氟尿嘧啶联合丝裂霉素通过改变自噬作用抑制胆管癌细胞QBC939衰老并促进凋亡

目的 观察氟尿嘧啶(5-Fu)联合丝裂霉素(mitomycin,MMC)对胆管癌细胞QBC939的自噬、衰老、凋亡的影响,并探讨自噬、衰老、凋亡之间的相互关系及相关机制.方法 5-Fu(25、50、100、150、200 μg/mL)、MMC(0.25、0.50、1.0、1.5、2.0 μg/mL)及两者相应终浓度的混合溶液分别对胆管癌QBC939细胞作用0、24、48 h后,分别用CCK-8法检测细胞增殖并确定后续实验中化疗药物作用时间及联合化疗药物浓度,Annexin V-FITC染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老,单丹磺酰尸胺(Monodansylcadaverin,MDC)染色及流式细胞仪检测细胞自噬；用广谱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)抑制剂Z-VAD-FMK阻断凋亡,用3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断自噬并再次用上述方法检测增殖、自噬、衰老及凋亡变化情况.结果 5-Fu联合MMC(终浓度分别为100、1.0 μg/mL)作用24 h时,QBC939增殖受到明显抑制且细胞尚未出现大量死亡,利于各项指标的检测,各组差别有统计学意义(F=26.929,P＜0.05)；自噬抑制剂作用后,自噬减少,增殖抑制,衰老细胞阳性率降低,细胞凋亡率明显增加(P＜0.01)；凋亡抑制剂作用后,凋亡减少,增殖增强、衰老细胞阳性率增高明显,自噬变化不明显.结论 5-Fu联合MMC能明显抑制胆管癌细胞QBC939增殖及衰老,促进细胞凋亡,这些变化均与联合化疗药物作用后胆管癌细胞自噬作用的变化有关.

血管紧张素Ⅱ诱导被动致敏人气道平滑肌细胞合成Ⅰ型胶原

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其Ⅰ型受体(Angiotensin Type 1 Receptor,AT1R)拮抗剂洛沙坦(Losartan)对被动致敏人气道平滑肌细胞(human airway smooth muscle cells,HASMCs)合成Ⅰ型胶原的影响.方法 体外培养HASMCs,按处理因素将细胞分为4组:①被动致敏组(10％哮喘血清)；②被动致敏+AngⅡ组(10％哮喘血清+10-7mol/LAngⅡ)；③被动致敏+ Losartan组(10％哮喘血清+10-6mol/L Losartan)；④被动致敏+AngⅡ+Losartan组(10％哮喘血清+ 10-7mol/L AngⅡ+10-6mol/L Losartan).免疫荧光染色法鉴定HASMCs,荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原mRNA表达,ELISA检测Ⅰ型胶原蛋白分泌.结果 10-7 mol/l AngⅡ作用于被动致敏的HASMCs 24 h后,Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达较被动致敏组明显增加(P＜0.01).在Losartan存在的情况下,AngⅡ对被动致敏HASMCs Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达的促进作用明显受到抑制(P＜0.01).结论 AngⅡ能促进被动致敏的HASMCs分泌Ⅰ型胶原,可能是通过与AT1R结合而实现的.

川芎嗪抑制IL-1β诱导的兔软骨细胞caspase-8和CytC的表达

目的 观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对白介素-1β(interleukin-1β,IL-Iβ)诱导的兔原代软骨细胞caspase-8和CytC表达的影响.方法 体外培养兔软骨细胞,用甲苯胺蓝染色检测蛋白多糖、免疫荧光检测兔原代软骨细胞Ⅱ型胶原；分为对照组、IL-1β 10 ng/mL单独作用组、IL-1β 10 ng/mL和不同浓度TMP联合作用组,按分组方法培养兔软骨细胞48 h,用Western blot和免疫组化检测caspase8蛋白表达；用ELISA法检测细胞内CytC的表达.结果 软骨细胞呈三角形或多角形,贴壁生长.蛋白多糖表达于细胞质中,Ⅱ型胶原主要表达于细胞质,少见于细胞核.实验组与对照组比较,IL-1β单独作用及IL-1β联合TMP作用软骨细胞后,caspase-8和CytC的表达均显著增加(P＜0.01).实验组之间比较,IL-1β+ 15 μg/mL川芎嗪联合作用组caspase-8和CytC的表达显著低于IL-1β单独作用组(P ＜0.05,P＜0.01).结论 川芎嗪能有效抑制IL-1β诱导兔软骨细胞caspase-8和CytC的表达,从而起到抑制细胞凋亡的作用.

