第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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阴道毛滴虫和口腔毛滴虫5种同工酶谱对比分析
目的 分析阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,Tv)和口腔毛滴虫(Trichomonas tenax,TT)的同工谱特征及其亲缘关系,寻找同工酶谱鉴别指标.方法 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,分别进行苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase, MDH)、谷氨酸脱氢酶(glutamic dehydrogenase, GLDH)、6-磷酸-葡萄糖脱氧酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PD)、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase, ADH)和过氧化氢酶(Catalase)5种同工酶染色,比较分析2种滴虫的酶谱.结果 MDH同工酶:2种滴虫只有相对迁移率(Rm) 52、85 2条区带相同,而Rm 34、42、94、100 4条区带在2种滴虫之间明显不同;GLDH同工酶:TV无显带,TT共分离出6条酶带;G6PD同工酶:TV只有Rm35、42、52 3条区带,而TT除了显示这3条区带外,还显示出其他迁移率更大的区带;ADH和Catalase均无区带显示.结论 MDH、GLDH和G6PD3种同工酶均具有鉴别意义.
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冠状动脉起源异常多层螺旋CT诊断及临床意义
目的 总结冠状动脉先天性起源异常的多层CT表现和临床意义.方法 回顾性分析4 581例冠状动脉CT血管造影(CT angiography, CTA)检查的影像和临床资料,冠状动脉起源异常者41例,男性34例,女性7例,年龄3～81(54.3±15.6)岁.观察CTA横轴位薄层重建图像,再进行多平面重组(multi-planar reconstruction, MPR)、大密度投影(maximum intensity project, MIP)和容积再现(volume rendering, VR)后处理观察.结果 冠状动脉起源异常41例,发生率为0.9%.41例中,右冠状动脉起源于左冠窦9例,高位开口6例;左冠状动脉高位开口4例,左冠状动脉起源于右冠窦3例;左前降支与左旋支分别起源于左冠窦8例,左前降支起源于右冠状动脉2例,左旋支起源于右冠状动脉5例;左右冠状动脉共干起源4例.41例中23例有发作性胸闷、心悸,4例有心绞痛,其中2例有心源性休克.结论 多层螺旋CTA可无创性显示冠状动脉起源及走行异常,应作为疑诊冠状动脉起源异常的首选影像学检查方法.
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彩色多普勒超声在糖尿病颈动脉硬化中的应用
目的 分析彩色多普勒超声在糖尿病颈动脉硬化诊断中的应用价值,并探讨糖尿病与颈动脉硬化的关系.方法 对本院诊断明确的2型糖尿病住院患者68例(观察组)、健康体检者73例(对照组)进行颈动脉超声对比分析.结果 观察组颈动脉内-中膜厚度(intima-media thickness,IMT)较对照组明显增厚(P<0.01),且观察组斑块发生率较对照组明显增高(82.35% vs 23.28%,P<0.01);观察组年龄小于60岁者颈动脉粥样硬化的发病率明显低于年龄超过60岁者(18.75% vs 76.92%,P<0.01);血流动力学改变在中度和重度狭窄时明显,血流速度明显增快,血流量明显减低,表现为频谱充填、峰值与舒张末期流速加快,PI、RI均增高,观察组明显高于对照组(P<0.01).结论 应用彩色多普勒超声能准确检测颈动脉粥样硬化斑块的范围、性质和血管病变的程度,是评价颈动脉粥样硬化受损的手段之一.
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姜黄素眼膏对兔小梁切除术后滤过道瘢痕化的抑制作用
目的 研究姜黄素眼膏对兔实验性小梁切除术后滤过道瘢痕的影响.方法 将27只新西兰大白兔按体质量分层随机分为对照组、基质组、姜黄素组,每组9只,均选右眼行标准小梁切除术.术后对照组不做特殊处理;基质组给予约0.1 g眼膏基质,3次/d;姜黄素组给予约0.1 g姜黄素眼膏,3次/d.分别观察3组眼压、滤过泡、炎性细胞、胶原、成纤维细胞和肌成纤维细胞.结果 术前,术后1、3、28 d 3组眼压值差异不明显(P>0.05),术后7、14、21 d 3组眼压值有明显差异(P<0.05).术后7 d时姜黄素组与对照组和基质组间的炎性细胞比较差异有统计学意义(P<0.05).而术后14、28 d 3组间比较差异无统计学意义(P>0.05).姜黄素组各个时间点的I型胶原量[7 d(21.62±2.87)%,14 d(27.83±2.37)%,28 d(33.47±2.79)%]与对照组[7 d(29.71±1.31)%,14 d(36.83±1.73)%,28 d(47.13±1.85)%]和基质组[7 d(31.07±1.67)%,14 d(38.09±1.17)%,28 d(48.13±1.69) %]比较差异有统计学意义(P<0.05),但Ⅲ型胶原差异无统计学意义(P>0.05).姜黄素组的成纤维细胞和肌成纤维细胞与对照组和基质组比较有显著差异(P<0.05).结论 姜黄素眼膏可抑制成纤维细胞和肌成纤维细胞增生,减少Ⅰ型胶原分泌,有效延缓滤过泡瘢痕化进程.
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人锌转运体8强免疫原性片段的预测及原核表达鉴定
目的 筛选人锌转运体8(Zinc transporter 8,ZnT8)中强免疫原性片段,并对其进行克隆表达及鉴定.方法 采用生物信息学软件预测ZnT8结构特征,筛选出具有强免疫原性的N末端片段ZnT8(N),经PCR(Polymerase Chain Reaction)技术扩增,构建表达质粒pET32a-ZnT8(N),转化入E.coli BL21(DE3)中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析及Western blot鉴定.结果 从ZnT8分子中筛选出具有140个氨基酸的肽段ZnT8(N),重组质粒pET32a-ZnT8(N)经酶切和测序鉴定证实构建成功.转入大肠杆菌进行表达,表达产物相对分子质量(Mr)约32 000,与预期值相符,并经免疫印迹检测鉴定为阳性,融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量45%.结论 筛选获得了人胰岛细胞来源的ZnT8强免疫原性片段,并在原核系统中成功表达.
