第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
千金藤素对乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬降解的影响
目的 探讨千金藤素对乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬的影响及其机制.方法 激光共聚焦显微镜观察千金藤素对转染了EGFP-LC3、tfLC3(mRFP-EGFP-LC3)质粒的MDA-MB-231细胞自噬体形成及自噬流变化的影响;Western blot检测自噬相关蛋白LC3B、p62以及Beclin1的表达水平.激光共聚焦显微镜观察千金藤素、Bafilomycin A1、Rapamycin分别对转染了EGFP-LC3、tfLC3(mRFP-EGFP-LC3)质粒的MDA-MB-231细胞自噬体形成及自噬流变化的影响;Western blot检测溶酶体相关膜蛋白LAMP1、LAMP2的表达.结果 千金藤素处理后细胞中的自噬体(EGFP-LC3荧光团)数量明显多于对照组[(30.40 ±6.42)vs(5.00±2.12),P＜0.01],自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、p62的表达也呈量效和时效增多.转染ffLC3质粒后,千金藤素组和Bafilomycin A1组红绿荧光重叠呈现较多的黄色荧光团,而Rapamycin组出现较多的红色荧光团.千金藤素联用Bafilomycin A1并未进一步升高p62和LC3B-Ⅱ蛋白的表达水平,但联用Rapamycin明显升高了LC3B-Ⅱ蛋白的表达水平,同时,逆转了Rapamycin导致的p62蛋白表达水平减少.千金藤素既不影响对溶酶体的染色,也不减少LAMP1、LAMP2蛋白的表达水平,但影响了mRFP-LC3和mGFP-LAMP1的共定位.结论 千金藤素通过阻断自噬体与溶酶体的融合抑制MDA-MB-231细胞自噬体降解.
-
HBx抑制RXRα表达对肝细胞癌DNMT3a表达的影响及初步机制研究
目的 探讨维甲酸X受体α(retinoid X receptor α,RXRα)在乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)上调肝细胞癌DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferases 3a,DNMT3a)表达中的作用及机制.方法 采用RT-PCR和Western blot检测12例正常肝组织、56例HBV阳性的肝细胞癌和癌旁组织中DNMT3a、RXRα的基因和蛋白表达变化;在培养的SMMC-7721细胞中,转染HBx基因和RXRα基因,观察对其DNMT3a表达的影响;在转染HBx基因的SMMC-7721细胞中,分别加入信号通路阻断剂,观察何种信号通路在HBx调节RXRα的表达中发挥作用.结果 与正常肝组织相比,肝癌组织与癌旁组织中DNMT3a的基因和蛋白表达量显著升高(P＜0.01),肝癌组织与癌旁组织中RXRα的基因和蛋白表达量显著降低(P＜0.01);在SMMC-7721细胞中,HBx的过表达使RXRα的蛋白表达量显著降低(P＜0.01),DNMT3a的蛋白表达量显著升高(P＜0.01),而RXRα与HBx共转染,则可降低HBx升高的DNMT3a蛋白表达量(P＜0.01);MKK/MEK抑制剂PD98059和p38 MAPK抑制剂SB203580可显著升高HBx下调的RXRα基因和蛋白表达(P＜0.01).结论 HBV产生的HBx蛋白可能通过MAPK信号通路,降低RXRα表达,引起促癌基因DNMT3a蛋白含量增加.
-
雌激素受体α36介导雌激素促进甲状腺乳头状癌细胞增殖的分子机制
目的 研究雌激素受体α36(estrogen receptor alpha-36,ERα36)介导雌激素促进甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖的分子机制及相关信号通路.方法 采用免疫组化(S-P)检测ERα36在34例人PTC组织标本及其21例配对癌旁组织标本中的表达;梯度浓度E2(0、10-7、10-8、10-9 mol/L)处理PTC细胞株K-1和BCPAP后,Western blot检测两种细胞株中ERα36的表达;10-8 mol/L E2处理后,Western blot检测两种细胞株ERK1/2和AKT磷酸化水平的变化,以及ERα36-siRNA对其的抑制作用;梯度浓度的E2处理BCPAP细胞后,MTT法检测细胞增殖和ERα36-siRNA对增殖的抑制作用.结果 在人PTC组织中ERα36的阳性表达率为82.4％,明显高于癌旁组织(P＜0.05).PTC细胞株K-1和BCPAP均表达ERα36;10-8 mol/L E2处理细胞后,ERα36的表达增高,且呈时间依赖性.E2能促进BCPAP和K-1细胞ERK1/2和AKT蛋白磷酸化水平增高,且处理15 ain时BCPAP细胞明显,10 min时K-1细胞明显,而ERα36-siRNA能抑制E2的诱导效果;E2促进BAPAP细胞增殖,ERα36-siRNA则抑制E2的诱导效果.结论 ERα36通过ERK/AKT途径介导雌激素促进PTC细胞增殖.
