第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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赖氨酸特异性去甲基化酶1在食管鳞癌中的表达及其临床意义
目的 检测赖氨酸特异性去甲基化酶1 (Lysine specific demethylase 1,LSD1)在食管鳞癌以及正常食管组织中的表达,并探讨LSD1与食管鳞癌临床特征、肿瘤增殖及凋亡等的关系.方法 免疫组化S-P染色法检测86例食管鳞癌组织及29例正常食管组织中LSD1、增殖相关抗原Ki67的表达情况,TUNEL检测食管鳞癌组织凋亡情况,并分析LSD1表达与患者临床资料、预后以及增殖和凋亡的关系.结果 LSD1在食管鳞癌组织中阳性率(89.5％)明显高于正常组织(51.7％),且与患者淋巴结转移相关(P＜0.05),并能明显影响患者的预后(P＜0.05),LSD1的表达与肿瘤增殖有关,但与凋亡无关.结论 LSDI在食管鳞癌中高表达且与患者预后相关,可能成为食管鳞癌中值得研究的治疗靶标.
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ZJX-1型口腔常用器械光波消毒器消毒效果的实验研究
目的 研究一种新型口腔常用器械光波消毒器的消毒效果.方法 用载体定量杀菌实验和理化测定等方法,对ZJX-1型口腔常用器械光波消毒器进行消毒性能的实验室观察.结果 该消毒器开机运行3min内可将大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌与白色念珠菌完全杀灭,将HBV-DNA完全破坏,消毒合格率均达100.0％；5min内可将枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭,消毒合格率达100.0％.启动消毒器运行1～5 min紫外线强度测定结果为885 μW/cm2～2 000 W/cm2,温度测定结果为137～ 161℃,达到消毒技术规范标准.依照规范标准判断该消毒器累计运行72 h对不锈钢基本无腐蚀,腐蚀速率为0.000 0 mm/年,对铜、碳钢为中度腐蚀,腐蚀速率分别为0.113 3、0.294 5 mm/年,对铝为轻度腐蚀,腐蚀速率为0.055 2 mm/年.结论 该新型口腔常用器械光波消毒器消毒效果达到消毒标准要求,能够达到与高温、高压灭菌同样效果,而且经济、方便,是一种实用性很强的口腔科消毒器械.
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HCV核心蛋白氨基酸替换与干扰素应答的关系
目的 研究慢性丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸替换与干扰素疗效的关系.方法 纳入HCV RNA阳性的慢性丙型肝炎患者108例,依据干扰素治疗结局分为持续病毒学应答组(76例)、非持续病毒学应答组(32例).逆转录巢式PCR (RT-nested-PCR)扩增核心蛋白区,分析其氨基酸替换模式及其与干扰素疗效的关系.结果 高频替换(频率＞10％)发生于Core蛋白第70、75、91、106、110、147、187位氨基酸残基,各位点之间存在广泛的连锁替换；两组间Core蛋白第70位的Q/non-Q替换(P=0.004)、91位的M/non-M替换(P=0.039)、110位的T/non-T替换(P =0.025)具有显著差异；70Q、91M、110T替换更倾向于发生不应答治疗结局,OR值及95％ CI分别为0.288 (0.120～0.693)、0.413 (0.177 ～0.966)、0.346 (0.133 ～0.896)；同时携有上述2个以上的“抵抗型”替换者,治疗4周时HCV RNA水平下降更缓慢(P=0.001).结论 HCV Core区第70、91、110三个位点可作为Core区预测干扰素疗效的优选氨基酸位点.
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亚微米级荧光脂质微泡的制备及其肝脏成像的实验研究
目的 制备荧光标记的脂质微泡,检测一般物理性质、荧光标记情况以及评价在兔肝脏的显影效果.方法 用二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)溶解细胞膜绿色荧光分子探针(3,3 dioetadeeyloxaearboeyanineperehlorate,DiO) 后,抽取少量溶解液加至脂质冻干粉内与溶媒液相溶,全氟丙烷置换瓶内空气,后机械振荡仪高速振荡制成带有荧光标记的脂质微泡,检测其微泡的一般物理性质、荧光标记情况；随机选取6只健康新西兰大白兔,雄性,体质量2.0～2.5 kg,经兔耳缘静脉团注荧光微泡后动态观察微泡在兔肝实质的显影效果,手术切取部分肝脏,冰冻切片后在荧光显微镜下观察荧光素在肝脏内的分布情况.结果 荧光标记的脂质微泡形态呈圆形,大小均一,微泡浓度范围(4～7)×109/mL,微泡粒径为(429±119)nm,激光共聚焦显微镜下微泡外壳被绿色光圈环绕.兔肝脏造影可见持续饱满的增强显影效果,荧光显微镜下肝脏内荧光素面积分布较少.结论 荧光标记的脂质微泡大小均一,粒径大小达到进入肺循环标准,在兔肝脏内显影效果显著.
