人结肠癌细胞系裸小鼠淋巴结转移的观察

目的 建立人结肠癌细胞系裸小鼠爪垫淋巴道转移动物模型,并评价卡培他滨抗癌药物效果.方法 裸小鼠爪垫皮下注射人结肠癌HCT-116细胞,在1～6周及8周取材,进行HE染色及CEA免疫组化检测,观察种植瘤的成瘤率、生长情况、淋巴结转移规律,并口服卡陪他滨抗癌药物观察其疗效.结果 种植1周后成瘤率100%.肿瘤在3～4周成指数生长.3周时见第一级胭窝腹股沟淋巴结转移(2/5),到6周时100%转移,其中腹股沟淋巴结转移阳性率76.9%(10/13);5周时见第二级髂血管旁淋巴结转移(1/5);到8周时见第三级肾门淋巴结转移(1/5),髂血管旁淋巴结转移(3/5),但均未见肝肺远处转移.淋巴结转移发生在肿瘤指数生长之前,HE染色及CEA免疫组化染色证实淋巴结有弥漫性癌细胞转移浸润.口服化疗药物卡培他滨能有效抑制肿瘤生长及淋巴结转移.结论 成功建立了人结肠癌裸小鼠爪垫淋巴道转移模型.此模型快速简便、转移集中、转移率高,且应用此模型能够评价抗癌药物卡培他滨抗癌疗效.

Tiaml基因沉默降低结肠癌细胞VEGF-C/-D的表达

目的 探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiaml)的表达与结肠癌淋巴管生成的关系.方法 将实验细胞分为3组,分别为未干扰组(HCT116)、空质粒载体对照组(HCT116/CN)和干扰组(HCT116/siRNA-Tiaml).应用siRNA使Tiaml基因表达下调,通过RT-PCR检测Tiaml mRNA表达抑制率,并用RT-PCR和Western blot方法检测Tiaml基因干扰前后VEGF-C/-D mRNA和蛋白的表达情况.结果 通过筛选后稳定表达的情况下,siRNA组的Tiaml、VEGF-C/-DmRNA和蛋白的表达明显低于未干扰组.结论 Tiaml参与了VEGF-C/-D表达的调节,推测Tiaml可能通过诱导VEGF-c/一D的表达影响结肠癌淋巴管的生成.Tiaml可作为结肠癌淋巴转移过程中一个有价值的指标.

内皮脂肪酶对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响及量效关系

目的 研究内皮脂肪酶(endothelial lipase,EL)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)黏附分子ICAM-1表达的影响及量效关系.方法 以TNF-a(10ng/m1)刺激HUVEC,用RT-PCR检测黏附分子ICAM-1 mRNA表达的变化;以50 ng/ml EL抗体进行预处理,再检测黏附分子mRNA表达的变化;再用0～50 ng/ml不同浓度EL抗体对HUVEC进行预处理,检测不同浓度EL抗体作用后ICAM-1 mRNA表达的变化.结果 HUVEC受TNF-a作用后,ICAM.1表达显著增加(P＜0.01),该作用可为EL抗体所拮抗,这种拮抗作用呈现剂量依赖性增强(P＜0.01,P＜0.05).结论 EL可呈剂量依赖性的促进内皮细胞表达ICAM-1,提示TNF-a作用于HUVEC产生的EL可促进黏附分子ICAM-1的表达.

模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察

目的 研究模拟微重力条件下小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESc)拟胚体(embryoid bodies,EBs)的形成及分化.方法 胰酶消化普通培养的小鼠胚胎干细胞,调整细胞数为1×106·ml-1,移入可模拟微重力的旋转型生物反应器内进行培养,显微镜动态观察鼠EBs的形成,苏木精-伊红染色观察ESc的组织细胞分化情况,检测培养过程中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的漏出量.取不同时相的EBs,接种6孔培养板培养3～5 d,倒置相差显微镜观察EBs来源细胞的分化.结果 生物反应器旋转培养24 h即可肉眼观察到大量多细胞聚集体形成,相差显微镜和立体显微镜下发现,72 h后细胞聚集体进一步形成均一的EBs.随培养时间延长EBs体积不断增大,并不断有新的EBs出现.HE染色显示,EBs中的ESc呈现多组织多细胞分化特征,培养后期(12 d以后)较大EBs中心有不同程度的坏死,伴LDH漏出量的明显升高.接种EBs于6孔培养板后,镜下观察到不同类型的细胞,如内皮样细胞、成纤维样细胞、肝细胞样细胞、血管样结构以及可自发性搏动的心肌样细胞.结论 ESc在模拟微重力条件下可大量快速形成EBs,伴有不同类型的组织细胞分化.旋转型生物反应器可作为ESc研究的有用工具.

