第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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高原心脏病研究对象血液中促血管内皮生长因子及平滑肌细胞生长因子的表达及意义
目的 探讨高原心脏病研究对象血液中促血管内皮生长因子及平滑肌细胞生长因子的表达情况及其意义.方法 对42例高原心脏病研究对象和40例高原健康者血液中促血管内皮生长因子[肝细胞生长因子(hepatocyte growthfactor,HGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)]及促血管平滑肌细胞生长因子[内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、血小板源性生长因子(platelet-derived growthfactor,PDGF)、成纤维母细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)]血液中的表达情况及其超声心动图情况进行检测.结果 通过对两组研究对象血液中的促血管内皮生长因子及促血管平滑肌细胞生长因子比较发现,高原心脏病组HGF、VEGF、bFGF及ET-1、PDGF、FGF血液中的表达均显著高于对照组(P ＜0.05,P＜0.01).高原心脏病研究对象均存在不同程度的右心改变及肺动脉高压,其右房(上下径,横径)、右室流出道、右室前后径、右室前壁厚度、肺动脉内径、肺动脉收缩压等测值均显著高于对照组(P＜0.01).且高原心脏病研究对象HGF、VEGF、bFGF及ET-1、PDGF、FGF与其肺动脉收缩压、舒张压、平均压呈显著的正相关.结论 高原心脏病研究对象血液中促血管内皮及平滑肌细胞生长因子的表达较高原健康者明显增强,与缺氧性肺动脉高压的形成及高原心脏病密切相关.
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GPR48与TLR4在大鼠激素性股骨头坏死组织中的表达及其相关性分析
目的 探讨G蛋白偶联受体48(G protein coupled receptor 48,GPR48)和Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)在大鼠激素性股骨头坏死组织中的表达变化及其相关性,阐明GPR48与TLR4在激素性股骨头坏死进程中的调控作用.方法 健康SD大鼠68只,按随机数字表法分为实验组(44只,肌注地塞米松10 mg/kg,每周1次)和对照组(24只,注射等体积生理盐水代替激素),于2、6、8、10周时分别获取实验组11只和对照组6只大鼠的双侧股骨头,进行组织学观察(HE、Masson三色染色)、免疫组化及RT-PCR检测.结果 ①HE染色显示,实验组2周可见骨小梁微小断裂,10周骨小梁断裂范围扩大,形成大量空骨陷窝;Masson三色染色及胶原含量分析显示,与对照组相比,实验组单位面积内胶原含量从第6周开始下降,第10周明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05),实验组组内各个时间点的比较差异有统计学意义(P＜0.05),胶原含量呈逐渐下降趋势;②免疫组织化学染色分析:实验组6、8、10周各个时间点GPR48表达的累积光密度(5.87 ±0.53)、(4.82±0.52)、(3.94±0.49)均低于对照组(P＜0.05),并呈逐渐降低趋势;实验组6、8、10周各个时间点TLR4表达的累积光密度(6.93±0.58)、(8.10±0.46)、(8.70±0.95)均高于对照组(P＜0.05),并呈逐渐上升趋势;实验组不同时间点GPR48与TLR4表达呈负相关(r=-0.821,P＜0.05);③RT-PCR检测:GPR48 mRNA表达在实验组内各个时间点之间呈逐渐降低趋势,而TLR4 mRNA表达则呈逐渐上升趋势;实验组不同时间点GPR48与TLR4 mR-NA表达呈负相关(r=-0.791,P＜0.05).结论 大鼠激素性股骨头坏死发展进程中GPR48和TLR4的表达呈负相关性,共同介导坏死过程中的炎症免疫反应.
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阿法替尼与PF-04691502单用及联合对H1975细胞体外抗肿瘤作用研究
目的 研究Pan-HER不可逆抑制剂阿法替尼(Afatinib)和磷脂酰基醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)α抑制剂PF-04691502 (PF)单用及联合对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂耐药的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株H1975的体外抗肿瘤作用.方法 通过MTS法、细胞划痕愈合实验、流式细胞术检测细胞周期和凋亡分析Afatinib和PF单药及联合对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975增殖、迁移等的影响.结果 Afatinib和PF单用对H1975细胞增殖有明显抑制作用,且抑制作用随浓度增加而加强;Afatinib和PF联合时对H1975细胞增殖、迁移均有明显协同抑制作用;Afatinib和PF单药和联合作用均主要使细胞阻滞在G1期(P＜0.05);Afatinib和PF单用时较对照组的细胞凋亡率增加,且当两者联合作用时凋亡率增加更显著(P＜0.05).结论 Pan-HER不可逆抑制剂Afatinib和PI3Kα抑制剂PF-04691502 (PF)单用对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975有较强抑制作用,且当Afatinib和PF联合时对非小细胞肺癌细胞株H1975有协同抑制作用.
