光性视网膜变性猪视网膜移植术后视功能的综合评价

目的 通过移植分化完成而发育不完全的新生猪全层视网膜组织,探讨此种供体改善光变性猪视功能的可能性.方法 选1～6 d新生小猪为供体,用准分子激光微切削脉络膜制备神经上皮-RPE联合移植片,并通过玻璃体-视网膜手术将联合移植片移植进光变性猪视网膜下腔.在视网膜移植术后1周、1～5个月,通过检眼镜、眼底彩照、荧光造影,观察移植物的存活状况及宿主视网膜有无排斥反应迹象;用mfERG检测并比较不同时相间N1、P1波振幅和潜伏期,综合评价移植术后视网膜功能的变化.结果 对8只光变性猪15眼实施视网膜移植手术,移植物植入视网膜下腔11眼,手术成功率为84.6%.移植术后1～2个月可见与宿主视网膜有清楚界限的移植床及其内灰黑色移植物, FFA检查可见移植物有荧光渗漏.光变性猪视网膜移植术后1～5个月, mfERG检测N1波、P1波幅值和潜伏期并在不同时相点间比较,发现N1波、P1波幅值随存活时间延长而增高,反应活跃区在第2、3环;而各环N1波、P1波潜伏期较手术前均明显缩短,存活后期更显著.结论 功能检测结合活体形态的同步观察,综合评价视网膜移植术后光变性猪视网膜功能改善的效果,从而证实了分化成熟的新生猪视网膜移植确实改善了光变性猪的视网膜功能.

邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘联合染毒对大鼠睾丸支持细胞的影响

目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘单独或联合染毒对大鼠睾丸支持细胞增殖及乳酸分泌的影响.方法 分离纯化大鼠睾丸支持细胞,油红O染色鉴定纯度大于90%后,以0.1、1、10、100、500 μg/ml 邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)和0.01、0.1、1、10、100 μg/ml 苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]单独或依次联合染毒,用MTT法检测对支持细胞增殖的影响,并测定培养液中的乳酸含量.结果 DBP染毒后100 μg/ml 吸光度值[D(490)]显著高于对照组(P＜0.01).BaP染毒各组的D(490)值与对照组比较,无统计学差异.DBP 100 μg/ml+BaP 10 μg/ml联合染毒组D(490)值显著上升(P＜0.01),而在500 μg/ml DBP+50 μg/ml BaP联合染毒组D(490)值下降(P＜0.05).DBP 100 μg/ml组、 100 μg/ml DBP+10 μg/ml BaP组和500 μg/ml DBP+50 μg/ml DBP组培养液中的乳酸显著增加(P＜0.01),DBP 500 μg/ml组和BaP 50 μg/ml组培养液中的乳酸含量也增高(P＜0.05).结论 一定剂量DBP可刺激支持细胞增殖并增加乳酸分泌,BaP虽不抑制支持细胞的增殖,但可使乳酸分泌增加.二者联合作用,在一定剂量下以DBP的效应为主,但在高剂量可抑制细胞增殖,呈现一定的协同作用.

重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1对大鼠肾移植存活时间的影响

目的 以人IL-2片段与植物毒素Luffin P1重组获得的免疫毒素hIL-2-Luffin P1,观察它对大鼠肾移植排斥反应的抑制作用.方法 采用同种异体大鼠肾移植模型,观察hIL-2-Luffin P1对移植物存活的影响,以及移植物的组织病理学观察.结果 hIL-2-Luffin P1组大鼠存活时间延长(13.86±2.11)d,与对照组比较相差显著(P＜0.01);而Luffin P1处理组与对照组相比无明显差异.同时,病理结果显示对照组移植肾单位结构破坏,淋巴细胞浸润明显,而在同一时间hIL-2-Luffin P1处理组大鼠的移植肾脏病理变化较轻;T淋巴细胞亚群检测显示经hIL-2-Luffin P1处理后,受体外周血T细胞的活化程度降低.结论 hIL-2-Luffin P1能够抑制免疫排斥反应,延长移植物存活时间.

老年2型糖尿病患者心率变异性与高敏C反应蛋白关系研究

目的 探讨老年2型糖尿病患者心率变异性(heart rate variability,HRV)与高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)的关系.方法 选取2004-2006年在本科门诊部和住院部治疗的老年2型糖尿病患者30例,再选取老年非糖尿病患者30例,分为糖尿病组和对照组,并行24 h动态心电图检查,测定HRV,包括所有窦性心搏R-R(NN)间期的标准差(SDNN)、全程记录中每5 min NN间期平均值的标准差(SDANN)、相邻NN间期差值的均方根(rMSSD),检测hs-CRP指标,并对糖尿病组的HRV与hs-CRP行线性相关分析.结果 糖尿病组HRV参数显著低于对照组(P＜0.05),而hs-CRP值较对照组显著升高(P＜0.05),并且HRV与hs-CRP具有显著的负相关性(r=-0.22, r=-0.21,r=-0.19,P＜0.05).结论 糖尿病患者心脏自主神经功能的改变和hs-CRP的变化具有相关性.

