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第三军医大学学报

第三军医大学学报杂志

Journal of third military medical university 제삼군의대학학보

统计源期刊
  • 主管单位: 第三军医大学
  • 主办单位: 第三军医大学
  • 影响因子: 1.01
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1000-5404
  • 国内刊号: 50-1126/R
  • 发行周期: 半月刊
  • 邮发: 78-91
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1979
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 第三军医大学学报编辑委员会
  • 出版地区: 重庆
  • 主编: 王正国
  • 类 别: 医药卫生综合
期刊荣誉:
  • 内嗅皮层-海马投射末梢基于光纤技术的钙活动记录

    作者:卢建;金文均;覃涵;谌小维

    目的 运用光纤探测系统建立轴突末梢Ca2活动的光学记录方法,并初步探究麻醉和自由活动状态下小鼠皮层-海马通路的活动规律.方法 向8 ~ 10周龄雄性C57BL/6小鼠内侧内嗅皮层(medial entorhinal cortex,MEC)浅层(Ⅱ层)注射神经元特异并携带Ca2+荧光指示蛋白基因的腺相关病毒(AAV-Syn-GCaMP5 G),继续饲养1个月后将光纤植入到海马齿状回(dentate gyms,DG)分子层上沿,记录麻醉和自由活动状态下轴突末梢的Ca2+活动;相同方法记录AAV-Syn-增强绿色荧光蛋白(eGFP)小鼠作为对照.向MEC浅层注射河豚毒素(tetrodotoxin,TTZ),同步记录轴突末梢Ca2活动,注射人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)作为对照.结果 内嗅皮层Ⅱ层神经元投射至海马DG的轴突纤维密集表达GCaMP5G.在麻醉和自由活动的小鼠中均能稳定记录到轴突末梢Ca2+信号,eGFP对照小鼠未记录到类似Ca2+信号.MEC浅层注射TTX后,轴突末梢Ca2信号100 s内高幅度降至注射前的12.6%.与ACSF比较,TTX对轴突末梢Ca2+活动有明显阻断作用(P<0.01).内嗅皮层投射至DG的轴突末梢处Ca2+活动在麻醉状态下以一定节律同步发放,自由活动状态下则表现为无节律非同步发放,且Ca2+信号幅度有所增强.结论 通过GCaMP5G特异标记了内侧内嗅皮层Ⅱ层投射至DG的轴突纤维,并运用光纤探测系统建立了长远投射轴突末梢Ca2+活动的光学记录方法.与麻醉状态相比,自由活动状态下内嗅-海马通路呈现更强的Ca2+活动发放.

  • 姜黄素通过调节肠道IEL亚群缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎

    作者:蒲爱民;张治草;韩宾;杨桦

    目的 观察传统中药成分姜黄素对葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的炎症状况及IEL亚群的影响,探讨姜黄素对治疗溃疡性结肠炎的可能机制.方法 选取成年雄性C57BL/6小鼠60只,按照随机数字表法分为3组,每组20只,分别为正常组、DSS组和DSS+姜黄素组,通过对小鼠疾病活动程度指数(disease activity index,DAI)评分及结肠组织HE染色评估炎症状况,应用流式细胞术分析各组结肠IEL亚群.结果 与正常组对比,DSS组DAI评分明显升高(P<0.01);结肠黏膜损伤程度明显加重;CD8αd和TCRγδ亚群比例降低(P<0.01),CD4亚群比例升高(P<0.05).而与DSS组比较,DSS+姜黄素组DAI评分明显降低(P<0.05);结肠黏膜损伤程度明显减轻;CD8αα和TCRγδ亚群比例升高(P <0.01);CD4亚群比例降低(P<0.05).结论 姜黄素缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎可能通过调节IEL亚群变化.

