第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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嗅鞘细胞移植后通过分泌MMP-3在RCS-P+大鼠视网膜中迁移
目的 初步研究将嗅鞘细胞( olfactory ensheathing cells,OECs)及嗅球成纤维细胞(olfactory nerve fibroblasts,ONF)混合细胞移植到皇家外科学院大鼠(Royal College of Surgeon rat,RCS-P+ rat)的视网膜下腔后,OECs/ONF迁移进入视网膜的机制.方法 离体实验中,取成年RCS-rdy+-P+大鼠的嗅球培养OECs/ONF至14d行OECs/ONF的基质金属蛋白酶-3(matrix- metalloproteinase-3,MMP-3)细胞免疫荧光染色.收集5、8、11、14 d OECs/ONF培养液上清,与普通培养液超滤后进行酶联免疫吸附实验( ELISA),检测MMP-3的含量变化.在体实验中,制作40只RCS-P+大鼠单眼视网膜下腔细胞移植,并以对侧眼作为伪手术组以及相同天龄未处理大鼠作为对照组.术后7、14、21、28 d用ELISA法检测细胞移植组、伪手术组及未处理组大鼠视网膜中MMP-3含量的变化.将携带绿色荧光的慢病毒感染后的OECs/ONF移植到4只RCS-P+大鼠视网膜下腔,激光共聚焦显微镜观察移植后7、14、21 d及28 d OECs/ONF在视网膜中迁移情况.结果 离体实验中,培养14d时OECs/ONF的MMP-3免疫细胞化学染色阳性.OECs/ONF培养液上清MMP-3含量分别为5d(2.83±0.80)、8 d(6.34±1.12)、11 d(11.65±1.35)、14 d(19.11 ±2.11),明显高于普通D/F12+ 10％ FBS培养液(1.65±0.44) (P＜0.01)；在体实验中,移植后21 d及28 d,OECs/ONF移植组视网膜MMP-3的含量[(1.80±0 29)、(3.96±0.51)]明显高于伪手术组[(1.17±0.20)、(1.83±0.26)]和未处理组[(1.19±0.17)、(1.92±0.25)](P＜0.01),伪手术组与未处理组之间无明显统计学差异(P＞0.05).激光共聚焦显微镜观察可见移植后7～28 d,OECs/ONF 在视网膜中迁移,远能够达到神经节细胞层.结论 OECs/ONF移植到RCS视网膜下腔后,可能通过分泌MMP-3在RCS-P+大鼠视网膜中迁移.
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猪源生物型人工骨进行胸壁重建的可行性及疗效分析
目的 探讨用猪源生物材料骨进行骨性胸壁修复重建的方法及疗效.方法 对6只中国杂种犬进行右侧开胸,切除第5～7肋及肋间肌,胸壁缺损9 cm×8 cm,用人工骨替移植替代第5、6肋.术后1周及1、3、6、12个月分别行X线照片检查,观察人工骨有无发生移位、脱落、变形及植入骨溶解变薄.术后6、12个月各解剖2只动物,分别进行大体检查,观察人工骨与犬自体骨连接处有无骨痂形成,对位、对线是否良好,犬胸壁内外表面弧度与犬胸壁是否一致；进行组织学检查,观察植入骨与犬自身骨交界处组织结构及植入骨周围有无排异反应.余下2只进行长期观察,以预测人工骨长期置入体内的可能性及转归.结果 6例动物全部长期存活,X线检查人工骨无移位、脱落、变形及植入骨溶解变薄等.大体观察犬骨性胸壁内外表面塑形良好,人工骨与犬自体骨连接处有明显的骨组织及软骨组织和明显骨痂形成,移植骨对位、对线均良好；组织学观察植入骨与犬自身骨交界处由骨组织和软骨组织组成,外层为骨膜组织,有成骨细胞和破骨细胞存在,未见炎细胞浸润等排异反应,移植骨中段为纤维结缔组织包绕,内有新生血管形成.结论 猪源生物型人工肋骨是一种优质骨性胸壁重建材料,置入机体后具有逐渐溶解破坏并向自体骨转化倾向.
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白细胞介素-28B的基因多态性与干扰素抗丙型肝炎病毒治疗应答的关系
目的 探讨IL-28B基因多态性与慢性丙型肝炎患者对干扰素治疗应答的关系.方法 采用分子生物学方法提取基因组DNA,PCR扩增后直接测序,对我院感染科门诊和住院的63例应答组(SVR)和34例无应答组(NVR)的HCV 1型患者的SNPs rs8099917和rs12980275位点进行检测分析.结果 (1)rs12980275只检测到AA、AG,rs8099917只检测到TT、TG,二者均未发现GG型.(2)rs 12980275、rs8099917基因型分布在SVR组和NVR组之间差异均具有统计学意义(OR =3.288,95％CI=[1.171 ～ 9.234],x2=5.416,P =0.020;0R=2.865,95％CI=[1.006～8.154],x2=4 081,P =0.043).(3) rs12980275等位基因频率在SVR组和NVR组之间差异具有统计学意义(OR=2.846,95％ CI=[1.086～7.464],x2=4.828,P=0.028)；rs8099917等位基因频率在SVR组和NVR组之间差异无统计学意义(OR=2 543,95％CI=[0.953 ～ 6.785],x2=3.664,P=0.056).(4)rs 12980275、rs8099917的基因型及等位基因频率在SVR、NVR组中的相关性分析r均大于0(r =0.236,r=0 205,r=0.158,r =0.137),均呈正相关.结论 rs12980275和rs8099917多态性对干扰素抗丙型肝炎病毒治疗应答有重要影响,可以预测抗病毒疗效,为实现个体化治疗提供依据.
