经皮微创纤维环穿刺法制作兔椎间盘退变模型

目的 应用经皮微创穿刺方法制造兔腰椎间盘退变模型.方法 在C型臂X光机监控下,定位18只兔子的L3/4、L4/5、L5/6椎间盘,应用经皮穿刺方法穿刺纤维环,每组行MRI检查后予以处死,取L3/4、L4/5、L5/6椎间盘髓核组织行HE染色观察髓核细胞,用免疫组化染色法观察Ⅱ型胶原蛋白染色情况,取L2/3及L6/7正常间盘组织作为对照.结果 造模前后椎间盘髓核的MRI信号强度有随造模手术后的时间延长而逐渐降低的趋势(L3/4、L4/5及L5/6,P＜0.05).病理HE染色观察发现,对照组正常的髓核组织中有大量的髓核细胞,随着通过微创法制作兔腰椎间盘退变动物模型后时间的延长纤维环细胞、髓核细胞数量逐渐减少,到第12周时,髓核组织中只有很少量的髓核细胞,却有很多纤维软骨组织.对照组及术后4、8、12周组Ⅱ型胶原免疫组化染色的灰度值单因素方差分析结果F=41.82,P＜0.05,组间比较LSD-t检验结果显示除术后4周与8周组比较差异无统计学意义外,其余组间比较均有显著差异(P＜0.05).结论 成功建立了新的微创兔腰椎间盘退变动物模型.

TURP术后尿道狭窄临床分析及对策研究

目的 探讨经尿道前列腺切除术(transurethral resection of prostate,TURP)术后尿道狭窄的预防及诊治策略.方法 回顾性分析2006-2010年本科104例TURP术后尿道狭窄患者临床资料,总结患者术后临床症状、发病时间、狭窄发生部位及疗效,结合临床检查情况进行分析.结果 前列腺增生患者TURP术后尿道狭窄发生率为(4.44％,104/2 341)；TURP术后尿道狭窄多发生于术后1年内,术后4～6个月为本组尿道狭窄发生高发期(41.35％,43/104)；TURP术后尿道狭窄常见狭窄部位为膜部尿道(35.58％,37/104),其次为尿道外口(21.15％,22/104)、膀胱颈(18.27％,19/104)及悬垂部(15.38％,16/104).结论 加强手术操作技能训练、尿管护理及充分润滑有助于预防TURP术后尿道狭窄的发生,治疗需要根据尿道狭窄部位及程度进行选择.

血清巨噬细胞炎症蛋白-2在脓毒症患者病情严重程度及预后中的评估价值

目的 探讨脓毒症患者早期血清巨噬细胞炎症蛋白-2 (macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)的浓度、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、降钙素原(procalcitonin,PCT)动态变化及与预后的关系.方法 采用前瞻性研究方法,选择2011年3月至2012年9月重症监护病房(ICU) 62例脓毒症患者,按照目标导向治疗(EGDT)方案进行复苏,将完成6 h EGDT复苏目标者归为Ⅰ组,未完成6 h EGDT复苏目标者归为Ⅱ组.分别记录患者复苏前(T0),复苏后6 h(T6 h)及复苏后1 d(T1 d)、2 d(T2 d)、3 d(T3 d)、4 d(T4 d)、5 d(T5 d)的APACHEⅡ评分,检测患者血中MIP-2、PCT、尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)等指标动态变化.根据患者28 d转归分为存活组和死亡组.结果 Ⅰ组APACHEⅡ评分、血MIP-2、PCT及BUN、Cr于复苏成功后呈逐渐下降趋势,于T5d低；Ⅱ组APACHEⅡ评分、血MIP-2、PCT及BUN、Cr于复苏失败后呈逐渐上升趋势；Ⅱ组APACHEⅡ评分于T2d时,血MIP-2于T1 d时较Ⅰ组明显升高(均P＜0.05).Ⅰ组死亡率明显低于Ⅱ组[12.5％ (5/40) vs 68.2％ (15/22),P＜0.05].存活组APCHEⅡ评分、血MIP-2、PCT及血BUN、Cr随病情好转逐渐下降,于T5d低,而死亡组则显著上升；死亡组APACHEⅡ评分于T1 d时、血MIP-2于T6h时即较存活组明显升高(均P＜0.05).结论 MIP-2是评估脓毒症的良好指标,动态监测其变化可了解脓毒症的发展过程,结合APACHEⅡ评分及PCT变化,对疾病的严重程度及预后有重要的评估意义.