  • 负载SDF-1α的温度敏感性水凝胶预防宫腔粘连及促进子宫内膜再生修复的效果

    作者:龙莹;唐帅;冯露;梁志清

    目的 考察负载重组人基质细胞衍生因子-1α (recombinant human stromal cell-derived factor-1 alpha,rhSDF-1 α)的温度敏感性水凝胶PLA/PEG三嵌段聚合物(PLA-PEG-PLA,PLEL)对预防宫腔粘连、促进子宫内膜再生修复的效果.方法 24只成年新西兰雌兔(48条子宫)分为4组(n=12):①自然修复组,纵行剪开子宫全长,剪去子宫内膜,止血后缝合子宫切口;②PLEL治疗组,缝合子宫切口后向宫腔内注射PLEL水凝胶;③PLEL-rhSDF-1 α治疗组,缝合子宫切口后向宫腔内注射复合rhSDF-1α的PLEL水凝胶;④假手术组,仅行开腹手术,不处理子宫.分别于术后7d和28 d取子宫标本,免疫荧光染色观察间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)表面标志CD44和CD90的表达,组织学染色观察子宫内膜修复情况.结果 自然修复组宫腔粘连,无内膜上皮组织再生.与PLEL治疗组比较,PLEL-rhSDF-1 α治疗组有大量MSCs归巢至再生内膜组织(P<0.05),再生内膜上皮层周长/基底层周长比值更大(P<0.05),但均不及假手术组(P<0.05).结论 温度敏感性PLEL水凝胶复合rhSDF-1α具有预防子宫宫腔粘连、促进子宫内膜再生修复的作用.

  • 动力相关蛋白-1在缺氧/复氧诱导人肾小管上皮细胞焦亡机制中的作用

    作者:陈雨;侯卫平;袁发焕

    目的 观察人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤时线粒体动力相关蛋白1 (dynamin-related protein 1,Drp1)、Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain containing 3,Nlrp3)以及炎性因子的表达改变和细胞焦亡情况,探讨Drp1在H/R诱导肾小管上皮细胞焦亡中的作用.方法 HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12液培养于37 ℃、5% CO2和95%O2的恒温培养箱.将细胞分为正常对照组、H/R组、H/R+ Drp1抑制剂(H/R+Mdivi-1)组、H/R+siNlrp3腺病毒(H/R+siNlrp3)组、H/R+空腺病毒(H/R+ Scra)组.检测细胞培养液上清乳酸脱氢酶LDH活性,Western blot检测Drp1、Nlrp3、凋亡相关蛋白-l(caspase-1)、IL-1β表达,2',7 '-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检测细胞活性氧(ROS)水平,流式分析仪检测细胞焦亡情况.结果 与正常对照组比较,H/R组培养液上清LDH和细胞内ROS水平明显升高,Drp1、Nlrp3、caspase-1、IL-1β表达增高,细胞焦亡明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组比较,H/R+Mdivi-1组培养液上清LDH和细胞内ROS水平明显降低,Nlrp3、caspase-1、IL-1 β表达降低,细胞焦亡明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在H/R条件下,Drp1通过激活Nlrp3炎性体诱导人肾小管上皮细胞焦亡.

  • FBXL20在颞叶癫痫患者及癫痫大鼠模型中的表达变化

    作者:伏鹏飞;温跃桃;王刚;高超;谢延风;詹彦;石全红

    目的 通过研究E3泛素连接酶FBXL20及其下游蛋白-神经元突触膜胞外分泌调节蛋白1 (regulating synaptic membrane exocytosis 1,RIM1)在颞叶癫痫患者皮质及匹鲁卡品癫痫大鼠模型皮质、海马组织中的表达变化,探讨FBXL20在癫痫形成中的作用.方法 以颞叶癫痫患者手术切除病灶标本(n=25)为癫痫组,以脑外伤减压手术所切皮质标本(n=10)为对照组.另取40只健康雄性SD大鼠腹腔注射氯化锂(127 mg/kg),20 h后腹腔注射匹鲁卡品(50 mg/kg),每30分钟重复给予1次匹鲁卡品(10 mg/kg),直到大鼠癫痫发作.2周后出现癫痫自发性发作的大鼠纳入癫痫组;2个月后仍未出现癫痫自发性发作的大鼠纳入对照组.采用免疫荧光对FBXL20的表达进行定位;免疫组化检测FBXL20的表达水平;Westem blot检测FBXL20、RIM1的表达水平.结果 免疫荧光检测结果显示FBXL20主要表达于神经元;免疫组化及Western blot检测结果均显示癫痫患者皮质、癫痫大鼠模型皮质与海马中FBXL20表达较对照组明显下降(P<0.05);同时Western blot检测结果显示RIM1表达较对照组明显升高(P<0.05).结论 FBXL20在癫痫患者及大鼠模型中的表达水平明显降低,RIM1表达明显升高,提示FBXL20可能通过调控RIM1参与了癫痫的形成.