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外侧半月板损伤患者病程与关节软骨损伤的关系
目的 探讨外侧半月板损伤患者病程与膝关节软骨损伤的关系.方法 纳入2010-2011年于本中心关节镜下诊断为外侧半月板损伤的患者376例,根据病程长短,参照Keene时间划分法将患者分为3组:急性期组(≤2个月),亚急性期组(＞2 ～12个月),慢性期组(＞12个月).统计患者病程及软骨损伤程度,分析病程与软骨损伤之间的关系.结果 有软骨损伤者共129例(34.31％),其平均病程长于无软骨损伤患者(P＜0.05).Ⅰ～Ⅳ级软骨损伤患者分别为7例(5.43％)、42例(32.56％)、59例(45.74％)、21例(16.28％)；急性期、亚急性期、慢性期患者软骨损伤发生率依次递增,分别为23.64％、30.59％、42.38％,慢性期患者软骨损伤发生率显著高于急性期与亚急性期(P＜0.05)；其中急性期软骨损伤以Ⅰ～Ⅲ级为主,亚急性期、慢性期软骨损伤以Ⅱ～Ⅲ级为主并有部分Ⅳ级损伤.结论 膝关节软骨损伤发生率随外侧半月板损伤病程延长逐渐增加,应及时治疗.
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旁分泌机制在脂肪间充质干细胞移植治疗心肌梗死中的作用
目的 探讨旁分泌机制在脂肪间充质干细胞(adiopose-derived stem cells,ADSC)移植治疗心肌梗死中的作用.方法 原代分离和培养人ADSC,将经鉴定的第3～5代的ADSC用于实验.①用8～ 10周龄(20～24 g)的雄性C57 B/L小鼠,结扎左前降支建立心肌梗死(myocardial infaretion,MI)损伤模型,实验分假手术组,MI+ DMEM/F12组和MI+ ADSC-CM(conditioned medium,条件培养液)组(n=12).在MI处理的小鼠心肌梗死边缘区分别注射DMEM/F12和ADSC-CM,观察动物生存率、TTC染色测量心肌梗死面积、超声评价心功能变化、TUNEL染色检测心肌细胞凋亡等方法评价心肌梗死的治疗效果.②用H2O2建立乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVM)体外损伤模型,观察ADSC-CM对心肌细胞的保护作用.实验分对照组,H2O2+ DMEM/F12组和H2 O2+ ADSC-CM组(n=5).分别用caspase-3 蛋白定量和TUNEL染色检测心肌细胞凋亡.结果 ①相较于DMEM/F12,ADSC-CM显著减少心肌梗死面积[(35.3±0.5％)vs(41.7±1.9％)P ＜0.05]、提高心功能[EF:(60.4±4.8)％vs(47.2±3.7)％,P＜0.05]、减少梗死边缘区心肌细胞凋亡[TUNEL+心肌细胞/106细胞核:(677.4±64.2) vs (867.3±67.9),P＜0.05]；②相对于DMEM/F12,ADSC-CM明显减少H2O2诱导的心肌细胞凋亡[caspase-3蛋白表达下降；TUNEL阳性率:(58.84±2.19)％vs(71.65±0.86)％,P ＜0.05].结论 ADSC-CM通过减少心肌细胞凋亡发挥对心肌梗死的治疗作用；旁分泌作用是ADSC移植治疗心肌梗死的重要机制.
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新型纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的作用
目的 研究纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASON)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary arterial smooth muscle cells,RPASMCs)增殖和凋亡作用.方法 设计合成5′端标记Cy3的Bcl-xlASON,由纳米载体Ac-αCD携带.实验分3组:纳米载体携带的Bcl-xl ASON组(ASON-NPs组)、单纯纳米载体组(NPs 组)和空白对照组,分别使用纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl ASON、纳米载体Ac-αCD和培养液处理RPASMCs 48 h,激光共聚焦显微镜观察RPASMCs对纳米载体携带的Bcl-xl ASON的摄取情况；RT-PCR、Western blot检测Bcl-xl的mRNA和蛋白表达；MTT检测处理后细胞的增殖抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 激光共聚焦显微镜下可见ASON-NPs组细胞质内大量呈颗粒状均匀分布的红色荧光物质,空白对照组和NPs组细胞细胞质内未见红色荧光物质；ASON-NPs组处理的RPASMCs的Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著低于空白对照组和NPs组(P＜0.05)；ASODN-NPs组、NPs组、空白对照组细胞抑制率分别为:(53.61±3.02)％、(6.30±1.90)％、(1.40±0.62)％,凋亡率分别为:(53.04±2.09)％、(10.98±2.03)％、(2.19±0.11)％、ASON-NPs组和NPs组细胞抑制率、凋亡率均显著高于空白对照组(P＜0.01),ASON-NPs组均显著高于NPs组(P＜0.01).结论 纳米载体Ae-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸能被RPASMCs有效摄取,从而抑制其增殖,促进凋亡.