CSF-DKK1作为标志物在神经母细胞瘤诊断与治疗监测中的临床价值

目的 定量检测神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)患者脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中Dickkopf相关蛋白1(DKK1),探讨其作为诊断NB及疗效评估标志物的临床价值.方法 实验组48例:NB患者经CT、骨髓检查确诊,年龄5个月至11岁,包括男性25例,女性23例；Evans分期:Ⅰ期5例,Ⅱ期20例,Ⅲ期15例,Ⅳ期8例.对照组50例:神经系统良性肿瘤25例,年龄5个月至65岁,包括男性13例,女性12例；化脓性脑膜炎10例,年龄5个月至6岁,包括男性4例,女性6例；脑外伤15例,年龄2～45岁,包括男性10例,女性5例.NB患者分别于治疗前、化疗结束后3d及化疗联合手术治疗后3d采集CSF样本各1次.ELISA法定量检测CSF中DKK1水平并做ROC曲线分析,对NB患者治疗后(化疗及化疗联合手术治疗)的CSF-DKK1水平进行随访检测.结果 与对照组[(57.0±13.7) pg/mL]相比,NB患者CSF-DKK1水平显著增高[(88.7±22.9)pg/mL,P＜0.01]；ROC曲线分析表明,CSF-DKK1诊断NB(Cut-off=65.0 pg/mL)的灵敏度为83％,特异性为76％.与治疗前相比,化疗缓解组[n =35,(48.5±9.7) pg/mL]及化疗联合手术组[n=15,(46.4±7.8) pg/mL]的CSF-DKK1水平均显著下降(P＜0.01),而化疗无效组的CSF-DKK1水平无明显变化[n=13,(89.1±25.7) pg/mL,P＞0.05].结论 NB患者脑脊液中DKK1水平显著升高且与疗效密切相关,可作为NB筛查诊断及疗效评估的标志物.

颈椎动态体位MRI及扩散张量成像对平山病的诊断价值

目的 分析平山病的临床及磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)特点,探讨MRI对平山病的诊断价值.方法 回顾性分析13例男性青年平山病患者的临床、肌电图检查和影像学资料；MRI检查包括自然位及屈颈位平扫、T1WI增强及扩散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI).结果 13例患者主要表现单侧或双侧上肢远端进行性肌萎缩、肌无力.肌电图示受累肌肉均发生神经源性损害.自然位MRI表现:①13例颈椎序列曲度失常；颈椎间盘变性、膨出或突出.②脊髓受累平面主要位于下段颈髓；横轴位见下段颈髓萎缩变扁；7例受累脊髓节段内见缺血坏死及胶质细胞增生的T2WI高信号.屈颈位MRI表现:①硬脊膜囊后壁前移并压迫相应节段颈髓；硬脊膜囊后间隙增宽；9例于增宽间隙内见弧形或小圆点状血管流空影.②3例增强扫描示背侧硬脊膜外间隙明显均匀强化.③3例DTI示病变颈髓区ADC值升高,FA值降低；2例病灶区神经纤维束变细稀疏,1例平扫示软化灶区的神经纤维束中断不连续.结论 平山病的临床及MRI表现均有一定特点,动态体位MRI更具特征性,DTI技术可以定量评价病灶内神经纤维束的结构和功能,有助于诊断及判断预后.

人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响

目的 构建人BNIP3真核表达载体,观察BNIP3高表达对人结肠癌细胞HT-29化疗敏感性的影响.方法 PCR法扩增BNIP3基因,酶切后插入质粒pEGFP-C3,构建重组真核表达载体pEGFP-C3/BNIP3.脂质体转染人结肠癌细胞HT-29,Western blot检测BNIP3蛋白表达.MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)的化疗敏感性和细胞增殖,AnnexinV-APC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 酶切电泳分析和DNA序列测定证实,重组质粒pEGFP-C3/BNIP3构建成功；转染重组质粒的HT-29细胞BNIP3蛋白明显高表达.与未转染组和转染空质粒pEGFP-C3组比较,转染pEGFP-C3/BNIP3组5-Fu的IC50值显著降低[(120.11 ±5.45)、(113.40 ±4.72) μg/mL vs (19.08 ±2.62) μg/mL,P＜0.05],细胞凋亡率显著增加[(5.51±0.32)％、(7.19±0.47)％vs (41.72±1.48)％,P＜0.05],细胞克隆形成显著减少[(52±6)、(49±5)vs(11±3),P＜0.05],细胞增殖速度减慢.结论 成功构建了人BNIP3真核表达载体,BNIP3高表达可增加HT-29细胞对5-Fu的化疗敏感性.

开放和经腹腔镜前列腺癌根治术围手术期的临床差异分析

目的 探讨经腹腔镜前列腺癌根治术较开放性前列腺癌根治术围手术期的优点.方法 回顾分析2006年1月至2012年2月我科收治的75例前列腺癌患者的临床资料,对比开放性前列腺癌根治术与经腹腔镜前列腺癌根治术两组患者围术期的临床特征及并发症等.结果 经腹腔镜前列腺癌根治术组的患者术中出血量和总输血量以及住院时间显著低于开放性前列腺癌根治术组(P＜0.05).开放性前列腺癌根治术组与经腹腔镜前列腺癌根治术组的总并发症分别为38.7％和18.2％ (P ＜0.05),其中重度并发症分别为6.5％和4.5％(P＞0.05).结论 经腹腔镜前列腺癌根治术因创伤小,术中出血量和围手术期输血量显著减少,总并发症率显著减少,终可能节约了医疗资源.

