生理学报杂志
Acta Physiologica Sinica 생리학보
- 主管单位： 中国科学院
- 主办单位： 中国科学院上海生命科学研究院,中国生理学会
- 影响因子： 0.86
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0371-0874
- 国内刊号： 31-1352/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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脊髓水平细胞外信号调节激酶激活参与吗啡依赖的形成及戒断反应的表达
在大鼠吗啡依赖和戒断模型上,采用行为学、免疫组织化学和Western blot方法观察吗啡依赖及戒断大鼠脊髓神经元磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK)表达的变化,及鞘内注射促分裂原活化蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MEK)抑制剂U0126或ERK反义寡核苷酸对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断反应、触诱发痛及脊髓神经元pERK表达的影响,探讨脊髓水平pERK在介导吗啡依赖和戒断过程中的作用.结果显示:(1)在吗啡依赖形成过程中,大鼠脊髓胞浆与胞核非磷酸化ERK表达没有改变,但pERK表达逐渐增加,纳洛酮催促戒断后,仍有进一步增加的趋势,戒断1 h后,其表达量明显下降,但仍高于对照组.(2)鞘内预先注射MEK抑制剂U0126或ERK反义寡核苷酸能明显抑制吗啡戒断反应和戒断引起的痛觉异常;与行为学结果一致,脊髓背角pERK阳性神经元表达与脊髓胞浆和胞核pERK表达也明显降低.上述结果提示,脊髓水平ERK激活和核转位参与吗啡依赖的形成及戒断反应的表达.
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增加刺激频率不影响大鼠萎缩比目鱼肌强直收缩疲劳性
为观察模拟失重对大鼠比目鱼肌(soleus,SOL)与趾长伸肌(extensor digitorumlongus,EDL)间断强直收缩功能的影响,以及对刺激频率的调节作用,采用离体骨骼肌条灌流技术,观测其产生强直收缩大张力的适刺激频率、疲劳性与疲劳后恢复过程.结果表明:对照组大鼠SOL强直收缩的适刺激频率为60 Hz,尾部悬吊1周大鼠SOL的适刺激频率亦为60 Hz,尾部悬吊2周后,其适刺激频率增高为80 Hz,4周后则为100 Hz;在适刺激频率作用下,悬吊大鼠SOL间断强直收缩的大张力(Po)在悬吊1与2周未见改变,第4周才呈现显著性降低(P＜0.01).间断强直收缩5 min后,对照组大鼠SOL张力降低到22.8%Po;悬吊1、2与4周组疲劳性均增加,与其同步对照组相比均有显著性差异(P＜0.01).疲劳性强直收缩后,在20 min内对照大鼠SOL张力基本恢复到疲劳前水平,而悬吊1、2与4周组则不能完全恢复(P＜0.05).对照组大鼠EDL的适刺激频率为120 Hz,悬吊1、2与4周组EDL的适刺激频率、疲劳性以及疲劳后恢复过程均未发生改变.以上结果提示,增加刺激频率可对悬吊1与2周大鼠SOL强直收缩大张力的降低有代偿作用,但不能代偿悬吊4周大鼠SOL大收缩张力的降低,亦不影响悬吊大鼠SOL间断强直收缩疲劳性的增加与疲劳后恢复的减缓.
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ERK1/2通路参与15-羟二十碳四烯酸收缩缺氧大鼠肺动脉的过程
缺氧诱导的15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE)是引起肺动脉收缩的重要介导因子.15-HETE引起肺动脉收缩的信号转导途径尚不清楚.本研究旨在确定细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase-1/2,ERK1/2)信号转导通路是否参与15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉的过程.采用组织浴槽肺动脉环张力检测、蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫细胞化学方法.制备缺氧大鼠动物模型,成年雄性Wistar大鼠在低氧环境下(吸入氧分数为0.12)正常喂养9 d.显微分离直径1～1.5mm肺动脉,剪成长为3mm的动脉环,进行血管张力检测.用ERK1/2上游激酶(MEK)抑制剂PD98059抑制ERK1/2活性.结果显示,PD98059可明显抑制15-HETE对缺氧大鼠肺动脉环的收缩作用.在去除内皮的肺动脉环,PD98059仍可明显降低15-HETE的缩血管作用.Western blot和免疫细胞化学结果都显示,15-HETE能促进ERK1/2磷酸化.由此表明ERK1/2信号转导通路参与15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉的过程.