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小鼠皮肤创伤后创面局部真皮干细胞参与修复过程
目的 研究小鼠皮肤创伤后,创面局部的真皮干细胞是否被激活并参与创伤愈合过程.方法 小鼠背部行全层皮肤损伤后,首先应用腹腔单次注射BrdU 2 h后标记快速分裂细胞(rapidly dividing cells,RDCs),检测创面局部组织中不同时间点细胞增殖反应情况；其次通过多次连续注射BrdU长时间后在体检测标记存留细胞(label-retaining cells,LRCs),以反映创伤后局部真皮干细胞被激活情况；后分离BrdU在体多次连续标记后的肉芽组织细胞和正常真皮细胞,通过比较其集落形成能力并检测BrdU信号存留情况,研究肉芽组织中真皮干细胞被激活和参与修复的情况.结果 单次注射BrdU 2 h后,在正常皮肤组织中,仅在表皮基底层和毛囊上皮细胞中存在少量的BrdU阳性细胞,而创伤后在创缘表皮、毛囊、创缘真皮和肉芽组织细胞都发生了明显的增殖反应；创伤后多次连续注射BrdU 3 d后,通过长时间示踪,证实创面愈合后肉芽组织中存在LRCs,而在正常真皮组织中未检测到被BrdU标记的细胞；进一步发现肉芽组织细胞较正常真皮细胞具有更强的集落形成能力,且在肉芽组织细胞形成的集落中仍可检测到BrdU信号阳性的LRCs.结论 创面肉芽组织中存在具有干细胞特性的LRCs,提示皮肤创伤后局部真皮干细胞被激活并参与创伤愈合过程.
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食管上段异位胃黏膜的组织学特点及临床意义
目的 观察食管上段异位胃黏膜(heterotopic gastric mucosa in upper esophagus,HGMUE)的组织学特点以及内镜下表现,研究患者各相关临床症状与HGMUE泌酸功能之间的联系.方法 分析40例普通内镜下诊断为HGMUE的患者的临床表现、NBI内镜以及共聚焦激光显微内镜(confocal laser endomicroscopy,CLE)特点,采用透射电镜、HE、免疫组化观察其病理学特征.结果 40例患者中,平坦型38例(95％),隆起型2例(5％),病变形态有椭圆形18例(45％)、圆形9例(22.5％)、不规则岛状7例(17.5％)、条索状6例(15％)；NBI内镜下,可清楚区分病变区域与周围正常食管黏膜,小凹形态以管状(92.5％)为主,未发现表面微血管扩张变异；CLE扫描腺管开口呈胃底型27例,非胃底型13例,结合HE病理诊断,符合率为92.5％,有不同程度的荧光素钠渗出；透射电镜显示细胞超微结构与正常胃黏膜无明显差异,HE染色胃底型腺体28例(70％),非胃底型腺体12例(30％)；免疫组化结果显示,胃底型腺体中质子泵、胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ表达均为阳性；相关临床症状中除胸骨后疼痛与壁细胞有关外(P＜0.05),其余症状壁细胞均无统计学差异(P＞0.05).结论 HGMUE患者病理分型以胃底型为主,此种异位胃黏膜可能有分泌胃酸及胃蛋白酶的能力,与患者胸骨后疼痛的症状相关；NBI内镜及CLE对于HGMUE的诊断比普通内镜可能具有更好的分辨效果及价值.
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胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型的数字化研究
目的 建立胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型,为临床上监测纵隔淋巴结的实际受照剂量提供实验依据.方法 以标准中国人体(身高170 cm、体质量65 kg)为参照,选取20例相近体型的男性胸部肿瘤患者,运用瓦里安公司的Eclipse治疗计划系统(treatment planning system,TPS)确定纵隔淋巴结分布区的三维定位点；根据定位点和三维立体数据,对辐照仿真体模(以下简称体模)进行打孔；根据辐射监测探头的形状和大小,安装辐射剂量监测设备.结果 通过Eclipse系统,精确定位了标准中国人体的纵隔淋巴结各分区中心点,并在胸部CT图像横断面、矢状面和冠状面上测量了标准中国人体的三维定位平均数据；利用该数据在体模上实施精确打孔,并安装辐射剂量监测装置,建立了纵隔淋巴结辐射剂量监测的仿真模型.结论 建立了胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型,实现了精确打孔并安装了探测设备.
