第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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PACS-2在非酒精性脂肪性肝病动态变化及意义
目的 探讨PACS-2(phosphofurin acidic cluster sorting protein-2)及其所调控的葡糖调节蛋白78(glucose regulating protein,GRP78)和细胞凋亡标志蛋白Bax、Caspase-3在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达变化及意义.方法 应用软脂酸诱导HepG2细胞脂肪变建立非酒精性脂肪性肝病体外模型,并按0、4、8、12、24 h时相点收获细胞,通过油红0(Oil red)染色检测细胞脂肪变程度.同时应用高脂饮食喂SD大鼠建立NAFLD 模型,并按时相点分为4、8、12、16、20周组,以普通饮食喂养为对照组.通过q-PCR及Western blot检测PACS-2及内质网应激标志蛋白GRP78和Bax、Caspase-3的表达.结果 软脂酸成功诱导HepG2细胞脂肪变性,应用高脂饮食喂养SD大鼠成功建立NAFLD大鼠模型.与对照组相比,PACS-2 mRNA相对表达量在HepG2细胞脂肪变模型早期(4、8h)下降,脂肪变模型晚期(12、24 h)升高；GRP78在8h组开始上升后,24 h组达到高峰(P＜0.01)；Bax、Caspase-3的表达均在12、24 h组显著上升(P＜0.01).在蛋白水平上,PACS-2、GRP78、Bax、Caspase-3的表达与mRNA水平表达基本一致(P＜0.01).NAFLD大鼠模型蛋白表达上,与对照组相比,PACS-2同样在早期(4、8周)下降,晚期(16、20周)上升(P ＜0.01)；GRP78在表达在4周上调后,20周达到高峰(P＜0.01).Bax、Caspase-3的表达均在晚期显著上升(P＜0.01).结论 PACS-2早期的低表达可能参与了NAFLD过程中的内质网应激,晚期升高可能与肝细胞凋亡所致的肝损伤密切相关.
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肥胖患者皮肤组织钠、钾离子浓度的检测及临床意义
目的 测定肥胖患者皮屑中钠、钾离子浓度及皮肤组织钠、钾转运相关蛋白的表达,并探讨其临床意义.方法 招募127例重庆地区自愿者,并以体质指数(BMI)和腰围(WC)值,将其分为肥胖、超重、健康组和腹型肥胖、健康组,刮取研究对象双前臂内侧皮屑,用消化液(1.5 mL×65％硝酸和0.5 mL×70％高氯酸)加热溶解后,使用火焰原子分光光度计检测溶液中钠、钾的含量；提取小鼠及人皮肤组织蛋白,用蛋白印迹法检测糖皮质激素受体、醛固酮受体、Na+-K+-ATP酶表达.结果 在适反应条件下,本方法的相对标准偏差在0.34～1.45,回收率为93.1％ ～ 107.2％；肥胖组与健康组相比,皮屑钠、钾值均有显著性差异(P =0.002,0.000),肥胖组与超重组比差异也有显著性(P =0.002,0.000),超重组与健康组比较均无差异.Western blot检测小鼠和人皮肤组织中糖皮质激素受体、醛固酮受体、Na+-K+-ATP酶3种蛋白均有表达.结论 应用火焰原子分光光度计测量肥胖者皮屑钠、钾含量明显升高,可简易地反映临床肥胖患者组织电解质变化,钠、钾转运相关的3种蛋白在小鼠和人皮肤组织中均有表达.
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金属离子对牛蒡子苷与牛血清白蛋白结合的影响
目的 研究金属离子对牛蒡子苷与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)结合的影响.方法 采用同步荧光光谱法,在拟生理pH条件下考察不同的金属离子(Cu2+、Mg2+、Zn2+)对牛蒡子苷与BSA结合作用的影响.结果 在金属离子(Cu2+、Mg2+、Zn2+)存在下,随着体系中牛蒡子苷浓度增大,BSA荧光增强,两者间的结合力仍以静电作用力为主.金属离子存在时,牛蒡子苷与BSA的结合常数在25℃时,分别为7.899×104(无金属离子)、8.557×104(Cu2+)、6.724×104(Zn2+)、7.062×104(Mg2+)；在37℃时,结合常数分别为5.962×104(无金属离子)、6.096×104(Cu2+)、5.915×104 (Zn2+)、5.612×104(Mg2+).结论 金属离子的存在会影响牛蒡子苷与牛血清白蛋白的结合.Cu2+存在下,牛蒡子苷与BSA之间的结合常数增大；锌离子和镁离子存在下,两者的结合常数减小.
