人原始生殖细胞的分离和培养

目的 探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法.方法 分离、培养2～3个月人胚胎的成纤维细胞,经60Co照射后作为饲养层;从5～9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞,培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞饲养层上;同时采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测人原始牛殖细胞阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4以及特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL的表达,并进行类胚体培养.结果 分离的人原始生殖细胞在饲养层上可以增殖形成典型的鸟巢状集落;细胞染色体均为正常的二倍体核型;阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4表达阳性,同时检测到生殖干细胞特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZI.表达.人原始生殖细胞在悬滴培养时能够形成类胚体,表明其具有多项分化潜能.结论 用人胚胎成纤维细胞作为饲养层进行体外培养人胚胎生殖嵴和肠背系膜组织,分离的原始牛殖细胞形成EG细胞集落,初步鉴定为人胚胎生殖细胞.

bcl-2在氧化低密度脂蛋白诱导人血管内皮细胞凋亡中的作用

目的 观察氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)对人血管内皮细胞株EA.hy926凋亡的影响,并探讨bcl-2在其中的作用.方法 MTT法检测不同浓度的oxLDL(50、100、150、200 oe/m1)对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测不同浓度的oxLDL对细胞凋亡的影响;RT-PCR、Western blot和免疫荧光细胞化学法分别检测不同浓度的oxLDL对bcl-2 mRNA、蛋白表达及在细胞内表达的影响.结果 oxLDL对EA.hy926细胞形态有明显影响,并能明显抑制EA.hy926细胞增殖能力,抑制作用随处理浓度增加而增大,半数抑制浓度(IC50)约为100ug/ml;不同浓度的oxLDL处理细胞24 h后,与对照组比较,早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比均显著增加(P<0.05);oxLDL能够明显抑制细胞内bel-2 mRNA、蛋白表达及在细胞内的表达水平.结论 6cl-2基因在oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡中发挥重要作用,oxLDL可能通过下调bcl-2的表达促进血管内皮细胞凋亡.

欧几里德几何距离矩阵法对FGFR2 Ser252Trp点突变小鼠头颅形状特征的分析

目的 通过定量分析模拟Apert综合征患者的FGFR2 Ser252Trp突变小鼠模型和野生型小鼠头颅表型,并与Apert患者所表现出来的异常头颅颜面特征进行比较,探讨所建立的Apert小鼠模型能否真实地模拟Apert综合征患者的头颅表型.方法 采用蚂蚁啃食的方法制备Ser252Trp突变小鼠和同窝对照小鼠头颅标本,用三维坐标测量仪检测头颅27个标记点的三维坐标值,用欧儿里德几何距离矩阵法(euclidean distance matrix analysis,EDMA)对突变小鼠和对照小鼠头颅三维数据进行处理和统计分析.结果 Ser252Trp突变小鼠头颅形状与同窝对照组相比具有统计学差异(P<0.01),突变小鼠头颅长度缩短,且头颅前端缩短比后部缩短更严重,头颅面部鼻骨长度、前颌骨、上颌骨及颧骨长度明显缩短(P<0.01),眼间距和额骨宽度变宽,颅腔长度有所缩短,宽度增加,颅顶升高(P<0.01),这与Apert患者颅而的临床表现高度相似:眼间距增宽,面中部发育不良,鼻骨缩短,上颌骨发育低下,突眼,颅腔变宽呈圆鼓状.结论 FGFR2 Ser252Trp突变小鼠从表型上真实地反映Apert患者的头颅颜面特征,可以作为人类Apert综合征的较好模型用于有关疾病致病机制、手术及药物治疗的研究模型.

军事医学综合演练学员42例晕厥原因分析及防治措施

目的 探讨军医大学军事医学综合演练期间学员发生晕厥的病因及其影响因素.方法 结合演练实际,对参加军事医学综合演练中学员发生晕厥42例临床资料情况进行回顾性的调查分析.结果 军事医学演练中血管功能障碍性晕厥占78.87%,女生发病率明显高于男生(x2=28.27,P<0.01);代谢性晕厥占14.29%;演练第1～3天时晕厥发病率高(69%).结论 对参加军事医学综合演练的学员应采取加强预防、及时救治、平时强化锻炼、灵活管理等措施,防止和减少晕厥情况发生,以保障军校学员的身体健康.

