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第三军医大学学报

第三军医大学学报杂志

Journal of third military medical university 제삼군의대학학보

统计源期刊
  • 主管单位: 第三军医大学
  • 主办单位: 第三军医大学
  • 影响因子: 1.01
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1000-5404
  • 国内刊号: 50-1126/R
  • 发行周期: 半月刊
  • 邮发: 78-91
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1979
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 第三军医大学学报编辑委员会
  • 出版地区: 重庆
  • 主编: 王正国
  • 类 别: 医药卫生综合
期刊荣誉:
  • 两种干细胞对颅脑创伤炎症反应调控作用的对比研究

    作者:高谋;徐如祥;杨志军;董勤;姚慧;张洪钿;杨阳;刘宁;陈晨

    目的 比较神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)后炎症反应的调控作用.方法 将264只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组(54只)和TBI组(162只),采用自由落体脑打击装置制备TBI模型并于伤后12h进行NSS评分,将3~7分者按随机数字表法分为3组,每组54只,于伤后24 h将离体培养的同品系小鼠成体NSCs、MSCs和PBS分别定向注射到创伤模型鼠脑内.于移植后24、72 h和7d处死动物,取脑组织病理切片染色,观察脑损伤修复和免疫细胞浸润情况;分别提取脑组织mRNA和蛋白检测细胞因子表达量.结果 ①NSCs或MSCs移植7d后,脑损伤较PBS处理组局限,组织内渗出减少.②NSCs或MSCs移植72 h和7d后,脑组织内浸润的小胶质细胞/巨噬细胞数量明显少于PBS处理组(P<0.05);NSCs移植7d后,脑内浸润的T细胞数量明显少于PBS处理组(P<0.05).③MSCs移植后IL-6和TNF-α mRNA和蛋白水平在各时间点均低于PBS处理组(P<0.05);NSCs移植后IL-10 mRNA水平在24 h和72 h明显高于PBS处理组(P<0.05),其蛋白水平在72 h和7d也较PBS处理组和MSCs移植组明显升高(P<0.05).结论 NSCs与MSCs可影响TBI后炎症反应中免疫细胞浸润和细胞因子表达,二者调控作用既有相同之处,也有明显差异.

  • 循环miR-338-5p、miR-15b-5p和miR-21-5p作为肝细胞癌的潜在肿瘤标记物

    作者:陈义;黄平;陈进;刘一钊;李始亮;王孜尧;宋丹

    目的 筛查血浆中能作为肝细胞癌肿瘤标记物的miRNA.方法 分为4个阶段:①miRNA芯片筛查肝细胞癌组织中异常表达的miRNA,并根据文献和miRNA芯片结果确定候选miRNA.②13对术前和术后7~10d肝细胞癌患者血浆用定量逆转录-聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction,qRT-PCR)检测候选miRNA的表达水平,术后表达水平下降的miRNA定为目的miRNA.③39例肝细胞癌患者、32例肝硬化患者、25例健康人员血浆进行qRT-PCR,验证目的miRNA在3组人群中的表达差异.④分析目的miRNA作为肝细胞癌肿瘤标记物的诊断价值,绘制受试者工作曲线并分析其与临床参数的相关性.结果 癌组织中40种miRNA表达量增加(>2倍),52种miRNA表达量明显下降(<0.5倍).结合文献,选取miR-15b-5 p、miR-21-5p、miR-338-5p作为候选miRNA.术后3种miRNA表达水平下降,定为目的miRNA.3组人群测量结果显示miR-15b-5p、miR-21-5p、miR-338-5p在肝细胞癌患者血浆中表达水平明显高于肝硬化患者和健康对照人群.其中miR-338-5p在肝细胞癌与肝硬化、健康人群鉴别时,曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.762 4(灵敏度:64.10%,特异度:87.50%)和0.906 4(灵敏度:89.74%,特异度:84.00%).miR-21-5p和miR-338-5p进行联合诊断,特异度可达92.98%.即使在甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)判定为阴性的肝细胞癌患者,3种miRNA判定为肝细胞癌的灵敏度都比较高.相关性分析结果显示,血浆miR-338-5p水平与AFP水平呈负相关(r=-0.344,P=0.032) .结论 循环miR-338-5p、miR-15b-5p、miR-21-5p具有作为肝细胞癌的肿瘤标记物的潜力.

