁刺激组,其免疫反应产物校正光密度值(COD)均显著低于对照组(P<0.05),并显著高于PD组和假磁刺激组(P<0.05),TMS-1组和rTMS-2组间无显著差异.结论 rTMS可诱导PD鼠纹状体区DA释放增加,并使VMAT-2和SYN表达上调.
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氨氯地平对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭影响的体外实验
目的 探讨氨氯地平对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231体外侵袭的影响及其相关机制.方法 用8.34 μmol/L氨氯地平处理肿瘤细胞,以人工重组基底膜侵袭小室(Transwell)观察氨氯地平对MDA-MB-231细胞侵袭的影响;免疫细胞化学方法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix met-allo-proteinaae,MMP-9)的表达.结果 8.34 μmol/L的氨氯地平可显著抑制MDA-MB-231细胞的侵袭能力,侵袭抑制率为36.27%;免疫细胞化学检测结果显示,MMP-9和VEGF蛋白的表达在MDA-MB-231细胞中亦明显降低.结论 氨氯地平对MDA-MB-231细胞体外侵袭具有明显的抑制作用,此作用与降低肿瘤细胞的MMP-9和VEGF的表达有关.
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重庆地区正常(牙合)人群颅颌面硬组织结构特征的Delaire头影测量初步研究
目的 采用Delaire头影测量方法分析重庆地区正常(牙合)人群的颅面硬组织结构特征,建立重庆地区正常(牙合)人群Delaire头影测量方法的参考标准以指导正畸和正颌治疗.方法 采用计算机辅助Delaire头影测量方法对重庆地区高校学生中95例正常(牙合)人群(男性44例,女性51例,年龄18～23岁)的颅颌面硬组织标记进行测量,结果进行统计学处理并与法国地区正常(牙合)参考值进行对比分析.结果 取得了95例中国重庆地区正常(牙合)人群Deliare头影测量分析法中各测量项目的 均值及标准差,分析得出中国重庆人与法国人颅面部硬组织结构的特征和差异.结论 建立了重庆地区正常(牙合)人群Delaire头影测量方法的参考标准.
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经导管介入治疗瓦氏窦瘤破裂的临床疗效及其安全性
目的 探讨经导管介入治疗瓦氏窦瘤破裂的临床疗效与安全性.方法 用导管法对1例瓦氏窦瘤(右冠窦)破人右心房患者进行封堵治疗.术后定期随访,复查心脏超声及心电图等,对封堵术前后心脏杂音、各心腔压力、心腔大小变化等进行回顾性分析研究.结果 用12/14 mm的国产PDA封堵器成功封堵.术后即刻心脏杂音消失,右心房、右心室及肺动脉压力分别由术前的21/10、52/2、50/14 mmHg下降为14/5、34/0、33/15 mmHg,左心室内径术前为57 mm,术后第3天复查为49 mm;无并发症发生.结论 经导管介入治疗瓦氏窦瘤破裂是一项安全、有效的新技术,对适合进行介入治疗的患者,可以取代外科手术治疗.
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牛磺酸对糖尿病大鼠视网膜损伤的防护效应
目的 应用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导建立糖尿病大鼠动物模型,观察膳食中添加牛磺酸对糖尿病大鼠视网膜损伤的影响.方法 SD大鼠用链脲佐菌素诱导糖尿病,分为正常对照组、糖尿病组、1%牛磺酸干预糖尿病组、5%牛磺酸干预糖尿病组、胰岛素治疗糖尿病组.2个月后测定视网膜电图(electroretinograph,ERG),并应用免疫组织荧光双标化学技术检测视网膜中胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)、牛磺酸转运蛋白(taurine trans-porter,Taut)表达.结果 视网膜电图结果显示:糖尿病组视杆细胞反应a波、b波、大反应b波、phot-ERG b波、OPs p4波的潜伏期分别比正常对照组明显延长;OPs Os1波的幅值比正常对照组明显降低;5%牛磺酸干预可明显缩短以上各波的潜伏期,升高OPs Os1波的幅值.免疫荧光结果显示:与正常对照组相比,糖尿病组整个视网膜GFAP表达明显增加,其阳性表达主要出现在外核层、外网状层、内核层、内网状层,视网膜中Taut的表达明显减少,只在外界膜、外核层和外网状层有少量表达;1%牛磺酸和5%牛磺酸干预可降低糖尿病大鼠视网膜中GFAP的表达,增加视网膜中Taut的表达,呈剂量效应关系.结论 膳食喂饲牛磺酸对糖尿病引起的视网膜损伤有一定的保护作用,其保护作用可能与降低视网膜中GFAP表达、增加Taut表达有关.
