不同眼轮匝肌活动记录方法对豚鼠痕迹性眨眼条件反射建立的影响

目的 比较不同眼轮匝肌活动记录方法 对豚鼠痕迹性眨眼条件反射建立的影响.方法 采用350 ms正弦波纯音和100 ms束状氧气流的配对刺激,训练豚鼠建立痕迹性眨眼条件反射.在此过程中,分别使用张力换能器和金属微电极记录眼轮匝肌活动,并使用我室编制的Matlab软件分析眨眼行为数据.结果 2种记录方法 条件下,豚鼠均能建立痕迹性眨眼条件反射,但应变片组动物条件眨眼反应的习得速率相对于肌电图组更快(P<0.05).此外,条件反射训练第10天,应变片组动物条件反应峰潜伏期显著迟于肌电图组(P<0.05).结论 相对于肌电图记录法,应变片记录法是一种更适合于豚鼠联想型学习神经生物学机制研究的记录方法 .

人乳头瘤病毒16 E6基因沉默对鼻咽癌细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响

目的 观察针对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16 E6基因的RNA干扰(RNA inteffering,RNAi)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响,探讨HPV16 E6基因作为鼻咽癌基因治疗标靶的可行性.方法 根据基因库上的HPV16 E6 mRNA序列,设计合成针对HPV16 E6的siRNA,转染HNE-1细胞,采用RT-PCR及Western blot分析E6基因的表达,利用侵袭实验检测细胞的侵袭能力,MTT法检测细胞的生长增殖,流式细胞术检测细胞周期.结果 针对HPV16 E6的siRNA下调鼻咽癌HNE-1细胞株E6 mRNA和蛋白表达水平,分别下调66.3%、56.7%(P<0.05);侵袭实验结果 显示,siRNA转染组的穿膜细胞数为(45.3±4.0),显著低于阴性对照组[(147.7±4.7),P<0.05];转染组细胞的增殖受到抑制,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术显示细胞阻滞于G0/G1期.结论 siRNA可以有效干扰鼻咽癌HNE-1细胞内HPV16 E6基因的表达,进而影响HNE-1细胞的侵袭转移能力,并抑制肿瘤细胞的生长增殖,使细胞周期重新分布.

缺血预处理对离体大鼠心肌线粒体心磷脂及心功能的影响

目的 探讨缺血预处理(ischemie preconditioning,IP)对缺血再灌注损伤大鼠心肌线粒体心磷脂(cardiolipin)及心功能的影响.方法 清洁级SD大鼠72只,体质量200～300 g,雌雄各半,用随机数字表法分为正常组、对照组、缺血预处理组(IP组)、5-羟葵酸(5-HD)拈抗缺血预处理组(HD组),每组18只.采用Langendorff灌流装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,正常组灌注平衡20 min,持续灌注100 min;对照组灌注平衡20 min,持续灌注30 min,缺血40 min,再灌注30 min;IP组灌注平衡20 min后,给予2次间断缺血预处理,每次缺血5 min再灌注5 min,余缺血再灌注同对照组;HD组在预处理前灌注5-HD 10 min,余同IP组.各组分别于灌注平衡末(T1)、缺血前即刻(T2)、再灌注末(T3)记录心率(HR)、左心室发展压(LVDP)和左心室舒张末压(LVEDP),采用高效液相色谱仪测定心肌线粒体心磷脂含量.结果 与T1、T2时比较,各组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,余3组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,IP组及HD组T1时HR、LVDP明显升高,LVEDP明显降低,心肌线粒体心磷脂含量明显升高(P<0.05,P<0.01);与IP组比较,HD组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 IP可维护心肌线粒体心磷脂含量的相对稳定,改善大鼠离体缺血再灌注心脏功能,其机制主要与mito-KATP通道的激活有关.

