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第三军医大学学报

第三军医大学学报杂志

Journal of third military medical university 제삼군의대학학보

统计源期刊
  • 主管单位: 第三军医大学
  • 主办单位: 第三军医大学
  • 影响因子: 1.01
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1000-5404
  • 国内刊号: 50-1126/R
  • 发行周期: 半月刊
  • 邮发: 78-91
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1979
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 第三军医大学学报编辑委员会
  • 出版地区: 重庆
  • 主编: 王正国
  • 类 别: 医药卫生综合
期刊荣誉:
  • 革兰阴性菌基因快速失活载体的构建及其应用

    作者:龚明福;滕亮;张金龙;黎庶;胡晓梅;陈志瑾;熊坤;丛延广

    目的 构建适用于革兰阴性菌的快速基因失活载体系统并进行初步应用.方法 应用分子克隆技术构建快速基因失活载体系统.载体成分主要包括:π蛋白依赖件复制起点ori R6K;编码接合转移的mob片段;多克隆位点序列;含有2个Xcm Ⅰ酶切位点的T载体形成片段以及多种耐药片段,包括Chl(氯霉素抗性)、Tet(四环素抗性)、Km(卡那霉素抗性),获得的载体分别命名为EK3-Chl、EK3-Tet、EK3-Km.采用构建的EK3-Tet载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行插入突变,以验证其有效性.通过Xcm Ⅰ酶切EK3-Tet质粒形成T载体状态,将PCR扩增得到的两端截短的yeeZ基因与该T载体直接连接,获得的质粒采用接合方式转移到弗氏枸橼酸杆菌ATCCS090中以实现整合,双抗培养基筛选整合突变株,对获得的突变株进行鉴定和形态观察.结果 成功构建了EK3-Chl、EK3-Tet和EK3-Km,并对yeeZ基因进行插入突变获得突变株,步骤简便,工作周期短.结论 上述构建的载体系统能够对革兰阴性菌进行目的 基因的快速插入失活,该载体可在细菌基因功能研究中得到一定的应用.

  • Cajal间质细胞在输尿管平滑肌自发性收缩中的作用

    作者:葛亮;方强;熊智勇;宋波;李为兵

    目的 通过Glivec特异性地阻断Cajal间质细胞后观察豚鼠输尿管平滑肌肌条自发性收缩活动的变化,从功能学上探讨caial间质细胞在输尿管平滑肌自发性收缩巾的作用.方法 采用c-kit免疫荧光化学染色,激光共聚焦显微镜观察豚鼠输尿管组织内的ICCs;通过离体肌条实验观察特异性地阻断ICCs后豚鼠输尿管平滑肌肌条自发性收缩的变化.结果 c-kit免疫荧光染色显示,在豚鼠输尿管组织中存在c-kit阳性的ICCs.在2.0 g的前负荷下,终浓度为2×10~(-2)mol/L的KCI可诱发对照组肌条出现稳定的自发性收缩,自发性收缩的波幅为(0.104 5±0.021 6)g,频率为(6.8±1.6)次/min;实验组经终浓度为10~(-4)moL/L Glivec孵育30 min后,再给予终浓度为2×10~(-2) mol/L的KCI不能诱发肌条出现明显自发性收缩,更换Kreb's液洗脱Glivec 30 min后,肌条又恢复了自发性收缩,但收缩幅度略有降低.结论 输尿管的ICCs在输尿管平滑肌的自发性收缩中起着重要作用,极有可能是输尿管的起搏细胞.

  • 氟比洛芬口崩片在健康家兔体内的药代动力学研究

    作者:来小丹;刘松青;陈勇川;代青;贺红军;谢林利

    目的 研究氟比洛芬口崩片在兔体内的药代动力学特征.方法 6只受试兔随机分成2组:单剂量交叉口服氟比洛芬口崩片1片(50 mg/片)和普通片1片(50 mg/片),于一定时间采集血样,用高效液相色谱法测定24 h内的血浆药物浓度.采用DAS2.0软件对有关参数进行方差分析.结果 氟比洛芬口崩片和普通片T_(1/2)(h)分别为(7.072±1.102)和(6.338±1.913),C_(max)(μg/ml)分别为(11.473±0.542)和(11.558±0.437),T_(max)(h)分别为(0.292±0.102)和(0.917±0.129),auc(0-t)(μg/ml·h)分别为(77.441±10.677)和(76.741±11.890),AUC(0-∞)(μg/ml·h)分别为(84.836±12.588)和(83.305±16.980).氟比洛芬口崩片平均相对生物利用度为102.7%.结论 氟比洛芬口崩片与普通片具有生物学等效性.

  • 微创三节段经皮椎弓根螺钉内固定选择性治疗胸腰椎骨折

    作者:李长青;罗刚;周跃;王建;初同伟;张正丰

    目的 评价微创三节段经皮椎弓根螺钉内固定术治疗胸腰椎骨折的效果.方法 选择2008年6月至2009年3月在我科住院治疗的为42例胸腰椎骨折无神经功能损害患者分为三节段经皮椎弓根螺钉内固定微创手术组[共16例,男性11例,女性5例,年龄(40.2±8.6)岁]和开放手术组[共26例,男性17例,女性9例,年龄(42.4±9.3)岁],对比分析手术切口、手术时间、H{血量以及后凸畸形矫正率等.结果 与开放手术组相比,微创手术组手术切口明显缩小[(16.5±1.8)、(10.1±1.0)cm,P<0.05],术中出血量[(346.2±138.7)、(81.3±21.9)ml,P<0.01]及术后引流量[(138.6±46.5)、(13.7±4.3)ml,P<0.01]均明显减少,手术时间明显缩短[(2.5±0.7)、(1.2±0.6)h,P<0.05].微创手术组手术前后Cobb's角[(15.4±5.1)°、(3.8±2.8)°,P<0.01]、椎体矢状面指数[(19.7±10.3)°、(7.3±9.1)°,P<0.01]和伤椎椎体前缘高度[(63.2±14.6)%、(86.4±6.9)%,P<0.01]均显著恢复.结论 在严格掌握照手术适应证的前提下,微创三节段经皮椎弓根螺钉内固定术是治疗胸腰椎骨折的较好选择.

