五联综合诊断技术对骨髓增生异常综合征诊断价值的临床研究

目的 探讨骨髓涂片、骨髓活检、染色体核型显带分析、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)及流式细胞术(flow cytometry,FCM)五联综合诊断技术单用和联用对骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)的诊断价值.方法 收集2010年10月至2013年11月在我院经细胞形态学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学(morphologie,immunophenotypie,cytogenetic,molecular,MICM)联合检测,并根据WHO造血组织和淋巴系统肿瘤分类的标准确诊为MDS的患者情况,并分析单项(骨髓涂片)、双联(骨髓涂片+活检)、三联(骨髓涂片+活检+染色体)、四联(骨髓涂片+活检+染色体+ FISH)和五联(骨髓涂片+活检+染色体+FISH+ FCM)诊断符合率及其在分型、预后评估中的作用.结果 在248例确诊的MDS患者中,双联诊断符合率为79.44％,三联和四联诊断符合率分别为87.10％、88.71％,五项联合诊断符合率可高达93.15％,均高于骨髓涂片单项诊断符合率(59.27％,P＜0.05).在MDS亚型分型及预后评估方面,五项联合应用辅以骨髓纤维组织的有无及增生程度、染色体核型情况及其复杂程度、抗原异常表达这3个参数均有助于提高MDS诊断及预后评估的准确性.结论 应用MICM五联综合诊断技术能有效提高MDS诊断水平,对其亚型分型、预后治疗评估具有重要的临床价值.

炎症通过SCAP-SREBP2-LDLr途径促进四氯化碳诱导的小鼠脂肪变肝细胞胆固醇内流

目的 探讨炎症促进CCl4所致的单纯性脂肪变肝细胞进一步脂质集聚形成脂肪肝的分子机制.方法 将12只6～8周龄的C57BL/6J雄性小鼠采用随机数字表法分为对照组(n=6)和炎症组(n=6).2组均预先皮下注射CC142周,再分别给予对照组和炎症组生理盐水和酪蛋白皮下注射16周,18周后留取小鼠血清及肝组织,检测血清炎症因子及脂质水平,HE及油红0染色观察小鼠脂肪肝病变程度,RT-PCR、免疫组化及Western blot分别检测小鼠肝组织的低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLr)、固醇调节元件结合蛋白-2(sterol regulatory element binding protein 2,SREBP-2)和SREBP裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein,SCAP)的基因和蛋白表达水平.结果 炎症组的血清淀粉样蛋白(serum amyloid A,SAA)和TNF-α的表达均较对照组明显升高[分别为(236.09±38.45) ng/mL vs(35.68±11.34) ng/mL,(82.59±11.48)pg/mL vs (17.91±2.77)pg/mL,P＜0.05],炎症组的血清HDL-e、LDL-c、TC均较对照组明显降低[分别为(0.91 ±0.10)vs(1.80 ±0.12) mmol/L,(2.65±0.44)vs(5.76±0.33)mmol/L,(3.69 ±0.26) vs(4.16±0.22)mmol/L,P＜0.05],HE及油红O染色显示炎症组可见大量的脂质堆积.炎症组的LDLr、SREBP-2、SCAP的mRNA和蛋白表达比对照组明显增高(P＜0.05).结论 炎症可能通过上调肝细胞LDLr、SREBP-2、SCAP的表达,导致CCl4刺激下的脂肪变肝细胞摄入外源性胆固醇增加,加重肝脏脂质的异常集聚.

钙库调控的钙离子通道对大鼠膀胱平滑肌收缩性调控的研究

目的 分析胞内钙库调控的钙离子通道(store operated calcium channels,SOCCs)在大鼠膀胱平滑肌中的功能.方法 RT-PCR检测SOCCs相关蛋白基因表达;使用SOCCs的激动剂CPA(10 μ,mol/L)以及抑制剂SKF-96365(10 μmol/L),采用离体肌条的方法观察其肌肉的收缩,全细胞膜片钳技术观察膀胱平滑肌细胞电流,激光共聚焦显微镜观察其膀胱平滑肌细胞内钙离子变化.结果 RT-PCR检测到TRPC3、TRPC4和STIM1基因表达.加入CPA激活SOCCs后,离体肌条实验结果显示膀胱平滑肌离体肌条收缩频率为(5.937 5±1.108 0)/min,比加入CPA前明显增加(P＜0.05),收缩幅度为(0.067 1 ±0.027 0)g,比加入CPA前明显降低(P＜0.05);膜片钳实验结果显示钙电流较加入CPA前显著增加,-80 mV电流密度为(-3.127 1 ±0.9087)pA/pF,20 mV电流密度为(1.048 1 ±0.322 5)pA/pF(P ＜0.05);激光共聚焦显微镜实验结果显示钙离子相对荧光(1.150 7±0.212 1)较加入CPA前显著增加(P＜0.05).加入抑制剂SKF-96365抑制SOCCs后,离体肌条收缩频率为(5.081 3±1.129 5)/min,较加入CPA后显著减缓(P＜0.05),收缩幅度为(0.079 0±0.033 0)g,较加入CPA后显著增加(P＜0.05);膜片钳显示钙电流较加入CPA后显著减少,-80 mV电流密度为(-2.678 1±0.8044)pA/pF,20 mV电流密度为(0.907 7 ±0.346 2)pA/pF(P ＜0.05);激光共聚焦显微镜实验结果显示细胞内钙离子相对荧光(1.028 9±0.204 7)较加入CPA后显著减少(P＜0.05).结论 膀胱平滑肌中可以表达SOCCs相关的通道,膀胱平滑肌的收缩性受到SOCCs的影响.