HepaRG细胞移植治疗鼠特异性Fas抗体诱导的小鼠急性肝衰竭

目的 探讨HepaRG细胞移植对鼠特异性Fas抗体诱导的急性肝衰竭小鼠的治疗作用和人肝细胞异种移植的策略.方法 利用特异性鼠抗Fas抗体(Jo2 mAb)腹腔注射,剂量为0.3 mg/kg,诱导20只SCID小鼠制备急性肝衰竭模型,24 h内按照实验动物随机数字表分组方法 ,经脾移植2×106HepaRG细胞的小鼠为实验组(10只),未经HepaRG细胞移植的小鼠为对照组(10只).观察小鼠的存活率、肝脏功能、肝组织变化情况.实验组移植4周免疫组化检测肝组织人白蛋白、人CK18、人Hep Par1的表达,免疫荧光检测人白蛋白的表达.结果 实验组小鼠有9只存活超过4周,而对照组小鼠3 d内先后死亡9只,实验组血清ALT和AST趋于正常,显著低于对照组(P<0.01),且存活时间显著高于对照组(P<0.01).实验组经HepaRG细胞移植能避免Jo2 mAb所致肝组织出血、坏死,移植后4周免疫组化可见人白蛋白、CK18、Hep Par 1阳性表达细胞,肝组织免疫荧光可见人白蛋白阳性细胞的表达.结论 移植HepaRG细胞可治疗Jo2mAb腹腔注射小鼠诱导的急性肝衰竭,HepaRG细胞不仅在小鼠肝内存活,且得以增殖.

大熊猫核糖体蛋白亚基RPS7基因的克隆及序列分析

目的 了解大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)核糖体蛋白亚基RPS7基因的结构及其与已报道的人和其他哺乳动物核糖体蛋白亚基RP57基因的同源性.方法 运用RT-PCR技术,从大熊猫的肌肉组织总RNA中对核糖体蛋白亚基RPS7基因的表达序列进行克隆、测序;采用Gnescan软件,对所克隆的基因序列进行氨基酸序列推定;采用ORF finder软件进行DNA序列的开放阅读框(ORF)查找;采用DNAMAN Version 6,对基因序列和氨基酸序列进行同源性比较;采用Ex2PASy Proteomics Server软件进行蛋白质功能位点和生化特性预测分析.结果 大熊猫RP57基凶的表达序列全长为589 bp,ORF为585 bp,编码194个氨基酸,该蛋白的相对分子质量为22.126 85 × 103,等电点为10.09,含有1个N-糖基化位点,2个依赖于cAMP和cGMP的蛋白激酶磷酸化位点,4个蛋白激酶C磷酸化位点,1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,2个十四(烷)酰化位点,2个酰胺化位点及1个RPS7蛋白signature位点.进一步分析结果 显示,大熊猫RPS7基因的表达序列及其编码的氨基酸序列与已报道的部分哺乳动物具有很高的相似性.结论 运用分子生物学原理与相应的技术手段,成功地扩增出大熊猫RPS7基因的表达序列,并对其编码的蛋白进行了初步分析,丰富和完善了哺乳动物RPS7基因资料库.

心复康口服液对慢性压力超负荷大鼠心肌能量代谢的影响

目的 探讨益气温阳活血化瘀方药--心复康口服液对腹主动脉部分缩窄致压力超负荷模型大鼠心脏功能和心肌能量代谢的影响.方法 将120只成年雄性SD大鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组、腹主动脉缩窄模型组(模型组)、心复康治疗组(治疗组).采用腹主动脉部分缩窄法制作压力超负荷大鼠模型.BL-420E+生物信号采集系统测定心功能参数,用高效液相法(HPLC)测定心肌高能磷酸盐的浓度,通过透射电镜观察大鼠心肌线粒体的形态,比较3组大鼠第6、8周心功能的各项指标(SAP、DAP、LVEDP、LVMI、+dp/dtmax、-dp/dtmax)及心肌高能磷酸盐(ATP、ADP、AMP、TAN、EC)的含量.结果 ①与假手术组相比,造模后第6周起,模型组大鼠左心室质量指数(LVMI)、左心室舒张末压(LVEDP)显著升高,左心室内压大变化速率(+dp/dtmax)显著下降(P<0.01);心肌ATP、ADP、AMP含量显著降低(P<0.01);造模后第8周,上述改变更显著(P<0.01,P<0.05).②和模型组相比,治疗组大鼠心功能指标及ATP、ADP、AMP、TAN的含量均明显改善(P<0.01).⑨治疗组大鼠心功能指标及ATP、ADP、AMP、TAN的含量在8周时明显高于6周(P<0.01,P<0.05).④治疗组大鼠心肌线粒体的受损程度较模型组轻.结论 心复康口服液能明显改善慢性压力超负荷大鼠心肌能量代谢和心脏功能,并对心肌线粒体起到保护作用.

