第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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高糖对视网膜色素上皮细胞Toll样受体2表达的影响
目的 观察高糖对体外培养的ARPE-19细胞Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)表达的影响及机制.方法 各组ARPE-19(RPE细胞系)细胞分别刺激48 h,正常糖浓度组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、中度高糖组(15.5 mmol/LD-葡萄糖)、高糖组(25.5 mmol/L D-葡萄糖)、PKC-α抑制剂组(25.5 mmol/L D-葡萄糖加10 mmol/L Go6976 PKC-o抑制剂)、高渗对照组(5.5 mmol/L D-葡萄糖加20 mmol/L甘露醇).Western blot检测各组ARPE-19细胞TLR2蛋白表达水平,以及PKC-α蛋白胞浆向胞膜的转位情况；Real-time PCR分析各组ARPE - 19细胞TLR2的mRNA表达水平.结果 与正常糖浓度组相比,高糖组和中度高糖组TLR2的mRNA和蛋白表达,以及PKC-α转位均增加(P＜0.05),并且高糖组高于中度高糖组(P＜0.05).与高糖组比较,PKC-α抑制剂组的TLR2蛋白表达降低(P＜0.05),PKC-α蛋白转位显著降低(P＜0.01).结论 高糖可以上调ARPE-19细胞TLR2的mRNA和蛋白表达,刺激PKC-α转位；高糖可能是通过PKC-α通路上调ARPE-19细胞TLR2表达.
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血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测结果在结直肠癌诊断中的价值
目的 探讨血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)检测结果对结直肠癌(CRC)的诊断价值.方法 采用C-12对130例住院CRC患者(CRC组)和108例门诊体检人员(对照组)血清进行检测,分析C-12在两组人群之间、CRC不同TNM分期之间、C-12包含的12种肿瘤标志物之间、不同肿瘤标志物联合检测之间的阳性率差异.结果 CRC组C-12阳性率显著高于对照组(P＜0.01),随CRC分期升高而上升(P＜0.01),其中CEA、CA242、CA19-9阳性率显著高于其余9项肿瘤标志物(P＜0.01),CEA联合CA242、CA19-9检测能提高敏感度,但它们之间联合检测或12项肿瘤标志物联合检测与单项肿瘤标志物CEA相比差异无显著性(P＞0.05).结论 C-12有助于CRC诊断,临床分期越晚诊断价值越高,其中CEA、CA242、CA19-9的诊断价值优于其余9项肿瘤标志物,多肿瘤标志物联合检测能提高检测敏感度,但并不显著优于单项肿瘤标志物CEA.
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乳腺癌前病变组织原代成纤维细胞生物学特征初步研究
目的 比较乳腺导管不典型增生成纤维细胞(atypical intraductal hyperplasia fibroblasts,AFs)与正常乳腺成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)、乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)在生物学特征上的差异.方法 采用Ⅰ型胶原酶法分离并培养AFs、NFs和CAFs,免疫细胞荧光化学检测其粘连蛋白(fibronectin,FN)表达以鉴定细胞纯度.比较3种细胞的细胞生长曲线、细胞周期和周期蛋白cyclin D1、p21wafl及p53的变化.结果 获得并鉴定了NFs、AFs、CAFs；其生长速度依次增加(P＜0.05),细胞周期S期百分比(8.24±2.47)、(16.94 ±4.77)、(33.31±7.90)依次增大(P＜0.05)；与NFs相比,AFs周期蛋白cyclin D1表达增加(P＜0.05),p21wafl和p53蛋白表达降低(P＜0.05)；与CAFs相比,AFs的周期蛋白cyclin D1没有升高(P＜0.05),p21 wafl蛋白和p53蛋白表达更强(P＜0.05).结论 AFs相对于NFs和CAFs,细胞生长增殖具有特异性,这种变化提示乳腺肿瘤的癌前病变阶段AFs可能是NFs逐步向CAFs转变的过渡阶段.