  • 骨培养探讨脂多糖对小鼠骨骼发育及矿化的影响

    作者:孙珂媛;杨京;谢杨丽;徐伟;王权;杜晓兰;陈林

    目的 探讨体外培养情况下脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激对小鼠骨骼发育和矿化的影响及其机制.方法 分离E18.5 d小鼠跖骨和胫骨,分为空白对照组(Blank组)及LPS组(10μg/mL LPS).分别于培养后第1、7天照相,计算跖骨和胫骨全长增长率(TL-rate)、矿化带增长率(CZ-rate)、第7天矿化带占骨全长的比例(CZ%).培养7d后固定、石蜡包埋切片,臧红固绿和甲苯胺蓝染色观察肥大带宽度、Ⅱ型胶原(collagenⅡ,ColⅡ)、X型胶原(collagen X,Col X)免疫组化染色观察软骨细胞分化及TUNEL染色观察软骨细胞凋亡变化.结果 与Blank组比较,LPS处理后跖骨和胫骨TL-rate及CZ-rate明显降低(跖骨TL-rate P=0.025;跖骨CZ-rate P=0.019;胫骨TL-rate P=0.010;胫骨CZ-rate P=0.024).臧红固绿、甲苯胺蓝染色及形态计量显示LPS组胫骨肥大带较Blank组明显变短(P <0.001).与Blank组比较,LPS组胫骨的软骨分化相关蛋白ColⅡ、ColX表达降低,软骨细胞凋亡明显增加.结论 LPS通过抑制软骨增生、分化及促进肥大带软骨细胞凋亡来抑制骨骼发育及矿化.

  • 双环己酮草酰二腙诱导脱髓鞘模型小鼠情绪及神经递质的变化

    作者:雷楚;黄嘉璐;陈昊炜;胡俊;周振华;陈康宁

    目的 观察双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘模型小鼠情绪及神经递质的变化特点,探讨髓鞘脱失和再生过程中情绪变化的可能原因.方法 选36只C57BL/6雄性小鼠,分为3组,正常对照组予以正常饲料14周;慢性脱髓鞘组予以含0.2% CPZ粉末的饲料14周;髓鞘修复组先用含0.2% CPZ粉末的饲料12周,再换用正常饲料2周.采用LFB染色、免疫荧光及透射电镜技术观察胼胝体区髓鞘以及星形胶质细胞的变化情况;通过体质量、旷场、高架十字迷宫及悬尾实验检测小鼠行为学的变化;利用酶联免疫吸附法和高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定血清肾上腺素、去甲肾上腺素、五羟色胺、多巴胺、二羟基苯乙酸和五羟基吲哚乙酸的浓度.结果 慢性脱髓鞘组和髓鞘修复组胼胝体区髓鞘明显脱失(P<0.01),两组GFAP的表达明显升高(P<0.01).慢性脱髓鞘组小鼠旷场实验总路程、中央路程及中央区活动时间均较其他2组明显减少(P<0.05);在高架十字迷宫中,慢性脱髓鞘组小鼠开臂滞留时间百分比(OT%)和开臂进入次数百分比(OE%)较正常对照组减少(P<0.05);慢性脱髓鞘组及髓鞘修复组小鼠在悬尾实验中的静止时间较正常对照组增加(P<0.05).HPLC-ECD及ELISA测得慢性脱髓鞘组血清NE和5-HT的浓度与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 CPZ诱导的脱髓鞘模型小鼠表现出焦虑、抑郁等行为变化,可能与脑组织的髓鞘脱失以及脱髓鞘环境下神经递质的含量变化有关.

  • 多孔钽颗粒负载碱性成纤维细胞生长因子促进犬颌骨缺损修复的初步研究

    作者:朱璨;节云峰;张倩;崔嘉玺;钟建鑫;汪昆;王晓亮;周继祥

    目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对多孔钽颗粒修复犬颌骨缺损过程中的促进效果.方法 Beagle犬6只,建立下颌骨缺损模型共计36个,单侧3个骨缺损分别为多孔钽颗粒修复组(实验组A)、bFGF+多孔钽颗粒修复组(实验组B)、无干预组(对照组).术后4、8、12周各处死2只犬,行大体、X线、组织学观察及新生骨面积统计分析.结果 X线片示实验组与周围骨质结合良好,对照组12周后仍可见低密度骨缺损区域.甲苯胺蓝染色示术后8周及12周实验组B骨连续性及成熟度优于实验组A.术后4周实验组B新生骨形成面积明显大于实验组A(P<0.05),而8周末实验组A明显大于实验组B(P <0.05).结论 bFGF可增强多孔钽颗粒的骨修复能力.