-
贵阳市多家医院感染产ESBLs大肠埃希菌基因分型研究
目的 分析贵阳市多家医院临床分离的大肠埃希氏菌中产CTX-M-9型产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamase,ESBLs)的基因分型.方法 收集贵阳市多家医院临床分离的大肠埃希菌74株,经确证非重复产ESBLs大肠埃希菌47株,将已扩增的PCR产物进行基因测序并用NCBI数据库中的BLASTN比对测序结果,从而进行基因分型.结果 74株大肠埃希菌中检出47株产超广谱β-内酰胺酶.PCR扩增结果显示47株ESBLs基因阳性菌株中,33株携带CTX-M-9组基因.随机选取部分PCR扩增阳性产物进行DNA测序分析,结果显示含CTX-M-9组基因阳性菌株的亚型为CTX-M-14型.结论 CTX-M-9型耐药基因为本研究产ESBLs大肠埃希菌主要基因,CTX-M-14型为其变异亚型.
-
白藜芦醇通过激活PKA-PLIN2通路促进HepG2细胞脂滴脂解
目的 明确围脂滴蛋白2(perilipinin-2,PLIN2)在白藜芦醇(resveratrol,RSV)改善脂肪变性HepG2细胞脂滴代谢中的作用机制.方法 0.2 mmol/L棕榈酸处理HepG2细胞24 h,建立肝细胞脂肪变性模型.使用0、10、20、40、80 μmol/L RSV及转染PLIN2 siRNA或PKI过表达质粒后,再用40 μmol/L RSV干预24 h,油红O染色检测脂滴形成情况,酶法检测细胞内甘油三酯以及细胞外游离甘油含量,Western blot检测PLIN2蛋白表达,实时定量PCR检测PLIN2 mRNA表达.结果 RSV可以降低脂肪变性HepG2细胞脂滴蓄积程度,促进脂滴的脂解.RSV可以通过促进磷酸化增强PKA的活性,并呈浓度依赖性地上调PLIN2 mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05).抑制PKA活性或下调PLIN2表达后,RSV促进脂肪变性HepG2细胞脂解的作用显著减弱(P＜0.05).结论 RSV通过激活PKA-PLIN2通路促进HepG2细胞脂滴脂解过程,从而可能改善非酒精性脂肪性肝病.
-
载LOX-1-siRNA靶向超声微泡的制备及其对大鼠动脉粥样硬化斑块的生物学作用
目的 构建载血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1 (lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)-siRNA靶向超声微泡,研究其对大鼠动脉粥样硬化斑块的生物学作用.方法 薄膜-水化-超声乳化法构建载LOX1-siRNA纳米级超声微泡(nanobubbles,NBs-siRNA).从Wistar大鼠体内分离、培养动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs).通过凝胶迁移阻滞实验与siRNA细胞内化实验验证超声微泡可运载siRNA进入靶细胞内;qRT-PCR及Western blot检测LOX1的mRNA和蛋白表达水平;油红O染色观察细胞内脂质聚集情况.构建Wistar大鼠动脉硬化模型,实验组经鼠尾静脉注射含有LOX-1-siRNA的NBs-siRNA微泡100 μg,并使用超声仪照射.治疗15 d后,取标本HE染色后与对照组对比动脉硬化斑块病变程度;免疫组化法检测斑块组织中LOX-1表达情况.结果 凝胶迁移阻滞实验结果显示,证实NBs与siRNA结合成功.激光共聚焦显微镜观察证实NBs可通过超声照射介导siRNA内化入VSMCs之中.qRT-PCR及Western blot实验结果显示实验组VSMCs LOX-1 mRNA及蛋白表达水平降低(P＜0.01).油红O染色显示实验组细胞泡沫化较oxLDL组减弱.组织标本HE染色表明实验组大鼠动脉斑块病变中内膜增厚、中膜萎缩及炎细胞浸润情况较对照组减轻;免疫组化实验结果显示,实验组动脉斑块中LOX-1表达水平较各对照组降低(P＜0.01).结论 成功制备能够有效运载LOX-1-siRNA的超声微泡,体内外实验证实该微泡可以在超声辐照下内化入靶细胞内部,下调LOX-1表达,减少泡沫细胞形成,降低动脉硬化斑块病变的严重程度.