含顺铂的4组联合化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效比较

目的 发通过回顾性比较顺铂的4组化疗方案治疗不同组织学类型晚期非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)患者的疗效差别,以期更好地选择化疔目标人群.方法 166例NSCLC患者,按组织学类型(鳞癌组94例、腺癌组72例)分别采用TP、GP、NP、DP 4种化疗方案治疗.化疗至少2周期后评价疗效及不良反应.结果 总有效率(overall response rate,ORR)为34.9%,鳞癌组与腺癌组ORR分别为38.3%、30.6%.其中,不I司化疗方案TP、GP、NP、DP比较,鳞癌组的ORR分别是41.7%、44.O%、34.8%、31.8%;中位生存时间(median survival time,MST)分别为:12.1、12.3、11.7、11.8个月;中位疾病进展时间(time to progression,TTP)分别为:4.4、4.5、3.1、4.4个月;1年生存率分别为:41.7%、44.O%、34.8%、36.4%;腺癌组的ORR分别为27.8%、25.O%、40.0%、28.6%;MST分别为:11.2、I I.1、11.5、10.4个月;TTP分别为:3.7、3.2、4.0、4.7个月;1年牛存率分别为:33.3V、30.0%、35.0%、35.7%;鳞癌、腺癌组内、组问比较无显著性差异(P>0.05).主要不良反应是骨髓抑制、恶心、呕吐、静脉炎、脱发.GP组血小板减少发生率(51.1%)高,且Ⅲ.、Ⅳ.血小板减少达24.4%,与其他组比较具有显著差异(P<0.05).NP组静脉炎的发生率(37.2%)明显高于其他组(P<0.05).NP组恶心、呕吐发牛率(32.9%)较其他组高(P<0.05).结论 TP、GP、NP、DP4种化方案治疗不同组织学类型NSCLC疗效相似,不良反应存在差异,应根据患者个体情况进行选择.

局麻下经皮肾微造瘘二期取石术治疗合并高危因素的肾结石

目的 探讨合并心肺功能障碍和/或上尿路感染的高危老年肾结石患者手术治疗方式的选择及其安全有效性.方法 同顾性总结2006年1月至2008年3月我科治疗的12例患者的临床资料.12例患者术前检查均有通气功能障碍或混合性呼吸功能障碍,7例合并高血压,3例合并心功能不全,4例合并糖尿病,6例合并上尿路感染.术前ASA分级均≥3级.手术均分期进行.一期在1%利多卡凶局麻下B超引导经皮肾穿刺,皮肾通道扩张至14F,放置12F造瘘管.5～7 d后局麻下经原皮肾通道行经皮肾镜取石术.应用视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评估患者耐受程度.结果 12例手术两期均顺利完成.一期手术时间15-25 min,平均21 min.二期手术时间20-45 min,平均35 min.一期手术VAS评分2.1～6.2 nlnl,平均3.9 mm,二期手术VAS评分1.5～6.4 mm,平均3.5 mm,患者均能良好耐受,无需更改麻醉方式.12例术后均无继发性大出血,无继发肺部感染、电解质异常及心脏并发症.1例术前有明显上尿路感染者一期术后发热2 d,经广谱抗牛素治疗后缓解.二期术后复查KUB,仅1例下盏残留结石4 mm.随访6～18个月,均无结石复发,无继发上尿路感染.结论 对于选择性的合并心肺功能障碍和/或伴有上尿路感染等高危因素的肾结石患者,采用局麻下分期经皮肾取石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)的方法疗效确切,同时明显降低了手术风险,是一种可选择的方法.

养精种子汤对缺氧雄性大鼠生殖细胞凋亡的影响

目的 观察中药制剂养精种子汤对缺氧雄性大鼠生精细胞凋亡的影响.方法 36只雄性sD大鼠分为正常组、缺氧组、养精种子汤低剂量(10 g·kg-1·d-1)组和养精种子汤高剂量(35 g·kg-1·d-1)组(n=9).用模拟海拔5 000 m的低压舱,造成火鼠牛殖系统损伤模型,应用光镜、电镜、原位末端标记法(TUNEL)观察服用养精种了汤前后大鼠生精细胞捌亡情况.结果 光镜下缺氧组示牛精小管内生殖细胞排列紊乱,生精细胞数减少,生精上皮变薄,管腔内精了数明显减少,而养精种子汤高剂量组可见牛精小管各级牛精细胞发育正常,排列整齐,管腔内有大量成熟精子.电镜F缺氧组出现明显细胞凋亡情况,养精种子汤高剂量组明显改善.TUNEL法榆测表明缺氧组与正常组、养精种子汤低剂量组和养精种子汤高剂量组相比生精细胞凋亡率明显增高(P<0.01).结论 养精种子汤能明显减少缺氧雄性大鼠的生精细胞凋亡.

