第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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间接ELISA测定人血IgM型抗-A抗体方法的建立及应用
目的 建立间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法,快速定量检测人血IgM抗-A抗体.方法 通过制备A型红细胞膜蛋白作为捕获抗原,采用棋盘滴定实验筛选出佳抗原抗体工作浓度,建立人血IgM型抗-A抗体定量检测方法.结果 所构建的间接ELISA定量检测方法检测下限为0.02 μg/mL;批内变异系数及批间变异系数均小于10％;通过ROC曲线分析,当临界D(450)为0.259时,ROC曲线下面积大,为0.947,检测灵敏度为87.7％,特异性为100％.采用本研究自建的ELISA检测57例B型血浆标本的IgM型抗-A抗体浓度为(1.71±1.95) μg/mL,定量结果与经典半定量效价评分呈正相关(r =0.71,P＜0.01).结论 成功建立了人血IgM型抗-A抗体定量检测方法.
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血红素氧合酶-1通过NF-κB信号通路抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡
目的 探讨血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的作用及机制.方法 采用免疫组化和Western blot检测正常(LVF组,标本来源于年轻的椎体骨折行手术治疗的患者)及退变(IDD组,标本来源于椎间盘退变性疾病行手术治疗的患者)人椎间盘髓核组织中HO-1和磷酸化的P65(p-P65)的表达差异;体外培养退变髓核细胞,通过IL-1β处理增加髓核细胞凋亡,再用载HO-1质粒的慢病毒及小干扰RNA处理髓核细胞后检测凋亡的变化;通过P65抑制剂PDTC抑制p-P65表达后检测髓核细胞凋亡的变化.结果 免疫组化结果显示,HO-1在IDD组中的阳性表达率为(18.58 ±0.59)％,明显低于LVF组(58.26 ±2.48)％ (P ＜0.05),而p-P65在IDD组中的阳性表达率为(40.27±2.03)％,明显高于LVF组(19.75±1.98)％ (P ＜0.05).IL-1β能增加退变髓核细胞的凋亡,同时引起p-P65表达增加,HO-1-siRNA抑制HO-1表达后可以进一步提高髓核细胞凋亡率(P＜0.05),而过表达HO-1处理细胞后能够降低IL-1β引起的凋亡增加,同时降低p-P65表达(P＜0.05).使用P65抑制剂PDTC抑制髓核细胞P65信号通路后,髓核细胞凋亡率明显降低,此时沉默HO-1不能增加髓核细胞凋亡.结论 HO-1能够通过NF-κB通路抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡.
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肘关节有限元模型模拟碰撞损伤的生物力学特性分析
目的 利用有限元法建立肘关节的三维有限元模型,动态模拟肘关节以不同角度撞击地面,分析肘关节的生物力学特性.方法 选取1名健康青年男性志愿者,肘关节屈曲90°行CT扫描,应用Mimics、Geomagic、UG、Hypermesh等软件对所得数据进行三维重建,建立肘关节的三维有限元模型;在Abaqus软件中模拟肘关节以不同角度(前臂与地面呈30°、60°、90°)撞击地面时,计算骨皮质破裂的临界速度及显著破裂时的速度,分析应力传导及其大小、分布等的变化规律.结果 肘关节屈曲90°状态发生正面碰撞时应力传导主要集中在肱骨髁、肱骨滑车及尺骨鹰嘴等部位,而桡骨头应力传导较小;当肘关节与地面撞击(前臂与地面分别呈30°、60°、90°)时,骨皮质破裂临界速度分别为11.4、9.3、13.8 m/s;前臂与地面分别呈30°、60°撞击,撞击速度分别达15.0、13.0 m/s时,尺骨鹰嘴呈粉碎性骨折;前臂与地面呈90°撞击,撞击速度达18.0 m/s时,肱骨远端呈明显横行骨折.结论 应用有限元建模分析软件构建的人体肘关节有限元模型可用于外力作用下肘关节损伤机制的研究,也可用于肘关节损伤时暴力的大小、速度、方向的推断.
