RNAi 抑制 XIAP 基因诱导 MG63 细胞凋亡、化疗增敏及其分子机制

目的 观察RNAi技术抑制X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibit apoptosis protein,XIAP)基因对MG63细胞凋亡及化疗药物敏感性的影响,并探讨其分子机制. 方法 构建XIAP基因的shRNA稳定表达载体, 将MG63细胞分为空白组(A组,不作转染),阴性对照空白质粒转染组(B组,psiRNA-Con转染组),实验组(C组,psiRNA-XIAP转染组),在此基础上又设A+阿霉素(doxorubicin,Dox,0.3 μmol)、C+Dox两化疗药物干预组;Western blot检测XIAP蛋白的表达,MTT检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期、凋亡及Caspase-9蛋白的表达情况. 结果 与A、B组比较,C组细胞XIAP蛋白水平、细胞增殖活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率、Caspase-9蛋白表达及G2/M期细胞明显增多(P<0.05).A+Dox组较C+Dox组细胞增殖活性更低,且Dox对A、C组细胞的抑制呈时间依赖性;Caspase-9蛋白表达明显增高(P<0.05);细胞周期出现G2/M为0,细胞阻断于S期. 结论 RNAi能有效抑制XIAP基因表达,抑制骨肉瘤细胞增殖活性,诱导其凋亡,并增加其对化疗药物的敏感性,其机制可能涉及抑制DNA合成及Caspase家族凋亡信号转导通路的活化.

重庆市宫颈癌及宫颈上皮内瘤变患者中人乳头瘤病毒感染率及型别分布

目的 研究浸润性子宫颈癌(infiltrative cervical cancer,ICC)及子宫颈上皮内瘤变(intraepithelial neoplasia,CIN)中人乳头瘤病毒(human papilomavirus,HPV)感染率及型别分布. 方法 选取重庆市肿瘤医院组织病理学诊断为CINⅡ、CINⅢ级和宫颈鳞癌的组织标本58例作为研究对象,SPF10 LiPA25及HPV DNA酶免疫检测法(DNA enzyme immunoassay,DEIA)进行DNA的提取及扩增;采用线形探针反向杂交技术检测病变组织中HPV型别. 结果 58例标本中有56例检测出HPV感染,HPV感染率96.55%,其中CINⅡ、CIN Ⅲ级和子宫颈癌中HPV感染的阳性率分别为100.00%、100.00%、95.00%.共检测出13种HPV型别,HPV16感染率高(60.00%),其次为HPV18(7.69%)、HPV58(7.69%)和HPV31(4.62%).宫颈鳞癌、CINⅢ、CINⅡ级HPV多重感染率分别为6.06%、26.31%、33.33%.41～50岁高危型HPV感染率高(44.64%). 结论 HPV16为重庆市常见的HPV感染型别,HPV18、HPV58和HPV31也有较高感染率.

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、基质金属蛋白酶与血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症(endometriosis, EM)中的表达及意义. 方法 应用免疫组化SABC三步法检测57例EM患者子宫内膜组织(57例异位内膜,51例在位内膜)和同期48例非EM患者的正常子宫内膜(对照组)中EMMPRIN、MMP-2、MMP-9及VEGF的表达情况,并对各蛋白表达水平进行相关性分析. 结果 EMMPRIN、MMP-2、MMP-9及VEGF在EM异位内膜表达[分别为(0.723±0.114)、(0.729±0.109)、(0.692±0.089)、(0.704±0.103)]均高于EM在位内膜组[分别为(0.396±0.097)、(0.365±0.023)、(0.349±0.030)、(0.370±0.129)](P<0.05);Pearson相关分析显示,在EM异位内膜中各蛋白表达呈显著正相关(P<0.05).在EM异位内膜组中EMMPRIN、MMP-2、MMP-9及VEGF表达Ⅲ～Ⅳ期[分别为(0.780±0.058)、(0.779±0.064)、(0.736±0.050)、(0.749±0.059)]高于Ⅰ～Ⅱ期[分别为(0.563±0.070)、(0.588±0.079)、(0.570±0.051)、(0.580±0.100)](P<0.05).MMP-2在EM在位内膜组表达较对照组高(P<0.05). 结论 EMMPRIN、MMPs和VEGF在EM中高表达,EMMPRIN-MMPs-VEGF系统上调可能在EM异位内膜种植、侵袭中发挥重要作用.

胸腺肽 α1 体外刺激胃癌患者外周血单个核细胞对淋巴细胞亚群影响

目的 观察胸腺肽α1(thymosin α1,Tα1)体外刺激培养胃癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)对淋巴细胞亚群分化及分泌细胞因子谱的影响,分析Tα1对肿瘤患者免疫功能的影响. 方法 分离32例胃癌患者及18例健康自愿者PBMCs,50、10、1 μg/ml Tα1体外刺激培养2 d;流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞百分比、CD4+/CD8+变化及分泌Th1/Th2细胞因子谱变化. 结果 Tα1体外刺激PBMCs后,胃癌患者及健康自愿者的CD4+、CD8+ T细胞水平及CD4+/CD8+比值均无明显变化;健康自愿者CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞水平无明显变化,胃癌患者CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞水平明显提高(P<0.05);1 μg/ml Tα1促进胃癌患者PBMCs分泌IL-1β、TNF-α,10 μg/ml促进胃癌患者PBMCs分泌IL-6(P<0.05),健康自愿者PBMCs分泌细胞因子谱变化不明显(P>0.05). 结论 Tα1体外刺激胃癌患者PBMCs,提高CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞亚群水平,可能对肿瘤患者抗肿瘤免疫起抑制效应.

辛伐他汀对大鼠移植肝胆管损伤的防治作用

目的 探索辛伐他汀对大鼠移植肝胆管损伤的防治作用. 方法 建立重建肝动脉的大鼠肝移植模型,设置实验组、对照组和假手术组,应用高效液相色谱法、生化、组织病理、免疫组化及RT-PCR方法检测胆汁胆盐的成分的变化,观察肝脏组织的病理学变化. 结果 ①辛伐他汀能明显增加大鼠胆汁中磷脂分泌,实验组[(3.874 8±1.414 8)mg/dl]、假手术组[(1.982 1±0.413 5)mg/dl]与对照组[(1.428 5±0.538 7)mg/dl]比较差异有统计学意义(P＜0.05).②对照组胆管损伤严重,而实验组的病理学变化则较对照组轻微;胆管损伤严重程度评分(bile duct injury severity score, BDISS):对照组为(8±1)分,明显高于实验组[(4±2)分]和假手术组(0分)(P<0.05).③磷脂转运蛋白(Mdr2 P-糖蛋白)及Mdr2 mRNA的表达,实验组较对照组有明显增强(P＜0.05). 结论 辛伐他汀能增加大鼠移植术后胆汁中磷脂成分的分泌,对移植肝胆管及肝脏组织有一定保护作用.

