新型可注射性人工髓核的体外细胞毒性测试

目的 检测前期制备的新型人工髓核材料的细胞毒性.方法 材料分为4组,编号为1～4.样品1组为合成的聚碳酸酯型聚氨酯;样品2组为在室温下由硅氢加成反应制成的缩合硅橡胶材料;样品3组是在2号样品中添加二氧化硅后制成;样品4组为室温下固化的聚醚型聚氨酯.采用细胞培养基作为阴性对照组.采用小鼠成纤维细胞(1929细胞)在材料浸提液中培养的方法 检测其细胞毒性,使用3-(4,5-二甲基-2,噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTF)比色法比较材料组与对照组问吸光度值和细胞相对增值率.结果 材料组的吸光度值和L929细胞相对增殖率相埘于对照组没有明显差异(P>0.05),在细胞毒性分级中处于0～1级,属于合格材料.结论 该材料没有细胞毒性,具有作为髓核替代材料的应用潜力.

BALB/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型的建立

目的 构建适合移植使用的BALB/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型.方法 分别用3.0、4.0、5.0、6.0、7.0Gv剂量辐照BALB/c-nu/nu裸鼠,检测照射后1、3、5、7、14、21 d血象变化,检测照射后1、7、14、21 d基质细胞集落形成单位(CFU-F)和巨核细胞计数,观察照射后骨髓组织活检变化情况.结果 7.0 Gy辐照剂量照射后裸鼠全部死亡;6.0 Gy组照射后出现明显骨髓抑制,至照射后21 d不能恢复至照射前水平,且部分裸鼠照射后死亡;3.0、4.0 Gy照射后裸鼠仅出现轻度骨髓抑制;5.0 Gy组照射后出现明显骨髓抑制,未做特殊处理于照射后21 d自行恢复至照射前水平.不同剂量放射线照射后裸鼠CFU-F计数变化不同.3.0 Gy和4.0 Gy组CFU-F在照射后7～14 d 出现轻度减少,6.0 Gy组照射后CFU-F明显减少,至照射后21 d不能恢复,5.0 Gy组照射后CFU-F也出现了较明显减少,但在照射后21 d恢复至照射前水平.结论 5.0 Gy是BALB、/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型的适宜照射剂量.

线粒体途径在幽门螺杆菌诱导胃癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨线粒体途径在幽门螺杆菌(H.pylori)诱导胃痛细胞凋亡中的作用.方法 采用流式细胞术检测H.pylori NCTC 11637诱导的SGC-7901细胞凋亡,RT-PCR和Western blot法检测H. Pylori感染对线粒体途径相关基凶和蛋白表达的影响,并观察Caspase抑制剂对H. Pylori所致SGC-7901细胞凋亡的影响.,结果 H. Pylori能够在体外直接诱导SGC-7901细胞凋亡,6、12、24 h和48 h的凋亡率分别为6.30%、11.57%、8.63%和7.22%;H. Pylori能够呈时间依赖性地上调SGC-7901细胞的Bax蛋白表达,并促进Caspase-9和3的激活;Caspase-9和3抑制剂能够显著抑制NCTC 11637所致的SGC-7901凋亡,而Caspase-8抑制剂仪能部分抑制约20%NCTC 11637所致的SGC-7901凋亡.结论 H.pylori可引起SGC-7901细胞Bax基因和蛋白表达升高,激活Caspase-9和Caspase-3,且主要通过线粒体途径诱导细胞凋亡.

肝素酶、bFGF在卵巢癌中的表达及与其血管生成的关系

目的 探讨肝素酶(heparanase,Hpa)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在卵巢癌组织中的表达及与卵巢癌血管生成的关系.方法 采用免疫组化S-P法榆测41例卵巢癌组织中Hpa、bFGF蛋白的表达同时对其微血管CD34进行染色,计数卵巢癌中的微血管MVD(microvessel density).结果 ①Hpa蛋白在卵巢癌组织中表达率增高并与卵巢癌中的微血管MVD及bFGF蛋白的表达成正相关(r=0.351,P<0.05;r=0.420,P<0.05);②卵巢癌组织中bFGF阳性表达组MVD值高于bFGF阴性表达组;③卵巢癌组织中Hpa、bFGF均表达阳性组的MVD值高于其他组.④Hpa、bFGF及MVD的表达与卵巢癌的FIGO(2000)分期、分化程度有关.结论 Hpa住卵巢癌组织中表达增高,并且与bFGF的表达及卵巢癌的血管生成止相关,Hpa可能通过释放和激活bFGF来促进血管生成,进而促进卵巢癌细胞的生长、浸润和转移过程.