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整合素αvβ6在移植肝胆管纤维化中的作用
目的 探讨整合素αvβ6在移植肝胆管纤维化中的作用,为探索新的移植物胆管病(graft cholangiopathy,GC)防治策略提供理论基础.方法 小鼠被随机分为假手术组、单纯移植组和药物干预组.假手术组不行肝移植,仅行开关腹；单纯移植组和药物干预组均采用非动脉化的小鼠原位肝移植模型,供肝冷保存时间均为12h.术后按2、4、6周3个时相点采集血液及组织标本.采用荧光实时定量PCR法测定整合素αvβ6及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、转化生长因子-1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转化生长因子-2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)和Ⅰ型前胶原(procollagen α1)等纤维化相关基因的mRNA表达,同时测定血清ALT、GGT、ALP以及肝组织羟脯氨酸(Hyp)的含量,并采用Masson三色染色法评估肝内胆管的纤维化情况.计量资料多组均数间的比较采用双因素方差分析,两总体均值的比较采用t检验,相关性分析采用直线回归分析.结果 严重的冷保存再灌注损伤(cold preservation/reperfusion injury,CPRI)合并动脉血供障碍可以迅速地诱发移植肝胆管纤维化.在术后第4、6周,整合素αvβ6 mRNA表达分别上调至假手术组的13.2、32.5倍,肝组织Hyp含量较假手术组分别上升87.5％、124.4％.通过特异性抑制整合素αvβ6可以明显缓解移植肝胆管纤维化,同时在一定程度上改善肝功能.结论 缺血再灌注损伤是造成移植肝胆管纤维化的重要原因之一,整合素αvβ6在这一过程中可能扮演着关键性的角色,针对整合素αvβ6的干预策略可能为GC的治疗提供新的思路.
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表达SDF-1/HOXB4融合基因的间充质干细胞对造血干细胞体外扩增及干性维持的作用
目的 构建SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4融合基因腺病毒表达载体,转染体外培养的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),比较其对CD34+细胞体外扩增及干性维持的影响.方法 全基因合成SDF-1/HOXB4基因序列,以其为模板,经PCR、酶切及测序鉴定,构建表达SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4的3种腺病毒载体,转染至293A细胞进行包装和病毒滴度测定,并转染体外培养的MSCs,分别为SDF-1组、HOXB4组和S-H组,转染空腺病毒载体的为阴性对照,转录水平及蛋白水平检测MSCs中外源基因表达.4组MSCs和CD34+细胞共培养7d,计数细胞并检测其CD34+表达.结果 测序表明3种腺病毒载体构建成功,在293A细胞中成功包装并获取病毒,RT-PCR和Western blot检测3个基因在MSCs细胞中稳定高表达,MSCs和CD34+细胞共培养,扩增细胞数目SDF-1组(9.52±2.24)、S-H组(8.11±2.34)显著高于对照组(4.85±2.53,P＜0.05),S-H组(CD34+表达为1.85％)较SDF-1组(1.20％)、HOXB4组(1.28％)更利于CD34+细胞干性维持.结论 表达SDF-1/HOXB4融合基因的MSCs对CD34+细胞体外扩增及干性维持作用更好.
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基于准静态平面流场的新型皮肤组织工程灌注式生物反应室设计与初步模拟
目的 设计准静态平面流场的灌注式新型生物反应器,以适合组织工程皮肤的培养要求.方法 采用计算流体动力学(computational fluid dynamics,CFD)商业软件FLUENT模拟新型生物反应器中的流场及培养支架壁面上的切应力,设计出一种能够层叠、低剪切力、均匀平面流场的生物反应器.结果 模拟结果表明筛网状支撑物及组织工程皮肤构建物表面处的大切应力小于3×10-5 N/cm2,且培养室中的流场是均匀的.结论 新型生物反应器满足准静态平面流场的要求,有可能在未来的皮肤组织工程研究和生产中广泛使用.
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肝星状细胞具有向肝细胞样细胞分化的干细胞潜能
目的 探讨肝星状细胞是否能体外诱导分化为肝细胞样细胞以及在这过程中某些干细胞标记物的表达和变化.方法 采用标准胶原酶灌注联合percoll密度梯度离心法提取并纯化原代大鼠肝星状细胞,免疫荧光鉴定细胞表型；将原代肝星状细胞分为对照组和实验组进行体外培养,对照组肝星状细胞不加任何细胞因子培养24 h,实验组肝星状细胞加入bFGF 20 μg/L、FGF420 μg/L、HGF 20μg/L、IL-6 1μg/L细胞因子诱导7d;倒置相差显微镜下观察诱导细胞形态的变化,Real-time PCR和细胞免疫荧光技术检测肝星状细胞诱导前后肝细胞ALB、AFP mRNA和蛋白的表达情况,以及诱导前后干细胞标记物mRNA和蛋白水平的表达及变化.结果 ①通过胶原酶灌注联合percoll密度梯度离心法获得的大鼠肝星状细胞,其特异性蛋白Desmin和GFAP表达阳性率≥95％.②实验组大鼠肝星状细胞经过bFGF、FGF4、HGF、IL-6等细胞因子诱导7d后,与对照组细胞相比细胞形态由星形变为类圆形或多角形,转录水平出现肝细胞特异性标记物ALB的表达(P＜0.01)和AFP的表达(P＜0.05),同时实验组ALB和AFP蛋白表达呈阳性,而对照组则呈阴性.③实验组大鼠肝星状细胞经过bFGF、FGF4、HGF、IL-6等细胞因子诱导7d后,与对照组相比干细胞标记物P75NTR转录水平表达下降(P＜0.05),CD90、c-kit、sox-2、oct-4等转录水平表达显著下降(P＜0.01),并伴有干细胞标记物蛋白水平的表达下调或无表达.结论 初步证明肝星状细胞可能具有潜在的干细胞特性,在体外可诱导分化形成肝细胞样细胞,在诱导过程中肝星状细胞的干细胞标记物明显下调.
