首页 > 文献资料
-
对氧磷单克隆抗体的研制及鉴定
重氮化法使对氧磷(E600)与牛血清白蛋白(BSA)、血蓝蛋白偶合合成人工抗原.用人工抗原E600-BSA免疫Balb/c小鼠,然后将SP2/0小鼠骨髓瘤细胞和E600-BSA免疫的Balb/c小鼠脾脏细胞融合,成功的建立了能分泌抗对氧磷单克隆抗体的杂交瘤细胞株.并分析了该细胞株的染色体及对其产生的单克隆抗体的类型、特异性、亲和力进行了鉴定和检测.上述杂交瘤细胞连续传代或冻存10周,其分泌抗体水平稳定.
-
农药代谢物甲基对氧磷和对氧磷的合成
目前甲基对硫磷(二甲基-对-硝基苯基-硫代磷酸酯,())和对硫磷(二乙基-对-硝基苯基-硫代磷酸酯())仍是我国应用较多的有机磷农药,并常与其它品种的农药混配使用,甲基对硫磷和对硫磷可通过呼吸道、皮肤和消化道被人体吸收,在人体内主要代谢物是甲基对氧磷(二甲基-对-硝基苯基-磷酸酯)())和对氧磷(二乙基-对-硝基苯基-磷酸酯()).
-
高血压与对氧磷酶基因多态性的关联研究
目的 探讨对氧磷酶(PON)中PON1 55M/L和PON2 148A/G基因多态性与高血压的关系.方法 采用PCR-RFLP方法检测201例高血压组和94例对照组的PON1 55 M/L和PON2 148 A/G基因多态性.结果 与对照组比较,高血压组血浆PON、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性明显降低,丙二醛(MDA)浓度显著升高;PON1 55LM基因型、M等位基因频率,PON2 148 GG/AG基因型、G等位基因频率较对照组明显增多;PON1 55 LM基因型的PON和T-SOD活性较LL基因型明显降低,而收缩血压、舒张血压显著增高;PON2 148AG和GG基因型的PON活性较AA基因型者明显降低,GG基因型的MDA、AG基因型的收缩压和舒张压则显著升高.logistic回归分析显示PON1 55 LM基因型、PON2 148GG/AG基因型是高血压的危险因素.结论 PON1 55 M等位基因、PON2 148 G等位基因是高血压的危险因素,此等位基因携带者血浆PON活性降低.
-
血清对氧磷酶浓度与急性冠状动脉综合征的关系
目的 观察血清对氧磷酶(PON)水平与急性冠状动脉综合征(ACS)的关系.方法 收集因ACS入住西安交通大学医学院第一附属医院心内科患者229例,和同期入住心内科年龄、性别、民族匹配,且经心肌酶谱、心电图和冠状动脉造影证实的非ACS患者129例,ELISA方法检测患者空腹血清PON水平；logistic回归分析PON水平与ACS发生与否的关系,多因素逐步线性回归分析PON与Gensini积分的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析PON判断的佳切点.结果 与非ACS患者相比,ACS患者血清lgPON水平较低[(5.72±0.73) ng/L比(5.07±0.57) ng/L,P＜0.05].logisitc回归分析发现,lgPON与ACS发生相关(OR =0.459,95％ CI:0.222 ～0.949,P=0.036)；ROC曲线分析PON对ACS的诊断价值曲线下面积为0.789,其佳诊断切点为180 mg/L,敏感度为83.3％,特异度为71.2％；多因素逐步回归分析发现lgPON与Gensini积分无相关关系.结论 PON浓度降低与ACS的发生相关,但是与冠状动脉的狭窄程度无相关性.
