第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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抗肿瘤转移肝素酶特异性抗体的筛选及鉴定
目的通过鉴定制备的人肝素酶单克隆抗体,筛选出具有抗肿瘤转移特异性的单克隆抗体株,并大量制备.方法采用Western blot技术,以HepG2、SGC-7901、MKN45、SW480、U2OS、MCF-7细胞总蛋白为样本,对已制备的3株人肝素酶单克隆抗体进行初步鉴定,筛选出能够与肝素酶蛋白特异性结合的抗体,并采用免疫细胞化学技术进一步验证筛选出的抗体特异性,然后通过Transwell体外侵袭实验观察筛选出的肝素酶单克隆抗体对肿瘤转移的抑制作用.结果已制备的3株人肝素酶单克隆抗体均能与不同肿瘤细胞肝素酶蛋白结合,其中12号抗体与商品化肝素酶单克隆抗体在MCF-7细胞中均检测出肝素酶弱阳性表达,其特异性佳;免疫细胞化学结果也显示在SGC-7901、HepG2、MKN45、SW480和U2OS细胞中12号抗体能检测出肝素酶阳性表达,而在MCF-7细胞中检测出肝素酶弱阳性表达;Transwell体外侵袭实验结果显示12号抗体(100 μg,浓度约1 mg/ml)作用于SGC-7901、HepG2、MKN45、SW480和U2OS细胞48 h后,其穿膜细胞数与正常小鼠IgG对照组相比明显减少(P<0.05).结论纯化制备的人肝素酶单克隆抗体能够与肿瘤细胞表达的肝素酶蛋白特异性结合,并通过抑制肝素酶蛋白达到抑制肿瘤细胞的扩散与转移.
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经导管封堵治疗成人巨大房间隔缺损的临床疗效及其安全性
目的通过对巨大型房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)封堵术后的随访观察,评价经导管封堵ASD的临床疗效与安全性.方法选择在我科成功进行经导管封堵治疗、ASD直径在30mm以上并完成1年以上随访的87例患者为研究对象,分别记录患者术前、术中及术后随访资料,分别术后3d、1、6个月及1年各查心电图及经胸超声心动图(TTE)1次,并对所有资料进行回顾性分析.结果 87例ASD患者TTE测量ASD直径30~38(33.8±1.85)mm,置入封堵器直径36~42(39.2±1.38)mm.术中2例发生一过性Ⅰ度及Ⅱ度房室传导阻滞,1例发生一过性窦性心动过缓.在长达1年的随访期间,所有患者右心房、右心室内径均明显缩小(P<0.05),左心室舒张末期内径则逐渐增大,但仍在正常范围.随访1年时,2例患者遗留完全性右束支传导阻滞,无严重并发症发生.结论经导管封堵巨大ASD安全、有效,术后右心房及右心室可逐渐恢复正常,达到根治ASD之目的.
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3种不同途径移植骨髓间充质干细胞治疗肝硬化模型大鼠的效果比较
目的探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不同途径移植对肝硬化模型大鼠的效果差别.方法用四氯化碳液体橄榄油混合液皮下注射和酒精喂养的方法建立肝硬化大鼠模型,将肝硬化模型随机分为肝硬化未移植组(n=8)、门静脉移植组(n=8)、肝动脉移植组(n=8)、尾静脉移植组(n=8).取健康SD大鼠骨髓,利用全骨髓贴壁的方法原代培养骨髓MSCs,利用CM-DiI标记间充质干细胞,然后通过3种途径分别进行移植.术后4周检测血清白蛋白、转氨酶、胆红素、Ⅳ型胶原;激光共聚焦显微镜观察干细胞在肝脏的分布及数量;HE和Masson染色观察肝硬化程度.结果通过3种途径移植MSCs到肝硬化模型大鼠体内,4周后发现移植组模型大鼠的肝功能均得到明显改善,血清白蛋白较肝硬化未移植组显著升高(P<0.05),转氨酶、胆红素较肝硬化未移植组显著降低(P<0.05),肝纤维化程度较肝硬化未移植组显著减轻(P<0.05).3种途径移植MSCs对大鼠肝硬化的治疗效果无统计学差异(P>0.05).结论骨髓MSCs移植肝硬化模型大鼠,移植后4周肝功能改善,肝纤维化程度降低,3种移植方法治疗效果相似.