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人子宫颈癌PD-L1的表达及其与肿瘤内浸润T细胞的相关性研究
目的 观察负性免疫调节分子程序性死亡配体1(programmed death receptor-ligand 1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内T淋巴细胞浸润的关系.方法 免疫组织化学染色观察5例正常宫颈组织、7例高级别宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CINⅡ-Ⅲ)组织和67例子宫颈癌组织中PD-L1的表达和淋巴细胞PD-1的表达,免疫荧光染色观察相应组织内浸润的CD4+T和CD8+T细胞数量,TUNEL法检测淋巴细胞凋亡.结果 正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈瘤变上皮不表达或弱阳性表达PD-L1,70%(47/67)的宫颈癌表达PD-L1.肿瘤内浸润的部分淋巴细胞表达PD-1.子宫颈瘤变上皮与子宫颈鳞状细胞癌PD-L1表达存在明显差异(P<0.01),浅表浸润的子宫颈鳞状细胞癌PD-L1 的表达略低于深部浸润的鳞状细胞癌,但无显著差异;PD-L1阳性病例肿瘤局部CD8+T细胞数量显著减少,且PD-L1 表达与CD8+T细胞数量明显负相关(r=-0.82,P<0.01),但与肿瘤局部CD4+T细胞数量无明显相关性(r=-0.05,P>0.05);部分PD-L1阳性的子宫颈癌局部浸润的淋巴细胞存在凋亡现象.结论 子宫颈癌细胞表达PD-L1,且PD-L1的表达与肿瘤局部浸润的CD8+T细胞数量减少有关,但与浸润的CD4+T细胞数量无关.癌细胞表达PD-L1可能促进了肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡.
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阻断内源性P75NTR对阿尔茨海默病小鼠海马神经干细胞增殖与学习记忆的影响
目的 研究阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)小鼠侧脑室注射p75NTR胞外段(extracellular domain of p75NTR, p75NTR-ECD) 阻断内源性p75NTR激活后对海马神经干细胞增殖和学习记忆影响.方法 选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠16只,注射组(n=8)连续7 d 侧脑室注射p75NTR-ECD(1 μg/d),对照组(n=8)向侧脑室注射等量生理盐水,Morris 水迷宫检测空间记忆,腹腔注射BrdU检测海马齿回神经干细胞增值变化.结果 与对照组比较,注射组小鼠海马齿回BrdU阳性细胞数显著增加[(286.39±26.17)vs(142.01±18.12) ,P<0.01],行为学检测显示逃逸潜伏期明显缩短[(30.39±4.31) s vs (39.58±6.19) s, P<0.05]、穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率显著增加[(3.72±0.45)vs(2.54±0.32);(39.58±6.19)% vs (30.42±4.31)% ;P<0.05].结论 阻断内源性p75NTR激活可促进AD小鼠海马神经发生并改善AD小鼠学习记忆.
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甲状旁腺激素相关肽在高糖诱导NRK-52E细胞转分化中的作用
目的 探讨甲状旁腺素相关肽在高糖诱导大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E转分化作用.方法 应用RT-PCR及Western blot检测无糖组(无糖培养基培养),正常葡萄糖组(含5 mmol/ L葡萄糖DMEM培养基培养)组及高浓度葡萄糖组(含16.7 mmol/L葡萄糖DMEM培养基培养)中甲状旁腺素相关肽(parathyroid hormone-related peptide,PTHrP)及其受体1在大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E表达.10 pmol/L PTHrP及16.7 mmol/L葡萄糖分别干预72 h,应用Western blot检测转化因子β、金属蛋白酶2、Ⅰ型胶原及α平滑肌肌动蛋白表达情况.ROS含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测.结果 与空白组和正常葡萄糖组相比,高浓度葡萄糖能显著上调PTHrP(P<0.05, P<0.01)和甲状旁腺激素受体1(Type 1 receptor parathyroid hormone-related protein,PTH1R) (P<0.01, P<0.05)蛋白及 PTHrP mRNA(P<0.01)表达,PTH1R mRNA在高浓度及正常葡萄糖浓度组的表达高于空白组(P<0.01).对比空白组,PTHrP能显著上调NRK-52E细胞转化因子β1(P<0.01)、Ⅰ型胶原(P<0.01)及α平滑肌肌动蛋白(P<0.01)表达,而在高浓度葡萄糖状态下,其表达上调更显著(P<0.05, P<0.01).金属蛋白酶2在PTHrP及高浓度葡萄糖共同干预下表达上调(P<0.01).PTHrP及高血糖均可以升高NRK-53E细胞ROS含量(P<0.01, P<0.01).结论 高浓度葡萄糖可能通过调控PTHrP/PTH1R的水平从而影响肾小管导管上皮转分化.
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高选择性阴茎背神经分支切除术治疗38例原发性早泄疗效评价
目的 观察和评价高选择性阴茎背神经分支切除对原发性早泄(primary premature ejaculation, PPE) 的有效性和安全性.方法 对本科2007年5月至2008年5月治疗的38例PPE患者实行高选择性阴茎背神经分支切除.手术前使用神经检测仪测定阴茎背神经的敏感点,随后进行高选择性阴茎背神经分支切除术.于术后第4周开始性生活,随访 6～24个月,评价射精潜伏期和性生活满意度.同时,观察切口不良反应的发生.结果 术后所有病例阴茎敏感性均降低,射精潜伏期延长显效12例,好转23例,无效4例,总有效率为89.47%.随访中未见切口感染、出血和阴茎勃起功能障碍.结论 高选择性阴茎背神经切断术可有效降低阴茎敏感性,明显延长射精潜伏期和提高性生活满意度,对于PPE安全、有效.