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TGF-β2对心肌细胞H9C2转录因子表达的影响及其组蛋白H3乙酰化调控机制
目的 探讨转化生长因子-β2(transforming growth factor beta2,TGF-β2)对心肌细胞H9C2转录因子Mef2c和GATA4的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系.方法 比较TGF-β2对细胞生长的影响.利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4mRNA的相对表达量,筛选合适的TGF-β2干预浓度.采用Western blot检测心肌细胞乙酰化组蛋白H3(acetylated histone H3,acH3)的表达差异.染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP) Real-time PCR检测Mef2c和GATA4启动子区与acH3结合DNA的相对表达水平.比色分析法检测TGF-β2对心肌细胞的总体组蛋白乙酰化酶(HATs)活性的影响.结果 ①TGF-β2干预组相对于对照组心肌细胞的增殖能力增强(P＜0.05).②心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4mRNA的相对表达量随着TGF-β2浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在5 μg/L的浓度时均达到高,Mef2c mRNA相对表达量是对照组的1.8倍,GATA4mRNA是对照组的2.3倍(P＜0.05).③TGF-β2干预72 h后acH3蛋白表达量是对照组的4倍(P＜0.05),HATs活性是对照组的1.34倍(P＜0.05).④TGF-β2干预组Mef2c和GATA4启动子区组蛋白H3的乙酰化水平分别是对照组的2.56和2.16倍(P＜0.05).结论 5μg/L TGF-β2可以促进心肌细胞H9C2的分裂与增殖,并上调心脏相关转录因子Mef2c和GATA4的表达,组蛋白H3乙酰化水平的升高可能是Mef2c和GATA4表达上调的机制之一.
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移居汉族高原红细胞增多症多导睡眠监测
目的 研究高原红细胞增多症(High altitude poly cythemia,HAPC)夜间睡眠呼吸及血氧饱和度(arterial oxygen saturation,SaO2)特点,为临床合理治疗提供依据.方法 以40例患HAPC的汉族移居者为研究对象(HAPC组),并以20例健康的汉族移居者作为对照组.2组在安静、舒适的睡眠监测室内行整夜多导睡眠监测.观察呼吸暂停/低通气指数(apnea-hypopnea index,AHI)、呼吸暂停指数(apnea index,AI)、低通气指数(hypopnea index,HI)、清醒SaO2(awake SaO2,ASaO2)、睡眠平均SaO2(mean SaO2,MSaO2)、低SaO2(lowest SaO2,LSaO2)、SaO2下降百分比(percentage of reduced SaO2,A-MSaO2％)、氧减饱和度指数(oxygen desaturation index,ODI4)、氧减时间百分比(percentage of time for ODI4,TODI4％)等指标.睡眠监测后填写匹兹堡睡眠质量问卷(pittsburgh sleep quality index,PSQI),并抽取静脉血检测红细胞(red blood cell,RBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、红细胞压积(haematocrit,HCT).结果 HAPC组RBC、HGB、HCT显著高于对照组(P＜0.01)；2组PSQI总分及各因子计分无显著差异性(P＞0.05)；2组AHI、AI无显著差异(P＞0.05),但HAPC组HI显著高于对照组(P ＜0.05)；HAPC组ASaO2、MSaO2、LSaO2显著低于对照组,A-MSaO2％、ODI4、TODI4％显著高于对照组(P＜0.05).结论 HAPC患者夜间睡眠期间以低通气及SaO2水平显著降低为主要特征.
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HBeAg阳性感染孕妇妊娠期中晚期接受替比夫定治疗对HBsAg、HBeAg及抗-HBc胎盘透过率的影响
目的 观察HBeAg阳性、HBV DNA高复制慢性HBV感染孕妇的HBsAg、HBeAg和抗-HBc胎盘透过率,进一步明确替比夫定阻断母婴传播的机制.方法 回顾性分析在本院例行孕期检查以及产科分娩的HBeAg阳性、HBVDNA≥106 IU/mL的慢性HBV感染孕妇84例,根据阻断HBV母婴传播方式不同分为常规双重免疫阻断组(常规组,15例)和双重免疫+替比夫定阻断组(替比夫定组,69例).检测妊娠中晚期、分娩时母亲和新生儿脐带血清HBsAg、HBeAg及抗-HBc水平.结果 两组之间母亲及新生儿HBsAg、HbeAg和抗-HBc水平无统计学差异(孕妇分娩时:HBsAg P =0.058,HBeAg P=0.065,抗-HBc P=0.727;新生儿脐血:HBsAg P=0.761,HBeAg P=0.225,抗-HBc P=0.924),且两组之间的HBsAg和HBeAg胎盘透过率亦无统计学差异(分别为P=0.172,0.163).两组新生儿脐带血抗-HBc透过率均为阳性.结论 妊娠中晚期替比夫定不能降低孕妇HBsAg、HBeAg水平和HBsAg、HBeAg的胎盘透过率,其阻断HBV母婴传播的机制可能主要与有效降低孕妇HBV DNA水平有关.透过率与母亲HBsAg和HBeAg水平不成平行关系.