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普罗布考治疗46例糖尿病肾病的疗效观察
目的评估普罗布考(probucol)延缓糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)进展的疗效.方法将102例临床出现白蛋白尿(尿微量白蛋白>1.9 mg/dl)的2型糖尿病患者,在常规药物治疗的基础上,分成普罗布考组(普罗布考500 mg/d,n=51)和对照组(n=51),随访6个月检测患者血压、血脂(TB、TG、LDL-c、HDL-c)、肾功(s-Cr、BUN、cys-c)、尿蛋白(尿微量白蛋白、24 h尿蛋白定量)、糖化血红蛋白(HbA1c)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肝功(AST、ALT、GGT)并作统计学分析.结果随访期间,普罗布考治疗组失访5例,对照组失访3例.①普罗布考组治疗后血脂(TC、TG、LDL-c)、cys-c、hs-CRP均较治疗前和对照组均明显下降(P<0.05),并且肾功(s-Cr、BUN)、尿微量白蛋白、24 h尿蛋白定量的增加值普罗布考组明显低于对照组(P<0.05).②在ARB/ACEI类药物(n=48)用药的基础上,普罗布考治疗更能降低患者cys-c、hs-CRP、24 h尿蛋白定量以及尿微量白蛋白增加水平(P<0.05).结论普罗布考可以改善糖尿病肾病患者尿蛋白以及肾功能情况,对DN进展具有延缓作用,若联合使用ARB/ACEI类药物,对糖尿病肾病的防治会产生协同作用.
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毛囊黑素谱系细胞中β-catenin在毛囊周期中的表达
目的探讨毛囊周期中,β-catenin在毛囊黑素谱系细胞中的表达变化.方法采用β-gal染色、石蜡切片免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测Dct-Lac-Z CD1小鼠毛囊的黑素谱系细胞随着毛囊的周期其细胞数量、分布的变化及β-catenin的表达在mRNA和蛋白水平表达量及部位的变化.结果 WB及RT-PCR结果表明在毛囊周期中,β-catenin的表达总量由高到低依次为生长早期(P4、P29)、生长中期(P8)、静止期(P23)、退化期(P18),数据经统计学单因素方差分析,各组间存在显著差异(P<0.05).免疫组化结果显示在黑素谱系细胞中,β-catenin强表达于活化的黑素母细胞、黑素干细胞和分化过程中的黑素细胞,弱表达于静息的黑素干细胞、成熟分化的黑素细胞.结论β-catenin的上调能促进毛囊黑素谱系细胞的分化,其周期性的表达变化可能是毛发周期性色素生成的基础.
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异穿心莲内酯糖苷及酯类衍生物的合成
目的合成异穿心莲内酯糖苷及酯类衍生物.方法以DCC为缩合剂,DMAP为催化剂,异穿心莲内酯与芳香酸合成异穿心莲内酯衍生物;苄基保护的酚酸与异穿心莲内酯以DCC为缩合剂,DMAP为催化剂成酯,再经氢化合成异穿心莲内酯酚酸衍生物;异穿心莲内酯与溴代乙酰氧糖在碳酸银催化下经K-K反应后在碱性条件下脱去乙酰基形成糖苷.结果合成了4个异穿心莲内酯糖苷类衍生物及16个酯类衍生物.糖苷类衍生物与单酯类衍生物均与19-OH反应,双酯类衍生物与3-OH、19-OH成酯.所有化合物为粉末状固体.结论合成的化合物结构经1H-NMR和MS表征,其中17个为新化合物.
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甲基-β-环糊精对肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖和TGF-β/Smad信号通路的影响
目的观察甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)破坏小窝(caveolae)对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)增殖和TGF-β/Smad信号通路的影响.方法分离培养大鼠AECⅡ,免疫荧光双标检测小窝蛋白-1(caveolin-1)和TGF-β受体Ⅰ(TβR- Ⅰ)表达和分布关系.以MβCD(5 mmol/L)破坏AECⅡ细胞膜Caveolae,设空白对照组,非离子去污剂法提取脂筏检测TβR- Ⅰ与Caveolin-1在细胞膜上的分布;Western blot检测Caveolin-1和磷酸化Smad2(pSmad2)表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力.结果荧光双标和脂筏提取结果提示TβR- Ⅰ主要分布于Caveolae区域,MβCD破坏Caveolae后,TβR- Ⅰ重新分布于细胞膜上非脂筏区域;MβCD干扰组Caveolin-1蛋白表达(24.53±3.24)%较正常对照组(54.83±5.67)%显著下调(P<0.01),而TGF-β/Smad信号通路下游分子pSmad2蛋白表达(10.93±1.11)%较对照组(8.36±0.64)%上调(P<0.05);MβCD干扰组细胞增殖率(31.00±4.18)%较对照组(49.20±4.44)%显著降低(P<0.01).结论 MβCD破坏Caveolae结构可抑制AECⅡ增殖,其机制可能与TβR- Ⅰ在非脂筏区域的聚集和Caveolin-1下调导致的TGF-β/Smad信号通路增强有关.