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不同厚度和不同透明度铸瓷对树脂黏结剂固化效率的影响
目的 研究不同厚度和不同透明度铸瓷对双固化树脂黏结剂固化效率的影响.方法 选用4种不同透明度(高度透明HTA2、低度透明LTA2、中度不透明MO1、高度不透明HO1)的IPSe.max全瓷,制备成直径为6mm,厚度分别为0.5、1、2、3、4 mm的圆片,共计20个.二极管(LED)光固化灯作为固化光源,VariolinkⅡ作为实验中的双固化树脂黏结剂,根据光照过程中有无铸瓷作为中介分为实验组和空白组.利用傅里叶红外光谱仪检测树脂黏结剂的双键转换率,并通过显微硬度仪记录固化后树脂的表面努氏硬度值.结果 在同一透明度下,VariolinkⅡ树脂黏结剂表面努氏硬度值除HTA2和 LTA2的1.0 mm与2.0 mm之间无显著性差异外(P＞0.05),其余不同厚度组之间均存在显著性差异(P＜0.05),且随着瓷片厚度的增加努氏硬度值呈降低趋势；在相同厚度下,HTA2和LTA2的树脂黏结剂表面努氏硬度值显著高于HO1和MO1 (P ＜0.05),而HTA2与LTA2之间及HO1与MO1之间的努氏硬度值无显著性差异(P＞0.05).不同厚度和不同透明度铸瓷下VariolinkⅡ树脂黏结剂双键转换率均有显著性差异(P＜0.05),且随铸瓷透明度降低及厚度增加呈降低趋势.树脂黏结剂的表面努氏硬度值和双键转换率除了IPSe.max HTA2组外,其余实验组均显著低于空白组(P＜0.05).结论 双固化树脂黏结剂的固化效率受铸瓷厚度和透明度影响,且随其厚度增加及透明度降低固化效率降低.
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骨形态发生蛋白7对胰岛素分泌的影响及机制研究
目的 探讨骨形态发生蛋白7(bone morphorgenetic protein 7,BMP7)对胰岛细胞胰岛素分泌的影响.方法 Westem blot检测小鼠胰岛细胞株MIN6中3种BMP7的Ⅰ型受体BMPR1A、BMPR 1B、ACVR1A的表达情况.将MIN6细胞分为4组:PBS对照组,重组人BMP7( rhBMP7)低、中、高剂量组(rhBMP7终浓度分别为10、50、100 ng/ml),每组设5个复孔.ELISA检测各组细胞培养基中的胰岛素分泌情况.激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度变化.结果 BMPR1A、BMPR1B、ACVR1A均表达于MIN6细胞.PBS对照组及rhBMP7低、中、高剂量组的胰岛素浓度分别为(0.42±0.11)、(0.63±0.22)、(0.82±0.19)、( 1.24 -±0.26) ng/(ml· μg).与对照组相比,rhBMP7低、中、高剂量组的胰岛素分泌均明显增加(P＜0.05).PBS对照组及rhBMP7低、中、高剂量组的细胞内钙离子浓度增加分别为(3.5±2.1)％、(4.2±2.3)％、(5.1±3.5)％、(4.9±2.7)％,4组间差异不显著(P＞0.05).结论 BMP7可显著促进胰岛细胞的胰岛素分泌,其作用机制可能是调控非钙离子浓度依赖的胞吐环节.
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purmorphamine促进人牙周膜干细胞应力成骨
目的 研究purmorphamine在动态张应力促人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,PDLSCs)向成骨细胞分化过程中的作用.方法 分离培养鉴定PDLSCs,在矿化诱导环境中加入purmorphamine,采用Flexcell FX4000T应力加载系统对细胞加力24 h,以Red-time PCR检测成骨相关指标Runx2、alkaline phosphatase(ALP)以及Hedgehog(Hh)通路的标志物GLI1、Pathed1( PTCH1)、Smoothend(SMO).结果 动态张应力作用24 h后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GHI1、PTCH1、SMO的表达水平明显升高(P＜0.05)；加入purmorphamine后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平较加力组均有增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 purmorphamine可能通过激活Hh通路,进而增强人PDLSCs应力条件下向成骨细胞分化.
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TRADD慢病毒载体构建及其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响
目的 构建抗食管支架术后再狭窄携人TRADD基因慢病毒表达载体,并检测其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.方法 以购买的人TRADD基因为模板,采用PCR法扩增目的基因片段,PCR产物经回收纯化后与线性化的慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro重组.重组质粒转化DH5α感受态细胞.菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆测序无误后,质粒共转染293FT细胞制备慢病毒.Real-time定量PCR法检测病毒滴度.Western blot检测TRADD-GFPFLAG融合蛋白的表达.MTT法检测TRADD基因慢病毒对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.结果 菌落PCR扩增产物经凝胶电泳,阳性克隆得到1 200 bp片段,基因测序显示重组质粒中TRADD序列与GenBank中序列一致.包装产生的慢病毒转染293 FT细胞48 h后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,病毒滴度为3.22×108 IU/ml,Western blot检测到融合蛋白TRADD-GFP-FLAG在293FT细胞中获得有效表达,MTT法证实该融合蛋白具有生物活性,能有效抑制瘢痕成纤维细胞增殖.结论 成功构建并包装了pLVX-TRADD-EGFP-3 FLAG-Puro慢病毒表达载体,其可明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖.