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品行障碍青少年执行功能的对照研究
目的 使用剑桥神经心理自动化成套测试(CANTAB)探讨青少年品行障碍与执行功能的关系.方法 采用韦氏成人智力测验(WAIS)简易版、CANTAB中的内外空间成套变换(IED)、剑桥袋球(SOC)和空间工作记忆(SWM)对86名品行障碍青少年和110名职高学生进行对照研究.结果 品行障碍青少年的智商水平(98.17±5.07)低于对照组[(103.42±5.40),P＜0.01]；在IED中,品行障碍青少年的外维转换前期错误数、外维转换期错误数、错误总数[(12.23±9.15)、(16.69±10.57)、(35.44±11.09)次]均多于对照组[(8.31±3.80)、(13.07±10.31)、(25.63±12.24)次,P＜0.01],阶段完成数[(7.47±1.96)次]少于对照组[(8.29±0.91)次,P＜0.05]；在SOC中,品行障碍青少年完成任务的少步数(7.65±1.96)多于对照组[(6.70±2.05),P＜0.01],3步和5步的平均步数多于对照组(P＜0.05),4步和5步的起始思考时间短于对照组(P＜0.05)；在SWM中,品行障碍青少年总的组间搜索错误数[(27.56±18.88)次]多于对照组[ (20.47±18.40)次,P＜0.01],在6个和8个盒子中的组间搜索错误数均多于对照组(P＜0.01),策略分[(33.84±4.58)分]高于对照组[(32.00 ±5.05)分,P＜0.01].结论 品行障碍青少年在执行功能方面存在一定的缺陷.
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与肝X受体相关的脂肪酸合酶转录调控区乙酰化组蛋白动态表达
目的 利用肝X受体(liver X receptor,LXRs)激动剂T0901317,对脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)基因转录调控区的组蛋白乙酰化状态进行研究,探讨FAS基因转录表达中是否存在组蛋白乙酰化引起的染色质重塑事件.方法 用实时荧光定量PCR方法测定FAS mRNA的转录表达时间谱.通过染色质免疫沉淀技术,结合实时荧光定量PCR测定脂肪酸合酶基因转录调控区4个位点上乙酰化组蛋白H3和乙酰化组蛋白H4的表达情况.结果 ①T0901317作用2h开始FAS mRNA表达呈时间依赖性增高(1.09倍,P＞0.05),16 h达到峰值(4.25倍,P＜0.01),48 h时仍明显高于0h的表达(2.59倍,P＜0.01).②T0901317作用30 min,组蛋白H3乙酰化水平显著高于0h水平(P＜0.05),1h降至0h水平以下(仅上游2 000 bp位点差异有统计学意义P＜0.05),2h又接近或高于0h水平(仅LXRE位点增高有统计学意义P ＜0.05).③T0901317作用30 min,组蛋白H4乙酰化水平均较0h增高(P＜0.05),而1h和2h,其水平均低于0 h(P ＜0.05).结论 在LXRs激动剂T0901317的作用下,FAS基因mRNA水平呈时间依赖性增高；而在FAS基因转录早期,FAS基因转录起始点上下游约2 500 bp位置范围均有组蛋白乙酰化引起的染色质重塑改变,但这种改变是随位置、时间和组蛋白的不同,呈动态变化的过程.
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沉默孕烷X受体增强结肠癌LS174T细胞对奥沙利铂敏感性的影响
目的 观察沉默孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)表达对结肠癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响,初步探讨其可能机制.方法 构建PXR基因的siRNA质粒表达载体,转染结肠癌LS17T细胞,并建立稳定表达细胞,用RT-PCR和Western blot方法检测特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)和多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance-associate protein 3,MRP3)表达,MTT方法检测奥沙利铂化疗敏感性.结果 成功建立PXR敲低细胞克隆PXRi 1#、PXRi 2#；在PXRi 1#和PXRi 2#细胞克隆中,MRP3 mRNA及蛋白表达明显下降,SP1表达也下降；与PXRi control相比,细胞克隆PXRi 1#、PXRi 2#奥沙利铂的IC50值均显著降低[(4.83 ±0.22)、(4.75 ±0.19) vs (9.44 ±0.37),P＜0.05].结论 PXR表达沉默可增强结肠癌LS174T细胞对奥沙利铂化疗敏感性,这可能与PXR沉默后,SP1、MRP3表达下调相关.
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基于VEGFR靶点的小分子肿瘤靶向抑制肽的99Tcm标记及鉴定
目的 探讨基于血管内皮生长因子受体( vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)靶点的小分子肿瘤靶向抑制肽理想的放射性核素99 Tcm标记方法.方法 多肽QKRKRKKSRKKH、RKRKRKKSRYIVLS分别经双功能螯合剂S-acetyl-MAG3、GA(D)GG、HYNIC修饰后进行放射性核素99 Tcm标记,HPLC及纸层析法鉴定其标记率及放化纯度,3 H-TdR参入实验鉴定其抑制细胞增殖的能力,体外受体竞争结合实验鉴定其受体结合活性.结果 以HYNIC为双功能螯合剂,这2条多肽的99 Tcm标记率分别为(94.13±1.77)％、(93.79±3.53)％,明显高于S-acetyl-MAG3、GA(D) GG修饰多肽的标记率.经HYNIC修饰后的多肽对肿瘤细胞A549增殖的抑制率约为(32.86±3.36)％、(61.50±4.50)％,与修饰前无明显变化(P＞0.05)；多肽标记后仍保持了良好的VEGFR结合活性,室温下放置24 h后,放化纯度仍高达90％左右.结论 以HYNIC为双功能螯合剂,以TPPTS为协同配体及还原剂,多肽QKRKRKKSRKKH、RKRKRKKSRYIVLS的99Tcm标记率高,且仍具有良好的抑制肿瘤细胞增殖的能力和VEGFR结合活性.