VEGF对大鼠50%肝脏移植术后血清HGF、IL-6浓度的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大鼠部分肝移植术后血清肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度的影响.方法 建立大鼠50%部分肝移植模型.实验动物分3组:VEGF治疗组、anti-VEGF组、对照组.分别于术后注射鼠重组VEGF、 anti-VEGF、生理盐水.在术后不同时相点(0、12、24、72、168 h)测血清中HGF、IL-6 含量及肝脏生化指标.结果 VEGF组血清HGF、IL-6水平较对照组明显增高,anti-VEGF组较对照组明显降低,有显著差异.anti-VEGF 组天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)较VEGF组及对照组明显升高,有显著差异.结论 VEGF治疗能明显促进大鼠部分肝脏移植术HGF、IL-6的释放.

实时三维超声心动图评价房间隔缺损不同手术方式的右室收缩功能变化

目的 应用实时三维超声心动图(real-time three dimensional echocardiography, RT-3DE)研究房间隔缺损(atrial septal defect, ASD)不同手术方式右室收缩功能的变化.方法 ASD患者按照不同手术方式分为外科手术组和封堵组;常规二维超声心动图检查后,使用RT-3DE采集患者的右室全容积数据库,分析右室舒张末容量(right ventricular end diastolic volume, RVEDV)和收缩末容量(right ventricular end systolic volume, RVESV)、计算右室射血分数(right ventricular ejection fraction, RVEF).比较术前、术后7 d、术后3个月的RVEDV、RVESV、RVEF值变化.结果 术后7 d,封堵组右室RVEDV、RVESV均较术前明显减小(P＜0.05),RVEF值与术前无显著差异;外科手术组右室RVEDV较术前明显减小(P＜0.05),但RVESV较术前无统计学差异,并且EF值较术前减低(P＜0.05).术后3个月两组的RVEF值均较术前明显增高(P＜0.05).结论 RT-3DE能简便、准确地确定右室容积并计算右室收缩功能;ASD患者外科手术组术后早期右室收缩功能较术前减低, 术后3个月恢复到正常水平,封堵组术后初期EF值即达正常水平.

甘草酸固体脂质纳米粒的处方及制备工艺

目的 制备甘草酸固体脂质纳米粒(GL-SLN).方法 用旋转蒸发薄膜超声法制备GL-SLN,在单因素考察的基础上,通过正交设计优选该纳米粒的处方及制备工艺,并对优化条件下制备的GL-SLN进行质量评价.结果 制备的GL-SLN大小较均匀,平均粒径为75.8 nm,zeta电位-19.7 mV,载药量8.27%,包封率91.76%.结论 薄膜超声分散法优化工艺制备得到的GL-SLN包封率较高,稳定性好,方法可靠.

RNA干扰对HL-60白血病细胞株WT1基因表达的抑制作用

目的 研究RNA干扰(RNA interference, RNAi) 对白血病细胞株WT1 基因表达的抑制作用.探讨WT1小干扰RNA在白血病治疗中的应用.方法 设计制备多对针对WT1基因的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA),转染HL-60人白血病细胞株,采用RT-PCR法测定WT1 mRNA 的表达,Western blot 测定WT1 蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 siRNA 后WT1 mRNA与蛋白的表达强度分别为(23.62±1.28)%和(23.20±1.04)%,和对照组比较有显著性差异(P＜0.05);在WT1表达受到抑制的同时,HL-60细胞的凋亡率为(13.72 ±1.33)%,和对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论 siRNA能有效抑制HL-60细胞中WT1基因的表达,增加细胞凋亡.

对中国4个不同地区幽门螺杆菌菌株的多位点序列分析研究

目的 了解国内4个不同地区(北京、上海、重庆和广州)收集的幽门螺杆菌(H.pylori)临床株的遗传背景和可能的来源.方法 从胃肠疾病患者黏膜标本中分离培养幽门螺杆菌,应用多位点序列分析(multilocus sequence typing, MLST)对鉴定阳性的菌株进行ST分型比较,并且以PCR方法测定vacA基因型.结果 30株临床分离的幽门螺杆菌菌株,vacAs1a阳性25株(83.3 %),vacA s1b阳性5株(16.7 %),vacA m2阳性为30株(100 %),未发现s2型菌株,其中标准株NCTC11637为vacAs1a/ m1型.共确定了28种ST型.结论 MLST作为幽门螺杆菌分型方法,分辨率高,结果准确,易于标准化.通过信息学分析可以将MLST分型、vacA基因型和遗传背景、临床来源结合起来,适于进行分子进化学研究.