  • SREBP-1c在白藜芦醇预防大鼠非酒精性脂肪肝发生中的作用

    作者:高燕翔;张勇;刘裕;张乾勇;糜漫天

    目的 探讨固醇调节元件结合蛋白-lc(SREBP-1c)在白藜芦醇(resveratrol,RSV)预防大鼠通过高脂膳食形成非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)过程中的作用.方法 40只8周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:对照组(基础饲料,Con组)、高脂膳食组(基础饲料+猪油,HF组),高脂膳食+50 mg/kg RSV组(每天50 mg/kg RSV,HFR50组)和高脂膳食+100 mg/kg RSV组(每天100 mg/kg RSV,HFR100组).干预8周,每周称量动物体质量和食物消耗量,干预后检测血清和肝脏中脂质含量,肝脏组织HE染色观察脂肪变性情况,Western blot检测pAMPK、SIRT1、SREBP-1c、FAS的蛋白表达以及实时定量PCR分析SREBP-1c和FAS mRNA表达,染色质免疫共沉淀法分析FAS启动子序列SRE与SREBP-1 c的结合程度.结果 白藜芦醇在不影响日常能量摄入的情况下能减少高脂喂养大鼠的体质量(P<0.05);白藜芦醇显著降低高脂喂养大鼠血清和肝脏中TG含量(P<0.05);高脂喂养诱导大鼠肝脂肪变性,导致大鼠的肝内SIRT1和pAMPK蛋白表达降低(P<0.05)、SREBP-1c和FAS mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)、FAS启动子SRE与SREBP-1c的结合程度增加(P<0.05),而白藜芦醇的干预能显著抑制上述效应(P<0.05).结论 白藜芦醇通过上调高脂喂养大鼠肝内pAMPK与SIRT1蛋白表达和下调SREBP-1c表达与转录活性,预防NAFLD的发生.

  • 胰岛素泵双波疗法在妊娠糖尿病中的应用

    作者:赵鑫;贾晓炜;贾贺堂

    目的 观察实施动态血糖监测联合胰岛素泵双波疗法在妊娠糖尿病中的疗效研究.方法 选取正常孕妇20例及妊娠糖尿病患者46例,将妊娠糖尿病患者分为胰岛素泵常规波治疗组和胰岛素泵双波治疗组,对所有入组孕妇实施动态血糖监测.对比3组平均血糖值、平均血糖漂移幅度、三餐后血糖漂移幅度、低血糖发生率、日内血糖波动大幅度及妊娠结局.结果 与常规波组相比,双波组平均血糖漂移幅度[(2.26 ±0.94) mmol/L vs (3.52±1.41) mmol/L]、三餐后血糖漂移幅度、日内血糖波动大幅度[(4.24±0.40) mmol/Lvs(6.56±1.32) mmol/L]及剖宫产的发生率(8.7% vs34.78%)显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 同胰岛素泵常规波形治疗方案相比,胰岛素泵双波疗法在妊娠糖尿病患者血糖控制的稳定性方面更具优势,可以有效降低剖官产率.