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大豆异黄酮激活PPARγ促进人前列腺癌DU-145细胞凋亡
目的 探讨染料异黄酮( genistein,GEN)和大豆苷元(daidzein,DAI)对人前列腺癌DU-145细胞凋亡的影响及其与过氧化物酶体增殖物激活体受体γ (peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)的关系.方法 采用过氧化物酶体增殖物反应元件(peroxisome proliferator responsive element,PPRE)驱动的荧光素酶报告基因检测GEN、DAI对DU-145细胞PPARγ的激活作用；GEN、DAI单独或联合PPARγ选择性拮抗剂GW9662处理DU-145细胞,采用免疫荧光化学染色方法观察PPARγ定位分布变化；TUNEL法和Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡的变化.结果 GEN、DAI明显增强转染PPRE-TK-Luc质粒的DU-145细胞中荧光素酶表达活性,且这种作用可被GW9662所逆转.GEN或DAI单独作用于DU-145细胞时,PPARγ发生核移位；细胞凋亡率明显增加(P＜0.05).GW9662分别与GEN或DAI联合作用时,GEN、DAI促进PPARγ核移位和诱导细胞凋亡的作用明显削弱(P＜0.05).结论 大豆异黄酮可通过激活PPARγ信号途径,促进人前列腺癌DU-145细胞凋亡.
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前列腺癌根治术后病理分期、Gleason评分与术前血清PSA的相关性分析
目的 探讨前列腺癌患者根治术后病理分期、Gleason评分与术前血清PSA的相关性.方法 收集香港中文大学附属威尔斯亲王医院泌尿外科2008年1月至2010年9月采用4-臂daVinci S-HD机器人外科手术系统施行前列腺根治性切除术的100例前列腺癌患者的临床资料数据,采用Spearman等级相关分析探讨根治术后病理分期、Gleason评分与术前血清PSA的相关性.结果 患者PSA值与Gleason评分呈正相关(r=0.382,P＜0.01),PSA值越高,Gleason评分值越高.PSA值与病理分期无明确的相关性(r=-0.073,P＞0.05).结论 前列腺癌患者术前血清PSA与根治术后Gleason评分有关,与病理分期无明确的相关性.
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不同膳食脂肪酸对肝细胞SREBP-1c表达及脂代谢的影响
目的 探讨不同膳食脂肪酸构成对肝细胞脂代谢及固醇调节元件结合蛋白-lc( sterol-regulatory elementary binding protein-1c,SREBP-1c)表达的影响.方法 以HepG2肝细胞为研究对象,分为空白对照组、二十碳五烯酸(EPA)组、棕榈酸(PA)组、EPA和亚油酸(LA)1:1混合组、PA和油酸(OA) 1:1混合组,EPA、PA单独处理组终浓度为150 μmol/L,混合处理组各组分浓度为75 μmol/L,总浓度为150 μmol/L,处理细胞24 h.采用油红O染色观察细胞内脂滴的变化,测定甘油三酯(TG)含量来评价细胞内脂质含量；采用RT-PCR、Western blot法检测SREBP-1c mRNA及蛋白的表达.结果 PA组、PA和OA 1:1混合组SREBP-1c mRNA及蛋白的表达上调,EPA和LA 1:1混合组、EPA组SREBP-1c mRNA及蛋白的表达下调,与对照组相比差异显著(P＜0.05).与对照组相比,EPA和LA 1:1混合组、EPA组肝细胞内TG含量显著减少(P＜0.05)；PA和OA 1:1混合组、PA组肝细胞内TG含量显著增加(P＜0.05).结论 PA、OA上调肝细胞SREBP-1 c的表达并促进细胞内TG的合成,可能促进肝细胞脂肪变性；而EPA、LA下调肝细胞SREBP-1c的表达并显著降低肝细胞内TG含量,减轻肝细胞脂肪变性.