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白藜芦醇降低大鼠心室肌细胞内游离钙浓度
实验旨在研究白藜芦醇(resveratrol)对大鼠心室肌细胞内钙浓度(intracellular calcium concentratoin,[Ca2+]i)的影响.应用激光共聚焦显微镜技术记录心室肌细胞内的钙荧光强度.结果表明:在正常台氏液和无钙台氏液中,白藜芦醇(15～60μmol/L)呈浓度依赖性地降低[Ca2+]i.蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂正钒酸钠(sodium orthovanadate,1.0 mmol/L)和L型Ca2+通道激动剂Bay K8644(10 μmol/L)可部分抑制正常台氏液中白藜芦醇的效应.但NO合酶阻断剂L-NAME(1.0 mmol/L)对白藜芦醇的作用无影响.白藜芦醇也能明显抑制无钙台氏液中由低浓度ryanodine(1.0 nmol/L)引起的[Ca2+]i增加.当细胞外液钙浓度由1 mmol/L增加到10 mmol/L而诱发心室肌细胞钙超载时,部分心室肌细胞产生可传播的钙波,白藜芦醇(60 μmol/L)可降低钙波的传播速度和持续时间,终阻断钙波.结果提示,白藜芦醇能够降低心室肌细胞内游离钙浓度,此作用可能与其抑制电压依赖性Ca2+通道、酩氨酸激酶和肌浆网内钙释放有关.
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钩藤碱对human ether-a-go-go相关基因通道的抑制作用
将human ether-a-go-go相关基因(HERG)cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞,采用双电极电压钳技术,观察钩藤碱对表达电流的影响.结果显示:(1)钩藤碱抑制HERG通道的表达是浓度依赖性的,IC50为(773.4±42.5)μmol/L.(2)钩藤碱抑制HERG通道的表达是电压依赖性的,大抑制率在-20 mV,为15%.上述结果提示,钩藤碱抑制HERG编码的钾通道,导致心室复极时间延长,揭示了与钩藤碱相关的心肌钾通道的分子生物学基础.
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阻断NMDA受体可增强皮质酮对海马脑源性神经营养因子表达的抑制:cAMP反应元件结合蛋白的作用
高浓度的皮质酮可引起海马形态与功能的损伤,其中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的改变在海马形态与功能损伤中扮演重要角色.本实验的目的是观察单次皮下注射皮质酮后海马内BDNF mRNA、前体蛋白及成熟型蛋白表达的改变,并观察N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate NMDA)受体阻滞剂MK801对皮质酮作用的影响.实验结果显示,单次皮下注射皮质酮2 mg/kg,3 h后海马内BDNF mRNA、前体蛋白及成熟型蛋白的表达均降低;MK801(0.1 mg/kg)对皮质酮的这一作用有增强效果.单独给予皮质酮或注射MK801 30 min后再给予皮质酮,均能明显降低海马中cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的磷酸化水平,MK801与皮质酮联用时CREB的磷酸化水平降低更为显著(与单独给予皮质酮相比,P＜0.05).实验结果提示,CREB磷酸化水平降低可能是皮质酮引起海马BDNF表达减少的重要中间环节,阻断NMDA受体可加强皮质酮降低BDNF表达的效应.
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血管紧张素Ⅱ上调自发性高血压大鼠和Wistar-Kyoto大鼠血管平滑肌细胞外信号调节激酶的信号转导
本文研究血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)和WistarKyoto(WKY)大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinases,ERKs)信号途径的影响.体外培养SHR和WKY大鼠的VSMCs,先在培养基中加入终浓度为1×10-5mmol/L的缬沙坦或1×10-5mmol/L的PD98059或不加药物,再给予1×10-7mmol/L的Ang Ⅱ刺激24 h后收集细胞,以无血清培养基培养的VSMCs作对照.用免疫沉淀法测定ERK活性;用Western-blot方法检测总ERK(total ERK,t-ERK)、磷酸化ERK(phosphorylated-ERK,p-ERK)及丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinases phosphatase-1,MKP-1)水平;用RT-PCR法半定量测定MKP-1 mRNA的含量.结果显示:(1)SHR和WKY大鼠Ang Ⅱ刺激组VSMCs中ERK活性、p-ERK、MKP-1及MKP-1 mRNA水平均明显高于对照组(P＜0.05);SHR和WKY大鼠Ang Ⅱ+缬沙坦组和Ang Ⅱ+PD98059组的上述指标与对照组比较均无显著性差异.(2)SHR大鼠VSMCs中ERK活性、p-ERK、MKP-1及MKP-1mRNA均显著高于相同干预的WKY大鼠(P＜0.01).(3)SHR和WKY大鼠之间以及对照组、Ang Ⅱ刺激组、Ang Ⅱ+缬沙坦组和Ang Ⅱ+PD98059组间VSMCs中t-ERK水平均无显著性差异.以上结果表明,Ang Ⅱ可能主要通过其1型(Ang Ⅱtype 1,AT1)受体激活SHR和WKY大鼠VSMCs中ERK途径,增加ERK活性和p-ERK蛋白水平,继而引起MKP-1及MKP-1 mRNA水平升高.