p38MAPK在体外培养脊髓星形胶质细胞P物质刺激活化中的作用

目的 观察体外培养脊髓星形胶质细胞P物质刺激活化过程中p38MAPK活性、TNF-Ot、NO水平及NOS活性的变化,探讨p38MAPK活性变化与脊髓星形胶质细胞活化的关系.方法 分离培养的SPF大鼠脊髓星形胶质细胞设正常对照组(止常组)、SP刺激组(SP组,10-7mol/L)、SB203580阻断p38MAPK组(SB组,10 umol/L)和sP刺激+SB203580阻断p38MAPK组(SP+SB组).WB法、RT-PCR法、ELISA法检测1,3,12,24 h和36 h时p38MAPK、p-p38(磷酸化p38MAPK)含量及GFAP mRNA、TNF-0、NO水平和NOS活性的变化.结果 脊髓星形胶质细胞GFAP阳性表达率大于95%.SP组脊髓星形胶质细胞总p38MAPK水平无显著变化,1 h后p-p38开始升高,3 h后GFAP mRNA水平显著增高,同时NO、NOS和TNF-a水平显著增高.用SB203580阻断p38MAPK通路后,sP+sB组较sP组p-p38、GFAP mRNA、NO、NOS、TNF-a水平显著降低.SB组总p38MAPK、p-p38、GFAP mRNA、NO、NOS、TNF-a水平无显著变化.结论 p38MAPK信号通路参与r脊髓星形胶质细胞P物质刺激活化过程,阻断p38MAPK信号通路可有效降低炎性因子水平.

急性胆道感染时肝组织脂多糖受体CD14的表达机制

目的 探讨急性胆道感染时大鼠肝组织巾脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)受体CDl4的表达及其对细胞因子分泌的影响.方法 通过结扎Wiser大鼠月日总管,在胆总管内注人大肠杆菌0111:B4,复制急性胆道感染动物模型.于术后0、3、6、12、24 h分别检测肝组织中CDl4蛋白和mRNA表达水平,血浆内毒素、TNF-Ot和IL-6的含量、枯否细胞(kupffer cells,KCs)吞噬活性,电镜观察KCs超微结构的变化.结果 在急性胆道感染时随着感染时间延长,血浆内毒素浓度逐渐升高,KCs呈现激活的改变,血浆TNF-a、IL-6含量明显增加,而此时肝组织中CD14的表达也显著增加.结论 急性胆道感染时肝组织中CD14的表达进行性增强,KCs激活,释放的细胞因子也逐渐增多,这可能是急性胆道感染时KCs敛炎作用增强的重要机制之一.

PDTC对重症急性胰腺炎E-selectin、氧化应激相关酶表达的影响

目的 探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸脂(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对重症急性胰腺炎(severe acutepancreatitis,SAP)大鼠胰腺组织E.selectin和氧化应激相关酶的影响.方法 36只sD大鼠随机分成6组:正常组(n=6)、SAP组(n=6)、左旋精氨酸注射前1 h注射l mg/kg PDTC干预组(A组,n=6)、左旋精氨酸注射后3 h注射l ms/kgPDTC十预组(B组,n=6)、左旋精氨酸注射前1 h注射100 ms/kg PDTC干预组(C组,n=6)、左旋精氨酸注射后3 h注射100 mg/kg PDTC干预组(D组,n=6).采用腹腔内注射20%左旋精氨酸制作大鼠SAP模型.正常埘照组以生理盐水代替左旋精氨酸注射24 h后检测胰腺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、脂质过氧化物酶(1ipid peroxide,LPO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的活性,免疫组化测定胰腺组织E-selectin,凝胶电泳迁移阻滞试验检测核转录因子NF-KB DNA结合活性.结果 在SAP组及SAP+PDTC组中,NF-KB、MPO、LPO、诱生型NOS(inducible NOS,iNOS)活性及E-selectin表达高于对照组(P<0.05),l mg/kg PDTC干预组(特别是模型诱导前1 h干预组)下调上述指标(P<0.05);结构型NOS(constitutive NOS,cNOS)活性低于对照组(P<0.05),而1 mg/kg PDTC干预组恢复cNOS活性(P<0.05).100 ms/kg PDTC对上述指标无影响.结论 1 mg/kg PDTC通过抑制NF-KB减轻SAP炎症程度,而100 ms/kgPDTC则无作用.