山奈酚与野马追总黄酮对实验性高脂大鼠的降脂作用及其血液流变学比较

目的 观察山奈酚单体对实验性高脂大鼠的降脂作用和血液流变学的影响,并与野马追总黄酮进行比较.方法 70只大鼠分为空白对照组,高脂模型组,山奈酚大、小剂量组,野马追总黄酮大、小剂量组和阳性药物组.每天上午8:30左右,山奈酚大、小剂量组分别灌服300 mg/kg和100 mg/kg山奈酚,野马追总黄酮组灌服(生药)100 mg/kg和50 mg/kg,阳性药物组灌服非诺贝特20 mg/kg,各组动物给药容量0.5 mL/100 9,空白对照组灌服赋形剂0.5％羧甲基纤维素钠溶液;除空白对照组每天按常规给予基础饲料外,其余实验组给予高脂饲料.连续给药6周后,各组动物采血测定血清中TC、TG、HDL-c、LDL-c、SOD、MDA、NO和血液流变学.采用油红0染色观察山奈酚对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的巨噬细胞泡沫化的影响.结果 山奈酚大、小剂量动物组血脂、血液流变学参数和MDA均明显低于高脂模型组(P＜0.01);而与野马追总黄酮大、小剂量组相比,组间无统计学差异(P＞0.05).山奈酚有效抑制oxLDL诱导的巨噬细胞内脂质的聚集.结论 山奈酚单体连续给药能降低实验性高脂动物血脂、血液流变学参数和血清中MDA浓度而升高SOD活性,山奈酚也能抑制巨噬细胞泡沫化的形成.山奈酚单体有望替代野马追总黄酮用于降脂、抗氧化、抗炎等临床治疗.

异丙酚重复镇静对大鼠空间学习记忆能力及其海马齿状回新生神经元的影响

目的 观察异丙酚重复镇静对大鼠海马齿状回新生神经元形态及对大鼠空间学习记忆能力的影响.方法 48只成年SD大鼠分为异丙酚组和溶媒对照组,异丙酚组给予异丙酚重复镇静(100 mg/kg,2次/d,共7d),溶媒对照组给予同等体积的溶媒(脂肪乳剂).Morris水迷宫检测首次给予异丙酚28 d后大鼠空间学习记忆能力.首次给药后以BrdU进行标记,分别计数首次给药后1、14 d和28 d大鼠海马齿状回颗粒下区BrdU阳性细胞数.激光共聚焦显微镜观察首次给药后14 d SD大鼠海马齿状回新生神经元树突分枝数量和长度的变化.结果 在使用异丙酚镇静28 d后,与溶媒对照组相比,成年大鼠发现隐藏物体的时间显著延长[异丙酚组(14.55±1.25)s,溶媒对照组(9.36±2.54)s,P＜0.05].与溶媒对照组相比,大鼠海马齿状回颗粒下区BrdU阳性细胞数在首次给药后1d无明显变化,但在首次给药后14 d[异丙酚组(2 560.58±42.76)个,溶媒对照组(2 941.42±46.66)个,P＜0.05]和28 d[异丙酚组(1 297.75±31.99)个,溶媒对照组(2 273.75 ±40.29)个,P＜0.05]均显著减少.首次给药后14 d,异丙酚镇静组成年SD大鼠海马齿状回新生神经元树突的长度[(异丙酚组(267.25±14.20) μm,溶媒对照组(394.33±32.59) μm,P＜0.05]和分枝数[异丙酚组(2.92±0.29)个,溶媒对照组(5.67±0.49)个,P＜0.05]明显低于对照组.结论 异丙酚重复镇静可损害成年大鼠的空间学习记忆能力和新生神经元的树突复杂度.

同种异体骨植骨联合锁定加压钢板治疗四肢良性骨肿瘤及类瘤病变的随访研究

目的 探讨同种异体骨植骨联合锁定加压钢板治疗四肢良性骨肿瘤的临床疗效和安全性.方法 回顾性分析2005年3月至2011年3月本科收治的56例接受同种异体骨植骨联合锁定加压钢板手术治疗的四肢良性骨肿瘤及类瘤病变病例患者的临床资料.其中男性31例,女性25例,年龄10～61(38.7 ±3.6)岁;疾病类型:单纯骨囊肿16例,骨纤维结构不良15例,动脉瘤样骨囊肿10例,骨巨细胞瘤9例,骨母细胞瘤3例,嗜酸性肉芽肿3例,其中合并病理性骨折36例,均行病灶刮除、同种异体骨植骨、锁定加压钢板内固定治疗,观察植骨量、有无免疫排斥反应、植骨愈合情况、愈合时间、病灶有无复发等.结果 本组病例植骨量为(23.5±10.3)g,随访时间12 ～60(25.5±12.3)个月,5例失访.2例骨巨细胞瘤复发,余49例均获治愈,4例出现排异反应,平均骨愈合时间为6个月,术后1年根据骨骼愈合情况取出内固定,未出现骨不连及再骨折情况.结论 同种异体骨促进成骨、修复骨缺损效果确切,排异反应发生率低,在彻底刮除病变的前提下,与锁定加压钢板联合应用可有效治疗四肢长骨良性骨肿瘤及类瘤病变.