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5-羟色胺转运体敲除小鼠在应激下焦虑行为和HPA轴的改变
目的 研究5-羟色胺转运体( serotonin transporter,SERT)敲除小鼠焦虑行为及ACTH和皮质酮分泌变化.方法 将基因型为SERT+/-的雌雄小鼠交配产子,并把鉴定后子代小鼠按基因型(SERT+/+、SERT+/-、SERT -)分为对照组和EPM组,每组15只.利用高架十字迷宫作为应激原刺激小鼠,观察各组小鼠的焦虑行为,并测定各组小鼠的ACTH和皮质酮分泌.结果 ①基因型PCR成功鉴定SERT+/+、SERT+/-和SERT-/-的小鼠.②SERT+/-和SERT - -小鼠的开臂停留时间、开臂停留时间百分比、进入开臂的次数和进入开臂的次数百分比较SERT+/+均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).③EPM刺激下,SERT+/-和SERT-/-小鼠ACTH分泌的增加显著高于SERT+/+(P＜0.05),SERT-/-小鼠皮质酮分泌的增加显著高于SERT+/+ (P ＜0.05).结论 SERT敲除小鼠在应激条件下易产生焦虑,并且ACTH和皮质酮分泌显著升高.
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自体骨髓干细胞移植治疗2型糖尿病的安全性及有效性
目的 探讨自体骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)经胰背动脉移植治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的有效性及安全性.方法 回顾性分析2009年6月至2011年4月在我科住院符合纳入标准的6例2型糖尿病患者(3男3女),年龄(45.67±14.92)岁,实施自体骨髓干细胞移植.①动员骨髓；②采集骨髓；③分离骨髓干细胞；④将骨髓干细胞注入胰背动脉；⑤观察移植前后血糖、糖化血红蛋白( glycosylated hemoglobin,HbA1c)、胰岛功能、C肽曲线下面积(area under curve for C-peptide,AUCC)及胰岛素用量等变化,记录治疗过程中及治疗后的不良反应；对干细胞移植的安全性及疗效进行评估.结果 移植前后:①糖化血红蛋白由( 10.33±2.78)％降至(7.05±0.90)％,有2例患者的糖化血红蛋白＜7％；②空腹C肽( fasting C-peptide,FC-P)由(0.71±0.54) ng/ml升至(1.54±0.63) ng/ml(P＜0.05),餐后2hC肽(2 h postprandial C-peptide,2 h C-P)由(1.63±0.88) ng/ml升至(4.67 ±2.31 )ng/ml(P ＜0.05),C肽曲线下面积由(2.29±1.31) ng/ml增至(6.05±2.94) ng/ml(P ＜0.05)；③胰岛素用量由(27.17±13.08) U/d降到(18.63±7.04) U/d,其中2位患者停用皮下注射胰岛素改为口服药物降糖治疗；④自体骨髓干细胞移植过程中及术后随访均未观察到不良反应,移植前后肿瘤标志物及血淀粉酶均正常.结论 自体骨髓来源干细胞移植可改善2型糖尿病患者的胰岛功能,减轻其对外源性降糖药物的依赖,且安全性可行.
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3种不同survivin基因启动子驱动Apoptin表达的重组慢病毒构建及体外抑瘤效果比较
目的 构建3种不同长度的survivin基因启动子融合6×his标签Apoptin cDNA的重组慢病毒载体,经鉴定后行慢病毒包装并感染人结直肠癌细胞( SW480),体外实验观察并比较抑瘤效果.方法 克隆3种不同长度的人survivin基因启动子(160、270、987 bp)和Apoptin-6×his cDNA,将其分别连接到pMD18-T载体并在该载体上完成survivin 基因启动子和Apoptin基因组装.将组装好的表达盒构建入polyA改造后的慢病毒载体FG12中,利用三质粒包装系统包装成慢病毒.为观察重组慢病毒的抑瘤效果,以适MOI值感染SW480肿瘤细胞后第5天及第30天,利用Annexin V-PE/7-AAD凋亡试剂盒和流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化,Western blot检测Apoptin-6×his表达.结果 成功构建3种重组慢病毒载体,经包装浓缩后获得高滴度病毒,可以有效地感染目的细胞(感染效率大于80％).体外结果提示病毒感染的SW480可以正确表达Apoptin-6×his蛋白,并能在感染后第30天出现明显的凋亡/坏死.其中,含有270 bp启动子的慢病毒抑瘤作用更为明显.结论 采用270 bp survivin启动子,apoptin基因构建的重组慢病毒在靶细胞中显示出较好的抑瘤效果.