5-氦胞苷诱导外源表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化的研究

目的 研究在单层培养条件下,5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化的可能性和效率.方法 实验分为实验组和对照组,实验组细胞为稳定表达Nkx2-5的P19细胞,对照组为P19细胞.2组细胞均在单层培养条件下,以5-aga(1 μmol/L)诱导.倒置显微镜观察细胞的生长状态;诱导4、8、12、16 d,Western blot检测α-fiareomeric actin和cTnT的表达;并用免疫荧光双标检测α-sarcomeric actin和cTnT的共表达.结果 实验组和埘照组细胞在5-aza诱导下,生长缓慢,死亡细胞数目增多.随贴壁细胞密度增加,形成类似于聚集体贴壁生长的状态,中心细胞小、密集,周边细胞呈放射状排列,胞体长梭形,伸出突起.实验组诱导8、12、16 d检测到α-sarcomeric actin和cTnT 2种蛋白的表达和共表达,表达量呈增多趋势;诱导12、16 d时α-sarcomeric aetin的表达量与8 d比差异有统计学意义(P<0.01),诱导16 d的表达量与12 d比差异有统计学意义(P<0.01);cTnT在诱导12、16 d的表达量与8 d比差异有统计学意义(P<0.01).对照组没有2种蛋白的表达和共表达.结论 5-aza可诱导单层生长的表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化.

血管紧张素(1-7)对不同模型高血压大鼠左心室结构的影响

目的 探讨血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对单纯压力负荷增加及肾素.血管紧张素.醛同酮系统(RAAS)激活的高血压模型左心室肥厚及心肌纤维化的影响及其机制.方法 建立二肾一夹(2K1C)及肾下主动脉缩窄(INAC)模型,应用微渗泵植入技术,使Ang(1-7)进行不同时间(14、28 d)的体内干预,采用定性及定量分析的方法 检测Ang(1-7)对这2种高血压模型早期(14 d)和晚期(42 d)左心室心肌细胞及纤维化程度的影响.结果 对2K1C和INAC动物模型,早期其左心室质量(LVW)、左心室质量指数(LVI)及左心室心肌细胞横断面积(LCA)均较对照组明显增加(P<0.05),晚期上述指标增加更为显著(P<0.01);Ang(1-7)可使2K1C动物模型的上述指标均显著下降(P<0.05),但对INAC动物模型,Ang(1-7)使其上述指标在早期显著下降(P<0.05),晚期略有下降(P>0.05).对2K1C动物模型,早期已出现明显的心肌纤维化(P<0.05),晚期更为显著(P<0.01);Ang(1-7)可明显抑制早期的间质及血管周围纤维化(P<0.05),在晚期,Ang(1-7)可明显抑制血管周围纤维化(P<0.05),但对间质纤维化,虽有下降趋势,但不明显(P>0.05).对IN-AC动物模型,早期心肌纤维化并不显著(P>0.05),晚期则有明显表现(P<0.05),Ang(1-7)可有效抑制问质和血管周围纤维化(P<0.05).结论 Ang(1-7)可预防改善这2种高血压模型的左心室肥厚和心肌纤维化,但对2种模型不同时期的改善程度不同,提示Ang(1-7)可能具有不同的作用机制.

高压氧对胆红素脑病新生鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆的影响

目的 探讨高压氧对胆红素脑病新生大鼠的海马神经细胞凋亡和学习记忆的影响,明确高压氧是否对胆红素的神经毒性有保护作用.方法 5日龄SD大鼠145只,雌雄不限,完全随机法分为3组:生理盐水对照组、胆红素脑病模型组、高压氧十预组.分别于小脑延髓池内注射生理盐水或等量10 mg/ml胆红素溶液,免疫组化法和免疫荧光法分别检测各组海马神经元细胞色素C和Caspase-3表达的动态变化,TUNEL法检测细胞凋亡,水迷宫实验测试学习记忆能力.结果 高压氧干预后海马神经细胞在各时间点,细胞色素C和Caspase-3表达均明显低于模型组,高于对照组(P<0.05);高压氧干预组TUNEL阳性细胞率(27.2±1.8)%明显少于模型组(37.6±6.6)%(P<0.05);水迷宫实验:高压氧干预组在各时间点找到安全平台的潜伏期均明显短于模型组(P<0.05),穿越平台次数是模型组的8倍.结论 高压氧治疗可能通过抑制线粒体途径中细胞色素c和Caspase-3的表达抑制神经细胞凋亡,减轻胆红素对海马神经元的毒性,从而减轻胆红素相关性脑损伤所致的学习记忆障碍.