赫赛汀和9-顺式视黄酸联合用药对HER2阳性荷瘤鼠乳腺癌细胞的抑制效应

目的 探讨赫赛汀和9-顺式视黄酸单独和联合用药对HER2阳性乳腺癌细胞周期进程的体内协同抑制效应及其分子机制.方法 将处于对数生长期的MCF-7HER2细胞皮下注射到BALB/c裸鼠体内,用赫赛汀和9-顺式视黄酸分别单独和联合处理裸鼠移植瘤模型20d,测量各组裸鼠移植瘤的体积大小.利用免疫印记法检测移植瘤细胞HER2、P27、Cyclin E和CDK2蛋白的表达变化.结果 赫赛汀和9-顺式视黄酸联合作用组较对照和单独作用组能显著减小HER2阳性乳腺癌细胞裸鼠移植瘤的体积,二者联合运用还能在体内显著改变荷瘤鼠癌细胞HER2、P27、Cyclin E和CDK2的表达.结论 联合应用赫赛汀和9-顺式视黄酸可在体内通过对细胞周期相关蛋白的表达进行调控从而达到协同抑制HER2阳性乳腺癌细胞的作用.

基因芯片分析Wnt刺激后小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2的差异基因表达

目的 探讨Wnt信号传导系统对诱导干细胞向神经系统分化的基因表达的影响.方法 采用新的含有22000多个已知基因及EST克隆的小鼠基因芯片U74Av2,检测了Wnt刺激后的小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2中目标基因表达的变化,并进行实时定量PCR,验证了基因芯片结果.结果 Wnt刺激后小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2中Wnt信号传导系统各主要组成基因表达有不同程度增加;对干细胞向神经系统发育有潜在调节作用的基因表达也有增加或减少.结论 表达谱芯片分析成功筛选出wnt刺激引起表达改变且可能与神经发生有关的基因.

腹腔镜下阴道旁修补术治疗阴道前壁膨出的临床疗效分析

目的 探讨腹腔镜下阴道旁修补术(1aparoseopic paravaginal repair,LPVR)治疗阴道前壁膨出的手术技巧和疗效.方法 自2005年3月至2007年3月,对74例有临床症状的阴道前壁膨出患者行LPVR,术后定期随访.术后患者无任何自觉症状定义为主观治愈;POP-Q分期0期定义为客观治愈.结果 手术时间为(43±27)min,术中出血量为(65±45)ml,术后住院时间为(4.3±2.3)d.有8例(10.8%)术后发生阴道后壁膨出,有3例(4.1%)术后出现子宫脱垂,4例(5.4%)术后出现压力性尿失禁.其中子宫脱垂和阴道后壁膨出患者中有2例接受再次手术.压力性尿失禁患者均经保守治疗好转.随访期间有7例再次发生阴道前壁膨出,主观治愈率为94.6%,客观治愈率为90.5%.结论 对于存在阴道旁缺陷的阴道前壁膨出,采用LPVR治疗临床效果满意,该手术创伤小,恢复快,是一种安全有效的治疗方法.