米氮平辅助治疗精神分裂症阴性症状疗效与安全性的Meta分析

目的 探索米氮平联合常规抗精神病药物治疗精神分裂症阴性症状的疗效与安全性.方法 系统检索PubMed、Embase、Cochrane Controlled Trials Register (CCTR)、EBSCO、web of knowledge、psycINFO、中国知网(CNKI)、万方、中国生物医学数据库(CBM)以及维普(VIP)数据库,选择已发表的关于米氮平合并使用抗精神病药物治疗精神分裂症患者阴性症状的临床随机对照试验进行Meta分析,纳入文献截止时间为2012年10月11日.结果 共纳入8项随机对照试验,米氮平联合抗精神病药物治疗精神分裂症阴性症状的有效率[OR(95％CI)=3.75 (2.73,5.16)]和痊愈率[OR(95％CI) =2.21 (1.23,3.99)]与单用抗精神病药物治疗有明显统计学差异,有效率与痊愈率均高于单用抗精神病药物治疗组(P＜0.01).米氮平联合抗精神病药物组的失眠与恶心的发生率明显低于单用抗精神病药物组(P＜0.05),而嗜睡的发生率要高于单用抗精神药物组(P＜0.05),其他不良反应的发生率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 米氮平联合抗精神病药物能显著改善精神分裂症的阴性症状,同时并未增加抗精神病药物的常见副反应发生率.

右美托咪定减轻小儿瘢痕整形术后苏醒期气道及心血管不良反应的临床研究

目的 研究盐酸右美托咪定减轻小儿瘢痕整形术后麻醉苏醒期气道、循环反射的可行性.方法 筛选我院整形科2011年4月至2012年3月收治的60名5～7岁瘢痕挛缩畸形患儿,其中女性21例,男性39例.全麻下行瘢痕切除及皮片移植术,术毕前40 min随机双肓静脉泵注0.5μg/kg盐酸右美托咪定注射液(n=30)或生理盐水安慰剂(n=30)10 min.对比2组麻醉结束后自主呼吸恢复时间、拔管时间、拔管后呛咳次数、寒战反应、Ramsay评分,记录拔管前、中、后患儿心率、血压、脉搏氧饱和度.结果 盐酸右美托咪定组和生理盐水对照组的呛咳评分中位数分别为1(1～3)和2(1～4)(P＜0.05),寒战发生率分别为2例和17例(P＜0.05).盐酸右美托咪定组和生理盐水对照组Ramsay评分分别是2 ～4分和1～2分.2组患者拔管时心率、血压有所上升,生理盐水对照组与盐酸右美托咪定组相比升高显著(P＜0.05).2组患者清醒时间和拔管时间基本一致,患者拔管后脉搏氧饱和度都有所下降.结论 小儿整形手术结束前,单次注射盐酸右美托咪定注射液可减轻气管拔管时的气道和循环反射,减轻术后寒颤反应并具有术后镇静的作用.

Rock信号通路参与TNF-α刺激兔基底动脉平滑肌增殖

目的 探索Rock信号通路在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)引起兔基底动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用.方法 组织块法原代培养兔基底动脉VSMCs,TNF-α刺激VSMCs,Rho激酶(Rho kinase,Rock)抑制剂Y-27632预处理,CCK-8法检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在VSMCs的定位及表达变化,Western blot法检测细胞PCNA表达量的变化.结果 细胞培养24 h后,与阴性对照组比较,20 ng/mL TNF-α处理可以显著增加VSMCs的增殖率(P＜0.01),PCNA蛋白表达显著增高(P＜0.01),S期+G2/M期细胞比例明显增加(P＜0.05)；加入Y-27632预处理后,与20 ng/mL TNF-α处理组相比,VSMCs的增殖率受到显著抑制(P＜0.01),PCNA蛋白表达明显减少(P＜0.05),S期+G2/M期细胞比例明显减少(P＜0.05).结论 TNF-α可促进VSMCs增殖和细胞周期进程,Rock抑制剂可阻滞TNF-α对VSMCs的这一作用,Rock信号通路参与TNF-α诱导的VSMCs增殖和细胞周期进程加速.

