第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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miR-145表达状态对大鼠高血压动脉内膜增生的影响
目的 观察微小RNA-145(microRNA-145,miR-145)在高血压血管内膜增生中的作用.方法 常规HE染色观察自发性高血压大鼠(SHR)和对照大鼠(WKY)主动脉内膜增生情况,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测不同病程SHR大鼠主动脉中miR-145的表达水平,并应用miR-145前体premiR-145和抑制剂2'OMe-miR-145分别升高和抑制血管平滑肌细胞(smooth muscle cell,VSMC)中miR-145的表达水平,从分化标志蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平、VSMC的增殖和迁移能力等方面检测VSMC表型转化情况.结果 ①SHR大鼠主动脉内膜增生,内膜/中膜面积百分比(39.7±l2.1)％显著高于WKY组(3.8±1.2)％(P=0.001),α-SMA染色阳性的VSMC是增生内膜的主要细胞成分；②与WKY相比,SHR大鼠主动脉来源的VSMC表型转化明显增多,表现为增殖和迁移能力升高,而α-SMA表达降低(P＜0.01)；③SHR大鼠主动脉中的miR-145水平在8周龄时开始下降(P=0.045 6),至18周龄时降至仅为WKY组的7.5％；④应用premiR-145可上调SHR-VSMC中α-SMA的表达(P=0.005 6)并促进VSMC增殖迁移过程(P＜0.01),而2'OMe-miR-145可抑制VSMC中α-SMA的表达(P =0.023 2)和VSMC增殖迁移过程(P＜0.01).结论 高血压时动脉中miR-145水平呈进行性下降,可能是引起VSMC表型转化并促进动脉内膜增生的一个重要机制.
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人STAT3重组腺病毒的制备及其对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响
目的 制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响.方法 以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,Pme Ⅰ线性化与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在BJ5183细菌同源重组,经Pac Ⅰ线性化后转染293FT细胞包装,同时包装空载体腺病毒,进行病毒滴度测定.取AdV-STAT3、AdV-GFP分别感染SGC-7901细胞,设空白对照,Western blot检测3组细胞STAT3蛋白表达,MTF法检测对细胞增殖的影响.结果 获得hSTAT3完整阅读框,T载体中测序无突变,亚克隆至pAdTrack-CMV,并与pAdEasy-1成功重组后包装AdV-STAT3,测定滴度为2.8×1010pfu/mL,AdV-GFP滴度为3.2×1010pfu/mL.与AdV-GFP组及空白对照组比,Western blot示AdV-STAT3组蛋白明显表达(P＜0.05)；MTT示AdV-1-STAT3组明显促进细胞增殖(P＜0.05).结论 成功制备hSTAT3的重组腺病毒,感染胃癌细胞株SGC-7901后高表达并促进其增殖.
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99Tcm-TP1093的制备及其在健康动物体内的生物分布及动力学特点
目的 制备标记率符合显像要求的99Tcm-TP1093,探讨其在健康动物体内的生物分布及动力学特点.方法 化学合成G(D) AGG-Aba-ATAQSAYG-NH2(TP1093)；氯化亚锡还原法99Tcm标记TP1093,纸层析测定标记率,计算比活度；体外稳定性实验、血清蛋白结合实验及脂/水分配实验鉴定99Tcm-TP1093的理化性质；研究标记多肽在健康家兔体内的示踪动力学和正常小鼠体内生物分布；健康家兔99Tcm-TP1093显像,观察体内放射性动态分布变化,利用感兴趣区(region of interest,ROI)技术分析重要组织器官的时间-放射曲线(time-activity curve,TAC).结果 99Tcm-TP1093的标记率为(97.23±0.87)％,比活度为(15.91±0.62) TBq/mmol.标记多肽室温放置4h,其放射化学纯度为(93.34±0.91)％.标记多肽与血清蛋白无明显结合,脂/水分配系数lgP=-(1.68±0.09).标记多肽在健康家兔体内的动力学过程符合权重为1/c的二室模型,t1/2α为(2.689 ±0.541) min,t1/2β为(69.156±20.342) min,总清除率(CL)为(5.029±4.381)mL/kg.小鼠体内分布和健康家兔显像示:血液放射性清除迅速,软组织放射性消退快；胃区呈放射性缺损,甲状腺区未见异常放射性浓聚,脑呈低放射性分布；体内放射性主要经泌尿系统排泄,少量通过肝胆系统分泌.结论 99Tcm-TP1093标记方法简便,标记率与比活度高,可制备成一步法冻干药盒,具有良好的稳定性、体内生物分布及动力学性质.