推定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位的DNA结合能力检测

目的 检测理论推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位(pap3p01基因)编码蛋白对特异性DNA的结合能力.方法 通过PCR从噬菌体PaP3基因组扩增出pap3p01基因,克隆至表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JMl109后,IPTG诱导表达目的 蛋白,超声裂菌后发现目的 蛋白质H6-PaP3P01存在于上清中,进而利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白.利用PCR与酶切方法 获取可能含有末端酶小亚单位结合位点的DNA片段,并对其3'端进行生物素标记.后采用凝胶迁移率改变实验检测H6-PaP3P01的DNA结合能力.结果 成功构建了pQE-PaP3P01表达载体,获得的融合蛋白H6-PaP3P01表达量较高且全部存在于菌体超声后的上清中.经亲和层析初步纯化及脱盐处理后,H6-PaP3P01可与263 bp特异性DNA片段结合.结论 成功构建并表达了推定的PaP3末端酶小亚单位重组蛋白H6-PaP3P01,并且检测到了该蛋白质对特异DNA的结合能力,初步证实了理论推定的正确性,为完善PaP3噬菌体包装机制的研究奠定了基础.

EphB4在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的 探讨EphB4在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学S-P法榆测65例浸润性导管癌以及12例癌旁乳腺组织中的EphB4、ER、PR、CerBb-2、P53的表达.结果 EphB4在65例乳腺浸润性导管癌中的表达明显高于癌旁乳腺组织(P<0.05),EphB4的表达与CerBb-2及肿瘤组织学分级呈正相关(P<0.05);与ER、PR及淋巴结转移元相关性(P>0.05).结论 EphB4 在乳腺癌的发展中起着重要作用.

rhNRG-1β对阿霉素心肌病大鼠的治疗作用

目的 探讨rhNRG-1β对阿霉素心肌病(adriamycin-induced dilated eardiomyopathy,ADR-DCM)大鼠损伤心肌的治疗作用.方法 雄性sD大鼠52只,参照Schwarz的方法 成功制备阿霉素心肌病大鼠23只(余29只死亡),分为:①给药组(rhNRG-1,n=8),rhNRG-1β 20μg/kg;②阴性对照组(赋形剂,n=8),注射方法 同给药组;③阳性对照组(地高辛,n=7),0.0625 mg/kg,注射方法 同给药组.另选取同批次正常鼠作为正常对照组(CON,n=8).测定心功能、血流动力学指标,心质/体质量比(HW/BW),窒壁厚度,并对心肌组织进行病理学检查及血清肌钙蛋白T、BNP水平测定.结果 与正常对照组比较,各模型组LVSP和±dp/dtmax显著降低(P<0.01),LVEDP明显升高(P<0.01),左窒壁厚度明显下降(P<0.05),各模型组心肌细胞明显受损,病理评分均升高(P<0.05),血TNT及血BNP水平明显增高(P<.05);与地高辛组、赋形剂组及给药前比较,给药组(rhNRG-1β)给药后LVSP和±dp/dtmax值均明显升高(P<0.05),LVEDP明显降低(P<0.05),HW/BW比值及左室壁厚度差异无显著性(P>0.05),心肌细胞坏死、变性程度轻,且病理评分明显降低(P<0.05),血清肌钙蛋白T(Tropomyosin binding componet,TnT)水平及血脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平显著下降(P<0.05).结论 rhNRG-1β可有效减轻阿霉素心肌病大鼠的心肌损伤,改善心功能,纠止心衰.