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LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响
目的 探讨LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响.方法 利用RT-PCR检测人肾透明细胞癌细胞系786-O和人胚肾细胞系HEK-293中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因1(largetumor suppressor gene 1,LATS1) mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(yes-associated protein,YAP) mRNA的表达水平,用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequence-PCR,BSP)对LATS1低表达细胞786-O进行甲基化分析,5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,DAC)处理786-O和HEK-293后,用RT-PCR、Western blot检测各组细胞LATS1和YAP的mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期,CCK-8检测各组细胞增殖抑制情况.结果 786-O较HEK-293 LATS1mRNA表达水平显著降低(P＜0.05),YAP mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),BSP显示LATS1在人肾癌细胞系786-O中高度甲基化;DAC处理786-O后,LATS1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),YAP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),周期停滞在G0/G1期(P＜0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P＜0.05)、细胞凋亡显著增加(P＜0.05),而HEK-293组均无明显变化(P＞0.05).结论 LATS1基因去甲基化后下调YAP基因表达,抑制786-O细胞增殖并诱导其凋亡.LATS1基因甲基化在肾癌发生中起重要作用.
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Kit信号通路调控成年小鼠Cajal间质细胞的表型改变
目的 通过构建阻断Kit信号的动物模型,观察结肠壁内Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)数量与网络的变化,探讨调控ICC可塑性的分子机制.方法 选取45只4周龄健康BALB/c小鼠,体质量18 ～20 g,酪氨酸激酶特异性抑制剂伊马替尼(imatinib,STI571)灌胃制作动物模型,全层铺片Kit/CD44双重荧光标记观察造模后0、8、16 d及停药8、16 d,各亚型Kit+和CD44+ ICC数量和形态的变化,Western blot和实时定量荧光RT-PCR分别从蛋白水平和基因水平检测Kit和CD44量的变化.结果 ①以近端结肠为例,Imatinib可致结肠壁内Kit+ ICC-IM、ICC-MY数量明显减少,用药16 d其数量下降至对照组的50％左右[ICC-MY:(136.17±3.56) vs (66.74±1.47),P＜0.05],停药后逐渐恢复正常.②ICC-SM的数量及网络在整个实验过程中没有明显变化.③用药后,Kit蛋白水平和基因水平均明显下降,停药后恢复正常.④用药后各亚型CD44+ ICC的数量及网络没有变化,且CD44在蛋白和基因水平均没有变化.结论 Kit信号通路可调节结肠ICC的可塑性.抑制Kit信号通路后,ICC并没有消失,只是丢失了其Kit表型.
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不同管径钛纳米管对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响
目的 研究不同管径钛纳米管表面结构对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)粘附、增殖及成骨向分化的影响.方法 分离并扩增rMSCs,成骨向诱导分化及流式细胞鉴定;阳极氧化法分别制备管径30、70、100 nm的TiO2纳米管,扫描电镜观察表面形貌、接触角测试材料表面亲疏水性;MTT法检测细胞在材料表面粘附及增殖情况,激光共聚焦显微镜观察细胞在材料表面形貌.评价细胞在纯钛,管径30、70、100 nm的TiO2纳米管表面成骨向分化过程中碱性磷酸酶活性变化特征及矿化情况.Real-time PCR检测诱导14 d后Runx2及OSX基因表达情况.结果 分离获得的rMSCs具有成骨向分化的能力,CD29阳性细胞为99.65％;扫描电镜观察各组材料表面管径均达到设计要求;管径为70 nm的TiO2纳米管材料表面亲水性较好(P＜0.05);MTT结果显示70 nm组rMSCs的粘附、增殖均较其他组明显增高(P＜0.05);30 nm组在成骨诱导7d后,碱性磷酸酶活性均高于其他组(P＜0.05).30 nm组在成骨诱导21 d后表面矿化高于其他组(P＜0.05).30 nm组在成骨诱导14 d后Runx2及OSX基因表达高于其余组(P＜0.05).结论 与光滑面纯钛相比,不同管径的TiO2纳米管对rMSCs的作用各不相同,rMSCs在70nm表面增殖能力和粘附性较好,但在30 nm表面的成骨向分化能力较强.