TRPM7对dHL-60细胞极性化的影响

目的 探讨瞬时受体电位M7 (transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)对dHL-60细胞极性化的影响及可能的分子机制.方法 通过siRNA技术下调dHL-60细胞TRPM7蛋白表达,分为转染无义干扰片段的对照组和TRPM7干扰组,用Zigmond小室观察细胞极性化的变化,采用Western blot检测TRPM7和磷酸化AKT的表达,并用细胞免疫荧光方法观察磷酸化AKT的定位情况.结果 与转染无义干扰片段的对照组相比,转染TRPM7靶向siRNA的dHL-60细胞中,TRPM7蛋白表达水平明显降低(P＜0.05)；干扰TRPM7后dHL-60细胞的极性化率与对照组相比显著增加(P＜0.05)；磷酸化AKT表达明显上调,并从细胞质转向了细胞膜,呈极性分布在细胞质膜上,而总AKT的表达则无明显变化.AKT的特异性抑制剂Triciribine可使dHL-60细胞在fMLP刺激下的磷酸化AKT的极性分布消失.结论 TRPM7通过AKT信号通路调控细胞极性相关分子,进而影响dHL-60细胞的极性化能力.

阿米替林对大鼠间质性膀胱炎的治疗作用

目的 探索小剂量环磷酰胺长期慢性腹腔注射建立大鼠间质性膀胱炎(interstitial cystitis,IC)模型的方法,并研究阿米替林对IC的治疗作用.方法 42只SD大鼠,采用随机数字表法分为7组:对照组,4、48 h模型组,10、30、45 d模型组和治疗组.模型组和治疗组腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CYP)40 mg/kg,治疗组于第31天开始给予阿米替林10 mg/(kg·d)灌胃,持续15 d.观察膀胱组织大体、光镜及电镜形态学表现.通过ELISA检测对照组和30、45 d模型组以及治疗组血清中IL-6、IL-10、IL-17A水平的变化.结果 模型组大鼠表现出IC的病理学变化.30、45 d模型组血清中IL-6、IL-10、IL-17A水平均较对照组升高(P＜0.05)；治疗组较45 d模型组降低,但高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 环磷酰胺小剂量慢性作用可构建大鼠IC模型,阿米替林可以改善IC大鼠的病理学表现.

哮喘急性加重和糖皮质激素治疗对诱导痰炎症细胞分类及表型的影响

目的 研究糖皮质激素治疗及急性加重对哮喘患者诱导痰炎症细胞分类及表型的影响.方法 收集2011年1-6月,新桥医院呼吸内科门诊和住院部经糖皮质激素治疗的104例哮喘患者的病史及诱导痰资料进行回顾性分析.结果 急性加重患者诱导痰炎症细胞表型分别为中性粒细胞性42.3％,嗜酸性粒细胞性26.9％,混合细胞性及寡细胞性各为15.4％；非急性加重患者表型分别为嗜酸性粒细胞性50％,寡粒细胞性19.2％,混合细胞性19.2％,中性粒细胞性11.5％.急性加重及非急性加重患者痰炎症细胞分类均以中性粒细胞[(65.2±19.3)％、(54.4±20.5)％]及嗜酸性粒细胞[(3.8±7.4)％、(9.9±23.9)％]为主.急性加重组经糖皮质激素治疗前后诱导痰细胞炎症细胞表型及分类无显著变化(P＞0.05),非急性加重组经吸入糖皮质激素治疗后诱导痰细胞中性粒细胞比例从(55.5±20.5)％上升到(68.9±19.3)％,嗜酸性粒细胞从(14.7±20.1)％下降为(4.6±5.6)％,两者呈显著的负相关性(r=-0.66,P＜0.05)；中性粒细胞性表型患者的比例也显著增多(P＜0.05).结论 哮喘急性加重及吸入激素治疗均可以导致哮喘患者诱导痰中性粒细胞增多,改变气道炎症细胞的表型.

电针对轴突生长导向因子-1和臂板蛋白3a在局灶性脑梗死大鼠脑皮质表达的影响

目的 观察局灶性脑梗死大鼠皮质轴突生长导向因子-1(netrin-1,Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a,sema3a)的表达及电针干预对其表达的影响.探索Ntn1与sema3a在电针对脑梗后神经可塑性影响中的作用.方法 将130只雄性SD大鼠分为正常组(n=10)、模型组(n=60)及电针组(n=60).利用线栓法制作大脑中动脉闭塞模型.分别在术后1、3、7、14 d时,对术后大鼠进行神经功能评分(modified neurologic severity scores,mNSS),利用免疫组化检测缺血侧大脑脑皮质中Ntnl、sema3a、神经丝蛋白200(NF200)分布和表达,免疫印迹法检测缺血侧大脑皮质Ntnl和sema3a的蛋白表达.结果 免疫组化结果显示在各个时相点大鼠脑皮质均表达Ntn1和sema3a,主要集中在细胞质阳性表达.Westernblot检测结果显示,与正常组相比,模型组Ntn1蛋白的表达水平在脑梗死后1d即开始明显上升(P＜0.01),3d时呈上升趋势(P＜0.01),7d时达峰值(P＜0.01),14 d时仍显著高于基础水平(P＜0.01),电针组与模型组相比,Ntn1蛋白表达趋势相同,但表达量明显高于模型组,术后1、3、7、14 d时有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01).与正常组相比,模型组sema3a蛋白的表达水平在术后1d即开始上升(P＜0.01),7d时达高峰(P＜0.01),14 d时仍高于基础水平(P＜0.01).同时相点电针组与模型组相比sema3a均呈现低表达,1、3d和7、14 d时有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01),峰值同样在7d时出现.Western blot检测结果与免疫组化分析结果基本相符.7、14 d时电针组与模型组相比mNSS评分存在统计学差异(P＜0.05),14 d时电针组与模型组相比NF200的表达量存在统计学差异(P＜0.05).结论 局灶性脑梗死后大鼠皮质Ntn1与sema3a表达明显上调,给予电针干预后可提高Ntn1的表达并抑制sema3a的表达,促进轴突的再生与修复,这可能是电针促进脑梗死后神经功能恢复的机制之一.