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敲除解偶联蛋白3促进高盐介导的血管内皮功能损害
目的 探讨解偶联蛋白3(uncoupling protein 3,UCP3)敲除对高盐介导的血管内皮功能损害的影响及机制.方法 雄性UCP3敲除(UCP3 KO,C57BL/6J背景)及相应的野生型小鼠(wild type,WT)各20只,分普盐饮食组(normal salt,NS:饮食中含0.5％食盐)和高盐饮食干预组(High Salt,HS:饮食中含8％食盐),每组10只小鼠；饮食干预24周后:①二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)染色荧光显微镜观察各组小鼠肠系膜动脉中超氧阴离子水平；②微血管张力检测仪观察肠系膜动脉血管功能,包括内皮依赖性舒张功能和非内皮依赖性舒张功能；③测定鼠尾血压观察各组小鼠干预前后的收缩压与舒张压水平.④取小鼠的胸主动脉,蛋白印迹法(Western blot)观察UCP3蛋白和p-eNOS的表达.结果 与普盐饮食WT小鼠比较,高盐饮食WT小鼠的血管超氧阴离子水平显著升高(P＜0.01)；而UCP3敲除则显著增加高盐环境下超氧阴离子的水平(P＜0.05),与高盐WT小鼠比较；高盐环境使血管内皮依赖性舒张功能受损,而高盐干预的UCP3敲除小鼠与WT小鼠比较,内皮功能的损害更为显著(P＜0.05)；Western blot结果提示,高盐饮食显著增加WT小鼠胸主动脉组织中的UCP3表达水平,降低p-eNOS水平.结论 UCP3敲除后使小鼠抗氧化应激能力下降,在高盐状态下,使血管功能的损害加重,血压升高.
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兔膝关节内纳米超顺磁性氧化铁颗粒标记细胞磁靶向模型建立
目的 建立活体兔膝关节腔内磁靶向细胞移植模型,探讨纳米超顺磁性氧化铁颗粒(superparamagnetic iron oxide,SPIO)标记的种子细胞磁靶向移植修复关节软骨缺损的可行性.方法 将8只家兔按随机数字表法分成2组,在其左膝股骨滑车中央制造直径5 mm、深6 mm的圆柱形骨软骨缺损,实验组(n=4)缺损内置入钕铁硼强力磁体,对照组(n=4)置入骨水泥；将体外培养扩增的同种异体兔膝关节软骨细胞经BrdU及SPIO双重标记后注入上述活体兔膝关节腔内,1周后取缺损区组织分别行HE、普鲁士蓝染色及BrdU显色.结果 实验动物均存活.HE染色示实验组缺损区内大量细胞聚集生长,SPIO及BrdU双重标记结果显示其来源为外源性注入,形态类似软骨细胞；对照组见缺损区纤维组织增生明显,间以大量炎性细胞,SPIO及BrdU双重标记示外源性注入的细胞散在分布,少量集中于缺损区.实验组与对照组相比,高倍镜下缺损区阳性细胞数有显著性差异(t =6.343,P=0.001).结论 该模型可较好完成SPIO标记的关节软骨细胞活体兔膝关节腔内的磁靶向移植研究,并证实磁靶向技术可以显著提高移植细胞向目标区域聚集生长的效率,且能保留较高的细胞活性.
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miR-18a对A549细胞的放射增敏作用及其机制
目的 观察miR-18a对A549肺腺癌细胞放射敏感性的影响.方法 qRT-PCR检测2 GyX线照射A549细胞后miR-18a的变化；将人工合成的miR-18a模拟物(mimics)转染A549细胞,测定不同剂量照射后A549细胞的克隆形成能力,描记细胞存活曲线,测算2 Gy时存活分数(SF2)等指标,判断miR-18a对A549细胞放射敏感性的影响；同时检测过表达miR-18a的A549细胞中共济失调-毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)蛋白,探讨miR-18a对A549细胞放射敏感性影响的分子机制.结果 与照射前(1.00±0.04)相比,2 Gy剂量照射后A549细胞miR-18a水平[(0.18±0.04)～(0.31±0.09)]显著降低(P＜0.05).miR-18a过表达后A549细胞放射敏感性增强,miR-18a过表达组、空白对照组SF2分别为0.34,0.48;同时miR-18a过表达的A549细胞中ATM、磷酸化ATM(ATM phospho S1981)水平下降.结论 miR-18a上调A549细胞放疗敏感性,可能与miR-18a下调ATM有关.