SPIO标记大鼠骨髓基质干细胞及体外磁共振成像研究

目的 探讨以多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)为转染介质介导超顺磁性氧化铁微粒(superparamgnetic ironoxides,SPIO)标记大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的合适条件,通过标记细胞的体外磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)获取佳的磁共振扫描序列.方法 分离、纯化、培养大鼠BMSCs,SPIO和PLL以1:0.001 2混合配制氧化铁一多聚赖氨酸(F-PLL)混合液,用铁浓度分别为0、4.2、8.4、21、42、84μg/ml的FE-PLL复合物标记BMSCs.计算细胞标记阳性率,测量并绘制末标记细胞和不nd浓度铁标记细胞的MTT生长曲线;对不同浓度铁标记的细胞进行磁共振成像.分别用浓度为0、0.05、0.25、0.5、1.0、5.0 μg/ml的PLL同BMSCs共同培养,了解各种浓度PLL对细胞的生存是否有影响.结果 细胞的标记率分别为O%、(44.40±11.33)%、(71.97 4±8.01)%、(88.86±9.10)%、(98.24±2.94)%、100%,随着SPIO浓度的增加而增加.MTT显示在铁浓度＜42 μg/ml时FE-PLL上复合物对细胞的生长活性无明显影响,而铁浓度为84μg/ml时,细胞的生长活性受到抑制.PLL在浓度≤1.0μg/ml时对细胞的活力无明显影响;当PLL浓度为5.0μg/ml时,细胞生长明显受抑.MRI信号随FE-PLL复合物浓度的增加而增加(P＜0.05),标记细胞的信号在T1WI的改变不及在T2WI及T2*WI明显,而以T2*WI信号改变明显(P＜0.05).结论 以PLL为转染介质,SPIO能够高效的标记BMSCs,并且在合适的浓度范围内不会影响干细胞的生长活性.

非酒精性脂肪性肝病的临床、病理与CT的关系

目的 研究非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的病理变化、临床特征与肝脏CT影像学改变的关系.方法 对45例患者的肝组织标本按脂肪变、炎症和纤维化程度分级、分期,并研究其与腰围、臀围、腰臀比、体质量指数、血清生化指标的关系,其中16例行肝脏CT,分别测定肝脏及脾脏不同断面的平均cT值,并对肝组织脂肪变程度进行分析.结果 45例患者按肝组织脂肪变分级:12例为F0(设为对照组),19例为F1,13例为F2,1例为F3;肝组织炎症活动度分级:9例为G0,14例为G1,17例为G2,5例为G3;肝组织纤维化分级:11例为S0,9例为S1,16例为S2,5例为S3.肝组织脂肪变程度与腰围(r=0.357,P=0.028)、腰臀比(r=0.463,P=0.001 6)、总胆固醇(TC)(r=0.484,P=0.004)呈显著正相关.其中16例病例行肝脏CT检查,肝组织脂肪变与肝脏CT值呈显著负相关(r=-0.592,P=0.016),F0、F1、F2各组之间肝脾比值无显著差异(P>0.05).结论 随着腰围、腰臀比、TC的增高,NAFLD患者肝组织脂肪变程度逐渐加重;转氨酶高低并不与肝组织脂肪变程度相平行;随着肝细胞脂肪变程度的加重,肝脏CT值逐渐减低,但肝脾比值不能准确反映脂肪肝程度的差异.

乳化异氟醚对缺氧复氧乳鼠心肌细胞的保护作用及bcl-2、bar表达的影响

目的 观察乳化异氟醚(8%体积分数)对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA与蛋白水平表达的影响.方法 利用原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注模型,分正常培养组、模型组、脂肪乳组、乳化异氟醚(终浓度0.28 mmol/L).各组心肌细胞做相应分组处理后,利用倒置显微镜观察心肌细胞的生长状态和搏动频率,并用透射电镜观察细胞超微结构改变;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因bcl-2 mRNA、box mRNA的表达.Western blot定量检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 乳化异氟醚组和脂肪乳组均可显著降低细胞凋亡率(P＜0.05),但乳化异氟醚组与脂肪乳组比较降低更明显(P＜0.05).乳化异氟醚可显著上调Bcl-2表达(P＜0.05)、下调Bax表达(P＜0.05);脂肪乳对Bcl-2和Bax表达无影响(P>0.05).结论 乳化异氟醚及其其中的成分之一脂肪乳可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞的凋亡;乳化异氟醚对缺氧复氧损伤的抗凋亡作用与其心肌细胞Bcl-2表达上调和Bax表达下调有关.