  • IBP通过上皮间质转化促进结肠癌细胞迁移和侵袭

    作者:何颖;张竹君

    目的 探讨干扰素调节因子4结合蛋白(interferon regulatory factor-4 binding protein,IBP)能否影响结肠癌细胞上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的发生,观察IBP在肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭中作用.方法 干预结肠癌细胞中IBP的表达,构建IBP过表达的HT-29-IBP细胞株与IBP沉默的HCT116-shIBP细胞株;干预IBP表达后,采用Western blot检测结肠癌细胞EMT相关分子的蛋白表达;Transwell实验检测结肠癌细胞迁移、侵袭能力的改变;MTT实验检测结肠癌细胞增殖能力的改变.结果 HT-29-IBP细胞中上皮相关分子E-cadherin和ZO-1表达水平降低,间质相关分子Fibronectin表达升高,细胞增殖、迁移和侵袭能力增强(P<0.05);HCT116-shIBP细胞则E-cadherin、ZO-1表达水平升高,Fibronectin及Snail表达降低,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05).结论 IBP通过调节EMT促进结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭.

  • 生物活性多孔钽骨修复材料促骨生长的实验研究

    作者:张倩;节云峰;朱璨;钟建鑫;崔嘉玺;汪昆;王晓亮;舒绍兵;周继祥

    目的 通过将转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)与多孔钽颗粒复合,制备生物活性多孔钽修复材料,并观察该材料的促骨生长作用.方法 6只Beagle犬,建立下颌骨缺损模型共计36个,单侧3个骨缺损分别为单纯多孔钽颗粒修复组(对照组)、TGF-β1+多孔钽颗粒修复组(实验组)和无干预组(空白对照组).于材料植入后30、60、90 d处死动物,取下颌骨行大体观察、X线检测、甲苯胺蓝染色、四环素荧光标记检测、CD31相关抗原抗体染色.结果 30 d时实验组新骨生成面积及新生微血管数目显著大于对照组和空白对照组(P<0.05);60 d时对照组新骨生成面积及新生微血管数目显著大于实验组和空白对照组(P<0.05);90d时3个时间点成骨情况差异无统计学意义(P>0.05).结论 TGF-β1复合多孔钽生物材料具有高促骨活性,能加速多孔钽与周围骨组织的早期生物性结合,缩短愈合时间.

    关键词: TGF-β1 多孔钽 骨缺损
  • 4-PBA抑制内质网应激降低间质性膀胱炎大鼠膀胱兴奋性

    作者:李佳;夏六兵;张腾;董兴有;宋波;李龙坤

    目的 探讨内质网应激在大鼠间质性膀胱炎发病过程中的作用,以及4-PBA的治疗价值.方法 45只雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组:对照(C)组、炎症(IC)组和炎症+4-PBA(IC+4-PBA)组,每组15只.C组用生理盐水处理;IC组用鱼精蛋白联合LPS诱导;IC+ 4-PBA组由炎症模型建立时予以内质网应激抑制剂4-PBA处理.5d后应用Western blot分别测定内质网应激标记物(GRP78)、自噬流标记物(P62)、自噬标记物(LC3A/B、Beclin1)的表达量;免疫荧光检测膀胱LC3A/B的表达;HE染色检测膀胱组织病理学变化;尿动力学检测膀胱功能改变.结果 IC组GRP78、P62、LC3A/B、Beclin1表达显著高于C组(P<0.05);4-PBA+IC组GRP78、P62、LC3A/B、Beclin1表达显著低于IC组;免疫荧光结果显示IC+ 4-PBA组LC3A/B表达显著低于IC组且高于C组(P<0.05);HE染色结果显示IC+ 4-PBA组膀胱上皮组织完整性,炎细胞浸润和组织水肿程度都较IC组明显改善;在膀胱功能学上,IC+ 4-PBA组大鼠较IC组排尿频率显著降低,排尿间隔显著延长.结论 在鱼精蛋白联合LPS诱导的大鼠间质性膀胱炎模型中,使用4-PBA抑制膀胱内质网应激恢复自噬流有可能降低膀胱兴奋性,改善膀胱功能.