-
载脂蛋白E拟肽COG1410对蛛网膜下腔出血后自噬和凋亡的影响
目的 研究新一代载脂蛋白(apolipoprotein E,apoE)拟肽COG1410的应用对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤(early brain injury,EBI)期间大脑自噬及凋亡的影响.方法 选用颈内动脉穿刺法建立小鼠SAH模型,首先观察EBI期间伤侧大脑半球自噬、凋亡及相关信号蛋白的表达变化,然后针对自噬水平活跃的时间点进行COG1410给药,采取Garcia评分评价SAH及给药后小鼠的神经功能变化,利用Western blot测定自噬、凋亡及相关信号分子蛋白的表达量,并使用免疫荧光染色观察皮层神经元的凋亡变化情况.结果 ①在SAH后EBI期间,与Sham组相比,伤侧大脑半球的自噬水平在SAH后6h开始增加(P＜0.05),并在24 h达到高峰(P＜0.01),随后逐渐下降,信号分子p-GSK-3β水平也有类似的变化趋势;给予小鼠COG1410后,SAH后24 h的大脑自噬活动被进一步增强(P＜0.05).②在SAH后的EBI期间,伤侧大脑半球整体凋亡水平变化并不完全和自噬及p-GSK-3β水平变化同步,其在EBI后期仍保持相对高值,但有减弱的趋势;给予COG1410后,伤侧大脑半球和皮层神经元凋亡水平均被下调(P＜0.05).③与Sham组(16.50±1.05)比较,SAH组的Garcia评分(11.17±1.83)明显降低(P＜0.01),COG1410的干预能显著改善SAH组的Garcia评分(15.17 ±0.75)(P ＜0.01),但COG1410的干预对SAH分级影响并不大.结论 COG1410的应用可能通过磷酸化GSK-3β增强SAH后EBI期间大脑的自噬活动,减弱神经元的凋亡活动,并改善模型小鼠的神经功能.
-
AGEs通过JAK2/STAT3信号通路诱导结肠癌SW480细胞增殖、侵袭及上皮间质转化
目的 观察糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响,并探讨其相关机制.方法 将结肠癌SW480细胞分为对照组、AGEs组(200 μg/mL AGEs)、AGEs(200 μg/mL)+AG490(50 μmol/L)组,CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,Transwell实验检测细胞体外侵袭能力,划痕实验检测细胞体外迁移能力.不同浓度(0、50、100、200 μg/mL) AGEs和200 μg/mL AGEs、50 μmol/L AG490单独处理及二者联合处理SW480细胞后,Western blot检测上皮间质转化相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及JAK2/STAT3信号通路相关分子的变化.结果 与对照组比较,AGEs能明显促进结肠癌SW480细胞的增殖,减少G1/S期阻滞,抑制凋亡,增强体外的侵袭、迁移能力(P＜0.05).与AGEs组比较,AGEs+ AG490组结肠癌SW480细胞增殖减少,G1/S期阻滞增加,凋亡增加,侵袭、迁移能力降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测结果显示,AGEs处理结肠癌SW480细胞后E-cadherin表达降低,N-cadherin、Vimentin、p-STAT3、p-JAK2表达升高,而AG490可逆转AGEs对结肠癌SW480细胞的作用.结论 AGEs能够通过JAK2/STAT3信号通路促进结肠癌SW480细胞的增殖,抑制凋亡,增强侵袭、迁移能力,促进上皮间质转化.
-
Notch1调控小鼠脑出血后海马神经发生与神经功能恢复
目的 探讨Notch1在小鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分裂方式影响中的作用以及对小鼠ICH后远期神经功能恢复的影响.方法 利用免疫荧光、Western blot、转轮实验和平衡木实验等方法检测小鼠脑出血后海马NSCs的分裂方式情况、Notch1蛋白表达情况和神经功能恢复情况.结果 与Sham组比较,ICH导致小鼠海马NSCs水平分裂的比例明显降低(P＜0.01),同时发现小鼠海马中Notch1的表达也明显降低(P＜0.05).促进ICH小鼠海马中Notch1的表达能够有效地增加小鼠海马NSCs水平分裂的比例(P＜0.01),维持NSCs的数量,同时能够有效地增加ICH后小鼠转轮实验掉落的潜伏期以及小鼠海马中DCX阳性细胞数(P＜0.01),维持神经发生的持续性,另外还能够减少ICH后小鼠平衡木行走实验腿的滑落次数(P＜0.01).结论 Notch1信号可以调控脑出血后小鼠海马NSCs的分裂方式以及促进远期神经功能恢复.