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渗透冲击联合超声和去污剂处理对新生牛真皮组织学和生物活性成分的影响
目的 采用渗透冲击联合超声和去污剂处理新生牛真皮,观察处理前后新生牛真皮基质的组织学和生物活性成分的变化.方法 从8头健康雄性新生牛皮肤获取网状层真皮组织.采用反复渗透压改变、超声震荡和去污剂联合法对新生牛网状层真皮进行处理,HE染色、DAPI染色和核酸电泳检测细胞成分残留情况；扫描电镜(SEM)观察胶原束结构和细胞成分；PicoGreen法、DMMB法和BCA法对脱细胞前后真皮基质的DNA、sGAG和蛋白质含量进行定量分析；ELISA法测定脱细胞前后真皮基质内TGF-β1、EGF、bFGF和KGF含量.结果 形态学观察可见脱细胞处理后的真皮三维结构完整,胶原纤维束排列较疏松,细胞清除较彻底,未见明显细胞及细胞碎片残留.与脱细胞处理前比较,脱细胞处理后的DNA含量[(2 516.1 ±324.2) ng/mg vs(249.5±53.8)ng/mg,P =0.000)]、sGAG含量[(5.92±0.50) μg,/mg vs (2.48±0.24) μg/mg,P=0.000]、TGF-β1含量[(478.8±196.1) pg/g vs (180.3±111.0)pg/g,P=0.009]和EGF含量[ (10.52±2.78) pg/g vs未能检测到EGF含量]均明显减少；而bFGF含量[(788.6±333.8) pg/g vs( 364.8±294.8) pg/g,P =0.424]下降了53.7％,KGF含量[(0.033±0.000) pg/g vs (0.033±0.000) pg/g,P=0.433]变化不显著.结论 反复渗透冲击联合超声和去污剂处理对新生牛真皮基质明显地清除了细胞及细胞碎片,较好地保留了真皮细胞外基质的三维结构和主要生物活性成分.
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噬菌体Legendre的生物学特性及抗耐药结核潜力的初步研究
目的 研究噬菌体Legendre的生物学特性并初步探索其用于抗耐药结核的潜力.方法 双层平板法制备Legendre的噬菌斑,观察其特点,纯化噬菌体,电镜观察Legendre形态；提取Legendre基因组,限制性内切酶酶切分析确定其核酸类型；以不同感染复数扩增Legendre,找出佳MOI和小MOI；通过一步生长实验找出Legendre潜伏期、裂解期和裂解量；纯化Legendre颗粒,免疫家兔,获得抗血清,通过中和反应实验测定Legendre以及其他8种噬菌体和Legendre抗血清之间的吸附反应常数K值；采用单斑法测定Legendre的宿主谱；检测Legendre对紫外线、温度、氯仿、酒精、酸碱度的耐受性.结果 Legendre的噬菌斑圆形透明,边界清楚,Legendre头部呈多面体立体对称,直径平均为65 nm,尾长平均为215 nm；基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoR I,HindⅢ及BamH I切开,大小约65 kb;Legendre佳MOI为10-4,小MOI为10-3,Legendre对耻垢分枝杆菌极度易感；Legendre感染宿主菌的潜伏期为180 min,裂解期为120 min,裂解量为13；Legendre K值为697,Legendre抗血清对非对应噬菌体的中和活性有差异,对DNAⅢ、Bo4、Clark、Sedge、Leo高,对TM4、D29中和活性较低；Legendre能裂解耻垢分枝杆菌、结核分枝杆菌标准株、多数临床耐药株；Legendre对紫外线、温度、氯仿、酒精、酸碱度均敏感.结论 Legendre属于长尾噬菌体科,双链DNA噬菌体,抗原性低,宿主谱广,具有抗耐药结核潜力.