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Wnt7a基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及向神经元样细胞分化的影响
目的 研究Wnt7a基因过表达对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和向神经元样细胞分化的影响.方法 构建Wnt7a腺病毒,利用病毒感染MSCs,MTT法检测Wnt7a基因腺病毒感染前后MSCs增殖情况,Western blot检测细胞质和细胞核中β-catenin及CyclinD1表达的变化,比较诱导后向神经元样细胞的分化率.结果 与对照组细胞相比,Wnt7a腺病毒感染组细胞增殖能力明显增强(P＜0.05)；细胞质和细胞核中β-catenin蛋白表达量均明显增加(P＜0.05)；CyclinD1的蛋白表达量也明显增加(P＜0.05)；诱导后向神经元样细胞分化率明显提高.结论 Wnt7a蛋白表达上调,可能通过提高β-catenin和CyclinD1表达来促进MSCs细胞增殖,Wnt7a蛋白同时促进MSCs向神经元样细胞的诱导分化.
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硫化氢对离体大鼠胰腺腺泡细胞炎症因子表达的影响
目的 以雨蛙素刺激的大鼠胰腺腺泡细胞为体外急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型,研究硫化氢(H2S)对AP时胰腺腺泡细胞炎症因子表达的影响及机制.方法 分离25只SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素(10-7 mol/L)诱导体外AP模型,用不同浓度NaHS(5、10、20、40 μmol/L)及不同时间(10、30、60 min) NaHS(5μmol/L)处理,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平.再用CSE抑制剂PAG处理,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平及CSE mRNA水平.进一步用NF-κB抑制剂BAY 11-7082处理后,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平,Western blot检测浆内IκBα及核内NF-κBp65的蛋白表达.结果 当5μmol/L NaHS预处理60 min时,TNF-α水平(14.70±1.10)、IL-1β水平(14.42±0.83)显著低于雨蛙素组(P＜0.05),IL-10水平(12.20 ±0.55)显著高于雨蛙素组(P＜0.05)；CSE抑制剂PAG预处理60 min后,TNF-α水平(37.38 ±0.89)、IL-1β水平(24.45 ±0.76)显著高于雨蛙素组(P＜0.05),CSE水平(0.14±0.03)、IL-10水平(0.14 ±0.03)显著低于雨蛙素组(P＜0.05)；NF-κB抑制剂BAY 11-7082预处理30 min,TNF-α水平(9.17±0.96)、IL-1β水平(2.90 ±0.17)显著低于雨蛙素组(P＜0.05),IL-10水平(40.00±1.00)显著高于雨蛙素组(P＜0.05),并且胞浆内IκBα(0.90 ±0.01)的降解及细胞核内NF-κBp65 (0.70 ±0.04)的蛋白表达明显低于雨蛙素组(P＜0.05).结论 小剂量H2S供体NaHS在雨蛙素孵育的胰腺腺泡细胞中具有一定抗炎作用,且该作用是通过抑制NF-κB通路从而抑制腺泡细胞表达促炎因子实现的.
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姜黄素对大鼠重症胰腺炎的干预效应研究
目的 探讨趋化因子ENA-78 (epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78)在重症急性胰腺炎(acute pancreatitis,SAP)发病过程中的作用及姜黄素(curcumin,CUR)的干预效应.方法 54只SD大鼠按完全随机法分为SAP组、姜黄素治疗(SAP+CUR)组和对照组,用4％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠模型,SAP+CUR组在建立模型前2h腹腔内注射姜黄素溶液(200 mg/kg),余组注射同等剂量的DMSO溶液.用ELISA法测定3组大鼠不同时点血清中ENA-78水平的变化；Western blot和免疫组化法检测胰腺组织不同时点ENA-78蛋白的表达水平；病理组织切片检查各时点胰腺的病理变化.结果 SAP组血清中ENA-78水平随时间的延长逐渐增强,3h后各时点血清ENA-78水平均高于对照组及SAP+ CUR组(P ＜0.01)；SAP组及SAP+CUR组术后胰腺组织ENA-78蛋白表达随时间延长逐渐增加,术后各时间点表达均显著高于对照组,但同时间点比较SAP+ CUR组表达明显低于SAP组(P＜0.01)；病理组织切片检查显示SAP+CUR组各时点与SAP组相比较,胰腺病理损伤显著减轻.结论 姜黄素能有效干预SAP,其机制可能与抑制趋化因子ENA-78的表达有关.