血红素加氧酶-1在大鼠原位肝移植急性排斥反应中的作用

目的 探讨血红素加氧酶-1(hemooxygenase-1,HO-1)在大鼠原位肝移植急性排斥反应中的作用.方法 建立大鼠原位肝移植排斥模型后分为3组:对照组(A组),ZnPP组(B组)和CoPP组(C组).3组分别于3、7 d处死,取血及肝脏标本.进行肝功测定(AST、ALT、TBIL、ALB);肝组织HE染色;荧光RT-PCR检测HO-1表达.结果 ①3组肝功能3、7 d时比较有明显的统计学意义(P＜0.05).②HE染色:A组3 d出现I、Ⅱ级为主的排斥反应,7 d时出现Ⅱ级为主的排斥反应;B组3 d出现Ⅱ级为主的排斥反应,7 d时出现Ⅱ、Ⅲ级为主的排斥反应;C组3 d出现排斥反应0～Ⅱ级,以I级为主,7 d时出现排斥反应0～Ⅱ级,以I、Ⅱ级为主.③HO-1在C组表达明显升高,B组不明显,A组介于两组之间.结论 血红素加氧酶-1(HO-1)过表达能减轻急性排斥反应.

结直肠癌患者腹腔镜手术与开腹手术后并发症的风险因素分析

目的 分析腹腔镜结直肠癌手术与开腹手术后并发症的风险因素.方法 将收治的344例结直肠癌患者分为腹腔镜手术组(n=170)和开腹手术组(n=174).入院时对患者的临床一般资料进行统计,同时也对2组手术后的并发症风险因素进行分析.结果 手术后并发症的总发病率为26.5%,其中腹腔镜组为18.8%,明显少于开腹组33.9%(P＜0.01).腹腔镜组大肠功能恢复快,且住院时间短.整宗病例的多因素分析发现手术时间、输血是手术后并发症的风险因素.开腹组失血、输血、手术时间、体质量减轻、年龄等与手术后并发症有关;腹腔镜组的风险因素仅仅与手术时间有关.结论 腹腔镜手术可避免年龄、输血、失血量等多种风险因素.

Livin反义寡核苷酸诱导人肾癌细胞凋亡及其机制的研究

目的 探讨Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人肾癌细胞株786.O Livin mRNA及蛋白表达的抑制作用以及对细胞凋亡的影响.方法 设计合成全硫代磷酸化修饰的Livin ASODN,脂质体辅助转染至786-O细胞内.采用RT-PCR检测转染后Livin mRNA的变化,细胞免疫化学、激光扫描共聚焦显微镜观察Livin蛋白在细胞内的分布、转染后表达的变化及细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,激酶法测定Caspase3活性的变化.结果 转染Livin ASODN后,RT-PCR显示786-O细胞表达Livin mRNA减少(P＜0.01),激光扫描共聚焦显微镜下见细胞表达Livin蛋白减少、细胞形态发生变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率显著增加(P＜0.01),Caspase3活性明显增加(P＜0.01).结论 Livin ASODN能明显下调786-O细胞Livin基因的表达,诱导细胞凋亡.抑制Caspase3活性是Livin抑制细胞凋亡的途径之一.

糖基化终产物对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

目的 观察糖基化终产物(advanced glyeosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶.1(aeyl coenzyme A:cholesterol acyhransferase-1,ACAT-1)表达的影响.方法 将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine serum albumin,AGE-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h的THP-1巨噬细胞共同孵育,运用RT-PCR和Western blot分别检测巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 PMA诱导72 h后,THP-1细胞停止增殖,由单核细胞分化成为巨噬细胞.用50、100、200和400 mg/L AGE-BSA处理巨噬细胞后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐增加;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐增加,二者较对照牛血清白蛋白组明显增加(P＜0.05).用200 mg/LAGE-BSA作用巨噬细胞0、12、24、36 h和48 h后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐升高;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐升高,较0 h明显增加(P＜0.05).结论 AGEs可上调THP-1巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性,这可能与糖尿病动脉粥样硬化有关.