Tet-on控制的Luciferase和SupF突变报告基因质粒的构建及其在顺铂致突变作用中的应用研究

目的 研究TCR在顺铂导致的细胞内DNA损伤和突变过程中的分子机制,并为进一步研究转录偶联修复与突变发生的分子机制提供重要分子生物学依据.方法 首先将SupF突变报告基因克隆到带有双向真核启动子的含有Tet调控元件TRE的表达载体pBI-L的多克隆位点(MCS)上,获得pTCR-1,再将SV40ori元件插入pTCR-1载体,终获得pTCR-2质粒.酶切和DNA测序证实后,用顺铂将pTCR-2进行体外DNA损伤后瞬时转染至Tet-on 293细胞,在Dox诱导下培养48 h,从细胞内提取质粒,纯化后转化SY204菌株,蓝白斑筛选挑取白色突变斑,计算突变频率并进行DNA测序检测突变频谱.结果 经酶切鉴定和测序分析,插入片段长度和序列正确.在Dox诱导下取得了SupF报告基因在转录偶联修复途径中的突变频率与频谱.结论 重组的pTCR-2质粒具有在真核细胞中Tet启动的转录活性,应用于顺铂致突变研究中,使转录条件下的突变情况能够得以反映.

电针阻断胰岛素抵抗及过氧化反应治疗非酒精性脂肪肝的实验研究

目的 探讨电针阻断胰岛素抵抗及过氧化反应治疗非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)的机制.方法 SD大鼠33只按随机抽签法分组:正常对照组(11只),造模组(22只).正常组以普通饲料喂养,造模组以高脂饲料喂养,8周后处死3只(正常对照组1只,造模组2只),验证造模成功后将造模组分为NAFLD模型组(10只)和电针治疗组(10只),后者施以电针治疗.12周末处死所有大鼠检测血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)、血清游离脂肪酸(FFA)、肝内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷胱甘肽(GSH)含量变化及肝组织病理学.结果 与模型组比较,电针组FBG、FINS、FFA降低(P＜0.05);肝内MDA、TG、TC显著下降(P＜0.01);SOD、GSH活性升高(P＜0.01),肝组织脂肪变性和炎性损伤得以改善.结论 电针通过阻止胰岛素抵抗和过氧化反应之间的恶性循环治疗NAFLD.

去甲二氢愈创木酸治疗子宫内膜异位症的实验研究

目的 探讨血管生成抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对子宫内膜异位症巴马香猪动物模型的影响.方法 采用建模成功的巴马香猪6头,分为实验组NDGA组4头和对照组PBS组2头,实验组隔日皮下注射NDGA和对照组给予等体积的PBS溶液,连续给药20 d.观察给药前、后血清激素水平和异位内膜包块的变化情况,以及FⅧRag和VEGF的表达情况.结果 NDGA组血清E2显著降低(P＜0.05).NDGA组异位内膜包块不同程度的缩小,甚至少部分消失;PBS组包块无明显变化,部分略有增大.NDGA能显著抑制子宫内膜腺体数目减少,间质紧密;PBS组子宫腺体数目多,间质疏松.NDGA组减少微血管密度(MVD)的数目和VEGF的弱表达(P＜0.05);PBS组微血管密度(MVD)的数目多和VEGF的强表达(P＜0.05).结论 NDGA组种植的异位灶缩小甚至部分消失.

肩胛盂扭转角与肩关节前下不稳的相关性研究

目的 探讨肩胛盂扭转角与肩关节前下不稳之间的关系.方法 用16排螺旋CT对比扫描24例单侧肩关节前下不稳患者的双侧肩关节.通过三维CT多平面重组、容积重建等技术获取肩胛盂重建平面,于肩胛盂上结节和盂下结节连线的4等分垂直横截面上分别测量患侧和健侧肩胛盂扭转角,并进行统计学分析.结果 24例肩关节前下不稳组的患侧盂扭转角自上而下分别为:(-15.24±10.18)°,(-8.22±8.47)°,(-2.88±4.56)°,(-2.49±6.43)°,而健侧盂扭转角自上而下分别为:(-15.07±12.11)°,(-10.63±7.25)°,(-6.04±3.61)°,(-5.26±3.02)°.第1、2、3平面双侧扭转角无统计学差异,而第4平面双侧扭转角统计学有显著性差异(P＜0.05),患侧比健侧要大.结论 肩胛盂扭转角可能与肩关节前下不稳直接相关,是肩关节前下不稳的原因之一.肩胛盂扭转角的测量对肩关节稳定性的评估、手术方式的选择及手术预后具有重要的参考价值.