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间充质祖细胞源性的神经元样细胞肌内移植后自身特性的维持
目的 探讨间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells,MPCs)源性的神经元样细胞肌内移植后能否维持其自身特性.方法 取3周龄健康GFP转基因C57小鼠后肢长骨进行MPC培养及鉴定,选取生长良好的第3代MPC,采用神经元原代培养上清液进行神经元样细胞诱导分化后收集细胞,并制备成5×105/μL细胞悬液备用.选取12周龄健康C57小鼠24只,按随机数字表法分为损伤+移植细胞组、损伤+生理盐水组、假手术+移植细胞组、假手术+生理盐水组.损伤+移植细胞组及假手术+移植细胞组:将制备的5 μL MPC悬液散点注入小鼠三头肌内；损伤+生理盐水组和假手术+生理盐水组:同法注入等量生理盐水.术后4周取材,荧光显微镜下观察肌内移植细胞存活情况,电镜观察肌肉超微结构的变化,免疫荧光染色检测神经元特异性标志物NSE、NeuN及神经胶质特异性标志物GFAP的表达情况.结果 肌内移植细胞生长良好且均匀分布于肌细胞间隙,并抑制了肌细胞核、线粒体、内质网的退变及肌肉纤维化的发生.损伤+移植细胞组定植存活的移植细胞阳性表达:NSE(58.35±1.37)％、NeuN(60.22 ±0.16)％及GFAP(13.32±1.65)％,损伤+生理盐水组、假手术+移植细胞组、假手术+生理盐水组均无阳性细胞表达.结论 MPC具有良好的生物学活性,经体外诱导分化为神经元及神经胶质样细胞后移植于失神经支配肌内可定植存活,并能够维持神经元及神经胶质样细胞的特性,同时有效抑制了肌细胞核、线粒体、内质网的退变及肌肉纤维化的发生.
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内皮细胞通过Hedgehog通路促进胶质瘤干细胞自我更新
目的 探讨Hedgehog通路在内皮细胞促进胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)白我更新中的可能作用.方法 实验以GL261细胞系中分离的GSC和内皮细胞系b.END3为研究材料,采用Transwell双室细胞培养、极限稀释法成球实验、实时定量PCR、Western blot、体内移植瘤实验以及慢病毒载体基凶干扰等方法,检测内皮细胞对GSC成球、成瘤能力、干性基因表达以及Hedgehog信号通路相关的部分基凶表达的影响.结果 与对照组相比:①GSC与内皮细胞共培养后其体外成球能力明显增强,表现为形成干细胞球数目明显增多,体积明显增大,尤其在每孔5个(24.3％ vs 11.3％)和每孔 10个细胞(39.4％ vs 25.8％)的极低浓度下更加明显(P＜0.05).②共培养体系中,GSC的干性相关基凶Oligo2、Bmil与Hedgehog信号通路相关基因Gli1的mRNA和蛋白表达明显增加(P＜0.05).③体内移植瘤实验发现,与内皮细胞共同注射的GSC成瘤能力明显增强,所形成的移植瘤体积显著大于对照组(P＜0.05),而且出现了部分瘤体破溃、小鼠死亡.④通过慢病毒载体基因干扰Smo基因表达抑制Hedgehog信号通路后,内皮细胞促进GSC自我更新的上述现象消失.结论 内皮细胞可能通过激活Hedgehog信号通路促进GSC自我更新.
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Ln5γ2对胃癌细胞迁移、侵袭的影响
目的 探讨Ln5γ2对胃癌SGC-7901细胞迁移、侵袭的影响及可能机制.方法 实验分为对照组、Ln5γ2趋化组、上皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)干扰组、空载体组.以Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,观察穿过铺和未铺Matrigl胶的Transwell小室滤膜的细胞数目.采用ELISA和免疫荧光方法检测细胞缓冲液中MMP-2和MMP-9浓度以及细胞骨架结构改变.结果 Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,穿过铺和未铺Matrigl胶的Transwell小室滤膜的细胞数目明显高于对照组(P＜0.01),EGFR干扰后数目与对照组无显著差异(P＞0.05).EGFR干扰组细胞MMP-2和MMP-9浓度下降,细胞骨架结构模糊,伪足形成减少或消失.结论 Ln5γ2可以促进胃癌SGC-7901侵袭迁移,可能机制为通过EGFR改变细胞骨架结构,影响MMPs的分泌.
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TRPC5在结节性硬化症癫痫患者皮层致痫结节中的表达
目的 研究瞬时受体电位通道蛋白5 (transient receptor potential canonical channel 5,TRPC5)在结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)癫痫患者皮质中的表达与分布,探讨TRPC5在TSC癫痫发生中的可能机制.方法 收集新桥医院神经外科手术切除的TSC癫痫患者皮层致痫结节14例,与12例正常对照皮层(CTX)相比较,运用RT-PCR、western blot、免疫组织化学和免疫荧光等方法检测TRPC5在致痫灶中的表达分布.结果 TSC癫痫患者皮层致痫结节中,TRPC5在mRNA、蛋白表达水平较对照组明显升高(P＜0.05).免疫组化结果显示,在正常皮层中TRPC5弱至中等强度表达于神经元上,偶在胶质细胞上表达,而在TSC癫痫患者皮层致痫结节中强表达于神经元上,特别是巨型细胞和异形神经元上,胶质细胞表达强度也较CTX组增高,免疫染色强度明显高于正常皮层(染色强度值:2.77±0.43 vs 1.64±0.56;相对光密度值:64.72 ±9.56 vs 30.34 ±9.43;P ＜0.05).结论 TRPC5表达增高可能与TSC患者癫痫发病密切相关,可能成为治疗难治性癫痫的新药物靶点.