-
对氧磷酶基因多态性及血浆同型半胱氨酸硫内酯复合物水平与冠心病的关系
目的 探讨对氧磷酶(PON)基因多态性(PON1 T-107C、PON2 C311S)及血浆同型半胱氨酸(Hcy)、同型半胱氨酸硫内酯(HTL)复合物水平与冠心病发病的关系.方法 对203例经冠状动脉造影证实为冠心病的患者及117例经冠状动脉造影证实无冠状动脉病变的对照者进行研究,采用竞争性ELISA法测定血浆HTL复合物水平;采用高压液相色谱法测定血浆Hcy的水平;采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析PON基因中PON1 T-107C和PON2 C311S基因多态性.结果 冠心病组血浆Hcy和HTL复合物水平明显高于对照组(P＜0.01);PON1 T-107C基因型与等位基因频率分布在冠心病组与对照组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);而PON2 C311S的SS基因型分布在冠心病组低于对照组(P＜0.05),但等位基因频率分布两组间差异无统计学意义(P＞0.05);当两位点的等位基因T、S同时出现时(即CT/TT+CS/SS基因型)血浆Hcy及HTL复合物水平较CC+CS/CC或CT+CC基因型明显降低[Hcy(11.83±4.76)μmol/L与(15.32±10.32)μmol/L;HTL(24.36±9.30)U/ml与(32.05±10.44)U/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).冠心病合并2型糖尿病组与冠心病无糖尿病组及对照组相比,PON2基因型分布差异有统计学意义,冠心病合并2型糖尿病患者中C等位基因频率明显增高(P＜0.05).结论 血浆Hcy和HTL复合物水平升高可能是冠心病发病的独立危险因素,PON1 T等位基因和PON2 S等位基因同时出现可能在动脉粥样硬化形成过程中起到保护作用,而PON2 C311S多态性的C等位基因存在可能与冠心病患者合并2型糖尿病的几率增高相关.
-
疏肝利胆法结合西医疗法对有机磷农药中毒后毒物经胆道排泄的量化规律的研究
目的:研究有机磷农药中毒毒物经胆道排泄的量化规律;疏肝利胆中药结合胆汁引流疗法对胆道排泄有机磷的影响及对血浆和门静脉血浆有机磷浓度与胆碱酯酶浓度的影响.方法:将染毒动物分为传统治疗组(B组)、胆汁引流组(C组)和疏肝利胆法结合胆汁引流组(D组),染毒后按时动态测定对硫磷、对氧磷浓度,胆碱酯酶浓度;同时测定C、D组动物胆汁对硫磷、对氧磷浓度;染毒48小时测定门静脉血浆对硫磷、对氧磷浓度.结果:有机磷农药中毒后确实存在胆道排毒过程,经疏肝利胆中药结合胆汁引流治疗组胆道排泄有机磷总量明显高于单纯胆汁引流组,前者血浆和门静脉对硫磷、对氧磷浓度明显低于后者,前者胆碱酯酶浓度明显高于后者,C、D组的治疗效果明显优于传统治疗组.结论:疏肝利胆法结合胆汁引流可明显增加有机磷经胆道排泄,本治法为抢救有机磷农药中毒提供了一个新的治疗理论.
-
对氧磷酶1与2型糖尿病合并冠心病的关系
目的:探讨对氧磷酶-1(PON-1)在2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CAD)中的作用.方法:应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法鉴定天津地区汉族人的PON-1 Q/R基因多态性的基因型,并测定血清PON-1活性.结果:单纯T2DM组、单纯CAD组、T2DM合并CAD组和正常对照组PON-1Q/R基因多态性的基因型分布及等位基因频率差别无统计学意义(x2分别为4.95和5.27,P＞0.05).前3组血清的PON-1活性均显著低于正常对照组(P＜0.05),其中T2DM合并CAD组血清PON-1活性亦显著低于单纯CAD组和T2DM组(P＜0.05).结论:PON-1 Q/R基因多态性与T2DM并发CAD无相关性,而高血压病史和血清PON-1活性降低与T2DM并发CAD有关.提高血清PON-1活性有助于预防T2DM的大血管并发症.
-
2型对氧磷脂酶基因311 Cys/Ser多态性与糖尿病肾病的相关性研究
目的探讨2型对氧磷脂酶(PON2)基因311Cys/Ser多态性与2型糖尿病肾病的相关性及其与血脂的关系.方法采用聚合酶链式反应-长度片段多态性(PCR-RFLP)技术,对78例2型糖尿病患者 (其中26例单纯性2型糖尿病,52例糖尿病肾病) 和30例健康对照者,PON2基因311Cys/Ser多态性进行检测.结果 PON2基因311Cys/Ser多态性的基因型频率和等位基因频率在2型糖尿病合并大量蛋白尿组与对照组间差异有统计学意义,Ser等位基因在2型糖尿病合并大量蛋白尿组明显增高.结论 PON2基因311Cys/Ser遗传多态性与中国甘肃地区2型糖尿病并发肾病的发病具有相关性.