磁标记反义探针对小鼠的急性毒理观察

目的 评价SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针对小鼠的急性毒性,为进一步将该探针用于活体MR基因成像与靶向基因治疗奠定基础.方法 60只清洁级昆明种小鼠分为口服灌胃、静脉注射、腹腔注射3组,采用大给药苗法,口服灌胃:总剂量为2 104.8 mg/kg,给药容积40 ml/kg;静脉注射:总剂量为438.5 mg/kg,给药容积25 ml/kg;腹腔注射:总剂量为1 578.6 mg/kg,给药容积30 ml/kg;各组还另设20只小鼠按相应方式给予等量生理盐水作为对照.所有实验小鼠均在25℃室温下连续饲养14 d,观察并记录饲养期问小鼠的一般情况、主要脏器的病理学、血常规、凝血指标和血清主要生化指标改变.结果 在观察期间,各组小鼠均末出现死亡,仅个别出现食欲下降、饮水量增多、腹泻、嗜睡、活动增加等,但均在3 d内恢复正常.脏器系数无统计学差异,肝、脾、肾、心、肺、骨髓、生殖器等主要脏器颜色、形态未见明显异常改变,HE染色切片肝、脾、肾、心、肺、生殖器等细胞和Wright染色的骨髓细胞均无水肿、变性、坏死等改变,普鲁士蓝染色仅见肝、脾内分布少许监色铁颗粒.各组血常规、凝血指标及生化指标无统计学差异.结论 SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针对小鼠无急性毒性.

抗抑郁药物促进抑郁模型大鼠行为和海马血管内皮细胞生长因子的表达

目的 探讨抗抑郁药物对抑郁模型大鼠海马血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)的作用及机制.方法 选择成年雄性SD大鼠40只,分为应激+氟两汀组(氟西汀组)、应激+噻奈普汀组(噻奈普汀组)、应激组(模型组)、应激+生理盐水组(盐水对照组)、空白对照组,每组8只.采用孤养与慢性不可预见性中等强度应激(chronic unpredieted mild surss,CUMS)联合建立抑郁模型,旷场分析和液体消耗实验进行行为学观察.对抑郁模型进行抗抑郁药物氟两汀和噻奈普汀以及生理盐水作为对照灌胃30d,免疫组化观察各组大鼠海马VEGF表达情况.结果 氟两汀组、噻奈普汀组与生理盐水对照组通过较旷场分析、液体消耗试验显示抑郁模型成功.免疫组化图像分析氟西汀组、噻奈普汀组与生理盐水对照组大鼠海马VEGF表达有统计学意义(P<0.05).结论 抗抑郁药物氟西汀、噻奈普汀均能促进抑郁模型大鼠海马VEGF的表达,VEGF可能参与抑郁症的病理生理机制.

多发伤患者细胞免疫功能的变化及加鱼油肠外营养对其的影响

目的 探讨多发伤后细胞免疫功能的变化及加鱼油肠外营养对多发伤患者的影响.方法 2007年8月至2008年3月本中心收治的26例多发伤患者随机分为鱼油组和常规组,入院后即按等氮等热量的肠外营养方式给药:常规组脂肪采用大豆油1.2 g·kg-1·d-1,鱼油组脂肪采用大豆油1.0 g·kg-1·d-1加鱼油0.2 g·kg-1·d-1,均连续使用5 d.于入院后及治疗后第3、6天采集患者外周静脉血,ELISA法检测CRP、MIF、IFN-γ及IL-4浓度.结果 多发伤患者外周血中CRP、MIF、IL-4水平均较对照组升高非常显著(P<0.01),IFN-γ水平较对照组降低非常显著(P<0.01);治疗后第3大,鱼油组CRP、IL-4水平较常规组显著降低(P<0.05),MIF水平较常规组降低非常显著(P<0.01),IFN-γ水平较常规组显著升高(P<0.05);治疗后第6天,鱼油组CRP、IL-4水平均较常规组降低非常显著(P<0.01),IFN-γ水平较常规组升高非常显著(P<0.01).结论 常规治疗的同时,补充ω-3 PUFAs可以显著改善多发伤患者机体免疫防御,有效抑制了 Th1/Th2应答模式的偏移,降低了多发伤后过度的炎症反应程度,对提高多发伤患者的救治具有重要意义.