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RNA干扰PDK-1对5-FU诱导结肠癌细胞凋亡的促进作用
目的 探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用.方法 针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构建pGenesil.1-PDK-1重组质粒表达载体及pGenesil.1-NC阴性对照载体,利用脂质体分别将质粒转染入LS174T,并用G418对细胞进行药物筛选,并通过Real-time PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性.MTT实验检测5-FU对干扰组和对照组细胞生长、增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 Real-time PCR 和Western blot证实3个干扰组均抑制PDK-1表达,其中大敲减效率超过70％.MTT实验结果显示,经5-FU同样处理48 h后,PDK-1干扰的LS174T细胞生长抑制率较对照组显著增高(P＜0.05)；流式细胞仪结果显示,干扰组细胞凋亡率较对照组增高(P＜0.05).结论 PDK-1 shRNA能特异性下调LS174T细胞中PDK-1的表达,PDK-1干扰联合5-FU可促进结肠癌细胞化疗诱导凋亡.
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姜黄素通过P53/P21/PCNA/eIF4E信号通路抑制A549细胞增殖
目的 研究姜黄素对A549细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的分子机制.方法 不同浓度姜黄素处理A549细胞后,分别用平板克隆形成实验、MTT法检测A549细胞的克隆形成数和增殖.20 μmol/L姜黄素处理A549细胞24、48、72 h后,FCM检测细胞周期；RT-PCR、Western blot检测P53、P21、PCNA及eIF4E mRNA和蛋白的表达水平.结果 20 μmol/L姜黄素可引起A549细胞S期阻滞,抑制细胞增殖,减少细胞的克隆形成数.20 μmol/L姜黄素作用A54924 h后P53、P21 mRNA和蛋白表达上调,48 h或72 h后变得尤明显.此外,20μmol/L姜黄素处理A549细胞48 h后可引起PCNA、eIF4E mRNA和蛋白表达水平下调,72 h后尤明显.结论 姜黄素可抑制A549的克隆形成数和细胞增殖,其机制可能与姜黄素促进P53和P21基因表达,抑制PCNA和eIF4E基因表达有关.
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早期2型糖尿病大鼠胃动力变化与胃血管病变的关系
目的 研究胃组织一氧化氮( nitric oxide,NO)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)与可溶性内皮细胞蛋白C受体(soluble endothelial cell protein C receptor,sEPCR)的变化情况,探讨早期糖尿病胃动力异常与胃血管病变的关系.方法 25只SPF级雄性SD大鼠分为正常对照组(NC组,n=10)、糖尿病组(DM组,n=15).高糖高脂饲料喂养并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型.12周后应用单光子发射断层显像仪(SPECT)技术测定胃半排时间与胃排空速率,采用酶联免疫法测血清sEPCR,硝酸还原酶法测定胃组织NO含量,免疫组织化学方法测定胃组织eNOS免疫阳性染色密度.结果 DM组大鼠胃半排时间(30.82±12.56) min、NO( 30.82±12.56) μmol/L、eNOS平均光密度(0.36±0.15)均明显低于NC组(P＜0.05),血清sEPCR( 129.45 ±4.83) μg/L明显高于NC组(P＜0.01).结论 2型糖尿病大鼠早期胃动力加快,血管内皮功能受损,血管病变可能是胃动力障碍的始动因素.
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表皮生长因子受体和整合素通路交叉作用对胃癌细胞侵袭的影响
目的 了解表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和整合素信号通路在胃癌细胞SGC7901中的交叉反应和对细胞侵袭增殖的影响.方法 使用EGF和Fn刺激SGC7901细胞,免疫沉淀和蛋白质电泳检测ERK、FAK和p130cas总蛋白和FAK Y397、p130cas Y410和ERK总酪氨酸磷酸化的改变；使用改良Boyden小室法检测胃癌细胞侵袭力；MTT法检测细胞增殖的改变；使用RNA干扰降低FAK表达,观察FAK低表达对交叉反应和胃癌侵袭增殖的影响.结果 ERK、FAK和p130cas总蛋白在刺激前后无变化(P＞0.05).Fn刺激后,ERK总酪氨酸磷酸化增强了2.90倍(P＜0.05),细胞侵袭力增强了2.36倍(P＜0.05),24 h MTT值升高了1.68倍(P＜0.05)；EGF刺激后,FAKY397磷酸化增强了2.75倍(P＜0.05),p130cas Y410磷酸化增强了4.33倍(P＜0.05),细胞侵袭力增强了1.50倍(P＜0.05),24 h MTT值分别升高了1.76倍(P＜0.05).转染FAK siRNA组细胞,FAK Y397磷酸化表达只有对照组的0.30倍(P＜0.05)；Fn刺激后,ERK总磷酸化表达只有对照组的0.66倍(P＜0.05),细胞侵袭力只有对照组的0.37倍(P＜0.05),24 h MTT值只有对照组的0.63倍(P＜0.05)；EGF刺激后,p130 Y410磷酸化只有对照组的0.49倍(P＜0.05),细胞侵袭力只有对照组的0.48倍(P＜0.05),24 h MTT值只有对照组0.77倍(P＜0.05).结论 EGFR和整合素信号在胃癌细胞中发生交叉反应,FAK是其中的关键信号分子,阻断FAK表达可以有效抑制两条信号通路引起的胃癌细胞侵袭和增殖.