幽门螺杆菌双价亚单位分子内佐剂疫苗的构建表达与纯化

目的 克隆表达幽门螺杆菌外膜蛋白烷基过氧化氢还原酶ahpC、ureB414功能片段基因,与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位构建融合基因ahpC-ureB414-ltB(aul).方法 采用重叠延伸PCR的方法,以AhpC做为融合蛋白前端,与UreB414功能片段及黏膜佐剂ltB依次串联,在片段间引入5个氨基酸的柔性Linker GGGGS进行连接;将融合基因构建在原核表达载体pET-22b(+)中,经酶切及测序鉴定后转化宿主菌E. coli BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白ahpC-UreB414.ltB(AUL).融合蛋白经AKTA-explore纯化仪纯化融合蛋白.结果 PCR扩增出1 350 bp的目的 基因片段aul,工程菌pET22b-aul/BL21经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带,相对分子质量约为50×103,与预期值一致,目的 蛋白约占菌体总蛋白的28.7%,重组蛋白用Ni2+-NTA树脂提纯.纯化后的蛋白质经SDS-PAGE分析可见单一条带,图像软件分析表明纯度可达85%以上.Western blot显示重组蛋白质具有良好的免疫反应性.结论 成功构建、表达融合蛋白rAUL,纯化后的融合蛋白保持各亚单位组分及佐剂的独立免疫反应性.

多肿瘤标志物蛋白质芯片检测对肿瘤诊断的临床意义

目的 研究多肿瘤标记物蛋白芯片检测系统对肿瘤筛选的临床意义,并建立辨别诊断函数,以提高肿瘤诊断的准确率.方法 检测对象:体检组1209例;临床确诊良性病变组660例,临床确诊肿瘤组3 731例,共5 600例.通过检测12种常见肿瘤标志物结果和对临床资料进行回顾性研究,建立肿瘤判别诊断函数,比较12种肿瘤标志物和判别诊断函数对肿瘤诊断的准确率差异.结果 ①1 209例体检者中,128例结果异常,阳性率为10.59%,显著低于肿瘤组(P＜0.01).②12项肿瘤标志物检测结果显示其在体检组的诊断准确率为89.66%,肿瘤患者的诊断准确率为62.77%,灵敏度为66.11%,特异度为48.68%.③肿瘤辨别诊断函数对体检者的诊断准确率为93.7%,对肿瘤患者诊断准确率为75.7%.结论 肿瘤标记物蛋白芯片检测系统具有较高灵敏度和特异度,对肿瘤的早期诊断具有重要临床价值.辨别肿瘤的函数可提高肿瘤诊断准确性.

异丙酚对猕猴再灌注肺损伤的保护作用机制

目的 通过观察异丙酚在猕猴失血性休克并复苏过程中对病理生理学变化的作用,探讨休克复苏引起肺损伤的原因和异丙酚的保护作用机制.方法 12只猕猴按随机数字表法分为对照组和异丙酚组,每组6只.建立失血性休克复苏导致再灌注肺损伤的动物模型.异丙酚组猕猴除在放血前用计算机靶控技术输注异丙酚使猴血浆异丙酚浓度达到8 mg/L并维持此水平到实验结束外,其余操作与对照组相同.分别于放血前、休克2 h和复苏2 h测定血流动力学参数,并抽动脉血行血气分析、血常规检验.结果 异丙酚组在休克2 h和复苏2 h时平均肺动脉压(MPA)、肺血管阻力指数(PVRI)均明显低于对照组(P＜0.05),血小板(PLT)计数明显高于对照组(P＜0.01);复苏2 h时异丙酚组白细胞(WBC)计数明显低于对照组(P＜0.01).结论 休克复苏时肺动脉高压和全身炎性反应可能是导致肺损伤的原因,异丙酚可通过降低肺动脉压和减轻全身炎性反应显著减轻肺损伤.