实时三维经胸超声心动图在诊断二尖瓣脱垂中的应用价值

目的 评价实时三维经胸超声心动图在诊断二尖瓣脱垂中的临床应用价值. 方法 34例二尖瓣脱垂伴中度以上反流患者,术前行实时三维经胸超声心动图检查,判断并记录二尖瓣瓣膜病变类型和小叶分区定位,并与外科手术对照.实时三维超声心动图和外科手术中二尖瓣的解剖定位均采用Carpentier命名法,将前叶分为A1、A2和A3,后叶分为P1、P2和P3.所有患者在行实时三维经胸超声心动图1周内行外科手术,由外科医师记录二尖瓣脱垂、腱索断裂等病理类型及二尖瓣小叶具体的病变部位. 结果 实时三维经胸超声心动图能清晰地显示二尖瓣的前叶和后叶的形态和空间结构,并能分别从左房面和左室面观测二尖瓣及其腱索.与外科手术相对照,实时三维经胸超声心动图定性诊断二尖瓣脱垂的准确率为100%,诊断二尖瓣脱垂病理改变的准确率为94.1%(32/34),定位诊断二尖瓣前、后叶病变区域的准确率为91.2%(31/34). 结论 实时三维经胸超声心动图能清晰显示脱垂二尖瓣的病理形态,并对二尖瓣瓣叶进行准确分区和定位病变区域,在诊断二尖瓣脱垂中具有重要的临床价值.

多排 CT 对左心房和左心耳容积和功能的评价

目的 与3.0T CMR(cine magnetic resonance)比较,探讨多排CT(multi-detector CT,MDCT)评估左心房和左心耳容积和功能的能力. 方法 回顾性分析2008年3-12月进行冠状动脉CTA检查的48例患者,同一天完成多排CT和CMR检查,并获得多排CT容积数据及左心房垂直长轴FIESTA 电影图像.多排CT采用心功能分析软件、MR采用Report Card 2.0心功能分析软件对原始数据进行后处理,分析左心房和左心耳大容积、小容积、射血分数.通过线性相关和t检验分析评估多排CT和CMR 2种检查方法间的相关性和一致性,操作者间的变异性采用Bland-Altman分析. 结果 多排CT与CMR测得的左心房和左心耳的容积和功能指标具有较好的相关性(r＞0.75)和一致性.与CMR相比,多排CT有过高估计LAVmax、LAVmin、LAAVmax和LAAVmin的趋势,对左心房射血分数(left atrial ejection fraction,LAEF)和左房耳射血分数(left atrial appendage ejection fraction,LAAEF)有低估的趋势.多排CT操作者间测量值的变异性低于CMR操作者间的变异性. 结论 多排CT对于进行多排CT冠状动脉造影检查的患者,在提供冠状动脉信息的同时,对左心房和左心耳的容积和功能评估较准确、重复性较强.

EGFP-CD40L 融合基因的构建、表达及功能鉴定

目的 构建编码增强型绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,EGFP)和人CD40L胞外段(hecdCD40L)组成的融合基因真核表达载体,并探讨表达后的融合蛋白对人树突状细胞(dendritic cells, DCs)表型和功能的影响. 方法 以RT-PCR方法从健康人外周血单个核细胞中克隆hecdCD40L基因片段.小鼠血管内皮细胞生长因子受体2信号肽序列(SigmKDR)和EGFP与hecdCD40L基因片段融合或不融合,插入真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1 SigmKDR-EGFP(sEGFP)和pcDNA3.1 sEGFP-hecdCD40L.用脂质体将表达载体转染至体外培养的COS-7细胞后,G418抗性筛选,流式细胞仪分选并检测EGFP和/或CD40L的表达.Western blot检测融合蛋白在COS-7细胞及其上清中的表达,用镍柱和超滤离心管获取纯化浓缩的sEGFP-hecdCD40L和sEGFP融合蛋白与人DCs共孵育,流式细胞仪和ELISA分析DCs对2种融合蛋白的摄取率、DCs表型变化以及细胞因子IL-12的分泌. 结果 pcDNA3.1 sEGFP或pcDNA3.1 sEGFP-hecdCD40L转染COS-7细胞后,经G418抗性筛选和流式细胞仪分选筛选获得高效表达融合蛋白的单克隆细胞株,EGFP阳性细胞可达95%以上,Western blot在细胞内和上清中均能检测到融合蛋白.sEGFP或sEGFP-hecdCD40L与DCs共孵育2 h,流式细胞仪检测示EGFP阳性率前者为28.6%,后者为56.9%,24 h后分析DCs的表型,sEGFP-hecdCD40L融合蛋白增强DCs表面CD80、CD83和HLA-DR分子的表达以及刺激IL-12的分泌,而sEGFP对DCs的表型和IL-12的分泌无明显影响. 结论 用SigmKDR、EGFP和hecdCD40L构建的融合基因能在真核细胞中表达并能分泌至细胞外,这种分泌型融合蛋白能靶向DCs,诱导DCs的成熟和上调其表面共刺激分子和MHC-II分子的表达,并刺激IL-12分泌.

汉防己甲素对大鼠急性脊髓损伤后 bcl-2 和 bax 表达的影响

目的 观察汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对大鼠急性脊髓损伤后bcl-2和bax表达的影响,探讨其对脊髓损伤的作用机制. 方法 成年SD大鼠100只,分为4组:假手术组10只,损伤对照组、甲基强的松龙(methylprednisolone, MP)治疗组、Tet治疗组各30只.胸8、9椎板切除后,损伤对照组,MP、Tet治疗组用加速压迫型Allen's打击法制成脊髓损伤模型,后2组动物于制模前,伤后24、48 h尾静脉分别注射MP 90 mg/kg和1% Tet 22.5 mg/kg.各组大鼠于术后8 h,1、3、7、14 d行运动功能BBB评分,取损伤段脊髓行石蜡切片HE染色,观察脊髓组织的形态结构变化,免疫组织化学染色检测细胞凋亡因子bcl-2、bax表达. 结果 伤后7、14 d MP、Tet治疗组大鼠运动功能评分显著高于损伤对照组(P<0.05),各时间点MP、Tet治疗组评分无统计学意义(P>0.05);MP、Tet治疗组脊髓组织损害较损伤对照组轻,术后8 h至14 d动态观察,3～7 d损伤表现为严重,达到损伤高峰期;假手术组中bax、bcl-2阳性细胞数较少,MP、Tet治疗组bax阳性细胞数少于损伤对照组(P<0.05),而bcl-2阳性细胞数多于损伤对照组(P<0.05). 结论 Tet可通过增加bcl-2表达和降低bax表达来抑制急性脊髓损伤后神经细胞的凋亡,有益于脊髓组织的保护,促进运动功能的恢复.