  • 基于VRML的数字化喉模型的虚拟仿真解剖

    作者:谭立文;张绍祥;宋林;陈卫军;李振强;胡南

    目的 建立喉的虚拟现实语言(virtual reality modeling language,VRML)模型,实现三维喉解剖模型远程虚拟仿真解剖.方法 选取第2例中国数字化可视人体喉区数据,利用手工分割建立喉区解剖结构的分割数据集;利用Amira4.1软件建立分割数据的面绘制模型,输出VRML文件;为每个模型设置名称、外观属性、事件路由等节点,以及接口函数,并将分离的模型合并为一个完整的VRML模型;利用Javascript函数来传递网页与VRML模型之间的参数,在网页文件中控制模型的显示属性,对喉模型进行远程虚拟仿真解剖.结果 建立了喉区器官结构的VRML虚拟现实模型,通过VRML插件实现了远程喉区解剖结构的三维显示与虚拟仿真解剖操作.结论 基于解剖断层图像的三维重建技术可以建立解剖标本的VRML模型,实现了数字解剖模型的远程交互式三维虚拟仿真解剖操作,为解剖学教学提供了新的远程虚拟现实仿真教学模式.

  • 黑米花青素对HER-2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB-453移植瘤血管生成的影响

    作者:于斌;余小平;易龙;常徽;陈春烨;金鑫;糜漫天

    目的 观察黑米花青素对HER-2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB-453移植瘤血管生成的影响.方法 以24只雌性BALB/c裸鼠建立MDA-MB-453细胞移植瘤模型,按照完全随机设计原则平均分入对照组、VEGF组、黑米花青素组和联合组4个处理组,分别以VEGF和黑米花青素提取物进行单独和联合干预;免疫组织化学法检测瘤组织核抗原Ki-67和Ⅷ因子相关抗原表达,评价移植瘤肿瘤细胞生长能力和瘤组织微血管密度(MVD)的变化;Western blot检测瘤组织促m管生成凶子MMP-2、MMP-9和uPA表达水平的变化.结果 相对于对照组,黑米花青素组瘤体积、MVD值和促血管生成因子的表达水平均显著降低(P<0.05),VEGF组上述指标则均有明显升高(P<0.05),联合组上述指标同对照组之间均无显著差异.相对于VEGF组,黑米花青素组和联合组的上述指标均有显著降低(P<0.05),其中黑米花青素组瘤体积有非常显著的降低(P<0.01).与对照组相比,黑米花青素组核抗原Ki-67表达强阳性的细胞数显著减少,VEGF组核抗原Ki-67表达强阳性的细胞数显著增多.结论 黑米花青素可能通过抑制移植瘤内血管生成而抑制肿瘤生长.

  • 蓝光对痤疮患者的疗效及对糠秕马拉色菌的影响

    作者:穆艳蕾;杨蓉娅;王文岭;樊昕;徐阳;王聪敏;张洁

    目的 观察波长407~420 nm蓝光对痤疮患者的疗效,对面部皮肤皮脂溢出率及糠秕马拉色菌的影响.方法 对20例痤疮患者蓝光治疗前后行电子显微成像观察,评价靶疹的表皮层及真皮浅层变化;应用Looking bill及Cunliffe改良测定法进行皮脂溢出率测定;应用蓝光对培养的糠秕马拉色菌进行照射,观察照光前后菌落的数量及形态变化.结果 20例痤疮患者蓝光治疗后靶疹明显消退,其表皮层及真皮浅层损伤减轻;皮脂溢出率较治疗前显著减少(P<0.01);在0.5 ml细胞数为5×10~6/ml的糠秕马拉色菌菌液中,菌落数量、直径与光照时间成反比,蓝光光照时间大于3 min 30 s时,平吼内无菌落生长.结论 蓝光对痤疮有很好的治疗效果:能修复深至真皮层的皮肤损伤,抑制皮脂分泌,对糠秕马拉色菌有杀菌作用.

  • 高血脂对大鼠血液流变特性和心肌肌钙蛋白的影响

    作者:滕丽新;刘胜学;何作云

    目的 观察高血脂大鼠早期血液流变特性的变化特点,探讨心肌缺血性损伤的发生机制.方法 给予72只SD大鼠高胆固醇+猪油+猪胆盐饲喂,建立高血脂大鼠模型即高脂组(HC),与普通饲料饲喂的36只SD大鼠即正常对照组(NC)相比较,饲喂10-90 d,每间隔10天为一取样时相点,测定9组高血脂大鼠的血脂、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和血液流变特性指标,并观察心肌及冠脉血管的病理变化.结果 本实验模型主要表现为高胆固醇、高低密度脂蛋白血症(LDL),随高脂饲喂时间延长,血浆粘度逐渐升高,红细胞变形性下降.饲喂50 d后cTnI升高,病理提示大鼠心肌出现局灶性缺血性损伤,相关分析表明高血脂大鼠心肌缺血性损伤的发生与血高胆固醇、高LDL密切相关.结论 高胆固醇血症血液流变特性的异常改变,是早期心肌缺血性损伤发生的原因之一.