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大鼠孕期染邻苯二甲酸二丁酯对子代神经干细胞增殖分化的影响
目的 探讨大鼠孕期染环境雌激素邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)对子代神经干细胞增殖和分化的影响.方法 40只SD孕鼠随机分为3个不同DBP剂量[25、75、225 mg/(kg·d)]的实验组和对照组,各组孕鼠自E0起分别给予不同剂量DBP或玉米油溶剂灌胃直至生产.取新生大鼠进行神经干细胞培养,检测计数细胞克隆形成率、克隆球直径大小;分离的神经干细胞进行分化培养,以Neu-N和GFAP免疫荧光检测DBP干预后的神经干细胞分化为神经元与星形胶质细胞的比例差别与形态变化.结果 大鼠孕期染DBP致子代神经干细胞增殖能力降低.与对照组相比,中、高剂量染毒组新生鼠神经干细胞克隆率明显低于对照组[实验对照组克隆率为(40.53±4.65)%;药物处理组克隆率分别为(30.96±3.80)%、(15.35±5.29)%、(6.58±1.43)%,P<0.01].高剂量处理组克隆球的直径也明显小于对照组.DBP高剂量组神经干细胞分化为星形胶质细胞比例显著增加[高剂量组为(36.8±3.5)%,而对照组为(30.8±2.4)%,P<0.01 ].分化后的神经元和神经胶质细胞形态随着染毒浓度增大,形态变化明显.星形胶质细胞的细胞突起逐渐变短,变粗,以高剂量染毒后为明显.结论 大鼠孕期染DBP会影响子代神经干细胞的增殖与分化,从而影响神经系统的发育.
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轴向应力作用下的舟骨有限元分析
目的 快速、准确建立舟骨有限元模型,分析其轴向应力下的力学分布.方法 采用美国GE LightSpeed VCT(64排螺旋CT)对健康志愿者1例(男性,24岁,无腕部疾病史)扫描获取CT扫描图像,将12具尸体标本与Instron Model 1011型力学试验机相连接,扫描压敏图像,得到腕关节的受力面积和应力分布,通过CT扫描图像数据对腕部进行三维有限元建模,计算并分析舟骨受轴向压力作用下正常腕部载荷传递及接触应力的分布.将此实验数据及以往文献数据与有限元模型的数据进行对比以验证有限元模型的精确性.结果 本模型构架了包括桡骨以及近端掌骨的腕部整体三维有限元模型,共有节点73 588个,单元39 7344个;桡舟关节面受力面积约为153.35 mm2,应力大小约为54.28 MPa,大应力约为2.72 MPa,桡舟关节面受力面积约为90.00 mm2,受力大小约为45.72 MPa,大应力约为3.45 MPa,舟骨载荷传递及关节接触应力分布情况与实验数据相接近.结论 所建模型结构完整,空间结构准确,轴向压力作用下加载模拟形象、逼真,客观反映舟骨三维解剖形态结构和生物力学特点,本模型可以较好地模拟舟骨以及腕关节载荷传递与接触应力的分布情况.
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PTEN对原代培养大鼠海马神经元牵张损伤后GluR2受体亚单位定位表达的调节作用
目的 探讨第10染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)对大鼠原代海马神经元牵张损伤后AMPA受体GluR2亚单位定位表达的调节作用.方法 选用新生SD大鼠培养原代海马神经元,建立神经元牵张损伤模型,利用RNAi 慢病毒载体敲减神经元中PTEN基因的表达.采用Tunel染色评估神经元牵张各时相点的损伤情况.采用Western blot检测牵张各时相点AMPA受体GluR2亚单位在细胞中的表达定位变化.结果 慢病毒介导的RNAi能有效下调PTEN 基因的表达.PTEN基因表达下调后,0、2、6 h细胞凋亡比例无明显差异,但24 h细胞凋亡比例由(68.7%±5.1%)下降至(39.3%±3.5%),48 h细胞凋亡比例由(76.7%±5.3%)下降至(52.0%±4.3%).神经元细胞膜中的AMPA受体GluR2亚单位含量在牵张损伤6、24、48 h明显降低.下调PTEN 基因的表达后,神经元细胞膜中的AMPA受体GluR2亚单位含量在牵张损伤6 h无明显降低,牵张损伤24、48 h后降低.细胞损伤6、24、48 h时,下调PTEN 基因的表达能够明显上调神经元细胞膜中的AMPA受体GluR2亚单位含量.结论 海马神经元受到机械性牵张损伤后,下调PTEN的表达能够有效地阻止AMPA受体GluR2亚单位在细胞膜上定位的降低,降低凋亡细胞比例.PTEN对AMAP受体的调节作用可能为预防和治疗脑创伤提供一条新途径.
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葡萄糖转运蛋白-2逆转录病毒表达载体构建/包装及其鉴定
目的 构建葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter-2,GLUT-2)基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为新型"人工胰岛β细胞"的构建奠定基础.方法 质粒pCB7/GLUT2经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建成重组逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序鉴定;转pL-GLUT2-SN至包装细胞系PA317,G418抗性筛选,检测上清病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆行PCR及RT-PCR鉴定.结果 建立GLUT-2基因逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;所建稳定产毒细胞克隆PA317/GLUT2,其高病毒滴度达7.1×105 CFU/ml,PCR及RT-PCR证实GLUT-2基因整合入其中并稳定表达.结论 成功构建GLUT-2基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为"人工胰岛β细胞"的构建奠定了基础.
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BRL-37344对豚鼠心肌细胞ICa-L、Ito的影响
目的 为研究β3肾上腺素能受体介导的心脏生物学效应--β3肾上腺素能受体激活后心肌细胞电生理活动的变化.方法 以原代培养的豚鼠心肌细胞为对象, 采用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞孵育β3肾上腺素能受体激动剂4-[-[2-hydroxy-(3-chlorophenyl)ethyl-amino]propyl]phenoxyacetate(BRL-37344; BRL)5~10 min前后ICa-L,Ito(L型钙离子通道和瞬时外向钾通道)的变化.结果 显示10-6 mol/L的BRL显著增强豚鼠心肌细胞的Ito,上移I-V曲线;去极化刺激到+80 mV时,电流密度从(6.11±1.03) pA/pF上升到(8.46±2.07) pA/pF(n=6,P=0.013064).10-6 mol/L的BRL显著增强豚鼠心肌细胞的ICa-L,为对照组的(2.30±0.75)倍(n=5,P=0.0063);去极化刺激到+10 mV时,电流幅度从(89.25±17.83) pA上升到(205.00±72.24) pA.结论 BRL-37344可增强豚鼠心肌瞬时外向钾电流和L型钙电流,进而调控心脏的活动.