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丙戊酸钠对APP/PS1转基因小鼠自主活动及脑形态结构的影响
目的 研究丙戊酸钠( valproic acid,VPA)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠自主活动及脑组织形态结构的影响,探讨VPA对AD的保护作用及可能机制.方法 将3月龄APP/PS1双转基因小鼠及同窝野生型小鼠分为VPA处理组和生理盐水对照组,运用VPA[30 mg/(kg·d)]和等量生理盐水腹腔注射4周.旷场实验观察各组小鼠的自主活动能力；尼氏染色、透射电镜观察各组小鼠脑组织的病理改变.结果 行为学结果显示:与野生型小鼠相比,AD模型小鼠自主活动明显减少(P＜0.05)；野生型小鼠VPA处理组与对照组自主活动无明显差异(P＞0.05)；而AD模型小鼠VPA处理组比对照组的自主活动明显减少(P＜0.05).尼氏染色显示:AD模型小鼠脑内神经元密度显著低于野生型小鼠.AD模型小鼠中,对照组脑内神经细胞明显肿胀,尼氏小体明显减少而致细胞质淡染,神经细胞密度降低(85.2±13.3)；而VPA处理组脑内神经元肿胀程度明显减轻,神经元数量显著回升(116.9±16.2,P＜0.05),但VPA不影响野生型小鼠脑内的神经元数量及形态(VPA处理组:142.2±24.4 vs 生理盐水对照组:136.7±23.1,P＞0.05).电镜结果显示AD模型小鼠对照组脑内神经元细胞核、线粒体及神经毡肿胀明显,突触结构稀松；而AD模型小鼠VPA处理组脑内神经元细胞核、线粒体及神经毡的水肿明显减轻,突触结构清晰.结论 VPA可显著减少APP/PS1双转基因AD模型小鼠的自主行为,显著减轻躁狂症状；VPA可改善APP/PS1双转基因小鼠脑内神经细胞的形态结构,减少肿胀的神经元并抑制神经元数量的减少.
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小鼠肾单位发育过程中的经典凋亡和坏死性凋亡
目的 观察小鼠肾单位发育过程中的程序性细胞死亡现象.方法 应用光镜、透射电镜、原位缺口末端标记法及免疫组织化学技术观察胚龄12、14、16、18 d胎鼠肾单位发育过程中的细胞凋亡.结果 小鼠肾单位发育过程中的程序性细胞死亡主要有经典凋亡、坏死性凋亡和副凋亡3种方式.随着小鼠胚龄增加,凋亡指数逐渐升高,在胚龄18 d达到高峰[(29 45±3.34)％,P＜0.05].Bcl-2和Bax蛋白表达也逐渐增加,均于胚龄18 d达到高峰,分别为(80.52±4.06、33.67±3.42,P＜0.05).结论 小鼠肾单位发育过程中各部位PCD的表现具有明显差异,出现了多种细胞凋亡形式,其中以经典凋亡为主,还出现了坏死性凋亡和副凋亡.
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降钙素基因相关肽对高氧暴露胎鼠原代肺泡Ⅱ型细胞的保护作用及其Wnt信号机制
目的 探讨降钙素基因相关肽(calcitonin generelated peptide,CGRP)是否可促进高氧损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞( typeⅡalveolar epithelial cells,AECⅡ)的存活及其可能涉及的Wnt信号机制.方法 SD胎鼠原代AECⅡ分为空气组、高氧组、高氧+CGRP组、高氧+CGRP+ hCGRP8-37组,采用MTT测定各组细胞增殖,流式细胞仪检测细胞死亡,Western blot检测Wnt7b、β-catenin及p-β-catenin表达.结果 与空气组对照比较,高氧暴露24h后死亡细胞数显著升高(P＜0.01),细胞增殖活性明显受到抑制(P＜0.01),CGRP干预可明显下调高氧暴露后死亡细胞数(P＜0.01),减弱高氧对细胞增殖的抑制作用(P＜0.01).高氧暴露后Wnt7b及β-catenin蛋白表达水平明显降低(P＜0.01),p-β-catenin表达水平显著增加(P＜0.01),CGRP干预后,与单纯高氧暴露组相比Wnt7b、β-catenin蛋白表达水平增加,而p-β-catenin表达水平降低,具统计学差异(P＜0.01).结论 CGRP可减少高氧诱导的细胞死亡、减弱高氧对细胞增殖的抑制效应,改善AECⅡ存活,Wnt7 b/B-catenin通路可能参与了CGRP这一调控过程.
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甲基化修饰致PCDH10基因在多发性骨髓瘤中沉默
目的 研究PCDH10基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者及细胞系KM3、RPMI-8226中的甲基化状态,分析甲基化对其沉默的影响.方法 常规骨髓穿刺术获取MM患者骨髓样本,培养骨髓瘤细胞系KM3、RPMI-8226,以增生性骨髓象骨髓样本作为对照.RT-PCR检测其中PCDH10基因表达水平,甲基化特异性PCR( methylation-sensitive PCR,MSP)法检测PCDH10基因甲基化状态,通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷和组蛋白去乙酰化酶抑制剂[5-aza-2'-deoxycytidiue (Aza) and trichostatin A (TSA),A+T]处理MM细胞系,检测药物处理前后PCDH10甲基化状态及表达水平.结果 PCDH10基因在正常人群中表达,但在MM患者骨髓及细胞系中广泛低表达,且77.27％ (34/44)的MM患者PCDH10呈甲基化状态.PCDH10基因可经A+T试验逆转甲基化状态并恢复表达.结论 DNA甲基化可能在多发性骨髓瘤的PCDH10基因沉默中发挥作用,从而参与骨髓瘤的发生.