-
枸杞多糖对有机磷所致大鼠血管内皮功能损伤的保护作用
目的:探讨枸杞多糖(LBP)对有机磷(PO)所致大鼠血管内皮功能损伤的保护作用.方法:以大鼠离体胸主动脉血管环(EVAPVR)为实验对象,以PO为损伤药物,以LBP为保护药,检测血管内皮依赖性舒张反应(EDRR).结果:LBP明显减轻了PO对血管EDRR的抑制作用(均P＜0.05).结论:LBP对PO所致的大鼠血管内皮功能损伤有明显的保护作用.
-
石杉碱甲预防有机磷神经毒剂中毒的研究
目的 研究石杉碱甲预防有机磷神经毒剂中毒的效果,确定佳预防用药剂量.方法 分别以0.5,1.0,2.0,5.0 mg/kg的石杉碱甲(H)给大鼠预防用药,30 min后以2.7 mg/kg的对氧磷(P)进行染毒,观察各组动物的死亡时间、死亡率、染毒后不同时间的胆碱能中毒症状,并与对照组比较;分别以0.5,1.0,2.0,3.0 mg/kg的石杉碱甲给大鼠预防用药,30 min后给予3.6 mg/kg的对氧磷进行染毒,观察各组死亡时间、死亡率,并与对照组比较.结果 预防给予1.0 mg/kg石杉碱甲,1.0 mgH+2.7 mgP组无论是对氧磷染毒后0.5 h或1.0 h,动物的胆碱能中毒症状均轻,不自主运动(IM)及流涎、流泪、排尿、排便(SLUD)评分均低于对照组(P＜0.05),动物死亡率为14.28%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);1.0 mgH+3.6 mgP组动物平均存活时间长(22.8±13.7)min,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 石杉碱甲可有效地预防有机磷神经毒剂中毒;1.0 mg/kg是石杉碱甲预防大鼠有机磷神经毒剂中毒的佳剂量.
-
对氧磷酶基因192位点多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系
目的:研究动脉粥样硬化性脑梗死与血清对氧磷酶( PON1)基因 192位点多态性的关系. 方法:应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性( PCR RFLP)方法,对 52例动脉粥样硬化性脑梗死患者, 48例正常人的 PON1基因 192位点多态性进行分析,同时检测血脂水平. 结果:脑梗死组及正常组均以 QR基因型为主,频率分别为 0.50,0.54, QQ,RR基因型频率分别为 0.10、 0.25, 0.40、 0.21,两组人群基因型分布处于 Hardy Weinberg平衡.脑梗死组 R等位基因频率明显高于正常组,分别为 0.65,0.48(χ 2=4.18 P< 0.05).且脑梗死组血清胆固醇、三酰甘油、载脂蛋白 B水平高于正常组,低密度脂蛋白胆固醇有升高趋势,而高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白 A1低于正常组. 结论: PON1基因 192位点多态性可能与动脉粥样硬化性脑梗死有关. R等位基因可能为动脉粥样硬化性脑梗死的相对危险因素.且血脂异常参与脑梗死的发病.
关键词： 多态现象 (遗传学 ) 动脉粥样硬化 脑梗塞 对氧磷 酶类 /遗传学 -
广西南宁地区人群与动脉硬化发病相关的对氧磷酶2基因C311S多态性观察
目的:调查广西南宁地区人群是否存在对氧磷酶2基因C311S多态性,并与其他地区或人种进行比较.方法:实验于2003-11/2004-05在广西医科大学第一附属医院和实验中心完成.随机抽取在广西医科大学第一附属医院体检中心体检者123人,均为无血缘关系南宁地区健康汉族及壮族人.用酚/氯仿法提取白细胞中的基因组DNA,应用聚合酶联反应-限制性片断长度多态性技术检测血DNA的对氧磷酶2基因C311S多态性,同时检索国内外部分文献中对氧磷酶2基因位点基因型频率后与之比较.结果:按意向处理分析,123人全部完成测试进入结果分析,其中男90人,女33人.①广西南宁地区人存在对氧磷酶2基因C311S多态性,SS基因型频率为0.61,CS+CC基因型频率为0.39,C/S等位基因频率为0.203/0.797,男女组间差异无显著性(基因型频率X2=0.000,P=0.997 5;等位基因频率X2=0.000,P=0.997 7).②广西南宁地区与广东地区比较C等位基因相对较多而S等位基因相对较少,但差异无显著性(基因型频率X2=3.075 5,P=0.079 5;等位基因频率X2=2.789 8,P=0.094 9).③与印度人的基因型频率及等位基因频率分布有显著差异(基因型频率X2=21.724 4,P＜0.01;等位基因频率X2=23.161 8,P＜0.000 1),与白种人亦有明显差异(等位基因频率X2=12.738 3,P=0.000 4);而与日本人相近(基因型频率X2=0.016 5,P=0.897 8;等位基因频率X2=0.016 5,P=0.897 8).结论:广西南宁地区多人群存在对氧磷酶2基因C311S多态性,该基因多态性可能存在一定的地域性差异.