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广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性分析
目的 了解广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)分子型别及其对临床常用抗生素的耐药情况,为防控MRSA感染提供依据.方法 收集2010年10月至2011年4月广州地区两家教学医院临床分离的MRSA 142株,应用SCCmec、spa、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)等方法进行分子分型,检测这些菌株对苯唑西林、克林霉素等17种临床常用抗生素的药物敏感性,分析临床MRSA的耐药情况.结果 142株MRSA中121株为医院获得型金葡菌(HA-MRSA),20株为社区获得型金葡菌(CA-MRSA),1株未定型MRSA.这些MRSA可分为16种spa型,8种ST型及13种PFGE型.HA-MR-SA中的ST239-MRSA-Ⅲ-t030、ST239-MRSA-Ⅲ-t037和ST5-MRSA-Ⅱ-t002为主要流行克隆,也发现CA-MRSA中ST59-MR-SA-Ⅳ-t437克隆的流行,且这些流行克隆有特定的耐药谱.结论 广州地区流行的金葡菌仍以HA-MRSA为主,同时也有一定量的CA-MRSA检出和传播,且CA-MRSA的多重药物敏感性已在下降.
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320排CT上腹部一站式检查在肝癌TACE治疗中的价值
目的 探寻320排CT上腹部一站式检查在肝癌经动脉插管化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗中的临床应用价值.方法 收集30例肝癌患者TACE术前行320排CT上腹部灌注扫描病例,分析全肝灌注情况,与TACE术中数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)图像对比了解其血管成像能力,术后随访病灶灌注情况并与术前对比分析.对320排灌注容积扫描行辐射剂量分析.结果 TACE术前肝癌组织肝动脉灌注量(hepatic arterial perfusion,HAP)、门静脉灌注量(portal vein perfusion,PVP)及肝动脉灌注指数(hepatic arterial perfusion index,HAPI)与非癌组织相比,差异有统计学意义(P＜0.05)；术后肿瘤坏死组织无血流灌注；肿瘤活性组织的HAP、PVP较术前升高,HAPI则下降,较术后非癌组织其HAP及HAPI升高,而PVP则明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).30次扫描中均能获得满意上腹部CT血管成像(computer tomography angiography,CTA)图像；对1～4级肝动脉CTA与DSA对比显示,差异无统计学意义(P＞0.05),5级及以上肝动脉CTA与DSA比较,差异有统计学意义(P＜0.01).剂量对比发现低参数(100kV、100 mA)灌注扫描较常规上腹部增强扫描辐射剂量低,稍高参数灌注扫描方案(100kV、200 mA)辐射剂量仅轻度增高.结论 320排CT上腹部一站式检查能很好地显示全肝灌注情况,尤其是肝癌组织的异常灌注情况及术后活性灶,血管成像能够从三维角度显示肝动脉及肿瘤滋养动脉,对TACE术前评估、术中操作及术后随访都具有重要的指导意义.
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小分子血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂用于急性冠脉综合征的经皮介入治疗Meta分析
目的 系统评价小分子血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂(glycoprotein Ⅱb/Ⅲa inhibitors,GPI)用于急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)经皮介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)的疗效和安全性.方法 计算机检索PubMed、EMBASE、OVID、CBM、CNKI、VIP等数据库,检索2012年7月31日前小分子GPI与安慰剂对ACS患者PCI疗效影响的所有随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs),并同时追索纳入研究的参考文献.由2名评价者独立对纳入研究的质量进行评价和资料提取后,采用RevMan5.1软件进行Meta分析.结果 共纳入10个RCTs共计9 518例进行PCI治疗的ACS患者.Meta分析结果显示,①与安慰剂相比,小分子GPI能降低7、30 d及6个月的主要不良心脏事件(major adverse cardiovascular event,MACE)发生率[7 d:RR =0.71,95％ CI(0.55,0.94),P＜0.05;30 d:RR=0.85,95％ CI(0.73,0.98),P＜0.05;6个月:RR =0.73,95％ CI(0.55,0.99),P＜0.05]；降低30 d血运重建(target vessel revascularization,TVR)发生率[RR=0.75,95％ CI(0.58,0.96),P＜0.05]及6个月的再次心肌梗死(myocardial infarction,MI)发生率[RR =0.67,95％ CI(0.53,0.83),P＜0.01].但对于30 d死亡率、6个月死亡率 30 d MI及6个月血TVR,2组差异无统计学意义[30 d死亡率:PR =0.65,95％ CI(0.41,1.04),P＞0.05；6个月死亡率:RR =0.87,95％ CI(0.58,1.32),P＞0.05;30 d MI:RR =0.80,95％ CI(0.65,1.00),P=0.05;6个月血TVR:RR =0.90,95％ CI(0.79,1.02),P＞0.05].②与安慰剂相比,小分子GPI伴随更多的轻微出血[RR=1.60,95％ CI(1.24,2.07),P＜0.01]及严重出血事件[RR=1.44,95％ CI(1.09,1.89),P＜0.05].但血小板减少症的发生率并没有统计学差异[RR=1.16,95％ CI(0.63,2.14),P＞0.05].结论 小分子GPI对于降低接受PCI治疗的ACS患者MACE发生率具有一定疗效,但也伴随更多出血事件的发生.