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TNIP1基因及其编码蛋白ABIN1在进行期寻常型银屑病中的表达及意义
目的 研究TNFα诱导蛋白3相互作用蛋白1(TNFα-induced protein 3-interacting protein 1,TNIP1) mRNA及其编码蛋白在进行期寻常型银屑病患者体内的表达水平,探讨其在银屑病发病机制中的意义.方法 研究分为两组,病例组为2011年10月至2012年4月我院皮肤科收治的进行期寻常型银屑病患者25例,男性13例,女性12例,年龄(33.0±8.3)岁；健康对照组为我院体检中心健康人群共25例,男性14例,女性11例,年龄(31.3±9.9)岁.通过荧光定量PCR和Western blot检测TNIP1 mRNA及其编码蛋白ABIN1在病例组和对照组外周血淋巴细胞中的表达,免疫组化染色法检测ABIN1蛋白在患者皮损和健康对照者皮肤中的定位和表达.结果 病例组外周血淋巴细胞中TNIP1 mRNA的相对表达量(0.292 1±0.1016)显著低于健康对照组(1.085 9±0.266 3)(P ＜0.05),ABIN1蛋白在病例组外周血淋巴细胞中的表达(0.093 2 ±0.003 9)与健康对照组(0.290 9 ±0.057 8)相比也有显著差异(P＜0.05).ABIN1蛋白主要表达在健康对照者皮肤的表皮层,且主要表达在细胞核外,病例组皮损中ABIN1蛋白的表达明显减少.结论 银屑病患者TNIP1 mRNA及其蛋白的低表达可能与银屑病的发生、发展有密切的联系.
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慢病毒转染人角质形成细胞高表达核纤层蛋白B1
目的 通过对慢病毒载体稳定转染人角质形成细胞(HaCaT)株和未转染HaCaT细胞进行比较蛋白组学分析,找出其差异表达蛋白,寻找基因修饰组织工程表皮种子细胞生长特性改变的原因和可能存在的成瘤性安全隐患.方法 选择慢病毒载体稳定转染后生长特性发生明显改变的转染株细胞,采用二维电泳技术对该转染株和未转染株的总蛋白进行分离和比较,找出差异表达蛋白点,再进行串联质谱鉴定.从鉴定得到的差异蛋白中选择可能与细胞生长特性改变和肿瘤生成相关的核纤层蛋白Bl(lamin B1)采用Western blot和实时荧光定量PCR技术(qPCR)对其表达差异进行验证.结果 与未转染株比较,转染株在二维电泳中存在11个差异表达蛋白点,质谱从其中鉴定出7个蛋白质.选取其中与细胞增殖和凋亡相关的核纤层蛋白B1通过WB和qPCR证实其在转染株中蛋白和转录水平均存在明显的高表达.结论 慢病毒载体稳定转染株HaCaT细胞株相对未转染株核纤层蛋白B1高表达.这种高表达可能与转染株细胞生长特性改变和潜在的成瘤性隐患相关.
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膀胱肿瘤患者外周血源性树突状细胞表型及免疫功能变化
目的 探讨膀胱肿瘤患者外周血源性树突状细胞(dendritic cells,DCs)的表型及免疫功能变化.方法 通过密度梯度离心法从膀胱肿瘤患者和正常人外周血分离单个核细胞,加rhGM-CSF和rhlL-4诱导培养树突状细胞,采用流式细胞仪检测2组DCs表达程序性死亡配体-1(PD-L1)、CDla、HLA和CD83的变化,混合淋巴细胞反应检测其刺激T淋巴细胞增殖能力和ELISA法检测分泌IL-10和IL-12的变化.结果 膀胱肿瘤患者外周血DCs表达PD-L1[(95.06±4.06)％ vs (76.63±6.90)％]和分泌IL-10[(214.00±13.75) pg/mL vs(83.78±7.95) pg/mL]的水平显著高于正常组(P＜0.05),DCs表达CD83[(16.20±1.91)％ vs (35.53±1.58)％]及刺激淋巴细胞增殖的能力均低于正常组水平(P＜0.05).结论 膀胱肿瘤患者外周血源性树突状细胞高表达PD-L1、低表达CD83及过多分泌IL-10可能是膀胱肿瘤发生免疫逃逸的原因之一.
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GRP78和CHOP蛋白表达增加与脓毒性休克大鼠肺血管通透性改变的关系
目的 研究脓毒性休克大鼠内质网应激模型中葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)蛋白表达的变化及其与血管通透性改变的关系.方法 42只成年SD大鼠,雌雄各半,体质量200～220 g,随机分为3组:①假手术组；②盲肠造瘘组,按照术后时间长短盲肠造瘘组又分为术后1、2、4、6、8h等5个亚组；③盲肠造瘘+牛磺酸组(n=6).用异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白注入肺组织,在术后1、2、4、6、8h时分别取各组相应大鼠肺脏,牛磺酸干预组于术后6h取出,生理盐水进行肺灌洗,观察其荧光物质渗透率的变化测量肺毛细血管通透性；Western blot方法测量肺血管内皮细胞GRP78和CHOP蛋白的表达并对各组进行比较.结果 ①大鼠盲肠造瘘术后1、2、4、6、8h后GRP78和CHOP蛋白表达均呈递增趋势[(P(GRP78) ＜0.05；P(CHOP)＜0.05],肺血管荧光物质渗透率也随着时间的延长呈直线递增的趋势(P=0.006＜0.05),盲肠造瘘组各组GRP78和CHOP蛋白的表达与肺血管荧光物质渗透率的改变呈正相关(R2=0.785,P＜0.05;R2=0.881,P＜0.05)；②牛磺酸处理后,6h点肺血管荧光物质渗透率显著低于单纯盲肠造瘘术后(P=0.007 ＜0.05),GRP78和CHOP蛋白的表达也较盲肠造瘘组低(P=0.004 ＜0.05).结论 脓毒性休克内质网应激参与了血管通透性增高的发生,GRP78和CHOP蛋白为重要的参与分子.