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G蛋白偶联雌激素受体1、表皮生长因子受体和趋化因子受体1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
目的 探讨G蛋白偶联雌激素受体1 (G protein-coupled estrogen receptor1,GPER1)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和趋化因子受体1(chemokine receptor1,CXCR1)在甲状腺乳头状癌(papillarythyroid carcinoma,PTC)组织中的表达及意义.方法 甲状腺乳头状癌68例、结节性甲状腺肿42例,采用免疫组织化学S-P法检测GPER1、EGFR和CXCR1的表达,分析其与患者临床病理特征的关系,以及三者间表达的相关性.结果 在PTC组织中,GPER1、EGFR和CXCR1的表达阳性率分别为76.5％、66.2％、64.7％,明显高于结节性甲状腺肿组的21.4％、16.7％和11.9％(P＜0.01);GPER1、EGFR和CXCR1在PTC中的表达与颈部淋巴结转移相关(P＜0.05),而与其他临床病理特征(年龄、性别、肿瘤大小及TNM分期)无相关性(P＞0.05);在PTC及PTC淋巴转移癌组织中,GPER1与EGFR的表达呈显著正相关(r=0.262,P=0.031;r=0.542,P=0.002)、GPER1与CXCR1的表达也呈显著正相关(r=0.276,P=0.025;r=0.483,P=0.006).结论 GPER1、EGFR和CXCR1的两两共表达与PTC的发生、发展密切相关,三者间可能存在一种相互作用.
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MH370航班失联事件不同阶段信息传播对大众认知及心理期待的影响
目的 探讨马来西亚航空公司MH370航班失联事件(以下简称“马航事件”)中,事件进程的不同阶段信息传播对大众认知和心理期待的影响.方法 采用自编《马航MH370航班失联事件大众调查问卷》,通过微博、微信、百度贴吧等网络社交平台发布并传播,利用网络在线数据收集平台共收到有效问卷810份,使用SPSS 18.0对数据结果进行单因素分析和t检验.结果 ①基本事实的认知:不同阶段民众对基本事实的认可程度差异不显著(P＞0.05).②事件线索的认知:不同阶段民众对大众传媒线索和谣言的认可度差异显著(P＜0.01),对大众传媒线索在事件中期认可度显著低于早期和后期(P＜0.01),对谣言中期显著高于早期(P＜0.05).③事件性质的认知:民众在不同阶段对非人为因素的事件性质类型认可度差异显著(P＜0.01),对人为因素的性质判断在不同阶段差异不显著(P＞0.05).④心理期待的认知:正性心理期待在不同阶段差异显著(P＜0.01),在事件中期达到高.结论 民众在事件进展的不同阶段对事件线索和事件性质的认知存在不同程度的差异.大量不确定线索构成的信息环境会使民众认知判断趋向于保守、谨慎和更多的期待空间.
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γ-氨基丁酸通过其A型受体参与小鼠胎盘血管的形成研究
目的 探讨不同浓度的γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)A型受体激动剂/抑制剂对小鼠胎盘形成的影响.方法 免疫组化检测孕鼠中晚期胎盘中GABA的A型受体(GABAAR)π亚基(GABRP)的表达规律.将昆明孕鼠分为8组,每组3只,处理组从妊娠第7 ～ 13天分别腹腔注射0.0095、0.095 mg/kg及0.95 mg/kg A型受体激动剂和0.018 4、0.184 mg/kg及1.84 mg/kg的A型受体抑制剂溶液,对照组注射生理盐水,空白组不作任何处理.第14天时称量各组胎盘和胚胎,HE染色观察胎盘形态学变化,检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达情况.结果 GABRP强表达于孕鼠第10～17天的母胎蜕膜区;与对照组比较,0.95 mg/kg GABAAR激动剂组蜕膜区血管数量和胎盘迷路区胎儿有核红细胞的数量显著增加(P＜0.05),同时迷路区PCNA和VEGF的表达显著增加(P＜0.05);1.84 mg/kg GABAAR抑制剂组胎盘和胚胎的质量显著降低(P＜0.05),同时迷路区PCNA和VEGF表达均降低.结论 GABA可能通过与其A型受体结合参与调节小鼠胎盘增殖和血管的生成过程.
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108例汉族人群let-7a基因调控区多态性与糖尿病肾病的相关性分析
目的 探寻循环miRNA let-7a与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的关系,分析并评估let-7a调控区域单核甘酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)对DN疾病的易感性.方法 Real-time PCR检测病例组及对照组中let-7a的表达水平.生物信息学方法预测并筛选3个位于let-7a前体(let-7a-2)启动子调控区域标签SNP(Tag SNP),采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(RFLP-PCR)法对108例糖尿病肾病(DN)、104例糖尿病(DM)患者及62例健康人对照(CON)3个SNP进行基因分型.结果 Real-time PCR结果显示let-7a在DN、DM、CON三组中表达水平有显著差异(P＜0.05).let-7a-2基因调控区域rs1143770多态位点的CT杂合子基因型在DN、DM、CON三组间有显著差异(P＜0.05),且在DM组和DN组CT +TT两基因型均依次较CON组显著升高(P=0.049;P =0.001).结论 miRNA let-7a可能参与调控DN疾病,其启动子调控区rs1143770多态与中国汉族人群糖尿病肾病相关,可能是个潜在的功能位点.