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血清骨形成蛋白-7浓度与女性肥胖的相关性研究
目的检测女性血清骨形成蛋白-7浓度,探讨骨形成蛋白-7与女性肥胖的相关性.方法选取女性肥胖者65例,以体质量指数正常女性134例作为对照组.记录年龄、腰围、臀围、身高、体质量等人体学指标,计算腰臀比和体质指数.测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血糖、尿酸等代谢指标,酶联免疫吸附试验 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清骨形成蛋白-7浓度,比较两组间指标的差异以及血清骨形成蛋白-7和代谢性指标的相关性.结果肥胖组血清骨形成蛋白-7浓度明显低于正常对照组(P<0.01).女性血清骨形成蛋白-7浓度与年龄、体质指数、收缩压、腰围、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇均存在负相关(r值分别为-0.181、-0.248、-0.143、-0.148、-0.169、-0.177,P<0.05),多元线性回归分析显示通过年龄、体质指数、收缩压、腰围、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、舒张压、平均动脉压、腰臀比、尿酸、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖校正后,血清骨形成蛋白-7仍和体质指数负相关(r=-0.248,P<0.01).结论女性血清骨形成蛋白-7浓度与体质指数负相关,提示血清骨形成蛋白-7可能作为治疗女性肥胖的潜在靶点.
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基于BP神经网络的老年男性保健人群缺血性心脑血管病预测模型研究
目的建立基于BP神经网络的老年男性保健人群缺血性心脑血管病(ischemic cardiovascular disease,ICVD)的发病预测模型.方法以某保健医院所有老年男性保健对象2003年5月的体检资料为基线数据,剔除基线前已患有ICVD者.收集历年住院资料、问卷调查资料、电话回访资料,观察截止到2010年10月的ICVD发病及死亡情况.按照4∶1的比例将基线人群划分为训练组和测试组,利用MATLAB 7.0软件的神经网络工具箱构建训练组的BP神经网络模型,用测试组加以验证,并与传统的COX比例风险回归模型进行比较.结果 BP人工神经网络模型的判别能力、群体水平的预测能力方面优于COX比例风险回归模型.结论利用BP神经网络进行疾病预测,能获得更好的预测效果,并且对资料的类型、分布不作任何要求,是一种较好的疾病预测方法.
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拉米夫定治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎疗效相关因素分析
目的研究分析影响拉米夫定治疗HBeAg阴性慢性乙型病毒性肝炎疗效的主要相关因素.方法收集2006年1月至2009年12月在我科和门诊就诊并接受拉米夫定治疗的HBeAg阴性慢性乙型肝炎203例患者临床资料,分析患者治疗前性别、年龄、血清ALT水平、HBV DNA水平、基因型等因素与疗效的相关性.结果获得病毒学应答患者为180例(88.7%),应答患者较之无应答患者基线HBV DNA水平较低;长期治疗时发生病毒学突破患者为81例(45%),发生病毒学突破患者较之获得持续应答的患者基线 HBV DNA水平较高;COX比例风险回归模型分析认为,治疗前HBV DNA水平以及治疗6个月时HBV DNA状态是发生病毒学突破的危险因素.结论拉米夫定治疗HBeAg阴性慢性乙型病毒性肝炎过程中,治疗前较低的HBV DNA水平能够获得较好的应答,治疗6个月时HBV DNA阳性状态是病毒学突破的高危因素.
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Sigma-1受体在非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义
目的明确Sigma-1受体在非酒精性脂肪性肝病中的表达变化及意义.方法应用软脂酸诱导HepG2细胞脂肪变建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外模型,并按0、2、4、8、12 h时相点收获细胞,利用尼罗红(nile red)染色检测细胞脂肪变程度,通过Real-time PCR及Western blot检测Sigma-1受体(Sigma-1 receptor,Sigma-1R)及内质网应激标志蛋白葡糖调节蛋白78(glucose regulating protein,GRP78)的表达,二甲基噻唑二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测细胞脂肪变过程中细胞活性的变化.结果 HepG2细胞经脂肪酸诱导后发生了脂肪变,脂肪变程度随时间点的延长而加重,细胞的平均脂变面积在12 h组(435.14±39.87)较0 h组明显升高(P<0.01); 8、12 h组GRP78 mRNA的相对表达量[(2.35±0.51),(8.71±1.20)]较0 h 组明显升高(P<0.05),而Sigma-1R mRNA相对表达量在2 h组(0.19±0.02)即开始出现明显下降(P<0.05); 在蛋白水平上,GRP78的表达在8、12 h组[(25.59±0.51),(28.43±1.20)]较0 h组明显上调,Sigma-1R在8、12 h组[(15.92±0.42),(10.73±0.63)]较0 h组明显下调(P<0.05); MTT检测提示细胞在脂肪变过程中细胞活性逐渐下降,12 h组细胞活性[(59.86±4.47)%]相对0 h组明显下降(P<0.05).结论 Sigma-1R的低表达可能诱发了NAFLD过程中的内质网应激,进而导致肝细胞的损伤.