发病前使用他汀类药物对急性缺血性脑卒中患者静脉溶栓疗效的影响

目的 探讨发病前使用他汀类药物治疗对急性缺血性脑卒中患者静脉溶栓疗效的影响.方法 从2006年4月到2012年11月连续收集发病6h内静脉溶栓治疗的181例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象.根据发病前有无使用他汀类药物将患者分为使用他汀类药物组和未使用他汀类药物组.采用改良的Rankin量表评价神经功能恢复状况.结果 181例患者中发病前使用他汀类药物的溶栓治疗组30例,未使用他汀类药物的溶栓治疗组151例.两组在90d内溶栓预后良好率(50.00％vs56.95％,P=0.166)、颅内出血的发生率(26.67％ vs 18.54％,P=0.309)、症状性颅内出血的发生率(16.67％vs11.26％,P=0.408)及病死率(10.00％vs4.64％,P=0.240)均无统计学差异.结论 发病前使用他汀类药物对急性缺血性脑卒中患者静脉溶栓疗效无影响且安全.

细胞外信号调控激酶在邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导的尿道下裂大鼠中的表达

目的 在邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]诱导的先天性尿道下裂大鼠模型上,研究细胞外信号调控激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK) 1/2在DEHP暴露后的胎鼠阴茎中的表达变化,探讨尿道下裂发生机制.方法 将SD孕鼠完全随机分为DEHP组[750 mg/(kg·d)DEHP +1.5 mL大豆油]和对照组(1.5 mL大豆油),每组20只,2组分别于母鼠怀孕天数(GD)第12 ～19天持续经口灌注给药.2组分别取10只孕鼠让其正常分娩,并计数每窝产雄性活仔鼠数量；出生后1、3、7、14、21、30日龄时称取雄性仔鼠体质量并测量肛门生殖器距离(anogenital distance,AGD)；30日龄时逐个检查尿道下裂的发生情况.余孕鼠在GD20行剖宫产取雄性胎鼠,应用实时定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫组化方法分别检测胎鼠阴茎组织中ERKl/2 mRNA和蛋白表达水平.结果 DEHP组孕期暴露诱导的尿道下裂发生率为28.2％.DEHP组每窝产雄性活仔鼠数量、各日龄雄性仔鼠体质量及AGD较对照组明显减少或缩短(P＜0.01).与对照组比较,DEHP组胎鼠阴茎组织中ERK1和ERK2 mRNA表达水平明显增加(P＜0.05)；DEHP组ERKl/2磷酸化蛋白表达水平有增加趋势.结论 DEHP诱导先天性尿道下裂发生可能与胎鼠阴茎组织中ERK信号的过度表达有关.

军校新训学员的训练疲劳与其心理弹性、人格及心理健康的关系

目的 研究军校新训学员的训练疲劳与心理弹性、人格及心理健康的关系.方法 采用作业疲劳症状自评量表(newly developed questionnaire for work related fatigue feelings,WRFFQ)、心理弹性量表(connor-davidson resilience scale,CD-RISC)、艾森克人格问卷(Eysenck personality questionnaire,EPQ)和症状自评量表(symptom checklist 90,SCL-90)对1 798名军校新训学员进行抽样调查.结果 ①新训学员总体的训练疲劳状况较好,疲劳总分为(37.01 ±10.96)分,其中男生的疲劳总分为(36.53±10.61)分,女生为(40.48±12.69)分,差异有统计学意义(P＜0.05)；②训练疲劳高分组的学员在心理健康问题和神经质上显著高于低分组(P＜0.05),而在心理弹性和外向性上显著低于低分组(P＜0.05)；③训练疲劳总分与SCL-90总分、神经质呈显著正相关(r分别为0.724、0.386,P＜0.05)；而与心理弹性、外向性呈显著的负相关(r分别为-0.296、-0.167,P＜0.05).结论 军校新训新生的心理健康问题、心理弹性和神经质能显著预测新训学员的疲劳状况.在军训过程中,对某些低心理弹性和高神经质学员,应注意训练方法的灵活性,以有效降低学员的训练疲劳.