特异性脱氧核酶对小鼠呼吸道合胞病毒感染的抑制作用

目的 研究特异性抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)N基因的脱氧核酶DZ1133在小鼠体内对病毒复制和气道炎症的影响.方法 RSV感染BALB/c小鼠滴鼻给予DZ1133及其变异体、反义寡核苷酸AS1133,空斑形成实验检测肺组织病毒滴度,RT-PCR检测病毒mRNA表达,支气管肺泡灌洗液白细胞计数,ELISA检测TNF-α、IL-12、IFN-γ和IL-10水平,肺组织病理学分析炎症情况.结果 0.2、0.4 mg和0.8 mg DZ1133治疗组小鼠肺组织病毒滴度分别为(2.75±0.21)×105、(1.86±0.20)×105PFU/g和(1.02±0.22)×103PFU/g,与感染对照组小鼠(7.94±0.42)×105PFU/g比较明显下降(P<0.01),上述各剂量治疗组小鼠肺组织病毒mRNA表达与感染对照组比较分别下降30.51%、47.38%(P<0.05)和53.97%(P<0.01).0.4 mg DZ1133治疗降低RSV感染小鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞总数,改善肺组织病理学损伤(P<0.05),对TNF-α、IL-12、IFN-γ和IL-10水平无显著性影响(P>0.05).结论 特异性脱氧核酶DZ1133在小鼠体内有效抑制RSV复制、减轻气道炎症,是有效的抗RSV途径.

周期性张应变激活整合素β1-FAK信号途径调控皮肤成纤维细胞运动

目的 探讨周期性张应变对皮肤成纤维细胞的影响,寻找引起细胞运动的佳张应变幅度及其信号转导机制.方法 成纤维细胞培养于预敷胶原蛋白基质的6孔柔性培养板,对柔性培养孔施加10次/min的负压(-135 mmHg),每孔柔性板由中心到周边张应变幅度介于0%～24%.倒置显微镜观察细胞旋转角度,细胞免疫染色和激光共聚焦显微镜观察细胞整合素β1在细胞内的改变,免疫印迹观察细胞整合素β1表达和黏着斑激酶(FAK)磷酸化.结果 发现15%的张应变幅度是诱导皮肤成纤维细胞运动的低张应变幅度.机械张应变诱导成纤维细胞整合素β1在细胞再分布和FAK磷酸化,整合素抗体β1部分抑制了FAK磷酸化和细胞运动.结论 机械张应变通过整合素β1-FAK途径引起皮肤成纤维细胞运动.

优化hα-syn基因疫苗预防注射对MPTP急性帕金森病小鼠的神经保护作用

目的 探讨预防注射优化hα-syn基因疫苗对多巴胺神经元在遭受急性神经毒素损害时的保护作用.方法 在小鼠双侧后肢胫骨前肌部位分别注射优化基因疫苗、空重组质粒或PBS各50μl,共3次.末次注射3周后,优化基因疫苗组皮下注射MPTP 30 ms/kg,对照组用等容量的PBS背部皮下注射,每日1次,连续5 d.后1次模型注射后,观察行为学和病理生理改变.结果 优化基因疫苗组小鼠的爬杆分数与空重组质粒组比较明显减少(P<0.05),与PBS对照组比较,爬杆分数增多,但差异无统计学意义(P>0.05).优化基因疫苗组与空重组质粒组相比,黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显增多,凋亡细胞数明显减少(P<0.05),α-突触核蛋白表达略减少(P>0.05).空重组质粒组与PBS对照组相比,黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显减少,凋亡细胞明显增多(P<0.05),α-突触核蛋白表达明显增多(P<0.05).结论 优化hα-syn基凶疫苗预防注射能够较好的防止神经毒素对黑质多巴胺细胞的损害,对多巴胺神经细胞具有保护作用.