  • Notch信号通路在新生鼠高氧暴露致少突胶质细胞成熟障碍中的作用

    作者:刘光建;郭冉;杜敏;刘杨;刘剑霞;徐颖

    目的 探讨Notch信号通路在新生鼠高氧暴露致少突胶质细胞成熟障碍中的作用.方法 取C57BL/10J新生3 d(P3)小鼠64只,分为空气对照组(C)、空气+DAPT组(C+DAPT)、高氧组(H)、DAPT预处理高氧暴露组(H+DAPT);H组予以高氧暴露48 h,H+DAPT组采用Notch信号特异抑制剂DAPT(10 mg/kg)腹腔注射1h后高氧暴露48 h.生后5 d(P5)断头取脑.Real-time PCR检测Notch1、Jagged1、Hes1及Hes5表达变化.生后12 d(P12)取脑,HE染色观察脑白质形态学变化;免疫荧光化学染色检测成熟少突胶质细胞表达;Western blot定量检测MBP蛋白的表达量.结果 与C组比较,H组小鼠脑组织明显水肿,Notch1、Jagged1、Hes1及Hes5 mRNA的表达均增高(P<0.05);与H组比较,H+ DAPT组Notch1、Jagged1 mRNA表达明显增强(P<0.05),Hes1及Hes5 mRNA表达显著降低(P<0.05);免疫荧光和Western blot结果均显示H组MBP表达低于C组(P<0.05);而与H组比较,H+ DAPT组MBP表达显著增多(P<0.05).结论 Notch信号通路参与了高氧暴露致新生鼠脑白质损伤过程,其机制可能与影响少突胶质细胞的成熟有关.

  • 脉冲磁场对人卵巢癌SKOV3细胞内Ca2+和细胞膜电位的影响

    作者:龙映妃;唐均英;米彦;储怡道;芮少琴

    目的 研究脉冲磁场(8 Hz,200 mT)对卵巢癌细胞SKOV3细胞内Ca2+和细胞膜电位的影响及其作用机制.方法 将SKOV3细胞分为对照组、脉冲磁场组、脉冲磁场+维拉帕米组.对照组不施加任何处理,其余2组给予脉冲磁场照射1h,脉冲磁场+维拉帕米组同时加入维拉帕米50 μmol/L.分别用荧光探针Fluo-3/AM及DiBAC4(3)及标记细胞内Ca2+和细胞膜电位,应用激光共聚焦显微镜检测磁场作用后细胞内平均荧光强度的变化,并采用流式细胞仪检测磁场作用后细胞凋亡情况.结果 脉冲磁场诱导Fluo-3/AM荧光强度增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),维拉帕米干预后Ca2+荧光强度较脉冲磁场组明显减弱(P<0.05).脉冲磁场诱导DiBAC4(3)荧光强度增加,细胞膜发生去极化,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);维拉帕米对脉冲磁场的去极化效应无明显影响(P>0.05).脉冲磁场组凋亡率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 脉冲磁场作用于SKOV3细胞膜,使其发生去极化,从而激活电压依赖型钙离子通道,引起细胞内Ca2+浓度升高.而目前的脉冲磁场实验条件下,未促进细胞凋亡的发生.

  • Rap1酶激动剂C3G对Ⅰ型卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

    作者:李雪梅;罗淑娟;车亚玲;令狐华

    目的 探讨Rapl酶激动剂鸟苷酸交换因子(Crk SH3-domain-binding guanine nucleotidereleasing factor,C3G)对Ⅰ型卵巢癌恶性增殖及侵袭能力的影响.方法 Western blot分别检测Ⅰ型和Ⅱ型入卵巢癌组织中C3G蛋白的表达水平;利用Ⅰ型卵巢癌细胞株OVAR3,构建外源性过表达C3G蛋白的细胞株,通过MTT、平板克隆、流式细胞学实验检测细胞的增殖和凋亡情况;Transwell检测细胞迁移、侵袭能力;Westem blot检测细胞MMP-2、MMP-9的表达.结果 Ⅰ型卵巢癌组织中C3G表达(0.377 6±0.083 1)与良性卵巢肿瘤(0.351 1±0.071 3)及正常对照类似,明显低于Ⅱ型卵巢癌组织[(0.873 5±0.174 6),P<0.05].低转移潜能卵巢癌细胞株OVAR3在外源表达C3G后表现出增殖减慢(P<0.05,P<0.01),凋亡增加(P<0.05),但迁移和侵袭能力增强(P<0.05),MMP-2、MMP-9表达增高(P<0.05).结论 C3G蛋白有抑制增殖和促进侵袭作用,其在Ⅰ型卵巢癌组织中的低表达与其低转移潜能和膨胀型生长模式相关.