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无血清培养法分选舌癌侧群细胞及其特性的鉴定
目的探索人舌鳞癌细胞株Tca8113中侧群细胞的分选方法.方法利用流式细胞仪分选传统含血清培养方法获得的人舌鳞癌细胞系Tca8113中的侧群细胞(SP),并与无血清培养方法分离出的侧群细胞(TSC-SP)进行形态学比较和平板形成克隆实验及成瘤实验的比较,富集并验证肿瘤干细胞相关亚群.结果人舌癌细胞系Tca8113中SP细胞的含量为0.2%,而Tca8113细胞系的细胞在无血清培养基中能够成活,3～5 d 后增殖并形成悬浮的肿瘤干细胞球,并随着培养时间的延长而肿瘤干细胞球体积增大和更加致密;而应用无血清悬浮法培养的Tca8113细胞系中TSC-SP细胞的含量为0.4%;SP与TSC-SP细胞在平板形成克隆实验的形成率均为100%;接种16 d后,104、105数量级的TSC-SP和SP接种裸鼠背部均出现瘤体.结论人舌鳞癌细胞系Tca8113中含极少量的SP细胞,利用无血清培养基可以达到富集肿瘤干细胞亚群的目的.
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姜黄素促进大鼠脊髓损伤恢复的病理及行为学研究
目的探讨脊髓损伤后应用姜黄素对组织形态及大鼠行为学的作用.方法雌性Wistar大鼠72只按随机数字表法分为6组:①单纯损伤组;②姜黄素预处理组(术前30 min,300 mg/kg,腹腔注射);③～⑤姜黄素大、中、小剂量治疗组(大300 mg/kg、中100 mg/kg、小剂量30 mg/kg,腹腔注射)和⑥甲强龙治疗组(30 mg/kg,静脉滴注).以50 g力的动脉瘤夹钳夹T9~T10胸段脊髓1 min 造模,按计划给药.术后2、8周处死大鼠,HE染色观察脊髓组织形态变化;伤后1 d,1～8周每周行BBB评分及斜板评分实验.结果 HE染色示伤后8周,姜黄素治疗组[(30.07±8.75)、(68.40±12.90)、(87.67±11.49)]与单纯损伤组(150.28±27.31)、甲强龙治疗组(109.78±16.5)相比明显缩小了组织空洞面积,姜黄素预处理组(125.57±18.35)也较单纯损伤组空洞范围小(P<0.05).行为学功能与形态学结果相一致,后肢运动评分显示脊髓损伤后完全性后肢瘫痪的各组大鼠逐渐恢复运动功能,姜黄素大、中、小剂量组2、8周[2周:(32.50±2.74)、(30.83±2.04)、(28.33±4.08);8周:(61.67±5.16)、(57.50±2.74)、(55.00±3.16)]的行为功能均显著优于单纯损伤组[2周:(27.50±2.73);8周:(38.33±2.58)]和甲强龙治疗组[2周:(30.00±3.16);8周:(49.17±3.76)],大剂量组效果好(P<0.05),姜黄素预处理组在术后4周起[4周:(33.33±2.58);6周:(37.50±2.74);8周:(44.17±2.04)]也较单纯损伤组表现出更好的行为学功能.结论姜黄素可能通过缩小脊髓损伤后空洞面积,促进大鼠后肢功能恢复.
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血管内超声用于外周动脉狭窄诊断、治疗的临床价值
目的评价血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)对外周动脉狭窄的诊断和血管内介入治疗的价值.方法选择2006年10月至2010年9月西南医院心内科诊断为外周动脉狭窄的住院患者94例,其中男性58例,女性36例,年龄26～77(58.4±18.3)岁.将患者分为数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)组(行DSA检查,43例)及DSA+IVUS组(行DSA及IVUS检查,51例),对2种检查结果进行比较.分别在DSA及IVUS指导下置入支架,并观察支架置入效果.术后采用普通超声、CTA随访,必要时再次行DSA及IVUS检查.结果 DSA+IVUS组中DSA检测发现狭窄血管77处,其中偏心性狭窄42处,向心性狭窄35处;IVUS检测发现狭窄血管82处,其中偏心性斑块63处,向心性斑块19处.直径狭窄率IVUS所测值[(67.1±12.2)%]显著高于DSA[(54.5±11.4)%](P<0.05).面积狭窄率IVUS所测值[(89.3±12.3)%]显著高于DSA[(77.1±13.1)%](P<0.05).DSA+IVUS组支架置入治疗82处血管病变,DSA组支架置入治疗53处血管病变,支架置入均获成功.经3～48个月随访,DSA组再狭窄率[15.1%(8/53)]显著高于DSA+IVUS组[3.7%(3/82)(P<0.05)].结论 IVUS比DSA能更准确地判定病变性质及狭窄程度,更有效地指导和评估支架置入.