Cad-Ⅱ基因转染的hMSCs在异种骨基质材料上的粘附和增殖研究

目的 探讨经Cad-Ⅱ(OB-Cadherin,成骨细胞特异性钙粘蛋白)基因转染的人骨髓间允质干细胞(humanmarrow mesenchymal stem cells,hMSCs)在骨基质材料上的粘附性和增殖情况.方法 将脂质体介导的Cad-Ⅱ cDNA转染体外分离培养的hMSCs,再将已转染和未转染的hMSCs分为实验组和对照组,分别与异种冻十脱钙骨基质材料复合体外构建组织工程骨,通过相差显微镜、扫描电镜及MTT检测对比观察两组细胞在材料上的黏附和增殖情况.结果 2组细胞均能在骨基质材料上粘附、伸展、增殖,其中增殖情况无明显差异(P>0.05),但Cad-Ⅱ基因转染组的上架细胞数和上架率(84.5%),显著高于未转染组(71.7%),差异显著(P<0.05).结论 Cad-Ⅱ基因转染能提高种子细胞在支架材料上的粘附性,但对细胞增殖无影响.

血清内脂素在2型糖尿病合并冠心病中的临床意义

目的 分析血清内脂索在2型糖尿病及其合并冠心病中的变化,并探讨内脂素与糖尿病或/和冠心病的相关关系.方法 依据WHO的糖尿病诊断标准随机选择2型糖尿病(T2DM)患者61例,经心电图及冠脉造影检查分为:单纯T2DM组(DM)18例、T2DM合并冠心病(CHD)组(DC)43例以及正常对照组(NC)29例,其中DM组均为新诊断患者.经统计学分析3组间一般资料具有可比性.结果 DM组及DC组血清内脂素浓度水平显著高于健康人对照组(t=4.992 1,P<0.05;t=4.722,P<0.05).DC组患者血清内脂素水平与DM组对照组有显著下降(t=4.236,P<0.05).结论 2型糖尿病患者内脂素水平下降可能提示冠心病的发生或加重,在2型糖尿病合并冠心病诊断和治疗中可能具有一定的意义.

TRAIL联合5氟尿嘧啶诱导喉癌细胞株的凋亡

目的 探讨TRAIL与化疗药物5氟尿嘧啶(5-Fu)单独和联合对喉癌HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响并探讨其可能机制.方法 不同浓度的TRAIt、5-FU单独及联合作用于HEP-2细胞株,MTT法检测其增殖抑制作用,FCM法检测细胞凋亡率,荧光显微镜下观察细胞形态,Western blot法检测c-FLIP、NF-κB蛋白的表达.结果 TRAIL与5-Fu联合作用于HEP-2细胞株时,其抑制率、凋亡率较单独作用时高,c-FuP、NF-κB蛋白的表达水平低于单独作用时的表达水平.结论 TRAIL与5-Fu联合作用有协同诱导 HEP-2细胞株凋亡的作用,可能机制为下凋c-FLIP、NF-κB蛋白的表达水平.