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HSP90抑制剂17-DMAG调控胰腺癌细胞PANC-1增殖及凋亡的初步研究
目的 探讨热休克蛋白90(HSP90)功能特异性抑制剂17-DMAG对胰腺癌细胞PANC-1增殖与凋亡的影响.方法 体外培养腺癌细胞PANC-1,17-DMAG处理PANC-1细胞后,CCK8法测定细胞生长曲线,观察细胞增殖的抑制情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化,Jc-1染色检测线粒体膜电位变化,RT-PCR法测定17-DMAG处理PANC-1细胞前后Bcl-2、Bax表达变化.结果 17-DMAG处理组24 h时D(490)值较对照组差异无统计学意义(P＞0.05),48、72 h后较对照组D(490)值分别减少(18.3±2.4)％、(21.5±3.2)％,差异有统计学意义(P＜0.05).17-DMAG处理组48 h时较对照组能显著地抑制PANC-1细胞增殖(P＜0.05),细胞凋亡率[(22.4±2.4)％]较对照组[(4.2±1.7)％]显著增加(P＜0.05)；线粒体电位显著降低(P＜0.05).RT-PCR结果显示,17-DMAG处理组抑制Bcl-2的表达,促进Bax的表达.结论 17-DMAG可抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖并诱导其凋亡,该效应可能是通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2家族成员的表达实现.
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双环己酮草酰二腙诱导精神分裂症小鼠模型胼胝体有髓神经纤维脱髓鞘的定量观测
目的 进一步研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导精神分裂症动物模型胼胝体内有髓神经纤维的改变及与行为学改变之间的关系.方法 19只雄性C57BL/6小鼠被分为2组,空白对照组(n=10)和CPZ处理组(n=9),分别给予正常鼠饲料和混有0.2％(质量分数)CPZ的鼠饲料6周,运用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验、探孔实验和转棒实验检测小鼠的行为学改变,运用免疫组化、透射电镜、体视学方法研究小鼠的胼胝体和其内有髓神经纤维的改变.结果 CPZ处理组小鼠在行为学实验中表现为:旷场实验中央区活动增多,高架十字迷宫开臂内活动增加(P＜0.05),提示CPZ处理小鼠的焦虑行为减少；学习记忆能力、运动能力和基本探索行为并未受到影响(P＞0.05).透射电镜研究发现CPZ模型小鼠胼胝体存在有髓神经纤维脱髓鞘改变.透射电镜和体视学研究发现,CPZ模型小鼠胼胝体体积[(12.66±1.07)mm3]较空白对照组[(13.53 ±2.79)mm3]无显著性下降(P＞0.05),但CPZ模型小鼠胼胝体有髓神经纤维长度密度和总长度[(0.70±0.17) km/mm3和(9.06±2.56)km]均较空白对照组[(1.47±0.17) km/mm3和(19.75 ±3.70)km]显著下降(P＜0.05).结论 CPZ模型可以出现类似精神分裂症样症状且胼胝体内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变.
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PPLA纳米微球的溶血率与粒径相关性研究
目的 研究新型聚乙二醇接枝聚乳酸(PPLA)自组装纳米微球浓度、微球粒径对溶血率的影响.方法 研究按照国家医疗器械生物学评价IS010993.1-1997和GB/T16886.1-2001标准和要求进行,采用透析法,用动态激光光散射仪(DLS)进行粒径及Zeta电位检测,制备不同浓度、不同行粒径的PPLA自组装纳米微球.就制备的纳米微球采用水浴法及测量540 nm处光密度值并计算出纳米微球的溶血率.结果 随着微球浓度的增加,溶血率增加,粒径为960.8 nm的微球,在浓度为2.0 mg/mL时出现了轻度溶血；相同浓度(1.0 mg/mL或1.5 mg/mL)的微球,随着粒径(200 ～ 300 nm)的减小,溶血率增加,但都小于5％,可作注射用；在0.9％ NaCl溶液中,PPLA纳米微球的临界溶血浓度为1.5～2.0 mg/mL,在此范围符合国家药物溶血标准.结论 纳米药物的纳米效应对其临床应用存在负面影响,粒径在纳米微球的溶血及其他性能评价存在显著影响,相同浓度下,微球的粒径越大,溶血率越小.
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氯化钴后处理对新生鼠缺氧缺血性脑损伤学习记忆的作用
目的 探讨氯化钴(cobalt chloride,COCl2)后处理对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠空间学习记忆的作用.方法 生后7日龄SD大鼠66只,分为假手术组(n=16)、缺氧缺血组(HI组,n=18)、CoCl2即刻干预组(C1组,n=14)、CoCl2术后1d干预组(C2组,n=18).Western blot检测术后1、2、7d脑组织HIF-1α蛋白的表达.大鼠生后7周行水迷宫观察CoCl2对大鼠空间学习记忆的影响.结果 HI组和C1组HIF-1α蛋白在术后第1、2天增多,第7天则不能检测到HIF-1α蛋白.而C2组第7天仍能检测到HIF-1α蛋白表达.水迷宫实验显示C2组较HI组3～5d时平均潜伏时间明显缩短,穿越原平台区域的时间增加,空间学习记忆能力部分恢复(P＜0.05).结论 在新生鼠缺氧缺血性脑损伤时,CoCl2促进HIF-1α蛋白的持续表达,术后1d干预可有效恢复大鼠的空间学习记忆能力.