  • 玻璃体腔注射雷珠单抗或联合曲安奈德对反复或持续的CRVO-ME的疗效分析

    作者:袁诗曼;刘丹宁;周希瑗

    目的 探讨玻璃体腔注射雷珠单抗(ranibizumab,R)或联合曲安奈德(triamcinolone acetonide,TA)治疗反复或持续的视网膜中央静脉阻塞继发黄斑水肿(central retinal vein obstructive macular e-dema,CRVO-ME)的有效性及安全性.方法 采用临床对照研究,收集首次行玻璃体腔注射雷珠单抗0.5 mg后反复或持续的CRVO-ME患者38例(40眼),在患者知情同意的情况下完全随机分为:R组20例(22只眼),均行玻璃体腔注射雷珠单抗0.5 mg;R+TA组18例(18只眼),均先行玻璃体腔注射雷珠单抗0.5 mg后注射曲安奈德1 mg.随后根据光学相干断层扫描(OCT)结果对患眼行按需治疗[黄斑中心凹视网膜厚度(CMT) >250 μm患者行玻璃体腔重复注射],测量2组患者治疗后1、2、3、4、5、6个月佳矫正视力(BCVA)、CMT、眼压,每次随访行裂隙灯、间接眼底镜检查,比较治疗前和治疗后1、2、3、4、5、6个月2组CMT与BCVA的改变情况.结果 与治疗前比较,2组治疗后1、2、3、4、5、6个月CMT及视力均有明显改善(P<0.05),2组间各项指标均无统计学差异(P>0.05).R+TA组注射次数为(2.61 ±0.92)次,R组注射次数为(4.05±0.65)次,2组间有统计学差异(P<0.01).R组未见并发症,R +TA组2例出现眼压升高,1例出现皮质型白内障.结论 玻璃体腔单独注射雷珠单抗或联合曲安奈德治疗反复或持续的CRVO-ME均可减轻黄斑水肿和改善视力,但两者治疗效果无明显差异.联合治疗虽能减少注药次数,但增加了白内障、青光眼的发生风险.

  • 4-HPR对人胆管癌QBC939细胞放射敏感性的增强作用

    作者:朱浩然;罗放;朱方玉

    目的 探讨N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺(fenretinide,4-HPR)对人胆管癌QBC939细胞的放射敏感性.方法 应用人胆管癌QBC939细胞进行培养,取对数生长期的细胞进行实验.随后采用MTT测定4-HPR对胆管癌QBC939细胞的抑制作用,计算出半数抑制浓度(IC50).采用细胞克隆实验分析4-HPR对QBC939细胞的放射增敏作用.采用流式细胞仪分析4-HPR对细胞凋亡的影响.Western blot检测相关蛋白的表达.结果 4-HPR对QBC939细胞具有抑制增殖作用,随剂量增加而增强.4-HPR与不同剂量的X线照射QBC939细胞后,与单纯照射组比较,4-HPR+照射组的细胞存活分数下降(P<0.01).单纯照射组、4-HPR照射组的平均致死剂量(D0)分别为2.72、1.93 Gy,准域剂量(Dq)分别为2.06、0.94 Gy,4-HPR的放射增益比(SER)为1.41,说明4-HPR对胆管癌QBC939细胞有放射增敏作用.流式细胞仪检测结果显示,4-HPR作用于QBC939细胞后细胞凋亡率升高.bcl-2和caspase-3的Western blot检测结果显示,4-HPR明显增加了放射线诱导的胆管癌QBC939细胞的凋亡,表现为bcl-2的低表达和caspase-3的高表达.结论 4-HPR对胆管癌QBC939细胞有抑制作用和放射增敏作用,其放射增敏作用机制可能与诱导细胞凋亡有关.

