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层粘连蛋白受体基因表达谱分析
目的 探讨层粘连蛋白受体(67LR1)基因相关的一组基因表达变化,为反式二羟环氧苯并芘致癌机制的研究提供依据.方法 构建67LR1转基因表达载体,转染人支气管上皮细胞(16HBE),获得转基因67LR1的瞬时表达的细胞株.用半定量RT-PCR方法分析转基因表达产物,应用含8 064个基因点的微芯公司基因表达谱芯片CSCGE-80与双荧光标记样品与芯片杂交和扫描、图像数据分析等一系列处理进行表达谱分析.结果 成功构建出瞬时表达67LR1的细胞株.基因表达谱分析,2组相比发生了显著性表达变化的基因有295个,其中表现为上调的基因有145个,下调表达的基因有150个.在发生了显著性表达改变的基因中,比较有明显功能分类特征的包括与信号转导相关的基因,与肿瘤相关的基因,与免疫反应相关的基因以及与蛋白质合成系统相关的基因等.结论 67LR1基因功能涉及到信号转导、肿瘤相关基因等方面,相关基因的表达变化具有复杂性.
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反式二羟环氧苯并芘诱导入支气管上皮细胞p53表达分析
多环芳烃化合物(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是全球性有机污染物,在各种环境介质如空气、水、土壤、沉积物等中都广泛存在.PAHs中有相当一部分是致癌物,其中以苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,B[a]P)的致癌性强.B[a]P可引起实验动物肺癌、皮肤癌等多种癌症.B[a]P本身无致癌活性,必须在体内活化代谢后,生成终致癌物如反式二羟环氧苯并芘(anti-benzo[a]pyrene trans-7,8-di-hydrodiol-9,10-epoxide,anti-BPDE)等才具有致癌活性.
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二羟环氧苯并芘诱导转化与翻译延长因子的关系
目的探讨真核翻译延长因子1α1(eTEF1α1)基因在反式二羟环氧苯并芘致癌机制中所起的作用.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增真核翻译延长因子1α1基因全长,插入pcDNATM 3.1 Directional TOPO 表达载体,以脂质体转染介导的技术和G418细胞筛选法转染人支气管上皮细胞,构建转基因稳定表达的细胞株.用半定量RT-PCR方法分析转基因表达产物,对转基因细胞株,进行双层软琼脂试验以确定基因的恶性特性.结果成功扩增出eTEF1α1基因全长,构建出稳定表达真核翻译延长因子1α1基因的细胞株.稳定转染eTEF1α1基因的细胞株,能在双层软琼脂中形成克隆.结论真核翻译延长因子1α1基因与反式二羟环氧苯并芘的恶性转化有关.
关键词： 反式二羟环氧苯并芘 真核翻译延长因子1α1 转化