atRA抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化

目的 探讨高浓度全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,atRA)抑制大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向脂肪细胞分化的机制.方法 体外分离、培养和诱导大鼠BMSCs；在成脂诱导液中加入0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L atRA,光学显微镜下观察细胞形态及油红O染色变化；油红O染色提取法分析不同浓度atRA对BMSCs成脂分化的影响；real-time PCR测定细胞视黄酸受体(RARα、RARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)及过氧化物酶体增殖激活受体γ2(PPARγ2)mRNA水平的变化.结果 细胞形态及油红0染色观察发现,在0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L atRA作用下大鼠BMSCs向脂肪细胞分化受到抑制,且呈浓度依赖性；油红0染色提取法半定量测定结果显示,随着atRA浓度升高,分化细胞内脂肪含量降低(P＜0.01)；real-time PCR检测显示与血清组(未加atRA)相比,加入atRA后,大鼠BMSCs的CEBPo和PPARγ2表达显著降低(P＜0.05),RARα表达无显著差异[血清组vs1.0μmol/L atRA组:(0.0084±0.001 9)vs (0.009 1±0.001 3),P＞0.05],但RARγ表达显著增加[血清组vs 1.0 μmol/L atRA组:(0.022 6 ±0.001 2)vs (0.053 1 ±0.002 3),P＜0.01].结论 0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L atRA可抑制大鼠BMSCs向脂肪细胞分化,其机制可能与RARγ的上调及CEBPα、PPARγ2的下调有关.

口服甲磺酸多沙唑嗪缓解前列腺穿刺术后排尿症状

目的 观察口服α受体阻滞剂能否有效缓解前列腺穿刺术后的排尿不适症状.方法 2010年1月至2012年3月我科50例怀疑为前列腺癌的住院患者[(63.1±6.6)岁]随机分为试验组、对照组,每组25例,试验组在穿刺前1d至穿刺后7d每天口服4 mg甲磺酸多沙唑嗪控释片,监测、比较2组患者穿刺前1d及穿刺后1、7d的国际前列腺症状评分表(IPSS)评分、大尿流率数值.结果 与穿刺前基线相比,穿刺后1、7d,试验组IPSS评分分别由(14.21 ±7.62)分上升至(18.43±5.98)分、(17.94±7.14)分,对照组由(16.49 ±8.33)分上升至(21.44±4.75)、(19.02±6.57)分；实验组大尿流率由(9.32±6.82) mL/s下降至(7.08 ±9.35)、(8.36±11.21) mL/s,对照组由(9.78±5.45) mL/s下降至(5.64±10.42)、(8.85±10.94) mL/s.试验组穿刺后1 d IPSS评分低于对照组(P＜0.05),大尿流率高于对照组(P＜0.05).结论 口服α受体阻滞剂对缓解前列腺穿刺术后的排尿不适症状有一定效果.

沉默整合素连接激酶基因抑制TCA8113舌癌细胞生长和侵袭

目的 研究沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达,对人舌鳞癌细胞生长、侵袭和转移能力的影响.方法 通过用ILK mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA8113组、TCA8113 vector组和TCA8113 siILK组,通过筛选鉴定后,用MTT法、划痕试验和Transwell法分别检测细胞生长、迁移和侵袭能力,用Western blot分析细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β及Snail等的表达.结果 沉默ILK基因表达显著抑制了细胞的生长、迁移和侵袭能力,接种的第48、72、96、120小时,TCA8113 siILK组的抑制率分别为17％、29％、25％、42％,迁移能力较TCA8113组和TCA8113 vector组分别下降67％和66％,侵袭能力则较两个对照组下降了67％和68％,p-Akt、p-GSK3β及Snail的表达较TCA8113组和TCA8113 vector组分别降低了45％和53％,57％和61％,74％和73％.结论 抑制ILK基因的表达可通过Akt/GSK3β/Snail途径,显著抑制人舌鳞癌TCA8113细胞的生长、迁移和侵袭潜能,可作为治疗人舌鳞癌的靶蛋白.