慢性肾病患者肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系

目的 探讨慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)患者蛋白尿诱导肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测CKD患者肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白氧调节蛋白150(cells-oxygen-regulated protein150, ORP150)和糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)的表达;TUNEL法检测细胞凋亡.对各指标与CKD患者24 h尿蛋白量进行相关性分析.结果 CKD患者肾小管上皮细胞细胞质中ORP150、GRP78的表达较正常对照组显著增强(P＜0.01),且轻、中、重度蛋白尿3组各组间亦均有显著性差异(P＜0.01),并与尿蛋白水平呈正相关(r=0.695,r=0.76,P＜0.01);各组小管上皮细胞凋亡系数(apoptosis index,AI)均亦有显著性差异(P＜0.01),并与尿蛋白水平呈正相关性(r=0.835,P＜0.01).结论 CKD患者肾小管上皮细胞有内质网应激与凋亡的发生,并且其强度与蛋白尿水平呈正相关关系.内质网应激可能是大量蛋白尿引起小管上皮细胞凋亡的重要环节.

临床用氧对新生鼠视网膜发育的影响

目的 研究不同临床用氧方式对新生鼠视网膜血管发育的影响以及相应视网膜血管内皮生长因子(VEGF) 的表达以探讨ROP发病机制,为早产儿临床合理用氧提供实验依据.方法 新生7 d Wistar鼠仔150只,按不同吸氧方式称质量随机分为5组.实验组1: FiO2由75%分5 d逐渐降低直至停氧(每天下降幅度约为10%);实验组2:吸入氧浓度( FiO2 )5 d逐渐由30%升高至75%后突然中断吸氧.实验组3:持续吸75%高氧5 d后骤然停氧;实验组4:持续吸75%高氧5 d后分5 d逐渐降低FiO2 直至停氧;对照组:置于同实验条件下的空气中饲养.视网膜铺片(ADP酶染色法)了解视网膜血管形态改变;眼球切片(HE法)观察视网膜血管的增生和发育情况;免疫组化法观察5组标本视网膜各层VEGF的表达,并进行视网膜组织内VEGF的含量,血管内皮细胞核两者之间相关性分析.结果 ①视网膜铺片和眼球切片HE染色显示实验组2、3视网膜存在缺氧并出现异常新生血管生成的类似ROP表现.②免疫组化结果显示缺氧后视网膜组织内VEGF的表达明显增加,主要分布在视网膜节细胞层和内核层的毛细血管内皮细胞细胞质和细胞核中.视网膜新生血管芽细胞核数(以与内界膜相关联的突破内界膜的内皮细胞核数C表示)与视网膜组织VEGF含量呈正相关(r=0.807,P＜0.01).结论 吸入高浓度氧后突然停氧可严重影响新生鼠视网膜血管的发育,产生类似早产儿视网膜病的病变.因此临床上应严密监测用氧情况,采取逐渐降低氧浓度的吸氧方式.

NGF参与支气管哮喘大鼠气道炎症的发生及作用机制

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响及作用机制.方法 24只雄性SD大鼠分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)和抗NGF组(C组),每组8只.测定各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总细胞及细胞分类计数;HE染色观察气道病理改变;RT-PCR和ELISA法检测各组大鼠白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、NGF mRNA和蛋白表达水平.结果 B组与A组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数增多(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01).C组与B组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数减少(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达减弱(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达水平无显著差异.B组BALF中NGF含量与细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞呈正相关(r=0.833、0.944、0.949,P＜0.05);与IL-4含量呈正相关(r=0.944,P＜0.01),与IFN-γ含量不相关(r=0.122,P＞0.05);与肺组织中IL-4 mRNA表达水平呈正相关(r=0.848,P＜0.05),与IFN-γ mRNA表达不相关(r=0.611,P＞0.05).结论 NGF与哮喘大鼠气道炎症密切相关,它可以通过使Th2型细胞因子分泌亢进参与哮喘的发生.