siIRE1α重组腺病毒对内质网应激介导凋亡的影响

目的 构建内质网跨膜蛋白肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1 α,IRE1α)基因干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)重组腺病毒,并探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)状态下其对C2C12细胞增殖凋亡的影响.方法 人工合成靶向IRE1α的siRNA序列,连接到穿梭载体pSES-HUS上,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183感受态中进行同源重组,得到pAdSES-HUS-IRE1αsiRNA重组质粒.通过脂质体介导在HEK293细胞中包装并扩增重组腺病毒Ad-IRE1α siRNA,在C2C12细胞中采用RT-PCR和Western blot检测其干扰效果,并通过FCM法和MTT检测Tm诱导ERS时病毒对C2C12细胞增殖凋亡的影响(分为4组:NC组、Tm单独处理组、Tm+ Ad-RFP组和Tm+ Ad-IRE1 α siRNA组),Western blot检测C2C12细胞中Cleaved Caspase-3和Chop蛋白的表达.结果 成功获得了病毒滴度约为4.3×1011 PFU/mL的重组腺病毒Ad-IRE1αsiRNA.RT-PCR和Western blot检测结果表明,该重组腺病毒有效地抑制了C2C12细胞中IRE1α的表达.FCM检测结果表明,ERS条件下,Tm+ Ad-IRE1α siRNA组S期的细胞比例分别比Tm单独处理组和Tm+ Ad-RFP组升高12.62％和14.80％ (P ＜0.05);凋亡率比Tm单独处理组和Tm+ Ad-RFP组降低16.64％和16.26％ (P ＜0.05).MTT实验结果与Cleaved Caspase-3和Chop蛋白的表达与FCM结果一致.结论 重组腺病毒Ad-IRE1α siRNA在C2C12细胞中能有效抑制IRE1 α的表达;ERS状态下,RNA干扰IRE1α基因可促进C2C12细胞的增殖,抑制其凋亡.

睡眠剥夺在儿童MRI检查中的作用

目的 探讨睡眠剥夺对接受MRI检查的儿童的镇静作用.方法 对300例1～＜7岁门诊MRI检查的儿童,在常规药物镇静基础上,根据睡眠剥夺时间长短及年龄进行分组:未行睡眠剥夺组、短时段(0.1 ～ ＜3.0 h)、中时段(3.0～＜6.0 h)以及长时段睡眠剥夺组(≥6.0 h);1～＜3岁组(A)、3～＜5岁组(B)、5～＜7岁组(C).对各睡眠剥夺组及各年龄组的MRI检查成功率进行比较分析.结果 300例患儿中,睡眠剥夺患儿MRI检查总成功率(223/242,92.15％)及A(91/98,92.86％)、B(66/72,91.67％)、C(66/72,91.67％)各年龄组成功率均分别较对应的未行睡眠剥夺组患儿MRI检查成功率有较显著提高(x2总=17.622 7;x2A =77.041 7;x2B=52.408 5;x2C =47.684 9,P＜0.01);趋势检验发现A、B、c各年龄组内,MRI检查成功率随患儿睡眠剥夺时段的延长均存在增高趋势(x2A=14.167 8,P=0.0002;x2B=12.388 6,P =0.006 2;x2C=10.526 9,P=0.014 6).结论 睡眠剥夺在儿童MRI检查中有镇静作用,联合常规药物镇静能有效提高检查成功率.

Ki-67与Cyfra21-1联合检测在鼻咽癌不良预后评估中的作用

目的 探讨检测鼻咽癌组织Ki-67的表达水平及治疗后血清细胞角蛋白19片段21-1(Cyfra21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)的含量在鼻咽癌不良预后评估中的作用及临床意义.方法 回顾性分析2008年6-12月经病理确诊并接受根治性同步放化疗治疗的鼻咽鳞癌患者89例.免疫组化法检测患者鼻咽癌组织Ki-67表达情况,化学发光法检测治疗后血清Cyfra21-1、SCCA含量,连续监测法检测患者治疗后血清中的LDH、ALP含量.结果 至2013年12月随访日结束,36例患者入组复发组,34例患者入组远处转移组,19例患者入组临床缓解组.临床缓解组患者鼻咽癌组织中的Ki-67表达水平低于远处转移组(P＜0.05),且血清Cyfra21-1表达水平低于复发组及远处转移组(P＜0.05).同时,复发组患者的血清LDH表达水平低于远处转移组(P＜0.05);血清ALP与SCCA在各组间未见明显差异(P＞0.05).Cox回归分析结果显示,组织Ki-67高表达(P＜0.01,HR=1.973)与血清Cyfra21-1高表达(P＜0.01,HR=1.537)均为无进展生存期的不良预后因素,血清Cyfra21-1高表达(P＜0.01,HR=1.492)为总生存期的不良预后因素.通过建立预后指数方程发现,高危组与低危组患者的无进展生存期和总生存期差异有统计学意义(P＜0.01).结论 联合检测患者鼻咽癌组织中Ki-67的表达水平与血清Cyfra21-1的含量可用于评估鼻咽癌患者的不良预后情况.

甲基-β-环糊精对内皮素-1诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度变化的影响

目的 研究甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响.方法 原代培养大鼠颈总动脉平滑肌细胞,通过形态学和免疫荧光染色鉴定.再通过炎症因子TNF-α(100 μg/L)和MβCD(5 mmol/L)的不同处理将细胞分为4组:PSS液+ET-1组(A组)、PSS液+MβCD +ET-1组(B组)、PSS液+TNF-α+ ET-1组(C组)、PSS液+TNF-α+MβCD+ET-1组(D组).后各组细胞经Furo-2/AM染色后,采用TILL荧光钙成像系统检测活细胞在ET-1(100 nmol/L)刺激下胞内钙荧光强度的变化情况,R(F 340 nm/F 380 nm)值代表单细胞胞内钙荧光强度比值.结果 TILL荧光钙成像系统检测结果显示A～D组细胞静息状态荧光强度R0值分别为(0.591 6±0.082 0)、(0.575 3±0.079 0)、(0.655 1±0.083 7)、(0.610 5±0.080 4),组间比较无统计学差异(P＞0.05).各组细胞经ET-1(100 nmol/L)刺激后胞内钙荧光强度分别较静息状态上升:A组上升(115±17)％,B组上升(67±15)％,与A组比较差异有统计学意义(P＜0.05);C组上升(279 ±21)％,与A组比较差异有统计学意义(P＜0.01);D组上升(88±16)％,与C组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MβCD破坏caveolae结构后明显降低了VSMCs胞内钙离子浓度升高程度,caveolae可能是抑制脑血管痉挛发生的重要靶点.