  • 吸烟及全身炎症反应与慢性阻塞性肺疾病患者中发生肺动脉高压的相关性研究

    作者:陈刘通;廖晨;涂洪波;冯双双;白莉

    目的 研究吸烟、全身炎症反应与慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者中发生肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)之间的关系.方法 连续收集我研究所2013年4月至2015年3月收治的111例COPD合并PH的住院患者作为病例组,匹配年龄、性别后以同期111例COPD未合并PH的住院患者作为对照组,记录患者年龄、性别、吸烟史等一般资料,采集患者入院24 h内血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞(white blood cell,WBC)、中性粒细胞/淋巴细胞比例(neutral granular cell/lymphocyte ratio,NLR)、血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、纤维蛋白原、降钙素原(procalcitonin,PCT)、动脉血气、胸部CT及心脏彩超等结果.结果 COPD合并PH组的吸烟指数、CRP、IL-6及TNF-α均明显高于COPD未合并PH组(P<0.01),且与肺动脉收缩压呈正相关(r=0.271、0.181、0.270、0.208,P<0.05),多因素Logistic回归分析结果显示吸烟、CRP、IL-6及TNF-α是PH形成的独立危险因素(OR=6.185、6.740、3.434、2.700,P<0.05).结论 吸烟及血清中CRP、IL-6及TNF-α升高与肺动脉压力升高呈正相关,提示吸烟、机体炎症反应与COPD发生PH密切相关.

  • 前路与后路两种术式治疗单节段胸椎结核对比研究

    作者:黄兴舟;赵晨;蒲小兵;李虎进;罗磊;代飞;罗飞;侯天勇;张泽华

    目的 探讨前路与后路两种术式治疗单节段胸椎结核的优缺点.方法 回顾性分析2006年5月至2013年7月本科收治的56例单节段胸椎结核患者的相关资料,其中男性29例,女性27例;年龄18 ~76岁,平均38岁.其中前路术式组26例,行一期前路病灶清除、结构性植骨融合内固定术,后路术式组30例,行一期后路病灶清除、结构性植骨融合内固定术,定期随访观察结核治愈、神经功能改善及后凸、侧凸畸形矫正情况.手术时间、出血量、平均住院日、植骨融合时间比较采用独立样本t检验;红细胞沉降率(erythrocyte sedimentaon rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、后凸及侧凸畸形比较采用单因素方差分析;术前及末次ASIA等级评分及并发症比较采用非参数检验进行统计分析.结果 56例患者均获得随访,随访时间24 ~ 56个月,平均29个月,均获得临床治愈.在后凸及侧凸矫正角度丢失方面,前路术式组>后路术式组.而在手术时间、术中出血量、平均住院时间、植骨融合时间、神经功能改善、后凸及侧凸畸形矫正度、术后并发症发生率等方面,两组差异无统计学意义(P>0.05).结论 两种术式治疗单节段胸椎结核均能达到良好的治愈效果.与前路术式相比,后路术式在后凸和侧凸矫正角度的维持上优势明显,安全性好,更具可选择性.

  • 血清APE1自身抗体在结直肠癌诊断中的价值

    作者:何乐;杨宇馨;张诗珩;罗佳;戴楠;李梦侠;单锦露;王宏毅;王东

    目的 探讨血清中APE1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 autoantibodies,APE1-AAbs)在结直肠癌中的诊断价值.方法 利用ELISA检测150例结直肠癌患者和170例健康体检人员(对照组)血清APE1-AAbs水平,采用蛋白芯片法检测相应的CEA、CA199和CA242浓度.运用Logistic回归和ROC曲线分析方法,将APE1-AAbs与CEA、CA199及CA242联合分析.结果 150例结直肠患者血清APE1-AAbs中位水平为2.697,显著高于对照组(P <0.001).绘制ROC曲线,其AUC为0.797,灵敏度为62.67%,特异性为85.29%.APE1-AAbs分别与CEA、CA199及CA242联合后,AUC、诊断灵敏度和准确性均有所升高.结论 血清APE1-AAbs对结直肠癌有辅助诊断价值,与临床上常用的结直肠癌肿瘤标志物联用可提高结直肠癌的诊出率.