病程超过1周重度以上突发性聋的短期疗效分析

目的 了解未规范治疗或治疗效果欠佳的、病程超过1周的、重度以上突发性聋的短期疗效.方法 对住院的76例共77耳病程超过1周的重度以上突发性聋患者的临床资料进行回顾性分析.根据入院前听阈均值(pure tone average,PTA)分为重度聋组(35耳)、极重度聋组(31耳)及全聋组(11耳),按发病至入院时间将3组又分为7～13、14～29、≥30 d亚组,对各组的预后进行比较.结果 重度聋组、极重度聋组、全聋组治疗后PTA改善分别为(17.3±13.6)、(21.0±17.7)、(12.4±9.1)dB,治疗前后PTA差异均有统计学意义(P＜0.05),但组间PTA改善差异无统计学意义(P＞0.05)；PTA≤50 dB的百分率分别是37.1％、12.9％、0,组间差异有统计学意义(P＜0.05).重度聋组7～13、14～ 29、≥30 d PTA≤50 dB的百分率分别为44.4％、14.3％、20.0％,极重度聋组分别是16％、0、0,而全聋组均为0.结论 对未规范治疗或治疗效果欠佳的病程超过1周的重度与极重度突发性聋患者进行治疗仍有意义,但全聋及病程超过2周的重度以上突发性聋患者疗效欠佳.

VEGF受体单抗与Luffin双靶融合毒素的构建及其对非小细胞肺癌细胞的抑制作用

目的 构建含血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体单链抗体(KDRscFv)、尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点(uPAcs)、丝瓜毒素(luffin-β)与KDEL (Lys-Asp-Glu-Leu)内质网驻留信号序列的双靶向融合毒素,并探讨其对非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)细胞的抑制作用.方法 全基因合成KDRscFv基因,RT-PCR法克隆luffin-β,重叠PCR法将两基因融合,其连接部位与C端分别引入uPA裂解位点uPAcs与KDEL,形成融合基因KDRscFv-uPAcs-Luffin-β-KDEL.将该融合基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转入大肠杆菌后,诱导其表达融合毒素蛋白Trx-EK-KDRscFv-uPAcs-Luffin-β-KDEL (TEKPLK)并纯化TEKPLK.用肠激酶(enterokinase,EK)切割TEKPLK后,纯化与回收靶向融合毒素KDRscFv-uPAcs-Luffin-β-KDEL(KPLK).采用CCK-8(cell counting kit-8)、RT-PCR、Western blot等方法,体外检测靶向融合毒素KPLK经uPA酶裂解后释放Luffin-β对NSCLC细胞的抑制作用.结果 成功诱导重组载体pET-32a(+)/KDRscFv-uPAcs-Luffin-β-KDEL表达相对分子质量约7.5×104含载体表达标签(Trx)的融合毒素蛋白TEKPLK,EK酶切该蛋白获得相对分子质量约5.8×104的靶向融合免疫毒素KPLK.CCK-8法检测表明,KPLK毒素的杀瘤活性成剂量-效应关系,其IC50约为35 ng/mL；RT-PCR和Western blot检测结果显示,KPLK经uPA酶体外裂解后能释放细胞毒素小分子Luffin-β,上调瘤细胞促凋亡基因caspase-3及其蛋白的表达.结论 成功构建了KDRscFv-uPAcs-Luffin-β-KDEL融合基因及其原核表达载体,并获得相对分子质量约5.8×104的靶向融合毒素KPLK,该毒素经uPA酶体外裂解后能释放具杀瘤活性的Luffin-β毒素小分子.