  • 两种注射速度对钆塞酸二钠磁共振肝脏动态增强动脉期图像质量的影响

    作者:赵骏;黎川;陈伟;张琳;王健;周代全

    目的 比较两种注射速度(1、1.5 mL/s)钆塞酸二钠(Gadolinium ethoxybenzyl diethylenetriaminepentaacetic acid,Gd-EOB-DTPA)增强磁共振(magnetic resonance,MR)肝脏动态增强动脉期图像质量的优劣性.方法 回顾性评估本院2012年12月至2013年9月接受Gd-EOB-DTPA肝脏MR动态增强检查的患者106例,包括注射速度为1 mL/s患者52例,1.5 mL/s患者54例,对动脉期增强图像进行评估.由2名副高以上诊断医师定量评估所有患者肝脏动脉期腹主动脉、肝总动脉、肝脏实质的信噪比(signal noise ratio,SNR)和强化率(contrast-enhancement ratio,CER)的差异性,定性评估腹主动脉、肝总动脉、肝脏实质、门静脉和图像伪影5个项目得分和总分的差异性.结果 Gd-EOB-DTPA注射速度为1 mL/s组和1.5 mL/s组各部分SNR和CER差异无统计学意义(P>0.05),1 mL/s组腹主动脉、肝总动脉强化评分和总分均高于1.5 mL/s组(P<0.05).结论 Gd-EOB-DTPA注射速度为1 mL/s的肝脏动脉期图像质量优于注射速度为1.5 mL/s的肝脏动脉期图像质量.

  • 连续性高容量血液滤过对脓毒症合并重度急性呼吸窘迫综合征的疗效分析

    作者:吴燕燕;赵金川;鲁力

    目的 探讨连续性高容量血液滤过(continuous high-volume hemofiltration,CHVHF)治疗脓毒症相关重度急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的临床疗效.方法 回顾性分析2008年1月至2014年12月入住我院重症监护室(ICU)的117例脓毒症相关重度ARDS患者的临床资料,按是否接受CHVHF分为血滤组(49例)和常规组(68例),常规组接受常规治疗,血滤组在常规治疗基础上应用CHVHF治疗.观察两组患者治疗前及治疗后6、24、48、72 h氧合指数(PaO2/FiO2)、血管外肺水指数(EVLWI)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)等呼吸功能指标以及血流动力学参数如心率(HR)、平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)的变化;检测治疗前及治疗后6、24、48、72 h白介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)的变化;并观察机械通气的持续时间、住ICU时间、撤机成功率、28 d存活率.结果 两组治疗后血流动力学指标HR、MAP、CVP较治疗前均有明显改善(P<0.05),两组间没有显著差异(P>0.05).血滤组的24 h PaO2/FiO2[(122.4±9.6) mmHg]、24 h EVLWI[(10.6±2.5) mL/kg]、24 h PaCO2[(46.7 ±6.2)mmHg]等肺功能指标较常规组[(91.2±12.5)mmHg、(12.8±2.6) mL/kg、(50.8±4.4)mmHg]改善明显(P<0.05).血滤组的IL-6、CRP明显比常规组下降快,6h时血滤组IL-6[(51.61 ±6.09) pg/mL]、CRP[(22.97 ±4.24) mg/L]显著低于常规组[(61.31 ±2.90) pg/mL、(31.37 ±5.81)mg/L,P<0.05];血滤组机械通气时间(11.5 ±4.3)d、住ICU时间(19.5 ±9.2)d与常规组[(20.6±7.4)、(35.0±6.3)d]比较,明显缩短(P<0.05).血滤组撤机成功率(89.7%)、28 d存活率(83.8%)较常规组(61.2%、63.3%)明显增高(P<0.05).结论 脓毒症合并重度ARDS患者采用CHVHF治疗能迅速改善肺功能,缩短机械通气时间,提高机械通气撤机成功率,降低病死率.