心理弹性训练对水面舰艇军人自我意识和应对方式的影响

目的 研究心理弹性训练对水面舰艇军人自我意识(自我接纳、自我效能和自我概念)与应对方式的影响.方法 选取与团体辅导目标基本一致的舰艇部队军人100名,随机分成训练组(n=45,参加训练)和对照组(n=55,不参加任何训练).2组被试在训练前、中、结束时和训练结束6个月后分别采用自我接纳问卷(SAQ)、一般自我效能感量表(GSES)、Wallance自我概念量表(WSCS)和简易应对方式问卷(SCSQ)进行心理评估.根据心理弹性理论及构成要素设计10次团体训练的内容,每周1次、每次2h,在10周内完成.训练组按抽签法分成组1(n =22)和组2(n =23),训练成员的自我意识、情绪管理、人际沟通、问题解决和社会支持等能力；对照组不参加任何形式的训练.11名被试因执行任务未能全程参与(脱落),训练前训练组与对照组在年龄、军龄、职务和文化程度,SAQ、GSES、WSCS、积极应对和消极应对得分方面均无统计学差异(P＞0.05).结果 ①与训练前结果相比,训练组在训练结束时和训练结束6个月后测SAQ、GSES和WSCS得分均有显著提高(P＜0.05,P＜0.01),其中GSES在训练第5次结束后就有显著提高(P＜0.01),而SAQ和WSCS在训练第10次结束后显著提高(P ＜0.05,P＜0.01).训练组在训练中、结束时和6个月后SAQ、GSES和WSCS得分均显著高于对照组(P＜0.05,P＜0.01).②与训练前结果相比,训练组训练中和训练结束时,积极和消极应对方式得分均无统计学差异(P＞0.05)；而在训练结束6个月后积极应对显著提高(P＜0.01),消极应对得分无统计学差异(P＞0.05).训练组在训练结束6个月后测积极应对得分显著高于对照组(P＜0.01).结论 心理弹性训练能有效提升水面舰艇军人的自我意识,提高其积极应对能力.

医学生人文关怀能力问卷的编制及其应用

目的 编制适用于在校医学生人文关怀能力的测量问卷,探索医学生的人文关怀能力特点.方法 通过开放式问卷和访谈收集初始问卷条目,采用探索性和验证性因素分析对问卷进行检验.对其中的312名学生,初测2周后进行重测.结果 医学生人文关怀能力问卷由42道题目组成,包括利他、耐心、诚实、信任、谦逊、希望和勇气7个维度.问卷的Cronbach' s α系数为0.899,重测信度为0.851,分半信度为0.843.应用问卷调查发现:女生利他、耐心、诚实、信任、谦逊、希望维度得分显著高于男生(P ＜0.05,P＜0.01),男生勇气维度得分显著高于女生(P＜0.05)；医学生人文关怀能力得分按年级总体呈现上升趋势(P＜0.01).结论 所编制的问卷具有良好的信度和效度,可以作为评估医学生人文关怀能力的工具.

房颤与非房颤患者血脂水平的病例对照研究

目的 研究心房颤动与非心房颤动患者血脂水平的变化并探讨其意义.方法 回顾性分析2007年6月至2012年6月于重庆医科大学附属第二医院心内科住院符合纳入标准的598例房颤[包括295例阵发性房颤(paroxysmal atrial fibrillation,PAF)亚组,303例非阵发性房颤(non paroxysmal atrial fibrillation,NPAF)亚组]患者的临床资料,对比其一般情况、血图分析、肝功、肾功、血脂、血糖、甲状腺功能、心电图、动态心电图、心脏彩超值等资料,符合纳入标准的596例非房颤患者作为对照,对比分析房颤组及亚组同对照组血脂水平的变化.结果 房颤组与对照组在年龄、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、白细胞计数(WBC)及中性粒细胞比例、左房内径(LAD)和左室射血分数(EF)有统计学差异(P＜0.05).多因素Logistc回归显示,WBC(OR=1.119,P＜0.05)和LAD(OR=1.147,P＜0.05)是房颤的危险因素；TG(OR=0.822,P＜0.05)、HDL(OR=0.401,P ＜0.05)、LDL(OR =0.736,P＜0.05)水平与房颤负相关.亚组分析显示HDL(OR=0.420,P＜0.05)、LDL(OR=0.695,P ＜0.05)与PAF负相关,而LAD(OR=1.078,P＜0.05)与PAF正相关；在NPAF亚组,HDL(OR =0.219,P＜0.05)、LDL(OR=0.638,P ＜0.05)、TG(OR=0.676,P＜0.05)三者一致地与NPAF负相关,是其保护因素,LAD(OR=1.247,P＜0.05)是NAPF的危险因素.结论 房颤患者血脂尤其是LDL、HDL水平明显低于非房颤患者,且随着PAF进展为慢性房颤而呈逐渐降低趋势.

鲍曼不动杆菌噬菌体AB3的全基因组测序及生物信息学分析

目的 对本研究小组分离的鲍曼不动杆菌噬菌体AB3进行测序和基因组生物信息学分析,阐明其亲缘关系.方法 采用鸟枪法和重叠群组装的策略对噬菌体AB3进行基因组测序,并通过EditSeq、tRNAscan-SE、TRF、FindTerm、ORF finder、BPROM、GeneMarkTM、Clustalx、phylip等软件对所获噬菌体AB3基因组的一般特性、编码基因的功能预测、RNA聚合酶基因系统的进化进行分析.结果 噬菌体AB3基因组为全长31 185 bp的双链DNA,G+C含量为39.18％,包含28个预测基因,1个转录终止子和4个可能的启动子序列.结论 基因分析和RNA聚合酶基因进化分析显示噬菌体AB3与噬菌体AB1类似,均属于phiKMV-like病毒属.