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Caveolin-1与兔蛛网膜下腔出血模型基底动脉平滑肌增殖的关系
目的观察兔蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)模型基底动脉小窝蛋白-1(Caveolin-1)和血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)随时间表达变化情况,分析caveolin-1与动脉中膜平滑肌细胞增殖的关系.方法采用随机数字表法将76只新西兰大白兔完全随机分为空白对照组、假手术组和SAH组,空白组(各8只)不施加任何因素干扰,SAH组通过枕大池2次注血模拟脑血管痉挛病理过程,假手术组以生理盐水代替自体动脉血.于2次注血完毕后第1、3、5、7、14天取材,进行基底动脉组织学观察;RT-PCR、Western blot检测caveolin-1及PDGF mRNA转录及蛋白表达的变化规律.结果 SAH组基底动脉中膜滑肌层第7天增厚为明显(39.92±4.07)μm,较sham组(10.78±2.14)μm显著增厚(P<0.01),第14天恢复正常;SAH组caveolin-1 mRNA转录水平上调,第5天达峰(63.41±4.47)%,较sham组(11.75±1.84)%显著上调(P<0.01),蛋白表达则持续下降,第7天(13.78±0.59)%较sham组(37.63±0.85)%显著下调(P<0.01);SAH组PDGF mRNA转录水平第3天(64.45±4.00)%较sham组(11.13±1.20)%显著上调(P<0.01),蛋白表达于第7天达峰(40.67±0.81)%,较sham组(15.42±1.00)%显著上调(P<0.01);Cavelin-1蛋白表达与基底动脉中膜平滑肌层厚度呈显著负相关(r=-0.89,P<0.01).结论 Caveolin-1蛋白在SAH后脑血管平滑肌细胞增殖过程中持续下调,可能是抑制血管痉挛平滑肌增殖反应的潜在靶点.
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宫颈癌中端粒酶抑制因子PinX1基因变异位点分析
目的探讨端粒酶抑制因子PinX1(Pin2/TRF1-interacting protein X1)在宫颈癌细胞系、正常宫颈组织标本、宫颈癌组织标本中的变异情况.方法采用3种宫颈癌细胞系(加以3种淋巴瘤细胞系、1种乳腺癌细胞系作为参照)、28例正常宫颈组织及52例宫颈癌组织标本.提取基因组DNA为模板,PCR扩增PinX1基因全部7个外显子及其部分侧翼序列,PCR纯化产物直接测序从而检测PinX1基因的变异情况,SPSS统计学软件进行数据分析.结果于宫颈癌细胞系中发现3个突变位点,于52例宫颈癌组织中发现5个变异位点,其中位于第7外显子的Ser254Cys(23.1%)及位于第2内含子的IVS2+18 G→A(51.9%)变异率与正常宫颈组织相比有显著差异(P<0.05),位于第2内含子的1个变异位点IVS2+64 C→A(9.3%)为首次报道.结论在宫颈癌中,可能存在PinX1基因的变异新位点,对PinX1基因变异的研究,可能为宫颈癌的诊断、防治和个体化诊疗提供潜在的新靶标.
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肝素酶特异性细胞毒T淋巴细胞表位多抗原肽负载的树突状细胞疫苗体外抗肿瘤免疫效应研究
目的研究肝素酶(heparanase,Hpa)细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位多抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)疫苗能否诱导更强的Hpa特异性CTL反应.方法 HLA-A2.1限制性肝素酶CTL表位多抗原肽负载正常人外周血来源(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)树突状细胞(dendritic cell,DC),诱导CTL,采用4 h标准51Cr释放实验检测上述CTL对不同肿瘤细胞的免疫杀伤效应;采用ELISPOT实验检测效应细胞分泌IFN-γ的能力.结果肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的CTL对Hpa阳性且HLA-A2.1匹配的KATO-Ⅲ胃癌细胞、U2OS骨肉瘤细胞、SW480结肠癌细胞具有杀伤效应,且其杀伤效应强于相应的单肽,在大效应细胞/靶细胞(effector/target,E/T) 时高出率均大于16%;其对HLA-A2.1阴性的HepG2肝癌细胞和Hpa阴性的MCF-7乳腺癌细胞不具有杀伤效应,但是对MCF-7/Hpa乳腺癌细胞和HepG2/HLA-A2肝癌细胞具有杀伤效应,且其杀伤效应强于相应的单肽,在大E/T时高出率均大于18%;其对自体淋巴细胞和DC 不具有杀伤效应.另一方面人肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的IFN-γ分泌水平强于相应的单肽.结论肝素酶CTL表位MAP疫苗能激发较相应单肽更强的特异性和非特异性抗肿瘤效应.