颈内动脉床突段与眼动脉关系的多层螺旋CT观察

目的 利用多层螺旋CT(multi-slice spiral computed tomography,MSCT)三维重建在活体个性化观察颈内动脉(internal carotid artery,ICA)床突段与眼动脉(ophthalmic artery,OA)分支的关系.方法 观察100例(200侧)受检者薄层轴位和容积再现(volume rendering,VR)融合图像上OA的起始位置,并将轴位ICA前半部分分成前内、中、外各1/3等分,分别记录OA起始点所在的位置;常规进行VR重建颅骨,沿眶截骨平面模拟切除颅盖骨,同时分别距前床突左或右外侧缘1 cm处模拟矢状位切除左或右外侧颅骨,并以正中矢状面将其分成左右两部分,于左或右侧分别观察OA与ICA的上下关系.结果 100例(200侧)受检者中,轴位上OA起始于ICA前、中、外1/3各占52.00％(左29.00％,右23.00％)、45.00％(左19.50％,右25.50％)和3.0％(左右各1.50％).侧位上OA起始于OA段、床突段及其交界处者分别为76.50％(左39.00％,右37.50％)、6.00％(左、右侧各3.00％)、17.50％(左9.00％,右8.50％).结论 MSCT能清楚地显示前床突、ICA床突段与OA起始部的关系,能为显微外科手术入路的选择和术中磨除前床突提供有用的影像学信息.

调节性T细胞在肝再生增强因子免疫抑制机制中的作用研究

目的 观察人肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)对体外活化的单个核细胞中调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的增殖、分化及抑制性细胞因子TGF-β1、IL-10表达水平的影响,探讨ALR的免疫抑制机制.方法 梯度离心分离正常人外周血单个核细胞(human peripheral blood monoclear cells,PBMCs),分为对照组(Control组)、ConA刺激组(ConA组)和人ALR (hALR)干预组(ConA+ hALR组).ConA组和ConA+ hALR组分别给予ConA(5μg/mL)和hALR(30μg/mL)处理,对照组不处理.各组作用60h后,2-对磺酸基苯基-3..(4,5-二甲基噻唑)-5-(3-羧甲氧基苯基)-二氢四唑嗡盐[3-(4,5-dimethyhhiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt,MTS]检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞比例和细胞周期变化,Real-time PCR检测各组FoxP3 mRNA的表达,ELISA检测各组上清中细胞因子TGF-β1、IL-10浓度.结果 hALR能明显抑制ConA活化的PBMCs的增殖(P＜0.01);与ConA组和Control组相比,hALR能显著增加CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞占CD4+T细胞的比例(P＜0.01)和FoxP3 mRNA的表达(P＜0.01),并且hALR能够解除ConA引起的Treg细胞周期G2/M期的阻滞(P＜0.01).此外,与ConA组和Control组相比,ConA+ hALR组上清中TGF-β1和IL-10的浓度明显升高(P＜0.01).结论 hALR可以通过诱导Treg细胞的增殖、分化以及促进TGF-β1和IL-l0的产生,从而达到免疫抑制的作用.

11例先天性主-肺动脉间隔缺损的外科治疗临床分析

目的 回顾性总结本科2002年8月至2013年5月收治的11例14岁以下先天性主-肺动脉间隔缺损患儿的诊断及外科治疗经验及疗效.方法 本组患儿共11例,均为男性,平均年龄6.91(2 ～14)岁,入院后通过心脏超声及CTA等方法明确诊断,按Moii分型,其中Ⅰ型4例,Ⅱ型4例,Ⅲ型3例,其中5例合并其他心脏畸形,1例继发感染性心内膜炎.结果 全组患儿术前确诊9例,漏诊2例,均采用胸骨正中切口,9例在中度低温体外循环下完成手术,2例患儿采用常温非体外循环下经主-肺动脉间隔缺损外游离结扎.术后无早期死亡病例,晚期死亡1例(严重肺部感染及弥散性血管内凝血),10例患儿术后门诊随访1～10年,症状均明显缓解,复查心脏超声均未见主-肺动脉间隔残余漏.结论 术前通过心脏超声,结合CTA或者升主动脉造影对先天性主-肺动脉间隔缺损可明确诊断;合并复杂的心脏大血管畸形与本病的治疗效果密切相关.

体外细胞单轴循环牵伸载荷模型建立的实验研究

目的 研制一种体外细胞单轴循环牵伸模型.方法 用硅树脂材料制备带微沟槽培养皿,运用有限元软件ABAQUS分析培养皿应变分布.将肌腱干细胞(tendon stem cells,TSCs)在培养皿中培养,观察TSCs贴壁生长情况.可编程控制器(programmable logic controller,PLC)控制牵伸模型机械运行部分对培养皿周期性牵伸.按不同牵伸频率(0.5、1.0、2.0、3.0 Hz)及应变(4％、8％、16％、20％)分为16组连续牵伸24h,检测培养皿实际运行次数及位移量变化;倒置显微镜观察TSCs有无脱落及漂浮;在牵伸时间为8、12 h(频率1 Hz、应变8％)时,用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架中F-actin形态变化.结果 硅树脂培养皿应变分布较均匀,培养皿底膜有效应变范围约占总面积的91％.TSCs在培养皿中培养10 h时,全部贴壁且沿微沟槽方向生长.在不同牵伸条件下牵伸模型运行稳定,硅树脂培养皿实际运行频率、应变位移距离和设定频率及理论应变位移距离比较差异无统计学意义(P＞0.05);TSCs无明显脱落及漂浮;牵伸组F-actin束变细,部分发生断裂,红色荧光(F-actin)染色减弱且分布不均匀.结论 体外细胞单轴循环牵伸载荷模型建模成功.该模型操作简便、参数设计范围宽,可模拟不同条件进行体外贴壁细胞生物力学载荷实验研究.