  • 昆明山海棠总生物碱对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

    作者:黄晓春;刘晋档;周燕虹;敖琳;杨录军;曹佳

    目的 研究昆明山海棠总生物碱(total alkaloids of tripterygium hypoglaucum hutch,THHta)对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT法检测THHta对HCT116细胞增殖的抑制作用;用倒置及荧光显微镜观察THHta作用后HCT116细胞形态的变化;流式细胞术检测THHta对HCT116细胞周期及凋亡的影响,Western bolt检测凋亡相关caspase-3及PARP蛋白表达.结果 THHLa能显著抑制HCT116细胞增殖,抑制率与剂量和时间呈依赖关系.THHta作用HCT116细胞48、72 h的IC_(50)值小于20 μg/ml.THHta(10μg/ml)能诱导HCT116细胞G_0/G_1期比例增加及细胞凋亡,caspase-3活化及PARP蛋白剪切显著增强.结论 THHta能显著抑制HCT116细胞增殖,并可诱导HCT116细胞G_0/G_1期阻滞及细胞凋亡.

  • 整合素αvβ3特异性结合肽的筛选及初步鉴定

    作者:李雪松;吴虹晔;熊燕;李晓武;董家鸿

    目的 应用噬菌体随机肽库展示技术筛选能与整合素αvβ3分子具特异性结合功能的小肽分子,并对其功能进行初步鉴定.方法 根据整合素αvβ3分子细胞外配体结合区域的品体结构及蛋白质序列设计①~⑤号5条短肽,并作为筛选配基,分别经过3轮"吸附-洗脱-扩增"后,ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序和分析,粘附试验进一步分析化学合成多肽的功能.结果 经3轮亲和筛选后,噬菌体克隆得到有效富集,以⑤号肽为代表,ELISA鉴定显示7个阳性克隆能与⑤号合成短肽有较强结合活性.进行DNA测序,多重序列分析获得2个多肽基序:****HRH,HWR****.粘附试验表明化学合成多肽FITC-HLPWHRH,FITC-HWRLHPH与表达整合素αvβ3的细胞株具有一定的亲和性,且结合能被αvβ3分子配体纤维连接蛋白所抑制.结论 通过噬菌体随机展示肽库技术在体外对合成的短肽进行筛选,可以获得与整合素αvβ3分子具特异性结合能力的小肽分子.

  • 线粒体转录因子A对梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用

    作者:林恒;唐春;吴乔;冯春林;张玉君;别平

    目的 初步探讨线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)在重组人肝再生增强因子(rhALR)对梗阻性黄疸大鼠肝功能保护过程中的作用.方法 首先体外合成靶向TFAM的有效慢病毒载体,然后建立梗阻性黄疸大鼠动物模型,并通过门静脉将慢病毒注入大鼠肝组织进行靶向TFAM活体RNA干扰实验.然后通过RT-PCR和Western blot检测目的 基凶表达量的改变并观察大鼠肝脏病理改变、肝脏功能改变及rhALR保护作用的变化情况.结果 体外靶向TFAM慢病毒载体构建成功.通过门静脉注入后能特异、有效的感染肝组织细胞.RT-PCR和Western blot检测结果 显示进行活体RNAi的大鼠肝组织中TFAM的表达明显减弱;且这一组大鼠肝脏病理改变为明显,肝功能损害严重.rhALR的肝功能保护作用也随着消失.结论 阻断目的 基因TFAM的表达使得rhALR对梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用消失;TFAM在rhALR保护梗阻性黄疸大鼠肝功能过程中具有重要作用.

  • Ipr1重组卡介苗对小鼠结核病的治疗效果

    作者:候艳;陈全;王瑜伟;严莎;吕玉春;郭荫广

    目的 评估携带小鼠胞内病原体抗性基因1(intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)质粒(pBOGI)的重组卡介苗(BCG)对结核分枝杆菌(Mtb)感染的治疗效果.方法 BALB/c小鼠30只,随机分为3组:分别滴鼻给予磷酸盐缓冲液(PBS)、BCG和重组BCG,2周后用人型Mtb H_(37),Rv标准株感染所有小鼠;感染后分别用PBS、BCG和重组BCG治疗7次;末次治疗后处死小鼠,检测肺脾荷菌量,肺脾脏器指数,血清IFN-γ、IL-10及TNF-α分泌水平和肺脾组织中Ipr1的表达,同时观察小鼠肺脾组织病理改变情况.结果 重组BCG组肺脾荷菌量比PBS组和BCG组显著降低(P<0.01);重组BCG组肺脾脏器指数比PBS组和BCG组显著降低(P<0.05);重组BCG组血清IFN-γ分泌水平比PBS组和BCG组显著升高(P<0.01).用免疫组化检测到小鼠肺睥组织中有Ipr1表达.PBS组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛;重组BCG组肺部病变轻,肺泡结构基本正常;BCG组病变范围局限,病变程度界于PBS组与重组BCG组之间;各组间比较脾脏病理改变不明显.结论 携带小鼠Ipr1基因的重组BCG对结核分枝杆菌感染有一定的治疗作用.

  • HMGB1启动子红色荧光蛋白报告基因载体的构建及在机械牵张诱导下的活性检测

    作者:丁宁;肖慧;高巨;许立新;余守章

    目的 构建高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子的红色荧光蛋白报告基因载体.方法 采用基因重组技术构建含HMGB1启动子区的红色荧光蛋白报告基因载体pDsRedl-1-HMGB1P.经PCR、酶切和DNA测序鉴定后,将重组载体转染HEK293细胞,在荧光显微镜下观察其在细胞内的表达以及对机械牵张刺激的反应.以转染空载体pDsRedl-1的细胞作为对照.结果 PCR、酶切和DNA测序表明重组载体pDsRedl-1-HMGB1P的构建正确,该表达载体在HEK293细胞静息状态下表达水平较低,经机械牵张刺激后,在荧光显微镜下可看到高亮度的红色荧光.转染空载体pDsRedl-1的细胞未见红色荧光.结论 成功构建了HMGB1启动子的红色荧光蛋白报告基因载体,对机械牵张刺激有很好的反应.