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RNA干扰HER2/neu对膀胱癌BIU-87细胞增殖和凋亡的影响
目的 研究靶向HER2/neu基因的siRNA对膀胱癌BIU-87细胞增殖和凋亡的影响.方法 化学合成的靶向HER2/neu基因siRNA在脂质体的介导下转染BIU-87细胞,实验分为HER2/neu siRNA组、空脂质体组、阴性siRNA序列组,以未转染BIU-87细胞为空白对照组.利用CCK-8法评价HER2/neu基因siRNA对BIU-87细胞体外生长的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测转染前后细胞中HER2/neu mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 转染HER2/neu siRNA后BIU-87细胞的存活率显著下降,从(82.37±0.90)％降低到(56.76±1.70)％,差异有统计学意义(P＜0.05)；同时能诱导细胞凋亡,HER2/neu siRNA组凋亡率达(45.60±0.70)％,与空白对照组、空脂质体组、阴性siRNA序列组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；靶向HER2/neu基因siRNA能显著降低BIU-87细胞中HER2/neu mRNA和蛋白的表达(P＜0.05).结论 化学合成的靶向HER2/neu基因siRNA能有效抑制HER2/neu基因在BIU-87细胞中的表达,进而能有效抑制BIU-87细胞的增殖和诱导凋亡的作用.
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筛选调节HBV增殖和HBsAg产生的宿主细胞的miRNA
目的 筛选调节乙型肝炎病毒( HBV)增殖和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)产生的宿主细胞的miRNA.方法 用328种miRNA的反义链转染HepG2 2.2.15细胞,72 h收获上清,MTS检测细胞的增殖活性,ELISA检测表面抗原和e抗原的表达水平,实时定量PCR检测其中HBV DNA的拷贝数.构建筛选到的miRNA的过表达载体,转染HepG22.2.15细胞,也分别用MTS、ELISA和实时定量PCR进行检测.结果 miR-199a-3pASO、miR-210ASO和miR-185ASO促进了HBsAg产生和HBV增殖(P ＜0.05)；miR-199a-3p、miR-210、miR-185的过表达,分别抑制了HBsAg的产生和HBV的增殖(P＜0.05)；miR-199a-3p、miR-210和miR-185的ASO转染组与对照组相比,分别降低了细胞内miR-199a-3p、miR-210和miR-185的表达水平(P＜0.05)；miR-199a-3p、miR-210和miR-185的过表达载体转染组与对照组相比,分别增加了细胞内miR-199a-3p、miR-210和miR-185的表达水平(P＜0.05).结论 在没有对细胞的增殖活性产生影响的情况下,miR-199a-3p、miR-210和miR-185抑制了HBV表面抗原的产生和HBV的增殖,miRNA作为病毒与宿主细胞相互作用中的调节因子,在HBV的生命活动周期中具有重要作用.
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肾小球巨大稀少症1例
1临床资料患者,女性,45岁,因双下肢水肿2个月于2011年6月16日入院.患者于2个月前出现颜面及双下肢水肿,晨轻暮重,查尿常规(-),血清肌酐107.4 μmoL/L,为明确肾功能减退原因入院.入院查体:体温36.2℃,心率76/min,呼吸18/min,血压125/76 mmHg.身高164 cm,体质量45 kg.贫血貌,皮肤及眼睑苍白,双下肢Ⅰ度水肿,其余阴性.实验室检查:血红蛋白99 g/L,白细胞3.8×109/L,血小板84×109/L,血清总蛋白68.2 g/L,白蛋白42.5 g/L,球蛋白25.7 g/L,血清肌酐107.8 μmol/L,尿素氮4.44 mmol/L,尿酸369.2 μmol/L,血胱抑素C 1.02 mg/L,血清免疫球蛋白、补体正常,自身抗体阴性;尿常规(-),蛋白定量0.14 g/24 h.双肾超声左肾92 mm×34 mm,右肾87 mm×36 mm,回声增强.