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膳食辣椒素预防高脂饮食诱导的小鼠胰岛素抵抗
目的 探讨膳食辣椒素对高脂饮食诱导的小鼠胰岛素抵抗的预防作用.方法 雄性C57BL/6J小鼠30只,按随机数字表法分成3组,每组10只,分别给予普通饮食(normal diet,ND),高脂饮食(high fat diet,HD)和高脂+辣椒素饮食(high fat+capsaicin,HC).辣椒素的添加浓度为0.01％(质量百分比).小鼠自8周龄开始给予上述饮食干预,干预时间为20周.每周测空腹血糖、体质量,干预后测葡萄糖耐量、胰岛素耐量,干预结束后取血浆测血脂水平(总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇)、胰岛素水平.取内脏脂肪(肠系膜脂肪、肾周脂肪及睾旁脂肪)检测各组小鼠内脏脂肪质量,Western blot检测脂肪组织中瞬时受体电位通道1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)和葡萄糖转运子4(glucose transporter type4,GLUT4)的表达水平.结果 经20周的高脂饮食干预成功复制出小鼠胰岛素抵抗模型,而膳食辣椒素可显著预防高脂饮食导致的小鼠体质量和空腹血糖的升高、葡萄糖耐量异常、血浆胰岛素水平的升高和胰岛素敏感性的下降等胰岛素抵抗的表现；与高脂饮食组小鼠比较,高脂+辣椒素饮食组小鼠的腹内脂肪质量显著低于高脂饮食组小鼠(P＜0.01).Western blot检测提示膳食辣椒素可显著增加小鼠脂肪组织TRPV1和GLUT4的表达水平(P＜0.01).结论 膳食辣椒素可能通过上调脂肪组织TRPV1和GLUT4的表达,从而预防高脂饮食诱导的小鼠胰岛素抵抗.
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基于红外视频测量技术的瞳孔反应动态识别监测系统
目的 设计一种简单实用,基于红外视频测量技术,能对人或动物的瞳孔反应进行动态和同步在线自动识别和监测的系统.方法 系统包括:普通CCD红外摄像头、数据采集卡、生理信号记录仪及信号采集分析基础软件、瞳孔同步视频测量分析软件、计算机等.CCD摄像头接收眼球的红外光反射并将之转化为数字信号,数据采集卡采集已经数字化的视频信息然后将其输入计算机.瞳孔视频分析软件是该系统的核心,它通过动态地跟踪分析瞳孔区域的灰度值与周围区域灰度值的差异,得出瞳孔区域的总像素数从而得出瞳孔区域的面积.利用Windows内存转储机制作为桥梁,进行与信号记录系统软件间的数据通讯传递,使瞳孔大小的变化以快速跳变的数据呈现在生理信号记录仪上,同时形成实时的瞳孔反应的面积-时间曲线图.结果 利用本系统成功测量了猫瞳孔扩大反应.结论 本系统依赖简单设备解决了瞳孔自动跟踪和动态测量的难题,特别是解决了瞳孔位置移动对于测量的影响.
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CA916798基因通过PI3K/AKT通路参与肺癌顺铂耐药
目的 在前期体外研究的基础上,建立裸鼠移植瘤模型,观察阻断PI3K/AKT通路对肺腺癌细胞A549及多药耐药肺腺癌细胞A549/CDDP内CA916798基因mRNA表达的影响.方法 建立A549、A549/CDDP裸鼠移植瘤模型,以LY294002作用A549组和A549/CDDP组后,比较各组移植瘤生长情况,HE染色观察组织结构变化,实时荧光定量PCR检测肿瘤细胞中CA916798基因mRNA的表达水平.结果 成功建立裸鼠移植瘤模型,以LY294002分别阻断A549、A549/CDDP组裸鼠移植瘤细胞的PI3K/AKT通路后,移植瘤体积明显缩小,CA916798基因的表达明显下调(P＜0.05).结论 抑制PI3K/AKT通路能够明显抑制肺腺癌细胞A549及A549/CDDP的恶性增殖.
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常驻高海拔高原陆军军人心理素质特点
目的 调研常驻高海拔高原陆军军人心理素质特点.方法 采用自编一般资料调查表、军人心理素质量表(mental quality questionnaire for armymen,MQQA),对驻防海拔3100m以上、时间大于6个月的2 589名高原陆军军人进行测试.结果 ①常驻高海拔陆军军人MQQA总分及各维度分均显著低于军人常模(P＜0.01).心理素质优秀的军人19名(0.74％),心理素质良好的军人187名(7.22％),心理素质中等的军人1 412名(54.54％),心理素质较次的军人682名(26.34％),心理素质较差的军人289名(11.16％).②常驻高海拔陆军军人心理素质在性别上,男、女军人除忠诚维度外,其余无显著差异(P＞0.05)；级别上,呈现出军官＞士官＞士兵的趋势(P ＜0.05,P＜0.01)；文化程度上,表现为大专和本科以上＞高中＞初中(P＜0.01),而大专、本科以上差异不显著(P＞0.05)；年龄上,15～25岁组MQQA总分及聪慧、忠诚、自信分显著低于＞ 25 ～ 35岁组、＞35 ～ 45岁组(P＜0.01),＞25～35岁组与＞35～ 45岁组差异不显著(P＞0.05)；随着军龄的增加,所有因子呈现出“升高→下降→升高”的波动变化趋势,除耐挫因子外,均在3年军龄上出现了1个明显的转折点；驻高原年限上,驻守≤1年的军人除耐挫因子外,其余因子分均显著低于驻守3年以上军人(P＜0.01),其余两组间无显著差异(P＞0.05).结论 常驻高海拔高原陆军军人心理素质水平较低,表现出性别、级别、年龄、军龄、驻高原年限、文化程度等差异.