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神经递质对豚鼠左心室流出道自律细胞电活动的影响
为研究左心室流出道慢反应自律细胞的神经支配和受体分布,本实验采用标准玻璃微电极细胞内记录技术,分别观测了肾上腺素能和胆碱能受体激动剂及相应的受体拮抗剂对离体豚鼠左心室流出道组织自发慢反应电位的影响.观测指标有:大舒张电位(maximal diastolic potential,MDP)、动作电位幅度(amplitude of action potential,APA)、0相大去极速度(maximal rate of depolarization,Vmax)、4相自动去极速度(velocity of diastolic depolarization,VDD)、复极50%时间(50%ofduration ofaction potential,APD50)和90%时间(90%ofduration ofaction potential,APD90)以及自发放电频率(rate ofpacemaker firing,RPF).结果表明:(1)100 μmol/L异丙肾上腺素(isoprenaline,Iso)可使RPF和VDD显著加快(P＜0.01),MDP绝对值和APA显著增大(P＜0.05,P＜0.01),Vmax加快(P＜0.05),APD50缩短(P＜0.01),这些变化均可被5 μmol/L心得安拮抗;(2)100μmol/L肾上腺素(epinephrine,E)可使RPF和VDD加快(P＜0.01,P＜0.05),APA显著增大(P＜0.001),Vmax加快(P＜0.05),APD50和APD90缩短(P＜0.05);(3)100 μmol/L去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)可使VDD和RPF加快(P＜0.05),APA显著增大(P＜0.05),Vmax明显加快(P＜0.05),APD50缩短(P＜0.05),这些变化可被100μmol/L酚妥拉明拮抗;(4)10μmol/L ACh可使VDD和RPF减慢(P＜0.05),APA显著减小(P＜0.01),APD50缩短(P＜0.05);ACh对APD50的缩短效应可被10μmol/L阿托品拮抗(P＜0.05).结果提示:左心室流出道自律细胞膜上可能存在α-肾上腺素能受体(α-adrenergic receptor,α-AR)、β-肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR)以及M型胆碱能受体(muscarinic receptor,MR),其自律性电活动可能也接受心交感神经和心迷走神经调控.
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内源性和外源性一氧化氮对正常和滴注博莱霉素大鼠肺泡巨噬细胞生存的调节
分别用一氧化氮(nitric oxide,NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和前体L-精氨酸(L-arginin,L-Arg)孵育来自正常大鼠(alveolar macrophages from normal rats,normal AMs)和滴注博莱霉素大鼠的肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages fromBLM-treated rats,BLM AMs),以探讨NO对不同状态细胞生存的调节.用凋亡和细胞周期评价细胞生存,细胞内Bcl-2和Bax蛋白含量探讨其分子机制.结果如下:(1)BLM AMs的凋亡多于normal AMs;G0/G1期BLM AMs数少于normalAMs;S+G2M期BLM AMs数与相应的normal AMs数间的差异无统计学意义;(2)与normal AMs相比,BLM AMs内Bcl-2下调,Bax上调;(3)与相应的对照比,SNP和L-Arg能诱导normal AMs和BLM AMs凋亡;L-Arg仅能增加S+G2M期BLM AMs数;(4)SNP和L-Arg诱导normal AMs内Bcl-2下调和Bax上调,但不能使BLM AMs内的Bcl-2和Bax发生上述变化;(5)L-Arg下调BLM AMs内的Bax.上述结果显示:NO能诱导BLM AMs和normal AMs凋亡;Bcl-2和Bax与NO诱导的normal AMs凋亡有关,而与NO诱导的BLM AMs的凋亡无关,提示NO诱导normal AMs和BLM AMs分子机制不同;内源性NO促进BLM AMs增殖,这可能与其下调Bax有关.