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咪达唑仑对幼龄大鼠大脑神经元caspase-3活化的影响
目的 观察咪达唑仑对幼龄SD大鼠大脑皮层神经元半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3活化(caspase-3 activa-tion)的影响.方法 出生7 d SD大鼠64只,雌雄不拘,分为A、B 2部分.A部分24只,分为4组(n=6):A1为未给予咪达唑仑正常状态(记为0 min),A2、A3和A4按照18.0 mg/kg给予咪达唑仑后15、30、60 min进行血气分析.B部分40只,分为5组(n=8):对照组(B1)单次腹腔注射生理盐水18.0 mg/kg,B2、B3、B4、B5分别单次腹腔注射咪达唑仑4.5、9.0、13.5、18.0 mg/kg.给予咪达唑仑6 h后进行多聚甲醛灌注,取脑,进行caspase-3免疫组织化学染色与图像分析.结果 咪达唑仑单次注射未发现幼龄SD大鼠产生缺血缺氧表现.单次给予咪达唑仑可导致幼龄SD大鼠大脑神经元caspase-3活化,给予较高剂量咪达唑仑后caspase-3活化强度明显增加.结论 咪达唑仑可以促发幼龄SD大鼠大脑神经元caspase-3活化,并可能导致大脑神经元凋亡.
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绝经后女性雌激素受体β基因多态性与骨密度的关系
目的 探讨绝经后女性雌激素受体β基因(estrogen receptor β,ESR2)CA重复序列多态性及G1082A多态性与骨密度的关系.方法 随机数字表法抽取重庆地区绝经后女性200例,采用基因扫描及DNA测序技术分析ESR2基因CA重复序列多态性,采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性法分析ESR2基因G1082A多态性,使用双能X线骨密度仪测量股骨近端及腰椎骨密度.结果 以CA重复序列平均数22次为界,将重复序列基因分为短基因(<22)和长基因(≥22),分别以S和L表示.200名绝经后女性中CA重复序列基因型SS、SL及LL的频率分别为25.0%、4600%及29.0%;G1082A基因型rr、Rr及RR的频率分别为43.0%、42.0%及15.0%;基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).在校正年龄、绝经年限、身高、体质量和体质指数后,CA重复序列SS基因型者股骨颈骨密度较SL或LL基因型者高(P<0.01),其余部位(大转子、Wards三角和腰椎)各基因型骨密度无统计学差异(P>0.05);G1082A位点各基因型股骨颈、大转子、Wards三角及腰椎骨密度无统计学差异(P>0.05);这2个ESR2基因的多态性位点非连锁不平衡(P>0.05).结论 绝经女性中,ESR2基因第5内含子的CA重复序列多态性可能对骨密度的遗传调节起作用,而ESR2基因第5外显子的G1082A多态性可能对骨密度无明显影响.
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甲状腺功能亢进症患者血浆Ghrelin水平的改变及其影响因素探讨
目的 了解甲状腺功能亢进症患者血浆生长激素促分泌素受体的内源性配体Ghrelin水平的改变及抗甲状腺药物治疗对血浆Ghrelin水平的影响.方法 采用酶联免疫法测定正常成人和初发甲亢患者治疗前后血浆Ghrelin水平,分析血浆Ghrelin与FT3、FT4、S-TSH、体质量指数、体脂百分比、空腹血糖的关系.结果 甲亢患者血浆Ghrelin水平较对照组明显降低[分别为(468±136)、(751±212)ng/L,P<0.01].经他巴唑治疗1个月后血浆Ghrelin水平、体质量及BMI升高(P<0.01),他巴唑治疗2个月后血浆Ghrelin水平与正常对照组比较无明显差异[分别为(670±214)、(751±212)ng/L,P0.05].相关性分析表明血浆Ghrelin水平与FT4、FT3浓度呈明显负相关(r=-0.43,r=-0.37,P<0.01),而与S-TSH和体脂百分比呈明显正相关(r=0.29,P<0.01;r=0.26,P<0.05).多元线性逐步回归分析提示FT4是影响血浆Ghrelin水平的独立相关因素.结论 甲亢患者血浆Ghrelin水平的显著降低可能与甲亢患者高水平的甲状腺激素抑制了Ghrelin的分泌有关.