  • 黄体酮对大鼠实验性变应性脑脊髓炎的治疗作用

    作者:余洪俊;费军;罗雪;姚忠祥

    目的 研究黄体酮对实验性变应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)大鼠的治疗作用.方法 采用注射豚鼠脊髓匀浆的方法 制作雄性Wistar大鼠EAE模型.当EAE大鼠出现神经症状后,开始在治疗组腹腔内注射溶于2.5 ml芝麻油中的黄体酮(4 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续注射4 d),模型组注射等量的芝麻油.分别对两组大鼠进行运动功能评分和脑组织的电镜检查、LFB染色、锇酸Marchi's染色.染色结果 采用IPP图像分析软件计算光密度(OD)值.结果 治疗组和模型组神经功能评分无明显区别,但是在开始治疗后第6、10、25天,治疗组正常髓鞘的积分光密度值明显高于模型组,而退变髓鞘的积分光密度值明显低于模型组.结论 黄体酮有利于EAE大鼠中枢神经系统的髓鞘再生,促进髓鞘修复.

  • 完全弗氏佐剂诱导前列腺炎模型大鼠尿道腺分泌异常的研究

    作者:吴爱宁;熊恩庆;宋波;张恒

    目的 观察前列腺炎对大鼠尿道腺分泌的影响.方法 20只Sprague-Dawley大鼠随机分为前列腺炎组和对照组,前列腺炎组侧叶内给予注射完全弗氏佐剂0.1 ml,对照组给予注射生理盐水0.1 ml,2周后取尿道腺组织做AB-PAS黏液染色和分泌型粘蛋白MUCSAC免疫组化染色.结果 ①前列腺炎组前列腺内大量淋巴细胞、单核细胞浸润,对照组阴性,前列腺炎动物模型建立成功.②AB-PAS黏液特殊染色提示:前列腺炎组大鼠尿道腺细胞的黏液面积、直径、光密度均比对照组高,且差异有统计学意义(P<0.05).③分泌型粘蛋白MUCSAC免疫组化染色结果 提示前列腺炎组粘蛋白面积、平均光密度与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 前列腺炎可以导致尿道腺合成和分泌黏液功能增强,这可能是前列腺患者尿道分泌物增多的原因之一.

  • 稳定过表达Wnt5a对K562细胞生物学性状的影响

    作者:牛长春;司维柯;李军;赵辰;丁伟;李招权;潘静;赵宸

    目的 构建稳定过表达Wnt5a的K562细胞株,并观察稳定过表达Wnt5a对K562细胞牛物学性状的影响.方法 构建质粒pSEB-Wnt5a;包装得到含有逆转录病毒的上清,感染K562细胞,筛选出感染成功的细胞;Western blot检测蛋白的表达;细胞计数、瑞氏染色、透射电子显微镜观察对细胞生物学性状的影响.结果 成功构建了质粒pSEB-Wnt5a;筛选得到了感染成功的细胞;感染pSEB-Wnt5a逆转录病毒的K562细胞Wnt5a蛋白表达水平明显高于感染空病毒载体的细胞;与K562-vector细胞相比,K562-Wnt5a细胞的增殖被明显抑制,并出现了向成熟分化的形态学特征.结论 成功构建了稳定过表达Wnt5a的K562细胞株;稳定过表达Wnt5a抑制K562细胞增殖并可以促进其向成熟分化,提示Wnt5a在白血病发生中可能起到抑癌基因的作用.

  • 早产儿视网膜病变的彩色多普勒超声诊断与临床眼科随访对比分析

    作者:包蕾;王荞;方静;余加林

    目的 研究彩色多普勒血流成像(CDFI)检查技术在早产儿视网膜病变(ROP)的诊断和随访中所具有的临床价值.方法 选择2008年3月至2009年2月我科收治的胎龄小于37周或出生体质量小于2 000 g的早产儿、低体质量儿为研究对象,在生后4~6周采用RetCam数字视网膜照相机及间接眼底镜等眼科检查进行ROP筛查,共检查49例,98只眼,同时行双服彩色多普勒超声检查,并将两者对照分析.结果 眼科检查确诊ROP患眼41只,包括Ⅰ期8只,Ⅱ期19只,Ⅲ期6只,瘢痕期8只,未发现Ⅳ、Ⅴ期的患儿.CDFI与眼科检查对照特异性为85.5%,敏感度为76.7%.其中Ⅱ、Ⅲ期表现为:眼底视网膜中央动脉(CRA)的血流信号异常丰富,血管细小分支增多,走行迂曲,收缩期峰值流速(V_s)测值无明显改变,舒张期流速(V_d)减低,血流阻力指数(RJ)增高,在眼底正中视乳头区域可见强回声短条状结构突向玻璃体内,Ⅰ期ROP的8只眼CDFI未发现明显特征性改变.结论 Ⅰ期ROP的CDFI表现不典型,而Ⅱ~Ⅲ期患儿眼底视网膜血管病变CDFI具有特征性的图像表现,CDFI对于ROP高危人群的常规初筛有较好的临床实用价值.

  • 胎儿镜下胎盘血管交通支凝固术治疗双胎输血综合征6例临床分析

    作者:李俊男;梁志清;陈功立;管唯靓;胡华;陈诚;蒋凤;余关佳;常青;王琳;葛晓冬;张晓航;蔡萍

    目的 探讨胎儿镜下胎盘血管交通支凝同术(选择性或非选择性)治疗双胎输血综合征(twin-twin transfusionsyndrome,TTTS)对围生结局的影响.方法 6例TTTS接受胎儿镜下胎盘血管交通支凝固术治疗,在实时超声引导下,直径3 mm胎儿镜经孕妇腹壁进入羊水过多的受血儿羊膜腔,在胎儿镜下找到胎盘血管交通支,采用Nd:YAG激光光纤或双极电凝凝固血管交通支.结果 6位母亲均能耐受手术过程,没有严重的并发症发生.至少有1胎存活率50%(3/6),双胎儿存活率为33.33%(2/6),胎儿总存活率41.6%(5/12).结论 胎儿镜下胎盘血管交通支凝固术治疗,TTTS能提高围生儿的存活率.