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阻断腺苷A2a受体对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤区谷氨酸转运体GLT-1表达的影响
目的观察腺苷受体A2a拮抗剂对大鼠MCAO模型纹状体中谷氨酸转运体GLT-1表达的影响,并探讨其对缺血性神经保护作用的机制.方法分别在雄性SD大鼠脑缺血2 h、缺血2 h再灌注22 h给予腺苷受体A2a拮抗剂SCH-58261,采用RT-PCR、WB方法检测纹状体区GLT-1的表达,同时观察脑梗死体积和神经功能缺损情况.结果缺血2 h组的神经功能评分无明显差异;缺血2 h再灌注22 h干预组神经功能评分(1.67±0.52)与对照组(2.50±0.55)比较,有显著差异(P<0.05);缺血2 h干预组梗死体积(23.63±3.89),比对照组缩小了16%(P<0.05).缺血2 h再灌注22 h干预组梗死体积(95.12±18.22),比对照组缩小了33%(P<0.01);给予SCH-58261后,MCAO大鼠在急性缺血期和缺血再灌注期纹状体中GLT-1表达均明显增高.结论初步证明阻断腺苷受体A2a对脑缺血产生的保护作用与增强了GLT-1 的功能有关.
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急性冠脉综合征患者血清APN、HO-1水平与冠状动脉病变严重程度的相关性研究
目的通过测定急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清脂联素 (adiponectin,APN)及血红素加氧酶-1 (heme oxygenase-1,HO-1)水平,分析其与冠状动脉病变程度的相关性,探讨二者在冠心病中的相互作用.方法入选160例行冠状动脉造影(CAG)患者,根据患者病史及CAG结果分为2组:急性冠脉综合征(ACS)组92例,稳定型心绞痛(SAP)组68例;50例对照组为非冠心病CAG阴性组.用Gensini评分系统对冠脉病变程度评分.根据Gensini评分系统对冠脉病变组分为Gensini积分≥30分组和＜30分组,再根据冠脉病变支数分为单只、双支和3支病变组.采双抗体夹心ELISA法测定ACS组、SAP组、正常对照组血清APN、HO-1水平.分别比较其二者之间的相关性及与冠脉病变的严重程度(Gensini积分)的相关性.结果 ACS组和SAP组血清APN及HO-1水平均明显低于对照组[(5.84±2.29)、(8.01±2.04) vs (15.27±2.51)mg/L;(24.08±7.88)、(32.86±10.97) vs (54.35±14.8)μg/L,P<0.01].按冠状动脉病变支数分组,冠状动脉病变支数多者血清APN、HO-1水平较冠状动脉病变支数少者亦显著降低.Gensini积分≥30分APN、HO-1水平](5.75±2.28)mg/L、(22.27±6.5)μg/L]明显低于＜30分组[(7.55±2.29)mg/L、(32.38±10.6)μg/L,P<0.01].APN与HO-1呈正相关(r=0.598,P<0.01),Gensini积分与血清APN、HO-1水平均呈负相关(r=-0.576,P<0.01; r=-0.456,P<0.01).结论血清APN与HO-1密切相关,且与冠状动脉病变严重程度密切相关,且二者之间可能存在相互调节.
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延续护理对脑卒中患者出院后独立生活能力和出院护理满意度的影响
目的创建脑卒中后延续护理方案,探讨其提升脑卒中患者出院后独立生活能力和出院护理满意度的效果.方法 2010年5月至12月于西南医院神经内科选择缺血性脑卒中住院患者,采用抛硬币法将入选患者随机分成对照组(19例)和试验组(23例).对照组施行常规出院护理;试验组施行实行常规出院护理和延续护理方案,干预措施包括出院前1周的脑卒中健康课程、出院前3 d的出院护理评估、出院后1周的电话随访以及出院后4周的家庭随访.观察指标为巴氏指数和主观生活质量和出院护理满意度,于出院前3 d及出院后12周应用自制结构性问卷收集患者数据并分析.结果出院后12周,试验组患者巴氏指数的提高幅度(18.70±9.32)分高于对照组(13.16±5.33)分(P<0.05);试验组患者主观生活质量的提高幅度(1.52±0.85)分较对照组(0.89±1.15)分无显著性差异(P>0.05);试验组对出院护理满意度(86.96±10.20)分显著高于对照组(53.16±14.55)分(P<0.01).结论延续护理方案能有效提高脑卒中后患者基础性独立生活能力和出院护理服务满意度,尚无法改善患者对生活质量的主观感受.