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黄芪、当归对血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响
目的 观察中药黄芪、当归对血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)表达及活性的影响,探讨黄芪、当归抗血栓作用的分子机制.方法 使用成品的黄芪和当归注射液,各设两个浓度(6 mg/ml和 3 mg/ml),分别加入细胞培养板,实验组各孔均加入0.5 ng/ml TGF-β1作为诱导剂以增加PAI-1Ag表达.同时设立TGF-β1组(细胞液中只加入0.5 ng/ml TGF-β1)以及空白对照组(细胞液中不加入任何成分),各组在37 ℃,5%CO2孵箱中培养24 h.应用RT-PCR方法检测黄芪、当归对血管内皮细胞PAI-1 mRNA表达的影响,ELISA法检测黄芪、当归对PAI-1表达的影响,发色底物显色法检测黄芪、当归对PAI-1活性的影响.结果 黄芪、当归可不同程度地降低血管内皮细胞PAI-1 mRNA表达、抗原水平与活性,以黄芪、当归联合应用作用更为明显.黄芪、当归单独及联合应用对PAI-1 mRNA表达的抑制率分别为17%、24.6%和36.6%.结论 黄芪、当归可能通过抑制血管内皮细胞PAI-1表达和活性而发挥其抗血栓形成的作用.
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S-腺苷蛋氨酸对内毒素性肝损害的保护作用
目的 探讨S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)对内毒素(lipolmlysaccharide, LPS)性肝损害的保护机制.方法 100只BABL/c小鼠随机数字法均分为2组,LPS组:腹腔注射10 mg/kg的LPS;SAM组:在注射10 mg/kg LPS前2 h于小鼠腹腔内注射100 mg/kg SAM.记录两组小鼠存活率;光镜和电镜观察组织病理学改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的浓度;免疫组织化学法(SABC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中Toll样受体4(TLR4)和肝X受体α(LXRα)的蛋白表达水平.结果 两组24、48、72、120 h存活率比较,SAM组显著高于LPS组[(80.0%、70.0%、60.0%、50.0%) vs (50.0%、40.0%、30.0%、30.0%),P<0.05],肝脏病理损害程度减轻;SAM组血清中TNF-α水平显著低于LPS组,差异有统计学意义[(1791.79±122.19)pg/ml对(718.83±53.27)pg/ml,P<0.05];SAM组血清中IL-10增加且高峰前移,与LPS组比较差异有统计学意义[(418.69±38.77)pg/ml对(347.09±31.37)pg/ml,P<0.05];SAM组肝组织中LXRα表达明显增加,而TLR4表达则明显减少,两者与LPS组比较差异均有统计学意义{Western blot灰度值[TLR4:(1.550±0.034)对(1.365±0.017),LXRα:(1.605±0.027)对(1.375±0.014)],P<0.05}.结论 SAM能明显减轻LPS所致的肝损害,其机制可能与其降低肝脏各种细胞TLR4的表达,增强LXRα的表达,终导致TNF-α水平降低和IL-10水平增高有关.
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p300特异性siRNA载体的构建及其对心肌细胞GATA4表达的影响
目的 构建并筛选小鼠p300特异性siRNA载体,并观察p300表达降低对心脏特异性转录因子的调控作用,为进一步研究p300介导的组蛋白乙酰化失衡对心脏发育的影响奠定基础.方法 针对小鼠p300基因的保守序列区域设计并构建3个重组质粒p300 RNAi1,p300 RNAi2和p300 RNAi3.利用阳离子脂质体将其分别转染入体外培养的乳鼠心肌细胞,分别利用RT-PCR和免疫荧光从mRNA和蛋白水平检测p300表达,判断抑制效率,并检测心脏特异性转录因子GATA4的表达水平.结果 pSOS-HUS组和p300 RNAi2组中p300 mRNA水平表达较正常对照组无明显降低,而p300 RNAi1组和p300 RNAi3组中p300 mRNA表达量较正常组有明显降低(分别为0.220 8±0.020 0,0.170 8±0.040 0,vs 0.509 5±0.030 0),且差别有统计学意义(P<0.05),抑制率分别为56.7%和66.5%.转染p300RNAi1组和转染p300RNAi3组的GATA4 mRNA表达水平(分别为0.423 1±0.110 0,0.262 7±0.080 0)明显低于正常组(0.856 4±0.070 0)和阴性对照组(0.841 5±0.040 0),差别有统计学意义(P<0.05).结论 p300特异性siRNA 质粒载体构建成功,p300 RNAi1和p300 RNAi3具有确切阻断p300蛋白表达的作用,并下调GATA4的表达.
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低渗状态下星形胶质细胞AQP8的表达变化
目的 探讨低渗透压作用下,星形胶质细胞水通道蛋白8(aquaporin8,AQP8)的表达变化规律.方法 原代培养大鼠星形胶质细胞,随机分为对照组(常规培养液)和低渗组(268、254、240 mmol/L),每组分别作用1、3、6、12、24 h,共5个时间点.通过MTT比色法检测细胞活力,免疫细胞化学、免疫荧光、Real time-PCR研究AQP8及其mRNA的表达变化.结果 对照组星形胶质细胞的细胞形态、细胞活性、AQP8及其mRNA的表达在各时间点均无明显变化(P>0.05).低渗组中,星形胶质细胞水肿,细胞活性下降;AQP8及其mRNA的表达水平随低渗程度的下调和低渗作用时间的延长而增强.低渗液(268、254、240 mmol/L)作用后,免疫细胞化学显示星形胶质细胞的AQP8表达从低渗作用1 h的(0.258 3±0.009 8, 0.280 0±0.010 9, 0.281 7±0.007 5) 到低渗作用24 h的(0.385 0±0.010 9, 0.406 7±0.007 0, 0.425 0±0.010 4) (P<0.05);Real time PCR显示:AQP8与beta-actin 的mRNA水平比从低渗作用1 h的(0.127 5±0.011 8,0.134 4±0.032 4, 0.167 5±0.007 8)上升到(3.278 0±0.121 2,5.410 4±0.104 1,8.351 0±0.288 0).结论 低渗作用下,AQP8介导的水分子运输可导致星形胶质细胞肿胀,继而引发细胞结构、功能的损伤; AQP8的表达上调可能是导致星形胶质细胞水肿形成和发展的重要分子机制之一.