  • 经阴道改良盆底功能重建术中切除子宫与保留子宫的疗效比较

    作者:刘增婷;潘珂;曹莉莉;王延洲;雷玲;徐惠成

    目的 比较经阴道改良盆底重建术中切除子宫与保留子宫的临床疗效及对患者生活质量的影响.方法 收集2009-2013年在我院接受经阴道改良盆底重建术的患者临床资料,切除子宫组(concomitant hysterectomy group,CH)71例,保留子宫组(uterus conservation group,UC)53例.比较手术时间等围手术期参数;采用盆腔器官脱垂分度(POP-Q)评估患者术前的脱垂情况及术后的手术效果;以盆底疾病生活质量影响问卷(pelvic floor impact questionnaire-short form7,PFIQ-7)、盆底功能障碍疾病相关问卷(pelvic floor distress inventory short form 20,PFDI-20)评价手术对患者生活质量的影响.结果 两组患者手术时间、术中出血量、手术费用比较,差异有统计学意义(P<0.05).两组患者术后的POP-Q值及POP-Q分期均较术前有明显改善;两组术后PFIQ-7和PFDI-20评分均较术前有显著降低(P<0.05),但两组术后以上参数比较差异无统计学意义(P>0.05).术后患者有性生活的UC组9例和CH组8例;两组术后PISQ-12评分差异无统计学意义(P>0.05).结论 经阴道改良盆底功能重建术中选择保留子宫不影响手术疗效.

  • 类鼻疽的实验室诊断方法及评价

    作者:毛旭虎;胡治强

  • 类鼻疽研究进展

    作者:Yunn-Hwen Gan

    类鼻疽是由类鼻疽伯克霍尔德菌引起的一种新兴传染病,流行于东南亚和澳大利亚北部,目前尚无有效疫苗.类鼻疽菌作为一种兼性胞内致病菌具有庞大基因组,编码多种毒力因子,通过控制宿主细胞生物学途径并且抑制宿主细胞免疫应答过程,促进其在细胞内的增殖.本文对目前类鼻疽菌毒力相关的Ⅲ型和Ⅵ型分泌系统在类鼻疽病发病机制中的作用进行了概述,并讨论了类鼻疽菌新发现的毒力因子在细菌致病过程以及逃逸或破坏宿主免疫应答中发挥的作用.随着基因组学和蛋白组学的进展,对类鼻疽菌与宿主相互作用的分子机制有所加深,但许多问题仍有待探索解决,如疫苗、诊断、有效的治疗药物等.

  • 重庆市大学生精液常规参数与精子DNA损伤的关联性分析

    作者:刘太秀;崔志鸿;曹佳

    目的 探讨重庆市在校大学生精液常规参数与精子DNA损伤水平之间的关联性.方法 2014年6月招募的重庆大学生男性生殖健康调查(male reproductive health in Chongqing college students,MARHCS)队列639名健康大学生,手淫法采集精液样本,用计算机辅助精子分析系统(Computer-aided sperm analysis,CASA)进行精液常规分析,采用Diff-Quick试剂盒检测精子形态,采用单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测精子DNA损伤,采用Spearman相关分析探讨精子DNA损伤与精液常规参数间的关联性.结果 大学生人群精液常规各指标(中位数):精液量为3.6 mL,精子密度为52.0×106/mL,精子总活力为89.4%,前向运动精子百分率为57.0%,精子正常形态率为21.3%.精子DNA损伤(彗星实验指标)水平:尾部DNA含量百分比(Tail DNA%)为19.4%,尾长(tail length,TL)为35.7 pixels,彗星长(comet length,CL)为81.6 pixels,尾距(tail moment,TM)为7.6,Olive尾距(olive tail moment,OTM)为6.3.经Spearman相关性分析,精子密度与Tail DNA%呈负向关联(P<0.05),精子总活力(%)与Tail DNA%、CL、TM、OTM呈负向关联(P值均<0.01),前向运动精子百分率与精子Tail DNA%、CL、TL、TM、OTM呈负向关联(P值均<0.05).结论 重庆市大学生精子密度、精子总活力、前向运动精子百分率均与精子DNA损伤呈负向关联.