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上皮-间质转化在人结肠癌细胞系SW480对西妥昔单抗及氟尿嘧啶耐药中的作用
目的探讨人结肠癌细胞系SW480上皮-间质转化现象与其在化疗药物及靶向药物耐药中的作用.方法西妥昔单抗(cetuximab,C225)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)以及二者联合处理人结肠癌细胞系SW480,观察细胞形态,免疫荧光化学方法检测处理前后SW480细胞骨架改变以及E-钙粘素(E-cardherin)、波形蛋白(vinmentin)表达差异,Western blot方法检测实验组与对照组SW480细胞E-cardherin、Vinmentin以及多药耐药蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)表达差异;体外药物敏感试验(cell Counting Kit-8,CCK-8比色法)分别检测实验组与对照组SW480细胞存活能力.结果 SW480细胞经C225、5-Fu以及二者联合处理后细胞形态由上皮细胞向间质细胞转化;细胞免疫荧光显示处理前后SW480细胞骨架改变,微丝蛋白排列极性增强,E-cardherin表达下降,Vinmentin表达升高,同时伴随MRP、P-gp表达增高.SW480细胞经C225与5-Fu联合处理较单独应用2个药物细胞存活率明显降低(P<0.05).结论 SW480细胞经单独使用靶向药物或化疗药物以及两者联合应用可诱导细胞发生EMT,且此EMT对肿瘤细胞耐药有影响.
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BMP-13在C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用
目的研究骨形态形成蛋白-13(bone morphogenetic proteins-13,BMP-13)促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用.方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后,利用Western blot以及免疫荧光技术于1、2、3周时分别检测C3H10T1/2干细胞心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达变化;同时以实时荧光定量PCR技术进行心肌分化特异性基因GATA4、MEF2C的检测,4周后应用电子显微镜观察干细胞超微结构变化.结果 C3H10T1/2干细胞经pAdEasy-BMP-13感染诱导后,细胞开始伸展,折光性增强,细胞间连接较紧密且细胞排列趋向一致;pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞于3周时,Western blot技术检测出心肌特异性肌钙蛋白(cardiac isoform of tropnin T,cTnT)、连接蛋白Cx43(connexin 43,Cx43)(P<0.05),免疫荧光检测有蛋白α-MHC、α-actin表达,而于1周和2周时未检测出.同时pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞1、2周和3周均未发现有心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达.3周对各组均出现心脏早期发育特异性基因GATA4、MEF2C的表达,但pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞表达量明显高于pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞(P<0.05);pAdEasy-BMP-13感染后细胞于4周时透射电镜下观察出现闰盘及肌丝样细胞超微结构,而pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞没有出现类似结构.结论 pAdEasy-BMP-13可以诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化.
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KLF4对胃癌SGC-7901细胞株体外生长增殖的影响
目的探讨Krüppel样因子4(krüppel-like factor 4,KLF4)对人胃癌SGC-7901细胞株生长增殖的影响.方法以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,脂质体介导转染pcDNA3.1IE-KLF4重组质粒并建立KLF4稳定过表达细胞株,以未转染KLF4基因和转染空质粒载体的胃癌细胞株为对照.用RT-PCR和免疫细胞化学法检测KLF4 mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期及增值指数.结果 RT-PCR和免疫细胞化学法检测示转染组细胞与未转染组和空载体组相比较,KLF4 mRNA和蛋白均明显表达(P<0.05).流式细胞术检测显示转染组G1期细胞增多[(65.08±3.43)%,P<0.05],而S期和G2/M期细胞减少[(30.39±1.80)%、(4.53±1.66)%,P<0.05],增殖指数亦降低[(34.92±3.42)%,P<0.05].结论 KLF4对SGC-7901细胞株体外生长增殖具有抑制作用.
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含uPA裂解位点的人sTrail融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化
目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTrail)基因的原核载体,表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA.方法 RT-PCR法克隆sTrail基因后,经引物延伸法构建his-uPA-sTrail融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中,诱导其表达蛋白并将其纯化,肠肽酶(enterokinase,EK)切与再次纯化回收该蛋白,Western blot检测其抗原性.结果表达载体经诱导成功获约38×103含载体表达标签(Trx)的融合蛋白,EK酶切该蛋白获约19.5 ×103的目的蛋白uPA-sTrail.检测表明,该目的蛋白具人Trail抗原性.结论成功克隆uPA-sTrail融合基因并构建至原核表达载体,并获约19.5×103的融合蛋白,且该蛋白具人Trail抗原性.