survivin蛋白的原核高效、可溶性表达及其抗体在恶性肿瘤早期诊断中的应用

目的 实现重组survivin在大肠杆菌中的高效、可溶性表达,检测健康人和肿瘤患者血清中anti-survivin并探讨其在肿瘤早期诊断中的应用价值.方法 重组PET32a-survivin质粒转化BL21感受态细胞,IPTG诱导表达8 h后对表达产物行溶菌酶处理、冻融及超声处理,SDS-PAGE及Western blot鉴定后用镍离子金属螯合层析柱纯化.建立基于重组融合蛋白的survivin特异性抗体的检测方法,对300份健康血清、144份肿瘤血清anti-survivin进行了检测,并将anti-sur-vivin与肝癌、肠癌、胰腺癌、卵巢癌患者中AFP、CEA、CA199、CA125等肿瘤标志物进行了联合分析.结果 重组survivin融合蛋白在BL21中获得了高效、可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的30%.建立了检测survivin抗体的间接ELISA方法,anti-survivin在不同的肿瘤血清中均有表达,阳性率各不相同.结论 成功的实现了survivin蛋白在大肠杆菌中的高效、可溶性表达;结果提示在肿瘤的辅助诊断中,anti-survivin与现有的肿瘤标志物CA199、CEA、CA-199和CA-125联合检测,可以互相补充其不足,提高肿瘤的诊断率.

角质细胞生长因子对无排卵功血子宫内膜上皮细胞PCNA、ER和PR表达的影响

目的 观察角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)对离体培养的无排卵型功血子宫内膜上皮细胞EEC中增殖细胞核抗原PCNA、雌激素受体ER和孕激素受体PR表达的影响.方法 体外培养无排卵型功血子宫内膜上皮细胞,加入不同浓度的KGF作用后,免疫组化法检测PCNA、ER和PR的表达变化,RT-PCR检测ER和PR mRNA表达的变化.结果 免疫组化染色结果,PCNA蛋白表达位于细胞核,ER和PR蛋白表达主要位于细胞核内,少数可见细胞质着色;50 ng/ml KGF作用后,正常组和功血组PCNA表达分别较作用前的对照组显著增高,ER和PR表达分别较作用前的对照组显著增高(P＜0.05);PCNA和ER表达的增加幅度在正常组和功血组之间无显著差异(P>0.05);而功血组PR表达的增加幅度显著高于正常组(P＜0.05);50.ng/ml KGF作用后,RT-PCR方法检测正常组和功血组ER和PR的mRNA表达,分别较作用前的对照组显著增高(P＜0.05).结论 KGF对体外培养的无排卵型功血和正常的子宫内膜上皮细胞均有增加PCNA、ER和PR表达的作用,但增加程度有差异,提示两组的子宫内膜上皮细胞生长均受KGF的影响,但无排卵功血可能存在与正常的子宫内膜上皮细胞不同的生长机制.

兔血液凝血功能诊断的逐步判别与分析

目的 测定兔胸部不同程度撞击伤后凝血指标的变化,并对传统的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)含量等指标进行筛选.方法 用相关分析做数据预处理剔除指标,再用逐步判别分析(stepwise diseriminant analysis,SDA)选人指标,并用多元线性判别分析诊断,后随机抽样比较剔除指标前后的诊断效果.结果 用逐步判别分析法选人4项指标,判别正确率达87.60%;剔除指标FIB后,判别正确率达96.12%;1 000次抽样诊断检验,4项指标和3项指标的平均诊断正确率分别为83.07%和85.16%.结论 逐步判别分析可有效判别兔血液出、凝血功能状况,剔除指标FIB后诊断正确率略有提高.

两种胶体用于治疗失血性休克犬对红细胞免疫功能影响的对比研究

目的 应用6%羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch,HES)130/0.4(商品名:万汶)和国产聚明胶肽(商品名:菲克雪浓)治疗失血性休克犬,对比观察2种胶体的治疗效果和对红细胞免疫功能的影响.方法 将18只犬用随机数字表法分成3组,每组6只:生理盐水组(A组)、HES组(B组),聚明胶肽组(C组).采用Wiggers改良法制作犬可逆性休克模型,使平均动脉血压降至(45.56±3.69)mmHg,并维持60 min.然后,各组分别回输不同成分的液体进行治疗.分别于休克前、休克60 min和休克治疗10、30、60 min测血流动力学指标(MAP、HR、CO).同时,于休克前、休克60 min及休克治疗60 rain取静脉血检测血浆中MDA的含量及红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率.结果 各组休克60 min时MAP与CO明显低于休克前(P＜0.01),而HR明显高于休克前(P＜0.01);血浆中MDA的含量明显升高(P＜0.01),红细胞C3b受体花环率降低而红细胞免疫复合物花环率增高(P＜0.01);各组休克治疗10、30、60 min时,各项指标均有不同程度地恢复,其中以HES组恢复佳(P＜0.01,P＜0.05).结论 HES能达到良好的休克治疗效果,并能减轻失血性休克引起的红细胞免疫功能的降低.