  • CRH对腹腔巨噬细胞分泌IL-10的影响及其信号机制

    作者:王伍超;陈金萍;张岫竹;代维;刘大维;周继红

    目的 研究促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin-releasing hormone,CRH)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌白介素-10(interleukin-10,IL-10)的影响及其信号转导机制.方法 将原代培养的大鼠腹腔巨噬细胞分为正常对照组、CRH组、CP+CRH组、HL+CRH组、H89+CRH组以及PKAi+CRH组.其中正常对照组仅加入新鲜RPMI1640培养液2 ml;CRH处理组,加入含CRH终浓度为10~(-9) mol/L的培养液2 ml;后4组在分别用CRHRI选择性阻断剂CP-154526(5×10~(-4) mol/L)、CRHR1/2非选择性阻断剂α-helical CRH9-41(10~(-6)mol/L)、Ac抑制剂H89(10~(-6)mol/L)和PKA抑制剂PKAi(6-22)amide(10~(-4)mol/L)预孵育2 h后,加入含终浓度为10~(-9)mol/L的CRH培养液,再分别加入CRH(终浓度为10~(-9)mol/L)刺激.各组分别于CRH刺激后0.5、1、2、4、8 h收集培养皿中的上清液,应用ELISA方法 检测IL-10的含量.结果 正常对照组巨噬细胞分泌IL-10的含量为(29.41±3.10)μg/g.CRH组IL-10含量呈现双峰,在1、4 h达到高峰,分别为(53.15±7.98)、(46.01±1.70)μg/g,与CRH组0.5 h相比差异均非常显著(P<0.01),接近正常对照组的2倍(P<0.01).CP+CRH组与HL+CRH组IL-10含量在1、4 h均明显低于CRH组(P<0.01),并接近正常对照组水平.但在8 h时明显增加,显著高于正常对照组(P<0.05)和CRH组(P<0.05).且两组之间IL-10含量在0.5~4 h差异不显著,但在8 h时HL+CRH组显著低于CP+CRH组.H89预孵育后细胞IL-10含量在1、4、8 h显著下降,与CRH组比较差异显著(P<0.01);在4、8 h低于正常对照组水平(P<0.05).PKAi(6-22)amide预孵育细胞后,IL-10含量在0.5~8 h下降,与正常对照组以及CRH组比较差异非常显著(P<0.01).结论 CRH可通过CRHRI促进巨噬细胞分泌产生抗炎因子IL-10,其与cAMP/PKA信号通路密切相关.

  • 尿毒症患者血清对内皮细胞凋亡的影响及rhEPO的干预作用

    作者:李小丽;甘华;常晓东;杜晓刚

    目的 探讨尿毒症患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡的影响及重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)的干预作用.方法 选择我院2008年12月至2009年4月收治的尿毒症患者和健康志愿者各10例,HUVECs按不同的干预方式分3组进行实验:对照组(含10%健康者血清)、尿毒症组(含10%尿毒症患者血清)、rhEPO干预组(rhEPO 5、10、15 U/ml,分别加入含有10%尿毒症患者血清的培养基).各组干预24 h,TUNEL法检测细胞凋亡,比色法测定细胞内活性氧.结果 尿毒症患者血清环境中内皮细胞的凋亡指数和活性氧水平均高于对照组(P<0.01).rhEPO可抑制尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡(P<0.01),降低细胞内活性氧水平(P<0.01);随着rhEPO浓度的增加,内皮细胞凋亡指数和ROS水平都逐渐降低(P<0.05).相关分析显示:凋亡指数与活性氧水平呈正相关(r=0.89,P<0.01).结论 尿毒症患者血清可以诱导HUVECs凋亡,其机制可能与氧化应激有关.rhEPO可能通过减轻氧化应激反应而抑制尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡.

  • 高效液相法测定水杨柳提取物中水柳皂苷的含量

    作者:车仁宇;赵晶;王圣燕

    目的 建立测定水杨柳提取物中水柳皂苷的高效液相色谱法.方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为HYPER-SILBDS-C_(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μn);流动相为乙腈:水=75:25;流速为1.0 ml/min;检测波长为203 mm;柱温为30℃;柱压为10.0 MPa.结果 该方法 的线性范围为5~500μg/ml(r=0.999 8);平均加样回收率为99.44%,RSD为0.52%(n=15).结论 该方法 重现性好,精密度高,可用于水杨柳药材及其制剂的质量控制.

  • miR-223在CXCR4~+Lewis肺癌细胞中的显著低表达及其靶基因预测

    作者:辇伟奇;陈芳琳;敖绪军;陈正堂

    目的 分析miR-146a、miR-206、miR-223、let-7c-1等细胞分化相关miRNAs,在小鼠Lewis肺癌细胞株(theLewis lung cancer cell lines,LLC)CXCR4~+与CXCR4~-亚群间的差异表达.方法 免疫磁珠分选CXCR4~+和CXCR4~-LLC细胞,Trizol法抽提细胞总RNA,实时荧光定量PCR(TaqMan探针)检测miRNAs表达,对表达差异为显著的miRNAs进行潜在靶基因预测,应用免疫组化方法 初步分析具有研究价值的关键分子在两个不同亚群小鼠种植瘤组织中的表达情况,并通过BLAST对其3'非翻译端(untranslated region,UTR)进行直向同源基因序列比对分析.结果 CXCR4~+与CXCR4~-LLC比较,各检测mirna表达均较低,其中以miR-223差异为显著(Fold Change=8.26),通过软件分析预测,miR-223与IGFIR、IGFBP5、Pik3cb、ELK-1和E2F1等基因均具有可能靶位点,免疫组化检测发现CXCR4~+亚群种植瘤组织IGFIR表达显著高于CXCR4~-亚群,IGF1R 3'UTR的238~244 nt和688~695 nt两个结合位点具有高度的进化保守性.结论 miR-223在CXCR4~+LLC中显著低表达,可能与肺腺癌细胞IGFIR信号通路调控有关.