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幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性研究
目的 对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性进行研究,探讨Hp感染与胃内菌群的关系.方法 建立HP感染的蒙古沙鼠模型,空白对照组、阴性对照组、直接感染组和预处理感染组各15例,4周后采集胃黏膜样本,同时检测HP定植率,并提取细菌基因组DNA,采用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)对黏膜局部菌群进行指纹图谱分析,并对特异性条带进行测序鉴定分析.结果 预处理感染组感染率(93.3％)与直接感染组感染率(26.7％)有明显差异(P＜0.05)；各实验组PCR-DGGE指纹图谱分析显示条带数量,空白对照组(21.6±2.5)、阴性对照组(3.3±1.1)、直接感染组(14.6±2.4)和预处理感染组(7.2±2.2),经统计学分析,各组间均有明显差异(P＜0.05),提示蒙古沙鼠各组间菌群多样性存在显著的差异性.结论 HP感染与胃黏膜菌群结构的变化密切相关.
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脂肪酰胺水解酶在结直肠癌中的表达及临床意义
目的 检测脂肪酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase,FAAH)在结直肠癌及正常肠黏膜中的表达,探讨其临床意义.方法 应用Western blot和组织芯片技术结合免疫组化法检测结直肠癌组织以及对应正常肠黏膜中FAAH蛋白的表达.结果 FAAH在结直肠癌组织中的表达低于正常肠黏膜,169例结直肠癌组织中FAAH的阳性表达率显著低于正常肠黏膜(56.8％ vs 97.4％,P＜0.01),并与肿瘤的分化程度密切相关(P＜0.01).结论 FAAH在结直肠癌组织中低表达,在正常肠黏膜中高表达,在结直肠癌的恶性增殖中发挥着重要作用.
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β肾上腺素能受体兴奋对大鼠急性肝损伤的影响
目的 探讨β肾上腺素能受体兴奋对大鼠急性肝损伤的影响.方法 使用异丙肾上腺素兴奋β肾上腺素能受体,在不同的用药剂量(1、10、100 mg/kg)和不同的损伤时相点(24、48、72、96 h)以及使用普萘洛尔抑制β肾上腺素能受体兴奋的情况下,检测肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(Alb)和总胆红素(TBii)],观察组织病理学变化,探讨β肾上腺素能受体兴奋对大鼠急性肝损伤的影响.结果 大鼠肝损伤程度随着异丙肾上腺素剂量的加大而加重[ ALT(IU/L):对照组(336.2±140.5),1 mg/kg组(603.7±239.7),10 mg/kg组(838.6±448.5),100 mg/kg组(1 571.5±714.7),P＜0.05]；在急性肝损伤后第48小时对照组与实验组各项肝功能指标均有统计学差异[ALT(IU/L):(290.8±153.9)、(636.0士385.2),P＜0.05; AST (IU/L):( 521.0±296.8)、(2 289.1±1 361.5),P ＜0.05；Alb(g/L):(28.3±1.3)、(25.2±1.5),P＜0.05；TBil(μmol/L):(4.1±1.2)、(24.8±16.9),P＜0.05]；应用普萘洛尔抑制β肾上腺素能受体兴奋,能有效防止大鼠急性肝损伤加重[ALT:兴奋组(606.0±154.9) IU/L,抑制组(210.0±176.1)IU/L,P＜0.05].结论 β肾上腺素能受体的兴奋能有效调控大鼠急性肝损伤的进程.
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肺癌全肺切除术后常见并发症临床分析
目的 总结肺癌全肺切除术术后常见并发症,分析其预防及处理方法.方法 回顾性分析我科2009年1月至2011年10月施行全肺切除于术的155例肺癌患者的临床资料,统计患者年龄、术前夹杂病史、肺功能、术后带管时间及术后住院时间等指标.结果 51例术后发生各类并发症,占32.90％,其中心律失常31例,肺部感染13例,急性呼吸衰竭1例,肺栓塞3例,支气管胸膜瘘2例,术后胸腔内活动性出血1例.全组围术期死亡5例,手术死亡率3.23％,其中3例考虑为肺栓塞引起死亡,其余2例为术后肺部感染导致呼吸衰竭死亡.结论 肺癌全肺切除是一种高风险术式,心律失常、肺部感染、急性呼吸衰竭、支气管胸膜瘘及肺栓塞是术后常见的并发症.对拟行全肺切除的患者,要严格掌握手术适应证,术前检查应更加全面准确；术后加强围术期管理,严密监护,做到及时、正确的处理.
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Runx3基因对HepG2细胞顺铂耐药性的影响
目的 探讨Runx3基因对HepG2细胞耐药性的影响及可能机制.方法 取在1.6 μg/ml顺铂(CDDP)下生长良好的HepG2耐药细胞(HepG2/CDDP-1.6),建立耐药HepG2/CDDP的动态变化模型HepG2/CDDP/2.0,并予以甲基转移酶抑制剂5-氮-2 '-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理；将Runx3-shRNA表达载体转染HepG2/ CDDP-1.6细胞,RT-PCR检测处理及转染前后细胞Runx3 mRNA的表达.MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪分析细胞周期,Hoechst 33258检测凋亡,Western blot检测P-gp表达的变化.结果 在动态变化模型中随CDDP诱导时间的延长,Runx3 mRNA的表达逐渐降低.5-Aza-CdR处理后Runx3 mRNA的表达增加,细胞生长受到明显抑制,S期细胞逐渐增加,凋亡细胞明显增多,细胞内P-gp的表达减少.转染Runx3 -shRNA载体后HepG2/CDDP-1.6细胞对CDDP的耐受性增强,G1期细胞增加,P-gp的表达增加.结论 Runx3基因的表达可抑制HepG2/CDDP耐药的形成,提高HepG2/CDDP细胞对化疗药物的敏感性.