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养血清脑颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤后轴突再生及RGMa表达的影响
目的 探讨养血清脑颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤后轴突再生的影响及可能的机制.方法 成年雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠48只,随机分为假手术组、缺血/再灌注组、生理盐水对照组和养血清脑颗粒治疗组.缺血2周后,采用免疫组织化学及Western blot法检测缺血侧脑皮质及海马排斥性导向因子A(repulsive guidance molecular A,RGMa)蛋白的表达,免疫染色神经微丝蛋白200(NF-200)评估轴突生长.术后2、7、14 d和28 d,采用改良的神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)评估大鼠神经功能.结果 同缺血/再灌注组相比,养血清脑颗粒治疗组大鼠缺血侧脑皮质和海马RGMa蛋白表达明显降低(P＜0.01),NF-200蛋白表达增加(P＜0.05),mNSS神经功能评分显著下降(P＜0.05).结论 养血清脑颗粒能促进大鼠缺血再灌注损伤后神经功能的恢复,其机制可能与下调RGMa蛋白的表达,促进轴突再生有关.
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载脂蛋白E与蛛网膜下腔出血后脑组织中内皮型一氧化氮合成酶表达的关系
目的 探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)与蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑组织中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达的关系.方法 采用枕大池注血法构建小鼠蛛网膜下腔出血模型.将30只apoE基因敲除(apoE knock out,apoE KO)鼠和30只apoE基因野生(apoE wild type,apoE WT)鼠均随机抽签分为对照组、蛛血组、干预组,每组10只；对照组为枕大池注射40 μL的生理盐水,蛛血组为枕大池注射40 μL自体尾动脉血,干预组在枕大池注血前6周,每天胃内灌注促进apoE蛋白表达的肝X受体激动剂T0901317 10 mg/(kg·d)；RT-PCR和Western blot法分别检测术后12 h各组脑组织中eNOS的mRNA和蛋白表达情况.结果 对照组apoE KO鼠及apoEWT鼠eNOS mRNA [(0.823 ±0.015) vs (0.811 ±0.021)]和蛋白[(0.902±0.038) vs (0.875±0.041)]之间的表达无明显差异(P＞0.05)；与对照组相比,蛛血组eNOS mRNA和蛋白表达明显降低,且蛛血组内apoE KO鼠eNOSmRNA[(0.411 ±0.022) vs (0.613 ±0.036)]和蛋白[(0.578 ±0.061) vs (0.694 ±0.026)]表达较apoE WT鼠更降低(P＜0.05)；与apoEWT蛛血组相比,apoE WT干预组eNOS的mRNA (0.796±0.052)和蛋白(0.775±0.062)表达明显增加(P＜0.05),但apoE KO干预组eNOS的表达与apoE KO蛛血组相比无明显差异(P＞0.05).结论 apoE与SAH后脑组织中eNOS的表达有关；增加脑组织中apoE的表达能明显促进eNOS的表达增加.
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巨大型冠状动脉瘘经导管封堵术后的临床随访研究
目的 评价经导管封堵治疗巨大型冠状动脉瘘(coronary artery fistula,CAF)的临床效果与安全性.方法 对2006年11月至2010年8月在我科住院并接受经导管封堵治疗的8例巨大型冠状动脉瘘患者的术前、术中及术后1、3、6个月及1、2年的临床随访资料进行回顾性分析,并进行自身前后对照研究.结果 8例巨大型CAF患者中男性5例,女性3例,年龄8 ～68(30.38 ±22.83)岁.病变类型包括右冠状动脉-右室瘘4例、右冠状动脉-左室瘘3例、左冠状动脉-右房瘘1例.患者经导管封堵治疗均获成功,术后心脏杂音消失,冠状动脉造影及超声心动图检查均未见残余分流.随访24 ～36 (30.63±3.85)个月.术后2年右心室、右心房、左心房及左心室内径均较术前明显缩小(P＜0.05),左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)则较术前有明显提高(P＜0.01),无封堵术相关并发症发生.结论 经导管封堵巨大型CAF安全、有效,有助于改善患者心脏结构重塑及心脏功能,有临床推广应用价值.