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PI3K/Akt/FoxO3a信号通路对人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路.方法 通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测FoxO3a在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,实时荧光定量PCR检测FoxO3a的mRNA表达水平,MTT法检测鼻咽癌细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测鼻咽癌细胞的凋亡率.结果 通过使用PI3K特异性抑制剂LY294002,FoxO3a在实验组人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞中的蛋白和mRNA表达水平均高于对照组(P＜0.05),且在CNE-1 (P =0.004)、CNE-2(P =0.001)细胞核内的表达量高于对照组,FoxO3a的上调可抑制人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的增殖(P＜0.05),促进其凋亡(P＜0.01).结论 通过抑制PI3K/Akt信号通路的活性可上调人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞FoxO3a基因的表达,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与其对FoxO3a的调控有关.
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慢性间断性缺氧对大鼠脑缺血再灌注NF-κB及其靶基因TNF-α表达的影响
目的 观察大鼠脑皮质炎症因子[核转录因子κB(NF-κB p65)]及其靶基因TNF-α的表达,探讨慢性间断缺氧对脑缺血再灌注后炎症反应影响.方法 将SD大鼠24只按随机数字表法分为空白对照组、慢性间断缺氧组、线栓组、慢性间断缺氧+线栓组,每组6只.建立SD大鼠慢性间断缺氧联合局灶性脑缺血再灌注模型,免疫组化染色检测脑皮质中NF-κB p65、TNF-α的表达.结果 与空白对照组比较.CIH、CIR、CIH+ CIR均可促使NF-κB p65及TNF-α的表达增多,差异存在统计学意义(P＜0.05);CIH与CIR存在交互作用(P＜0.05),CIH+ CIR与CIH及CIR比较可促使NF-κBp65及TNF-α表达明显增多,差异存在统计学意义(P＜0.05).大鼠脑皮质NF-κB p65与TNF-α呈正相关(r=0.90,P＜0.01).结论 慢性间断性缺氧可使大鼠脑缺血再灌注NF-κB p65及其靶基因TNF-α的表达显著增多.
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低氧诱导因子-1α对骨形态发生蛋白2诱导的干细胞成软骨、成骨分化的影响
目的 探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1 α在干细胞成骨、软骨分化中的作用.方法 构建相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1 α、AdGFP,单独或共同感染干细胞,Western blot法检测成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达,Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1 A1和ALP mRNA表达,Alcian blue、ALP及Alizarin red S染色检测软骨细胞外基质及骨基质钙盐沉积情况.进行干细胞裸鼠皮下移植,观察不同处理组形成骨块的组织结构情况,探讨HIF-1α对BMP2诱导干细胞成骨、软骨分化的影响.结果 诱导分化后第1、3天,BMP2+ HIF-1α组Sox9蛋白表达明显高于BMP2单独处理组,而BMP2+ HIF-1α组Runx2蛋白表达明显低于BMP2单独处理组.诱导分化后第7、9天,BMP2+ HIF-1α组COL2A1、aggrecan mRNA相对表达明显高于BMP2单独处理组(P＜0.05),而BMP2+ HIF-1α组COL1 A1、ALP mRNA相对表达明显低于BMP2单独处理组(P＜0.05).Alcianblue染色发现BMP2+ HIF-1α组软骨细胞外基质分泌多于BMP2单独处理组,染色更深;ALP染色发现BMP2+ HIF-1 α组ALP的活性弱于BMP2单独处理组;茜素红染色发现BMP2+ HIF-1α组较BMP2单独处理组骨基质钙盐沉积更少;体内试验组织学观察见BMP2+ HIF-1α组软骨成分更多,骨化不明显,BMP2单独处理组软骨成分少,软骨内骨化更明显.结论 HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化,抑制了成骨分化及软骨内骨化,维持了软骨分化表型.