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下调Notch3表达对骨肉瘤细胞生物学特性的影响
目的 观察Notch3在骨肉瘤细胞中的表达及下调Notch3表达后对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响,探讨Notch3在骨肉瘤细胞生物学功能中的作用.方法 体外培养人骨肉瘤细胞MG63、Saos2、U20S,采用Real-time PCR和Western blot检测3种骨肉瘤细胞系中Notch3的mRNA和蛋白表达水平;利用siRNA敲低Notch3在骨肉瘤U20S细胞中的表达,并将细胞分为siNotch3组和阴性对照组,检测下调Notch3的表达后骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭、迁移等生物学特性的变化.结果 Notch3在骨肉瘤细胞MG63、Saos2、U20S中均呈阳性表达,并且在低级别骨肉瘤细胞系MG63中的表达明显低于高级别细胞系Saos2和U20S(P ＜0.05),下调Notch3的U20S细胞(siNotch3组)增殖、侵袭、迁移能力较阴性对照组减弱,凋亡率增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在骨肉瘤细胞U20S中下调Notch3的表达可明显抑制细胞的增殖、侵袭、迁移能力,促进凋亡.Notch3可能是Notch 通路在骨肉瘤中的关键受体之一,并参与了骨肉瘤的发生、发展.
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果糖联合氧嗪酸钾建立高尿酸血症大鼠模型
目的 采用单纯果糖及联合氧嗪酸钾喂养的方法诱导高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)大鼠模型,比较不同模型的稳定性和适用性.方法 雄性SD大鼠60只,应用随机数字表法分为6组,每组10只,分别予以5％果糖水喂养(5％ Fru组)、5％果糖水+氧嗪酸钾处理(5％ FO组)、10％果糖水喂养(10％ Fru组)、10％果糖水+氧嗪酸钾处理(10％ FO组)、氧嗪酸钾处理(Oaps组)、清水喂养对照组(Con组).实验造模14周,每周末检测大鼠血清尿酸(serum uric acid,SUA)、血清尿素氮(serum ureanitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)水平,实验结束后观察大鼠肝、肾组织学变化.结果 5％ FO组、10％ Fru组、10％ FO组均能快速升高SUA(P＜0.01);在第10、11周10％ Fru组SUA水平显著低于5％ FO组、10％ FO组(P＜0.01).10％ Fru组、10％ FO组BUN和SCr水平分别在第6、7周开始升高(P＜0.01).10％ Fru组、10％ FO组肾脏组织学改变明显;5％ FO组偶见轻微组织学改变;各组均未发现肝脏有明显组织学变化.结论 果糖联合氧嗪酸钾能够成功建立稳定、高效的高尿酸血症大鼠模型,不同果糖浓度对肾脏损伤程度不同,可根据后续研究选择合适的动物模型.
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miR-19a对慢性压迫性损伤大鼠神经病理性疼痛的影响及其机制
目的 观察miR-19a对慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用,并探讨其潜在机制.方法 75只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组,行假手术;CCI组,坐骨神经结扎法构建CCI大鼠模型;CCI+inhibitor组,CCI大鼠鞘内注射miR-19a inhibitor.于术前当天(0 d)和术后3、7、14、21 d观察机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热刺激反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的变化.采用RT-qPCR检测腰椎脊髓中促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β mRNA及JAK2和STAT3表达的变化,Western blot检测SOCS3蛋白水平的表达,荧光素酶报告基因技术验证miR-19a的靶基因.结果 与假手术组比较,CCI组大鼠脊髓的miR-19a表达显著上升(P＜0.05),MWT显著降低,TWL显著缩短(P＜0.05).与CCI组比较,CCI+ inhibitor组MWT显著升高,TWL显著延长(P＜0.05).RT-qPCR检测结果表明,CCI可显著促进促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β mRNA的表达;而与CCI组比较,CCI+inhibitor组IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达水平均显著降低(P＜0.05).另一方面,与假手术组比较,CCI组大鼠术后脊髓中JAK2和STAT3 mRNA水平明显增加;与CCI组比较,CCI+ inhibitor组术后脊髓中JAK2和STAT3的表达显著降低(P＜0.01).荧光素酶报告基因检测结果表明JAK2/STAT3上游的负调控因子SOCS3是miR-19a的靶基因.Western blot检测结果表明CCI组大鼠脊髓中SOCS3水平较假手术组升高,且SOCS3水平在CCI术后第7天达到高,而后呈下降趋势;与CCI组比较,CCI+inhibitor组SOCS3表达明显上升(P＜0.05).结论 miR-19a inhibitor能缓解CCI大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏,该作用与SOCS3介导的JAK2/STAT3通路有关.