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骨髓间质干细胞向大鼠损伤心肌组织的迁移
实验旨在动态观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向不同微环境下心肌组织的迁移特点,明确组织损伤在干细胞迁移中的作用,为提高干细胞治疗的靶向性和高效性奠定初步试验基础.分离纯化雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠的骨髓MSCs,输注入雌性SD大鼠.实验分为4组:正常大鼠+MSCs移植组,假手术+MSCs移植组,心肌缺血+MSCs移植组,心肌缺血对照组(心肌缺血+培养基移植).结扎冠状动脉前降支制造心肌缺血模型,将相等数量的雄性MSCs经尾静脉注射移植入前3组雌性大鼠体内,对照组注射等体积培养基,分别于移植后1周及8周取心脏组织标本,采用荧光原位杂交方法(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测大鼠Y染色体雄性鉴别基因sry片段的表达,用透射电镜观察大鼠心肌组织超微结构改变.结果发现,移植后1周和8周,正常大鼠移植组和对照组大鼠的心肌组织中均未见sry基因的表达,但假手术移植组和心肌缺血移植组的心肌组织中均可见sry基因的表达,心肌缺血移植组的Y染色体sry基因阳性细胞数量在两个时间点均显著高于假手术移植组(P＜0.01).分别比较心肌缺血移植组和假手术组在移植后1周和8周的Y染色体sry基因阳性细胞的数量,两个时间点无明显差异.心肌组织的超微结构观察发现心肌缺血移植组大鼠的心肌梗死周边区域可见一些细胞,其形态类似于体外培养的MSCs.研究结果提示MSCs具有向损伤心肌组织迁移的特性,迁移的高峰期可能在组织损伤1周左右,组织损伤及其程度在干细胞迁移中起重要作用.
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电刺激大鼠尾壳核诱导丘脑外侧背核神经元出现与海马电图变化相关的特征性放电脉冲间隔
本文旨在探讨电刺激右侧尾壳核(caudate putamen nucleus,CPu)对双侧丘脑外侧背核(laterodorsal thalamic nucleus,LD)单个神经元放电和海马(hippocampus,HPC)电图瞬时时间编码形式的调制性影响.用21只雄性Sprague-Dawley大鼠(150～250 g),重复急性强直电刺激(60Hz,2 s,0.4～0.6 mA)右侧尾壳核(acute tetanization of the right caudate putamen nucleus,ATRC)诱发大鼠癫痫模型,4通道同步记录双侧LD神经元单位放电和双侧HPC深部电图.结果如下:重复施加ATRC可以诱导大鼠出现(1)双侧LD-HPC癫痫电网络间的功能性环状联系.起始点为对侧LD神经元原发性单位后放电,随后出现同侧LD神经元原发性单位后放电,然后呈现同侧HPC电图原发性后放电,终引起对侧HPC电图脱同步化效应;(2)双侧LD神经元放电脉冲间隔(interspike intervals,ISIs)散点分布形式与刺激前呈现镜像对称特征.对侧LD神经元原发性后放电的ISI点分布基于底层而且持续时间较长,具有更加明显的突触可塑性特征;(3)随着ATRC串次的增加,对侧LD神经元原发性单位后放电间的爆发式放电时程逐渐延长,可以募集增强海马电图同步化电活动;显现对侧LD神经元单个放电脉冲与HPC电图γ电振荡(20～25 Hz)间的锁相(phase-lock)和锁时(time-lock)关系.结果提示:ATRC可以募集形成具有联系的双侧LD神经元放电和HPC电图特征性的神经信息编码形式,以对侧更加明显.这些跨越大脑半球、涉及多结构的功能性神经信息网络的建立很可能是癫痫发生、发展和扩布的重要信息编码机制.