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不同粒径的阳离子阿奇霉素泡囊体内生物等效性研究
目的 比较不同粒径的阳离子阿奇霉素囊泡及阿奇霉素(azithromycin,AM)原料药在大鼠体内的药代动力学参数,并计算其相对生物利用度.方法 大鼠单剂量口服小粒径、大粒径阿奇霉素囊泡及阿奇霉素原料药后,采用HPLC法测定药物浓度,并用DAS2.1.1软件计算药代动力学参数并以统计矩参数Cm、AUC0-t和tmax,通过双向单侧t检验和非参数检验判断3种制剂的生物等效性.结果 小粒径阿奇霉素泡囊(AMNSS)和大粒径阿奇霉素泡囊(AMNSL)以及原料药AM体内的Cmax分别为18.73、9.2 mg/L和10.31 mg/L;tmax分别为6、4h和2 h;AUC0-t分别为371.79、160.41 mg·h/L和136.09 mg·h/L;AUC0-∞分别为454.92、263.16 mg·h/L和158.50 mg ·h/L;小粒径阿奇霉素泡囊和大粒径阿奇霉素泡囊相对生物利用度为273.19％、117.87％;经方差分析、双向单侧t检验和非参数检验,小粒径阿奇霉素泡囊和阿奇霉素、小粒径阿奇霉素泡囊和大粒径阿奇霉素泡囊体内有统计学差异(P＜0.05)、而大粒径阿奇霉素泡囊和阿奇霉素体内无统计学差异(P＞0.05).结论 小粒径阿奇霉素泡囊和阿奇霉素、小粒径阿奇霉素泡囊和大粒径阿奇霉素泡囊体内生物不等效,而大粒径阿奇霉素泡囊和阿奇霉素体内生物等效.
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恒磁场对培养的骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制
目的 观察不同强度的恒磁场作用不同时间对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向成骨细胞分化的影响及机制.方法 密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞进行体外培养.以3～4代的MSCs为靶细胞,对其进行诱导分化和施以恒磁场处理.磁场暴露强度分别为0、0.5、1.5、2、3 mT.以IFCC推荐法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性表达;茜素红染色观察钙结节的数量和大小;放免法检测骨钙素(osteocalcin,OCN)和Ⅰ型胶原的分泌;Western blot分析MAPK P38信号分子的磷酸化,并探讨其特异性阻断剂对恒磁场调控MSCs成骨分化的影响.结果 ①恒磁场明显促进Ⅰ型胶原和ALP的活性表达,增加OCN的分泌及钙结节的形成,其中1.5～2 mT磁场强度促MSCs成骨分化作用为明显;②恒磁场促进磷酸化MAPK P38的表达;③加入P38信号通路SB253580明显抑制恒磁场的促成骨效应.结论 磁场促进MSCs成骨分化,其机制与P38信号分子的激活有关.
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雷帕霉素诱导细胞自噬促进乙型肝炎病毒的复制
目的 研究雷帕霉素诱导细胞产生自噬对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响.方法 通过雷帕霉素诱导人肝癌细胞HepG2 2.15产生自噬,荧光显微镜和透射电镜下观察自噬小体形成,Western blot检测诱导后HepG2 2.15细胞自噬标志蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达水平;荧光定量PCR检测HBV mRNA水平;加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),Western blot检测自噬抑制后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的表达,Southern blot检测HBV DNA水平,验证HBV复制情况.结果 雷帕霉素诱导后,HepG2 2.15细胞在荧光显微镜和透射电镜下观察到自噬小体的形成,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著上升(P＜0.05);细胞诱导自噬后HBsAg和HBVmRNA显著增加(P＜0.05),而加入自噬抑制剂3-MA后,HBsAg和HBV DNA均显著减少(P＜0.05).结论 雷帕霉素可能通过诱导细胞自噬促进HBV的复制.
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华蟾素对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响
目的 观察华蟾素对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 采用巯基罗丹明B(SRB)法检测华蟾素对SH-SY5Y细胞的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光探针二乙酸二氯荧光素盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;罗丹明123(Rhodamine 123)染色法检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt-C)的表达;ELISA检测Caspase-3和Caspase-9酶活性.结果 华蟾素对SH-SY5Y细胞增殖具有明显抑制作用,且表现出剂量和时间依赖性.流式细胞术检测对照组及各浓度组凋亡率分别为(3.12±0.91)％、(17.65±4.28)％、(29.14±6.72)％、(50.01±9.26)％,与对照组比较,华蟾素组的凋亡率均显著性增高(P＜0.01);华蟾素能够呈浓度依赖的增加细胞内ROS水平(P＜0.01),降低线粒体膜电位(P＜0.01),增加胞质中Cyt-C的表达(P＜0.01),同时增加Caspase-3和Caspase-9酶活性.结论 华蟾素能够通过诱导SH-SY5Y细胞产生凋亡而发挥增殖抑制作用,其作用机制可能与激发线粒体凋亡途径有关.