核酸序列依赖扩增联合分子信标对曲霉菌感染的检测效果

目的 建立快速、灵敏、特异的定量检测曲霉菌感染的诊断方法.方法 以烟曲霉菌、黄曲霉菌及黑曲霉菌的孢子配制菌液,提取RNA后,采用核酸序列依赖扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)联合分子信标(molecular beacon,MB)技术进行荧光检测,并对该方法进行灵敏度和特异性分析.结果 扩增过程中累计荧光量达到设定的荧光阈值所需循环数与标本中霉菌孢子量的对数存在线性相关关系(y＝-10.7x +81.6,r=0.988).将含有梯度数量霉菌孢子的标本提取总RNA后进行检测,可建立相应标准曲线.该方法的灵敏度可达到1个孢子；对照菌株(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、热带念珠菌、新型隐球菌)与曲霉菌提取总RNA经扩增后的产物进行电泳分析,发现仅曲霉菌出现特异性条带.结论 NASBA结合分子信标检测曲霉菌具有灵敏度高、特异性强的特点,具有潜在利用价值,有望成为曲霉菌感染的临床诊断方法.

内镜下微创诊治58例胃异位胰腺临床分析

目的 分析胃异位胰腺内镜下特点,评估内镜下黏膜切除术(endoscopic mucosal resection,EMR)和内镜下黏膜剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)对胃异位胰腺的治疗价值.方法 回顾性分析第三军医大学新桥医院2008年11月至2012年11月内镜下切除且病理诊断明确的58例胃异位胰腺病例资料,其中男性23例,女性35例,平均39.6(14 ～75)岁,包括行EMR 20例和行ESD 38例,总结其内镜特点,比较EMR和ESD的治疗效果.结果 部分患者以上腹部隐痛、腹胀为主诉；均单发黏膜下包块,表面完整,典型者可有中心脐样凹陷,占27.6％(16/58)；超声内镜发现多来源第3层,回声不均匀,有时与固有肌层分界不清,超声内镜与术后病理诊断均一致,达100％(58/58).行EMR20例,复发率20.0％(4/20),无并发症；行ESD 38例,无复发,2例术中出血和2例穿孔.ESD与EMR治疗胃异位胰腺相比,复发率低(P＜0.01),并发症发生率较高.结论 超声内镜对胃异位胰腺诊断率高,ESD治疗胃异位胰腺较EMR复发率低,但并发症发生率较高.

阿尔茨海默病和轻度认知损伤诊断的建模分析

目的 建立阿尔茨海默病和轻度认知损伤的诊断模型.方法 用ROC曲线进行指标筛选,再用判别分析进行诊断模拟,后选出正确率高的判别函数.结果 ROC曲线筛选出4项指标.在包括正常人、阿尔茨海默患者以及轻度认知损伤患者的研究对象中,经过100次随机抽样诊断模拟,线性判别分析诊断的平均正确率达71.42％,非线性判别的平均正确率达74.75％,高正确率为82.05％,并得到了相应的判别函数.结论 非线性判别函数可有效诊断阿尔茨海默病和轻度认知损伤.

TGF-β1介导的上皮-间质转分化在Gefitinib耐药中的作用

目的 调查上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者接受吉非替尼(Gefitinib)治疗反应性中的作用及机制.方法 突变富集PCR法检测NSCLC患者EGFR突变状况；免疫组化法检测癌组织中上皮钙粘蛋白(E-cadhefin)和纤维连接蛋白(Fibronectin)的表达情况,探讨EMT与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)治疗敏感性的关系.体外选取人肺腺癌细胞系PC9细胞,经TGF-β1反复处理4周,观察细胞形态学变化；MTT检测TGF-β1处理后细胞对Gefitinib敏感性的影响；Western blot验证EMT相关标记蛋白表达变化并检测EGFR信号通路下游蛋白的变化.结果 43例NSCLC标本中,EGFR 19、21外显子突变率为58.14％ (25/43).具有EGFR基因突变的肿瘤E-cadherin 的表达水平显著高于EGFR野生型(70.00％ vs 30.00％,P＜0.05).接受Gefitinib总体有效率为46.51％(20/43),具有E-cadherin阳性表达的患者治疗反应性明显好于Fibronectin阳性的患者(65.00％ vs 30.43％,P＜0.05).TGF-β1可诱导PC9细胞向间质型细胞形态转化,上调Fibronectin的表达；与亲本PC9细胞相比,TGF-β1处理的细胞对Gefitinib的敏感性下降(P＜0.05)；这种敏感性的下降伴随着AKT和STAT3的持续活化.结论 EMT在EGFR-TKI耐药中发挥着重要作用,TGF-β1诱导的EMT可影响PC9细胞对Gefitinib的敏感性,这种效应可能是通过持续活化AKT和STAT3而发挥作用.