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长链非编码RNA Gm4419通过NF-κB信号通路调控高糖下系膜细胞炎症因子的表达
目的 探讨长链非编码RNA Gm4419通过核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路对高糖培养的肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响.方法 在高、低糖培养的小鼠肾小球系膜细胞中,采用RT-qPCR检测Gm4419的亚细胞分布及NF-κB亚基p50和p65的表达水平;采用RT-qPCR及免疫荧光检测上、下调Gm4419后炎症相关因子TNF-α和MCP-1的表达;采用生物信息技术分析Gm4419与p50和p65关系;采用Western blot检测上、下调Gm4419后细胞核中p50和p65的表达水平,以及检测特异性p50抑制剂对过表达Gm4419影响MCP-1表达的作用.结果 Gm4419在肾小球系膜细胞高糖组表达水平显著高于低糖组(P＜0.05),且主要分布在系膜细胞的细胞质中.同时,在低糖组过表达Gm4419后MCP-1、TNF-α表达水平显著增加(P＜0.01);而在高糖组沉默Gm4419后MCP-1、TNF-α表达水平显著减少(P＜0.01).此外,Gm4419与NF-κB亚基p50和p65均存在潜在结合位点,过表达Gm4419后胞核p50和p65蛋白表达水平显著增加,NF-κB活化增强(P＜0.01);而沉默Gm4419后胞核p50和p65蛋白表达水平显著降低,NF-κB活化减弱(P＜0.01),且过表达Gm4419增加MCP-1表达的效应可被特异性p50抑制剂阻断.结论 Gm4419可能在促进高糖下系膜细胞炎症因子表达中扮演重要角色,其机制可能涉及NF-κB信号通路.
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131I-RP215McAb分子探针的制备、鉴定及荷人肺腺癌裸鼠放射免疫显像
目的 制备靶向肺腺癌细胞表面碳水化合物相关抗原(carbohydrate antigen 215,CA215)的核素分子探针131I-RP215单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),鉴定其理化性质并探讨其在荷瘤裸鼠模型中的体内分布情况和放射免疫显像特点.方法 采用氯胺T法对McAb RP215进行131I标记,Sephadex G25M柱纯化标记抗体,并鉴定其理化特性,观察该抗体标记物在荷A549裸鼠模型中的生物分布及放射免疫显像情况.结果 131I-RP215 McAb标记率为(91.03 ±2.36)％,纯化后的放化纯度为(93.15±1.40)％,比活度(3.37±0.42) MBq/μg;具有较好的稳定性及免疫活性.荷瘤裸鼠体内生物分布及SPECT显像结果显示,131 I-RP215 McAb能够在肿瘤组织中选择性浓聚,131I-RP215 McAb作用24h时,肿瘤/肌肉比达高,且瘤体显影清晰.结论 成功制备了特性理想的131I-RP215 McAb分子探针,在荷人肺腺癌裸鼠模型中有较好的显像效果.
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HBV相关性肝癌患者CD19+CD24+CD38+调节性B细胞和IL-10的检测及临床价值
目的 检测HBV相关性肝癌患者CD19+ CD24+ CD38+调节性B细胞(Bregs细胞)的分布频率及血清白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平并分析其临床意义.方法 收集93例HBV相关性肝癌患者、47例HBV相关性肝硬化患者和57例健康体检者的外周血,采用流式细胞术检测CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞分布频率,化学发光法检测血清IL-10水平,并分析其与疾病分期、肿瘤个数、血管侵犯等临床指标的关系;同时收集20例HBV相关性肝癌患者的癌组织、癌旁组织和远癌组织,采用流式细胞术检测组织中CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞分布频率,并分析其与肿瘤位置的相关性.结果 HBV相关性肝癌外周血CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞显著高于肝硬化组和健康对照组,且HBV相关性肝癌晚期(C+D期)患者显著高于早期(0+A期)和中期(B期)患者(P ＜0.05,P＜0.01);HBV相关性肝癌和HBV相关性肝硬化患者血清IL-10水平显著高于健康对照组(P＜0.01);HBV相关性肝癌外周血CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞分布频率和血清IL-10水平与肿瘤个数、是否血管侵犯有密切关系;HBV相关性肝癌患者外周血CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞分布频率与血清IL-10呈正相关(r =0.46,P＜0.01);HBV相关性肝癌患者癌组织和癌旁组织CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞频率显著高于远癌组织(P＜0.01).结论 CD19+ CD24+ CD38+ Bregs细胞可能通过分泌IL-10在HBV相关性肝癌免疫微环境中发挥调节作用,参与肿瘤的发生、发展.