河南某县农村HIV感染者/AIDS患者人群心理状况调查分析

目的 了解农村HIV感染者/AIDS患者(people living with HIV and AIDS,PLWHA)的心理健康状况.方法 采用一般情况调查表和症状自评量表(SCL-90)对192例HIV/AIDS人员进行调查.结果 192例PLWHA人员SCL-90总分、阳性项目数和各因子分均高于中国常模(各项P＜0.05);心理问题阳性检出率83.9%;AIDS患者总分、阳性因子数、各因子分均显著高于HIV感染者(P＜0.01);不同文化程度分组之间SCL-90各个因子的比较,除抑郁因子外,其他因子均有显著差异(P＜0.05);不同经济收入之间有显著差异,接受政府救济才能维持基本开支组显著高于不需救济组(P＜0.01).性别、年龄、感染方式之间均无显著差异.结论 被调查的HIV/AIDS人群存在突出的心理健康问题,应建立便捷有效的心理帮助机制,在实施心理帮助时应更加重视AIDS患者、低学历和低收入人群.

大鼠阿霉素所致心肌病过程中PI3K/AKT以及ERK1/2信号通路表达的改变

目的 研究阿霉素对心脏结构功能的影响以及此过程中部分相关信号通路的变化.方法 用20只SD大鼠分为两组:阿霉素组(10只)和正常组(10只),观察阿霉素对心脏结构及功能改变,心肌细胞凋亡以及p-AKT与p-ERK1/2的蛋白水平.结果 阿霉素注射11周后造成肌纤维排列紊乱,肌纤维丢失及肌浆空泡化,心脏功能尤其是收缩功能下降(FS与CO比较,P＜0.01),心肌细胞凋亡增加,p-AKT与p-ERK1/2的蛋白水平较正常明显下降.结论 阿霉素能明显造成心脏结构及功能的损伤,心肌细胞凋亡,PI3K/AKT与ERK1/2两条信号通路的变化可能参与到阿霉素的心脏毒性过程中.

透析患者动静脉内瘘连续和间断缝合效果的临床评估

目的 评估两种不同缝合术对动静脉内瘘成形术的手术成功率及瘘管年通畅率,总结治疗经验,以期进一步提高手术效果.方法 回顾性分析我院5年来380例前臂桡动脉一头静脉内瘘成形术患者的临床资料,比较间断及连续动静脉吻合术对手术成功率及瘘管年通畅率的影响并作统计学分析.结果 两种缝合术对一次手术成功率明显影响,间断缝合术瘘管1年通畅率好于连续缝合术.而性别、年龄、肾功能等因素对手术成功率及瘘管年通畅率均无影响,缝合方式、血管本身条件、血管吻合技术是导致手术失败及瘘管闭塞的重要影响因素.结论 间断缝合术因为良好的吻合口径而优于连续缝合术,应作为动静脉内瘘血管吻合方式的首选.

IGF-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响.方法 建立大鼠坐骨神经切割伤模型,通过硅胶管进行桥接,实验组于再生室内注入胰岛素样生长因子-1,对照组注入等量生理盐水,于术后3、5、7、9、11 d取材,用SABC免疫组化法检测轴突再生情况以及雪旺细胞数目、形态和排列方式的变化.结果 ①雪旺细胞:在对照组,术后3 d,断端间隙内仅可见少量雪旺细胞,术后7 d,雪旺细胞数量明显增多,术后11 d,整个间隙内的雪旺细胞排列呈有序的条索状.在实验组,术后3 d,雪旺细胞即明显增多,以后各相同时相点雪旺细胞数目均明显高于对照组.②再生轴突:在对照组,术后5 d,轴突开始长出,术后7 d轴突快速增长,至第11天,再生的轴突已长过5 mm的间隙到达神经远端.在实验组,术后3 d轴突即开始长出,9 d就快到达远端.结论 胰岛素样生长因子-1能促进轴突延伸和雪旺细胞增殖,明显促进坐骨神经再生.

小鼠IDO真核表达载体的构建及其在未成熟树突状细胞中的表达

目的 构建小鼠pEGFP-N1-IDO真核表达载体并观察其在未成熟树突状细胞中的表达.方法 利用RT-PCR方法扩增小鼠IDO基因全长,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pEGFP-N1.经酶切和测序鉴定后, 用DOTAP脂质体转染法转染未成熟树突状细胞.通过G418筛选, 用倒置荧光显微镜观察转染的未成熟树突状细胞绿色荧光蛋白的表达,用RT-PCR、Western blot检测IDO的表达.结果 小鼠全长IDO基因序列正确插入pEGFP-N1载体,与GenBank中报道的序列一致,成功构建了pEGFP-N1-IDO真核表达载体,并转染未成熟树突状细胞,成功地表达目的基因.结论 真核表达载体成功构建和转染未成熟树突状细胞,并证明能有效表达于未成熟树突状细胞中 .