肺表面活性物质治疗新生儿呼吸窘迫综合征时有效减少肺出血发生率的应用时限选择的多中心回顾性研究

目的 探讨应用肺表面活性物质(pulmonary surfactant,PS)制剂——牛肺表面活性物质(calf pulmonary surfactant,CPS,商品名:珂立苏)治疗新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)时有效减少肺出血发生率的终应用时限.方法 收集2008年5月至2009年6月国内22家各级医院新生儿病房应用PS治疗NRDS的相关临床资料.NRDS患儿分为3组,第1组:重度NRDS采用常规机械通气(CMV)+ CPS治疗;第2组:轻度NRDS采用CMV+ CPS治疗;第3组:轻度NRDS采用鼻塞式持续气道正压通气(nCPAP)+ CPS治疗;将生后1、2、3、4、5、6、7、8h作为时间界点,逐一比较在界点前后使用CPS的各组肺出血的发生率,并探讨NRDS严重程度相同的患儿在不同通气模式下肺出血发生率.结果 对于重度NRDS患儿,以生后4、5、6、7、8h作为使用CPS的时间界点时肺出血的发生率比较差异有统计学意义(P＜0.05).对于轻度NRDS患儿,生后5h内使用组肺出血发生率明显低于5h后使用组(3.2％ vs9.7％,P ＜0.05).对于轻度NRDS患儿,以生后5h为界点,第3组的肺出血发生率明显低于第2组(0.3％ vs 6.5％,P＜0.05).结论 生后5h内使用CPS是治疗NRDS时有效降低肺出血发生率的后时限,对于轻度NRDS,生后5h内使用CPS联合nCPAP可明显减少肺出血发生率.

GPC5基因在肺腺癌组织中差异表达和突变分析

目的 探讨GPC5基因在肺腺癌组织和正常肺组织中差异表达和突变情况.方法 通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)的两个数据集分析肿瘤组织和相匹配正常组织GPC5表达量,对GPC5基因表达差异进行分析.运用肿瘤基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)公共数据库初步分析GPC5突变和拷贝数变异情况.运用实时定量PCR检测39例肺癌患者肿瘤组织和正常组织样本中GPC5基因的表达,对结果进一步验证.结果 我们对GEO数据库中的两个数据集进行分析发现肺腺癌肿瘤组织中GPC5表达量明显低于配对的正常组织(P＜0.05);实时定量PCR检测结果证实了GPC5基因在肿瘤组织中的相对表达量均显著低于相匹配的正常组织(P＜0.01),而且与Ⅰ期肿瘤组织相比,Ⅱ期+Ⅲa期的肿瘤组织中GPC5表达水平明显较低(P＜0.05).结论 GPC5基因的拷贝数变异广泛存在,杂合子缺失可能是导致GPC5表达水平降低的原因.

国产多孔钽对成骨细胞生物相容性及其相关成骨基因表达的影响

目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响.方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定.根据国家标准制备多孔钽浸提液,以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组,以DMEM完全培养基培养成骨细胞作为对照组.MTT法检测多孔钽浸提液对成骨细胞生长及增殖的影响;倒置相差显微镜及扫描电镜观察成骨细胞在多孔钽上粘附、生长及增殖的情况;实时荧光定量PCR技术检测OPN、OC及FN mRNA的表达并进行定量分析.结果 肉眼及扫描电镜观察多孔钽外观呈深灰色、多孔状三维立体结构,表面及断面均匀分布直径400～600 μm的微孔,内部孔隙相互连通.MTT法检测结果显示,实验组及对照组成骨细胞培养1～8d,除第3天外,各时间点细胞光密度值差异无统计学意义(P＞0.05).成骨细胞种植于多孔钽培养结果显示,材料表面和孔隙内细胞叠层生长,分泌的骨基质完全覆盖材料表面.实时荧光定量PCR检测结果显示,实验组成骨基因OPN、OC、FN mRNA的相对表达量分别为1.45、1.79、1.69.结论 国产多孔钽材料具有良好三维立体空间构型及良好的生物相容性,可刺激成骨细胞的粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA的表达.

冷光漂白对复合树脂充填体边缘微渗漏的影响

目的 评价冷光漂白对在不同充填时机使用不同粘接剂的复合树脂充填体边缘微渗漏的影响.方法 选取新鲜拔除的健康前磨牙40颗,在其颊面制备Ⅴ类洞,按随机数字表法分为A～J共10组,每组4颗.A～E组使用AdperTMSingle Bond2全酸蚀粘接剂,分别于漂白前、漂白后即刻、漂白后1周、漂白后2周及未漂白时充填,F～J组使用AdperTMEasy One自酸蚀粘接剂分别于上述时间充填,其中E组与J组为对照组(未漂白组),所有牙使用FilitekTM Z350XT复合树脂进行充填.冷热循环并染色后,颊舌向剖开,牙科显微镜下测量记录染料渗入洞壁的深度.结果 ①在相同充填时间使用AdperTM Single Bond2的充填物微渗漏较使用AdperTM Easy One小(P＜0.05,P＜0.01).②冷光漂白前、漂白后即刻与漂白后1周使用2种粘接剂树脂充填,均较未漂白边缘微渗漏增加(P＜0.05);漂白后2周使用2种粘接剂树脂充填,与未漂白微渗漏比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 使用全酸蚀粘接剂的树脂充填物微渗漏较小,好在冷光漂白2周后进行树脂充填,而漂白前已经存在的充填物则应该在漂白后更换.