应用量子点及磁微粒技术快速检测阴道毛滴虫抗原

目的 以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备.方法 针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体.量子点及抗体-磁微粒加入待测抗原AP33结合后,在荧光显微镜下观测结果.结果 确立了本检测系统的优条件,对AP33的检测与儿种阴道常见病原菌无交叉反应,检测限为0.05υg/ml.结论 成功构建了量子点磁微粒检测技术,对Tv抗原检测,特异度为90%,准确率为88%.

拟做体外授精-胚胎移植妇女的应对方式与心理健康状况的特点及其相关分析

目的 探讨拟做体外授精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)妇女的应对方式与心理健康状况之间的关系.方法 采用应对方式问卷和症状自评量表(SCL-90),由心理学专业人员分别对99例拟做IVF-ET妇女和98例止常育龄妇女进行测试.结果 ①应对方式问卷中,IVF-ET妇女组的解决问题冈子分明显低于iF常育龄妇女组(t=-2.42,P<0.05),而幻想因子分明显高于正常育龄妇女组(t=2.79,P<0.05);②在SCL-90中IVF-ET妇女组的躯体化、强迫、恐怖、焦虑和精神病性的因子分显著高于正常育龄妇女组(P<0.05,P<0.01).③解决问题与SCL-90总均分旱显著负相关,自责、幻想和退避与SCL-90总均分显著正相关.结论 IVF-ET妇女存在不同程度的心理问题,其心理健康水平与应对方式密切相关,可通过改善她们的应对方式提高她们的心理健康水平.

应用荧光原位杂交技术对50例羊水标本产前诊断的研究

目的 探讨荧光原位杂交技术诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值.方法 选用X、Y、13、18、2l号特异性探针对50例有产前诊断指征的孕妇进行羊水间期细胞的FISH分析及染色体核型分析.结果 被检50例羊水未培养细胞均获得诊断结果,检测出"21 三体"3例,检测结果与染色体核型分析及随访相符.结论 应用染色体特异性探针对羊水间期细胞进行FISH分析可用于胎儿染色体非整倍体的产前诊断,该方法具有快速、准确、灵敏度高的优点.

MELD与CTP评分系统对TIPS术后患者预后的评价作用

目的 评价终末期肝病评分模型(model for end-stage liver disease,MELD)与Child-Tureotte-Pugh(CTP)评分系统在肝硬化门脉高压患者行经颈静脉肝内门体静脉分流术(Transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPs)的预后判断中的作用.方法 收集我科2004年1月至2008年3月110例行TlPS术的门静脉高压患者基本资料、临床生化指标,计算MELD分值和CTP评分,并观察所有患者的临床转归,比较不同MELD评分(≤15分,>15分)组及CTP分级(A、B和c级)组的牛存率,通过ROC曲线下面积比较这2种模型在术后3个月、1年、2年预后中的预测作用.结果 ①MELD评分≤15分患者的生存率明显高于>15分患者(P=0.0217),CTP评分为A、B、C级的患者生存率差异显著(P=0.0341).②ROC曲线下面积在3个月时MELD为0.866,CTP为0.863;在1年时MELD为0.755,CTP为0.739;在2年时MELD为0.729,CTP为0.750,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 MELD与CTP均能较准确地预测TIPS患者的短期生存率,但MELD评分系统设计更客观、全面和科学,临床上值得推广应用.

临床诊断与尸体检验诊断相关性研究

目的 比较临床诊断与尸体检验诊断结果,分析、评估临床误诊率.方法 回顾分析重庆医科大学法医教研室1988-2007年医疗纠纷尸体解剖356例,统计内容包括性别、年龄、在医院的时、科别,死亡疾病和医院的等级,比较尸体检验诊断与临床诊断的一致率.结果 临床诊断与尸检诊断完全一致的有162例(45.5%),临床诊断与尸检诊断不一致的有101例(28.4%),临床诊断与尸检诊断部分不一致的有63例(17.7%),无法比较的有30例(8.4%).误诊率高的是循环系统和呼吸系统疾病,其中心肌病、主动脉粥样硬化与高血压致主动脉破裂、肺炎的误诊率高.结论 科学的尸体检验不但为医疗事故的处理提供医学依据,而且为相关临床学科提高诊疗水平提供科学依据.