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RNA干扰survivin基因增强SKBr-3细胞对多柔吡星敏感性的体外研究
目的 探讨抑制survivin基因的表达对人乳腺癌SKBr-3细胞化疗敏感性的影响.方法 构建针对survivin基因序列特异性shRNA的表达载体,脂质体转染SKBr-3,G418筛选阳性克隆.实验分为RNA干扰组(S1&P),脂质体对照组(H1&P)和空白对照组.光镜观察转染后细胞的形态变化;0.5 μg/ml 多柔吡星作用于转染后的细胞,电镜观察细胞形态学变化;TUNEL染色、Annexin V荧光标记检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖的抑制率.结果 成功构建具有新霉素抗性的靶向survivin的序列特异性shRNA表达载体,基因测序完全正确;转染后干扰组细胞均发生细胞凋亡的形态学改变;低剂量多柔吡星诱导后,TUNEL染色结果,S1&P组凋亡细胞比例(23.6±4.8)%明显高于H1&P组(4.1±1.1) %和空白对照组(3.2±1.4) %(P<0.05),表明转染了RNA干涉载体的SKBr-3细胞对低剂量多柔吡星的敏感性显著增加;Annexin-V染色结果:空白对照组凋亡比例为(17.43±3.12)%,H1&P组为(20.51±4.67)%,S1&P组为(68.76±8.49)%,后者与前两者比较均有统计学差异(P<0.05).干扰组细胞凋亡率、细胞增殖的抑制率均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 体外实验证实抑制survivin基因的表达可提高乳腺癌SKBr-3细胞对多柔吡星的敏感性.
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苯并(a)芘对子宫内膜细胞中雌激素代谢相关基因的影响
目的 探讨苯并(a)芘对人子宫内膜雌激素代谢相关基因作用的分子机制.方法 采用人子宫内膜癌细胞株进行体外实验,研究苯并(a)芘对细胞色素P450酶的作用,以0.016、0.8、0.4、2.0、10 μmol/L BP作用RL95-2细胞12 h,2 μmol/L BP作用RL95-2细胞6、12、24、36、48 h,细胞经收集、裂解后,用Western blot分析方法检测总细胞提取液中CYP1A1、CYP1B1和CYP3A4蛋白表达, 并用表达了CYP450酶的supersomes作为阳性对照来检测方法的可靠性.结果 不同剂量BP作用于RL95-2细胞12 h后,CYP1A1蛋白表达明显增加, 2 μmol/L BP作用于RL95-2细胞不同时间后,CYP1A1随作用时间延长而逐渐增加,作用48 h后到大值,呈现良好量效和时效关系(P<0.05).其他细胞相关蛋白CYP1B1和CYP3A4没有改变.结论 苯并(a)芘可诱导CYP1A1表达增加,可能引起雌激素代谢发生改变,并进而抑制子宫内膜癌细胞的分裂增生.
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CEREC全瓷嵌体修复楔状缺损后牙体抗折强度的实验研究
目的 研究应用CEREC全瓷嵌体对楔状缺损牙的修复效果并测试修复后抗折裂性能.方法 将因正畸治疗拔除的离体牙分成对照组与实验组(n=16),分别制备成模拟楔状缺损牙.其中实验组用CEREC CAD/CAM全瓷嵌体修复;对照组用光固化树脂充填.然后在万能试验机上测试每组牙的抗折裂性能,并记录大载荷.比较各实验组与对照组的抗折强度的差别.结果 用CEREC全瓷嵌体修复的离体模拟楔状缺损牙(3.56±0.27)抗折强度明显高于对照组(2.43±0.15)(P＜0.01).结论 CEREC全瓷嵌体可以有效修复楔状缺损牙,防止其受力折断.
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高渗盐水点眼制作的小鼠干眼模型与评估
目的 通过高渗盐水点眼提高泪液渗透压制作小鼠干眼模型并对该模型进行评估.方法 60只雌性6～8周龄BALB/c小鼠,采用随机数字表法分为空白组、对照组和实验组,每组20只.对照组采用308 mOsmol/L氯化钠溶液点眼,每天5次,实验组采用500 mOsmol/L氯化钠溶液点眼,每天5次,空白组不点眼.分别在第0,7,14,28,42天行SchirmerⅠ实验、角膜荧光素钠染色和评分、眼表虎红染色观察、泪液蕨类实验、角膜上皮HE染色观察、角膜上皮厚度测量、结膜上皮PAS染色观察和杯状细胞计数.第42天行角膜上皮扫描电子显微镜观察.结果 第0天各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).第7天起,与空白组[(3.0±0.5)mm]和对照组[(3.1±0.5)mm]相比,实验组[(2.3±0.4)mm]BALB/c小鼠出现泪液生成明显减少(P<0.05),角膜荧光素钠染色和虎红染色出现点、片状着色,角膜荧光素钠染色评分升高[3组分别为(0.9±1.2)、(0.5±0.7)、(1.4±1.6),P<0.01],泪液蕨类图形减少.第14天起,与空白组和对照组相比,实验组BALB/c小鼠结膜杯状细胞计数减少[3组分别为(10.6±2.0)、(11.8±1.3)、(5.4±1.8),P<0.01].角膜上皮基底部细胞排列紊乱缺失,角膜上皮分层减少,出现空泡,角膜上皮层厚度减少[3组分别为(21.69±3.41)、(21.23±2.64)、(15.82±1.38)μm,P<0.05],角膜上皮细胞微绒毛丢失.结论 高渗盐水可以在小鼠眼表引起类似干眼的病理损害,泪液高渗透压在干眼的发病中起重要作用.