高氧对幼鼠肺组织细胞凋亡及p38 MAPK丝裂原活化蛋白激酶的影响

目的 探讨高氧对幼鼠肺组织细胞凋亡及p38 MAPK丝裂原活化蛋白激酶表达的影响.方法 幼年Wistar大鼠90%氧气暴露建立高氧肺损伤模型,行肺组织病理学检查,应用TUNEL法检测肺组织的细胞凋亡,Western blot法检测p38 MAPK表达.结果 高氧暴露3 d可见肺组织水肿、出血、炎症细胞浸润等急性肺损伤改变.高氧3 d组的肺凋亡指数较空气对照组明显增加,凋亡发生的主要部位为肺泡、支气管上皮及血管内皮细胞.Westem blot结果显示高氧暴露1 d,肺组织的p38MAPK活性迅速升高,于第2天达到高峰,第3天活性有所下降,但仍高于空气对照组.结论 高氧暴露可以诱导肺组织发生细胞凋亡;高氧可以激活p38MAPK通路,参与高氧性肺损伤的调控;活化的p38MAPK可能参与了高氧诱导的肺组织细胞凋亡的调控.

三羟基异黄酮对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及侵袭作用的影响

目的 观察5,7,4'-三羟基异黄酮(Genistein)对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞生长及侵袭作用的影响,探讨其抗纤维化作用的机制.方法 以25、50、100μmol/L浓度Genistein处理体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,MTT法检测细胞增殖活性,3H-脯氨酸掺入法检测细胞胶原合成,Transwell小室趋化运动模型检测细胞侵袭能力.结果 Genistein作用后,瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖及胶原合成作用降低,细胞的侵袭能力显著下降.随着药物浓度增加,对细胞的这种抑制作用也增强.结论 Genistein具有体外抗瘢痕疙瘩成纤维细胞纤维化与侵袭的作用,可成为治疗病理性瘢痕及纤维化疾病的有效药物.

染料木黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453、MCF-7、MCF-7/HER2增殖能力的影响

目的 探讨染料木黄酮(Genistein)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453(ER-,HER2-high)、MCF-7/HER2(ER+,HER2-high)、和MCF-7(ER+,HER2-low)增殖能力的影响,并观察HER2在染料木黄酮抑制肿瘤增殖中的作用.方法 通过基因转染技术建立HER2/neu高表达的人乳腺癌MCF-7细胞,免疫荧光细胞化学法鉴定;不同浓度的Genistein分别处理3种乳腺癌细胞,MTT法分别检测Genistein对肿瘤细胞增殖能力的影响.结果 Genistein对MDA-MB-453细胞的增殖抑制作用随处理浓度增加而增大,IC50约为100 μmol/L;Genistein对MCF-7/HER2和MCF-7细胞在低浓度表现为增殖促进作用,分别在大于40 μmol/L和10μmol/L时表现为增殖抑制作用.结论 Genistein可通过ER依赖和非依赖两种途径,在一定浓度范围内抑制肿瘤细胞增殖,且HER2高表达能够降低染料木黄酮对ER+乳腺癌的增殖抑制作用.

手术治疗髁状突骨折30例临床疗效

髁状突骨折是常见的下颌骨骨折.常见致伤原因有交通事故、坠跌、击打等,不同的致伤力、致伤方向、致伤性质对髁状突骨折的严重程度、移位程度以及骨折的方向、部位等影响较大,导致髁状突骨折差异较大,治疗的方法也不尽相同.迄今为止,临床上对髁状突骨折的治疗方法选择仍有较大争议.我们采用手术治疗30例髁状突骨折,效果满意,现报告如下.