人脐血内皮祖细胞体外扩增、鉴定和生物学活性

目的 建立一种稳定的体外分离培养和鉴定人脐血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的方法 ,并探讨利于EPCs增殖的佳接种浓度.方法 采用密度梯度离心法分离得到单个核细胞,制成1×106/ml、1.5×106/ml、2 × 106/ml、2.5×106/ml、3 × 106/ml、3.5×106/ml、4×106/ml 7个密度接种于铺被人纤维连接蛋白的培养瓶,比较各接种密度的贴壁细胞数和细胞集落形成情况,并采用激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和免疫荧光鉴定EPCs.结果 不同接种密度得到的贴壁细胞数和细胞集落数有差别,在2.5×106/ml密度接种时得到的佳贴壁细胞数和细胞集落数,与其他密度比较差异有统计学意义(P<0.05);双染色阳性细胞为正在分化EPCs;流式细胞仪检测内皮祖细胞对CD34、AC133、VEGFR2的阳性表达率分别为(1.67±0.35)%、(12.63±9.70)%、(66.81±6.63)%;免疫荧光检测内皮祖细胞一致性表达CD34、AC133、VEGFR2;黏附能力和迁移能力检测结果 分别为(33.7±1.6)、(29.2±1.2).结论 采用Ficoll密度梯度离心法结合贴壁筛选法可以较好地分离人脐血EPCs,以2.5×106/ml的密度接种培养可获得良好的细胞分化和增殖.

布洛芬包合物凝胶体外释药行为及体内药代动力学研究

目的 制备布洛芬(ibuprofen,IBU)包合物原位凝胶,并考察体外释药行为和体内药代动力学特点.方法 用冷冻干燥法制备布洛芬.羟丙基-β-环糊精包合物,以泊洛沙姆P407及P188为基质制备温度敏感型原位凝胶,无膜溶出法考察包合物原位凝胶体外释药情况,新两兰白兔肌注布洛芬溶液及包合物原位凝胶,高效液相色谱法(HPLC)测定血药浓度,3P97软件计算药代动力学参数.结果 制得的包合物平均载药量10.24%,体外凝胶溶蚀及药物释放均符合零级动力学,与布洛芬溶液相比,布洛芬包合物原位凝胶能明显使tmax推迟,Cmax降低,t1/2延长,药时曲线下面积(AUC)显著增加.结论 布洛芬包合物原位凝胶体内和体外均具有缓释效果,可作为一种优良的缓释注射剂,更好地发挥布洛芬解热镇痛抗炎作用,同时也为开发难溶性药物的温度敏感原位凝胶提供了借鉴.

以自发性大鼠模型评价胰岛素增敏剂药效时的初步探讨

目的 研究自发性Zucker fa/fa(ZF)大鼠评价胰岛素增敏剂药效时需要注意的问题,确定入组标准、检测指标、评价标准.方法 20只雄性ZF大鼠按照体质量均一原则分为模型对照组和罗格列酮组(每组10只),10只Zuckerfa/?大鼠设为正常对照组.罗格列酮组以胰岛素增敏剂罗格列酮作为阳性药物,6 mg/kg灌胃给药;模型对照组和正常对照组给予水.结果 罗格列酮能明显降低大鼠的血清胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸水平(P<0.05);高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果 表明,能明显提高罗格列酮组大鼠的葡萄糖输注率与胰岛素敏感指数(P<0.05).胰腺病理组织学检查表明罗格列酮能缓解大鼠胰岛细胞的增生肥大.结论 以ZF大鼠模型评价胰岛素增敏剂药效时,选用7～8周龄自发性ZF雄性大鼠,以空腹胰岛素水平高于4 ng/ml为纳人标准,以甘油三酯、游离脂肪酸及血清胰岛素水平与高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果 为评价指标,由此方法 建立的动物模型可用于评价胰岛素增敏剂的药效作用.