  • MPPa-PDT诱导人骨巨细胞瘤细胞自噬

    作者:黄秋;涂平华;欧云生;刘渤;陶勇;尹航

    目的 探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯介导的光动力疗法(MPPa-PDT)对人骨巨细胞瘤SGC-0404细胞自噬的影响,研究自噬与凋亡的关系.方法 SGC-0404细胞经MPPa-PDT处理后采用Hochest33258染色观察细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色和透射电镜观察细胞内自噬体的形成,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白的表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 MPPa-PDT处理SGC-0404细胞以后,Hochest33258染色可观察到细胞核固缩、核碎裂等典型凋亡形态学改变;DCFH-DA染色结果显示MPPa-PDT组细胞内ROS水平分别是对照组、MPPa药物组、LED光照组的21.07、18.68倍和19.66倍(P<0.05);MDC染色及透射电镜下可见细胞内有典型自噬体形成;Western blot检测结果则显示LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白的表达明显高于各对照组(P<0.05);流式细胞仪检测发现经3-MA抑制自噬后MPPa-PDT所致的细胞凋亡率明显升高[(27.69 ±2.23)% vs (43.17 ±2.87)%,P<0.05].结论 MPPa-PDT能诱导SGC-0404细胞发生凋亡与自噬;自噬在MPPa-PDT作用的早期可以延缓凋亡的发生,具有抗凋亡的保护作用.

  • 慢病毒介导LATS1过表达对人肾癌细胞系786-0增殖、凋亡及下游癌基因YAP的影响

    作者:陈柯宏;何江;王德林;刘武江

    目的 探讨慢病毒介导LATS1过表达对人肾癌细胞786-0增殖、凋亡及下游癌基因YAP的影响.方法 采用携带LATS1基因的慢病毒载体感染人透明细胞肾癌细胞系786-0,利用RT-PCR检测感染后786-0细胞中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因-1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP) mRNA的表达水平,Western blot检测LATS1和YAP的蛋白表达水平,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡和周期,细胞增殖/毒性试剂(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖抑制情况.结果 慢病毒介导LATS1感染肾癌786-0细胞系后,LATS1 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组及空病毒组(P<0.05),YAP mRNA及蛋白表达水平显著低于对照组及空病毒组(P<0.05),细胞周期停滞在G1期(P<0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)、细胞凋亡显著增加(P<0.05).结论 慢病毒介导LATS1过表达下调YAP基因表达,抑制786-0细胞增殖、促进其凋亡并阻滞细胞周期于G1期.肾癌的发生、发展可能与LATS1和YAP表达失调有关.

  • APP/PS1双转基因小鼠CBS过表达对Aβ代谢及认知功能的影响

    作者:刘梦洁;陈秋霞;高丹;乔沛丰;赵丰丽;晏宁;张华;晏勇

    目的 探讨APP/PS1双转基因小鼠胱硫醚-β-合酶(cystathionine-β-synthase,CBS)过表达对Aβ代谢及认知功能的影响.方法 向APP/PS1转基因小鼠脑组织内注射慢病毒构建CBS过表达模型,以空载病毒作阴性对照.4周后行Morris水迷宫检测各组小鼠认知功能,敏感硫电极、免疫组化测定海马组织H2S、CBS、Aβ1-42含量.结果 ①过表达CBS组小鼠脑组织内H2S含量显著增加(P<0.05);②过表达CBS组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05);③过表达CBS组小鼠脑组织内Aβ1-42含量明显降低(P<0.01),所形成老年斑的数量和大小明显减少.结论 增加APP/PS1双转基因小鼠脑组织内CBS表达含量可减少Aβ1-42生成并改善小鼠认知功能.