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大鼠脊髓损伤后自噬相关蛋白LC3和BNIP3的表达
目的 检测大鼠脊髓损伤后神经元自噬以及相关蛋白的表达.方法 24只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为假手术组,损伤后6、12、24、48、72 h组,每组4只.假手术组仅作T10椎板切除,Allen's法建立损伤模型.透射电镜观测损伤组织的超微结构,Western blot检测LC3、BNIP3的表达变化,免疫荧光检测LC3、BNIP3的表达及定位.结果 透射电镜下脊髓损伤48 h后观测到自噬小体；Western blot检测显示LC3-Ⅱ表达量48 h后明显升高(P＜0.01),BNIP3损伤后12 h明显升高(P＜0.05)；免疫荧光显示LC3、BNIP3在损伤区域的神经元中高表达.结论 大鼠脊髓损伤后激活神经元自噬以及相关蛋白表达.
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Tmub1沉默对大鼠肝部分切除术后肝细胞增殖的影响
目的 探讨Tmub1蛋白在肝再生过程中的作用及其在肝再生过程中对Securin蛋白的影响.方法 54只大鼠随机分为3组即Tmub1 RNAi慢病毒组、空载慢病毒组及正常对照组,其中Tmub1 RNAi慢病毒组、空载慢病毒组注射相应病毒颗粒(3×107 TU),对照组未行注射,2d后行肝部分切除术(partial hepatectomy,PH),每组分为6个亚组:PH术后0、2、6、12、24、48 h,每亚组3只大鼠,术后提取原代肝细胞、留取肝脏组织标本,利用Real-time PCR和Western blot检测慢病毒干扰效果及Tmubl沉默后对Securin蛋白的影响.MTT实验、流式细胞仪检测原代肝细胞的增殖情况.结果 Real-time PCR和Western blot表明实验组Tmub1 mRNA和蛋白被有效抑制；Tmub1沉默后securin mRNA表达无明显变化,而G2/M期securin蛋白量明显减少.MTT实验表明Tmub1沉默可明显上调PH术后6～24 h肝细胞的增殖速率；流式细胞分析结果显示实验组处于G2/M期的肝细胞比例明显增高.结论 Tmub1蛋白在肝再生过程中对肝细胞增殖进程发挥负向调控作用,而该作用可能与其在蛋白质水平影响了Securin的表达密切相关.
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成功切除Rh阴性血型头面部巨大神经纤维瘤1例
1病例资料患者,男性,28岁,主因头面部巨大肿物20余年,影响视物及外观入院.查体见:病变位于左侧头面部,呈巨大下垂外观.分布于左侧颞顶部头皮内、左侧面颊部.表面无破溃,可见较多毛发不均匀分布.色泽不均,大部分呈咖啡样外观,局部黑灰,病变质软,下垂明显,严重遮盖左眼,影响正常视物(图1A).平卧位行头面部MRI检查示(图1B):左侧头颞部头皮软组织可见巨大软组织肿块,呈稍长T1稍长T2信号影,其内见多个迂曲血管影及结节影,病灶大小约20.9 cm ×6.9 cm×15.5 cm,病变向前生长,部分遮盖左眼.
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颈椎椎管内肠源性囊肿1例
肠源性囊肿(enterogenous cyst)又称做神经管原肠囊肿,是一种较少见的先天性发育畸形的囊肿.因其壁内衬能分泌黏液的类似于胃肠道的柱状上皮而得名,多来源于胚胎发育时期神经肠管的残余组织[1].本院收治1例,现报告如下.1临床资料患者,男性,11岁,因"间断后颈部疼痛9个月"于2012年12月3日收治入本院.临床表现:后颈部疼痛,同时出现四肢发麻、乏力,走路不稳,行动不便;用药(消炎、止痛)后上述症状可短时消失.