地震挤压综合征所致急性肾功能衰竭的临床特点和救治方案

目的 回顾性分析地震挤压综合征致急性肾功能衰竭(acute renal failure,ARF)患者的临床特点,总结合理有效的救治方案.方法 分析我校收治的12例在汶川大地震中因挤压综合征致ARF患者的病历资料,对患者的临床表现、实验室检查结果 、连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)结果 以及治愈时间进行综合评价.结果 贫血、发热和肺部感染在此类患者中较多见,发生率分别达到了91.67%、66.67%和58.33%,有41.67%的患者出现了胸腔积液和急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS).12例患者均出现低钙、低白蛋白血症以及肌酸激酶(CK)明显升高,并且CK>3 000 IU/L的患者都进行了CRRT治疗,CK>3 000 IU/L与CRRT治疗有明显的相关性(r=0.845);另有高达91.67%的患者伴有谷草转氨酶升高.筋膜切开减压和/或截肢术后患者行CRRT的例数虽高于闭合性损伤的患者,但两者之间差异无统计学意义(P=0.522 7);创面感染的患者其ARF的恢复时间明显长于无感染的患者(P=0.025 5).结论 与其他诱因引发的ARF不同,地震挤压综合征所致的ARF具有一些独特的临床表现,且易合并多脏器功能障碍,在救治过程中要给予积极的对症支持和肾脏替代治疗;彻底清创和有效的感染控制有利于肾功能的快速恢复.

复方甘草酸苷对重型肝炎的治疗作用及机制研究

目的 观察复方甘草酸苷对于重型肝炎的治疗作用并探讨其作用机制.方法 在综合支持疗法的基础上加用复方甘草酸苷注射液治疗重型肝炎患者30例,对照组仅采用相同的综合支持疗法,动态观察2组患者病死率、肝功能指标、血浆内毒素及多种炎性因子水平.结果 治疗第3周末,治疗组病死率为26.7%(8/30),对照组病死率为43.3%(13/30);治疗过程中治疗组患者血清ALT及AST水平显著低于对照组(P<0.01);治疗第3周末,治疗组血清总胆红素水平及血浆凝血酶原时间均值显著低于对照组(P<0.05);治疗后各时相点治疗组TNF-α水平均显著低于对照组(P<0.01);治疗后第2、3周,治疗组患者血浆内毒素及IL-6水平显著低于对照组(P<0.01).结论 复方甘草酸苷用于治疗重型肝炎,可促进肝功能恢复,可能有助于降低病死率,其机制与降低患者血浆内毒素及细胞因子所致的继发性肝损伤有关.

诺帝对人卵巢癌细胞3AO和SKOV3增殖、周期及Aurora-A表达的影响

目的 探讨抗肿瘤新药诺帝(Nordy)在体外对卵巢癌细胞(3AO黏液性癌,SKOV3浆液性癌)生长的抑制作用及对细胞周期的影响,同时对卵巢癌细胞株中Aurora-A的mRNA和蛋白过表达的抑制作用进行研究.方法 MTT法检测诺帝对细胞增殖的抑制作用;RT-PCR和Western blot检测Aurora-A的mRNA和蛋白表达情况;流式细胞术分析细胞周期.结果 经诺帝作用后Aurora-A的mRNA及蛋白的表达水平显著下降(P<0.01);诺帝能明显抑制3AO、SKOV3细胞的增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期(P<0.05).结论 诺帝对卵巢癌3AO、SKOV3细胞的生长具有明显抑制作用,可以阻滞细胞周期.在诺帝多环节的抑癌机制中,抑制癌细胞株Aurora-A的异常高表达,阻止中心体的异常转变可能是其机制之一.

经动脉灌注新辅助化疗对局部进展期乳腺癌激素受体表达水平的上调作用

目的 探讨经动脉灌注化疗对乳腺癌雌激素(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达的影响.方法 应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化方法 检测8l例乳腺癌患者经动脉灌注化疗前后的雌孕激素受体表达情况.采用Western blot检测经动脉灌注化疗前后ER和PR的变化.结果 RT-PCR结果 表明,81例患者中43例(53.1%)ER mRNA水平升高,33例(40.7%)PR mRNA水平升高,25例(30.9%)ER和PR mRNA水平同时升高.免疫组织化学结果 提示,35例(43.2%)ER表达水平升高,其中14例(17.3%)由阴性转为阳性;21例(26.0%)PR表达水平升高,其中10例(12.2%)由阴性转为阳性;16例(19.8%)ER和PR表达同时升高.Western blot显示,经动脉灌注化疗后,81例患者中38例(46.9%)ER蛋白水平升高,30例(37.0%)PR蛋白水平升高,2l例(25.9%)ER和PR蛋白水平同时升高.结论 经动脉灌注化疗可有效上调ER、PR mRNA和蛋白水平的表达,有利于后续化疗药物对肿瘤细胞的杀灭.