RNAi沉默MACC1基因表达抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移

目的 探讨RNAi沉默MACC1基因表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移的影响及相关的分子机制.方法 化学合成针对MACC1基因的荧光标记的siRNA-FAM,利用siRNA转染试剂将MACC1特异性siRNA-FAM转染至乳腺癌MCF-7细胞；采用RT-PCR检测siRNA对MACC1 mRNA表达的影响,Western blot检测siRNA对MACC1蛋白合成的影响；MTT实验检测沉默MACC1基因后对MCF-7细胞增殖活性的影响；Transwell迁移实验检测沉默MACC1基因后对MCF-7细胞迁移能力的影响；Western blot检测干扰MACC1对S100A4及vimentin蛋白合成的影响.结果 MACC1基因在乳腺癌MCF-7细胞高表达；针对MACC1基因的siRNA转染MCF-7细胞48 h后,siRNA组与空白对照组比较,能够显著抑制MACC1基因表达和蛋白合成,抑制效率分别为81％和75％；MACC1特异性siRNA转染MCF-7细胞24、48、72 h后,MMT结果显示与空白对照组比较,siRNA组能够抑制细胞生长,并随着时间延长抑制明显(P＜0.05)；转染MCF-7细胞48 h后,Transwell迁移实验结果显示siRNA组与空白对照组比较,穿过小室细胞数明显降低,其能有效抑制MCF-7细胞迁移(P＜0.05);siRNA组与空白对照组相比,S100A4和vimentin表达降低(P＜0.05).以上实验阴性对照组和空白对照组之间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 利用特异性siRNA干扰MACC1基因表达,可显著抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移能力,且这一过程可能与S100A4和Vimentin的表达下调有关.

加显影剂的Portland cement作为根充材料的封闭性研究

目的 通过染料渗透+透明标本法评价白色波特兰水门汀(white Portland cement,wPC)、WPC+氧化铋(Bi2O3,BO)、WPC+氧化锆(ZrO2,ZO)、无机三氧化聚合物(mineral trioxide aggregate,MTA)和灰色波特兰水门汀(grayPortland cement,GPC)作为根管充填材料的封闭性能.方法 选取单根离体前磨牙104颗,制作根尖倒充填模型,按随机数字表法将离体牙分成5个实验组(WPC、WPC +BO、WPC +ZO、MTA、GPC组,n=20)和2个对照组(阴性对照组、阳性对照组,n=2).染料渗透法检测根尖微渗漏情况,体视显微镜下测量染料自根尖渗入冠方的长度.结果 阳性对照组染料渗入整个根管,阴性对照组无染料渗入,WPC、WPC+ BO、WPC +ZO、MTA4组仅有微量染料渗入,且4组染料渗入深度两两比较差异无统计学意义(P＞0.05),GPC组有较多的染料渗入,渗入深度与前4组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 WPC、WPC+ BO、WPC +ZO与MTA封闭性相当,且它们的封闭性明显优于GPC; ZO和BO可考虑作为显影剂加入WPC中.

血红素氧合酶-1对大鼠复苏后心肌损伤的保护作用和机制

目的 探讨血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)抗炎效应对大鼠复苏后心肌损伤的影响.方法 采用窒息法制作大鼠心跳骤停心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)模型.60只雄性SD大鼠分为4组:假手术组(仅置入相关导管,不行CPR术)、CPR组、Hemin组(血晶素组,Hemin 30 mg/kg于CPR前18h及2h2次腹腔注射)、Hemin+ ZnPP组(血晶素+锌原卟啉组,Hemin用法同前,ZnPP 5 mg/kg于CPR前17 h和1h2次腹腔注射).各组术后6、24 h2个观察时相点,假手术组每时点6只鼠,各复苏组每时相点8只鼠.Western blot法检测各组心肌组织HO-1蛋白水平；全自动生化分析仪测定血清肌酸肌酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量；ELISA法测定大鼠血清TNF-α、IL-6浓度；透射电镜下观察心肌超微结构变化.结果 ①各复苏组复苏后6、24 h HO-1蛋白表达水平增高,且Hemin组HO-1水平高于CPR组和Hemin+ ZnPP组(P＜0.05).②各复苏组复苏后6、24 h CK-MB和LDH活性增高,且Hemin组各时相点CK-MB和LDH活性均低于CPR组和Hemin+ ZnPP组(P＜0.05).③TNF-α水平:CPR组、Hemin+ ZnPP组复苏后6、24 h均升高,Hemin组仅复苏后6h升高,且低于前2组(P＜0.05)；IL-6水平:CPR组、Hemin+ ZnPP组仅复苏后24 h升高(P＜0.05),Hemin组复苏后各时相点未见升高(P＞0.05).④与假手术组比较,各复苏组大鼠心肌超微结构损伤明显,但Hemin组心肌超微结构完整性优于CPR组和Hemin +ZnPP组.结论 HO-1可减轻大鼠心肺复苏后心肌损伤,其抗炎效应可能是其保护机制之一.