关节镜下同种异体骨-髌腱-骨重建前交叉韧带的临床疗效

目的 评价关节镜下应用同种异体骨-髌腱-骨重建膝关节前交叉韧带的临床疗效.方法 2005年12月至2007年12月,我科住院患者经关节镜检查证实为前交叉韧带(anterior crueiate ligament,ACL)断裂者125例,获得随访的患者109例,所有患者均于关节镜下行同种异体骨-髌腱-骨重建膝关节前交叉韧带术.疗效评估采用:KTl000,Lysholm,Irrgang,改良larson,国际膝关节评分委员会(international knee documentation committee,IKDC)韧带评分系统.结果 所有患者术后随访6～24个月,平均16.9个月,所有患者随访时异体移植物位置良好,术后所有患者KT.1000检查双侧膝关节前向松弛度差值<3 mm,IKDC评分活动水平正常或接近正常98例(89.9%),Lysholm评分从(50.2±4.3)分提高至(88.4±6.4)分,lrrgang评分从(43.4±4.3)分提高争(82.6±5.3)分,Larson评分从(41.4±4.8)分提高至(88.5±4.3)分,和术前相比均有显著性意义(P<0.01).所有患者均无严重并发症发生.结论 同种异体移植物是前交叉韧带重建良好的选择之一,关节镜下同种异体骨-髌腱-骨移植物重建前交叉韧带手术能使膝关节功能获得良好的恢复.

AQP9在脑出血大鼠脑组织中的表达变化

目的 研究大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)在脑组织中的表达变化,初步探讨AQP9在脑出血脑组织病理变化中的作用.方法 采用定量胶原酶注入大鼠尾状核建立脑出血模型,运用HE染色、免疫组化、免疫荧光双标、RT-PCR等方法 榆测脑出血大鼠脑组织AQP9表达的变化.结果 HE染色显示,脑出血面积随着时间的延长而逐渐增大,24 h达到峰值,24 h后无明显变化.RT-PCR结果 显示,除ICH 1 h外,ICH早期,AQP9 mRNA含量较假手术组降低,于6 h降至低;24 h及以后各时段明显增高,于48 h达到峰值,7 d仍明显高于对照.免疫组化和免疫荧光双标显示,AQP9在脑内表达部位随时段变化而变化,其中,ICH后48 h,AQP9强表达于脑室周围器官和渗透压感受器.结论 ICH早期AQP9表达降低可延迟细胞内水肿的形成,而ICH后期AQP9表达上调,可能与水电解质平衡调节和能量代谢调节有关.

肝癌组织中Raf激酶抑制蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)在肝癌中的表达及其临床意义.方法 采用RT-PCR方法 检测肝细胞癌、癌旁组织及正常肝组织中RKIP mRNA的表达;采用组织芯片的免疫组织化学方法 检测RKIP蛋白和磷酸化的RKIP蛋白的表达,并分析RKIP蛋白和磷酸化的RKIP的表达与肝细胞癌临床病理学特征的关系.结果 RKIP mRNA在肝细胞痛组织、癌旁肝组织及正常肝组织的表达差异无统计学意义(P>0.05).肝细胞癌、癌旁肝组织及正常肝组织中RKIP蛋白表达的阳性率分别为22.2%、86%、93.8%,磷酸化的RKIP蛋白表达的阳性率分别为29.2%、84%、93.8%;肝癌组织中RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达均显著低于癌旁及正常肝组织(P<0.05);RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达与肿瘤大小、AFP水平及有无门静脉或胆管癌栓无关(P>0.05);RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达与肝细胞癌分化程度及有无肝内或淋巴转移有关,中高分化组RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达高于低分化组,无肝内或淋巴转移组高于有肝内或淋巴转移组(P<0.05).结论 RKIP和磷酸化的 RKIP 蛋白表达的减少或缺失与肝癌的发生、发展、侵袭转移密切相关.

椎间盘镜下治疗巨大中央型腰椎间盘突出23例

目的 探讨腰椎间盘镜下治疗巨大中央型腰椎间盘突出症的可行性及疗效.方法 回顾分析本科2003-2006年间 23 例经椎间盘镜下治疗巨大中央性腰椎间盘突出症患者资料,术后采用Macnab疗效标准评什手术效果.结果 术后随访3～12个月,优良21例,可2例,优良率86.9%.结论 熟悉脊柱解剖,灵活运用椎间盘镜工作通道,采用椎板间隙人路治疗巨大中央犁腰椎问盘症,可以取得满意的临床疗效.