改良迷宫同期瓣膜置换联合射频消融治疗心房纤颤 100 例临床分析

目的 探讨瓣膜置换手术中射频消融改良迷宫术治疗心房纤颤的疗效. 方法 本科2006年3月至2009年12月期间收治的100例风湿性心脏病合并心房纤颤(atrial fibrillation,AF)患者,行瓣膜置换手术,同时采用双极射频消融改良迷宫治疗心房纤颤,回顾性分析并随访比较手术前后心电图、超声心动图检查指标. 结果 术毕窦性心律者91例(91.0%),交界性心律者8例(8.0%),房颤者1例(1.0%);术后6个月随访: 窦性心律者80例(82.5%),交界性心律者17例(17.5%),无房颤者.无Ⅲ度房室传导阻滞发生,无因出血二次开胸,因严重心功能不全致围手术期死亡3例. 结论 改良迷宫同期瓣膜置换联合射频消融治疗心房纤颤操作简单,安全,治疗效果好.

TLR4 及MD2 反义基因对内毒素诱导的肺泡Ⅱ型细胞活化的影响

目的 观察Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)及myeloid differentiation protein 2(MD2)反义基因对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肺泡Ⅱ型细胞NF-κB活化的影响. 方法 培养的肺泡Ⅱ型细胞分为:正常细胞(对照)组、LPS组、LPS+转染空载体组、LPS+转染TLR4反义基因组、LPS+转染MD2反义基因组、LPS+转染TLR4-MD2反义基因组(n=8).Northern blot检测转染细胞的TLR4 及MD2 mRNA表达,Western blot检测转染细胞TLR4及MD2蛋白表达,电泳迁移率改变法检测 NF-κΒ的活性,ELISA测定细胞培养上清中TNF-α和IL-6含量. 结果 与对照组比较,LPS刺激后的细胞TLR4及MD2 mRNA和蛋白表达、NF-κB活性、TNF-α和IL-6的生成均显著增加(P<0.01);而转染反义基因组细胞与其他LPS刺激组比较,TLR4 及MD2 mRNA和蛋白的表达、NF-κB活性及TNF-α和IL-6的含量均明显降低(P＜0.01). 结论 TLR4及MD2反义基因能有效抑制LPS诱导的肺泡Ⅱ型细胞的活化.

脂质代谢相关基因在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义

目的 观察乳腺浸润性导管癌组织和癌旁正常乳腺组织中脂质代谢调控基因的表达,并探讨其与乳腺浸润性导管癌发生的关系. 方法 收集30例乳腺浸润性导管癌患者手术切除的乳腺癌组织和癌旁乳腺组织,RT-PCR检测各组织中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)、环氧合酶(cyclooxygenase-2, Cox-2)、5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)及过氧化物酶增殖活化受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPAR-γ)的基因表达. 结果 乳腺浸润性导管癌组织中FAS mRNA的表达显著高于癌旁组织(3.265±0.913 vs 1.300±0.712, P<0.01),同时乳腺癌组织中Cox-2、5-LOX mRNA的表达显著高于癌旁组织(2.449±1.333 vs 1.027±0.596,P<0.05;2.766±1.193 vs 1.159±0.520,P<0.05),PPAR-γ mRNA的表达在乳腺癌组织和癌旁乳腺组织间差异无统计学意义(2.771±1.313 vs 2.235±1.383, P>0.05). 结论 FAS、Cox-2及5-LOX基因的高表达与乳腺浸润性导管癌的发生有关,提示脂质代谢途径调控对乳腺癌的预防具有重要的意义.

肝癌细胞对树突状细胞白介素-12 表达的影响

目的 研究肝癌细胞(hepatocellular carcinoma cells,HCCs)微环境对树突状细胞(dendritic cells, DCs)的白介素-12(interleukin-12, IL-12)表达的影响,以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制. 方法 免疫磁珠法从人外周血分离CD14+单核细胞,加入rhGM-CSF和rhIL-4将单核细胞诱导分化为imDCs,利用rhTNF-α将imDCs诱导为mDCs,imDCs和mDCs与HCCs在Transwell中共培养48 h,ELISA法分别检测不同培养条件下上清液中IL-10、IL-12、转化生长因子β1(trasnformed growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达量. 结果 与HCCs共培养后,imDCs和mDCs的IL-12的表达量分别从(115.076±8.129)pg/ml和(258.346±3.609)pg/ml下调至(17.599±1.757)pg/ml和(6.787±1.123)pg/ml (P<0.05, P<0.01),而且培养上清中的TGF-β1浓度分别从(133.172±3.053)pg/ml和(174.446±3.972)pg/ml上调至(633.025±9.527)pg/ml和(486.806±10.515)pg/ml(P<0.05,P<0.01),VEGF的浓度分别从0 pg/ml上调至(830.892±7.564)pg/ml和(858.169±5.419)pg/ml(P<0.01). 结论 HCCs可抑制DCs的IL-12的表达,这可能是HCCs损伤DCs免疫调节功能的方式之一.

冠状动脉旁路移植术后撤机困难的序贯通气治疗

目的 探讨冠状动脉旁路移植术后撤机困难应用有创-无创序贯通气治疗的有效性. 方法 2005年12月至2010年2月我院行冠状动脉旁路移植术患者360例,21例出现撤机困难而行无创通气治疗,设为研究组(N组,n=21),余为对照组(C组,n=339).分别在术前、治疗前8 h、治疗即刻、治疗后8、16、24、48 h 7个时间点观察呼吸次数、动脉血气指标、心率、肺动脉压、氧合指数及肺泡-动脉氧分压差等指标的变化. 结果 研究组高龄(＞65岁)、近期吸烟、氧合指数低、肌酐清除率低、3支血管病变及合并瓣膜病变比例高于对照组(P<0.05).研究组术中搭桥数量≥3支较多、输血量较大,转机比例较高(P<0.05).无创通气治疗后呼吸次数、动脉血气指标、心率、肺动脉压、氧合指数及肺泡-动脉氧分压差显著改善(P<0.05),无创通气对于心源性肺水肿、肺不张和急性肺损伤所致撤机困难改善明显,而对于肺部感染所致撤机困难疗效不理想,2例中行再次插管1例,总有效率95.2%. 结论 冠状动脉旁路移植术后撤机困难患者应用有创-无创序贯通气治疗,能够改善氧合,尽早拔管.