声门硬币取出术1例

1 临床资料患者,男性,38岁,因声嘶,咳嗽ld于2013年3月16日来我科就诊.患者述ld前与自家小孩玩耍硬币时,不慎将1枚1元人民币硬币投入口腔后并吞入喉腔,随之出现声音嘶哑,讲话费力,咳嗽且伴有轻度呼吸及吞咽困难.行间接喉镜检查时,可见一白色圆形异物嵌于声门处.立即应用1％麻黄素液及1％丁卡因液喷雾鼻腔2次,收缩鼻甲黏膜使之鼻腔宽大且减轻镜体通过鼻腔所致的不适感.采用1％丁卡因液喷雾咽喉部3次,行黏膜表面麻醉,减轻咽反射.待麻醉成功后,术者持电子纤维鼻咽喉镜镜体自较宽侧鼻腔缓慢置入会厌游离缘平面,当窥清异物时(图1A),根据异物所在位置及嵌入的方向选择适宜的异物钳,直视下操作[1-2].在电子纤维鼻咽喉镜镜直视下,嘱患者自行拉舌,术者左手持电子纤维鼻咽喉镜镜体,右手经口腔置入左右张开之间接异物钳,当到达声门区时,张开异物钳,将异物夹住并确认已夹紧后,缓慢将异物钳退出.一次成功取出异物,所取异物为直径25 mm的1元硬币(图1B).异物取出后,患者呼吸畅通,吞咽及发音恢复正常.

胃血管球瘤CT诊断1例

血管球瘤(glomus tumor,GT)是一种少见的软组织肿瘤,原发于胃的血管球瘤更少见,发病率约为同期胃肠间质瘤的1％[1].我院收治1例,现报告如下.1 临床资料患者,男性,48岁,10余年前无明显诱因出现上腹部疼痛不适,呈持续性胀痛,伴轻度发热及恶心呕吐,全身乏力,进食后症状有所缓解,无皮肤巩膜发黄,无放射及牵扯痛,无心慌气紧,院外检查后考虑为"胃病",经治疗后疼痛缓解,未进一步诊治,后反复发作;2012年8月上腹部疼痛再次发作,遂于9月9日来我院就诊.

产前超声诊断胎儿期肾上腺出血2例

肾上腺出血(adrenal hemorrhage,AH)是由于肾上腺皮质不可逆损伤而致的一种以出血为临床表现的少见疾病,主要依靠影像学检查、临床治疗及随访观察诊断,预后较好,多行保守治疗,极少采取手术治疗.新生儿期AH并不少见,但是国内外鲜有产前诊断胎儿期AH的报道.

膀胱肌瓣代输尿管治疗输尿管全长撕脱伤1例

1 临床资料患者,男性,40岁,2011年12月10日因"左侧腰部间断性胀痛1周"入我院泌尿外科.8年前曾因右侧输尿管结石行体外震波碎石治疗.入院完善辅助检查后诊断:左输尿管上段结石、左肾积水、右肾无功能,于19日在硬膜外麻醉下行左输尿管镜气压弹道碎石术,术毕退镜时发生输尿管撕脱伤,征得患者家属同意后,改全身麻醉,术中探查发现左侧输尿管肾盂至膀胱壁段全程撕裂,脱落于膀胱内,输尿管移行区少量血肿,无活动性出血.患者家属拒绝行自体肾移植及肠代输尿管术,经患者家属同意遂行左肾造瘘+撕脱输尿管吻合并大网膜包裹术,术后留置支架管及左肾造瘘管.术后半年拔除支架管,拔管1个月后经左侧肾造瘘管造影示:左输尿管闭锁,左肾积水.

慢性硬膜下血肿开颅血肿清除并包膜切除术4例临床分析

慢性硬膜下血肿(chronic subdural hematoma,CSDH)在临床上较为常见,但伴有厚壁者由于血肿壁坚厚,脑组织受压时间较长,脑复张欠佳,残腔积液、积气和血肿复发常见,在处理上更复杂[1].我院从2008年1月至2012年6月,共收治慢性硬膜下血肿65例,其中61例行慢性硬膜下血肿钻孔引流术.另4例因术前CT提示血肿包膜增厚,手术行开颅血肿清除并包膜切除,均治愈出院,现报告如下.

结肠手术的手术部位感染目标性监测分析

手术部位感染会导致住院时间延长,给患者的身体健康造成损害,并带来沉重的经济负担,还严重影响预后甚至导致死亡[1].手术部位感染居医院感染的前3位,占所有医院感染的14％ ～ 16％[2].美国疾病控制与预防中心(centers for disease control and prevention,CDC) 1970年建立了国家医院感染监测系统(national nosocomial infections surveillance system,NNIS),完善了手术部位感染的定义.美国CDC医院感染控制效果研究(study on the efficacy of nosocomial infection control,SENIC)发现,感染监测和控制措施(包括将感染率反馈给外科医师)得当能够显著降低手术部位感染.英国医院感染全国监控服务系统(nosocomial infection national surveillance service,NINSS)发现对手术部位感染进行评估是一个有效的措施[3-5].本研究对374例结肠手术患者的手术部位感染进行目标性监测,分析导致手术部位感染的危险因素,对患者进行危险指数评分,为普外科医师预防控制结肠手术切口感染提供参考.