EPO上调人CD34+脐血干细胞 CD26 的表达

目的 研究EPO对人CD34+脐血干细胞表面 CD26 表达的影响.方法 应用流式细胞仪法检测经MACS-CD34+免疫磁珠分选并采用EPO处理后培养的人CD34+脐血干细胞,通过与酶底物反应榆测人CD34+脐血造血干细胞表面CD26的表达情况.结果 与对照组相比,经EPO 100 U/ml和EPO 200 U/ml 18h培养后的CD34+脐血造血于细胞群中CD26+细胞比例明显上升,其酶活性亦明显升高.结论 EPO可上调CD34+脐血于细胞表面CD26的表达并增强其生物学功能.

清醒无制动豚鼠经典眨眼条件反射的建立及其习得规律研究

目的 以眼肌电记录法记录在清醒无制动豚鼠建立经典眨眼条件反射(conditioned reflex,CR)并分析其习得规律.方法 采用金属电极埋植技术及简易"随动"气流给气刺激装置,以声音作为条件刺激(conditioned stimulus,CS),气流作为非条件刺激(unconditioned stimulus,US),以眼肌电判断其眨眼行为,在清醒无制动的豚鼠上进行经典眨眼条件反射的训练.结果 可顺利于豚鼠的内眦采集并记录到眨眼肌电信号,动物可成功建立经典眨眼条件反射,其第4天,第7天,第10天的 CR 习得率分别可达31%、61.33%、82.67%,第15大,第20天的 CR 保持率可达到81.33%和82.33%.结论 应用眼肌电记录技术及"随动"给气刺激方法 吸可以在清醒无制动豚鼠建立经典眨眼条件反射实验.操作简单,方法 可靠,成功率高,可用于埘体型较大,不易固定动物的条件性眨眼行为研究.

Id2在三碘甲状腺氨酸调节大鼠室管膜前下区神经干细胞分化中的作用

目的 探讨三碘甲状腺氨酸(triiodothyronine,T3)对大鼠室管膜前下区(anterior subventrieular zone,SVZa)神经下细胞(neural stem cells,NSCs)分化为少突胶质细胞的影响及转录因子Id2的表达变化.方法 离体培养新生大鼠SVZa来源的NSCs,应用免疫细胞化学技术观察加入T3后对NSCs分化细胞种类、比例的影响,以及不同分化时间Id2表达的变化情况.结果 在正常自然培养的未分化NSCs中ld2表达较强,分化2h和12h时表达较弱,随后逐渐增强.加入T3后,细胞分化加速,Id2表达较对照组高(P<0.05),但此时少突胶质细胞数甚增多,而星形胶质细胞数量减少.结论 T3可能通过增加Id2的表达从而促进体外培养的SVZa NSCs向少突胶质细胞分化,而抑制其向星形胶质细胞分化.

低剂量维生素 A 及多种微量营养素佐治新生儿肺炎随机双盲对照研究

目的 探讨临床常规应用低剂量维生素A(VA)、维生素E(VE)、锌(zn)、硒(Se)对新生儿肺炎的佐治效果,了解相关生化、免疫指标的水平变化及对临床效果的影响.方法 纳入新生儿肺炎患儿150例分为3组,实收111例.VA组口服低剂量VA,复合营养组口服低剂量VA、VE、Zn、Se,安慰组订服生理盐水.分别收集患儿背景资料和在入院时、干预7 d后静脉血3 ml,采用高效液相色谱法(HPLC)测VA、酶联免疫法(ELISA)测视黄醇结合蛋白(RBP)、免疫比浊法测IgM、硫代巴比妥酸比色法测丙二醛(MDA).结果 肺炎极期患儿严重VAD达13.8%,VAD达26.2%,边缘型VAD达36.9%,各型VAD合计76.9%.营养干预2组症状持续时间均短于安慰剂组(P<0.01);干预前后比较:血清VA在营养干预2组均显著升高(P<0.01),安慰剂组无明显变化(P>0.05);血清RBP在营养干预2组前后无差异(P>0.05),安慰剂组RBP显著升高(P<0.01);血清IgM、MDA营养2组显著降低(P<0.05),安慰剂组无明显变化(P>0.05);症状持续时间和实验室指标变化在营养干预2组间无差异(P>0.05).结论 新生儿肺炎患儿在患肺炎时多种营养素的缺乏比较广泛,临床给予低剂重多种营养素干预可有效减少症状持续时间,并能有效改善患儿营养水平和抗氧化功能;使用安全、简便易行,有较好的临床应用前景.