人参皂苷Rg1促进人牙周膜干细胞增殖与成骨分化

目的 观察人参皂苷Rg1对体外培养的人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖和成骨分化的影响.方法 选取第3代PDLSCs,采用MTT法和细胞周期检测不同浓度(0.25、0.5、1、2、4μmol/L)人参皂苷Rg1对PDLSCs增殖的影响；采用碱性磷酸酶(ALP)活性、实时荧光定量RT-PCR和放免法检测人参皂苷Rg1对PDLSCs成骨分化的影响；采用ELISA方法检测人参皂苷Rg1对PDLSCs碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的影响.结果 与对照组比较,浓度为0.5、1、2μmol/L的人参皂苷Rg1能明显提高PDLSCs的增殖能力(P＜0.05),其中浓度为1μmol/L的促增殖作用强,S+G2/M期细胞百分率明显高于对照组(P＜0.05)；浓度为1μmol/L的人参皂苷Rg1组ALP活性、骨钙素(osteocalcin,OCN)和bFGF的表达水平明显高于对照组(P＜0.05).结论 人参皂苷Rg1对体外培养的PDLSCs有促进增殖和成骨分化的作用.

受孕龄28～30周早产儿脑电图高幅慢波改变对其预后的评估价值及临床意义

目的 观察受孕龄(conceptional age,CA) 28～ 30周早产儿脑电图高幅慢波改变情况,探讨其对早产儿预后的评估价值及临床意义.方法 2011年8月至2012年5月我院新生儿重症监护病房收治受孕龄28～30周早产儿34例,于生后1～3d进行床旁视频脑电图(video electroencephalogram,VEEG)监测,根据受孕龄将受监测者分为受孕龄28～ 29周及30周2个观察组,根据随访结果又将2个观察组细分为死亡组和存活组,各12例,对每份VEEG记录的暴发间隔时间(interburst interval duration,IBI)及高幅慢波进行20 min半定量分析.结果 死亡组与存活组比较,大IBI时程在受孕龄28 ～ 29周及30周均差异显著(P＜0.01)；高幅慢波主要分布于颞、枕区,形态以光滑δ波占优势,其次为δ刷,波幅以150～300 μV为主,在该波幅段优势空间分布及优势波形分布无差异,＞300 μV慢波在死亡组中数量高于存活组,在空间分布上于颞、枕及前额区有差异(P＜0.05),在形态上重叠多高尖波的δ波分布差异为显著(P＜0.01),其次为尖样δ波和δ刷(P＜0.05)；畸形δ刷、畸形δ波中重叠多高尖波的δ波和一般畸形δ波在死亡组中的发生率均高于存活组(P＜0.05).结论 早产儿早期床旁VEEG中IBI时程过长及特殊形态的畸形高幅慢波过多提示脑损伤和/或预后不良发生可能.

丙泊酚对癫痫发作患者致病灶激化作用的研究

目的 观察静脉推注丙泊酚对皮层脑电图(electrocorticography,ECoG)波形的影响,探究其对幕上肿瘤伴癫痫患者致痫灶脑电活动的激化作用.方法 选择2011年4月至2012年2月我院神经外科60例幕上肿瘤伴癫痫发作患者为试验组,不伴癫痫发作的无皮质侵犯的深部肿瘤及动脉瘤患者40例为对照组.所有患者行常规静吸复合麻醉,硬脑膜切开后,停用丙泊酚10 ～ 15 min,低肺泡有效浓度(minimum alveolar concentration,MAC)控制在0.3 ～0.4,脑电双频指数(bispectral index,BIS)控制在40 ～ 60,于术区行ECoG监测,于癫痫波明显处做标记,待脑电背景恢复后推注丙泊酚(0.1 mg/kg),以丙泊酚推注前2 min(时段A)与推注后至暴发抑制现象前(时段B)之间为自身对照比较的2个时间段,定量、定性比较各组ECoG癫痫波的变化.病灶切除后,术中麻醉重复上述过程,对试验组非功能区致痫灶行皮层切除或热凝癫痫波(处理组),对功能区致痫灶暂不处理(非处理组).术后随访20 ～ 24个月,比较术后早期癫痫发生率、晚期癫痫控制率.结果 ①硬脑膜切开后,试验组推注丙泊酚前后(时段A与B)棘波定量分析:棘波波幅分别为(347±30)、(479±27) μV,波幅增长幅度为1.2～1.6倍；棘波频率分别为(3l±6)、(44±7)Hz,频率增加1.0 ～2.0倍；经配对t检验,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组棘波量化分析无统计学差异(P＞0.05).试验组与对照组棘波定性比较:静推丙泊酚后,试验组棘波增强率为95.00％ (57/60),对照组仅为10.00％ (4/40),两组差异有统计学意义(x2=72.89,P＜0.05).②随访结果:处理组术后早期癫痫发作5例(13.89％,5/36),非处理组术后早期癫痫发作9例(42.86％,9/21).差异有统计学意义(x2 =6.01,P＜0.05).晚期癫痫控制率:处理组与非处理组分别为88.89％(Engel Ⅰ～Ⅱ级,32/36)及61.90％(Engel Ⅰ～Ⅱ级,13/21),差异有统计学意义(x2=4.30,P＜0.05).结论 小剂量静推丙泊酚对幕上肿瘤伴癫痫发作患者病灶周围皮层癫痫波有激化作用,可辅助定位致痫灶,指导术中致痫灶的有效处理,有利于提高晚期癫痫控制率.