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24例硬-腰联合麻醉下妊娠期急腹症手术麻醉体会
妊娠期妇女的呼吸循环消化以及中枢神经系统都发生了一系列的生理变化和功能改变,若妊娠期患急腹症往往比较危急,对胎儿有一定影响,因此在诊治方面有一定的特殊性.妊娠期妇女中约有1.5％的妇女在妊娠期间接受非产科手术,其并发症发生率及死亡率与非妊娠妇女无异,但胎儿死亡率在5％～35％之间[1].而麻醉往往容易引起胎儿早产,还可严重影响胎盘血供,有可能导致胎儿宫内窘迫,严重的影响胎儿流产.我院2003年1月至2010年12月采用硬-腰联合麻醉(combined spinal and epidural anesthesia,CSEA)用于妊娠期急腹症手术24例,均取得了满意的效果,现报告如下.
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宫颈癌术后阴道上皮内瘤变28例临床分析
阴道上皮内瘤变(vaginal intraepithelial neoplasia,VAIN)是包括阴道鳞状上皮不典型增生和原位癌的一组病变.VAIN发病率低,为0.2/105～ 0.3/105,仅为宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的0.6％ ～1％,但是较常见于因CIN或宫颈癌行子宫切除的患者[1].本研究对2007年1月至2011年5月郑州大学第二附属医院收治的子宫颈癌术后门诊随访时经病理检查发现的28例VAIN患者的临床资料进行回顾性分析,探讨宫颈癌术后VAIN的发生率及临床特点、诊断、治疗及预后.
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体位压迫预防肝穿刺活组织检查术后出血173例观察
肝穿刺活组织检查术有时会引起腹腔内大出血,是术后引起死亡的主要原因.以往预防肝活检术后出血的主要措施为采用腹带和沙袋压迫的方法,但这种护理方法不仅部分限制了患者的活动,使患者不适,且易出现穿刺点疼痛、腰背酸痛、排尿困难等情况,且仍有少部分患者发生出血,国外报道出血的发生率为0.4％～5.3％[1-2],国内报道为0.6％[3],因此探索新的预防出血的方法甚为必要.我院于2010年10月至2012年12月对173例患者进行了肝活检,通过体位压迫替代沙袋、腹带的护理方法,无1例发生出血,且患者舒适度好,现报告如下.
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代谢手术治疗高血压和2型糖尿病——理想抑或现实?
我国高血压和血脂异常患者均超过2亿,肥胖和糖尿病患者分别达到7千万和9千万.这几类重大慢病常聚集存在,构成代谢综合征.目前我国代谢综合征的患病率已达15％,上述重大慢病既是心肌梗死、心衰、脑卒中和肾功能不全的主要危险因素,也是致残和病死的主要原因.这类以代谢紊乱为始动因素,并导致的心血管损害的疾病也称之为代谢性心血管病,揭示其发病机制对控制代谢性心血管病至关重要.据201 1年《中国心血管病报告》,我国35～ 84岁人群未来20年的心脑血管事件数增加将超过50％,如合并高血压、糖尿病和血脂异常,心脑血管事件数将额外增加23％.世界银行预测我国心血管病在未来10年将快速增长,如不改善应对措施,心脑血管与糖尿病将给我国造成5 500亿美元的经济损失.虽然近年来我国心血管代谢病的研究与防治取得了许多进展,但其患病率及其相关的心血管事件乃居高不下[1-2].
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代谢手术改善糖尿病患者血管舒张功能及相关机制
目的 探讨代谢手术(metabolic surgery)对肥胖合并2型糖尿病患者血管舒张功能(vascular dilation)的影响及发生机制.方法 105例健康成人作为正常组,将31例肥胖合并2型糖尿病患者中11例未手术患者作为非手术组,20例代谢手术后患者作为代谢手术组.用高频超声检测所有观察对象安静状态下肱动脉内径(D1)、血流阻断后肱动脉内径(D2)及含服硝酸甘油后肱动脉内径(D3),计算出血流介导的血管舒张反应(flow-mediated dilation,FMD)及硝酸甘油介导的血管舒张反应(nitroglycerin-mediated dilation,NMD)；测量20例代谢手术前后患者体质量、体质指数(BMI)、血压、血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白、血清胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)及二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase-4,DPP-4).结果 代谢手术组与非手术组相比,血管舒张功能(FMD、NMD)具有显著差异(P＜0.01),与正常组血管舒张功能(FMD、NMD)相比,差异无统计学意义(P＞0.05)；而非手术组与正常组相比,血管舒张功能(FMD、NMD)具有显著差异(P＜0.01)；与代谢手术组术前相比,术后GLP-1明显升高(P＜0.05),DPP-4明显降低(P＜0.05).结论 肥胖合并2型糖尿病患者血管舒张功能明显低于正常人,肥胖合并2型糖尿病患者通过代谢手术治疗,体质量、BMI、血脂、血压、GLP-1、DPP-4较术前明显改善,而使血管舒张功能得到改善.