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益生菌对重型颅脑损伤后高血糖反应的影响
目的 观察益生菌对重型颅脑损伤患者高 血糖反应的影响.方法 选取重型颅脑损伤患者40例,在取得患者家属知情同意后按照随机数字表法分别纳入试验组(18例)和对照组(22例).试验组在人院后24 ～ 72 h内,将益生菌制剂研磨后加入20 mL温水经鼻胃管注入,对照组单纯给予20 mL温水.于营养开始第0、4、7、15天检测患者血糖水平,比较干预前后GCS评分.结果 2组患者血糖水平在干预第0天差异无统计学意义(P＞0.05),在干预第4、7、15天,试验组血糖水平均低于对照组(P＜0.05)；试验组、对照组在干预后GCS评分均高于干预前(P＜0.05),试验组干预后GCS评分高于对照组(P＜0.05).结论 益生菌能改善重型颅脑损伤后高血糖反应.
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当归多糖对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞的影响
目的 研究当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)的保护作用.方法 BALB/c小鼠按随机数字表法分为10组,每组24只,共计240只.正常组不作任何处理,其余9组经X射线照射后分别给予生理盐水(NS)、2 mg/kg APS和8 mg/kg APS,给药至第7、14、21天计数小鼠外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)及骨髓单个核细胞(BMNC)；观察BMSC生长达80％贴壁所需时间及形成的成纤维细胞集落(CFU-F)数量；流式细胞术检测BMSC细胞周期、凋亡率及表面黏附分子CD54、CD106的表达水平.结果 与正常组比较,NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少(P＜0.05)；BMSC达80％贴壁所需时间明显延长,CFU-F数明显减少(P ＜0.05)；G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例显著降低(P ＜0.05)；BMSC细胞凋亡率明显增高(P＜0.05)；CD54、CD106表达明显降低(P＜0.05).2 mg/kg APS、8 mg/kg APS组与NS组相比,外周血各指标、BMNC数及CFU-F数明显增加(P＜0.05)；BMSC达80％融合时间显著缩短(P＜0.05)；G0/G1期比例明显降低,S期比例显著增加(P＜0.05)；凋亡率显著降低(P＜0.05)；CD54、CD106表达明显增高(P＜0.05).第21天8 mg/kg APS组各指标均恢复正常.结论 APS可能是通过提高BMSC贴壁及增殖能力,加速BMSC由G0/G1期向S期转换,降低BMSC凋亡率,上调CD54、CD106表达来促进辐射损伤后小鼠造血功能的恢复.
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双环己酮草酰二腙诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及有髓神经纤维的体视学观测
目的 探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及其内有髓神经纤维的改变.方法 将6周龄的雄性C57BL/6小鼠分为CPZ组和对照组,CPZ组小鼠用含0.2％ CPZ混合饲料饲育,对照组小鼠用标准的实验室饲料饲育.6周后进行行为学实验以证实精神分裂症样动物模型造模成功.然后运用透射电镜技术和体视学方法对小鼠大脑皮质体积和大脑皮质内有髓神经纤维进行定量研究.结果 行为学实验中CPZ组小鼠出现精神分裂症样表现,体视学定量研究中CPZ组与对照组小鼠相比大脑皮质总体积没有显著性改变(P＞0.05).与对照组小鼠相比,CPZ组小鼠大脑皮质有髓神经纤维长度密度和总长度分别显著性降低了64.3％和68.9％ (P ＜0.01),有髓神经纤维平均直径显著性增加了17.8％ (P ＜0.01).直径为0.2～＜0.4 μm、0.4～＜0.6 μm和0.6～ ＜0.8 μm的大脑皮质有髓神经纤维总长度与对照组小鼠相比分别显著性减少了4.317、3.313 km和0.940 km(P ＜0.01),CPZ组小鼠其他直径段大脑皮质有髓神经纤维总长度与对照组小鼠相比无显著性差异(P＞0.05).结论 CPZ组小鼠存在大脑皮质有髓神经纤维总长度的降低和平均直径的增加,有髓神经纤维总长度的降低主要是由小直径纤维丢失造成的.