普洱茶水提取物对大鼠非酒精性脂肪性肝病的干预作用

目的 探讨普洱茶水提取物对大鼠非酒精性脂肪肝病的干预作用.方法 根据干预方式不同将50只SD大鼠分成空白对照组、脂肪肝模型组、普洱茶组、饮食控制组、饮食普洱茶组,每组10只.实验12周后,测定大鼠体质量、肝质量、血脂水平、肝组织TG和TC含量,并进行肝脏组织病理学检查.结果 与脂肪肝模型组比较,3个干预组肝脏病理切片提示肝脏脂肪变均有不同程度的改善,大鼠肝湿质量显著下降(P＜0.01),肝组织TG、TC含量显著下降(P＜0.01),血清HDL-C显著升高(P＜0.01)；饮食控制组与饮食普洱茶组大鼠血清LDL-C显著降低(P＜0.01)；普洱茶组和饮食普洱茶组大鼠血清TG显著降低(P＜0.01)；普洱茶组和饮食普洱茶组大鼠体质量显著降低(P＜0.01).结论 普洱茶水提取物具有明显降低血脂,改善肝脏脂肪变性的作用,可能作为非酒精性脂肪肝病早期预防和治疗有效的饮食策略.

吲哚菁绿血管造影在硬脊膜动静脉瘘手术中的应用价值

目的 探讨吲哚菁绿血管造影在硬脊膜动静脉瘘手术中的应用价值.方法 回顾性分析硬脊膜动静脉瘘手术中使用吲哚菁绿血管造影的3例硬脊膜动静脉瘘患者的临床资料.术前行脊髓血管造影明确诊断,通过显微手术直接探查以识别硬膜内的血管连接,然后静脉注射吲哚菁绿来验证.处理瘘口完毕后再次行吲哚菁绿造影.结果 3例患者术中的吲哚菁绿血管造影结果与术前脊髓血管造影、术中探查结果均吻合.经成功手术后2例患者症状明显改善,l例症状缓慢改善.结论 吲哚菁绿血管造影术实施简单,可实时准确提供脊髓硬脊膜动静脉瘘瘘口位置,明确供血动脉、引流静脉及瘘口情况.

AngⅡ对大鼠心肌梗死后TGF-β1表达的影响及对心室肌重构的作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)对大鼠心肌梗死后心肌组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor β1,TCF-β1)表达的影响及对梗死心肌的作用.方法 健康雄性SD大鼠60只(体质量180～220 g),通过结扎冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死模型.术后48h将存活的36只大鼠分为4组:假手术组(n=10)、心肌梗死组(n=9)、小剂量AT1受体(angiotensinⅡtype-1 receptor,AT1R)拮抗剂氯沙坦钾干预组(n=8)、大剂量氯沙坦钾干预组(n=9).4周后取大鼠心脏左心室组织,采用放射免疫法测定梗死心肌中AngⅡ的含量,用免疫组化、Western blot法检测TGF-β1的表达.结果 心肌梗死组心室肌组织匀浆中AngⅡ含量较假手术组显著增高(P＜0.05),氯沙坦钾组与心肌梗死组相比,AngⅡ的水平显著降低(P＜0.05),并具有剂量依赖性.免疫组化和Western blot结果提示心肌梗死组心肌组织中TGF-β1较假手术组显著升高(P＜0.05),经氯沙坦钾干预后与心肌梗死组比较,TGF-β1表达水平呈剂量依赖性降低(P＜0.05).结论 AngⅡ通过与AT1R结合后可增加大鼠心肌梗死后心室肌组织中TGF-β1的蛋白表达,AT1受体拮抗剂氯沙坦钾呈剂量依赖性抑制心肌梗死后AngⅡ和TGF-β1的表达,进而改善梗死心肌的重构.

腹腔镜胃癌D2根治术的评价

局部进展期胃上部癌腹腔镜淋巴结清扫的评价与策略

腹腔镜胃癌根治术:未来治疗胃癌的标准手术

腹腔镜全胃切除术后消化道重建方式的探讨

腹腔镜胃癌手术常见并发症及其防治对策

早期胃癌内镜治疗与外科治疗的方式选择