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Sturge-Weber综合征伴脑皮质发育不良1例
Sturge-Weber综合征,又称为脑颜面血管瘤病或软脑膜血管瘤病,是一种先天性神经皮肤的发育异常,在临床上少见报道[1].我科于2011年8月20日收治1例患儿,伴有脑皮质发育不良,分析其临床表现及MRI、脑电图表现,现报告如下.1临床资料 患儿,男性,2岁,因"阵发性抽搐1年余"来我科就诊.患儿无明显诱因出现发作性抽搐,伴有双眼凝视,牙关紧闭,肢体抽搐,持续数分钟,反复发作,间隔时间不等.患儿足月顺产,系第1胎第1产,母亲孕期体健无病毒感染史,非近亲婚育.否认出生时宫内窒息史,否认家族中有遗传病、传染病及类似疾病史.出生后发现额、面、颈部皮肤散在火焰状鲜红斑痣,以左侧为主,我院皮肤科诊断为"面部鲜红斑痣".1年前患儿家长发现患儿左眼角膜较右眼大,不伴畏光、流泪、哭闹等,偶尔左眼红,后发现双眼角膜逐渐透明、增大.我院眼科A超示双眼眼压增高,诊断为"青光眼".
关键词： Sturge-Weber综合征 脑皮质发育不良 -
鼻腔NK/T细胞型淋巴瘤活检病理诊断19例
1资料与方法2005年6月至2010年6月,我科对26例怀疑鼻腔内NK/T细胞型淋巴瘤患者进行病理活检检查.其中7例反复活检5次以上,并临床观察12个月以上,排除该病;19例确诊为NK/T细胞型淋巴瘤.19例患者中,男性12例,女性7例,年龄21～73岁,平均53.3岁.
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儿童颈部腺泡状横纹肌肉瘤1例
1临床资料患者,男性,14岁.因颈部外伤后颈部疼痛、活动受限3周于2011年5月21日入我院.查体:颈部僵直,压痛,颈部屈伸、旋转、侧屈活动受限,伴疼痛,双上肢肌力、肌张力正常,皮肤感觉及血运未见明显异常.外院X线片:寰枢椎向前脱位,颈椎生理曲度变直.入院后1周行物理治疗(颌枕带牵引),颈部疼痛有所缓解.颈椎MRI平扫及增强扫描示:颈2、3椎体后缘欠连续,平扫齿状突信号略显不均匀.颈2～4椎体平面椎体、附件旁及周围软组织内见不规则形片状异常信号,T1WI呈低信号,T2WI呈高信号,信号欠均匀,范围约5.3 cm ×5.0 cm,边界欠清,与椎管、椎体分界不清,并沿椎间孔走行,向椎管内生长,自左右方向压迫颈髓致局部变形,增强扫描病变强化明显、信号较均匀.双侧椎间孔扩大,颈髓左右方向受压、变形,前后方向受压不明显,未见异常强化;颈椎椎体信号未见明显异常强化(图1).颈后肌肉穿刺活检见弥漫性小细胞浸润,侵犯肌组织,肿瘤细胞呈"圆形",胞浆偏少,部分呈嗜酸性红染,胞核异型性明显,核分裂易见(图2).免疫组化染色:MyoD1(-),Desmin(+),Myogenin(+),CD99(+),FLI-1(-),CK(-),Vim(+).
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Cantrell综合征1例
Cantrell综合征是一种涉及心脏、腹壁发育异常的复杂性先天性畸形[1].因病例罕见、病情复杂,诊断困难,容易导致误诊及漏诊.我院儿科近期收治1例,现报告如下.1临床资料患儿,男性,12d.系第5胎第2产,体质量4.04 kg.因发现上腹部异常搏动区12 d于2011年1月25日收入新桥医院儿科.体检:腹部畸形,上腹部见异常搏动区,表面无皮肤覆盖,左上至右下斜行走形,面积约1.5 cm×3.5 cm,搏动与心音同步,中腹部见菱形皮损面,约1.0cm×1.5 cm,外周见菱形深棕色皮肤,约1.0 cm ×3.0 cm,其下端与脐窝相连,皮损面及腋窝见黄色分泌物附着(图1).CT检查:胸部及上腹部64排CT血管造影(CTA)检查.心脏增大,心尖朝向左前下方.
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子宫动脉栓塞术治疗26例中晚期妊娠前置胎盘的护理
子宫动脉栓塞术是近年来预防前置胎盘产后大出血的新方法、新技术.它具有安全、微创、痛苦小、有效预防产后大出血、保持子宫完整性等优点[1].2010年6月至2011年3月,我们对26例前置胎盘中晚期妊娠需要终止妊娠的孕妇采用子宫动脉栓塞术结合利凡诺羊膜腔内注射引产治疗,疗效满意.