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抗趋化因子配体20抗体对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应的抑制作用
目的 研究趋化因子配体20 (CC chemokine ligand 20,CCL20)在哮喘小鼠肺组织内的表达,观察抗小鼠CCL20单克隆抗体对哮喘小鼠肺部炎症和气道高反应的抑制作用.方法 6～8周龄雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为4组:哮喘组、正常对照组、CCL20单克隆抗体治疗组(单抗组)和治疗对照组,每组8只.哮喘组予卵蛋白(ovalbu-min,OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型,单抗组和治疗对照组致敏和激发同哮喘组,但自第1次激发起,雾化前1h分别腹腔注射给予抗小鼠CCL20单克隆抗体或磷酸盐缓冲溶液(PBS),连续5d.正常对照组用PBS代替OVA进行致敏和激发.末次激发后24h用无创肺功能体描仪行小鼠气道反应性检测,HE染色观察肺组织病理炎症及评分,免疫组化及图像分析和实时荧光定量PCR分别测定小鼠肺组织CCL20的蛋白含量和基因表达水平.结果 哮喘组小鼠肺组织炎症病理评分、气道高反应、肺组织CCL20 mRNA相对表达量及免疫组化CCL20平均光密度值均显著高于正常对照组.与哮喘组相比,单抗组小鼠肺部细胞浸润减轻(P＜0.05),肺功能(雾化乙酰甲胆碱浓度为25 ～ 50 mg/mL时)Penh降低(P＜0.05),肺组织CCL20平均光密度值显著降低(P＜0.01),而CCL20 mRNA表达无影响.结论 CCL20单克隆抗体可改善OVA诱发的小鼠哮喘炎症和气道高反应,其抑制作用可能与抗鼠CCL20单抗阻断部分CCL20活性有关.
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利用精子特异性抗体SPAG8分离混合细胞体系中的精子
目的 利用精子特异性抗体SPAG8(Sperm associated antigen 8)结合免疫磁珠技术分离混合细胞系中的精子,建立混合斑中精子细胞分离的新方法.方法 制备含有精子103、104、105/mL与阴道上皮细胞104/mL的3种混合悬液各10例,各样本制作混悬液及模拟混合斑各2份,分别以生物素标记的SPAG8单克隆抗体孵育特异结合混合悬液及混合斑中的精子,然后用亲和素包被的免疫磁珠通过生物素-亲和素复合体捕获分离精子细胞,提取精子DNA进行STR复合扩增和DNA分型检测,同时以差异裂解法检测混悬液及混合斑中的精子进行方法比较.结果 免疫磁珠-亲和素-生物素-抗体复合物可分离混合细胞体系中的精子,当混合悬液内的精子数量达到103/mL时,90％的样本可得到13个STR基因座的单一男性分型,精子数量达到104/mL时,90％的样本均可得到16个STR基因座的单一男性分型;含有104/mL以上数量精子的混悬液制作的混合斑,单一男性13个STR基因座的正确分型率达80％以上,混悬液及混合斑的免疫磁珠法有效STR检出率高于传统的差异裂解法.结论 本方法简便快捷,可作为混合斑法医学检验的有效补充手段.
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Pentacam与SL-OCT测量对原发性闭角型青光眼患者激光周边虹膜切开手术前后中央前房深度的相关性分析
目的 评估Pentacam与SL-OCT测量原发性闭角型青光眼(primary angle-closure glaucoma,PACG)应用激光周边虹膜切开术(laser peripheral iridoplasty,LPI)手术前后中央前房深度(center anterior chamber depth,CACD)的差异性、相关性和一致性.方法 在我院眼科门诊筛查PACG患者中符合行LPI术的病例共58例(58眼),应用眼前节分析系统Pentacam和裂隙灯光学相干断层成像术(slit-lamp-adapted optical coherence tomography,SL-OCT)分别对PACG患者进行CACD测量,分别记录LPI术前,术后1d、1周、1个月参数.结果 Pentacam测得PACG患者LPI术前,术后1d、1周及1个月的CACD分别为(1.60±0.31)、(1.65±0.28)、(1.62 ±0.30)、(1.61±0.31)mm.SL-OCT测量LPI术前,术后1d、1周及1个月的CACD分别为(1.70 ±0.30)、(1.73±0.30)、(1.71±0.31)、(1.72±0.31)mm.2种测量方式LPI术前与术后各时间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);而2种测量方式之间相比较,术前及术后相同时间点差异均具有统计学意义(P＜0.01).Pentacam与SL-OCT测量PACG患者LPI术前,术后1d、1周及1个月的CACD值均存在显著相关关系(r =0.929,P＜0.001;r=0.962,P＜0.001;r=0.961,P＜0.001;r=0.951,P＜0.001).通过Bland-Ahman分析方法,Pentacam与SL-OCT测量LPI术前,术后1d、1周及1个月CACD差异的95％置信界限分别为-0.33 ～0.12、-0.29～0.08、-0.25～0.08、-0.26 ～0.07 mm.结论 Pentacam与SL-OCT测量PACG患者LPI术后CACD具有高度一致性和相关性,二者均可作为青光眼临床筛查的辅助检查方式,为患者提供了有效的无创且可量化的便捷检查.