  • 窦房结区甲醛湿敷法建立犬窦房结损伤模型

    作者:张志辉;程军;宋治远

    目的 探讨甲醛湿敷法建立犬窦房结损伤模犁的可行性和电生理特征变化.方法 20只实验犬按随机数字表法随机分为湿敷后2 h、4 h、1周及4周组(n=5).用20%甲醛湿敷窦房结区建立窦房结损伤模型.各组于湿敷前、湿敷后各自相对应时间点行电生理功能检测,同步记录体表心电图(electrocardiogram,ECG).结果 20只实验犬甲醛湿敷时间为3~12(6.2±2.6)min.5只犬甲醛湿敷后窦性心率(heart rate,HR)显著减慢[(140±11)、(89±6)次/min,P<0.01],无心律失常;4只犬除窦性心率明显减慢外出现窦性心律不齐、窦性停搏及频发房性早搏,但很快恢复为规整的窦性节律;11只犬予甲醛湿敷后P波消失,呈交界性逸搏心律,其中4只于湿敷后24 h行ECG监测时转为窦性心律,但HR仍显著低于湿敷前.湿敷后2 h、24 h、1周及4周组的HR均较甲醛湿敷前显著减慢(P<0.01);各组湿敷后的窦房结恢复时间(sinus node recovery time,SNRT)及校正的窦房结恢复时间(corrected sinus node recovery time,CSNRT)则均较湿敷前显著延长(P<0.01,P<0.05).结论 采用甲醛湿敷法可以成功建立犬窦房结损伤模型,其电生理改变与临床病态窦房结综合征表现相似.

  • 诱导细胞mtDNA缺失以及再转入线粒体后对肿瘤细胞凋亡的影响

    作者:李歆强;凌贤龙;周源;何玉琦;李诗伟;晏斌

    目的 对比研究mtDNA缺失以及再转入线粒体后细胞凋亡的变化.方法 在成功构建ρ_0SK-Hepl细胞和转线粒体细胞SK-HeplCyb的基础上,采用Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位(△ψm);Western blot检测细胞Bcl-2、Bax表达水平;免疫荧光染色观测Bel-2细胞内分布.结果 SK-Hepl、ρ~0SK-Hepl和sK-HeplCyb细胞凋亡率分别为(2.01±0.11)%、(0.37±0.08)%和(2.10±0.12)%.ρ~0SK-Hepl对细胞凋亡有明显抗性(P<0.05).ρ~0SK-Hepl细胞内DCFDA荧光强度较SK-Hepl细胞显著增强(35.5与15.9,P<0.01);转入线粒体后,SK-HeplCyb细胞DCFDA荧光强度较ρ~0SK-Hepl细胞明显下降(17.4与35.5,P<0.01).ρ~0SK-Hepl细胞MitoTracker Red荧光强度较SK-Hepl细胞显著减低(55.0与65.9,P<0.05);转入线粒体后,SK.HeplCyb细胞MitoTrack-er Red荧光强度与SK-Hepl细胞基本一致(67.4与65.9,P>0.05).ρ~0SK-Hepl细胞线粒体Bcl-2、Bax表达增多,Bcl-2/Bax比值增加(P<0.01).SK-HeplCyb细胞线粒体Bcl-2/Bax值下降.结论 mtDNA缺失肿瘤细胞对细胞凋亡有明显拮抗.Bcl-2线粒体转位、线粒体Bci-2/Bax值增加、ROS产生增多可能参与细胞凋亡拮抗的形成.

  • 临床分离表皮葡萄球菌的大环内酯耐药性与生物膜形成能力、icaA基因型的关系

    作者:枉前;孙凤军;夏培元

    目的 研究68株临床分离表皮葡萄球菌大环内酯耐药性与生物膜形成能力、icaA基因型之间的关系,初步预测采用大环内酯抗菌药物预防表皮葡萄球菌生物膜感染的有效性.方法 以琼脂平板稀释法测定菌株的小抑菌浓度,采用微孔测定法考察临床分离表皮衙萄球菌生物膜形成能力,通过PCR法测定icaA基因型,探讨三者之间的关系.结果 临床分离表皮葡萄球菌对大环内酯耐药程度较高(88.2%),且耐药菌生物膜形成能力较敏感菌显著增强(P<0.05),耐药菌与敏感菌的icaA阳性比率没有统计学差异(P>0.05).结论 红霉素、阿奇霉素、克拉霉素等常用的大环内酯类药物可能难以有效地预防表皮葡萄球菌生物膜感染.

  • 核磁共振氢谱内标法测定盐酸小檗碱的含量

    作者:陈玉兰;陶凌晖;侯华;张艺;周向东;范昕建

    目的 建立用内标法快速、专属、简单的测定盐酸小檗碱含量的核磁共振氧谱定量分析方法 .方法 用Varian公司Mercury Plus 400 MHz核磁共振仪,在25℃下,以氘代甲醇为溶剂,2,4-二硝基甲苯(2,4-DNT)为内标,观察在频率400.123 MHz、谱宽6 410.3 Hz、90°脉冲宽度6.450μs、采集时间4 s和延迟时间18 s的条件下采集盐酸小檗碱试样的氢谱.结果 以化学位移分别在8 6.13 ppm和8 8.45 ppm盐酸小檗碱单峰和2,4-DNT的双二重峰作为定量峰,含量测定重复性实验的RSD为1.785%(n=6),测得3批盐酸小檗碱含量分别为88.847 7%、88.380 3%、88.658 7%.结论 在没有对照品的情况下,核磁共振氧谱内标法可用于盐酸小檗碱的含量测定和质量控制.

  • 红药气雾剂治疗老年消化道肿瘤患者静脉炎的疗效观察

    作者:袁昌琼;孙彩红

    通过外周静脉输注化疗药物治疗肿瘤在临床已广泛应用.化疗药物的毒副作用强,容易导致静脉及其周围局部组织出现静脉炎相关症状,主要表现为红肿、灼痛、条索状物等[1,2].