自发性孤立性肠系膜上动脉夹层的血管腔内治疗2例

自发性孤立性肠系膜上动脉夹层(spontaneous isolated dissection of the superior mesenteric artery,SIDSMA)是指不合并主动脉夹层,而单独出现的肠系膜上动脉夹层,是一种少见的血管疾病[1],临床以急性腹痛为起病症状,严重时可出现肠道缺血性坏死、肠梗阻.我们采用血管腔内治疗2例SIDSMA,效果较好,现结合文献报告如下.

快速康复外科理念在高龄高危前列腺增生患者术后护理中的应用

前列腺增生(benign prostaic hyperplasia,BPH)患者年龄＞70岁且合并一种或多种心、脑、肺等重要脏器疾病,统称为高龄高危BPH[1].如今人们对健康生活的需求日益增加,越来越多的高龄高危BPH患者选择微创手术改善排尿症状,提升生活质量.

人工髋膝关节置换术后患者发生谵妄的原因分析及护理对策

术后谵妄(postoperative delirium,POD)是一种波动性意识功能障碍,包括认知功能下降、理解力下降等,多在术后2～3d发生,可持续几小时到数天.POD患者可出现明显的感知障碍、恐怖性幻觉、错觉,不能入睡,强烈的恐惧感等情感反应¨],导致患者依从性较低,术后康复时间明显增加,大大增加褥疮、感染、血栓等风险.本研究分析2010年1月至2011年7月在我科行髋膝关节置换术的681例患者发生术后谵妄的情况,现报告如下.

双腔支气管导管插管位置与非通气侧肺呼出气二氧化碳波形的关系

目前国内研究呼出气二氧化碳监测判断双腔支气管导管(double lumen endobronchial tube,DLT)位置多为分析非通气侧呼出气二氧化碳波形变化[1-2],但对应用非通气侧呼出气二氧化碳波形判断双腔管位置的标准尚有争议[3].本研究按纤维支气管镜(fiberoptic bronchoscope,FOB)检查确认导管管端3种不同位置分析非通气侧呼出气二氧化碳波形的变化,旨在为临床麻醉中行呼出气二氧化碳监测判断DLT位置提供资料.

IL-2胸腔内注射治疗恶性胸腔积液对肺功能的影响

恶性胸腔积液是晚期恶性肿瘤的常见并发症,其中位生存期仅为3～ 12个月,6个月病死率为84％[1].胸腔内注射IL-2能诱导产生免疫效应细胞而发挥抗肿瘤作用,又可使胸膜产生化学性炎症粘连而使胸膜腔闭塞,胸膜纤维化、粘连、增厚.那么IL-2治疗恶性胸腔积液对患者肺功能有何影响?是否会加重胸膜粘连、加剧肺功能障碍?临床中治疗恶性胸腔积液是否会造成患者肺功能失代偿,只能凭借临床医师的经验及主观意向决定是否用药,目前国内对此方面的报道极少.本研究通过观察单纯胸腔穿刺引流与IL-2胸腔灌注治疗的恶性胸腔积液患者的疗效,并对有效病例治疗前后的肺功能各项指标、动脉血气变化对比研究,分析本研究方法疗效和对患者肺功能的影响,为临床安全用药提供参考依据,报告如下.

彩超引导下经皮肾镜碎石取石术治疗上尿路结石285例临床分析

经皮肾镜碎石取石术以其创伤小、恢复快、并发症小、安全可靠等优势已成为临床治疗上尿路结石的首选方式[1-2].我科从2008年4月至2012年9月于彩超引导下建立经皮肾通道行超声负压联合气压弹道碎石取石术治疗上尿路结石285例,疗效满意,报告如下.

川芎嗪对高糖致大鼠腹膜间皮细胞MCP-1与NF-κB p65表达的影响

目的 观察川芎嗪对高糖致大鼠腹膜间皮细胞MCP-1与NF-κB p65表达的影响,探讨其在持续性不卧床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD)时腹膜慢性炎症发病机制中的可能作用.方法 60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分成3组:对照组(n=20):腹腔每天注射生理盐水25 mL;模型组(n=20,HGC组):腹腔每天注射4.25％葡萄糖腹透液25 mL+每周1次腹腔注射红霉素6.25万单位；治疗组(n=20,HGM组):腹腔每天注射4.25％葡萄糖腹透液25 mL+ 2％川芎嗪溶液(40 mg/L)+每周1次腹腔注射红霉素6.25万单位.8周后分别处死各组大鼠,取腹膜组织以SABC免疫组织化学法检测壁腹膜间皮细胞MCP-1、NF-κB p65的表达,并行腹膜组织HE及Masson染色病理学检查.结果 与对照组比较,HGC组和HGM组腹膜间皮细胞MCP-1[(109.69±5.33),(122.46 ±5.00)与NF-κB p65(104.83±2.31),(116.44±5.55)表达上调(P＜0.05)],且HGC组显著高于HGM组(P＜0.05).大鼠腹膜间皮细胞MCP-1与NF-κB p65表达水平成正相关(r=0.81,P＜0.05).HE染色后光镜下HGC组和HGM组可见腹膜间皮细胞由扁平变为圆形、柱形,间皮细胞肥大脱落,间皮下结缔组织明显增厚,可见血管生成以及纤维素样物质沉积,还可见成纤维细胞及单核巨噬细胞浸润,HGC组表现尤为明显.结论 川芎嗪可能拮抗高糖引起的腹膜间皮细胞MCP-1与NF-κBp65表达,从而减轻腹膜慢性炎症,延缓腹膜纤维化的发生.