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人脑深部核团三维模型的构建与数据测量
目的 构建大脑深部核团三维可视化模型,以对其立体形态和空间位置进行研究.方法 选取可视人体数据集头部连续横断位图像,将其重采样到平行前后连合平面方向后,逐张分割出其中的脑深部核团及前后连合等结构的二维轮廓；采用面绘制和体绘制对各分割结构进行三维重建和虚拟显示,并根据重建模型测量计算各核团在大脑空间坐标系中的位置范围、重心点坐标和体积.结果 获得了平行于前后连合平面的头部连续断面真彩色图像集和附有解剖学标识的脑深部核团二维轮廓分割图像集,重构了各核团的面绘制和体绘制三维模型,并获得其在前后连合中点为原点的大脑空间坐标系中的核团重心点坐标,核团在X、Y、Z轴上的投影范围和核团体积等解剖数值.结论 基于可视人体数据集所构建的脑深部核团三维可视化模型充分显示了各核团在大脑中的立体形态和空间位置关系,并提供了核团重心点坐标、范围、体积等解剖数值.
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不同气道炎症表型哮喘278例的临床特征分析
目的 研究哮喘不同炎症表型的临床特征.方法 采用回顾性分析的方法,收集2011年1月至2012年3月期间在本院就诊哮喘患者的病史,共纳入资料完整的患者287例,根据诱导痰炎症细胞分类不同将患者分为4组:嗜酸性粒细胞性哮喘(Eos)组(41.5％,119/287),中性粒细胞性哮喘(Neu)组(27.5％,79/287),寡细胞性哮喘(Pau)组(11.1％,32/287),混合细胞性哮喘(Mix)组(19.9％,57/287).对诱导痰细胞学检查和肺功能等结果进行分析.结果 各组患者在性别、病程、发病年龄、特应性、吸烟、体质指数、ACT评分、规律使用吸入激素方面无统计学差异(P＞0.05).在诱导痰炎症细胞方面,Mix组炎症细胞总数显著高于其余3组(P＜0.01).在Neu组和Mix组中,存在气流受限患者(FEV1占预计值＜80％)的诱导痰中性粒细胞比例与FEV1占预计值百分率呈显著的负相关(r=-0.386 6,P=0.032).结论 哮喘患者存在不同的气道炎症表型,但其临床特征无显著差异.中性粒细胞炎症可能在哮喘气道阻塞中起重要作用.
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Luffin-β-KDEL-uPAcs融合毒素的构建及其抗胃癌SGC-7901细胞的活性研究
目的 构建含尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点(uPAcs)和KDEL(Lys-Asp-Glu-Leu)驻留信号序列的丝瓜毒素(Luffin-β)基因的原核载体,表达并纯化其融合毒素蛋白Lufin-β-KDEL-uPAcs(LKP),并探讨融合毒素蛋白LKP抗胃癌SGC-7901细胞的活性.方法 RT-PCR两步法克隆Luffin-β基因,引物延伸法构建Luffin-β-KDEL-uPAcs融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,诱导其表达融合蛋白Trx-EK-Luffin-β-KDEL-uPAcs (TELKP)并纯化TELKP,肠激酶(enterokinase,EK)切割TELKP后,纯化与回收目的毒素蛋白LKP,SDS-PAGE对LKP蛋白予以检测鉴定,高效液相色谱法(HPLC)对其进行纯度检测.采用cell counting kit-8 (CCK-8)、RT-PCR、Western blot等方法,体外检测毒素蛋白LKP经uPA酶裂解后释放Luffin-β的抗胃癌SGC-7901细胞的活性.结果 成功诱导重组载体pET-32a(+)/Luffin-β-KDEL-uPAcs表达相对分子质量约48.8×103含载体表达标签(Trx)的融合免疫毒素TELKP,EK酶切该蛋白获含290个氨基酸,相对分子质量约31.8×103的目的蛋白LKP.SDS-PAGE检测鉴定表明,LKP蛋白与预期大小一致,其纯度达98.8％.CCK-8、RT-PCR、Western blot等法检测显示,LKP经uPA酶体外裂解可释放具杀瘤活性的Luffin-β小分子毒素.结论 成功克隆到Luffin-β-KDEL-uPAcs融合基因,并将其构建于原核表达载体pET-32a(+)中,且诱导该载体表达了相对分子质量约31.8×103的融合毒素LKP.LKP毒素经uPA酶体外裂解能释放具杀瘤活性的Luffin-β小分子毒素.