-
循环肿瘤细胞分型检测在非小细胞肺癌中的应用
目的 探讨非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的数量和型别分布,分析其与临床病理特征之间的关系.方法 采用新CanPatrolTM CTCs分型检测技术,基于滤膜法收集221例非小细胞肺癌患者外周血中的CTCs,通过RNA原位杂交、分支DNA技术对循环肿瘤细胞内的上皮、间质标志物mRNA进行荧光检测,将CTCs分成上皮型、混合型、间质型,分析其与年龄、性别、临床病理分期和是否远处转移的关系.结果 90.05％非小细胞肺癌患者检出CTCs,3个型别里混合型CTCs检出比例高.总CTCs,上皮型、混合型、间质型CTCs数量与临床分期和远处转移有关(P＜0.05),与年龄和性别无关(P＞0.05).Logistic回归分析结果显示,间质型CTCs是临床分期和远处转移的危险因素.结论 在外周血循环肿瘤细胞检测中,数量和分型均有重要价值,其中间质型CTCs可能为非小细胞肺癌患者肿瘤分期及远处转移提供重要线索.
-
核苷(酸)类似物抗病毒治疗对早期乙型肝炎病毒相关性慢加急性肝衰竭患者预后的影响
目的 探讨核苷(酸)类似物[nucleot (s) ides analogues,NAs]抗病毒治疗对早期乙型肝炎病毒相关性慢加急性肝衰竭(hepatitis B virus associated acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)预后的影响.方法 收集2002年1月至2012年12月第三军医大学西南医院感染病研究所住院的早期HBV-ACLF患者618例,其中男性568例,女性50例,年龄12～77(41.29±11.38)岁.根据有无联合NAs抗病毒治疗将患者分为抗病毒组(546例)和对照组(72例).采用多因素COX回归分析NAs抗病毒治疗对早期HBV-ACLF患者预后的影响.回顾性分析比较基线特征和治疗6个月后的自然生存率.结果 多因素COX回归分析表明是否抗病毒治疗、性别、年龄、血浆Na+浓度、血清总胆红素和白细胞是影响早期HBV-ACLF患者预后的独立影响因素.抗病毒组的自然生存率显著高于对照组(52.0％ vs36.1％,P＜0.05).不同抗病毒方案的自然生存率依次为:恩替卡韦(56.4％)＞拉米夫定联合阿德福韦酯(55.2％)＞拉米夫定(50.8％),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 早期HBV-ACLF患者使用NAs抗病毒治疗可提高自然生存率.
-
基于张量的形态学测量在轻度认知障碍患者大脑灰质萎缩诊断中的价值
目的 探索轻度认知障碍患者的大脑灰质结构萎缩的规律,区分不同轻度认知障碍亚型的灰质结构萎缩模式的异同.方法 数据来自阿尔茨海默病的神经影像(Alzheimer's disease neuroimaging initiative,ADNI)数据库,包括34例正常人、22例稳定性轻度认知障碍和20例进展性轻度认知障碍患者60个月纵向高分辨MRI 3D T1W结构像.基于张量的形态学(tensor-based morphology,TBM)测量方法进行数据分析,利用DARTEL配准过程中得到的雅克比矩阵计算出行列式的值和迹,并对得到的特征参数进行组内方差分析,然后采用多重比较的配对t检验,获取相对首次扫描时间点时不同跟踪时间点大脑灰质萎缩的规律及特征.结果 采用两种参数得到的结果相对一致,3组被试数据均表现为随着时间的推移,大脑灰质萎缩区域逐步扩大,萎缩程度逐步增加,尤其对于颞叶、额叶、海马和扣带回等与认知相关的区域萎缩为明显.但是在相同时间点,相对于正常组来说,稳定型的轻度认知障碍患者组大脑灰质萎缩程度较为严重,进展型的轻度认知障碍患者组大脑灰质萎缩为严重.结论 TBM测量法得到的大脑灰质萎缩差异可以用于区分稳定性、进展性轻度认知障碍以及正常人大脑结构,可指导阿尔茨海默病的早期诊断和相关临床干预.