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寻常性银屑病皮损区表皮Smad4表达下调
目的 探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号转导途径中共有Smad(Smad4)在寻常性银屑病皮损中的表达水平及其意义.方法 采用反转录-实时定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-Time RT-PCR)和免疫组化技术分别检测寻常性银屑病皮损和正常对照皮肤中Smad4 mRNA及其蛋白质的表达情况.结果 寻常性银屑病皮损中Smad4 mRNA及其蛋白质表达水平显著低于正常对照皮肤.结论 寻常性银屑病皮损表皮中Smad4表达下调可干扰TGF-β信号转导,有助于寻常性银屑病皮损中表皮增殖状态的形成.
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经导管封堵对先天性心脏病伴肺动脉高压患者血浆脑钠素的影响及其药物干预研究
目的 探讨经导管封堵术对先心病(congenital heart disease,CHD)伴肺动脉高压(pulmonary arterial hyperten-sion,PAH)患者血浆脑钠素(brain natriuretice peptide,BNP)浓度的影响及依那普利和美托洛尔的干预作用.方法 选择肺动脉收缩压(SPAP)≥50 mmHg的CHD患者119例,分为3组:A组(依那普利组,0.3～0.4 mg·kg-1·d-1,n=44),B组(美托洛尔组,0.8～1.0 mg·kg-1·d-1,n=39),C组(无药物干预,n=36).分别于封堵术前当天及术后第4天、2个月、6个月抽血检测BNP浓度.药物干预组患者自术后第4天抽血后开始服药.另选同期在我院进行健康检者20例为对照组.结果 ①封堵术前,A、B、C 3组血BNP水平比较无明显差异.与对照组比较,3组术前、术后第4天及C组术后2个月血BNP浓度均显著升高(P<0.01).②用药前,A、B、C 3组血BNP水平无明显差异(P>0.05).术后2个月及6个月时,3组患者血BNP浓度均较用药前显著降低(P<0.01);A、B两组以及C组血BNP浓度分别于术后2个月及6个月恢复至对照组水平.③组间比较显示:A、B两组血BNP浓度于术后2个月时较C组显著降低(P<0.05),药物干预后A、B两组间血BNP浓度比较无显著性差异(P>0.05).结论 在介入治疗术后,CHD伴PAH患者的血BNP浓度先升高后降低,依那普利及美托洛尔均有促进其恢复的作用.
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先天性巨大冠状动脉右室瘘的介入治疗
目的 探讨经导管法封堵先天性巨大冠状动脉瘘的技术方法及其有效性与安全性.方法 对1例先天性粗大、迂曲右冠状动脉右室瘘患者进行经导管封堵治疗.选择性冠脉造影后,建立动-静脉轨道,再沿轨道钢丝经股静脉送人长鞘经瘘口至右冠状动脉,沿鞘管将动脉导管未闭封堵器置于右冠状动脉瘘口处,确定封堵器位置合适后将其完全释放.结果 瘘口完全堵闭,术后无并发症,复查心脏超声示各心腔内径缩小.结论 对迂曲、粗大的冠状动脉瘘,用国产器械经导管封堵治疗安全、有效.
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提高大鼠心肌梗死模型成功率及存活率的研究
目的 探讨结扎位置、冠状静脉变异等因素对大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型建立的成功率以及利多卡因的使用对模型的死亡率的影响.方法 120只雄性SD大鼠按随机排列表法分为4组:低位结扎且冠状静脉不明显组(30只)、低位结扎且冠状静脉明显组(30只)、高位结扎组(30只)以及高位结扎且使用利多卡因组(30只),计算建模后各组死亡率,测定各组心功能及梗死面积.结果 结扎位置较高时模型成功率为93.0%,而结扎位置较低时的成功率为67.3%;高位结扎不加利多卡因大鼠死亡率为43.3%,加用利多卡因后大鼠死亡率则降为13.3%.结论 高位结扎时能明显提高模型成功率,加用利多卡因后死亡率明显下降.