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腹腔镜Roux-en-Y胃转流术对2型糖尿病患者术后近期血压的影响
目的评价腹腔镜Roux-en-Y胃转流术(Roux-en-Y gastric bypass,RYGB)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者近期血压的影响.方法 分析2010年5月至2012年4月经内科评估后行腹腔镜RYGB的T2DM患者21例的临床资料,包括手术前及术后1、3、6、12个月诊室血压、24 h动态血压(24-hour ambulatory blood pressure,ABPM等的变化情况,及其与体质量、体质指数(BMI)、腰围(WC)的关系.结果 肥胖组(BMI≥28.0 kg/m2)手术后能明显降低患者诊室血压和晨峰血压(MBPS) (P ＜0.05)；非肥胖组仅舒张压手术前后有统计学差异(P＜0.05),ABPM各指标无统计学差异.与术前相比,合并高血压患者诊室血压显著下降(P＜0.05),且与手术前后体质量、BMI、WC及其变化均无显著相关.结论 腹腔镜RYGB能够有效降低2型糖尿病合并高血压患者术后近期血压,且血压下降与体质量、BMI、WC无显著相关.
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代谢手术对肥胖与非肥胖2型糖尿病患者体质指数、胰岛素抵抗及血脂影响
目的 比较代谢手术对肥胖与非肥胖2型糖尿病患者术后体质指数(BMI)及代谢指标的总体效果差异.方法 以体质指数28为切点,分为肥胖糖尿病组(BMI≥28 kg/m2,n=10)及非肥胖糖尿病组(BMI＜ 28 kg/m2,n=10),术前配比各项基础资料,术后3～6个月随访体质指数、葡萄糖耐量及胰岛素释放、尿酸、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平,比较各组手术前后的差异以及两组术后效果的差异.结果 相关分析发现非肥胖患者(BMI＜ 28 kg/m2)术后BMI下降程度与术前BMI无相关(r=0.416,P=0.232),而肥胖患者(BMI≥28 kg/m2)术后BMI下降程度则与术前BMI高低明显相关(r =0.932,P＜0.001).非肥胖患者与肥胖患者手术前后胰岛素抵抗程度、总胆固醇水平均明显改善(P＜0.05),而尿酸代谢、低密度脂蛋白胆固醇水平均无明显变化.两组患者术后在体质指数的下降程度差异明显,肥胖患者较非肥胖患者下降更明显,而两组患者术后在胰岛素抵抗、总胆固醇水平的改善程度上并无显著性差异.结论 代谢手术能明显改善肥胖与非肥胖糖尿病患者术后体质量、胰岛素抵抗及血脂,且非肥胖2型糖尿病患者与肥胖2型糖尿病患者术后总胆固醇、低密度脂蛋白及胰岛素抵抗改善获益相当,肥胖与否不能作为是否手术的绝对指征.
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以内科为主导多学科协作代谢手术治疗2型糖尿病的临床路径探索
目的 探索多学科合作的手术治疗2型糖尿病的优化临床路径.方法 由内分泌科、胃肠外科、消化内科、营养科及心理医生、护理人员和个案管理师组成多学科协作团队；对33例2型糖尿病患者实施胃肠转流手术,术式为胃转流术；按照一定的临床路径实施术前评估、手术治疗、术后管理和长期随访.结果 术后1个月主要代谢指标(包括空腹及餐后血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、血脂、尿酸)、炎性标志(h-CRP)及肥胖指标(体质量、体质指数、腰围、腹部脂肪分布)与术前相比有显著改善.术后随访1年以上的患者10例,9例获得临床缓解.结论 由代谢内分泌科为主导,胃肠外科为骨干,按较优化的临床路径、多学科合作手术治疗糖尿病的模式取得了较好的临床效果.
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腹腔镜Roux-en-Y胃转流术治疗2型糖尿病近期疗效分析
目的 总结分析腹腔镜胃转流术(Roux-en-Y gastric bypass,RYGB)治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的近期疗效,评估手术的安全性.方法 回顾性分析我院近2年来腹腔镜RYGB手术治疗的33例T2DM患者临床资料,年龄25 ～69(47.4±10.5)岁,BMI为22.2 ～45.5 (29.3±4.9) kg/m2,病程1个月至16年,平均4.6年.术后1、3、6、12个月定期随访并检测体质指数(BMI)、腹围、空腹血糖、HbA1c等指标,观察其变化.结果 33例患者均顺利恢复,无死亡,3例并发症(9％)分别为1例吻合口漏,2例吻合口溃疡均保守治愈.随访2～ 24个月,术后1个月BMI、腹围、空腹血糖、HbA1c等指标即显著降低(P＜0.05),在术后6～12个月达到低点.随访满1年的18例患者中,缓解11例(6l.l％),血糖控制5例(27.8％),好转2例(11.1％),无效0例.结论 腹腔镜RYGB手术对T2DM的近期疗效满意,88.9％的患者达到T2DM缓解或血糖控制,手术安全,值得临床推广.