缺氧PC12细胞中JAK1/STAT1、STAT3介导的信号通路变化

目的 研究缺氧后PC12细胞蛋白酪氨酸激酶1/信号转导子与转录激活子1(janus kinase 1/signal transducerand activator of transcription 1,JAK1/STAT1)、STAT3 mRNA和蛋白表达变化.方法 制备缺氧细胞模型.采用半定量RT-PCR技术和Western blot法检测缺氧PC12细胞的JAK1/STAT1、STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,并对PCR产物进行测序.结果 与对照组比较,缺氧2 h PC12细胞JAK1/STAT1、STAT3 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),在缺氧6 h达高(P<0.01).缺氧12 h的表达量降低(P<0.05).RT-PCR产物直接测序证实扩增产物片段与GenBank中相应序列相同.结论 缺氧能增强PC12细胞中JAK1/STAT1、STAT3基凶的表达,在缺氧所致脑损伤中可能发挥重要作用.

大肠癌中聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶对聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶的调节作用及意义

目的 初步探讨人肠癌中聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶[Poly(ADP-ribose)glycohydrolase,PARG]与聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的关系.方法 应用S-P免疫绀化检测人大肠癌组织中PARG、PARP的表达;以PARG抑制剂丹宁酸(Gallotannin,GLTN)为处理因索,采用流式细胞计数检测小鼠结肠腺癌CT26细胞中PARG、PARP表达变化.结果 PARG和PARP在人大肠癌组织中的表达呈正相关(γ=0.300 01,P<0.05);流式细胞计数显示,用GLTN处理后,小鼠结肠腺癌CT26细胞中PARG、PARP的阳性细胞率分别较对照组降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 大肠癌中PARG和PARP的表达有相关性,PARG抑制剂可以抑制PARG及PARP表达,PARG叮能对PARP具有调节作用.

宫腔镜治疗宫颈妊娠4例临床分析

宫颈妊娠发病率虽然仅占异位妊娠总发病率的1%[1],但误诊率高.治疗上多采取氨甲蝶呤化疗或刮宫等治疗方法,近年来开展了介入治疗和妊娠部位局部药物治疗,各种治疗方法各有利弊.我院2001年以来对4例临床确诊的宫颈妊娠患者实行MTX肌肉注射联合腔镜治疗,取得了良好治疗效果,现总结如下.

双氢青蒿素哌喹与甲氟喹治疗无并发症恶性疟疾的比较

疟疾是全球较为严重的传染病之一,全球每年有3～5亿人感染疟疾,150～270万人因此而死亡[1].2007年1-9月我们在联合围苏丹特派团(联苏团)瓦乌二级医院工作期间,对双氢青蒿素哌喹与甲氟喹治疗无并发症恶性疟疾的疗效进行了比较,现报告如下.

经导管封堵先天性主动脉窦瘤破口2例

先天性主动脉安瘤破裂是临床上比较少见的先天性心脏病,占先天性心脏病的0.31%～3.56%.传统的治疗方法为外科于术修补,近年来,随着介入治疗技术的发展,国内外已有经导管主动脉窦瘤破口封堵术获得成功的报道[2].2007年,我科经导管成功封堵先天性卡动脉实瘤破口2例,现报告如下.

四肢主干血管损伤术后护理

本科2005年10月至2008年6月期问收治32例四肢主干血管损伤的患者.通过积极的治疗、严密的观察和精心的护理,提高了治愈率、降低了截肢率.现将护理总结如下.