适于影像学研究的猪慢性心肌缺血模型的制备

目的 建立适于影像学研究的猪慢性心肌缺血模型. 方法 家猪10只,开胸手术游离冠状动脉左回旋支,在左旋支近段放置塑料Ameroid 缩窄环,以建立左旋支慢性狭窄的心肌缺血模型.模型建立后5～6周内每周1次行冠状动脉造影和心脏MRI、超声及SPECT检查.以冠状动脉造影结果作为评价冠状动脉狭窄程度的标准. 结果 10只家猪中2只术后早期死亡,8只成功建立慢性心肌缺血模型并存活至实验完成,共计行影像检查38例次,其中35例次满足图像分析.术后第1周,冠脉造影见左回旋支轻度狭窄,随术后时间延长,狭窄程度逐渐加重.术后第3周1只动物回旋支狭窄达90%,术后第5周4只动物狭窄达90%,第6周其余3只动物达90%.MRI扫描可见左室侧壁和后壁变薄,延迟灌注扫描见明显强化,超声及SPECT可见左室运动减弱,功能降低,缺血节段室壁灌注量降低甚至缺损. 结论 应用塑料Ameroid 缩窄环可以成功制备慢性心肌缺血的动物模型,并适用于各种影像学方法观察冠状动脉渐进性狭窄过程中左室结构及心功能的变化.

CT灌注成像在定量监测肿瘤微血管系对抗血管生成治疗反应中的应用

目的 探讨CT灌注成像技术对定量评价肿瘤组织血流动力学改变,区分肿瘤组织和正常组织、肿瘤中心组织和肿瘤边缘组织的有效性,以及定量监测肿瘤微血管系对抗血管生成药物治疗反应的有效性. 方法 15只一侧大腿植入VX2肿瘤的新西兰大白兔分为2组,1组行抗血管治疗(n=11),1组为对照组(n=4).于肿瘤种植1周后、治疗1周后和治疗2周后进行DEC-CT扫描,分别计算肿瘤区、肿瘤边缘区、肿瘤中心区和正常组织区的灌注参数:血流量(blood flow,BF)、血容量(blood volume,BV)、平均通过时间( mean transit time,MTT)和表面通透性(permeability surface,PS),并对各灌注参数值进行统计分析. 结果 肿瘤区和正常组织区的BF、PS、MTT值分别为(149.32±30.99)ml/(100 g·min)、(28.24±5.15)ml/(100 g·min)、(2.79±0.66)s和(32.18±4.10) ml/(100 g·min)、(11.88±0.71)ml/(100 g·min)、(6.57±0.90)s,两者比较差异均有统计学意义(P<0.01).肿瘤核心区和肿瘤边缘区的BF、PS、MTT值分别为(175.70±34.43)ml/(100 g·min)、(32.43±6.52) ml/(100 g·min)、(3.87±0.84)s和(19.07±3.58)ml/(100 g·min)、(18.75±2.10) ml/(100 g·min)、(8.11±1.44) s,两者比较差异均有统计学意义(P<0.05).治疗组肿瘤区的BF、 BV、 PS、MTT值在治疗后第2周后从187.57 ml/(100 g·min)、5.21 ml/100 g、30.74 ml/(100 g·min)、3.87 s改变为118.48 ml/(100 g·min)、4.21 ml/100 g、24.02 ml/(100 g·min)、4.27 s,对照组从129.74 ml/(100 g·min)、3.22 ml/100 g、25.85 ml/(100 g·min)、3.68 s改变为362.33 ml/(100 g·min)、10.86 ml/100 g、39.31 ml/(100 g·min)、3.54 s,改善明显. 结论 CT灌注成像技术能从血流动力学方面提供肿瘤定量信息,并能定量监测肿瘤微血管系对抗血管生成药物治疗的反应.

双歧杆菌脂磷壁酸对 B16 荷瘤小鼠 Fas/FasL 表达的影响

目的 探讨双歧杆菌脂磷壁酸(lipoteichoic acid of bifidobacterium,BLTA)对黑色素瘤B16小鼠Fas/FasL表达的影响. 方法将黑色素瘤B16细胞接种于C57BL/6小鼠(n=40)皮下,待触及肿块后于荷瘤小鼠瘤周注射不同剂量的BLTA.实验动物分为4组,每组10只:生理盐水(对照)组、低浓度BLTA(50 mg/L BLTA)组、中浓度BLTA(100 mg/L BLTA)组、高浓度BLTA(150 mg/L BLTA)组.采用MTT法检测荷瘤小鼠CTL杀伤活性;免疫组织化学染色检测肿瘤组织浸润的CD4+ 、CD8+ 淋巴细胞的表达情况;用RT-PCR检测肿瘤组织和脾脏组织Fas、FasL mRNA 的表达变化;免疫组织化学染色和Western blot检测肿瘤组织和脾脏淋巴细胞Fas、FasL 蛋白的表达变化. 结果 与对照组比较,BLTA处理各组荷瘤小鼠的CTL杀伤率明显增加(P<0.05),肿瘤组织内Fas、FasL mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),而荷瘤小鼠脾脏组织的Fas 、FasL mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05),肿瘤组织内CD8+淋巴细胞的浸润增多(P<0.05),并具有剂量依赖性. CD4+淋巴细胞的浸润无明显增加(P>0.05). 结论 BLTA能够通过调节Fas/FasL系统,增强CTL细胞的杀伤活性,促进肿瘤细胞的凋亡,逆转荷瘤小鼠的肿瘤免疫逃逸现象,进而提高机体的抗肿瘤作用.

钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂对新生大鼠心房肌细胞钙超载的干预作用

目的 观察钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ, CaMK Ⅱ)抑制剂KN93对新生大鼠心房肌细胞钙负荷的影响,并对细胞CaMK Ⅱ的表达变化进行检测. 方法 新生大鼠心房肌细胞原代培养96 h,应用钙离子导入剂ionomycin(1.0 μmol/L)建立心房肌细胞钙超载模型,并在KN93 3种浓度(0.25、0.5、1.0 μmol/L)的干预下,以钙离子指示剂Fluo-3 /AM负载心房肌细胞,激光共聚焦显微镜观察心房肌细胞内游离钙的变化;应用Western blot法检测CaMK Ⅱ表达的变化. 结果 ①细胞培养至第4天,免疫组织化学染色90%以上细胞α-肌动蛋白抗体阳性.②与对照组比较,钙离子导入剂ionomycin明显增加细胞内钙离子荧光值[(660.16±108.47) vs (376.12±57.57),P＜0.01];KN93对细胞内钙离子荧光值无明显影响(P＞0.05).③预先加入3种不同浓度KN93可显著降低ionomycin导致的细胞内钙离子荧光强度的增加幅度(P<0.01),与对照组比较差异也有统计学意义(P＜0.01).④钙超载组细胞CaMK Ⅱ表达较对照组明显增加(P<0.01);而KN93对细胞CaMK Ⅱ表达影响不明显.⑤不同浓度KN93预处理后,钙超载组细胞CaMK Ⅱ的表达显著降低(P<0.01). 结论 CaMK Ⅱ抑制剂KN93可降低ionomycin引发的大鼠心房肌细胞钙负荷,并下调细胞CaMK Ⅱ表达.

