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25-OH D3文献资料
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液相色谱-串联质谱法检测人血清25羟维生素D3水平及条件控制分析
目的 人血清25羟维生素D3 [25-(0H) D3]测定对于评价体内维生素D的水平十分重要.本文拟建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血清25-(OH)D3的方法.方法 人血清样本(400μl)用纯甲醇去蛋白,离心后用正己烷进行液-液萃取.采用大气压化学离子源(APCI源),正离子多反应监测模式.色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm)；流动相:100％甲醇；流速:0.2ml/min.结果 LC-MS/MS的检出限为1.0ng/ml,25-OHD3浓度在6～120ng/ml范围内,峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999),平均回收率为99.5％(范围:97.1％～103.4％),RSD为4.7％.分别用LC-MS/MS和放射免疫法检测53例血清样本,两种方法的平均浓度分别为23.69ng/ml和20.1 ng/ml,LC-MS/MS比放射免疫法(RIA)平均高17.69％ (P=0.083).二者的相关性良好,RIA=LC-MS/MS-3.57,相关系数为0.883.结论 本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度,易于操作,与放射免疫法相关性好,可用于测定人血清中25-(OH)D3的含量.