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大鼠乳腺癌CT灌注成像与肿瘤病理分级和微血管密度相关性研究
目的 研究诱发性大鼠乳腺癌CT灌注成像(CT perfusion imaging,CTPI)与肿瘤病理分级、微血管密度(microvascular vessel density,MVD)的相关性,探讨CTPI对乳腺癌的诊断价值.方法 Wistar雌性大鼠35只,7,12-二甲基苯蒽(7, 12-dimethyl-1, 2-benzanthracene,DMBA)灌胃诱发乳腺肿瘤.乳腺CT平扫和CTPI检查,经工作站后处理得到CTPI参数血流量(blood flow,BF)、血容量(blood volume,BV)、平均通过时间(mean transit time,MTT)、毛细血管通透性(permeability surface,PS),并计算时间密度曲线(time density curve,TDC).处死大鼠后取乳腺肿瘤组织进行HE染色和Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色,观察乳腺肿瘤病理类型和MVD.结果 30只大鼠成功诱发乳腺肿瘤,其中乳腺增生性疾病8只,乳腺癌22只.乳腺癌组与乳腺增生性疾病组的BF、BV分别为(151.72±93.43)vs(42.96±32.42) ml/(min·100 g);(9.55±7.88)vs(2.17±1.36) ml/100 g,乳腺癌显著高于乳腺增生性疾病(P<0.05).乳腺癌中分化组和低分化组的BF、BV分别为(115.30±15.46)vs(256.52±132.19)ml/(min·100 g);(9.76±9.00)vs(10.34±4.56) ml/100 g,BF、BV在不同分化程度肿瘤之间有显著差异(P<0.05).乳腺癌MTT为(2.43±1.64) s,显著低于乳腺增生性疾病(P<0.05),但在不同分化程度肿瘤之间无显著差异(P>0.05).BF、BV、PS与MVD的相关性随组织分化程度的降低呈升高趋势,其相关系数分别为0.701、0.441和0.521,两者之间均呈显著正相关(P<0.05).结论 大鼠诱发性乳腺癌是CT灌注成像研究适合的模型,CT灌注成像有助于判断乳腺病变的良恶性、反映肿瘤组织分化程度,并与肿瘤微血管密度密切相关.
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PADI4基因多态性与类风湿关节炎的相关性研究
目的 探讨重庆地区汉族人群肽酰精氨酸脱亚胺基酶4(peptidylarginine deiminase 4, PADI4)单核苷酸多态性(SNP)与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)之间的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测302例RA患者和322名健康对照者的PADI4 rs874881 SNP多态性,同时检测类风湿因子(Rheumatoid factor,RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(cyclic citrullinated peptide, CCP)和抗角蛋白抗体(anti-keratin antibody, AKA)3种RA的特异性自身抗体.结果 健康对照组PADI4 rs874881 C/C、C/G和G/G基因型频率分别为0.332、0.488和 0.180;RA组分别为0.295、0.474和0.232,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).RA组RF、抗CCP抗体和抗AKA抗体检测阳性率、滴度水平与PADI4 rs874881基因分型均无相关性(P>0.05).结论 重庆汉族人群PADI4 rs874881多态性与RA的易感性无关,与RF、CCP及AKA等抗体的阳性率无相关性.
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腹腔镜骶尾部畸胎瘤切除术的临床应用
目的 探讨骶尾部畸胎瘤腹腔镜下手术的可行性、手术技巧和临床疗效.方法 2002年7月至2009年9月对西南医院收治住院的骶尾部畸胎瘤患者26例行腹腔镜下手术,肿瘤小4 cm×4 cm×3 cm,大13 cm×12 cm×10 cm,肿瘤下缘距肛门1～6 cm.结果 所有病例均在腹腔镜下完成手术,平均手术时间98 min(45～160 min),术中平均出血180 ml(140～330 ml),术中有2例发生直肠损伤,无其他并发症发生.术后平均肛门排气时间1.2 d(1～2 d),术后平均住院时间3.9 d(3～6 d),有1例术后出现肠瘘.术后有21例接受随访,随访时间为2～48个月,未发现复发病例.结论 对骶尾部畸胎瘤施行腹腔镜下切除术安全、可靠,切除彻底,并发症少,术后恢复快,是骶尾部畸胎瘤有效手术方法之一.
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PTEN、Akt与CREB基因在偏头痛大鼠三叉神经节的表达
目的 检测第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase, Akt)与cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein, CREB)基因在偏头痛模型大鼠三叉神经节的表达情况,探讨其在偏头痛发病机制中的相互关系及作用.方法 通过硝酸甘油(glyceryl trinitrate,GTN)法建立大鼠偏头痛模型,分别在GTN注射后1、4、12和24 h,取三叉神经节通过RT-PCR和免疫组化法对PTEN、Akt和CREB基因在mRNA和蛋白水平进行检测.结果 PTEN的基因与蛋白表达开始呈下降趋势,至GTN 12 h时分别为(0.42±0.07)(0.19±0.02),较对照组(1.00±0.07)(0.36±0.02)有显著降低(P<0.05),但到24 h时基因与蛋白表达量分别为(3.09±0.21)(0.45±0.05),又明显回升(P<0.05);Akt与PTEN呈相反变化趋势,基因与蛋白表达在GTN 4 h(1.38±0.07)(0.23±0.03)和12 h(1.42±0.03)(0.25±0.02)时显著增加(P<0.05),24 h(0.88±0.15)(0.15±0.06)表达又降至正常水平(P＞0.05);而GTN各组的CREB的基因与蛋白表达均较对照组(1.00±0.07)(0.43±0.03)有显著降低(P<0.05),24 h(0.42±0.14)(0.27±0.05)表达量降到低(P<0.05).PTEN与Akt、CREB的基因表达呈显著负相关,r分别为-0.671,-0.484(P<0.05),蛋白表达也呈显著负相关,r分别为-0.563,-0.430(P<0.05),而Akt与CREB的基因及蛋白表达相关性不显著,r分别为0.272,-0.041(P＞0.05).结论 偏头痛大鼠三叉神经节中PTEN、Akt及CREB在GTN不同时间点表达发生改变,且PTEN调控了Akt与CREB的表达,可能通过影响神经突触可塑性,参与偏头痛的发生发展过程.