AMD3100 对 Lewis 肺癌进展及荷瘤鼠脾脏髓源抑制性细胞积聚的影响

目的 观察趋化因子受体CXCR4拮抗剂AMD3100对Lewis肺癌进展及荷瘤鼠脾脏髓源抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells ,MDSCs)积聚的影响. 方法 60只荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠分为2组:PBS组(腹腔只注射PBS液,0.2 ml/只)、AMD3100组[腹腔注射溶解有2 mg/(kg*d) AMD3100的PBS液,0.2 ml/只,1次/d,共26 d],每组30只.隔日测2组小鼠体质量,记录成瘤时间.26 d随机处死2组荷瘤鼠各15只,剥离瘤体称量,观察肺转移灶数目,用免疫组化法计数瘤组织微血管密度(microvessel density,MVD),流式细胞仪测小鼠脾脏MDSCs比例;统计2组剩余小鼠自然生存天数. 结果 PBS组、AMD3100组小鼠Lewis肺癌成瘤时间分别为(8.03±1.47)、(9.97±1.50) d,接种瘤细胞后26 d瘤质量分别为(3.54±0.93)、(2.09±0.66)g,MVD值分别为(41.40±6.44)、(32.47± 5.33)个/HP,肺癌肺转移灶数目分别为(18.27±9.78)、(7.40± 5.83)个/只,MDSCs比例分别为(19.57±3.59)%、(31.42±5.04)%,中位生存时间分别是第29、34天,2组各项指标比较差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论 AMD3100可延缓Lewis肺癌进展,但可能对荷Lewis 肺癌小鼠免疫产生一定的抑制作用.

汉族人群性别差异对Ⅰ型自身免疫性肝炎临床特征的影响

目的 分析中国汉族人群性别差异对Ⅰ型自身免疫性肝炎(type 1 autoimmune hepatitis,AIH-1)临床特征的影响. 方法 收集2002年1月至2009年12月确诊的113例(男26例,女87例)中国汉族Ⅰ型自身免疫性肝炎患者肝组织、血清标本,以及人口统计学资料.采用间接免疫荧光法检测血清抗核抗体(antinuclear antibodies, ANA)、抗平滑肌抗体(smooth muscle antibodies, SMA)、Ⅰ型抗肝肾微粒体抗体(liver/kidney microsome type 1, 抗LMK-1)及其他自身抗体,并分析患者肝组织病理学及人口统计学特征. 结果 男性AIH-1患者肝硬化发生平均年龄为60.62岁,女性患者肝硬化发生平均年龄为47.17岁,两者之间差异有显著统计学意义(t=2.876,P=0.007).男性与女性AIH患者血清ALT、AST和总胆红素水平,以及在临床表现、ANA和/或SMA阳性率及肝组织病理学方面差异无统计学意义(P>0.05).女性AIH-1患者的血清IgG水平明显高于男性患者[(21.86±9.12)g/L vs (17.49±8.58) g/L, t=2.017, P=0.046]. 结论 汉族女性AIH-1患者肝硬化发生年龄明显低于男性患者,可能与女性患者肝脏反复炎症活动有关.

腺苷 A2a 受体对肺泡上皮细胞钠离子通道 α 亚基的上调作用

目的 研究腺苷A2a受体对肺泡上皮A549细胞钠离子通道α亚基(epithelial sodium channel α-subunit,α-ENaC)表达变化的影响,探讨其在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的作用. 方法 不同剂量(0、0.1、1、10、100 μmol/L)和不同时间(0、1、4、8、24、48 h)的腺苷A2a受体激动剂CGS-21680干预A549细胞,分别用RT-PCR和Western blot检测α-ENaC mRNA和蛋白表达情况. 结果 ①不同剂量CGS-21680作用A549细胞8 h后,α-ENaC mRNA和蛋白表达水平从0.1 μmol/L开始增加,并与CGS-21680剂量呈正相关(mRNA表达:r=0.959,P<0.01;蛋白表达:r=0.988,P<0.01),与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).②100 μmol/L CGS-21680作用A549细胞1 h后,α-ENaC mRNA和蛋白表达水平开始增加,4 h后与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 激动腺苷A2a受体能上调α-ENaC的表达,有益于急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的预后.

喷射心肌打孔填充不同凝胶支架后心肌孔道演变规律的实验研究

目的 观察喷射心肌打孔填充不同凝胶支架后犬心肌孔道的演变规律以及不同凝胶支架在心肌组织中的组织相容性. 方法 12只健康杂种犬,体质量9～13 kg,年龄1～2岁,均分为琼脂糖凝胶(agarose hydrogel,AH)组、纤维蛋白凝胶(fibrin glue,FG)组、壳聚糖凝胶(chitosan hydrogel,CH)组,每组4只.各组用无针注射器分别喷射各种凝胶心肌打孔,于术后2、4、6周取含有孔道的心肌组织行HE、Masson染色,观察各种凝胶支架在心肌组织中的降解性和组织相容性,以及各组心肌孔道是否保留和开放. 结果 纤维蛋白凝胶2周内绝大部分已经降解,引起较少的炎性反应和胶原纤维增生,降解后心肌孔道闭塞,同时心内膜面发现附壁血栓形成;琼脂糖凝胶6周时仍有较多凝胶未降解,引起周围组织大量胶原增生,心肌孔道完全闭塞;壳聚糖凝胶的降解周期为4～6周,降解后可见心肌孔道开放及孔道壁内皮化. 结论 琼脂糖凝胶和纤维蛋白凝胶均不适合作为心肌孔道支架,而壳聚糖凝胶是一种良好的心肌孔道支架.