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贵州省708例尿路结石成分分析
目的 分析尿石症患者的尿路结石化学成分及其分布特征.方法 回顾性分析贵州省人民医院泌尿外科2009年12月至2012年9月共708例尿石症病例,以红外光谱法分析尿路结石的化学成分,并以患者性别、年龄、结石部位等为分组依据,分析各组尿路结石的化学成分特征.结果 40 ～ ＜60岁组尿路结石发病率达高峰,男性与女性尿路结石患者的比率为1.97∶1；结石成分检出率高的为草酸钙(占94.77％)；其次是碳酸磷灰石(占38.70％),尿酸或尿酸铵(13.42％)、磷酸镁铵(3.53％)、磷酸氢钙(0.56％)、胱氨酸(0.28％)等成分结石所占比例较低.结论 贵州省尿石症患者的尿路结石化学成分以草酸钙为主,草酸钙结石所占比率高于国内其他省份,有必要深入开展防治措施研究.
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重庆市某研究所体检人群中维生素D水平的调查研究
目的 了解重庆地区健康人群维生素D (VitD)营养状况.方法 用串联质谱分析仪检测送检人员血清25-羟维生素D[25(OH)VitD]水平,据此确定VitD营养状况.随机抽取重庆金域医学检验所从2012年1-8月的体检健康人员共3 875例,3～71岁.按年龄分为≤14岁儿童组(657例)、15 ～44岁青壮年组(3 019例)和≥45岁中老年组(199例)3组,采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析.结果 年龄≤14岁组的25 (OH) VitD水平严重缺乏、缺乏、不足、正常、过量所占的比例分别为1.52％、19.03％、9.44％、70.02％和0％；15～44岁组水平缺乏、不足、正常、过量的比例分别为60.09％、27.59％、12.32％和0％；≥45岁组水平缺乏、不足、正常、过量的比例分别为84.92％、13.07％、2.01％和0％.15 ～44岁组和≥45岁组女性25 (OH) VitD平均水平均较男性低,缺乏的女性人数较男性所占比例高,差异均有统计学意义(P＜0.01),而≤14岁组男女间差异无统计学意义；≥45岁组与15 ～44岁组相比,25 (OH) VitD平均水平随着年龄增加而降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 重庆地区人群VitD不同程度缺乏,女性缺乏所占比例较男性高,儿童有严重缺乏.
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重复应用钩活术治疗脊髓型颈椎病1例
脊髓型颈椎病是严重的颈椎病类型,其本质是颈椎管狭窄、颈髓受压,临床表现为脊髓损伤,主要为锥体束征,运动及感觉不同程度障碍,严重者出现瘫痪致残.目前骨科主张早期手术治疗以保护脊髓功能[1].对部分病情较轻或者发病缓慢、有手术指征但是拒绝开放性手术、保守治疗病情稳定、延误了手术佳时机、身体或者经济方面原因不能手术的患者,临床上往往缺乏有效的治疗手段.我国河北魏玉锁医师原创了"钩活术"治疗颈腰椎病,临床验证安全有效,2009年通过了中国中医药管理局组织的国家级技术鉴定并纳入"中医药适宜技术推广项目".笔者2004年开始使用钩活术治疗颈腰椎病,验证了其见效快、损伤小、安全无并发症、费用低、患者易接受等优点.本科1例脊髓型颈椎病伴咀嚼无力患者重复3次钩活术治疗均有效,现报告如下.
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获得性全身性脂肪营养不良症1例
1 病例资料患者,女性,25岁,因"口渴、多饮、多尿伴消瘦8年"于2011年5月31日入我院.8年前患者无明显诱因出现口渴、多饮、多尿伴全身消瘦(以面部及躯干、四肢尤为突出),无多食、怕热、多汗及心悸.多次空腹血糖超过20 mmol/L,先后服用多种降糖药,空腹及餐后2h血糖在15～ 20 mmol/L波动.无家族遗传病史.入院体检:体温36.5℃,脉搏92/min,呼吸20/min,血压100/60 mmHg,身高150 cm,体质量35 kg,腰围57 cm,体质指数(BMI) 15.5 kg/m2,发育正常,营养差.全身皮肤无明显色素沉着,无多毛.颜面、四肢、躯干、臀部皮下脂肪菲薄,约1.2 mm厚;后颈部可见黑棘皮样改变,面容消瘦,双侧颊部内陷,双侧颧骨突出,眼眶无凹陷,甲状腺不大.心肺无异常.腹平软,肝脾未扪及.
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合并脑干钙化Fahr病一家系报告
Fahr病又称特发性基底节钙化(idiopathic basal ganglia calcification,IBGC),是神经系统退行性疾病的一种.本病多呈家族性聚集发病,散发少见,以脑组织,特别是基底节及齿状核对称性钙盐沉积为特征.其钙化分布广泛,好发部位依次为苍白球、尾状核、壳核、丘脑、额顶叶脑回,钙化也偶见于小脑齿状核及小脑皮质[1],合并脑干钙化者在以往病例报告中罕见.现报告Fahr病一家系如下.
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肾脏留置输尿管支架缠结的处理
1 临床资料2012年3-4月本科治疗了3例肾脏留置单J管体内缠结患者.病例1:男性,25岁,身高165 cm.5年前行左肾切开取石术.2012年3月因"左腰痛发现左肾结石复发"收住我院.行经皮肾镜取石术,碎石顺利.术后单J管同肾盂引流管同时留置于左肾内,放置深度约21 cm.见单J管及肾盂引流管引出清亮尿液后,用丝线固定.术后2周患者入院复查发现固定丝线脱落;肾造瘘管引流通畅,单J管引流欠佳;肾造瘘管顺利拔出,单J管拔出时阻力较大.故急诊行腹部X线片.尝试插入导丝拔除失败,用力拔除阻力较大患者诉剧烈疼痛,给予局麻,切开约0.5 cm切口,食指探查,钝性拔除双J管.
