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  • 不同浓度胺碘酮对肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D表达的影响

    作者:王瑶函;吴蕊

    目的 观察不同浓度胺碘酮对小鼠肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D(SP-D)表达的影响.方法 取生长状态良好的3~5代小鼠肺成纤维细胞,用10%小牛血清培养制成细胞悬液加入96孔板中培养.分别给予不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0μmoL/L)胺碘酮处理,于给药12、24和48h后采用MTT法检测细胞增殖;蛋白免疫印迹法检测SP-D蛋白的表达.结果 0.5~4.0μmol/L胺碘酮作用于肺成纤维细胞12、24和48h后对细胞增殖有明显促进作用,且增殖率与浓度和时间成正相关(r=0.834,r=0.881,P<0.05).与对照组相比,胺碘酮能明显增加细胞SP-D蛋白的表达(P<0.05).胺碘酮A~D组细胞SP-D、a-SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达高于对照组细胞(P<0.05),胺碘酮A~D组细胞SP-D、a-SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达水平随胺碘酮浓度增加升高(F=10.215,P<0.01),细胞SP-D、a-SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达量与胺碘酮的浓度呈正相关(r=0.786,P<0.01).结论 胺碘酮可刺激小鼠肺成纤维细胞增殖,并且增加肺成纤维细胞SP-D蛋白的表达.

  • MTT法检测博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞增殖的影响

    作者:孙婧;汉建忠;刘伟;曹生田;陈玉;汪沛;李湘;罗自强

    目的:观察不同浓度和时间的博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞(NIH3T3细胞)增殖的影响.方法:取对数生长期的NIH3T3细胞,用10%胎牛血清培养制成的细胞悬液加入96孔培养板中培养.以NIH3T3细胞为观察对象,分别给予不同浓度(0.1~10 000 mU/mL)博莱霉素处理,于给药后12 h、36 h、48 h后采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖.结果:与空白对照组比较,1~10 mU/mL浓度的博莱霉素,可促进NIH3T3细胞增殖(P<0.05).其余浓度博莱霉素对细胞增殖无影响.结论:1 ~10 mU/mL浓度的博莱霉素能够促进NIH3T3细胞的增殖.

  • 改良组织法高效分离纯化成年小鼠肺成纤维细胞

    作者:王志超;武琦;冯凡超;金译涵;周贤梅

    目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞.方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化.结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成纤维细胞3d可长满单层,继续传代后2d可长满单层,培养5~7代后成纤维细胞保持较好的细胞活性.结论:改良的组织法能够高效获得数量可观、活性较好的小鼠肺成纤维细胞.

  • 口腔临床常用烤瓷合金对小鼠肺成纤维细胞体外毒性研究

    作者:江磊;林泓磊;张长源;郑明;林东红;程辉

    目的 比较镍铬、钴铬、纯钛、钯基、金铂等5种常用烤瓷合金的细胞毒性.方法 本研究于2011年7-10月在福建医科大学附属口腔医院中心实验室进行.按照IS010993标准,采用CCK-8法测定第1、3、5、7天时烤瓷合金浸提液培养的小鼠肺成纤维细胞(L929细胞)的OD值,同时观察L929细胞形态,并且计算细胞相对增殖率(RGR),评价5种烤瓷合金对L929的细胞毒性.结果 第7天时,除金铂合金外,其他4组烤瓷合金的OD值与阴性对照组的差别均有统计学意义(P<0.05);L929细胞的RGR由高到低分别为金铂合金(98.4%)、钯基合金(95.2%)、纯钛合金(83.0%)、镍铬合金(74.0%)、钴铬合金(72.6%).细胞形态学观察发现:金铂合金组、钯基合金组以及纯钛合金组的细胞形态与阴性对照组相比无明显差别;而钴铬合金组和镍铬合金组的细胞排列稀疏,少量细胞皱缩变圆.结论 金铂合金、钯基合金以及纯钛合金的细胞毒性为1级,具有较好的生物相容性;钴铬合金、镍铬合金的细胞毒性为2级,结合细胞形态观察认为生物相容性仍然合格.

  • ADAMTS-1对小鼠成纤维细胞转化生长因子及其下游信号通路PI3K/AKT的影响

    作者:董素素;张平;肖华;阳洁;邓湘

    目的 探索含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对体外小鼠成纤维细胞(NIH3T3)转化生子因子(TGF-β1)及其下游信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)的影响.方法 体外培养小鼠成纤维细胞,以ADAMTS-1为处理因素,按照不同浓度,将NIH3T3分为空白组、低浓度组(1 nM)、中浓度组(10 nM)、高浓度组(20 nM),通过RT-PCR检测细胞TGF-β1mRNA的表达情况,利用Western-blot观察细胞TGF-β1及磷酸化蛋白激酶B(pAKT)的蛋白表达情况.结果 根据RT-PCR图像显示,与空白组相比,其他各组TGF-β1mRNA的表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势(P<0.05).根据Western-blot图像显示,与对照组相比,其他各组TGF-β1、pAKT的蛋白表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势(P<0.05).结论 ADAMTS-1可能下调TGF-β1及其下游PI3K/AKT信号通路.

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