RGD修饰共载紫杉醇与microRNA-34a脂质体靶向抑制A549肺癌细胞的初步研究

目的 制备整合素受体修饰共载紫杉醇(paclitaxel,PTX)和microRNA-34a脂质体(RGDmiLPs-34a/PTX),研究与A549肺癌细胞的亲和力以及对肺癌细胞的靶向抑制效果.方法 采用薄膜分散法制备RGDmiLPs-34a/PTX.考察脂质体的粒径、电位以及包封率;通过定量细胞摄取实验以及定性的共聚焦实验考察A549细胞对普通脂质体(LP)和RGD修饰脂质体(RGDLP)的摄取效率.MTT实验考察不同脂质体对A549细胞的细胞毒性;构建肺癌细胞肿瘤球模型,考察不同脂质体对肿瘤球的穿透能力以及不同载药脂质体对肿瘤球的生长抑制能力.结果 RGDmiLPs-34a/PTX的粒径为(125.0±11.8)nm,电位为(21.00±4.85)mV,PTX与microRNA-34a的包封率分别为81.5％和94.6％.细胞摄取实验结果显示,A549细胞对RGDLP的摄取效率是LP的2.6倍,二者差异具有统计学意义(P＜0.01);定性的细胞摄取实验和肿瘤球穿透实验结果显示RGDLP组的荧光强度明显强于LP组,与定量的实验结果相一致.MTT实验表明RGDmiLPs-34a/PTX对A549肺癌细胞的毒性显著强于miLPs-34a/PTX、RGDmiLPs-34a和RGDLP-PTX;肿瘤球抑制实验结果显示,miLPs-34a/PTX、RGDmiLPs-34a、RGDLP-PTX和RGDmiLPs-34a/PTX分别使肿瘤球体积减小到原体积的81％、77％、64％和37％.与miLPs-34a/PTX、RGDmiLPs-34a、RGDLP-PTX相比,RGDmiLPs-34a/PTX对肿瘤球抑制率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 整合素受体RGD修饰共载紫杉醇和microRNA-34a脂质体具有良好的肺癌细胞靶向性和肺癌细胞抑制作用,是一种潜在高效的肺癌靶向给药系统.

糖皮质激素致病毒性心肌炎1例

1 临床资料患者,男性,47岁,因“反复蛋白尿半年”于2010年8月3日入院.院外肾活检示:系膜增生性肾小球肾炎.尿常规:蛋白(+++),隐血(++);24 h蛋白尿1.42 g/1.8 L;Scr 146.06 μmol/L;心脏彩超:左室壁增厚;心电图:窦性心律,正常心电图.有高血压、高脂血症病史.入院前服用强的松30 mg半个月,入院后给予甲泼尼龙16 mg,3次/d,住院期间有活动后气促、心悸,胸骨后短暂性压榨感,活动平板阳性,血糖升高,心肌标志物阴性.根据症状和活动平板诊断为病毒性心肌炎、类固醇糖尿病.给予降压、降糖、营养心肌等处理.20 d后,复查24h蛋白尿定量从2.29 g/2.1 L降至0.38 g/2.1 L,Scr从186 μmol/L降至128.9 μmol/L.

枕大池表皮样囊肿2例

颅内表皮样囊肿先由Pinson于1807年报道,1850年Remark提出异位残余上皮细胞的理论,1928年Cntchey将其定名为表皮瘤,又称珍珠瘤或胆脂瘤,其发病率占颅内肿瘤的0.2％ ～1.8％,好发于青壮年,以桥小脑角区多见,鞍区次之[1],极少发生于枕大池.2013年我科收治了2例枕大池表皮样囊肿,手术效果满意,现报告如下.

误诊为肝内胆管细胞癌的IgG4相关疾病1例

1 临床资料患者,男性,62岁,因“发现肝内占位性病变8个月”入院.患者2013年4月因鼻息肉在当地医院查:谷丙转氨酶(ALT)66 U/L,谷草转氨酶(AST) 68.9 U/L,碱性磷酸酶(ALP)246 U/L,γ-谷氨酰基转移酶(GGT) 580 U/L,CA-199 61.94 kU/L,甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、肝炎全套阴性,腹部B超示肝脏实质回声增粗、增强,胆囊壁异常回声;进一步完善上腹部CT平扫+增强示:①考虑肝左叶胆管癌,蔓延侵犯胆囊、右侧胆管、肝总管,肝内胆管轻度扩张;②左肺下叶后基底段炎性肉芽.患者遂于4月份就诊于上级医院,完善肝脏MR平扫+增强示:左肝管软组织灶并肝内胆管扩张,考虑左肝管胆管细胞癌可能性大;膈脚后、肝门区、腹主动脉旁多个淋巴结,可疑转移,诊断为“肝内占位查因:胆管细胞癌?”,建议手术治疗,患者当时因个人因素拒绝手术.

针刺配合火针治疗继发性闭经35例临床分析

继发性闭经是一种常见的妇科疾病,是指女性已经建立月经周期但又停止的一种现象,该病通常发生在青春期后、绝经期前.西医目前的治疗方法主要为激素的周期疗法,其副作用较大[1].本科采用针刺配合火针的方法治疗闭经并且取得了很好的疗效,现报告如下.