致病性大肠杆菌引发宿主细胞A/E损伤分析方法的建立

目的 建立一种能够对由致病性大肠杆菌引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤(A/E损伤)进行半定量分析的方法,为进一步研究其致病性提供评价手段.方法 以大肠杆菌黏附HeLa细胞作为感染模型.采用姬姆萨染色和荧光肌动蛋白染色实验,通过菌落计数及肌动蛋白聚集数量定量分析,统计学处理,比较EPEC 43095、EHEC 0157:H7 Sakai株和弱毒株EHEC 0157:H7 0013015以及E. coli DH5α对HeLa细胞的黏附能力,评价它们对细胞的损伤程度.结果 EPEC对细胞的黏附及擦拭性损伤程度大于EHEC(P<0.05).EHEC Sakai和00B015在黏附能力上差异不大(P>0.05),但是,Sakai在肌动蛋白聚集形成能力方面却明显强于00B015(P<0.05).结论 成功建立了一种能够对EPEC或EHEC所引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤进行半定量分析的方法.

心房颤动患者血清BNP、hsCRP、CK-MB的变化及意义

目的 探讨血清腩钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、高敏c一反应蛋白(high sensitive C-reactive protein,hsCRP)及肌酸激酶同工酶(MB isoenzyme of ereatine kinase,CK-MB)在心房颤动(AF)患者血清巾的浓度变化及临床意义.方法 入选72例患者按照心电图诊断将其分为持续性房颤组(房颤组,n=32)和窦性心律组(窦律组,n=40),按照美国纽约心脏病学会(New York Heart Association,NYHA)心功能的分级标准,义分为心功能II级、心功能Ⅲ级、心功能Ⅳ级3个亚组.采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、胶乳增强免疫透射比浊法、酶速率法分别测定BNP、hsCRP、CK-MB在各组血清中的浓度变化,对其结果进行统计分析.结果 ①房颤组血清BNP、hsCRP水平明显高于窦律组(P<0.05).在相同心功能亚组中房颤组血清BNP、hsCRP水平明显高于窦律组(P<0.01).在2组的心功能亚组中m清BNP、hsCRP水平随着心功能NYHA分级增加而增高(P<0.01).②房颤绀血清CK-MB水平与窦律组血清CK-MB水平无明显差别(P>0.05),其心功能业组之间亦无明显差别(P>0.05).③房颤组BNP、hsCRP、CK-MB 3者之间无相关关系(P>0.05).结论 BNP、hsCRP与心房颤动的发生和持续可能相关,可作为房颤病情的相对独立的检测指标.CK-MB与房颤的发牛和发展可能无关.

激光立体成形镍铬烤瓷合金的生物安全性评价

目的 评价激光立体成形Ni-62.9Cr-23烤瓷合金的生物安全性.方法 参照GB/T16886-2003和YY/T0279-1995以及YY/T0244-1996标准对激光立体成形镍铬烤瓷合金进行4种体内外实验,即细胞毒性实验、短期全身毒性实验、溶血实验及口腔黏膜刺激实验.结果 激光立体成形Ni-62.9Cr-23烤瓷合金细胞毒性实验评级为0～1级,无明显细胞毒性作用,未见任何短期伞身毒性反应,溶血程度为0.385%,口腔黏膜刺激实验未见异常组织学反应.结论 由以上结果可以初步认为激光立体成形Ni-62.9Cr-23烤瓷合金具有良好的生物安全性,是一种理想的生物材料.

高原和平原原发性肾病综合征患者凝血功能指标的对比分析

目的 探讨高原和平原原发性肾病综合征(nephrotie syndrome,NS)患者凝血功能指标的差异,为高原NS患者的诊治提供参考依据.方法 以健康体检者为正常对照组(n=30),同期检测两藏军区总医院(高原组,n=30)和第三军医大学新桥医院肾内科(平原组,n=30) Ns患者凝血酶原(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(D-Dimer)和血浆抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)活性等指标,并对各组凝血抗凝指标的检验结果进行对比分析.结果 与对照组相比,两组NS患者的PT、APTT均无显著差异(P>0.05),但Fib和D-D显著增高(P<0.01),AT-Ⅲ活性显著降低(P<0.01).两组Ns患者问相比,高原Ns患者的Fib和D-D均显著高于平原Ns组(P<0.01),而AT-Ⅲ活性明显低于平原NS组(P<0.01).结论 高原NS患者凝血活性较平原NS患者强,提示高原NS患者更需抗凝治疗.