RNA 干扰 DC-SIGN 表达对树突状细胞成熟及功能的影响

目的 研究慢病毒介导RNA干扰树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin,DC-SIGN)分子表达及干扰后对树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟度及功能的影响. 方法 分离健康人外周血单核细胞,用GM-CSF和IL-4刺激诱导DCs.培养第4天分3组:RNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,按实验设计加入病毒共孵育12 h后换液,继续培养60 h后用荧光显微镜观察转染效率及荧光强度,培养第6天加LPS刺激成熟.第7天收集细胞用RT-PCR检测DC-SIGN mRNA水平,Western blot检测DCs总DC-SIGN蛋白表达水平,流式细胞仪检测DCs表面DC-SIGN水平,ELISA检测DCs培养上清液中IL-12、IL-10水平,混合淋巴细胞反应检测DCs对CD4+ T淋巴细胞刺激增殖能力的影响. 结果①荧光显微镜显示感染复数(MOI)为20时,DCs感染病毒的效率达85%.②RT-PCR证实RNA干扰后DC-SIGN mRNA表达水平(0.252 5±0.139 6)显著低于另2组(0.572 2±0.190 9、0.548 7±0.119 3),差异有统计学意义(F=8.142,P<0.05).③Western blot检测干扰组DCs内总DC-SIGN 水平(0.323 7±0.057 0)显著低于另2组(0.590±0.014、0.578 ±0.023),差异有统计学意义(F=51.376,P<0.05).④流式细胞仪检测干扰组DCs表面表达DC-SIGN水平[(43.10±10.12)%]显著低于另2组[(73.05±8.11)%、(74.49±5.56)%],差异有统计学意义(F=14.19,P<0.05).⑤各组间成熟标志物HLA-DR及CD86差异无统计学意义(P>0.05).⑥ELISA结果显示各组DCs培养上清液中IL-10、IL-12水平差异无统计学意义(P>0.05).⑦混合淋巴细胞反应结果显示各组DCs诱导CD4+T淋巴细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05). 结论 慢病毒介导的RNA干扰能有效抑制DCs表面DC-SIGN分子表达,抑制DC-SIGN表达对DCs成熟度及DCs功能无影响.

SDF-1/CXCR4 对喉癌细胞归巢的作用

目的 在体外探讨血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)、趋化因子受体(Cys-X-Cys receptor 4,CXCR4)及其配体基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)在喉癌Hep-2细胞株中的表达及其在喉癌细胞归巢中的作用. 方法 ①分别用RT-PCR及Western blot检测喉癌Hep-2细胞株中CXCR4 mRNA和蛋白的表达和重组人SDF-1与CXCR4特异性拮抗剂(AMD3100)作用前后喉癌Hep-2细胞株中VEGF-C mRNA和蛋白表达水平的变化;②用甲基噻唑基四唑(MTT比色法)测定不同浓度重组人SDF-1以及AMD3100作用前后Hep-2细胞增殖率的变化;③Transwell小室迁移及体外侵袭实验检测不同浓度重组人SDF-1以及AMD3100对Hep-2细胞趋化活性的影响. 结果 ①在mRNA以及蛋白水平,CXCR4及VEGF-C在Hep-2细胞株中均有高表达,在不同浓度重组人SDF-1(1、10、100 ng/ml)作用Hep-2细胞株24 h后,VEGF-C的表达明显上调,且有明显的剂量依赖性,并能被1 μg/ml的CXCR4的特异性拮抗剂AMD3100阻断;②与对照组(未处理的Hep-2细胞)和10 ng/ml SDF-1组比较,100 ng/ml SDF-1组有明显促进喉癌细胞增殖的作用(P<0.05),并能被1 μg/ml的AMD3100阻断;③与对照组和10 ng/ml SDF-1组比较,100 ng/ml SDF-1组同样有明显的促喉癌细胞迁移和侵袭的作用(P<0.05),同样也能被1 μg/ml的AMD3100所阻断. 结论 SDF-1/CXCR4生物轴与VEGF-C协同促进喉癌细胞归巢,可作为干预喉癌淋巴转移的新手段.

某医科大学在校生亚健康及其与述情障碍的相关性分析

目的 了解医学生亚健康状态及其与述情障碍的相关性. 方法 选取某医科大学临床医学及其相关专业2 505名学生,运用<青少年亚健康多维评定问卷>和<多伦多述情障碍量表>分别评定亚健康状态和述情障碍,采用多因素非条件Logistic回归法分析医学生亚健康状态与述情障碍的关系. 结果 男生躯体、心理亚健康状态的检出率分别为7.7%、5.9%,女生分别为8.6%、5.5%,两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);单变量分析中,述情障碍及其3个因子与躯体和心理亚健康显著相关(除外向性思维和心理亚健康);在控制人口统计学指标等混杂因素后,躯体亚健康状态以七年制临床医学专业学生高,述情障碍得分>P75为其危险因素(P<0.05),"母亲文化程度为小学"是躯体亚健康的保护因素(P<0.01);心理亚健康状态以5年制临床相关专业低,父亲和自己生活的家庭类型、识别情感不能得分>P50是危险因素(P<0.05). 结论 亚健康状态在医学生中十分常见,述情障碍可能是医学生亚健康状态发生的危险因素.

通络方剂对糖尿病大鼠肝纤维化相关血清学指标及形态学的影响

目的 探讨通络方剂(Tongluo recipe,TLR)对糖尿病大鼠肝纤维化相关血清学指标及形态学的影响. 方法 SD大鼠予链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)60 mg/kg腹腔注射,制备糖尿病模型.模型动物按随机数字表法分为2组,每组10只:糖尿病对照组、通络方剂干预组,同时取10只大鼠作为正常对照组,正常对照组和糖尿病对照组大鼠仅给予等量的生理盐水溶液,每日同一时间灌胃.造模12周后测血清肝纤维化指标,取肝组织测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA),观察肝组织形态学改变. 结果 糖尿病大鼠血清透明质酸(hyaluronic acid ,HA)、Ⅳ型胶原(collagen type Ⅳ,Ⅳ-c)水平显著升高(P<0.01),肝血窦边缘及肝汇管区胶原纤维增生,Disse间隙贮脂细胞增生;糖尿病大鼠肝组织SOD活性显著降低,MDA水平显著升高(P<0.01).经通络方剂治疗12周后,血清HA、Ⅳ-c水平显著降低(P<0.05),肝纤维化病理形态有明显改善;糖尿病大鼠肝组织SOD活性显著增加、MDA水平显著下降(P<0.01),氧化应激水平有所下降. 结论 通络方剂可降低糖尿病大鼠血清肝纤维化指标,改善肝纤维化的病理形态,其作用机制可能与其增强了肝组织抗氧化酶类活性以及清除脂质过氧化物有关.

下肢闭塞性动脉粥样硬化血管成形及支架植入术的临床研究

目的 评估下肢闭塞性动脉粥样硬化血管成形及支架植入术治疗的疗效及安全性. 方法 2007年12月至2008年12月我科收治的20例(34处病变)间歇性跛行及静息痛患者,病因均为动脉粥样硬化.病变位于髂动脉18处,位于股腘动脉12处,位于腘下动脉4处.髂、股腘动脉病变均先行球囊血管成形术,如果有夹层或残余狭窄>30%,则植入支架;腘下动脉病变仅行球囊血管成形术.随访6个月和12个月时评估再狭窄和临床疗效. 结果 20例(34处病变)均介入成功,下肢缺血症状均明显减轻或消失.6个月随访,再狭窄率在髂动脉、股腘动脉、腘下动脉分别为5.5%、16.7%、25.0%;12个月随访,再狭窄率在髂动脉、股腘动脉、腘下动脉分别为11.1%、33.3%、75.0% . 结论 血管成形及支架植入术治疗下肢闭塞性动脉粥样硬化安全有效,术后规范抗血小板、抗凝、抗脂治疗对于保持血管再通至关重要.