  • 类鼻疽杆菌毒素分子BLF1的重组表达及生物学活性

    作者:任春艳;方瑶;李倩;胡艺;马腾飞;胡治强;袁顺翎;周杰;汪黎鸿

    目的 重组、表达类鼻疽杆菌毒素BLF1并研究其生物学活性.方法 运用DNA重组技术,以pGEX为表达系统在大肠杆菌中表达BLF1蛋白;以纯化重组蛋白rBLF1免疫新西兰大白兔,获得抗rBLF1血清,Western blot及ELISA鉴定抗血清;不同浓度rBLF1蛋白腹腔注射BALB/c小鼠,观察小鼠生存率;A549细胞模型中,通过CCK-8实验研究目的蛋白的细胞毒性效应及抗体阻断作用.结果 从类鼻疽杆菌基因组DNA中PCR得到了BLF1目的基因,连接到pGEX-6p-2质粒,经双酶切及测序表明重组质粒构建成功.GST-BLF1蛋白经诱导表达、酶切纯化得到了相对分子质量为23×103的高纯度rBLF1,免疫家兔抗血清ELISA效价达1∶1 280 000,Western blot鉴定在目的蛋白位置处出现特异印记条带.重组rBLF1蛋白腹腔注射BALB/c小鼠,小鼠死亡率与蛋白剂量呈正相关.rBLF1蛋白能明显杀伤A549细胞,抗体可有效阻断其杀伤作用.结论 成功重组表达了具有生物活性的rBLF1,该蛋白具有明显杀伤A549肿瘤细胞的作用,同时能够导致小鼠死亡但表现出一定耐受性.

  • 中国类鼻疽菌的耐药谱调查及耐药机制分析

    作者:陈杨久齐;胡春雨;方瑶;毛旭虎

    类鼻疽是一种由类鼻疽伯克霍尔德菌导致的热带医学疾病,其临床表现多样,也有“似百样病”之称,其病原已被美国CDC列为生物恐怖剂.类鼻疽在中国的海南、广西以及福建等地都有过报道,但由于其误诊率高,也未被列为法定报告的传染病,对类鼻疽的研究并未得以重视.类鼻疽菌对多种抗生素具有天然的耐药性,同时其基因组变异迅速,能产生新的耐药特性,造成的感染极易复发,治疗困难.目前临床上对类鼻疽的耐药检测还未建立统一的检测指标和判断标准,国内也还没有规范的类鼻疽抗生素用药指南.我们总结了中国2006-2014年公开发表文献中的类鼻疽临床用药及耐药结果,结合本室的类鼻疽临床资源库数据,对中国类鼻疽菌的耐药谱进行统计分析,总结用药规律,以期寻找合适的用药方案;同时,还分析了类鼻疽菌的可能耐药机制,探讨了类鼻疽耐药的深层次原因,以期为后续类鼻疽的治疗及用药指南的制定提供理论指导和临床借鉴参考.

  • 3种方法对鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的鉴定

    作者:康琳;高姗;周阳;辛文文;杨浩;方瑶;毛旭虎;王景林

    目的 用3种检测方法对同源性较高的鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,比较该3种检测方法的鉴定效果.方法 分别利用基于MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法、双重荧光定量PCR方法和16S rRNA基因序列分析方法对5株鼻疽伯克霍尔德菌和5株类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,综合判断鉴定结果,并与传统的形态学和生化鉴定结果比较,寻找更适合于该两种菌的鉴定方法.结果 在10株受试菌株中,2株排除是鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的可能,剩余8株之中,MALDI-TOF-MS方法正确鉴定了6株,双重荧光定量PCR方法正确鉴定了8株,16SrRNA基因序列分析方法正确鉴定4株.结论 MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法和双重荧光定量PCR方法对鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌具有很好的鉴定能力,16S rRNA基因序列分析方法不适合用于该2种菌的鉴定.