丹参素对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及NF-κB活性的影响

目的 观察丹参素对IL-1β刺激的肝星状细胞增殖、凋亡及NF-κB活性的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制.方法 用原位-密度梯度离心法提取肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSCs),以不同浓度的丹参素作用于IL-1β刺激的HSCs,MTT法、AO/EB免疫荧光和Annexin V-FITC/P1分别检测HSCs的增殖和凋亡;免疫细胞化学、ELISA法、Western blot分别检测Ⅲ型胶原的生成、NF-κB核转位及细胞质p-IκBet、细胞核NF-κB p65的表达.结果 与对照组相比,IL-1β刺激组HSCs增殖明显增加(P<0.01),凋亡率明显减低(P<0.05),Ⅲ型胶原的合成和分泌明显增加(P<0.01);不同浓度丹参素作用24 h后HSCs增殖明显减低(P<0.01),凋亡明显增加(P<0.01),以早期凋亡为主,Ⅲ型胶原的合成和分泌亦明显减少(P<0.05,P<0.01);Western blot结果显示IL-1β作用30 min时细胞质p-IκBα、细胞核NF-κB p65蛋白表达明显增加(P<0.01),出现核转位;免疫细胞化学显示细胞核内p65阳性染色细胞增多浓染,提示IL-1β可以诱导HSCs的NF-kB活性;丹参素组细胞质p-h

高效液相色谱荧光法同时测定小鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质

目的 采用高效液相-荧光检测技术建它一种稳定的用于测定脑组织中多种氨基酸类神经递质的方法.方法 用微透析技术收集小鼠脑组织中多种氨基酸类神经递质,用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相色谱(high perform-ance liquid chromatography,HPLC)法测定微透析液中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、r-氨基丁酸(GABA)的含量.结果 兴奋性Asp、Glu及抑制性Gly、GABA在18 min内完全分离,在0.625~5umol/L浓度范围内与峰面积有良好的线性关系.结论 HPLC法快速、准确、灵敏度高,适用于脑组织中氨基酸类神经递质含量的测定.

Smad3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的 构建Smad3基因RNAi慢病毒载体.方法 针对已经筛选确定的Smad3基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Age I和EcoR I双酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生GC-shSmad3慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用GC-shSmad3、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0载体共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 PCR和测序证实,构建出了Smad3 shRNA的慢病毒载体GC-shSmad3.包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为3×103TU/ml.结论 成功构建Smad3基因RNAi慢病毒载体.

不同浓度四氯化碳复合法诱导家兔肝纤维化模型的建立

目的 寻找到适宜做影像学和血清学研究的动物家兔肝纤维化模型建市方法.方法 分别用体积比为5%四氯化碳(CCl4)油溶液和纯CCl4,按0.1 ml/kg剂量每周1次腹腔注射,并辅以5%浓度的乙醇作为饮水,诱导家兔肝纤维化形成,并于注射后6、8、10、12周分组处夕匕家兔取其肝脏进行病理学检查.结果 家兔的死亡多发生在4周之内,6周之后趋于稳定.5%CCl4浓度组家兔死亡率为60%,纯CCl4组死亡率为25%.结论 长期给予CCl4可导致家兔的肝纤维化形成,采用腹腔注射纯CCI4,同时辅以5%浓度的乙醇作为饮水的复合法造模,家兔死亡率低,成模率高.

TSGl01-siRNA表达载体对结肠癌HT29/L-OHP细胞株耐药的逆转作用

目的 构建TSG101(tumour susceptibility gene101,TSG 101)小干扰RNA(TSGl01-siRNA)的真核表达载体,观察RNA干扰沉默TSG101基因后化疗药物奥沙利铂(L-OHP)对结肠癌耐药细胞株HT29/L-OHP增殖的影响.方法 根据小干扰RNA的设计原则由计算机软件辅助设计TSG101的靶序列,应用DNA重组技术将目的 序列克隆入小干扰RNA的表达载体;RT-PCR检测TSG101.siRNA对HT29/L-OHP细胞TSG101 mRNA表达的影响;Western blot榆测TSGl01-siRNA对TSGl01基因表达蛋白的抑制效率;采用MTT法测定TSGIOI-siRNA联合化疗药物L-OHP对HT29/L-OHP的增殖抑制作用;FCM分析TSG101-siRNA转染HT29/L-OHP细胞前后的细胞周期分布情况.结果 测序显示干扰载体构建成功,TSG101-siRNA能抑制TSG101mRNA表达,使HT29/L-OHP细胞TSG101蛋白的表达下降,明显增强L-OHP对HT29//L-OHP的增殖抑制,TSG101-siRNA转染HT29/L-OHP细胞后G0/G1期和s期细胞数有增加,而G2/M期细胞数有减少.结论 TSG101-siRNA的真核表达载体能有效地抑制HT29/L-OHP细胞的TSG101 mRNA、TSG101蛋白的表达,提高化疗药物奥沙利铂对HT29/L-OHP的抑制率,能逆转结肠癌耐药细胞株HT29/L-OHP对L-OHP的耐药性.