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对映-贝壳杉烷型二萜化合物Wangzaozin A对人早幼粒白血病HL-60细胞生长抑制和凋亡诱导的作用
目的 研究对映-贝壳杉烷型二萜Wangzaozin A对人早幼粒白血病细胞HL-60生长抑制、周期阻滞、凋亡诱导作用以及相关的机制.方法 利用倒置显微镜观察和台盼蓝排染法检测了Wangzaozin A对HL-60细胞生长的影响；采用流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染法检测化合物对细胞周期分布的影响以及诱导HL-60细胞凋亡的能力；进一步利用单细胞凝胶电泳法测试化合物对细胞DNA的损伤.结果 1～4 μmol/L的Wangzaozin A对HL-60细胞具有较强的生长抑制作用,较高浓度(3 μmol/L和4μmol/L)和较长处理时间(48～72 h)有较强的致死效应；1～ 2.5μmol/L药物处理细胞24h或48 h条件下细胞周期分布主要表现为G1期阻滞；4μmol/L药物处理12 ～60 h条件下细胞周期分布主要表现为很强的S期阻滞；2～4μmol/L药物作用24 h或48 h可诱导凋亡产生,其凋亡率呈显著水平(P＜0.01),相同条件下,药物对细胞DNA的损伤与对照相比差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 该化合物对HL-60细胞DNA的损伤作用极可能是引起细胞生长抑制、周期阻滞及凋亡的直接原因.
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融合蛋白TAP-SSL5对血小板与粒细胞结合的影响
目的 探讨融合蛋白TAP-SSL5对血小板与粒细胞结合作用的影响.方法 采用CCK-8试剂盒检测TAP-SSL5对细胞活力的影响；流式细胞仪检测THP-1细胞表面CD162(PSGL-1)的表达,及TAP-SSL5对小鼠抗人CD162单抗KPL-1与THP-1细胞结合的抑制作用.以20 μmol/L ADP激活人血小板,采用流式细胞仪、瑞氏-姬姆萨染色检测血小板与THP-1细胞或人中性粒细胞的结合情况,并研究TAP-SSL5的干预作用.结果 TAP-SSL5浓度在30 mg/L或以下时对THP-1细胞或中性粒细胞的活力无明显影响.流式细胞仪检测显示,TAP-SSL5(终浓度10 mg/L)能显著抑制KPL-1与THP-1细胞的结合；20μmol/L ADP激活的血小板与THP-1细胞或中性粒细胞的结合率分别为(31.3±8.4)％和(35.6±5.9)％；细胞经10 mg/L TAP-SSL5预先处理后,其结合率分别降至(13.4±6.7)％和(10.4±6.4)％(P＜0.01).瑞氏-姬姆萨染色的结果表明,TAP-SSL5和SSL5均可抑制激活的血小板与中性粒细胞的结合(P＜0.05).结论 TAP-SSL5可通过与PSGL-1的结合,而直接抑制激活的血小板与粒细胞的结合.
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下肢动脉硬化闭塞症介入治疗效果及其影响因素分析
目的 通过比较下肢动脉硬化闭塞症患者行介入治疗及保守治疗的截肢率、死亡率等差异,分析介入治疗效果及其影响因素.方法 入选2007年11月至2012年6月于我科住院的251例下肢动脉硬化闭塞症患者,分为介入治疗组(n=94)和常规治疗组(n=157),常规治疗组行药物治疗,介入治疗组在常规药物治疗基础上行下肢动脉球囊扩张和/或支架植入术.随访脑梗死、脑出血、急性心血管事件发生率、截肢率及病死率.于出院后1、3、6个月、1、2年检测踝肱指数(ABI)、血压、血糖、糖化血红蛋白、血脂、血肌酐、高敏-C反应蛋白(hs-CRP).结果 常规治疗组病死率、截肢率、脑梗死发生率显著高于介入治疗组(17.20％ vs 7.45％,P＜0.05；9.55％ vs 3.19％,P＜0.05；10.83％ vs3.19％,P＜0.05).介入治疗组术前ABI为0.62±0.25,术后3d、1、3、6个月ABI显著高于术前(分别为0.88±0.19、0.90±0.11、0.82±0.23、0.79±0.20;P＜0.01,P＜0.05),而常规治疗组ABI呈现继续下降趋势.进一步对相关危险因素行Logistic回归分析,结果显示年龄是影响术后疗效的危险因素(r=0.892,P=0.037),而hs-CRP是影响术后再狭窄发生率的危险因素(r =2.096,P=0.035).结论 下肢介入治疗能有效改善下肢动脉硬化闭塞症患者下肢血供,降低脑梗死发生率、截肢率及病死率.年龄越大,手术效果越差,术前hs-CRP越高,术后发生再狭窄的危险越大.
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肌萎缩侧索硬化症伴核磁共振成像异常1例
1临床资料患者,女性,39岁,因"进行性四肢无力、肌萎缩伴言语不清11个月"入院,11个月前无明显诱因觉左手无力,1个月后肢体无力发展到左下肢,4个月前发展到右上下肢,2个月前在上述症状基础上出现饮水呛咳、声音嘶哑,翻身、起床困难,双手骨间肌萎缩.人院时查体:神清,构音障碍,伸舌偏右,饮水呛咳,双咽反射活跃,双上肢近端肌力Ⅳ级,远端肌力Ⅱ级,双下肢肌力Ⅳ级,四肢腱反射(+++),踝阵挛和髌阵挛(一),双霍夫曼征(+),右Chaddock's(+),无深浅感觉异常.