  • 护理配合白内障超声乳化熟练术者的体会

    作者:唐文;张燕;喻红

    1 临床资料收集2008年10月至2009年4月眼科门诊、眼科及其他科住院患者1 275例,其中男性682例,女性593例,平均年龄53(3-86)岁.

  • 华支睾吸虫病术后胆汁分泌亢进21例分析

    作者:郑培秋

    胆汁分泌亢进(1hypereholeresis)一般情况下并无临床症状,但在做胆汁外引流时可致严重后果.作者在施行肝癌手术时,发现合并华支睾吸虫病胆管扩张者容易发生胆漏[1].做胆汁外引流旨在防止术后胆漏,但术后胆汁分泌亢进颇为常见.

  • 经关节突"V"形截骨矫治强直性脊柱炎后凸畸形

    作者:张铭华;李波;钟斌;余雨

    强直性脊柱炎(aJlkylosing spondylitis,As)若得不到及时治疗,晚期可使脊柱旁的关节突关节和椎间组织等结构融合硬化,导致脊柱过度后凸畸形,破坏身体矢状面上的平衡,影响患者日常活动、心理、交际[1,2].

  • 宫颈癌与KIR3DL1基因的相关性研究

    作者:周琦;聂蕾;单可人;黄林;何燕;张婷

    目的 探讨宫颈癌与KIR3DL1基因的相关性.方法 采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)及Touchdown-PCR方法 扩增KIR3DL1基因.结果 病例组KIR3DL1基因频率显著低于对照组(P<0.05).结论 KIR3DL1基因缺失可能与宫颈癌的发生存在相关性.

  • 米氮平与帕罗西汀治疗伴躯体症状抑郁症的对照分析

    作者:吴胜;张代江

    目的 比较米氮平与帕罗西汀治疗伴躯体症状抑郁症的疗效及安全性.方法 将64例伴躯体症状的抑郁症患者随机分为米氮平组和帕罗西汀组,每组32例,观察8周.采用HAMD、CGI和TESS量表评定疗效及不良反应.结果 治疗8周后,米氮平组和帕罗西汀组显效率分别为62.50%、56.25%,2组问无显著性差异(P>0.05);HAMD评分米氮平组治疗1周末起,帕罗西汀组治疗2周末起较治疗前有显著下降(P<0.01,P<0.05),治疗1周末米氮平组明显低于较帕罗西汀组(P<0.05),之后无显著性差异(P>0.05);治疗8周后米氮平组TESS评分显著低于帕罗西汀组(P<0.05).结论 米氮平与帕罗西汀均能有效治疗伴躯体症状抑郁症,且疗效相当,但米氮平起效更快,安全性更高,依从性更好.

  • 早产儿脑损伤动物模型的研究现状与展望

    作者:赵聪敏;鲁利群

    近年来,产科技术和新生儿重症监护技术的不断提高使早产儿存活率明显增加,早产儿脑损伤发病率亦呈逐年增加趋势.

  • 孕早期暴露家装空气污染物及高温对新生鼠神经行为的影响

    作者:张红;赵聪敏

    目的 探讨孕早期暴露家装空气污染物以及联合高温对新生大鼠神经行为的影响.方法 22只孕鼠随机分为4组,每天置于污染物柜、高温柜、高温联合污染物柜以及空染毒柜中2 h时,共10 d,然后对其分娩的新生鼠在不同时间点观察体质量变化和神经行为学改变.同时观察大鼠海马CAI区凋亡和死亡神经元的数量并检测海马组织中NMDA受体NRI亚基的基因表达变化.结果 化学污染物、高温可导致新生鼠海马神经元的死亡和凋亡以及促进海马NMDA受体NRI基因的表达,并对其神经行为、学习记忆能力有显著的影响,二者联合可加重其损伤作用.结论 孕早期暴露家装宅气污染物和高温环境会对新生鼠神经系统的发育产生明显影响.

  • 神经发育支持模式对早产儿体格及神经心理发育的影响

    作者:廖伟;赵聪敏;温恩懿;张雨平;王丽雁

    目的 探讨在新生儿重症监护室(NICU)实行神经发育支持模式对早产儿体格及神经心理发育的影响.方法 将78例早产儿随机抽样分为观察组38例,对照组40例.观察组在传统方法 护理基础上予以神经发育支持照顾模式,对照组采用传统方法 护理.两组患儿在出入院时均测定头围、身长及体质量;在纠正年龄14 d对两组患儿进行新生儿神经行为(NBNA)测试;纠正年龄2、6个月时,用Gesell发育量表对发育商进行评估.结果 观察组在出院时体质量增加较对照组体质量增加有显著差异(P<0.01);观察组新生儿神经行为测试其行为能力、被动肌张力、主动肌张力及一般评估4个方面的NBNA评分均显著高于对照组(P<0.01);观察组在6月龄时Gesell测试其动作能、应物能及应人能3个能区发育商分值均显著高于对照组(P<0.01).结论 在NICU对早产儿实行神经发育支持疗法可促进其体格及神经心理的发育,值得提倡、推广.

  • 大鼠EPO真核表达载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达

    作者:王文益;赵聪敏;廖伟

    目的 构建表达大鼠促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的真核表达质粒pEGFP-NI/EPO,并检测其在体外的表达.方法 从大鼠肾脏获得EPO基因片段并用RT-PCR方法 扩增,将其连接于真核表达质粒pEGFP-NI,测序鉴定后,用脂质体包裹转染大鼠骨髓问充质干细胞(mesenchymal stem cels,MSCs),采用免疫组化和RT-PCR检测EPO的表达.结果 经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确,该质粒在体外转染大鼠MSCs细胞后可表达EPO蛋白.结论 成功构建的pEGFP-NI/EPO重组质粒能在体外表达EPO蛋白.