醋酸曲安奈德巩膜植入剂的制备及体外释放特性考察

目的 制备醋酸曲安奈德(triameinolone-aeetonide-acetate,TAA)-聚乳酸(polylactic acid,PLA)植入剂(Im-plant),考察醋酸曲安奈德植入剂的体外释药特性.方法 采用熔融-挤出法制备TAA-PLA植入剂,高效液相色谱法测定TAA含量,绘制体外释放曲线.结果 制得的植入剂为直径0.8 mm,长约8 mm,质量约8 mg的白色柱状物,其巾TAA的载药鼍为30%,体外释放速率平稳且缓慢,第30天时TAA的累积释放率为75.84%,药物体外释放符合Higuchi方程Q=0.137×(t-0.752)1/2.结论 所制备的TAA-PLA植入剂对药物TAA有明显的缓释效果,且在体内可生物降解,毒副作用小,有望成为TAA的眼部新型给药制剂.

内皮素-1基因多态性与原发性高血压的相关性研究

目的 探讨重庆地区人群血管内皮素-1(endothelin-1,ET-1)基因Iqsl98Asn、raq I酶切位点基因多态性与原发性高血压(essential hypertension,EH)的关系.方法 运用序列特异引物聚合酶链反应(sequence specific primer poly-merase chain reaction,SSP-PCR)和限制性内切酶片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)方法分析86例EH患者和138例非EH患者的Lys198Asn和Taq I 2个位点基因多态性.结果 体质量指数(body inass index,BMI)<25 kg/m2人群中高血压组的Taq I 酶切位点基因型分布频率为:GG型26例(72.2%),GA+AA型10例(27.8%);对照组:GG型28例(50.0%),GA+AA型28例(50.0%).Logistic同归分析显示BMI<25 ks/m2人群中携带GG基因型(Taq I酶切位点)的患者发生高血压的风险增加(P=0.037,OR=2.597).线性回归结果显示收缩压(SBP)在BMI<25 ks/m2人群的GG型平均值为145.06,显著高于GA+AA型平均值131.9r7(P=0.018).结论 在BMI<25 kg/m2人群中Taq I酶切位点GG基因型更易导致SBP升高,cG基因型町能是BMI较小人群血压升高的一个危险因素.

脉冲Nd:YAG激光对口腔溃疡组织中NO及NOS含量的影响

目的 探讨脉冲Nd:YAG激光不同照射剂量对大鼠实验性口腔黏膜溃疡组织中一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量的影响.方法 健康Sprague-Dawley大鼠56只,随机分为7组(n=8):1组为正常埘照组,其余6组建立口腔黏膜溃疡动物模型,分别为溃疡组,药物组和激光含量1.5 W 40 rnJ组、1.5 W 60 mJ组、1.5 W 80 mJ组、1.5 W 100 mJ组.末次治疗24 h后观察溃疡愈合时间.采用分光光度仪测定大鼠口腔黏膜组织中NO、NOS的含量.结果 实验剂量范围内,1.5 W 60 mJ、1.5 W 80 mJ激光组较溃疡组N0、NOS活性显著降低(P<0.05).1.5 w 60 mJ、1.5 W 80 mJ激光组与正常对照组NO、NOS活性含量没有显著性差异(P<0.05).结论 适合的剂量参数,采用适量脉冲Nd:YAG激光照射口腔黏膜溃疡能有效降低组织中NO、NOS活性含量,起到治疗口腔黏膜溃疡的作用.

颅内肿瘤切除前后皮层脑电图的变化对术后癫痫的预测价值

目的 探讨皮层脑电图(electrocorticography,ECoG)在颅内肿瘤切除前后的变化特点及其对术后癫痫的预测价值.方法 选择95例颅内肿瘤患者,于病灶切除前后进行ECoG监测,根据ECoG上多棘波密度、波幅变化分为术后痫性放电增多组(A组)、不变组(B组)及减少组(C组).术后癫痫根据发生时间分为早期癫痫(术后1周内)与晚期癫痫(1周后).随访4年,比较各组术后癫痫的发生率.结果 95例颅内肿瘤患者病灶切除后ECoG显示A组13例(13.68%),B组37例(38.95%),c组45例(47.37%).95例中术后早期癫痫32例(33.68%),分别为A组8/13例(61.54%)、B组13/37例(35.14%)、c组11/45例(24.44%),3组间比较差异有统计学意义(x2=6.2,P<0.05);晚期癫痫17例(17.89%),A、B、C组分别为1/13例(7.69%)、7/37例(18.92%)、9/45例(20.00%),3组问比较筹异无统计学意义(x2=1.04,P>0.05).32例早期癫痫中有7例(21.88%)出现晚期癫痫,63例术后无早期癫痫的病例中有10例(15.87%)出现晚期癫痫,二者比较差异无统计学意义(x2=0.93,P>0.05).结论 颅内肿瘤切除前后的ECoG变化有助于预测术后早期癫痫.