人 Dickkopf1 基因腺病毒载体的构建及感染黑色素瘤后 β-catenin 表达的研究

目的 构建高表达外源性Dickkopf1(DKK1)基因的重组腺病毒载体(Ad-DKK1);感染黑色素瘤细胞株后研究Wnt信号通路中主要信号分子β-catenin的表达变化. 方法 利用PCR技术扩增目的 基因DKK1;应用分子克隆技术和AdEasy系统重组腺病毒技术,把目的 基因亚克隆到穿梭质粒;经酶切和测序后,在BJAdeasy中同源重组;用PacⅠ酶切过的重组腺病毒DNA在HEK293中包装并扩增;实验分为5组:Ad-DKK1感染组、Ad-SimDKK1感染组、Ad-GFP感染组、Ad-RFP 感染组和空白细胞对照组.按照MOI值为80感染恶性黑色素瘤细胞株A375,观察细胞形态;RT-PCR法检测DKK1、β-catenin基因的表达,MTT法检测细胞活力. 结果 重组腺病毒Ad-DKK1经酶切鉴定与测序证实构建成功.感染A375细胞,感染率均大于80%,感染后细胞形态无明显改变.Ad-DKK1感染组DKK1的表达水平(1.638±0.067)与其他4组(0.718±0.086、1.424±0.125、1.414±0.089、1.423±0.088)比较差异具有统计学意义(P<0.05),其β-catenin的表达水平(0.590±0.011)与其他4组(0.895±0.012,0.749±0.024,0.754±0.012,0.759±0.014)比较差异具有显著统计学意义(P<0.01).MTT法检测细胞活力:Ad-DKK1感染组(0.370±0.014)与其他4组(0.412±0.017、0.398±0.006、0.395±0.007、0.426±0.016)比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 成功构建重组腺病毒Ad-DKK1,经其感染的恶性黑色素瘤细胞中DKK1的表达明显增强,β-catenin的表达显著降低,A375的细胞活力受到抑制.

青少年原发性自发性气胸 84 例临床分析

目的 探讨青少年原发性自发性气胸发病原因、临床特点及治疗方法. 方法 1999年6月至2009年6月我院急诊科、呼吸科、胸外科收治的84例18岁以下原发性自发性气胸患者,其中男性72例、女性12例,男性∶女性为 6∶1,平均年龄17.06(14～18)岁.排除外伤、肺炎、医源性或其他原因引起的自发性气胸.治疗方法:吸氧4例(4.8%)、胸腔闭式引流48例(57.1%)和手术治疗32例(38.1%),31例(36.9%)胸腔闭式引流治疗失败患者改用手术治疗.采用电话、门诊随访,本组平均随访25.73(1～123)个月. 结果 胸痛发生率为81例(96.4%),呼吸困难56例(66.7%),咳嗽12例(14.3%),呼吸急促7例(8.3%),胸闷6例(7.1%);81例(96.4%)患者呼吸音降低;3例(3.6%)患者呼吸音消失.63例手术治疗的患者中有61例发现有肺大泡,肺大泡大部分位于肺尖和上叶.21例患者复发,其中吸烟者较不吸烟者复发率高(66.7% vs 22.0%, P＜0.05).第1次原发性自发性气胸发作和第2次发作平均间隔11.8个月;第2次发作和第3次发作间隔缩短为7.4个月. 结论 青少年出现胸痛、呼吸困难等症状要考虑自发性气胸的可能性;治疗方法倾向于胸腔闭式引流与外科手术相结合.

军队离退休干部健康现状的多维度调查与分析

目的 对军队离退休干部健康现状进行多维度调查与分析. 方法 借鉴国外老年综合健康评估(Comprehensive Geriatric Assessment,CGA)方法,结合军队干部特点,集成和重构综合健康评估指标体系,从生理健康、日常活动能力、精神健康、社会适应能力4个维度,采用横断面研究设计和体检结合问卷调查的方式,对随机抽取的402名军队离退休干部进行多维健康调查和分析. 结果 军队离退休干部平均患病种数7.9个,患病率顺位前5位的病种分别为前列腺增生、白内障、脂肪肝、高脂血症、高血压.9.2%存在或有潜在营养不良,34.6%存在不同程度的日常生活能力受损,8.0%有个别步态和平衡能力受损,30.3%存在不同程度的认知功能下降,存在抑郁情绪的有3.9%,睡眠质量不好者占56.8%,社会适应能力处于中等水平的占37.8%. 结论 军队离退休干部往往多病共存,其病种结构较普通老年人群有所不同,且日常生活能力正在减退,出现了部分心理、社会适应能力问题.其中,认知能力减退是军队离退休干部值得关注的健康问题.

内质网应激预处理对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用

目的 研究内质网应激预处理对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用. 方法 24只雄性SD大鼠均分为对照组、衣霉素(tunicamycin,TM)处理组、缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)组,衣霉素+缺血再灌注(TM+I/R)组.采用自动生化分析仪检测大鼠血肌酐、尿素氮水平, PAS染色检测肾小管损伤情况,免疫组化和Western blot检测肾组织内质网应激标志物GRP78蛋白表达. 结果 ①与对照组(0.2±0.03)比较,I/R组肾组织GRP78表达(2.4±0.17)增加(P<0.05),与对照组血肌酐、尿素氮[(47.42±6.02)μmol/L、(4.75±1.77)mmol/L]比较,I/R组血肌酐[(186.83±20.21)μmol/L]、尿素氮[(21.73±2.33)mmol/L]水平升高(P<0.05),肾小管损伤评分升高. ②TM组大鼠肾组织GRP78表达升高,但未见明显肾小管损伤,与对照组比较,血肌肝、尿素氮水平无明显变化. ③与I/R组比较,TM+I/R组大鼠GRP78表达(3.2±0.24)升高;肾小管损伤评分降低(P<0.05),血肌酐[(98.72±14.55) μmol/L]、尿素氮[(13.22±2.45)mmol/L]水平降低(P<0.05). 结论 内质网应激预处理对急性缺血性肾损伤有保护作用,其机制可能为通过激活适宜的内质网应激,上调肾组织GRP78表达,从而抑制I/R导致的过度内质网应激,提高肾组织对缺血的耐受性,减轻细胞和组织损伤,实现其对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用.