局部uPAR的高表达促进小鼠创伤后皮肤的再上皮化

目的 将构建的含uPAR的真核表达质粒转入创伤小鼠皮内,研究uPAR在皮肤创伤后再上皮化的作用.方法 将构建的真核表达质粒pEGFPC1-uPAR通过电穿孔法转入创伤小鼠皮内,观察质粒转入情况,测定创面愈合率,通过组织形态学观察和测定创面肉芽组织羟脯氨酸、蛋白含量来反映肉芽组织中胶原和蛋白合成的情况,评价创面愈合质量.免疫组织化学检测细胞增殖阳性率.结果 uPAR质粒转染的小鼠创面愈合率高于对照组,肉芽组织变化不明显,早期胶原蛋白含量增加,表皮细胞的增殖迁移能力增加.结论 局部uPAR的高表达能促进创伤后皮肤的再上皮化.

可溶性人TRAIL诱导胃癌细胞BGC-823凋亡的研究

目的 通过构建pBud-EGFP-TRAIL质粒体外观察可溶性人TRAIL蛋白(sTRAIL)对胃癌细胞BGC-823的作用.方法 以EFGP基因为报告基因,sTRAIL为目的基因,构建pBud-EGFP-TRAIL双表达质粒,鉴定酶切和测序重组体.经脂质体转染法转染体外培养的胃癌细胞BGC-823,用荧光显微镜观察EGFP的表达,RT-PCR及Western blot进一步检测sTRAIL mRNA及其蛋白的表达,MTT法检测转染后对胃癌细胞的生长抑制率,TUNEL法观察细胞的凋亡情况,流式细胞仪分析转染后胃癌细胞的凋亡率.结果 测序结果证实pBud-EGFP-TRAIL载体构建成功,质粒经脂质体转染后,通过表达sTRAIL蛋白对胃癌细胞发挥作用.MTT法显示转染该质粒的细胞的生长抑制率明显高于对照组,TUNEL法显示细胞核固缩,核染色质聚集或断裂,形成凋亡小体.流式细胞仪结果表明转染该质粒的细胞的的凋亡率明显高于对照组.结论 在体外初步证实TRAIL能诱导胃癌细胞BGC-823凋亡.

缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液中抗缺氧有效成分的初步研究

目的 探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of hypoxia-preconditioned mice, DHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及其与腺苷的关系.方法 复制缺氧预适应小鼠模型,高氯酸法制备DHP.HPLC法检测DHP中腺苷含量及正常小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of normal mice, DN)中腺苷含量.在已分化PC12细胞中加入DHP,以DN作对照,以1.0、10.0、100.0 μmol/L的腺苷为阳性对照,分别于缺氧(2%O2)培养24、48、72 h后检测MTT值、LDH透出率以及72 h晚期凋亡率;在DHP、10.0 μmol/L腺苷阳性对照组中分别加入腺苷A1、A2A受体阻断剂DPCPX、SCH 58261(5.0 μmol/L),以DN作对照,缺氧24、48、72 h后分别检测各组MTT值、LDH透出率.结果 DHP中腺苷含量显著高于DN;缺氧24 h时, DHP组MTT值显著高于DN组, 其 LDH透出率显著低于DN组.随缺氧时间延长, DHP保护作用逐渐减弱,至72 h时,DHP组MTT值、LDH透出率、晚期凋亡率与DN组均无显著差异;A2A受体阻断剂SCH 58261可阻断DHP的保护作用.结论 DHP在缺氧初期对分化PC12细胞的保护作用与缺氧预适应中腺苷含量增加有关, 保护作用可能通过A2A受体实现.

PAPP-A、IGF-Ⅰ在非ST段抬高的急性冠脉综合征患者中的临床意义

目的 探讨非ST段抬高的急性冠脉综合征(Non-ST elevation acute coronary syndromes, NSTEACS)患者血清妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy associated plasma-A, PAPP-A)及胰岛素样生长因子Ⅰ (insulin-like growth factor-1, IGF-Ⅰ)浓度变化的临床意义.方法 选择终以出院诊断为标准NSTEACS患者65例,冠脉造影证实的稳定型心绞痛(stable angina pectoris, SAP)患者28例,正常对照30例.入院后12 h内均抽取静脉血5 ml,测定IGF-Ⅰ、PAPP-A及C反应蛋白(C-reactive protein, CRP),常规测定肌钙蛋白T (cTnT)、血脂、血糖等,各组间进行比较并进行相关性分析.结果 NSTEACS患者的PAPP-A、IGF-Ⅰ、CRP明显高于SAP组和对照组(P＜0.01),IGF-Ⅰ在SAP组明显低于对照组(P＜0.01),而PAPP-A、CRP在SAP与对照组中无显著差异(P＞0.05).在NSTEMI组中PAPP-A与IGF-Ⅰ呈正相关, PAPP-A、IGF-Ⅰ与CRP均呈正相关,而与cTnT无明显相关性.结论 PAPP-A、IGF-Ⅰ对NSTEACS具有一定的诊断、预测价值.