24例大面积脑梗死患者颅内压动态监测的临床分析

大面积脑梗死是一种严重的缺血性脑卒中,其发病后可继发严重脑水肿,导致颅内压进行性增高,是促使病情急剧恶化的主要因素[1].目前对大面积脑梗死后颅内压的动态监测少有报道,我科于2011年1月至2012年1月对24例大面积脑梗死患者实施了有创颅内压动态监测,现报告如下.

超早期显微手术治疗28例高血压基底节区脑出血临床疗效分析

高血压脑出血具有较高的病死率和致残率,脑出血后,尽快清除颅内血肿,降低颅压,加强对血肿周围脑组织的保护,是挽救生命,恢复神经功能的关键[1]864-866.高血压脑出血手术时机存在较大争议,大多数学者主张早期或超早期手术.研究表明,超早期手术可提高治愈率及生活质量,并不会增加病死率[2].我院近年对高血压基底节区脑出血患者行显微镜下超早期手术治疗28例,现总结如下.

大孔树脂法纯化疹妙喷雾膜剂醇提液的工艺研究

目的 筛选适合分离纯化疹妙喷雾膜剂组方药物醇提液中苦参碱类成分的大孔吸附树脂并确立精制纯化该提取液的佳工艺参数.方法 采用溴麝香草酚蓝比色法,在412 nm测定提取液的光密度值为指标,单因素实验考察静态下6种大孔吸附树脂D113、D152、D301、D315、NKA-9和AB-8型的吸附性能,选择佳吸附树脂型号;单因素实验考察乙醇洗脱剂浓度;L9(34)正交设计考察药液量、乙醇用量、洗脱速度等的佳工艺条件.结果 大孔树脂法纯化组方药物醇提液,NKA-9型树脂优于D113、D152、D301、D315和AB-8型树脂;洗脱剂乙醇浓度越高洗脱效果越好;佳工艺条件为醇提取药液浓度为1∶1.17(药材∶药液)时,20 mL提取液用100 g NKA-9型树脂、80％乙醇140 mL为洗脱剂,洗脱速度2 mL/min时的纯化效果好.生物碱类成分可以保留近85％(84.23％).结论 NKA-9型大孔树脂能比较完整地纯化疹妙喷雾膜剂组方药物醇提液生物碱类药效成分.

抑郁症治疗研究新进展

抑郁症患者攻击行为与应对方式、焦虑、抑郁的关系

目的 探讨抑郁症患者攻击行为与应对方式、焦虑、抑郁的关系.方法 运用攻击性问卷、特质应对方式问卷、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)等,对2010年9月至2011年10月于重庆医科大学附属第一医院精神科门诊就诊及住院部住院的首发和复发抑郁症患者80例(抑郁症组)及来自本院职工和经广告招募而得的正常对照组80例(于2010年10月至2011年11月收集)进行对比分析,并进行Spearman相关分析和回归分析研究抑郁症患者攻击行为与应对方式、焦虑、抑郁的关系.结果 ①抑郁症组愤怒、敌意、面向自我攻击的各因子分及攻击总分显著高于正常对照组(P＜0.01).②相关分析显示抑郁症组身体攻击、言语攻击、面向自我的攻击、愤怒、敌意和攻击总分均与消极应对方式呈显著正相关(r值为0.37 ～0.60,P ＜0.01);而面向自我的攻击、敌意和攻击总分与积极应对方式呈显著负相关(r值为-0.38～-0.29,P＜0.05);言语攻击、愤怒、攻击总分与HAMA、HAMD得分均呈显著正相关(r值为0.29～0.45,P＜0.05,P＜0.01).③身体攻击、敌意、面向自我的攻击分别能被消极应对方式解释各占14.5％、32.9％、35.2％;言语攻击能被消极应对方式和抑郁得分解释占21.9％;愤怒、攻击总分分别能被消极应对方式和焦虑得分解释占39.2％、45.3％.结论 抑郁症患者存在明显攻击行为,且消极应对方式对其发生可能有重要预测和促发作用.

生活事件、社会支持及生命质量与大学生自杀未遂的关系

目的 从社会层面探讨生活事件、社会支持及生命质量与大学自杀未遂之间的关系.方法 采用分层整群随机抽样方法对重庆市9 808名在校大学生进行问卷调查,了解重庆市大学生自杀未遂的发生情况以及与生活事件、社会支持和生命质量之间的关系.结果 自杀未遂的大学生有影响的负性生活事件所占比例明显多于无自杀未遂组,其中学习问题,恋爱或结婚问题,恋人或夫妻之间发生矛盾,与家庭成员发生矛盾,与其他人发生矛盾,亲友患病或去世,患急、重病或外伤方面差异具有统计学意义(P＜0.05),而其社会支持及生命质量评分均明显低于无自杀未遂组(P＜0.01).通过多因素Logistic回归分析发现心理健康状况差(OR=1.422,95％ CI1.153～1.754)、躯体健康状况差(OR=1.336,95％ CI1.087～1.641)、客观支持评分低(OR=1.020,95％ CI1.002～1.038)、主观支持评分低(OR=1.018,95％CI 1.006 ～ 1.030)、与家庭成员之间发生矛盾(OR =0.579,95％ CI0.379～0.886)、恋爱或结婚问题(OR=0.483,95％ CI0.321～0.723)及恋人或夫妻之间发生矛盾(OR=0.370,95％ CI0.257～0.534)是大学生自杀未遂的危险因素.结论 自杀未遂的大学生遭遇了更多的负性生活事件,社会支持系统差、生命质量评分低.自杀未遂的危险因素为:恋人或夫妻之间发生矛盾、恋爱或结婚问题及与家庭成员之间发生矛盾、社会支持中主观及客观支持评分低、心理健康状况及躯体健康状况差.