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甘肃裕固族、东乡族、保安族人群CD14基因启动子区-159C/T多态性研究
目的 了解裕固族、东乡族、保安族人群CD14基因启动子区- 159位点基因多态性及其分布特点.方法 采用梯度PCR-RFLP技术研究以上3个民族人群CD14 - 159C/T基因多态性,并与文献报道的我国不同地区汉族人群进行对比分析.结果 裕固族、东乡族、保安族3个民族的研究样本CD14 - 159C/T位点频率分布均服从哈代-温伯格平衡,3个民族CD14 - 159C/T位点均以C等位为主,C等位检测频率分别为68.75％、82.40％、73.33％.我国不同地区汉族人群CD14 - 159C/T位点等位均以T等位为主,T等位频率分布在50.66％ ～63.94％之间.结论 裕固族、东乡族、保安族人群CD14 -159基因多态性分布特点与中国汉族人群存在明显差别,- 159位点等位在裕固族、东乡族、保安族人群中均以C等位为主,我国不同地区汉族人群均以T等位为主.
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21例外伤后顽固性癫痫的诊断评估和外科治疗分析
目的 探讨外伤后顽固性癫痫的术前评估和手术治疗方法,总结手术治疗经验.方法 回顾性分析第三军医大学西南医院2007年1月至2010年12月21例外伤后顽固性癫痫患者的临床资料,其中男性15例,女性6例,平均年龄25岁,术前采用MRI、视频脑电图(VEEG)、脑磁图(MEG)、单光子发射计算机断层扫描(SPECT)联合定位致痫灶,术中在皮层脑电图(ECoG)监测下采用多种术式联合治疗.结果 21例患者术前致痫灶定位与术中皮层脑电图定位的一致率为100％；经随访6个月至3.5年,满意13例；显著改善7例；良好1例.结论 电生理检查准确定位致痫灶后,恰当的外科手术是治疗外伤性顽固性癫痫的有效方法.
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结肠癌术后辅助化疗的共识与争议
根据美国1992 - 2004年130 762例结肠癌(不包括转移性结肠癌)的统计资料,不同分期(AJCC 2010年)的5年生存率分别为:Ⅰ期97.1％,ⅡA期87.5％,ⅡB期79.6％,ⅡC期58.4％,ⅢA期87.2％,ⅢB期64.9％,ⅢC期32.9％[1-2],结果显示分期较早的患者,其疗效并不一定优于分期较晚者,ⅢA期5年生存率明显高于ⅡC期,也高于ⅡB期,与ⅡA期相似,其原因与Ⅲ期患者通常接受术后辅助化疗有关.结肠癌根治性外科切除术后是否进行辅助化疗,目前在Ⅰ期和Ⅲ期患者中已达成共识,即:Ⅰ期不需要辅助化疗,Ⅲ期可从辅助化疗中受益;而对于Ⅱ期结肠癌辅助化疗的价值,既有共识,亦存在争议.<作者简介>=梁后杰,男,博士,主任医师,教授,博士生导师,担任中国抗癌协会临床肿瘤学会协作专业委员会(CSCO)执行委员会常务委员,中国临床肿瘤学会胃肠神经内分泌瘤专家委员会主任委员,中国临床肿瘤学会肝癌专家委员会副主任委员,中国临床肿瘤学会肿瘤营养治疗专家委员会副主任委员,重庆市医学会肿瘤专业委员会主任委员,重庆抗癌协会肿瘤分子靶向治疗专业委员会主任委员.国家自然科学基金和重庆市科学基金评审专家.长期从事肿瘤化疗和消化系肿瘤的基础研究和临床工作,主要研究方向为肿瘤耐药机制及肿瘤分子靶向治疗.获军队科技进步奖5项,承担973项目分题、国家自然科学基金、重庆市自然科学基金重点课题等各类课题10余项,发表论文200余篇.
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第21届迪拜世界糖尿病大会简介
1会议概况第21届迪拜世界糖尿病大会(World Diabetes Congress,WDC)于2011年12月4-8日在阿拉伯联合酋长国迪拜隆重举行.这次大会由非政府组织国际糖尿病联盟(IDF)联合世界卫生组织(WHO)举办.本届大会是IDF历史上规模大的一届,共有14 000人参会.本次大会主要目标是:①鼓励各国政府行动起来共同抗击糖尿病;②扩大糖尿病领域的政治对话.本次会议围绕临床与基础科学、教育与综合护理、全球健康挑战、健康系统与流行病学、糖尿病患者的生活等五个方面展开了新的研究报告以及热烈的讨论.主要研究内容涉及糖尿病的遗传、发病机制、预防、治疗和相关并发症.