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老年患者术后认知功能评价与疼痛视觉模拟评分的相关性研究
目的 研究术后疼痛分级与老年患者术后早期认知功能变化的相关性.方法 选择2009年1-6月本科接受腹腔择期开放性手术的住院老年患者30例,术后24、48 h采用疼痛视觉模拟评分法(visual analogue scale, VAS)评估疼痛程度,并同时采用MMSE量表、AFT量表、CDT量表对术后认知功能进行评分.从神经心理学的角度对老年患者术后的认知功能进行评价,并结合疼痛视觉模拟评分对术后疼痛进行量化评分,变量分析采用线性相关分析,观察术后疼痛分级与老年患者术后早期认知功能变化的相关性.结果 MMSE量表术后24、48 h与VAS评分无线性相关(r=-0.053,P=0.786;r=-0.052,P=0.783);AFT量表术后24、48 h与VAS评分无线性相关(r=-0.323,P=0.082;r=-0.038,P=0.841);CDT量表术后24 h、48 h与VAS评分有负线性相关(r=-0.731,P=0.000;r=-0.636,P=0.001).结论 术后认知功能在视空间结构功能及执行功能方面与VAS评分有相关性.
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420nm强脉冲光对痤疮动物模型TNF-α和MMP-2表达的影响及疗效观察
目的 研究420 nm强脉冲光对痤疮动物模型的疗效观察及其作用的可能机制.方法 皮内注射痤疮丙酸杆菌构建大鼠耳廓炎症痤疮模型,用420 nm强脉冲光照射痤疮动物模型,观察照射前后炎症皮损的改变,进行皮肤病理学检查,免疫组化法和Real-time PCR法测定TNF-α及MMP-2等因子的表达水平.结果 模型组注射部位于第5天形成痤疮样皮损;照射组与模型组相比,炎症反应明显减轻;病理示毛囊角化层明显变薄,真皮层炎性细胞减少,皮脂腺缩小;免疫组化示TNF-α和MMP-2呈阳性表达,且照射使其阳性表达降低;Real-time PCR示TNF-α和MMP-2在模型组中呈高表达,照射后表达下调(P＜0.05).结论 420 nm强脉冲光对痤疮有良好的治疗效果,其有效性可能与细胞因子TNF-α及MMP-2等的表达有关.
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后路经一侧椎弓根脊椎部分切除减压与重建治疗严重胸腰椎三柱骨折
目的 探讨后路经一侧椎弓根脊椎部分切除减压与重建手术治疗严重胸腰椎三柱骨折的可行性及疗效.方法 2006年3月至2009年3月采用后路经一侧椎弓根脊椎部分切除减压与重建术治疗严重胸腰椎三柱骨折患者19例.术前进行载荷分享评分及神经功能分级,术后测量伤椎Cobb角并了解丢失情况,评估椎管减压范围、植骨块位置及愈合情况,评定神经功能恢复情况.结果 19例患者均一期完成手术,手术时间2.8～4.1 h,平均3.4 h,术中出血400～2 100 ml,平均880 ml.术中无其他相关并发症发生.术后X线检查示Cobb角矫正12°～25°,平均19.8°.随访12个月以上,8例Frankel A级患者中,4例无神经功能恢复,4例恢复至B级;7例B级患者中,3例恢复至C级,3例恢复至D级,1例失访;4例C级患者中,3例恢复至D级,1例恢复至E级.随访中影像资料示植骨界面骨性融合,未发生内固定器或植骨块松脱、移位及断裂.结论 经后路经一侧椎弓根脊椎部分切除减压与重建手术可以同时完成椎管彻底减压、前中柱重建,恢复脊柱三柱稳定,是治疗严重胸腰椎三柱骨折的可行方法之一.
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外源性CCN1促进辐射损伤L929细胞的生长和迁移
目的 观察外源性CCN1是否促进辐射损伤L929细胞生长和迁移,以探讨CCN1在放创复合伤修复中的作用.方法 以4 Gy γ射线辐射L929细胞作为辐射损伤细胞模型,细胞辐射后分别加入2 ml CCN1或RFP条件培养液,37℃,5%CO2培养,作为CCN1组和RFP组;空白条件培养液培养辐射损伤L929细胞作为空白组.各组进行MTT试验、平板克隆形成试验、细胞周期分析和划痕愈合试验.结果 与RFP组和空白组相比,CCN1条件培养液处理后,与空白组辐射损伤L929细胞增殖明显增强(P<0.05),与RFP组和空白组相比,克隆形成率明显增高[CCN1组(34.4±3.6)%, RFP组(24.5±2.9)%,空白组(29.5±3.5)%](P<0.05),培养5 d时CCN1组S期细胞[(37.3±2.3)%]比RFP组[(25.2±1.9)%]和空白组[(26.9±1.3)%]增多(P<0.01),细胞迁移能力明显增强划痕愈合试验在1~5 d的愈合宽度/原宽度值与RFP组和空白组相比差异显著(P<0.01).结论 外源性CCN1可促进辐射损伤的成纤维细胞生长和迁移,提示CCN1是放创复合伤修复的促进因素之一.
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微量泵持续泵入氨溴索湿化气道的临床疗效观察
间断、定时滴入氨溴索气道湿化可在一定程度上缓解气管切开患者人工气道干燥, 但不能满足人工气道持续湿化的需求,另外由于每次气管内注入湿化液后, 较多液体迅速流入下呼吸道, 易引起刺激性咳嗽将湿化液咳出而影响湿化效果[1,2].我们采用微量注射泵持续气道湿化能避免以上情况,与氨溴索间断湿化气道的方法进行比较,临床疗效满意,现报告如下.