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重庆三峡库区健康体检人群的甲状腺结节状况调查
重庆三峡库区是传统的碘缺乏地区之一.我国自1995年推行全民食用盐强制加碘政策后,碘缺乏病得到了有效的预防和控制.但近年来,我国甲状腺疾病发病率普遍增加,引起学者们的重视.甲状腺结节是临床上常见的甲状腺疾病之一,流行病学调查发现,在国内碘缺乏地区可触性甲状腺结节的发病率在2％ ～ 6％,而通过超声检查甲状腺结节的发病率可高达20％ ～67％[1].其中绝大多数为良性结节,甲状腺结节恶变率约为5％[2].国内甲状腺恶性肿瘤发病率呈逐渐增加的趋势,因此,早发现、早诊断和早防治甲状腺结节具有重要的临床意义.本调查旨在了解该地区健康体检人群甲状腺结节的患病率和流行病学特点,以早期防治甲状腺结节.
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IgM/IgG型抗P1致正反定型不符1例
1临床资料无偿献血者,女性,29岁,首次献血.初检以血型正定型为B型,反定型中与A、B和O型试剂红细胞凝集(强度分别为4+、1+和±),与自身红细胞不凝集送检.按照《全国临床检验操作规程》[1]复检,结果同上.该献血者红细胞其他血型表型:CcDee,MN.直抗:阴性.反定型中与O型试剂红细胞凝集,提示血清中可能存在ABO血型外不规则抗体.以10个0型谱细胞进行抗体鉴定试验,该献血者血清与1、2、3、4、5、7和8号P1型谱细胞在盐水及抗人球蛋白介质中均出现凝集,而与6、9、10号非P1型谱细胞不凝集,该反应格局表明献血者血清中存在IgM及IgG型抗P1.
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CTA诊断腹部创伤性动脉瘤合并动静脉瘘1例
1临床资料患者,男性,19岁,因"活动后胸闷、气促伴腹胀4个月"于2011年9月25日入我院.平素体质良好,无特殊疾病史,半年前有腹部刀伤的病史,伤后曾经接受肠管吻合术.4个月前逐渐出现胸闷、气促伴腹胀以及左侧下肢浮肿.院外诊断为结核性多浆膜腔积液,经抗结核治疗4个月效果不佳,先后引流腹腔积液55 kg.体格检查:生命体征尚平稳,两肺呼吸音减弱,无啰音,心音低钝,心率110次/min,左下腹听诊可闻及喷射样血管杂音.左侧下肢肿胀.胸部正位片,左侧肋膈角变钝,心影明显增大,成烧瓶状.初步诊断为:①结核性多浆膜腔积液?②扩张型心肌病并心衰?
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80例神经内镜治疗颅内蛛网膜囊肿的临床疗效分析
颅内蛛网膜囊肿是一种蛛网膜良性病变,占颅内占位性病变的1％左右,到目前为止,该病的发病机制和病因尚未完全清楚[1-2].研究表明,其发生部位约50％于中颅窝附近,且多发于左侧大脑.75％的病变发生于天幕上部,也有发生于侧裂池和鞍区的.蛛网膜囊肿在儿童和成人均有发生,并以男性为多见[3].本研究选取我院神经外科收治的80例蛛网膜囊肿患者行神经内镜手术治疗,观察患者治疗前后的效果、临床症状的改善情况及并发症的发生等,为临床治疗蛛网膜囊肿提供选择手术方式的依据.
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血塞通和银杏达莫治疗急性脑梗死临床对照研究
急性脑梗死已成为严重危害人类健康的疾病之一.李学国[1]于2007年尝试在西医常规治疗的基础上,配合中医治疗急性脑梗死,取得了一定的临床效果.我们于2009-2010年,利用中药针剂血塞通注射液和银杏达莫注射液分别治疗急性脑梗死各120例,取得了比较满意的疗效,现报告如下.
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科学认识H7N9,有效防控人感染禽流感病毒
自2013年2月以来,华东地区上海市、安徽省、江苏省、浙江省先后发生不明原因重症肺炎病例,大多数患者病前曾有活禽鸟接触史,经病原体分离鉴定后,于3月31日将其确诊为人感染H7N9禽流感病毒(avian influenza virus,AIV).截止到2013年4月15日共确诊病例63例,死亡14例.目前病例均为散发,并未见人际间传播.疫情出现后,国家卫生与计划生育委员会、疾病防治控制中心立刻启动应急预案,完善疾病监测信息报告管理系统,即时发布《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》、《人感染H7N9禽流感医院感染预防与控制技术指南》和《人感染H7N9禽流感诊疗方案》[1].为提高科学有效防控H7N9禽流感的水平,现就人感染H7N9禽流感的相关知识作一介绍.