9例Castleman病临床观察及文献分析

目的 分析Castleman病(castleman disease,CD)的临床特点和治疗预后,提高对该病的认识和诊治水平.方法 回顾性分析我院2008-2012年收治的9例Castleman病患者的临床资料,并进行相关文献复习.结果 通过病理诊断确诊局灶型(localized CD,LCD)患者5例,多中心型(multicentric CD,MCD)患者4例.病理类型:透明血管型6例,浆细胞型3例.9例患者均出现淋巴结肿大,病程1～9个月.5例LCD患者中4例因无痛性包块就诊,1例CT示右肺可见一大小约3.5 cm ×4.0 cm占位.经手术切除,效果较好,随访未复发.4例MCD患者全身症状明显,如盗汗、发热(低热)、消瘦、乏力、贫血,肝脾大,并有自身免疫性溶血性贫血,全身多处骨质破坏,月经紊乱等.MCD患者经联合化疗后病情稳定.结论 Castleman病主要依靠病理学确诊.LCD病变局限,病症较轻,手术治疗后长期生存.MCD病变广泛,常有多系统侵犯,需通过化疗控制其发展.

舒芬太尼+咪哒唑仑用于无痛纤维支气管镜检查80例临床分析

目的 探讨舒芬太尼配伍咪哒唑仑用于无痛纤支镜检查的镇静、镇痛效果以及安全性、可行性.方法 将80例拟行无痛纤支镜检查的患者双盲法随机分为2组(n=40):舒芬太尼(0.1～ 0.2 μg/kg)+咪哒唑仑(0.05 ～0.075 mg/kg)(A组)和舒芬太尼(0.1～0.2μg/kg)+丙泊酚(0.5 ～ 1.5 mg/kg)(B组).术中监测心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和血氧饱和度(SpO2),记录苏醒时间、呼吸抑制例数、镇静评分及利多卡因总量等.结果 2组患者用药前后SBP、DBP差异无统计学意义(P＞0.05).2组患者用药后SpO2均有下降,B组下降较A组更为明显(P＜0.05)；A组苏醒时间较B组明显缩短(P＜0.01)；呼吸抑制例数A组＜B组(P＜0.01)；利多卡因总量2组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 舒芬太尼(0.1～0.2 μg/kg)+咪哒唑仑(0.05 ～0.075 mg/kg)用于无痛纤支镜检查较舒芬太尼(0.1～0.2 μg/kg)+丙泊酚(0.5～1.5 mg/kg)更为安全.

带蒂背阔肌肌皮瓣修复腹壁巨大缺损的临床疗效分析

目的 探讨带血管蒂背阔肌肌皮瓣修复腹壁肿瘤切除后遗留巨大缺损的临床效果.方法 1998年10月至2008年5月,采用带血管蒂背阔肌肌皮瓣修复6例因腹壁肿瘤切除致腹壁巨大缺损的患者,缺损范围12 cm ×9 cm～ 18cm×15 cm.结果 6例患者术后伤口均Ⅰ期愈合.随访1～6年,无肿瘤复发,无腹壁切口疝、肠粘连、肠梗阻和肠瘘等并发症发生.结论 带血管蒂背阔肌肌皮瓣修复腹壁缺损的方法疗效可靠,副作用少,在大面积腹壁全层缺损的修复中值得推广应用.

改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离法及膜片钳应用

目的 改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法,为利用膜片钳技术研究膀胱疾病提供必要的技术平台.方法 采用木瓜蛋白酶和胶原酶Ⅱ,采用一步法和二步法,分别消化5只新生和成年Wistar大鼠膀胱组织,在膜片钳工作台上分别对平滑肌细胞钠钙交换体电流行全细胞记录.结果 建立了稳定的新生和成年大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法.新生大鼠钠钙交换体(Na+/Ca2+ exchanger,NCX)电流密度(pA/pF)为[(0.21±0.07),n=4],成年大鼠NCX电流密度为[(0.19±0.06),n=6],差异有统计学意义(P＜0.05).KB-R7943在5μm浓度下,有阻滞NCX正向模式的能力.结论 本方法改良了大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离,并成功应用于膜片钳技术检测.

前列腺特异性抗原筛查前列腺癌:继续深入或时代终结

干细胞移植治疗视网膜变性疾病面临的挑战和前景