先天性小肠系膜缺损致肠系膜裂孔疝1例

患者,女性,22岁,2009年3月9日因"停经26"周,腹痛伴呕吐15 h"入我院产科.既往无手术史.查体:下腹部町扪及增大的子宫,中腹部轻压痛,无反跳痛及肌紧张,移浊(-),肠鸣音1～2次/min.产科检查:宫底压痛明显,偶可扪及宫缩

盆腔脂肪增多症影像表现1例

患者,男性,23岁.反复尿频、尿急、排尿不畅2年就诊.B超检查示双肾积水,膀胱变形.X线腹部平片(KUB)及静脉肾盂造影(intravenous pyelography,IVP)表现:双肾盂、肾盏及输尿管中上段明显扩张、积水.双侧输尿管中下段拉长、变细,以上平面输尿管迂曲、堆积.膀胱显影延迟,颈部变细、拉长,底部上移,达骶髂关节平面以上约9 cm,整个膀胱形状呈"倒葫芦"状).

胰十二指肠切除术114例临床分析

对我院1995-2008年手术治疗的114例胰头癌患者的临床资料进行回顾性研究,分析我院治疗胰头癌的胰十二指肠切除术和联合门静脉/肠系膜上静脉切除术的疗效,进一步探讨胰头癌手术式的选择.

Terson综合征1例

患者,男性,45岁,2008年11月6日因车祸致伤头部,在当地医院诊断为:①特重型脑伤,②右额、颞、顶硬膜下血肿,③颞顶部颅骨骨折,④脑疝.行手术治疗,患者伤后15 d在当地诊断为视网膜脱离,于2009年1月15日来我科就诊.

自体动静脉内瘘并发多中心静脉狭窄1例

患者,男性,73岁,因慢性肾功能衰竭(尿毒症期)于1年前在我科行右前臂头静脉-桡动脉端端吻合术,术后回当地行维持性血液透析(hemodialysis,HD)治疗(3次/周),半年后逐渐出现右上肢肿胀,HD时血流量低于200 ml/min,但内瘘血管杂音仍可闻及.

口服避孕药预处理在辅助生殖技术中的应用

黄体期降调节后联合促性腺激素(gonadotrophin,Gn)可以抑制内源性的LH(黄体生成素)峰,提高获卵率、受精率、妊娠率、降低周期取消率,是体外受精一胚胎移植治疗中常用的方案,但在治疗过程中由于易发生功能性囊肿,且需多次往返监测排卵确定排卵口期,加重患者治疗成本和经济负担,而口服避孕药(oral contraception,OC)可以调整周期,且能防止意外妊娠的发生,在IVF-ET周期中逐渐广泛应用,现将资料总结如下.

翼点入路经侧裂显微手术治疗岛叶胶质瘤

岛叶胶质瘤位置深在,周围毗邻重要的神经、血管和功能区,手术难度大,随着微创神经外科技术的发展,对这些肿瘤的手术治疗已取得了良好的疗果[1].现将我科近年来经手术治疗的39例岛叶胶质瘤报告如下.

HPLC法测定复方阿司匹林双层片的含量

目的 建立以高效液相色谱法测定复方阿司匹林双层片中的对乙酰氨基酚、咖啡因和阿司匹林含量的方法.方法 色谱柱为Agilent ZORBAX SB C18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(用冰醋酸调节pH值至3.0)(15:85);流速为1.0 ml/min;柱温为40℃;检测波长为280 nm;进样量为20μl.结果 对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林的线性范围分别为9.976～498.8 μg/ml(r=1.000 0)、2.632～131.6μg/ml(r=1.000 0)、18.36-918μg/ml(r=1.000 0);平均回收率分别为99.6%(RSD=0.32%)、99.7%(RSD=0.26%)、99.3%(RSD=0.27%).结论 本方法简单、快速、准确,可用于复方阿司匹林双层片的含量测定.

首期"期刊编校无差错承诺活动"结果揭晓