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HepG2、Hep3B细胞中肿瘤干细胞相关标志分子的表达
目的 富集培养肝癌干细胞,研究肝癌干细胞相关标志物CD90、CD133、八聚体4(Oct4)和ATP结合盒转运蛋白ABCG2在肝癌细胞HepG2、Hep3B中的表达,并初步分析其意义.方法 使用流式细胞仪从肝癌细胞(检测HepG2、Hep3B两种细胞系)中分选肝癌干细胞并行无血清成球培养.设肝癌细胞组为对照组.单细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力.分别给予肝癌细胞及肝癌下细胞阿霉素处理,MTT法测阿霉素处理后各组细胞的存活率,Real-time PCR及Western blot分别检测各组细胞CD90、CD133、Oct4和ABCG2 mRNA及蛋白水平的表达.结果 肝癌干细胞单个细胞增殖能力强于肝癌细胞,克隆形成分析显示培养第14天克隆形成率Hep3B细胞组低于Hep3B CSCs组[8/27(30％)vs 12/23(52％),P＜0.05 ]；HepG2细胞组克隆形成率也低于HepG2CSCs组[7/38(18％)vs 9/26(35％),P＜0.05].用阿霉素处理肝癌细胞及肝癌干细胞48 h后,MTT法测定结果显示肝癌干细胞组细胞活性显著高于对照组(P ＜0.05):HepG2细胞组细胞活性为(38.17 ±6.92)％、HepG2CSCs组为(69.88±5.43)％；Hep3B细胞组(50.16±4.89)％,Hep3B CSCs组为(78.53±7.86)％.Real-time PCR结果显示肝癌干细胞组中CD90、CD133、Oct4及ABCG2基因mRNA表达较亲代细胞组显著上调(P＜0.05).Western blot结果显示肝癌干细胞组Oct4及ABCG2蛋白水平显著上调,与亲代细胞组间表达差异有显著性(P＜0.05).结论 肝癌干细胞相关标志CD90、CD133、Oct4及ABCG2均高表达于肝癌干细胞,并且Oct4及ABCG2基因的高表达有可能与肝癌干细胞耐药性相关.
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人肺腺癌耐药细胞株A549/CDDP中相关泛素化蛋白质研究
目的 研究肺腺癌中与耐药相关的泛素化或类泛素化蛋白质及其与耐药的关系.方法 从经顺铂处理和未处理的A549细胞及其耐顺铂细胞株中分离泛素化、类泛素化蛋白质,通过1D SDS-PAGE和Chip HPLC-MS/MS分析鉴别蛋白,Western blot法验证质谱结果；MTT法检测细胞对顺铂的耐药性.结果 鉴定出发生类泛素化修饰蛋白质-PKM2,并发现其在耐药细胞株中低表达；以蛋白酶体抑制剂MG132干预细胞后,PKM2表达上调；CDDP和MG132联合作用细胞后,细胞耐药性下降.结论 细胞中PKM2表达水平与肿瘤细胞耐药程度呈负相关,PKM2受蛋白质类泛素化修饰-SUMO化修饰调节,提示PKM2可能与肿瘤耐药的发生密切相关.
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重庆市125例儿童白血病发病危险因素的病例对照研究
目的 总结和分析与重庆市儿童白血病发病相关的主要因素及特点.方法 根据国内外文献研究报道的可能与儿童白血病发病相关的不良因素,结合重庆市的地理及人文特点,设计统一的问卷调查表,采用病例对照的方法,收集2010年10月至2011年9月第三军医大学新桥医院及重庆医科大学附属第一医院、附属第二医院、附属儿童医院血液科住院的125例重庆籍1岁零3个月至18岁儿童白血病患者的资料；根据纳入标准随机选择同期就诊上述医院的139例非遗传病、菲先天缺陷、非肿瘤儿童作为对照组.通过问卷调查的方法收集2组人群的一般社会人口学特征、患儿感染史及喂养史、家庭装修史、居住地电磁辐射、父母生育年龄、母孕期感染史及家族肿瘤史等信息,对所得资料进行单因素与多因素非条件Logistic回归分析.结果 36项指标中,11项指标在单因素分析中有意义,其中6项指标也在多因素回归分析中有意义,包括儿童患病前1年居室装修史(OR =3.069),儿童直接接触农药杀虫剂(OR=3.522),母孕期出售配置和喷洒农药及杀虫剂(OR =3.101),孕期居室装修或新置家具(OR=4.868),孕期使用电磁用具(OR=1.786),孕期补充铁剂(OR =5.834).结论 儿童白血病的发病因素错综复杂,儿童患病前1年居室装修及直接接触农药杀虫剂等6个因素可能是重庆地区儿童白血病发生的主要危险因素.