  • 一种快速定量检测类鼻疽伯克霍尔德菌的方法建立及评价

    作者:傅琼瑶;陈春羽;邬娇;邬强;覃西;钱士匀;易国辉;夏乾峰

    目的 采用实时荧光定量PCR技术,建立并评价一种快速、准确、特异检测类鼻疽伯克霍尔德菌的定量检测方法.方法 以类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统保守基因序列设计引物和探针,构建重组质粒作为DNA标准品,优化荧光定量PCR体系,同时进行方法学评价,并与以16S rRNA基因为靶序列的荧光定量PCR方法进行对比.结果 建立了检测类鼻疽伯克霍尔德菌的荧光定量PCR方法,其线性范围为1 ×101~1×1010拷贝/μL;其灵敏度为10拷贝/μL;批内变异系数(CV)为1.43%~4.6%;对用24份模拟血液标本和67份稻田土壤标本分别采用本法和对照方法进行检测,本菌配制的模拟标本采用两种方法检测均为阳性,且能准确定量,阳性率为100%,而含有其他常见感染细菌的标本检测结果均为阴性;土壤标本中有12份标本采用本法和与细菌培养法均为阳性,但是对照方法未能检测出其中两份低浓度的土壤标本.结论 建立的类鼻疽伯克霍尔德菌定量PCR方法具有快速、准确、灵敏度高等特点,可作为环境中该菌检测和疫区类鼻疽病诊断的有效工具.

  • 钽金属Jumbo杯在Paprosky Ⅱ及Ⅲ型髋臼缺损髋关节翻修中的应用

    作者:古凌川;陈光兴;杨柳;何锐;彭阳;杨鹏飞

    目的 观察钽金属Jumbo杯在全髋关节翻修术中对PaproskyⅡ型及以上严重髋臼骨缺损进行重建的疗效.方法 收集2009年9月至2012年9月行钽金属Jumbo杯重建中、重度髋臼缺损髋关节翻修手术18例(18髋)患者的临床资料,包括男性8例,女性10例,年龄37 ~76(56.8±15.3)岁.Paprosky分型Ⅱb型6例,Ⅱc型7例,Ⅲa型2例,Ⅲb型3例.术后观测其髋关节Harris评分、视觉模拟疼痛评分(visual analogous scale,VAS)、髋臼假体[位置、稳定性、骨长入(Anderson影像学标准)、生存率]情况及并发症.结果 全部病例术后随访时间24~54个月,平均35.7个月.末次Harris评分PaproskyⅡ型为(84.8±11.8)分,明显高于术前(48.3±12.5)分(t=-13.8,P<0.01);Ⅲ型为(77.8±9.3)分,明显高于术前(38.5 ±10.6)分(t=-16.4,P<0.01).末次VAS评分PaproskyⅡ型为(1.1±0.7)分,明显低于术前(3.8±1.5)分(t=14.7,P<0.01);Ⅲ型为(1.9±1.2)分,明显低于术前(5.1±1.6)分(t=19.2,P<0.01).随访期内钽金属Jumbo杯固定良好,未出现松动及移位,髋臼杯均出现不同程度骨长入,均未发现臼杯周围透光线、骨溶解,假体生存率100.0%.术后4周出现假体后脱位1例,均无感染、神经损伤等并发症发生.结论 钽金属Jumbo杯重建中、重度髋臼缺损髋关节翻修手术的近期疗效优良,并具有简化手术操作、减少植骨需求、增加与宿主骨接触面、利于宿主骨长入、大限度恢复旋转中心的优点.