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17β-雌二醇对去卵巢胰岛素抵抗大鼠主动脉舒缩功能损伤的保护作用
为观察17β-雌二醇(17beta-estradiol,17β-E2)对去卵巢胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠主动脉结构和舒缩功能的影响及其可能机制,成年雌性Sprague-Dawley大鼠卵巢切除后,高果糖喂养8周诱导IR,同时给予生理剂量的17β-E2(30μg/kg),每天皮下注射一次,并检测IR相关指标.大鼠胸主动脉石蜡切片,HE染色,图像分析系统测定其结构.采用血管环灌流法,观察各组大鼠胸主动脉环对新福林(L-phenylephrine,PE)的收缩反应和对ACh、硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)的舒张反应以及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲脂(N-nitrl-L-arginine methyl ester,L-NAME)对卵巢切除+果糖喂养+17β-E2组大鼠胸主动脉ACh的舒张反应的影响;检测各组大鼠一氧化氮(nitric oxide,NO)含量.结果显示:(1)17β-E2能防止高果糖诱导的去卵巢IR大鼠收缩压升高、高胰岛素血症和胰岛素敏感性下降;(2)各组大鼠胸主动脉的结构无显著性差异;(3)卵巢切除+果糖喂养组大鼠与卵巢切除组或果糖喂养组相比,血清NO显著降低,胸主动脉对PE的收缩反应显著增强,对ACh的舒张反应显著降低,17β-E2能逆转上述改变,L-NAME可部分阻断17β-E2的这种作用;(4)各组大鼠胸主动脉对SNP的舒张反应和去内皮后对PE的收缩反应均无显著差异.以上结果表明,17β-E2能抑制高果糖诱导的去卵巢IR大鼠血管舒缩功能的紊乱,其机制一方面可能是部分通过血管内皮细胞NOS途径促进NO的释放,保护内皮细胞;另一方面可能是通过降低血压,血清胰岛素水平,改善IR所致.
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15-羟二十碳四烯酸下调肺动脉内皮型一氧化氮合酶的活性
15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE)在低氧性肺血管收缩中起着重要作用,低氧肺动脉高压下调内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS),使一氧化氮(nitric oxide,NO)的产量下降,但目前尚无关于15-HETE与eNOS/NO相互作用研究的报道.我们通过Wistar大鼠肺动脉环张力、牛肺动脉内皮细胞NO产量、总eNOS表达及eNOS磷酸化测定等方法对15-HETE与eNOS/NO的相互作用进行研究.首先分离大鼠肺动脉,分为eNOS抑制剂L-NAME组(0.1 mmol/L)、去血管内皮组与内皮完整组,用15-HETE作用大鼠离体肺动脉环,测定肺动脉张力.结果表明,L-NAME组、去除内皮组与内皮完整组分别比较,15-HETE对血管的收缩作用增强,且都有统计学意义(P＜0.05).培养牛肺动脉内皮细胞,分别用15-HETE、15-脂氧酶(15-lipoxygenase,15-LO)抑制剂[(cinnamyl 3,4-dihydroxy-[alpha]-cyanocinnamate,CDC)和(nordihydroguiairetic acid,NDGA)]处理细胞,通过Greiss方法检测亚硝酸盐含量,间接测定NO产量,与对照组比较,1 μmol/L15-HETE明显降低肺动脉内皮细胞NO水平(P＜0.05),10μmol/LCDC和0.1mmol/LNDGA显著增加NO水平(分别是P＜0.05,P＜0.01);通过Western blot检测不同时间(5,10,15,20,30,60 min)eNOS的表达情况,结果显示,15-HETE的不同作用时间,没有引起eNOS表达的明显不同;用苏氨酸495位点磷酸化eNOS(Thr495)抗体进行免疫沉淀,再用总eNOS抗体和15-LO抗体通过Western blot检测磷酸化型含量,间接测定eNOS活性,结果表明15-HETE增强Thr495磷酸化型eNOS含量.由于Thr495为eNOS抑制性磷酸化位点,因此15-HETE降低eNOS活性.这些数据表明:15-HETE的缩血管作用有eNOS/NO参与,15-HETE可以通过磷酸化Thr495位点降低eNOS活性,并且首次发现磷酸化eNOS(Thr495)和15-LO之间存在蛋白质相互作用.
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神经营养因子诱导分化的神经元样PC12细胞分裂的研究
神经营养因子(nerve growth factor,NGF)诱导PC12细胞分化产生的神经元样细胞一直被认为属于分裂后的细胞,没有分裂能力.然而在本研究中,我们观察了一些已经发生分化的PC12细胞,这些细胞长有很长的神经突起,在形态上属于神经元样细胞.在这些细胞中,我们不仅检测到DNA合成,而且观察到这些细胞的分裂现象.更令人感兴趣的是,除了胞体发生分裂外,位于胞体分裂位置的突起也一分为二,分别分配给两个子细胞.这些结果说明,形态发生分化的神经元样PC12细胞仍有分裂能力.本研究首次报道神经元样PC12细胞及其突起能发生分裂.