不同程度抑郁个体反事实思维性别差异的研究

目的 探讨不同程度抑郁个体反事实思维的性别差异.方法 采用自我报告法、故事脚本法和反事实思维推理测验(counterfactual inference test,CIT)对正常对照组(n=60)、抑郁状态组(n=60)、抑郁患者组(n=60)进行测试(正常对照组、抑郁状态组根据BDI、SDS、HAMD量表得分筛选入组,抑郁患者组根据CCMD-3临床诊断入组),完成自发反事实思维、诱发反事实思维和CIT 3个试验任务,对自发和诱发反事实思维的数量、合理性及CIT得分进行评价.结果 ①在反事实思维数量方面,抑郁状态组中负性事件产生的自发反事实思维在数量上女性显著多于男性(P＜0.05);②在反事实思维合理性方面,随着抑郁程度的增加,被试合理性逐渐降低.反事实思维合理性在性别上也无显著差异(P＞0.05);③在CIT得分方面,随着被试抑郁程度的增加,CIT得分逐渐降低.CIT得分在性别上也无显著差异(P＞0.05).结论 抑郁程度与反事实思维合理性和诱发反事实思维推理呈反比,抑郁状态的女性对负性事件产生的自发反事实思维数量多于男性.

重复经颅磁刺激联合改良电休克治疗对抑郁症状的疗效及对记忆功能的影响

目的 探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)联合改良型无抽搐电休克治疗(modified electroconvulsive therapy,MECT)及单纯MECT治疗对抑郁症患者的疗效及其对记忆功能的影响.方法 将120例抑郁症患者按随机、双盲的原则分成联合治疗组(实施rTMS联合MECT治疗)和单纯MECT治疗组(实施MECT治疗和rTMS伪刺激),每组60例.疗效评定采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD),记忆功能评定采用修订韦氏记忆测验(WMS-RC)、行为记忆测验第2版(RBMTⅡ),3个量表分别于第1次MECT治疗开始前及第24次rTMS或伪刺激结束后的治疗终点进行评定.结果 两组治疗终点的HAMD评分较治疗前均明显下降(P＜0.05),联合治疗组治疗终点评分较单纯MECT治疗组明显降低(P＜0.05);两组治疗终点WMS-RC评分中积累、背数、图片、再认、理解和联想评分均较治疗前明显降低(P＜0.05),联合治疗组治疗终点评分高于单纯MECT治疗组(P＜0.05);两组治疗终点RBMTⅡ评分中回忆姓名、回忆被藏物品、图片再认、故事即刻回忆、故事延迟回忆、脸部再认、路线即刻回忆、路线延迟回忆、信件即刻回忆、信件延迟回忆评分均较治疗前明显降低(P＜0.05),联合治疗组治疗终点评分高于单纯治疗组(P＜0.05).结论 rTMS联合MECT治疗与单纯MECT治疗疗效相当,但对抑郁症患者记忆功能影响比单纯MECT治疗小.

综合医院门诊首发抑郁患者服药早期依从性影响因素分析

目的 探讨影响首发抑郁患者服药早期依从性的影响因素.方法 选取2011年3月到2013年3月之间就诊于本科心理门诊的150例首次发作的抑郁症患者,采用问卷调查方法,问卷内容包括患者一般资料、患者对疾病的认识及治疗的态度、治疗依从性评价、领悟社会支持量表(PSSS)、卡特尔16种人格因素量表(16PF).采用x2检验、t检验及多元Logistic回归分析,探讨上述各因素与服药第1个月依从性的相关性.结果 在治疗后第1个月,依从性好组与依从性差组在家庭月收入、诊断认可度、病耻感、对疾病的了解程度、担心药物的副作用程度、PSSS评分及16PF人格测试中稳定性、有恒性、敏感性、忧虑性评分方面差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);将患者服药依从情况作为因变量,将以上项目作为自变量进行Logistic回归,结果显示社会支持、家庭月收入、病耻感、担心药物的副作用程度、对疾病的了解程度、对诊断的认可度、稳定性、敏感性、忧虑性进入回归方程,各变量比值比分别为9.523、6.088、5.368、4.237、3.213、2.519、2.246、0.532、0.207.结论 影响抑郁症患者服药依从性的重要因素很多,家庭月收入、诊断认可度、病耻感、对疾病的了解程度、担心药物的副作用程度、社会支持及人格可以预测患者的依从性.

全病程管理模式对抑郁症患者依从性及疗效的影响

目的 探讨全病程管理模式对抑郁症患者依从性及疗效的影响.方法 采用前瞻性平行对照研究,将2011年1月至2013年3月在西南医院临床心理科门诊就诊的符合DSM-Ⅳ抑郁发作诊断标准100例首发抑郁症患者按随机数字表法分配50例患者接受全病程管理服务(全病程管理组),50例进行门诊常规治疗(对照组),所有患者跟踪随访6个月,对两组患者治疗前基线及治疗后1、3、6个月进行依从性及17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD)的评定.结果 治疗后第1个月两组患者依从性无显著差异(P＞0.05),在治疗后第3、6个月全病程管理组依从性均显著高于对照组(P ＜0.05,P＜0.01);对照组患者治疗后第1、3个月HAMD评分明显低于治疗前,但治疗后第6个月HAMD评分与治疗前比较差异不显著(P＞0.05);而全病程管理组HAMD评分在治疗后1、3、6个月均显著低于治疗前(P＜0.05),且评分随治疗时间延续呈递减趋势;全病程管理组与对照组在治疗后第1个月HAMD评分比较无显著差异(P＞0.05),而在治疗后3、6个月全病程管理组HAMD评分均显著低于对照组(P＜0.05).结论 全病程管理模式能提高抑郁症患者的依从性及疗效.