西洛他唑抑制颈总动脉球囊损伤后大鼠血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1表达

目的 观察大鼠颈总动脉球囊损伤后血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(1ectin like oxidized low density lipo-protein receptor-1.LOX-1)的表达及西洛他唑对其表达的影响,探索西洛他唑抑制内膜增生的机制.方法 24只健康雄性SD大鼠按完全随机分组法分成假手术组、模型组、西洛他唑组(n=8).观察球囊损伤后内膜增生情况并计算内膜、中膜面积比值,检测血清MDA含量,RT-PCR法和免疫组化法分别检测各组球囊损伤后大鼠颈总动脉血管壁组织中LOX-1mRNA和蛋白的表达.结果 西洛他唑组内膜/中膜面积比值(IA/MA)、LOX-1 mRNA及蛋白表达水平、血清MDA含量显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 西洛他唑可显著抑制内膜增生,抑制LOX-1表达及其介导的氧化应激,这可能是西洛他唑抑制内膜增生的机制之一.

蛛网膜下腔出血脑脊液不对称二甲基精氨酸水平与脑血管痉挛的相关性研究

目的 观察蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑脊液中不对称二甲基精氨酸(ADMA)和NO水平的动态变化,探讨ADMA含量与脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)的关系.方法 采用枕大池二次注血法建立SAH后脑血管痉挛动物模型,分别于术前,术后1、4、7 d行经颅多普勒超声(transcranial Doppler sonography,TCD)检查测定基底动脉脑血流速度,应用酶联免疫分析法(ELISA)和硝酸还原酶法测定不同时间脑脊液中ADMA和NO含量.结果 ①SAH后脑脊液中ADMA浓度显著高于注血前正常水平(P<0.01),术后4 d达到峰值后逐渐下降,而脑脊液中NO水平注血后4 d逐渐下降至低值(P<0.01);②SAH后血管痉挛程度逐渐加重,动脉血流第4天达到大值后逐渐缓解,与ADMA水平时相表达一致;③SAH后脑脊液中ADMA浓度变化趋势与基底动脉血流速度相应,SAH后第4天脑脊液中ADMA浓度与NO水平呈显著负相关(r=-0.950,P<0.01),与基底动脉血流速度呈显著止相关(r=0.953,P<0.01).结论 SAH后脑血管痉挛程度与脑脊液中ADMA表达含量密切相关,SAH后脑脊液中ADMA可能通过调控NO生成水平参与了迟发性脑血管痉挛发生、发展的过程.

姜黄素对卵巢癌微血管内皮细胞生长及乙酰肝素酶表达的影响

目的 探讨姜黄素对卵巢癌微血管内皮细胞体外生长及乙酰肝素酶表达的影响.方法 体外培养卵巢癌微血管内皮细胞,分为正常对照组和姜黄素组(浓度分别为2、10、50、250μg/ml),观察时间为加入姜黄素共孵育后24、48、72 h.MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期变化,免疫荧光法和RT-PCR法检测内皮细胞乙酰肝素酶表达,生化法检测细胞上清液丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氧酶(LDH)活力.结果 姜黄素组细胞生长抑制率增加,有显著的剂量依赖效应(P<0.01).姜黄素组增殖指数显著下降(P<0.01),乙酰肝素酶mRNA水平和蛋白水平显著下降(P<0.01),细胞培养上清液MDA水平及LDH活力显著升高(P<0.01).结论 姜黄素(2～250μg/ml)能显著抑制人卵巢癌微血管内皮细胞增殖活性,降低乙酰肝素酶mRNA转录和蛋白表达.

评估三维电磁导管标测系统指导局灶性房性快速心律失常射频消融的临床价值

目的 探讨三维电磁导管标测系统(Carto)指导导管射频消融治疗局灶性房性快速心律失常(简称房速)的临床价值.方法 我院2007年4月至2009年4月共13例房速患者接受治疗,男性7例,女性6例,年龄(42.2±10.2)岁,其中3例为常规消融失败患者.对所有患者应用Carto标测实时重建房速发作时三维电激动图,判断房速起源部位及类型,采用冷盐水灌注导管在早激动点或关键峡部消融.结果 13例房速均为局灶性房速,12例消融成功,1例右心耳体部房速消融失败.7例房速在希氏束或冠状静脉窦(CS)近端记录到显著提前的A波,电解剖标测和消融证实房速起源于上腔静脉口部3例、右心耳体部1例、CS口部及其附近3例.3例房速在CS电极远端记录到明显提前的A波,消融结果 证实房速起源于左心耳后壁1例、左上肺静脉开口部2例.3例房速在希氏束和CS近端记录到相对提前的A波,消融证实房速起源于右下肺静脉口部2例、主动脉无冠窦内1例.随访2～24个月,其中1例术后3周复发,再次消融成功.3例术前显著右心扩大者,术后3个月内2例心脏大小恢复正常,1例心脏无显著变化.结论 Carto标测房速起源及类型准确快速,能安全、有效指导消融,提高成功率,特别对常规方法 消融失败者很有帮助.