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多模态影像神经导航联合术中超声在切除颅内胶质瘤中的应用
目的 探讨多模态影像神经导航联合术中超声在切除颅内胶质瘤中的临床应用及其价值.方法 回顾性分析本院2007年12月31日至2014年6月30日在多模态影像神经导航联合术中超声辅助下手术治疗的42例颅内胶质瘤患者临床资料,对比手术前后胶质瘤切除程度及胶质瘤继发癫痫的控制情况.结果 全部患者术后无血肿、感染、偏瘫.术后48 h复查MRI,结果显示肿瘤全切除34例,大部切除8例.术后1年评估癫痫控制情况,Engel's Ⅰ级17例,Engel'sⅡ级11例,Engel'sⅢ级5例.在保护神经功能的同时,切除肿瘤,控制癫痫发作,临床效果显著.结论 多模态影像神经导航联合术中超声可以实现大程度切除肿瘤及致痫灶,降低术后神经功能障碍的发生率.
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初期皮质性白内障的视觉质量评估
目的 通过视功能(visual function,VF)问卷、生存质量(quality of life,QOL)问卷调查、对比敏感度(contrast sensitivity,CS)和对比度视力(contrast visual acuity,CVA),探讨初期皮质性白内障患者的视觉质量.方法 回顾性分析2016年7月至2017年1 1月于我院眼科白内障门诊就诊的佳矫正视力≥0.8 100例(160眼)初期皮质性白内障患者的临床资料,正常对照组选择年龄、性别与实验组相匹配的正常人100例(140眼).行VF、QOL问卷调查评分,检测CS(低频、中频、高频),同时采用视觉灵敏度测量仪测试不同CS(50％、35％、25％)视标的视力,并与正常对照组比较.结果 初期皮质性白内障组的VF值(71.37 ±5.54)、QOL值(88.38 ±5.07)均显著低于正常对照组(P＜0.05).初期皮质性白内障组在对比度为50％、35％、25％下CVA[分别为(0.48 ±0.15)、(0.37±0.1 1)、(0.25±0.09)]均显著低于正常对照组[分别为(0.83 ±0.10)、(0.79 ±0.10)、(0.70 ±0.12),P＜0.05].初期皮质性白内障患者中频(6 c/d) CS值(35.05 ± 26.47)、高频(12、18 c/d) CS值[分别为(3.62 ±3.97)、(0.00±0.00)]显著低于正常对照组中频(6 c/d) CS值(94.75±40.45)、高频(12、18 c/d) CS值[分别为(30.04 ±17.18)、(10.29 ±5.69),P＜0.05].初期皮质性白内障组低频CS值(61.67 ±39.50)与正常对照组低频CS值(107.58 ±40.25)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 初期皮质性白内障患者虽然远视力尚可,但VF、QOL问卷评分及CS、CVA较同年龄段正常人明显异常.VF、QOL问卷和CS、CVA能反映普通视力检查不能辨识的初期皮质性白内障患者的视功能差异.
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经颈静脉不同门静脉分支穿刺分流对肝硬化患者血氨水平的影响
目的 观察经颈静脉肝内门体分流(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPSS)术后患者不同门静脉分支血氨的浓度,探讨不同门脉分支分流对肝硬化患者血氨水平的影响.方法 回顾性分析2016年1-12月本科收治的因消化道出血接受TIPSS的52例肝硬化患者的临床资料.根据TIPSS穿刺部位分为门脉左支组和门脉右支组,术中采集门静脉左支、右支及肠系膜上静脉和脾静脉的血液样本,检测不同部位血氨浓度,并对患者术前和术后1d、1个月、3个月和半年的动脉血和静脉血的血氨水平进行检测和比较.结果 门静脉系统中肠系膜上静脉的血氨浓度高,门脉左支的平均血氨浓度显著低于右支(P＜0.05).TIPSS术后动脉血氨浓度明显升高,术后1 d[(57.1±12.7) μmol/Lvs(47.1±9.9)μmol/L]和1个月[(51.4±11.8) μmol/L vs (43.6±9.2) μmol/L]时右支组患者动脉血氨明显高于左支组(P＜0.01);而静脉血氨浓度变化不明显(P＞0.05).结论 TIPSS手术能明显升高患者的动脉血氨浓度,经左支分流对血氨的影响小于经右支分流.