  • 丰富与贫瘠环境对新生鼠脑损伤后脑功能的影响

    作者:鲁利群;江俊;杨欣;刘松梅

    目的 研究丰富与贫瘠环境对缺氧缺血性腩损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)后脑功能的影响.方法 制备3 d龄SD大鼠HIBD模型,随机数字表法分为丰富环境组(enriched environment,EE)、贫瘠环境组(impover-ished environment,IE)和标准环境组(standard environment,SE).另设假手术组作为对照.各组大鼠于术后第2天开始分别给予不同环境刺激.术后32 d,应用悬吊和斜坡实验测试感觉运动功能,Morris水迷宫实验了解学习记忆能力,免疫组织化学染色检测皮层和海马胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达.结果 感觉运动和学习记忆能力测试发现,IE组明显差于SE组(P<0.01),sE组差于Sham组和EE组(P<0.01),Sham组和EE组无显著差异(P>0.05).皮层和海马GFAP免疫组织化学染色结果 显示,Sham组GFAP阳性细胞数分别低于其他3组(P<0.01),而SE组低于EE组,高于IE组(P<0.01).结论 丰富环境增加新生鼠脑损伤后GFAP的表达,改善脑功能;贫瘠环境加重脑功能的损害.

  • P2X_7受体在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后表达下调

    作者:王丽雁;蔡文琴;陈鹏慧

    目的 了解P2X_7受体在新生大鼠缺氧缺血型脑损伤后的表达变化.方法 选择出生7 d的SD大鼠建立新生鼠缺氧缺血性脑损伤模型,通过Western blot和免疫组化检测缺氧缺血前后脑皮层、白质、海马P2X_7受体表达.结果 缺氧缺血后2 h,患侧皮层、白质和海马P2X_7受体蛋白较假手术对照组明显下调(P<0.05,P<0.01);免疫组化也显示患侧皮层、白质和海马P2X_7,受体表达下降.结论 P2X_7受体可能参与了新生鼠缺氧缺血性脑损伤过程.

  • 高压氧在新生鼠缺氧缺血性脑损伤神经修复中的作用机制

    作者:尹晓娟;周冬翠;安育林;罗分平;封志纯

    目的 探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)在新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)神经修复中的作用机制.方法 新生7日龄SD乳鼠30只,随机分为HIBD+HBO干预组、HIBD组和正常对照组,每组10只.干预组于建模后予以HBO治疗,连续7 d.采用免疫组化技术检测各组骨形态发生蛋白4(BMP-4)及神经巢蛋白(nestin)在海马的表达;采用原位杂交技术检测各组BMP-4及nestin mRNA在海马的表达;采用TUNEL方法 检测各组神经细胞凋亡.结果 3组中,干预组BMP-4蛋白在海马的表达多,HIBD组BMP-4蛋白在海马的表达少;干预组nestin蛋白在海马的表达多,HIBD组nestin蛋白在海马的表达少;干预组BMP-4 mRNA在海马的表达多,HIBD组BMP-4 mRNA在海马的表达少;干预组nestin mRNA在海马的表达多,HIBD组nestin mRNA在海马的表达少;HIBD组凋亡神经细胞多.HBO干预组凋亡神经细胞与HIBD组差异有统计学意义(P<0.01).结论 HBO对HIBD具有神经修复作用,其作用机制可能与促进BMP-4及nesfin在海马的表达以及抑制神经细胞的凋亡有关.

  • 32例自闭症儿童的睡眠相关问题分析

    作者:赵雪晴;赵聪敏;吴至凤;廖伟;张雨平;杨红

    目的 探讨自闭症患儿睡眠相关问题.方法 采用儿童睡眠习惯问卷(the Children's Sleep Habits Question-aire,CSHQ)调查2.5~5岁自闭症患儿32例和幼儿园就读的健康儿童37例.结果 2.5~3岁自闭症患儿睡眠总量为(10.91±1.03)h,显著低于同年龄段正常儿童睡眠总量(11.83±0.27)h(P<0.05);3~5岁自闭症患儿睡眠总量为(9.71±0.27)h,显著低于同年龄段正常儿童睡眠总量(10.39±1.55)h(P<0.05).儿童睡眠习惯问卷中,2.5~3岁自闭症患儿总分为(48.00±1.79),正常儿童总分为(47.05±6.15),二者差异无统计学意义(P>0.05);3~5岁自闭症患儿总分为(47.86 ±3.34),正常儿奄总分为(45.31±6.56),二者差异无统计学意义(P>0.05).8项睡眠因子评分比较,2.5~3岁自闭症组与正常组在睡眠持续情况、夜醒、白天嗜睡3项中有统计学差异(P<0.05);3~5岁自闭症组与正常组在睡眠潜伏期、睡眠持续情况、夜醒、白天嗜睡4项中有统计学差异(P<0.05).结论 与同龄正常儿童相比,2.5~3岁及3~5岁自闭症患儿的睡眠总量均减少,并在睡眠持续情况、夜醒、白天嗜睡等多项睡眠问题上较正常儿童突出.

  • 不同发育阶段大鼠脑髓鞘化的研究

    作者:张雨平;黄其林;赵聪敏;汤金梁;王亚丽

    目的 研究大鼠不同发育阶段脑髓鞘化的发展及规律.方法 应用LFB髓鞘染色、MBP免疫组化及Wes-tern blot观察不同发育阶段大鼠脑髓鞘的分布及变化.结果 LFB及MBP免疫组化染色E18、P0、P2均未见着色,P7大鼠胼胝体中部少量LFB着色,P15两种染色均呈阳性,P30着色加深,与P90、P720类似.通过Western blot检测MBP蛋白在孕中后期已有表达,出生后随日龄增长逐渐增加,至老年期表达量高.结论 大鼠脑髓鞘化从P15已经开始,P30接近成熟;观察髓鞘的佳时间在30 d以后.

    关键词: 大鼠 髓鞘化 发育
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