瑞格列奈联合二甲双胍治疗2型糖尿病疗效观察

瑞格列奈为新型降糖药,作用于胰岛B细胞而发挥作用,不同于磺脲类降糖药.我们于2006年3月至2008年12月用瑞格列奈联合二甲双胍治疗2型糖尿病患者,收到了良好的疗效,现报告如下.

手足口病并发症21例临床分析

手足口病是由多种肠道病毒引起的常见传染病,主要侵犯5岁以下的婴幼儿.大多数患儿症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征,多数患者可以自愈.少数患儿并发无菌性脑膜炎、脑炎、肺水肿、肺出血、呼吸道感染和心肌炎等[1],个别重症患儿病情进展快,易发生死亡.

右侧大脑基底节区非霍奇金淋巴瘤1例

1 临床资料患者,女性,35岁,平素体健,因"反复头痛1个月伴恶心、呕吐,加重伴视物模糊2d",于2008年11月7日入住神经外科.入院查体一般情况较好,全身浅表淋巴结无肿大,颅神经检查右侧视乳头水肿,四肢运动、感觉、反射均正常,病理征阴性.

妊娠24周合并Ⅰ型夹层动脉瘤1例

1临床资料孕妇,26岁,G3P1,存1,孕23周,于2008年8月27日凌晨4时突发心前区疼痛,伴背部疼痛,疼痛呈撕裂样,感心累、胸闷、气促、大汗淋漓,在上海瑞金医院行心脏超声检查:①主动脉夹层Ⅰ型(从主动脉瓣13起撕裂至双侧髂总动脉);②左心增大伴中重度主动脉瓣关闭不全,轻中度二尖瓣关闭不全;③肺动脉高压伴轻度三尖瓣关闭不全.

阴式子宫肌瘤剔除术54例临床观察

子宫肌瘤是妇科多发病,严重影响妇女身体健康和正常生活[1].2006年5月至2008年10月,我院成功施行经阴道子宫肌瘤剔除术54例,效果满意,现报告如下.

兔颈动脉球囊成形术促进白细胞介素6和超敏C反应蛋白的表达

经皮冠状动脉内血管成形术(percutaneou8 coronary inter-vention,PCI)广泛应用于冠心病的治疗并取得了显著疗效,但术后6个月再狭窄(RS)有较高的发生率.

血管内皮生长因子在外周血内皮祖细胞体外三维血管新生中的作用

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)在三维血管新生中的作用.方法 取大鼠外周血,密度梯度离心法分离出内皮祖细胞,以VEGF为诱导因子,观察VEGF对大鼠外周血内皮祖细胞体外培养和扩增的影响,同时重点建立三维立体模型并分析VEGF在外周血内皮祖细胞体外三维血管新生中的作用.结果 VEGF实验组细胞在三维基质内向胶原基质内生长,24 h内即可出现向胶原内的出芽及浸润并逐渐形成分支样结构,对照组细胞生长慢、出芽慢,管状结构细小,向胶原内浸润的深度浅,网状结构稀疏、不完整.VEGF实验组与对照组新生血管数目比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 鼠尾胶原凝胶可以诱导内皮祖细胞表现出血管新生中的迁移、增殖、发芽等;VEGF能动员和诱导内皮祖细胞促进血管新生.

粘孢子虫孢子期扫描电镜样品制备方法的比较

目的 探讨粘孢子虫成熟孢子扫描电镜样品制备新方法 .方法 通过常规方法 和改进方法 制备粘孢子虫孢子扫描样品.结果 改进方法 后观察结果 显示虫体脱落少,结构清晰,立体感强,能够达到理想的效果.结论 改进方法 解决了粘孢子虫在制作扫描电镜样品时的几个问题,是一种切实可行的方法 ,值得推广应用.

关于数字的用法