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体外磁场定向迁移的间充质干细胞对脊髓损伤的治疗和GAP-43的表达
目的 探讨体外磁场定向迁移尾静脉注射的SPIO标记的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠脊髓损伤治疗的影响以及对脊髓中生长相关蛋白-43(growth-associated protein,GAP-43)表达的影响.方法 体外培养SD大鼠BMSCs,流式细胞仪检测其免疫表型,超顺磁氧化铁颗粒(superparamagetic iron oxieds,SPIO)标记BMSCs,普鲁士蓝染色测定SPIO标记率,台盼蓝染色检测标记细胞存活率,CCK-8检测标记细胞分裂增殖能力,West-ern blot检测标记细胞干细胞标记物Nestin及GFAP表达.建立大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,尾静脉注射移植细胞,对细胞移植后大鼠进行BBB评分.普鲁士蓝染色观察脊髓组织内标记细胞,TTC染色观察脊髓缺血损伤面积,Western blot检测损伤脊髓内GAP-43表达情况.结果 原代BMSCs体外能成功分离、培养、传代,且流式细胞仪检测表达间充质干细胞标记物不表达造血干细胞标记物.普鲁士蓝染色显示SPIO标记率接近100％.台盼蓝染色显示标记细胞生存率与对照组无差异(P＞0.05).CCK-8检测磁场下标记细胞增殖活性不受影响(P＞0.05).Westem blot检测磁场下标记细胞表达Nestin及GFAP无差异,分化活性不受影响(P＞0.05).磁铁组大鼠BBB评分明显优于对照组(P＜0.05).普鲁士蓝染色观察磁铁组脊髓组织中BMSCs明显多于无磁铁组.TTC染色显示磁铁组缺血面积小于无磁铁组(P＜0.05).Western blot检测脊髓组织中同一时间点GAP-43表达,磁场组明显大于对照组及无磁场组(P＜0.05).结论 外置磁场可以定向更多SPIO标记的BMSCs到达脊髓损伤处,使其更好地发挥修复作用且上调GAP-43的表达,利于脊髓损伤的恢复.
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前列腺胚胎性横纹肌肉瘤护理体会
1临床资料患者,男性,19岁,因1个月前无明显诱因出现尿潴留到当地医院就诊,经MRI检查提示可能为前列腺恶性肿瘤.在院外自行口服中药无明显好转后来我院就诊,于2011年4月18日收入我科,入院后查前列腺特异性抗原(prostatic specific antigen,PSA)正常,CT示:前列腺区一巨大肿物,密度不均,强化不明显.MRI示:前列腺明显增大,边界欠清晰,膀胱被轻度向前挤压移位.超声引导下活检提示前列腺软组织来源小细胞恶性肿瘤,随后行腹腔镜前列腺癌根治性切除术+回肠膀胱+腹会阴联合直肠根治术.术后病检:前列腺小细胞恶性肿瘤,免疫组化提示胚胎性横纹肌肉瘤.术后伤口恢复后辅以放化疗,2012年9月23日因骶骨、腹腔淋巴结、后颈、腹壁、背部皮下等多处继发性肿瘤死亡.
关键词： 前列腺胚胎性横纹肌肉瘤 护理 -
主动脉夹层术后急性肾损伤行肾脏替代治疗1例
1临床资料患者,男性,69岁,因“突发胸痛1d”于2014年2月27日入院.患者入院前1d无明显诱因出现剧烈胸痛,为持续性撕裂样疼痛,并向腹部及下肢放射,出现下肢麻木,运动障碍,至当地医院就诊,诊断为“主动脉夹层”,患者为求进一步治疗转入我院.入院查体:体温36.6℃,呼吸20/min,血压142/80 mmHg,心率88/min,神志清楚,双肺呼吸音清,心律齐,双下肢无水肿,大小便如常.行CT检查示:胸腹主动脉夹层,破口位于升主动脉,腹腔干及肠系膜上动脉起始部重度狭窄,右肾萎缩,右肾动脉细小.2月28日查血肌酐199.4 μmo]/L,尿素16.9 mmol/L,尿蛋白(++).既往有高血压、痛风性肾病史.诊断:①主动
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成功救治恶性高热1例
恶性高热(malignant hyperthermia,MH)是目前所知的唯一可由常规麻醉用药引起围术期死亡的遗传性疾病.男性发病多于女性[1],MH临床极为罕见、病死率高.近期我科成功抢救1例,报告如下.1临床资料患者,男性,25岁,体质量47 kg,ASA分级Ⅰ级.因特发性脊柱侧弯拟行经后路脊柱侧弯矫形术,术前检查血常规、肝肾功能、凝血功能及心肌酶均无明显异常.入室无创血压112/72 mmHg,心率(HR) 88/min,脉搏血氧饱和度(SpO2) 100％,体温36.5℃.