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骨髓间充质干细胞对SD大鼠离体肝切除自体肝移植肝功能的保护作用
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠离体肝切除自体肝移植肝功能的保护作用,寻找可能的机制.方法 采用生化、TUNEL、Westem blot等方法检测离体肝切除自体肝移植术后大鼠不同时间点的血清及肝脏组织标本.取SD大鼠骨髓体外培养BMSCs,纯化后GFP标记,第3代做检测并配置成细胞悬液,建立SD大鼠离体肝切除自体肝移植模型,分为BMSCs注射组(BMSCs悬液门静脉注入)和生理盐水注射组(等量生理盐水门静脉注入)行离体肝切除自体肝移植手术,观察术后大鼠状态,检测大鼠肝功能、肝细胞凋亡,TGF-β1及Bcl-2、bax表达情况.结果 成功分离培养BMSCs并鉴定.BMSCs注射组术后大鼠死亡率低于生理盐水注射组,BMSCs注射组术后12、24、48、72 h肝功能明显好于生理盐水注射组,肝细胞凋亡率低于生理盐水注射组.BMSCs注射组TGF-β1、bax水平较生理盐水注射组减少,Bcl-2较生理盐水注射组增高,其中bax下调、Bcl-2上调有显著性差异(P＜0.05),而TGF-β1在24、72 h无显著性差异.结论 BMSCs能通过直接门静脉注射入肝改善离体肝切除自体肝移植大鼠术后肝功能,其可能通过影响Bcl-2/bax值减少肝细胞凋亡,可能是通过TGF-β1无关的其他途径.
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重组腺病毒Ad5F11pTPEGFP的构建及其对UT-7/Epo细胞感染效率的检测
目的 构建携带报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad5F11pTPEGFP,并且研究该病毒对人白血病细胞UT-7/Epo的感染效率及其在细胞中的复制.方法 先通过分子克隆技术构建重组腺病毒质粒pAd5F11pTPEGFP,然后利用脂质体转染法,将其转染至HEK293细胞包装出重组腺病毒Ad5 F11 pTPEGFP,经酶切和PCR鉴定正确后,扩增并纯化得到滴度较高的重组腺病毒.以空载体病毒Ad5GFP作为对照,将纯化的重组腺病毒感染UT-7/Epo细胞,经流式细胞仪检测在不同感染复数(MOI)下荧光阳性细胞比例,即为Ad5F11pTPEGFP病毒对UT-7/Epo细胞的感染效率,同时将冻融后的重组腺病毒感染的UT-7/Epo细胞上清感染HEK293细胞,48 h后观察GFP在HEK293细胞中的表达.结果 成功制备了重组腺病毒Ad5 F 11 pTPEGFP,其对UT-7/Epo细胞的感染效率明显高于空载体对照病毒Ad5GFP,在MOI为200时,感染效率达98.2％,而空载体病毒在MOI为200时,对UT-7/Epo细胞的感染效率仅为29.7％.感染了重组腺病毒的UT-7/Epo细胞冻融上清感染新的HEK293细胞后,荧光显微镜下观察到GFP的表达.结论 成功构建了重组腺病毒Ad5F11pTPEGFP,其对UT-7/Epo细胞有较高的感染效率,并能在其中复制.
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莫沙必利对模拟急性高原暴露大鼠小肠动力的改善作用
目的 观察莫沙必利对高原缺氧大鼠小肠动力及黏膜屏障的保护作用,初步探讨其对肠道急性缺氧损害的预防作用.方法 将90只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组、高原缺氧组、高原莫沙必利组；低压氧舱模拟海拔6 000 m,氧分压(9.31±0.05) kPa,氧含量(19.6±0.2)％,建立大鼠急性缺氧模型,高原莫沙必利组采用莫沙必利灌胃,3次/d,每天剂量0.27 mg/kg.分别于10、24、48、72、168 h取小肠组织.检测急性高原缺氧应激后小肠组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的含量变化；墨汁灌胃实验计算推进距离,检测小肠动力；RT-PCR检测小肠黏膜闭锁连接蛋白1( ZO-1) mRNA的表达情况.结果 与同时间段正常对照组比,高原缺氧组NO、NOS含量增高,24、48、72、168 h NO含量差异明显(P＜0.05,P＜0.01),48、72、168 h NOS含量差异明显(P＜0.05,P ＜0.01)；ZO-1 mRNA表达量降低,48、72、168 h差异明显(P＜0.05,P＜0.01)；高原莫沙必利组NO、NOS含量较正常对照组增高,仅48 h NO含量增高明显(P＜0.05)；高原缺氧组与高原莫沙必利组(168 h除外)各时间点小肠推进距离均较正常对照组明显降低(P＜0.05,P＜0.01).各时间点高原莫沙必利组NO、NOS含量较高原缺氧组降低,72 h NO,72、168 h NOS含量差异明显(P＜0.05)；各时间点高原莫沙必利组小肠推进距离及ZO-1 mRNA的表达量较高原缺氧组增高,48、72、168 h的小肠推进距离及72、168hZO-1 mRNA的表达量差异明显(P＜0.05).结论 莫沙必利可有效促进小肠动力,减轻高原缺氧应激引起的小肠动力障碍及肠道黏膜屏障的损伤,可用于高原缺氧肠道损害的预防.