急性高眼压后大鼠视网膜突触囊泡素的表达变化

目的 研究急性高眼压后大鼠视网膜突触囊泡素(synaptophysin, SYN)的表达变化.方法 SD大鼠左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失并维持60 min,右眼为正常对照,动物存活1、3、7、14、21 d后处死,冰冻切片行SYN免疫组织化学及原位杂交检测.结果 正常情况下SYN蛋白分布于视网膜内、外网层,外网层染色较深,急性高眼压后SYN阳性产物除外网层分布外,还出现于外核层的内侧部分,存活7 d时,阳性产物在外网层及外核层的分布范围宽,至14 d时又恢复至与正常相似的分布模式.SYN mRNA阳性产物主要分布存在于内核层与节细胞层的神经元胞体,急性高眼压后1、3、7 d时内核层SYN mRNA阳性细胞数逐渐增多,均高于正常水平,14 d时又恢复至正常水平.结论 急性高眼压后大鼠视网膜SYN的表达先增强后减弱,且出现空间分布的改变,提示急性高眼压损伤后视网膜内突触溃变前可能存在突触功能增强的时期.

Galectin-3在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的 研究 Galectin-3 在食管鳞癌中的表达情况,初步探讨其与食管鳞癌临床病理特征的关系.方法 ①用 S-P免疫组化法检测 80 例食管鳞癌石蜡标本中 Galectin-3 蛋白的表达情况;②用 RT-PCR 法检测分析 Galectin-3 mRNA 在 36 例胃镜下切取的新鲜食管鳞癌组织中的表达情况.结果 ①Galectin-3 蛋白在食管癌组织、正常食管组织中的表达具有明显差异(P＜0.05);在分化程度低、浸润程度深及发生淋巴结转移的食管鳞癌组织中的表达明显高于分化程度高、浸润程度浅及未发生淋巴结转移的食管癌组织(P＜0.05).②Galectin-3 mRNA 阳性表达率在食管鳞癌组织中为 77.8%(28/36),在远癌正常组织中为 13.9%(5/36),结果具有显著性差异(P＜0.05);并且在分化程度低、浸润程度深及发生淋巴结转移的食管鳞癌组织中的表达明显高于分化程度高、浸润程度浅及未发生淋巴转移的组织,差异亦有显著性(P＜0.05).结论 Galectin-3 的差异表达,可能与食管鳞癌的发生、发展及转移有关.

异黄酮改构化合物F11对去势大鼠乳腺的影响

目的 探讨异黄酮改构化合物F11对去势大鼠乳腺的生物学效应.方法 选用雌性Wistar大鼠,制作去势模型分为生理盐水组、雌二醇组、F11组、假手术组,腹腔给药每日1次,连续给药12周,每4周测血清中雌二醇含量,12周后处死大鼠取乳腺组织观察乳腺组织形态学变化,免疫组化及Western blot检测PCNA、Erα、Erβ表达情况.结果 F11早期可使血清E2升高;减缓去势大鼠乳腺组织的萎缩;可上调Erβ及PCNA在去势大鼠乳腺组织中的表达.结论 F11有类似雌激素样作用,能有效缓解去势大鼠乳腺的萎缩,可能是通过上调Erβ实现的.

非离子型造影剂在静脉尿路造影中过敏反应的观察和急救

静脉尿路造影(intravenous pyelgraphy, IVP),又称排泄性尿路造影(excretory urography)检查系利用含碘造影剂经静脉注射法注入体内,通过尿路生理的排泄作用,将尿路器官自上而下全部或部分顺序显示,用以观察尿路的病变与功能.

严重缺损前牙牙髓炎一次法根管治疗术的临床观察

牙髓炎采用常规法治疗疗程长,患者复诊次数多.近年来,一次法根管治疗术治疗牙髓炎得到普遍应用.我科在2001-2004年期间,采用一次法根管治疗术治疗严重缺损前牙牙髓炎患者111例,效果可靠.