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雷诺病致术中氧饱和度监测异常1例
雷诺病即雷诺综合征,又称肢端动脉痉挛症,一般以上肢较重,偶见于下肢[1].我院2012年4月进行了1例雷诺病患者的手术,报告如下.1临床资料患者,女性,51岁,体质量60 kg,因直肠癌入院拟行腹腔镜下直肠癌根治术.术前检查血常规、肝肾功能、凝血功能及心肌酶、心电图、胸片均无明显异常.平素体健.入室无创血压133/65 mmHg,心率(HR) 76/min,脉搏血氧饱和度(SpO2)98％,体温36.1℃.行腰硬联合穿刺,成功后注入0.375％布比卡因葡萄糖液3 mL,并在硬膜外置管留备术后镇痛.
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TACE治疗不可切除型肝母细胞瘤早期不良反应事件的回顾性分析
目的 探讨经导管肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗儿童不可切除型肝母细胞瘤早期不良反应事件的变化规律及临床意义.方法 观察14例不可切除型肝母细胞瘤患儿行TACE治疗前后血清酶学、血常规指标的变化.结果 TACE治疗前后外周血中白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)无显著性变化(P＞0.05),不良反应事件较少,等级较低;碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)水平在TACE治疗前后各时间点差异无统计学意义;TACE治疗后3、5d谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平较治疗前显著升高(P＜0.05),ALT、AST不良反应事件增多.TACE治疗后7dALT、AST、LDH水平与治疗前差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TACE治疗儿童不可切除型肝母细胞瘤仅引发肝功能短暂损伤,在7d即可实施后续治疗.
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37例男性乳腺癌患者临床特征及预后分析
目的 探讨男性乳腺癌(male breast cancer,MBC)患者的临床病理特征及生存情况,并进行预后分析.方法 回顾性分析2003年6月至2013年6月郑州大学第一附属医院37例男性乳腺癌患者与同期随机抽取的300例女性乳腺癌(female breast cancer,FBC)患者的临床病理(年龄、病理类型、淋巴结情况)及随访资料(5年生存率).结果 37例MBC的中位年龄较FBC大(t=11.394,P＜0.01).MBC患者雌激素受体(ER)阳性率明显高于FBC患者(x2=6.294,P＜0.01),而人类表皮受体生长因子受体(HER-2)明显低于FBC患者(x2=8.022,P＜0.01).针对MBC的手术方式以改良根治为主,目前未行保乳手术,而FBC的手术方式较多(x2=8.308,P＜0.01).MBC预后的单因素分析显示,患者淋巴结转移情况(x2 =8.532,P＜0.01)及ER阳性率(x2=7.645,P＜0.01)是影响其总生存率的因素.淋巴结转移情况(x2=13.203,P＜0.01)是影响其无病生存率的因素.多因素分析显示,有无淋巴结转移(P＜0.01)为5年总生存率(overall sur-vival,OS)的独立预后因素.结论 MBC与FBC的临床病理特征存在显著差异,MBC患者的淋巴结转移情况及激素受体阳性率是影响其预后的主要因素.早期诊断及综合治疗是延长MBC生存期的关键.
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局麻下43例肾功能不全患者二期经皮肾镜碎石术治疗临床分析
目的 评估局麻在肾功能不全患者二期经皮肾镜碎石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)中应用的可行性和安全性.方法 2009年7月至2013年8月,43例经过一期经皮肾造瘘术后肾功能仍未恢复正常的患者纳入本研究,1％利多卡因沿肾造瘘管管周局麻,经原肾造瘘管行二期PCNL.患者在术后0(手术结束时)、4、24、48 h用视觉模拟评分法(VAS)评估患者疼痛程度.结果 患者均能在局麻下很好地耐受二期PCNL,平均手术时间为57(30～120) min,平均使用1％利多卡因25(12～36)mL,术后0、4、24、48 h的VAS评分分别为(2.9±0.8)、(2.6±0.6)、(2.2±0.7)、(1.9±0.7)分,没有患者使用哌替啶等镇痛剂.无麻醉相关性并发症发生.结论 局麻在肾功能不全患者二期PCNL中应用是可行和安全的.