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经颈静脉途径介入溶栓治疗TIPS术后支架狭窄1例
1 临床资料患者,男性,39岁.因"发现乙肝标志物阳性7年余,反复呕血、黑便6年余,再发黑便8 d."于2009年12月18日入院,诊断肝炎肝硬化失代偿期明确.2003年曾行"门静脉断流术+脾切除术".急诊胃镜提示:食道胃底静脉重度曲张,红色征阳性,胃底也见多处团状蓝色曲张静脉,不宜行静脉套扎术,建议患者行经颈静脉肝内门体静脉分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt, TIPS).腹部CT血管成像提示:门静脉主干明显狭窄,见偏心性充盈缺损,肠系膜上静脉近段也可见充盈缺损,分支静脉扩张,食管静脉丛、胃冠状静脉曲张.肝静脉及下腔静脉充盈良好.
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胃间质瘤致低血糖1例
1 临床资料患者,女性,59岁,因"反复发作性心悸、冷汗,偶伴意识模糊2个月"于2010年2月15日入院.患者2个月前,常于凌晨出现心悸、冷汗、乏力等症状,偶伴意识模糊、头晕、头痛、上腹胀痛等不适.经进食或休息数小时后,症状可缓解.门诊测血糖示:1.5 mmol/L,遂以"低血糖症(胰岛细胞瘤)"收入我院.患者患病以来体质量下降4 kg.体检:患者神志清,精神差,体型消瘦,全身浅表淋巴结未触及肿大.
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纤维结肠镜检查术前肠道清洁方法的比较
纤维结肠镜检查前的肠道准备传统方法采用大肠水疗法,或口服导泻药物[1].目前国内多家医院采用自行配制的口服清肠液[2].年龄大、胃不适的患者30 min内很难将3 000 ml口服导泻药喝到胃中,有些患者由于短时间内喝进大量液体引起呕吐造成准备工作失败,达不到清洁肠道的目的,部分患者还影响到结肠镜检查,使患者产生畏惧心理.我科于2007年开始使用大肠水疗机结合口服硫酸镁,用于清洁肠道准备,效果满意,现报告如下.
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盐酸纳美芬对60例腹腔镜胆囊切除术患者全麻超前镇痛效果的观察
在伤害性刺激前应用镇痛药,通过阻止伤害性刺激的传入,抑制中枢的敏化效应,使术后疼痛减轻,产生超前镇痛效应[1,2].目前超前镇痛常采用阿片类镇痛药、非甾体类药、曲马多等,但是这些药物存在呼吸抑制、恶心呕吐、嗜睡、影响凝血和血小板功能等副作用. 我们2009年10-12月选择60例在我院肝胆外科住院的择期腹腔镜胆囊切除术实施全麻患者,采用盐酸纳美芬对全麻超前镇痛效果进行观察,现报告如下.
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模拟羊水定位穿刺引产羊水过少48例分析
羊膜腔内穿刺注入乳酸依沙吖啶终止中期妊娠,现今仍作为妇产科终止中期妊娠的首选方法[1,2].传统的穿刺方法为盲穿,但对合并羊水过少者,穿刺成功率很低.为解决这一问题,近年来很多大型医院都采用特制的超声穿刺探头引导定位穿刺,更多的医院则采用普通超声探头辅助定位.但前者价格昂贵,使其难以在与我院情况相似的基层医院普及,后者则存在引起感染的可能.我院妇产科对此类患者采取模拟羊水定位穿刺,即向羊膜腔内注入一定量的生理盐水,作为羊水替代液[3,4],并回抽生理盐水和宫腔内羊水的混合液,从而判定穿刺是否成功的方法,使穿刺成功率较传统方法大大提高,同时,产程较对照组缩短.现报告如下.
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硬化治疗12例眼眶静脉性血管瘤体会
眼眶静脉性血管瘤是一种先天性静脉异常,以往常将手术作为首选治疗方式,但因为本病的组织构成和眼眶解剖特点,手术风险和难度大,不易根治,甚至可能损伤眼眶内重要结构.我们使用直视下无水酒精瘤体内注射的方法进行治疗取得了良好的疗效,现总结如下.
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胃乐散治疗急性化脓性梗阻性胆管炎的实验研究
目的 观察胃乐散对大鼠急性化脓性梗阻性胆管炎模型的治疗作用.方法 不完全结扎胆总管及注射大肠杆菌制备Wistar大鼠急性化脓性梗阻性胆管炎模型,胃乐散灌胃给药治疗72 h后,取血和胆总管组织标本,进行血象、血胆红素和组织病理学检查.结果 与假手术组相比,模型组大鼠外周血白细胞数显著升高;与模型组相比,胃乐散低剂量组(0.2 g/kg)和高剂量组(0.4 g/kg)血中白细胞数明显降低,低剂量胃乐散还可降低血中胆红素水平.病理组织学检查显示,模型组大鼠胆总管明显扩张;胆总管上皮细胞排列紊乱,黏膜完整性受到严重破坏,腺腔破坏明显,组织间和腺上皮水肿的明显;而胃乐散治疗后胆总管的上述组织病理学变化得到明显改善.结论 胃乐散对急性化脓性梗阻性胆管炎有明显治疗作用.
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人心脏发育相关基因ZNF382的原核表达及多克隆抗体的制备
目的 表达、纯化ZNF382融合蛋白及制备兔多克隆抗体.方法 通过PCR扩增ZNF382编码区,将其克隆到pRSET C载体中,重组载体酶切鉴定,测序,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG进行诱导表达,原核表达产物经鉴定、纯化后,免疫新西兰大白兔.通过ELISA和Western blot检测抗血清的效价和特异性.结果 成功构建了pRSET C-ZNF382原核表达重组质粒,His6-ZNF382融合蛋白被强烈诱导表达,以包涵体的形式存在,其相对分子质量约为 64×103,纯化后免疫产生的多克隆抗体效价约为1∶10 000,与ZNF382原核表达蛋白特异性结合.结论 获得了大量高效价、高特异性的兔抗人ZNF382多克隆抗体.