法尼醇 X 受体对 HepG2 细胞蛋白 C 表达的影响及机制的初步研究

目的 观察法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)的天然激动剂鹅脱氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)对HepG2细胞蛋白C(protein C,PC)表达的影响,探讨其引起变化的可能机制. 方法 以不同浓度(25、50、75 μmol/L)FXR激动剂CDCA刺激HepG2细胞,RT-PCR分别检测各组细胞FXR特异性靶基因小异源二聚体伴侣分子 (small heterodimer partner,SHP)及PC mRNA表达变化,并用实时荧光定量PCR(real-time PCR)分析各组PC的表达量;ELISA检测各组细胞培养上清液中PC蛋白分泌量的变化;瞬时转染结合报告基因检测在人胚肝L02细胞中转入组成性活化的FXR表达质粒(VP-FXR),观察PC启动子活性的改变. 结果 经FXR配体CDCA刺激的HepG2细胞,随着CDCA浓度的增高,SHP、PC mRNA的表达逐渐增高,细胞培养上清液中PC蛋白表达也逐渐升高,呈剂量依赖性;在人胚肝L02细胞中,活化的FXR可增强PC启动子的活性约2.9倍. 结论 CDCA活化FXR引起HepG2细胞中PC mRNA和蛋白表达的升高,其调控机制与PC启动子的活化相关.

老年起病的灰质异位症 1 例

脑灰质异位症（heterotopic gray matter,HGM）是指胚胎期神经迁移异常或室周基质内的神经母细胞凋亡失败导致皮质下神经元不能迁移到正常部位所引起的一种皮质发育畸形疾病[1].临床表现为癫痫、精神和智力发育障碍、神经系统功能缺失三大主征.通常在儿童期或10～20岁起病[2], 老年发病罕见.我院诊断1例61岁以癫痫起病,不伴有精神、智力发育障碍及神经系统功能缺失的灰质异位症患者,现报告如下.

结核瘤 1 例诊治分析

1 临床资料患者,男性,20岁,因"干咳、左胸背痛1月余,发热半月余,活动后气促1周"于2009年10月13日入院.患者2009年9月初无明显诱因出现干咳,左侧胸背部疼痛,无咯血、盗汗等不适;9月29日出现发热,以午后夜间为主,高体温40℃,在当地诊所治疗1周,症状无好转.

无创正压通气治疗慢性阻塞性肺病急性加重期伴呼吸衰竭失败的相关因素分析

无创正压机械通气(noninvasive positive-pressure ventilation,NPPV)应用于慢性阻塞性肺病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)伴呼吸衰竭的治疗,可取得较好疗效,但NPPV有其自身的局限性[1].我科2005年1月至2009年1月应用NPPV治疗AECOPD伴呼吸衰竭患者112例,现报告如下.

脊柱手术致缺血性视神经病变 1 例

1 临床资料患者,男性, 57 岁,因”右眼突然视力下降2周”于 2007年12月19日到我科入院.患者曾于2周前因”腰椎间盘脱位”在院外于全麻下行手术治疗, 术中采取俯卧位, 手术顺利,时间约2 h.患者麻醉清醒后发现右眼视力下降,伴鼻下方黑影遮挡.未予重视,后为进一步诊治来我院.既往有高血压病史,口服药物血压控制范围在140～150/80～90 mmHg.入院查:一般情况可,血压140/85 mmHg.视力,右眼: 0.1,左眼:0.8.右眼结膜无充血, 瞳孔圆,直径6 mm,直接对光反射迟钝,间接对光反射存在,眼底:右视盘C/D为0.1,上方视盘色淡,边界欠清, 有小的出血点,余网膜未见出血,渗出.

脑电图与脑磁图联合定位下手术治疗 West 综合征 1 例

1临床资料患者4岁,女性,因”发作性意识丧失伴肢体抽搐2年”入院.患儿2年前突发意识丧失,伴有肢体与全身抽搐,此后每天都有多次发作,发作时头前屈、弯腰,两手握拳,全身呈屈曲状.因服用促肾上腺皮质激素治疗无效,改用利比通治疗,有半年时间效果较好,因近抽搐频繁,来我院治疗.患者出生时曾出现窒息缺氧,家族史无异常.查体:抱入病房,呼之能应,但不予配合,哭闹不止,语言不清,仅能发音”爸爸妈妈”,其余无法表达,智力显低下,四肢活动自如,肌力肌张力正常,双侧病理征阴性.MRI提示左侧海马见片状长T1长T2异常信号,无水肿和占位效应,提示囊肿或变性可能性大.

先天性门静脉缺如 1 例

先天性门静脉缺如(congenital absence of portal vein,CAPV)较为罕见,由Abernethy率先报道,故又称为Abernethy畸形[1,2].CAPV是一种先天性门静脉胚胎发育异常,表现为肠系膜静脉和脾静脉未按正常途径流入门静脉,而是通过一个绕过肝脏的先天性门体短路连接,直接汇入体循环,导致无门脉血液灌注肝脏畸形[3].现将我院1例CAPV伴贫血、肝内结节病例报告如下.

冠心病心力衰竭患者血压昼夜节律的变化对心率变异性的影响

心力衰竭(心衰)是各种病因引起的以心脏收缩和/或舒张功能重度受损为主并伴有神经与体液激素改变的严重病症.血压昼夜节律异常与心衰严重程度密切相关[1].

针状刀在内镜逆行胰胆管造影术插管困难病例中的应用

目的 探讨针状刀乳头括约肌切开术在内镜逆行胰胆管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)插管困难病例中的临床应用. 方法 对2003年12月至2008年12月我科常规ERCP插管困难的712例患者行针状刀乳头括约肌切开术,观察疗效和并发症. 结果 701例切开后插管成功胆管显影,成功率为98.5%.并发症共55例(7.7%). 结论 对于插管困难的病例,用针状刀行乳头括约肌切开术,可安全、有效地提高ERCP诊疗的成功率.

折叠式骨膜-骨复合组织游离移植修复关节软骨缺损的实验研究

目的 观察游离折叠式骨-骨膜复合组织移植修复全层软骨缺损的效果及再生软骨的特性. 方法 新西兰大白兔实验动物48只,建立全层软骨缺损模型,设计折叠骨-骨膜复合组织游离移植为实验组,单纯骨膜游离移植为对照组,未作任何修复处理为空白组,每组16只.术后2、4、8、12周进行大体标本观察、HE染色、甲苯胺蓝染色组织学观察、免疫组化观察、扫描电镜观测和关节软骨组织学半定量分析. 结果 术后实验组修复组织为透明软骨,且与周围正常软骨融合良好,甲苯胺蓝染色深;细胞质和细胞外基质中Ⅱ型胶原的表达呈强阳性;电镜显示包埋在软骨细胞囊中的软骨细胞排列整齐,胶原纤维呈多孔结构,孔隙均匀;软骨组织学半定量评分实验组各时间点明显优于对照组和空白组(P<0.05). 结论 折叠式骨-骨膜复合组织游离移植是对以往单纯游离骨膜移植的改进,为修复全层软骨缺损的提供更有效的方法.

杨宗城教授2009年度重庆市科技突出贡献奖

我校2009年重要科技奖励成果简介(四)