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心肌声学造影对冠脉狭窄临界病变的功能性诊断价值
目的 探讨心肌声学造影对冠脉狭窄临界病变功能性评价的有效性及可靠性.方法 前瞻性纳入2017年6-10月本院心内科经冠状动脉造影证实冠脉狭窄介于50％～70％的患者70例,行心肌声学造影(myocardial contrast echocardiography,MCE)检查并以金标准血流储备分数(fractional flow reserve,FFR)为自身对照,结合其心脏结构、血脂、肾功、糖化血红蛋等生化指标进行对比分析.结果 ①70例患者中共78支血管为临界病变,其中左前降支(the left anterior descending,LAD)病变53处(67.9％),左回旋支(the left circumflex coronary artery,LCX)病变13处(16.7％),右冠状动脉(right coronary artery,RCA)病变12处(15.4％),其中FFR阴性(FFR值＞0.8)的53处(67.9％);FFR阳性(FFR值≤0.8)的25处(32.1％).②MCE检出49例患者存在节段性室壁运动异常,其中19例同时提示心肌灌注异常.MCE结果提示LAD病变56处,LCX病变12处,RCA病变18处.③FFR阳性的25处病变MCE全部为阳性,MCE阴性的29处病变FFR全部为阴性.FFR阴性的53处病变中,MCE阳性24处,MCE阴性29处.与金标准FFR相比,MCE诊断冠脉临界病变功能性狭窄的敏感性为100％,特异性为55％,阳性似然比为2.2,阴性似然比为0.④FFR阴性的病变中,MCE阳性组的静息FFR值[(0.94 ±0.02)vs(0.96 ±0.02),P＜0.05]和负荷FFR值[(0.84 ±0.04)vs(0.88 ±0.04),P＜0.05]均明显低于MCE阴性组.两组间年龄、左室舒张末期内径、室间隔厚度、左室射血分数、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、肌酐、估算肾小球滤过率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 MCE评价冠脉狭窄临界病变具有极高的敏感性和阴性预测价值,但特异性偏低,是否存在冠脉微血管病变或是其主要影响因素.
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颅内动脉瘤夹闭术后颅内压波形参数的临床价值
目的 分析颅内压波形参数与患者术后早期临床表现的相关性,探讨颅内动脉瘤夹闭术后颅内压波形参数的临床价值.方法 收集2016年1 1月至2017年7月重庆医科大学附属第一医院神经外科重症监护室颅内动脉瘤夹闭术后使用颅内压(intracranial pressure,ICP)监测的55例患者的临床资料.根据患者ICP植入术后24 h内的ICP数据,使用领域平均振幅算法计算2个ICP波形参数:平均ICP值(mean intracranial pressure,MICP)和平均ICP振幅值(mean intracranial pressure wave amplitude,MWA).分析MICP、MWA与患者术前病情及术后早期临床表现的关系.结果 ①患者术前病情较轻者,其术后MICP、MWA越低.②根据术后格拉斯哥评分(glasgow coma score,GCS)将患者分为3组(GCS 3～8分,GCS 9～ 12分,GCS 13～15分),各组间MICP和MWA差异均有统计学意义(P＜0.05).③术后GCS评分与MICP(r=-0.619,P＜0.05)、MWA(r=-0.782,P＜0.05)呈负相关,且MWA与GCS评分相关性更强.结论 ICP波形参数MICP、MWA能有效地反映颅内动脉瘤夹闭术后早期患者的神经功能障碍.
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糖皮质激素对脓毒性休克的疗效及预后Meta分析
目的 评价糖皮质激素在脓毒性休克治疗中的效果及对预后的影响.方法 计算机检索Web of Science、PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网、万方、维普和中国生物医学文献数据库,收集有关糖皮质激素治疗脓毒性休克的临床研究,使用Jadad评分对纳入文献的质量进行评价,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析.结果 纳入7篇文献,共1 220例患者,Meta分析结果显示:糖皮质激素治疗组与对照组28 d病死率差异无统计学意义(RR=1.09,95％ CI为0.85 ～ 1.39,P=0.51),糖皮质激素治疗组高血糖并发症(RR =0.59,95％CI为0.41 ～ 0.83,P=0.003)、出血并发症(RR=0.64,95％ CI为0.44 ～0.95,P=0.03)显著高于对照组,但两组二重感染并发症差异无统计学意义(RR=0.88,95％CI为0.67 ～1.15,P=0.29).结论 采用糖皮质激素治疗不能降低脓毒性休克患者的病死率,可增加患者高血糖及出血并发症的发生率,但未增加二重感染的发生风险.