-
兔血清中对氧磷酶的提取和纯化
目的 从免血清中提纯对氧磷酶并纯化.方法 采用液相色谱的方法,从兔血清中提取对氧磷酶并进行部分纯化.比色法检测待测样品中对氧磷酶的活性,垂直板电泳的方法检测纯化的对氧磷酶的纯度.采用体外解毒的方法,以1.5倍的LD50的敌敌畏(75 mg/kg)同对氧磷酶粗酶(10 U/kg)混合后,给予小鼠腹腔注射,初步验证对氧磷酶的解毒活性.结果 纯化后的对氧磷酶比活性为11.54 IU/mg,较纯化前的比活性(0.058 IU/mg)提高了近200倍,产出率约为10%.部分纯化的对氧磷酶对于有机磷类农药有较好的催化水解作用.染毒大鼠的死亡率为0.结论 采用液相色谱的方法,可以从兔血清中部分提取并纯化时氧磷酶.
-
小鼠对氧磷染毒后磷酸三酯酶试验治疗效果观察
目的:通过实验动物对氧磷中毒后磷酸三酯酶和其它有机磷拮抗剂联合使用的实验治疗,寻找治疗有机磷农药中毒的新方法.方法:采用up-and-down法测定几种有机磷拮抗剂单用和联合使用情况下小鼠对氧磷中毒时LD50的变化.结果:磷酸三酯酶提取自基因重组大肠杆菌,对氧磷经口灌胃给予,各种拮抗剂均染毒后1分钟尾静脉注射给予.磷酸三酯酶-阿托品-2-PAM-C1联合使用的LD50值为95.6mg/kg,与其它方法相比明显提高,与对照组相比可提供约140多倍的保护.结论:磷酸三酯酶在预防和治疗有机磷(包括神经毒剂)中毒等方面,具有很好的应用前景.
-
陕西某高校健康教职工血清对氧磷酶浓度及其影响因素
目的 探讨陕西省某高校健康教职工血清对氧磷酶(PON)浓度分布特征及其临床意义,为改善该人群的健康状况提供依据.方法 随机抽取陕西省某高校健康知识分子270名,测量研究对象坐位收缩压(SBP)和舒张压(DBP)；取清晨空腹静脉血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)等生化指标,以酶联免疫吸附法检测对氧磷酶水平；分析对氧磷酶与各生理生化指标的相关性.结果 男性lg-PON为(5.51±0.67) pg/mL,女性为(5.83±0.76) pg/mL,差异有统计学意义(P=0.011).PON浓度在各年龄组教职工之间差异无统计学意义.多元回归分析发现,PON与LDL -C(r=-0.354)和血糖(r=-0.134)呈显著负相关,而与HDL-C(r =0.793)呈显著正相关(P值均＜0.05).结论 高校知识分子PON浓度男性低于女性,LDL -C,HDL -C和血糖影响PON的浓度.