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大鼠神经球蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
目的 克隆Wistar大鼠神经球蛋白(NGB)基因,通过原核表达制备其多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础.方法 从雄性Wistar大鼠脑组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到cDNA,测序证明该基因序列正确后,亚克隆人pET-28a(+)载体中,通过双酶切和测序确定序列和阅读框正确.转化大肠杆菌BL21菌株,获得可溶性表达产物,经鉴定、纯化后免疫新西兰兔,分离血清,ELISA法测定抗体效价.结果 神经球蛋白多克隆抗体效价达1:100 000,此多抗可以与293细胞内表达的重组蛋白发生很好的抗原抗体反应.结论 成功制备了兔抗NGB的多抗,为后续研究提供了重要的实验材料.
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雄犬功能尿道长度变化对尿动力学指标的影响
目的 评估功能尿道长度变化对尿道尿控的影响,探索预防前列腺根治术后尿失禁的新方法及其尿动力学依据.方法 16只雄犬分成功能尿缩短组(A组)和膀胱肌管替代功能尿道组(B组),进行静态尿道压力图检查.结果 A组在功能尿道逐步缩短时,尿动力指标逐渐下降,B组在用膀胱前壁肌管代替后尿道后,尿动力指标相应上升.两组在切除前列腺及远端2 cm尿道后与术前尿动力指标差异显著(P<0.05).结论 功能尿道的长度与尿道控尿能力成正比,膀胱前壁带蒂肌管功能尿道重建术是预防前列腺根治术后尿失禁可供选择的方法.
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体外纳米磁标记骨髓间充质干细胞生物学特性及其MR成像
目的 研究超顺磁性氧化铁粒子(superparamagnetic iron oxide particles,SPIO)体外标记兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)及MR细胞成像示踪可行性.方法 从兔骨髓中分离培养MSCs,体外不同浓度SPIO联合硫酸鱼精蛋白标记,未标记细胞设为对照组.普鲁士蓝染色和电镜检查鉴定细胞内铁颗粒,台盼蓝染色检测细胞存活,MTF法测定细胞生长曲线的变化,磁标记MSCs转入成骨、成脂肪培养基中进行诱导培养后进行鉴定,应用1.5T MR梯度回波T2加权(GRE T2 *WI)扫描序列和自旋回波T2加权(SE T2WI)扫描序列对磁标记细胞成像示踪.结果 普鲁士蓝染色和电镜检查显示细胞质内含致密铁颗粒,磁标记对MSCs活性和增殖无统计学差异(P<0.05),标记细胞可正常成骨、成脂肪分化.GRE T2*WI序列和SE T2WI序列提示与未标记细胞信号强度(sI)相比,1×106(标记细胞)、5×105(标记细胞)SI均显著性下降(P<0.05),其中GRE T2*WI的信号强度衰减率(△SI)显著高于T2WI序列(P<0.05).在2个序列中1×106(标记细胞)△SI均高于5×105(标记细胞)△SI,但不具有显著性差异(P>0.05).结论 SPIO联合硫酸鱼精蛋白转染剂能成功标记MSCs,磁标记对细胞存活、增殖及潜在多向分化能力无影响.磁标记细胞在MR上产生特征性的低信号改变.应用1.5T MR成像示踪标记细胞可行,以GRE T2*WI序列成像为敏感.
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乳腺癌细胞中PNRC基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究
目的 研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用.方法 应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况,并运用"MethPrimer"软件对PNRC启动子区进行分析,预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测PNRC启动子区CpG岛的甲基化状况;PT-PCR及Northern杂交检测乳腺癌细胞经甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用后,PNRC基因mRNA的表达情况;Westernblot检测5-Aza-dc干预对PNRC蛋白表达的影响;将含PNRC启动子序列的报告质粒转染乳腺癌细胞,再经5-Aza-dc处理后,检测PNRC基因启动子的活性.结果 PNRC基因在乳腺癌细胞中的表达较正常乳腺细胞明显降低;乳腺癌细胞PNRC基因启动子区存在CpG岛甲基化;乳腺癌细胞经5-Aza-dc处理后,PNRC基因mRNA及蛋白表达水平显著增加,其PNRC基因启动子的活性也明显增强.结论 PNRC基因启动子区的高甲基化导致PNRC在乳腺癌细胞中表达降低.