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"一站式"杂交手术治疗冠脉复杂病变2例
冠脉复杂病变除药物保守治疗外,还可采用经皮冠脉介入(percutaneous coronary interventions,PCI) 或冠脉旁路移植手术(coronary artery bypass grafting,CABG)治疗,但PCI的手术风险很大,并发症多,CABG则移植血管质和量而不能满足需要,故将二者结合起来的"一站式"杂交手术可很好解决这一难题[1].我科2010年10月完成了2例"一站式"杂交手术,取得了很好效果.现报告如下.
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口腔矫治器治疗高原地区阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)是导致心脑血管疾病的危险因素之一[1].对于OSAHS患者而言高原地区低氧环境,是加重其睡眠障碍的又一重要原因.作者采用口腔矫治器治疗8例高原地区OSAHS患者取得满意疗效,报告如下.
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额骨恶性神经鞘膜瘤1例
1 临床资料患者,男性,20岁,因"发现左额部包块1个月,近日逐渐增大"来我院就诊.入院查体左额部肿块呈鸽蛋大小,质软,触痛阴性,表面皮温正常,无血管怒张.全身其余部位未扪及明显肿块.无头痛头昏等临床症状.X线示左侧额骨下外方一类圆形透亮区,内下外缘光整,考虑左侧额骨良性占位.胸片未见异常.
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亚临床型小脑幕切迹疝的临床分析
亚临床型小脑幕切迹疝(subclinical transtentorial herniation,SCTH)病例临床并不少见,但尚少见相关研究报道.我院对2009年1月至2010年9月收治的有完整影像资料的2 365例患者进行了回顾性研究,发现42例SCTH.现分析总结如下.
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卡介菌多糖核酸对213例复发性流产患者免疫状态的影响
免疫功能异常是复发性流产(recurrent spontaneous abortion, RSA)的常见病因[1].赵爱民等[2]发现T淋巴细胞亚群的改变与流产有关.李江平等[3]报道卡介菌多糖核酸(BCG-polysaccharides nucleic acid, BCG-PSN)有较强的免疫调节作用,已广泛应用于变态反应性疾病、自身免疫性疾病、病毒感染性疾病等的辅助治疗.我们采用BCG-PSN治疗RSA患者,检测患者治疗前后皮肤划痕反应及外周血CD56+ NK细胞.
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新兵乘火车入藏途中血氧饱和度及急性高原病发生情况的动态研究
目的动态观测新兵乘火车入藏途经不同海拔高度的血氧饱和度、心率等生理指标变化及急性高原病(acute mountain sickness,AMS)的发生情况.方法 60名从重庆乘火车去拉萨的新兵,分别在重庆(300 m)、德令哈(2 980 m)、那曲(4 507 m)、拉萨(3 658 m)进行动脉血氧饱和度(SaO2)、心率、血压测量及AMS发生情况调查.结果火车入高原后,新兵SaO2明显下降(P<0.01),心率显著增快(P<0.01),血压变化无统计学意义(P>0.05).4 500 m以上区段SaO2下降明显.急性高原反应为轻至中度,发生率为20.00%(2 980 m),36.67%(4 507 m),30.00%(3 658 m).青藏线上,出现症状多为头昏(71名)、其次是胸闷(61名)、头痛(57名)、失眠(50名)、气短(49名)等.结论新兵乘火车急进高原生理改变以动脉血氧饱和度下降及心率增快为主,急性高原反应以轻至中度为主,无重型高原病发生.
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葡萄柚漱口液抗变异链球菌生物膜效果的激光共聚焦扫描显微镜观察
目的观察葡萄柚漱口液对不同阶段变异链球菌生物膜的作用效果,并与西吡氯铵漱口液相比较.方法体外形成3、24、48 h变异链球菌生物膜模型,各组漱口液作用1 min后,(葡萄柚漱口液为实验组,设PBS液和西吡氯铵漱口液作为空白和阳性对照组),荧光染料染色生物膜中的死菌和活菌,激光共聚焦扫描显微镜观察并比较漱口液处理前后活菌百分比的变化.结果葡萄柚漱口液与空白组相较,各时段生物膜经处理后,3 h变异链球菌生物膜外层和中间层的活菌百分比,以及24、48 h生物膜外层的活菌百分比均有明显降低,两者间均有显著性差异(P<0.05);与阳性组相比较,二者间各层活菌百分比无显著性差异(P>0.05).结论葡萄柚漱口液对各时段生物膜的外层细菌有杀伤作用,但仅能影响早期(3 h)变异链球菌生物膜的深层细菌生存,与西吡氯铵漱口液对变异链球菌生物膜的作用效果相似.