  • 氟化钠诱导氧化应激促进大鼠子宫组织炎症反应及其作用机制

    作者:廖星贵;李艳丽;邱义稳;周永江;耿艳清;刘学庆;陈雪梅;王应雄;何俊琳

    目的 通过对氟化钠染毒大鼠的炎症反应相关因子及关键信号通路分子的检测,探讨其对大鼠子宫组织细胞氧化损伤的作用机制.方法 将30只雌性SD成年大鼠分为3组(10只/组),分别给予蒸馏水(对照组)、100 mg/L氟化钠溶液(100 mg/L氟化钠处理组)、200 mg/L氟化钠溶液(200 mg/L氟化钠处理组)饮用,持续染毒180 d,建立氟化钠染毒动物模型.采用Western blot、免疫组织化学法检测子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达;采用ELISA对氧化应激相关分子ROS、MDA、SOD、CAT、GSH进行检测;采用Western blot测定P38、ERK、JNK、PI3K活性物质的表达.结果 2个氟化钠处理组大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达量明显高于对照组(P<0.05);2个氟化钠处理组ROS、SOD、CAT、GSH明显高于对照组,而MDA明显低于对照组(P<0.05);与对照组相比,2个氟化钠处理组P38、JNK蛋白磷酸化效率增加(P<0.05),而且ERK、PI3K总蛋白及磷酸化蛋白表达水平均有增加.结论 氟化钠可诱导大鼠子宫组织的氧化应激,促进炎症反应发生,MAPK(ERK、JNK、P38)和PI3K信号通路可能参与其中.

  • 年龄增加对胃排空和胃内食物分布的影响

    作者:刘世雄;周芸;陈明;周永宁;王晶;姬瑞;杨鹏;刘纯;严祥

    目的 观察年龄增加对胃排空和胃内食物分布的影响.方法 50例健康志愿者按年龄不同分为青年组、中年组和老年组,进食99m Tc-DTPA标记的试餐后利用双探头单光子发射计算机断层成像术(single-photon emission computed tomography,SPECT)采集图像,通过计算机产生的像素将胃的每帧影像划分为近端胃、远端胃,分别测定、计算半排空时间、90 min胃内残留率、不同时相胃各部分面积、计数/像素比等.结果 老年组近端胃半排空时间较青年组、中年组缩短(P<0.05),远端胃90 min胃内核素残留率较青年组、中年组增多(P<0.05);老年组近端胃60、90 min时相面积较青年组、中年组明显减少(P<0.05).30、60、90 min时相老年组远端胃时相面积较青年组、中年组明显增加;在30、90 min时相老年组远端胃计数/像素比较青年组、中年组增加(P<0.05).结论 胃排空并没有随着年龄的增加而减慢,但老年人近端胃内食物过快流向远端胃,这种胃内食物分布异常可能与老年人食欲减退、胃纳减少有关.

  • 骨髓基质细胞抗原2抑制乙肝病毒复制与释放

    作者:朱素菲;贺巧;胡琴;黄英;陈维贤;李月

    目的 研究骨髓基质细胞抗原2 (bone marrow stromal antigen 2,BST-2)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制与释放的影响.方法 以不同浓度干扰素处理人肝癌细胞株HepG2.2.15,Western blot和荧光定量PCR检测BST-2蛋白水平和RNA水平;分别用构建的BST-2真核表达质粒pCDNA3.1-BST2-FLAG和BST-2拮抗蛋白HIV Vpu真核表达质粒,转染HepG2.2.15细胞,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和乙肝病毒e抗原(HBeAg),荧光定量PCR检测HBV mRNA,Southern blot检测HBV DNA.结果 转染pCDNA3.1-BST2-FLAG后,HBVmRNA降低26%,细胞内HBV DNA降低31%,细胞培养液中HBV DNA降低33% (P <0.05),细胞培养液中HBsAg下降至82%,HBeAg下降至77% (P <0.05);加入Vpu蛋白后,BST-2的抑制作用受到对抗,HBV mRNA恢复至92%,细胞内HBV DNA恢复至93%,细胞培养液中HBV DNA升至98%,细胞培养液中HBsAg恢复至102%,HBeAg恢复至99%,HBV复制与释放明显增强.结论 BST-2对HBV复制与释放具有抑制作用,该抑制作用可被HIV Vpu蛋白拮抗.

第三军医大学学报分期目录

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