  • 1例输入性类鼻疽病例的溯源分析

    作者:方瑶;陈建国;朱叶飞;毛旭虎

    类鼻疽是一种由类鼻疽伯克霍尔德菌感染人体所引起的热带感染性疾病,主要流行于澳洲北部,东南亚和我国海南等地[1-3].类鼻疽的临床表现多样,有“似百样病”之称,可潜伏感染,也可急性起病,复发率高,耐药广泛,死亡率在20% ~ 50% [3-4].有研究对全球类鼻疽菌流行扩散形势和感染风险进行预测分析,报道在全球范围内2015年类鼻疽感染病例为16万人,死亡约9万人[4].

  • 类鼻疽伯克霍尔德菌BPSL1549基因敲除株的构建及鉴定

    作者:胡治强;方瑶;朱攀;任春艳;胡艺;马腾飞;毛旭虎

    目的 构建类鼻疽菌BPSL1549基因敲除株[BP(△BPSL1549)],建立有效的类鼻疽菌毒力基因敲除平台.方法 设计引物扩增类鼻疽菌BPSL1549基因上下游同源臂,连接至pK18 mobSacB自杀质粒上,通过大肠杆菌S17-1 λpir以接合方式将其转入类鼻疽菌中.利用同源重组原理替换野生株中的BPSL1549基因,经过蔗糖筛选靶标基因敲除株,并采用PCR、Western blot检测方法鉴定敲除株,利用动物模型评价敲除株表型变化.结果 BP(△BPSL1549)菌株与野生株的BPSL1549基因两侧同源臂片段PCR产物相比缺少600 bp,Western blot检测敲除株不表达BPSL1549基因编码蛋白,成功构建类鼻疽菌BPSL1549基因敲除株.动物实验证实敲除株相比野生株毒力显著降低(P<0.05).结论 利用同源重组原理成功构建类鼻疽菌BPSL1549基因敲除株,完善了类鼻疽菌敲除平台和评价体系.

  • 1例类鼻疽伯克霍尔德菌感染复发睾丸脓肿的临床分析

    作者:麦文慧;朱雄;陈海;韩朝辉;吴清艳;王日;陈柳红

    类鼻疽是由类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)所致的人兽共患传染病,流行于热带和亚热带地区[1].该病临床表现多样,常出现肺部感染、急性败血症和脏器脓肿等临床损害,病情进展急进,预后迁延,死亡率和复发率极高[2].为加强实验室人员和临床医生对该病的认识,现将海口市第三人民医院1例类鼻疽复发睾丸脓肿的病例进行临床分析,以积攒临床诊治经验.

  • 用猪去氧胆酸立体选择性合成脑甾醇的新方法

    作者:白晓杰;吴四维;周向东

    目的 探讨立体选择性合成脑甾醇的新方法.方法 以猪去氧胆酸为原料,经甲酯化、还原、Wittig反应、Sharpless不对称双羟化等9步反应合成脑甾醇,其中以乙酰链甾醇为关键中间体,以Sharpless不对称双羟化反应为关键步骤.结果 以52%的总收率、97% de的立体选择性合成脑甾醇,其结构用质谱(MS)、核磁共振氢谱(1HNMR)、核磁共振碳谱(13CNMR)、红外光谱(IR)和元素分析等证实.结论 新的合成方法立体选择性高、收率高、每个中间体均为晶体易于重结晶纯化,可用于大量合成脑甾醇.

  • PLGA纳米药物递送系统的建立及其对bFGF生物学活性的维持

    作者:李素铠;欧阳斌;徐晓秋;李培;甘翼博;王利元;涂兵;周强

    目的 探索聚(乳酸乙醇酸)[poly(DL-lactide-co-glycolide),PLGA]纳米粒的制备条件,并进一步验证该纳米粒对碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的负载效率和活性维持.方法 采用复乳法制备牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的PLGA纳米粒,研究PLGA浓度、PLGA/BSA质量比、水油体积比及内水相溶剂对纳米粒粒径、蛋白包封效率的影响,然后选择优化条件制备负载bFGF的PLGA纳米粒,通过细胞增殖实验验证bFGF的活性.结果 采用优化条件制备的纳米粒对蛋白的包封率达到70.0%,粒径(373±12) nm,Zeta电位(27.1 ±0.6) mV.蛋白得以缓慢释放,突释现象不明显.负载bFGF的PLGA纳米粒有较好的活性,对细胞的促增殖作用优于bFGF溶液组.结论 采用复乳法制备的PLGA纳米粒可用于负载生长因子实现缓释,并能较好地维持其生物学活性.

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