金属所致系统性接触性皮炎81例临床分析

系统性接触性皮炎(systemic contacl.dermatitis,SCD)是指在个体已致敏状况下,通过口服、皮肤穿透或吸入抗原(半抗原)进入机体达到皮肤,从而引起皮肤所发生的炎症性疾病[1].引起SCD的病因很多[1-3],包括药物、调味品、金属、染发剂等.本科收集了皮肤性病门诊2005年6月至2006年6月资料完整的SCD病例,现将结果报告如下.

左侧膝关节外侧半月板变异1例

本室在解剖1青年男尸时发现其左侧膝关节外侧半月板是呈圆盘状,经测量该圆盘状半月板前后径较长为29.40 mm,而左右径较短为21.60 mm;我们又测量了该圆盘状半月板的前点、后点、外点、内点以及中心点的厚度;他们分别为:前点4.86 mm、后点4.72 mm、外点5.80 mm、内点2.84 mm以及中心点2.82 mm.虽然是呈圆盘状,但是并不是标准的正圆盘状;外缘厚内缘薄但该半月板的内缘并不游离,而是与前后交叉韧带的下端融合在一起,和正常的外侧半月板不同(图1,2).

输尿管镜下钬激光内切开术治疗后尿道狭窄

我院于2002年3月至2006年6月采用输尿管镜下钬激光内切开术治疗后尿道狭窄35例,疗效满意.现报告如下.1 资料与方法

双水平正压通气治疗阻塞型睡眠呼吸暂停综合征合并缺血性脑血管病

睡眠呼吸暂停综合征(sleep apnea syndrome,SAS)是指每晚7 h睡眠中,每次呼吸暂停发作10 s以上,呼吸暂停反复发作在30次以上或睡眠呼吸紊乱指数超过5次以上.

种植微型自攻种植体支抗的临床疗效分析

上颌前突和严重的牙列拥挤的患者在矫治过程中,常需要强力支抗以内收前牙.传统方法常使用磨牙作为支抗,但在内收前牙的同时可引起支抗牙移动.

锌状态和镉水平与妊娠期孕妇血压变化间的相关性研究

孕妇由于要同时负担本身和胎儿生长发育的营养需要,故很容易导致营养缺乏,缺锌也足常见的问题之一.镉足困扰全世界的重点有害金属之一,近些年来的研究证实,日常接触镉就有可能造成肾脏损伤.国内外有研究结果均显示,通过生产和生活环境接触镉均可引起高血压.但尚少见在孕妇中研究锌状态和镉水平与妊娠期血压变化之间关系的报告.

诺和灵30R治疗2型糖尿病血糖不满意者改用诺和锐30疗效分析

2型糖尿病的基本病理生理为胰岛素抵抗和胰β细胞功能减退,随着病程进展胰岛β细胞功能逐渐下降,后必须用胰岛素治疗[1].

深圳市553例门诊儿童PPD试验反应分析

儿童结核病由于缺乏特异性的临床表现和理想的快速病因学诊断方法,早期诊断比较困难.本研究针对门诊患儿,采用结核菌素纯化蛋白衍生物(purified protein derivation,PPD)试验并结合结核抗体检测,分析PPD试验阳性情况与结核感染,提高对儿童结核病的认识.

中重度单纯性肥胖症青少年早期动脉粥样硬化相关因素的探讨

肥胖儿童青年少并发动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)已越来越多地受到关注[1].本研究旨在探讨劲动脉超声检测结合血清瘦素水平测定预警青少年早期AS的发生,并对中重度肥胖青少年早期AS的相关因素进行分析.

是文献标识码的标识方法

地震灾后震中山区乡村早期卫生防疫的特点与对策

5.12汶川大地震后2 d,第三军医大学医疗队迅速到达了地震中心汶川县映秀镇开展医疗救护工作.5月18日我们2名队员跟随驻渝某红军师的8名突击队员乘直升机到达了映秀镇毗邻的耿达乡.灾后的耿达乡没有电力和通信,交通中断.