重庆市城市体检人群高尿酸血症的患病情况及相关因素分析

近年来与代谢有关的疾病高尿酸血症作为动脉粥样硬化和冠心病的独立危险因素与代谢综合征的肥胖、高脂血症、高血压密切相关[1] .我们采用分层随机抽样的方式,共抽取了2007年本中心健康体检人群15 823例的血糖、甘油三酯、胆固醇等的数值并进行统计分析,现报告如下.

间变性大细胞淋巴瘤19例临床特征分析

间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)具有独特的病理学改变和生物学行为.我科2003年3月至2008年1月收治经病理证实的19例ALCL,占同期NHL的6%,现将其临床病理特点、治疗方法、疗效和预后分析如下.

主动脉夹层累及急性下壁心肌梗死和脑梗死1例

1 临床资料患者,女性,54岁,主因"左侧胸痛4 d"入院.于4 d前休息时突然出现左侧胸痛,向下颌部、左前臂和下肢放射,伴大汗,左侧肢体功能障碍,经给予含服"速效救心丸数粒"症状缓解不明显,急打"120"到当地急救中心,心电图提示:急性下壁心肌梗死,入院后给予溶栓、抢救、电除颤、改善心肌缺血、营养心肌等治疗,胸痛症状反复发作,效果欠佳.

脑出血患者早期血肿扩大的多因素分析

目的 探讨脑出血患者早期血肿扩大的发生率、发生时间及相关因素.方法 对84例脑出血患者进行 CT动态扫描, 观察血肿体积、形态和出血部位.血肿增大的判断标准采用多田氏公式计算血肿体积,净增33%以上为血肿扩大.并于次日清晨抽取空腹血标本,检测纤维蛋白原( Fbg)、血小板计数及肝、肾功能.结果 本组血肿扩大率29.7%,其中64%发生起病24 h内;Fbg水平越低,血肿越易扩大(P＜0.001);出血量越大,发生血肿扩大的可能性越大(P＜0.01);不规则形态血肿扩大的发生率为 52%,明显高于类圆形(18%),椭圆形(20%),肾形(10%)(P＜0.05).;丘脑出血继续出血的发生率为58%,明显高于基底核出血(21%),脑叶出血(20%)(P＜0.05);高血压病史及住院发生呕吐与血肿扩大有关(P＜0.05);性别、年龄、抽烟、饮酒、肾功能及血小板计数均与血肿扩大无关(P＞0.05).结论 脑出血患者早期血肿扩大多发生在24 h内;血肿扩大的相关因素为Fbg水平、出血量、出血部位、血肿形态、高血压病史、呕吐.

针刺小鼠丰隆穴对代谢等相关基因表达的影响

目的 针刺小鼠丰隆穴(ST40),以高胆固醇血症疾病为模型,筛选和鉴定针刺治疗相关基因.方法 将小鼠分为正常组、疾病组和针治组,分别将以疾病模型小鼠和针治小鼠肝组织的cDNA为Tester, 以正常小鼠肝组织的cDNA为Driver, 应用抑制消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization, SSH) 和斑点杂交筛选方法,筛选针刺治疗特异表达基因.结果 成功构建正常组消减疾病组cDNA消减文库和正常组消减针治组cDNA消减文库.在此基础上通过对两个消减文库斑点杂交,筛选出针刺治疗特异表达基因7个,其中未知功能基因1个.结论 SSH技术是筛选新功能基因的有效方法,通过对筛选的6个已知功能基因的分析,推测针刺治疗疾病影响基础代谢、细胞生长和信号传递等方面的基因表达,为研究针刺治疗疾病的分子机理提供理论依据和实验依据.

固态溶液技术制备辛伐他汀口腔崩解片

目的 利用固态溶液技术制备辛伐他汀口腔崩解片的处方和工艺研究.方法 将明胶、甘露醇溶于水中,分装入PVC模具中,冷冻后用无水乙醇置换其中的固态水,然后挥发无水乙醇,加入主药制成片剂, 并进行处方筛选.结果 片剂成形性好,在10 s内崩解完全.结论 固态溶液技术用于制备口腔崩解片,具有较好效果.

对肿瘤研究前沿之肿瘤干细胞的几点认识

近些年肿瘤研究进展迅速,着实推动了肿瘤临床诊断和防治水平的提高,并带动了相关学科的发展和医学技术的进步.肿瘤病因学研究明确了数千种直接和间接致癌物(因素),发生机制研究揭示了肿瘤是一类多基因异常、多步骤发生、异质性演进的细胞分化异常性疾病、遗传性疾病和干细胞疾病.

作者书写数字须知