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低频重复经颅磁刺激对脑梗死患者运动功能恢复的影响
目的 探讨低频重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对急性脑梗死患者运动功能恢复的影响.方法 选取44例急性脑梗死伴偏瘫的住院患者,随机分为低频刺激组和对照组.低频治疗组接受10次1 Hz rTMS治疗,患者在rTMS治疗后均进行运动功能训练.在治疗前、第10天、第40天对所有患者进行临床功能NIHSS评分、Barthel指数(BI)、Fugl-Meyer评分(FMA).结果 治疗前两组间NIHSS、BI、FMA比较差异不具有统计学意义(P＞0.05).经过治疗,两组的临床功能评分(NIHSS、BI、FMA)在治疗后第10天和40天时均较治疗前改善(P＜0.01).治疗后第10天和第40天时两组间的NIHSS、BI、FMA比较差异有统计学意义(P＜0.01),其中,低频刺激组的运动功能恢复明显优于对照组.结论 低频rTMS对急性期脑梗死后运动功能的恢复有促进作用,其效果在治疗结束后1个月仍然存在.
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职业性汞中毒相关性肾病误诊1例
1临床资料患者,女性,49岁,因“头晕3年,尿检和肾功异常2个月”于2012年1月6日入本科就诊.近3年患者头晕、失眠、记忆力减退、四肢感觉异常,近2个月腰酸、下肢间断水肿、夜尿增多、视力下降,查BP 140/90 mmHg,尿常规蛋白3+,潜血2+,BUN 12.1 mmol/L,Scr 156μmol/L,当地医院诊断为“慢性肾炎、慢性肾功能衰竭”,治疗2周无效(予尿毒清、肾炎康复片等),行肾活检,病理组织送南京军区福州总院.患者随即转入我院.入院查体:P 80/min,BP 131/66 mmHg,慢性病容,贫血貌,眼睑及双下肢轻度水肿,心肺腹未见异常,肾区无叩击痛.超声:右肾8.8 cm×4.0 cm,左肾8.9 cm x4.2 cm,实质回声稍增强,示双肾符合慢性肾病改变.胸片示双肺纹理增多、粗乱.
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彩色多普勒超声对小腿肌间静脉丛血栓的诊断分析
小腿肌间静脉丛血栓是下肢深静脉血栓的好发部位,其症状比较隐匿,在临床上常被忽视,由于不能得到及时诊断和治疗,约有20％血栓可向上蔓延,累及腘静脉及其近端静脉,引起严重并发症[1].早期发现小腿肌间静脉丛血栓对临床治疗有重要意义.本研究对我院2010年1月至2011年1月确诊为小腿肌间静脉丛血栓的89例患者的检查资料及随访情况进行分析,探讨彩色多普勒超声在诊断小腿肌间静脉丛血栓中的应用价值.
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软-硬通道微创治疗高血压脑出血合并脑室积血的临床分析
微创治疗是高血压脑出血的重要方法,特别适合于临床普及开展[1].传统上多采用单纯硬通道或软通道对血肿进行抽吸或引流.2008年3月至2011年3月我们进行软-硬通道相结合微创治疗高血压脑出血合并脑室积血患者,现报告如下.
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帕罗西汀联合行为干预治疗脑卒中后抑郁的临床疗效分析
目的 探讨帕罗西汀联合行为干预治疗脑率中后抑郁患者的有效性.方法 将2006年7月至2011年1月我院神经内、外科确诊为脑卒中的72例患者按随机数字表法分为对照组和干预组(n=36),对照组予以口服帕罗西汀和常规治疗护理,干预组在对照组基础上同时进行针对性的行为干预,比较两组患者的康复效果及生活质量.两组治疗前后分别进行HAMD评分、Barthel指数(BI)评分法和生活质量综合评定问卷-74( GQOLI-74)的评定.结果 治疗后,干预组总有效率(94.4％)显著高于对照组(75.0％)(x2=5.528,P＜0.05).两组间在治疗前HAMD评分、BI评分和GQOLI-74评分差异均无统计学意义(P＞0.05)；治疗后,两组HAMD评分均下降,BI评分均上升,组内各项评分较治疗前均明显改善(P＜0.05),两组GQOLI-74评分除物质生活因子外,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 脑卒中后抑郁患者予以帕罗西汀联合行为干预治疗,能促进患者的康复,提高患者的生活质量.
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第十四届全国神经和头颈部放射学暨重庆市医学会第七届放射学学术会议简况
1会议概况由中华放射学会神经和头颈学组、重庆市医学会放射专业委员会主办,第三军医大学大坪医院野战外科研究所、重庆医科大学附属第二医院承办的中华医学会放射学分会第十四届全国神经和头颈部放射学学术会议暨重庆市医学会第七届放射学学术会议于2012年4月7-8日在重庆君豪大饭店隆重召开.中华医学会放射学分会冯晓源主任委员,重庆市卫生局张玲副局长,重庆市医学会陈华副会长兼秘书长,解放军放射诊疗专委会孙刚主任委员,重庆市医学会放射专业委员会赵建农主任委员等领导和来自全国神经头颈放射学以及相关领域的500多名国内外专家学者参加了本次会议.本次会议主要围绕着神经与头颈部影像学临床诊断与治疗,以及相关图像处理技术等新的研究进行了报告,同时还涉及胸心及乳腺影像、腹部影像、脊柱四肢影像等方面的学术报告.本次会议充分展示了全国神经头颈及重庆市医学影像诊断学术领域的前沿知识和学术动态,是一次融学术交流、继续教育和新技术、新产品展示为一体的学术盛会.