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血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞表达上调基因的分离和鉴定
为了对成年大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CF)受血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)刺激后上调基因表达谱进行筛选及分析,以受Ang Ⅱ刺激CF为实验方,未刺激CF为驱动方,进行抑制消减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH),建立消减cDNA文库.经斑点杂交筛选文库后将表达变化显著的部分阳性克隆测序及同源性分析,共获得19个上调表达的基因,分别与细胞外基质、细胞周期、胞内信号转导、细胞骨架及细胞代谢等功能相关,并克隆到7个新的基因表达序列标签(expressed sequence tags,EST).我们的数据证实了SSH可以有效地克隆成年大鼠CF受AngⅡ刺激后上调表达基因,对这些基因的研究将有助于阐明心肌重塑的分子机制.
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脊髓p38丝裂原活化蛋白激酶激活参与坐骨神经压迫性损伤所致神经病理性痛
本研究旨在观察脊髓p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)在坐骨神经压迫性损伤所致神经病理性痛中的作用.雄性Sprague-Dawley大鼠鞘内置管后,4-0丝线松结扎左侧坐骨神经制作慢性压迫性损伤(chronicconstriction injury,CCI)模型.CCI后第5天,鞘内注射不同剂量的p38 MAPK特异性抑制剂SB203580,并在给药前及给药后不同时间点,分别用yon Frey机械痛敏监测仪和热辐射刺激仪监测大鼠损伤侧后爪机械和热刺激反应阈值,用免疫印迹技术(Western blot)观察给药前后脊髓磷酸化p38 MAPK (p-p38 MAPK)和磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMPresponse element binding protein,pCREB)表达变化.结果发现:坐骨神经压迫性损伤引起脊髓p-p38 MAPK蛋白表达明显增加;鞘内注射SB203580能剂量依赖性逆转CCI引起的机械性痛觉异常和热痛觉过敏及脊髓水平p-p38 MAPK表达的增加,也明显抑制CCI引起的脊髓pCREB表达的增加.结果提示,脊髓水平p38 MAPK激活参与坐骨神经压迫性损伤所致神经病理性痛的发展,其作用可能通过pCREB介导.
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缺氧复氧时肥大心肌细胞凋亡及其与能量代谢途径转换的关系
心肌细胞凋亡是心肌肥大向心力衰竭转化的重要机制,因此,抑制肥大心肌细胞凋亡可能是防治心力衰竭的有效药物靶点之一.本研究以0.1 μmol/L血管紧张素Ⅱ和1 μmol/L去甲肾上腺素刺激培养心肌细胞,复制心肌细胞肥大模型,用三气孵箱培养.缺氧条件是95%N2和5%CO2,控制氧分压低于5 mmHg以下,8 h后常氧培养,液闪计数法测定丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,PDH)和肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase 1,CPT-1)活性,糖氧化、糖酵解、脂肪酸氧化率,以及细胞凋亡百分率,分析肥大心肌细胞能量代谢变化与细胞凋亡间的关系.结果如下:(1)与常氧培养比较,缺氧8 h后,活化型丙酮酸脱氢酶(PDHa)和CPT-1活性均有显著下降,但复氧早期肥大心肌细胞PDHa活性有轻度进一步降低(P＞0.05),而CPT-1活性却较快恢复.(2)缺氧时,正常和肥大心肌细胞葡萄糖氧化代谢率均有降低[分别下降(16±0.9)%、(48±1.1)%];复氧时,正常心肌细胞糖氧化代谢较快恢复,而肥大心肌细胞在复氧早期,糖氧化率进一步降低,此后才逐渐恢复.(3)在缺氧时,肥大心肌细胞糖酵解率仅轻度下降,但在复氧后糖酵解率迅速升高,呈爆发样达峰值后又逐渐恢复到缺氧前水平.(4)肥大心肌细胞在缺氧后脂肪酸代谢明显降低,但复氧后脂肪酸代谢呈爆发式上升,并大大高于缺血前的代谢水平.(5)缺氧时肥大心肌细胞凋亡率即显著增加,在复氧早期细胞凋亡率继续大幅度上升,此后逐渐减少.(6)预先用二氯乙酸处理肥大心肌细胞,可显著逆转缺氧复氧导致的细胞糖氧化受抑、糖酵解和脂肪酸代谢活化,同时,抑制细胞凋亡的发生.上述结果提示,缺氧复氧后的肥大心肌细胞能量代谢途径转换是导致细胞凋亡的重要原因.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 02 03 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1997 | 01 02 03 04 05 06 |