-
两种术式治疗女性压力性尿失禁效果和安全性的随机对照研究
目的 通过与改良的经闭孔阴道无张力尿道中段悬吊术(modified tension-free vaginal tape-obturator,TVT-Abbrevo)对比,研究可调节单切口微小吊带(adjustable single-incision sling,TVT-Ajust)治疗女性压力性尿失禁的疗效和安全性.方法 筛选2015年3月至2016年7月在我院泌尿外科明确诊断为压力性尿失禁的女性患者60例,年龄(50.5±7.6)岁,体质量指数(24.9±3.3),按随机数字表法分为TVT-Abbrevo组和TVT-Ajust组(n=30).术前评估患者年龄、体质量指数、分娩次数、大尿流率、腹压漏尿点压等一般情况;对比分析手术时间、术中出血量、是否合并有并发症、术后疼痛、主客观治愈率、生活质量等指标.结果 TVT-Ajust组术中出血量显著少于TVT-Abbrevo组(P＜0.05);术后排尿困难有4例,每组各有2例,其中TVT-Ajust组合并有1例阴道吊带腐蚀;TVT-Ajust组术后4周疼痛程度显著小于TVT-Abbrevo组(P＜0.05);TVT-Abbrevo组与TVT-Ajust组术后主观治愈率和客观治愈率差异无统计学意义(P＞0.05);2组术后患者生活质量较前均有明显提升(P＜0.05);2种手术方式均不能显著改善急迫性尿失禁症状.结论 TVT-Ajust治疗女性压力性尿失禁是安全、有效的,与TVT-Abbrevo相比,术中出血量小、术后疼痛程度及术后中重度疼痛发生率明显减小、术后恢复快,但长期疗效需进一步观察.
-
尿足细胞数量及podocalyxin蛋白与IgA肾病的相关性
目的 探讨尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达与IgA肾病发病、发展的相关性,探索IgA肾病的诊断、病情和预后评估提供的新指标.方法 采用间接免疫荧光法检测陕西省第四人民医院体检的健康人群和150例IgA肾病患者尿足细胞数量及podocalyxin蛋白表达水平,观察健康人群和IgA肾病患者尿足细胞数量差异和不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达水平差异,分析不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达与肾小球滤过率、24 h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮等临床指标的相关性.结果 健康人群组尿沉渣细胞涂片染色标本未见尿足细胞,而IgA肾病组尿沉渣细胞涂片染色标本尿足细胞数量为每20个高倍视野(12.54±2.89);不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者的尿足细胞数量、podocalyxin蛋白表达和24 h尿蛋白定量比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.835 3,P＜0.05),podocalyxin蛋白表达与24 h尿蛋白定量呈负相关(r =0.886 8,P＜0.05).结论 尿足细胞数量、podocalyxin蛋白表达与IgA肾病的发病、发展密切相关.
-
马岛战争和二战中海战伤发生特点及其对我军海战伤救治的启示
Casualties in naval battles,such as Malvinas War and World War Ⅱ,demonstrate different characteristics from those that occur in land battles,and are characterized by higher rate of mass casualties,higher incidences of burns and inhalation injuries,and higher prevalence rates of frozen injuries,drowning,seawater immersion injuries and combat stress reaction.Enlightenments of these features for our naval combat casualties care include:①Simple and fixed procedures should be established for mass casualties.②For burns and inhalation injuries,treatment measures should be set up,and related facilities should be equipped in warships and hospital ships.③Targeted strategies should be developed for frozen injuries,drowning,seawater immersion injuries and combat stress reaction.However,because of the improved killing effect of modern weapons and the changes of our national security strategy,the characteristics of casualties in our possible naval combats in the future differ from the above-mentioned features.So,in consideration of our national security strategy,features of various ships in modern naval combat,killing characteristics of different weapons and possible combat areas,we need to establish a reliable prediction model for casualties in modern offshore and far-offshore naval battles,and develop navel combat care skills and medical support strategies.
-
军事应激研究进展与类战争心身应激模型建立的思考
Military stress is an important factor affecting the combat effectiveness of the army,so it is of great significance to carry out medical researches on this field.This paper reviewed the progress of military stress reported by our and foreign armies.Through our analysis,it is found that extreme psychology in combatlike stress is a key part of military stress medicine.Therefore,establishing a scientific and effective model of combat-like psychosomatic stress is essential to promote the development of medical researches in military stress.