平滑肌肌动蛋白在胆管机械性损伤与电灼伤中的表达

目的 通过研究胆管机械性损伤与电灼伤的早期变化,比较开腹胆囊切除术和腹腔镜胆囊切除术导致担管损伤的差异.方法 选本地健康杂交犬35只,按抽签法随机分为机械性损伤组(n=15),电灼伤组(n=15)和对照组(n＝5),建立动物胆管损伤模型,机械性胆管损伤用手术刀做胆管壁全层锐性损伤,电灼伤组胆管损伤用电刀全层切开胆总管壁,然后均行黏膜对黏膜全层缝合,取正常胆管作为对照.分别于术后1周、2周、1个月取胆管损伤处标本,用免疫组化s-P法检测α-SMA在各组中的表达强度,利用图像分析系统定量分析3组中的阳件细胞数,并进行统计学分析.结果 α-SMA在IF常胆管壁中表达于少量平滑肌组织,在机械性损伤组及电灼伤组胆管损伤模型中表达于MFB细胞质与平滑肌组织中.统计结果 显示:机械性损伤组胆管损伤模型中各时期α-SMA表达强度均强于对照组(P<0.05);电灼伤组胆管损伤模型中各时期α-SMA表达强度均强于对照组(P<0.05);电灼伤组各时期α-SMA表达强度均弱于同期机械件损伤组(P<0.05).结论 在胆管电灼伤组织中的修复反应弱于机械损伤的组织,可能导致电灼伤组的瘢痕愈合周期延长.

骨间后神经桡管段的解剖学观测和临床意义

目的 探讨桡骨头颈部手术的安全区,为骨间后神经卡压综合征的手术治疗提供解剖学资料.方法 在80侧上肢标本上解剖观测骨间后神经桡管段的行程、毗邻和可能存在的卡压部位.结果 在桡管内,骨间后神经在桡骨头前方附近自桡神经发出,隔肘关节囊、环状韧带越过肱骨小头、桡骨头行至桡骨颈外侧中线处与桡骨颈交叉.该交叉部位距桡骨头上缘(3.6±0.4)cm;桡侧返血管的分支、桡侧腕短伸肌腱弓均对骨问后神经形成卡压.结论 桡骨上端后外侧3.0 cm范围内是桡骨头颈骨折手术暴露、放置钢板的全区;在行骨间后神经减压术,切开Frohsf腱弓的同时,将桡侧返血管的分支和桡侧腕短伸肌腱弓一并处理.

腹腔镜CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞体外增殖能力的影响

目的 探讨腹腔镜CO2气腹对人宫颈癌CaSki细胞体外增殖能力的影响.方法 建立腹腔镜CO2气腹体外模型,以不同压力(0、7、14 mmHg)的CO2气腹对人宫颈痛CaSki细胞分别处理不同时间(1、2、3、4 h),设未处理组为对照.采用流式细胞仪检测各组细胞周期分布及增殖指数的变化,采用免疫细胞化学法分别检测处理后各组细胞PCNA 和 Ki-67的表达情况.结果 ①7 mmHg CO2气腹主要增加G2～M期细胞比例,而14 mmHg CO2气腹主要增加S期细胞比例.②caSki细胞的增殖指数与一定的压力和时间成正相关.③CO2气腹在一定的压力和作用时间范围能上调PCNA和Ki-67在CaSki细胞中的表达.结论 CO2气腹可提高人宫颈癌CaSki细胞体外增殖能力,从而实现其促肿瘤细胞生长的生物学效应.

激光捕获显微切割-单细胞PCR技术的应用研究

目的 建立一套优化的激光捕获显微切割-单细胞聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术,应用于分子组织学研究中单细胞基因的检测.方法 从淋巴结反应性增生冷冻组织切片中,应用激光捕获显微切割获取1-10个淋巴细胞,采用优化的单细胞PCR反应体系和条件进行β-珠蛋白基因检测.结果 单轮常规 PCR 各组多细胞的扩增阳性率比较无显著性差异(P>0.05),而单细胞的扩增阳性率低于各组多细胞,有显著性筹异(P<0.01);半巢式降落式PCR的单细胞扩增阳性率高于单轮常规PCR,有显著性差异(P<0.01).结论 联合应用优化的激光捕获显微切割及半巢式降落式PCR技术,显著提高了单细胞PCR的敏感性、特异性和稳定性.

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