-
染料木素拮抗对氧磷诱导的大鼠胸主动脉组织 p22phox 表达上调
目的：探讨染料木素是否通过下调 p22phox、Nox4的表达，抑制活性氧的生成而拮抗对氧磷损伤的血管内皮功能。方法取♂ SD 大鼠胸主动脉。①溶媒对照组：用0.1％的二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）处理大鼠胸主动脉30 min；②染料木素（genistein，GST）处理组：GST （100μmol · L －1）处理大鼠胸主动脉30 min；③对氧磷（paraoxon，PO）处理组：PO（40.5μmol·L －1）处理大鼠胸主动脉30 min；④ PO ＋GST 处理组：PO（40.5μmol·L －1）＋GST（100μmol·L －1）处理大鼠胸主动脉30 min。RT-PCR法检测各组 p22phox、Nox4 mRNA 表达的变化；Western blot观察 p22phox 和 Nox4蛋白表达的变化。结果较之溶媒对照组，PO 处理可使 p22phox、Nox4 mRNA 及蛋白表达明显增加；GST 处理则使 p22phox、Nox4 mRNA 及蛋白表达明显减少；PO ＋GST 共同处理组，Nox4 mRNA 及蛋白表达增加。与PO 单独处理组比较，PO ＋GST 共同处理组 p22phox mRNA及蛋白表达明显减少。结论对氧磷可通过上调血管组织p22phox、Nox4 mRNA 和蛋白的表达，导致血管内皮氧化损伤；染料木素可下调二者的表达，保护血管内皮。
-
对氧磷酶2基因多态性与2型糖尿病的相关性研究
目的 探讨对氧磷酶2(PON2)基因多态性与2型糖尿病的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对327例2型糖尿病、184例健康对照组的PON2基因第9外显子的C311S多态性进行基因型分析,比较上述各组间基因型和等位基因频率分布有无差异.结果 PON2 C311S的基因型及等位基因频率在糖尿病和健康对照组之间分布差异无显著性(P＞0.05).在糖尿病组中, CC+CS型的低密度脂蛋白(LDL)高于SS型(P＜0.05).结论 PON2 C311S基因多态性与2型糖尿病的发生无明显关联,但与2型糖尿病的LDL显著相关.
-
食物中毒样品中有机磷农药对硫磷、对氧磷的GC/MS法测定
对硫磷作为一种高效有机磷杀虫剂广范使用,但由于它的毒性高,使其应用受到一定的限制,一般作物中其留量不能大于1mg/Kg.
-
黄芪多糖组分-A3对对氧磷所致血管内皮功能损伤的保护作用
目的 观察黄芪多糖组分-A3(APS-A3)对对氧磷(PARA)所致血管内皮功能损伤的保护作用.方法 以大鼠离体胸主动脉血管环(EVAPVR)和培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验对象,以PARA为损伤药物,以APS-A3为保护药,检测血管内皮依赖性舒张反应(EDRR)、内皮细胞单层通透性(ECMP)及细胞培养液生化指标.结果 APS-A3剂量依赖性(0.1,1,10 mg/ml)地显著减轻了PARA(3.63μmol/L)对血管EDRR的抑制作用,降低了ECMP的增加,保护了超氧化物歧化酶(SOD)活性、阻滞了丙二醛(MDA)浓度的升高以及一氧化氮(NO)浓度的降低(均P<0.05).结论 APS-A3对PARA所致的血管内皮功能损伤有明显的保护作用,其机制可能与APS-A3的抗氧化作用有关.
-
染料木素对对氧磷损伤大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能的保护作用
目的:探讨染料木素( genistein,GST)对对氧磷(paraoxon,PO)损伤血管功能的保护作用.方法:取雄性SD大鼠胸主动脉制备离体血管环,测量并记录血管环张力.实验分组如下:1)溶媒对照组,用0.1％的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)预孵育血管环30 min后,检测大鼠胸主动脉环对乙酰胆碱(acetylcholine,Ach;1 ×10-9～1 ×10-5 mol/L)诱导的内皮依赖性舒张(endothelium-dependent relaxation,EDR)功能及硝普钠(sodium nitroprusside,SNP;1×10-6 mol/L)诱导的非内皮依赖性舒张功能的反应；2)各浓度PO处理组,分别用不同浓度的PO(4.05×10-9 ～4.05×10-5 mol/L)预孵育血管环30 min后,检测大鼠胸主动脉环对Ach及SNP诱导的血管舒张功能的反应；3)PO+ GST处理组,分别用PO(4.05×10-6mol/L)与不同浓度的GST(1,3,10,30或100 μmol/L)共同孵育血管环30 min后,检测大鼠胸主动脉环对Ach及SNP诱导的血管舒张功能的反应及对苯肾上腺素(phenyllphrine,PE;1×10-6 mol/L)诱导的血管收缩功能的反应.结果:PO(4.05×10-9～4.05×10-5 mol/L)可浓度依赖性地抑制Ach诱导的EDR反应,对SNP诱导的非内皮依赖性舒张功能没有影响.GST(10,30或100μmol/L)可减轻PO(4.05 x 10-6 mol/L)对EDR的抑制作用,且GST浓度为10 ～ 30 μmol/L时,该作用具有剂量效应；但GST对SNP诱导的非内皮依赖性舒张反应没有影响.各浓度GST与PO共同孵育血管环,可浓度依赖性地抑制PE诱导的血管收缩.结论:GST可抑制PO诱导的EDR受损,并抑制PE诱导的血管收缩效应.