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成熟成骨细胞中敲除基因fgfr1小鼠的制备
目的 制备在成熟成骨细胞中敲除基因fgfr1的特定细胞阶段性基因敲除小鼠.方法 从美国NIH引进SPF级fgfr1条件性基因敲除(fgfr1flox/flox)小鼠,进行饲养、繁殖和PCR鉴定;fgfr1flox/flox小鼠与在成熟成骨细胞表达Cre重组酶的OC-Cre小鼠交配,获得在成熟成骨细胞中敲除一个基因拷贝的杂合子小鼠;杂合子小鼠之间交配,或者杂合子小鼠与fgfr1flox/flox小鼠交配,可以获得在成熟成骨细胞中敲除fgfr1基因的小鼠fgfr1△/△/OC-CreTG/+.结果 成功制备在成熟成骨细胞中敲除fgfr1的细胞特异性敲除小鼠.结论 成功引进fgfr1flox/flox小鼠,应用合理的基因条件性敲除繁殖策略,获得在成熟成骨细胞中敲除fgfr1的基因敲除小鼠.
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以假性肠梗阻为首发症状的系统性红斑狼疮1例
1 临床资料患者,女性,28岁,腹痛、呕吐、发热3 d入院,查体温37.7℃、脉搏92次/min、呼吸17次/min、血压110/80 mmHg.急性病容,面部无红斑,心肺无异常,腹部稍膨隆,上腹及脐周压痛,反跳痛不明显,移浊阳性,肠鸣音消失.
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妊娠合并重度血小板减少症的临床研究
妊娠合并重度血小板减少症可导致产后出血、胎死宫内及新生儿颅内出血等,对母婴存在潜在的危险[1].目前对血小板计数50×109/L的孕妇的处理尚有争议.对我院2002年6月至2006年6月收治的16例妊娠合并重度血小板减少患者进行回顾性研究,探讨妊娠合并重度血小板减少症的原因及临床处理,使临床医师能恰当地评估该病的风险,实施针对性治疗,减少不必要的干预.
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双源螺旋CT冠状动脉成像扫描的护理
CT冠状动脉成像是无创伤性检查,双源螺旋CT是目前冠状动脉成像的佳设备[1].要发挥双源螺旋CT在冠状动脉成像方面的大优势,消除不利因素的影响,使患者能主动配合检查,护理工作特别重要.现将我们的护理体会报告如下.
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复杂眼内异物摘出联合玻璃体切割手术治疗的护理
复杂眼内异物摘除术是眼科疑难手术.玻璃体切除手术使复杂眼内异物摘除率明显提高[1,2],可减少其并发症,较好地保留或提高患者的视功能,但对患者的护理,特别是术前、术后护理及并发症的观察提出了更高的要求.我科于2003年8月至2007年6月共收治复杂眼内异物伤患者45例,治疗护理效果满意,现将护理体会报告如下.
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靶控输注异丙酚复合艾司洛尔麻醉用于高血压患者纤维支气管镜检查
如何保证高血压患者接受纤维支气管镜检查时的循环系统稳定一直是临床难题.现研究靶控输注异丙酚复合艾司洛尔在纤维支气管镜检查中的价值,旨在寻找一种较好的临床方法.
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两种胸腔闭式引流治疗自发性气胸疗效观察
我科采用引流管侧释放导管针,经胸壁胸腔内置入可冲洗胸腔引流管治疗气胸,并与皮肤切开胸壁钝性分离引流管胸腔内置入术比较,评价其疗效和安全性,现报告如下.
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低位直肠癌行保肛手术102例临床分析
为提高直肠癌特别是低位直肠癌患者术后生活质量,在确保根治的前提下,保留肛门括约肌手术(sphincter preserving operation,SPO)是普外科医师关注的重点[1].现结合我院对直肠癌患者保肛手术的经验,对SPO适应证的合理选择及对患者预后的影响进行探讨.
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不同管径静脉移植治疗山羊股动脉缺损的研究
目的 探讨不同管径静脉移植治疗山羊股动脉缺损对移植物内膜增厚的影响.方法 选取同品系体格健壮的山羊20只,40条股动脉.随机分为A、B、C、D、E 5组,每组4只,8条股动脉.各组由细到粗选取不同管径的静脉作为移植物修复相同部位的股动脉缺损.A、B组和E组静脉管径分别明显小于和大于宿主动脉,C、D组静脉管径与宿主动脉接近.术后1 d和28 d进行血流动力学分析,术后28 d取材,对移植静脉进行病理学观测,测定内膜厚度、管腔直径和壁剪切应力,统计分析各组间的差异.结果 术后28 d A、B、E组内膜厚度大于C、D组,A、B组静脉移植物扩张程度大于其他组,壁剪切应力随着移植物管径的增加而减小.结论 移植静脉管径与宿主动脉接近时其内膜增厚程度轻.