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关节镜灌洗术治疗儿童急性化脓性髋关节炎的临床分析
化脓性关节炎是滑膜关节感染引起的关节炎症,常导致关节破坏而造成严重的关节畸形.儿童髋关节化脓性感染发病率仅次于膝关节,占儿童关节感染20％左右,致残率高[1].目前对儿童髋关节化脓性感染多采用切开引流术,手术创伤大,术后易导致关节功能障碍,而采用关节镜灌洗技术治疗具有手术创伤小、术后关节功能恢复好等优点.对我院2009年5月至2012年8月采用关节镜微创灌洗技术治疗的22例化脓性髋关节炎患者临床资料进行回顾性分析及总结,报告如下.
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NPPV联合降压药物对老年OSAHS合并高血压患者血清HGF水平及血压的影响
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apneahypopnea syndrome,OSAHS)是一种全身性疾病,成人发病率为2％～4％,并与高血压密切相关[1-2].文献[3]报道血清中肝细胞生长因子水平(hepatocyte growth factor,HGF)与OSAHS、高血压严重程度相关.本研究比较老年OSAHS合并高血压患者进行常规降压药物或无创正压通气(NPPV)联合降压药物治疗效果,观察HGF水平及血压变化情况,探讨NPPV对老年OSAHS合并高血压患者疗效的影响.
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食管癌晚期合并食管狭窄支架置入术后209例临床护理
食管癌晚期由于合并食管狭窄,患者常伴有进食困难,饮水呛咳等消化道梗阻症状,影响患者的营养摄入,降低患者对肿瘤放化疗的耐受,严重威胁患者的生命.食管支架置入是目前食管癌晚期合并食管下狭窄姑息治疗重要手段之一[1-3].而该手术成功的关键是加强术前评估及心理护理,术后严密观察病情变化,及时采取预见性护理措施,预防并发症发生.且正确的饮食指导,有效的心理护理可帮助患者缓解进食困难,加快患者康复,提高治疗远期效果,对延长患者生命,提高其生存质量意义重大.2010年1月至2012年10月住院209例食管癌晚期合并食管狭窄患者进行食管覆膜支架置入,患者均获得较好的效果,现报告如下.
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耐多药肺结核早期外科治疗的临床效果分析
目的 探索耐多药肺结核早期外科治疗的手术时机,为优化耐多药肺结核治疗方案提供询证医学依据.方法 选取重庆市公共卫生医疗救治中心胸外科2006年7月至2010年6月经药敏试验确诊为耐多药肺结核予以手术治疗的患者共42例作为观察组[其中男性29例,女性13例,年龄(36.7±1.5)岁]进行病肺切除,术后继续予以有效药物化疗12个月以上,另随机选取同期经药敏确诊为耐多药肺结核,并具备肺叶切除指征的门诊患者43例[其中男性27例,女性16例,年龄(39.5±1.0)岁],根据药敏试验选取有效药物单纯化疗的耐多药肺结核患者作为对照组.两组患者均予以连续不间断随访12～24个月,对比分析两组患者治愈率、并发症发生率、死亡率等临床指标.结果 对照组治愈率41.9％ (18/43),病情逆转率18.6％(8/43),死亡率16.3％ (7/43)；观察组治愈率83.3％(35/42),病情逆转率4.8％(2/42),并发症发生率28.6％ (12/42),死亡率2.4％ (1/42).两组治愈率、死亡率比较有统计学显著差异(P＜0.01),病情逆转率比较有统计学差异(P＜0.05).结论 对确诊耐多药肺结核,经内科治疗2个月以上者均可考虑病肺手术治疗,早期手术治疗效果优于晚期手术治疗,其手术并发症与普通胸外科手术的肺叶切除一致.
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手术切除联合局部光动力疗法治疗皮肤恶性肿瘤的临床效果
目的 评价手术联合局部光动力疗法在皮肤恶性肿瘤治疗中的优势以及对手术方式的改进.方法 入选病例包括基底细胞癌32例、鲍温病13例、湿疹样癌8例、鳞癌5例,均行手术切除病灶后辅助局部光动力学治疗.局部光动力疗法采用5-ALA作为光敏剂,在避光条件下将10％的5-ALA乳液均匀涂抹于肿瘤病灶表面,持续敷药4h.用波长为635 nm的激光照射病灶部位,光照剂量为120 J/cm2,每一部位照射时间为15 min.手术后辅助光动力学治疗3次,每次治疗间隔2周,治疗后2周复诊,照相,比较治疗前后的皮损,评价治疗效果.术后长期随访,观察肿瘤复发情况.结果 手术联合光动力治疗后,所有病例在半年时无一例复发；随访1年时,8例湿疹样癌中5例复发,5例鳞癌中2例复发,其他病例未见复发.结论 局部光动力疗法作为皮肤肿瘤切除术后的辅助治疗,可减少肿瘤病灶的切除范围,在手术难度极大的肿瘤病例治疗中有积极意义,但在降低复发率方面仍有待于进一步探索.
