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长沙地区汉族人血小板抗原(HPA1-17)基因多态性调查
目的 研究长沙地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA1-17基因多态性.方法采用PCR-SSP方法对长沙市血液中心 618名汉族无偿献血者进行HPA1-17系统基因分型.结果长沙地区 618名汉族无偿献血者HPA1a基因频率为99.3%,HPA2a基因频率为96.8%,HPA3a基因频率为58.7%,HPA4a基因频率为99.4%,HPA5a基因频率为98.9%,HPA6a基因频率为98.9%,HPA15a基因频率为53.6%.结论 长沙地区汉族人群HPA1-17的基因检测填补了地方空白,为建立血小板库奠定了基础,也为临床提供同型血小板输注提供可能.
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表达HPA抗原的细胞株稳定性及应用的研究
建立血小板特异性抗原永生化细胞株,为血小板免疫学及血小板交叉配型提供永久的研究材料.采用EB病毒(Ep-stein-Barr virus)转化技术,把携带血小板特异性稀有抗原外周血淋巴细胞转化成永生化淋巴母细胞株.结果:成功地建立了13个稀有血小板特异性稀有抗原建立了永久细胞株,所有的细胞株传代、冻存和复苏的成功率为100%,细胞传至30代没有发现基因突变.由所建的细胞株抽提的DNA样本,分发给第14届国际血小板免疫学研究会做为参比试剂,34个国际实验室基因分型鉴定结果的一致率为97.85%.采用EB病毒转化技术,能成功地血小板特异性抗原外周血淋巴细胞转化成永生化细胞淋巴母细胞株,细胞株稳定传代,并可用作为参比试剂.
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血小板输血反应及其对策
血小板输血反应是指由于免疫性或非免疫性原因,使输入患者体内的血小板发生异常破坏,而引起发热、输血相关急性肺损伤、血小板输注后紫癜(post-transfusion purpura,PTP)、血小板输注后无效(platelet transfusion refractoriness,PTR)等输血不良反应[1].本文对血小板输血反应及其对策作一简述.
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大连地区汉族人群HPA-15基因多态性分析
目的 分析大连地区汉族人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,探讨其在血小板输注中的临床意义.方法 采用PCR-SSP法对大连地区100名汉族无血缘关系血小板捐献者的HPA-15系统进行基因分型.结果 大连地区汉族人群HPA-15aa、HPA-15ab、HPA-15bb基因型频率分别为0.360 0、0.440 0、0.200 0.HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.580 0、0.420 0.与我国其他地区汉族人群比较,分布差异无统计学意义.在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率为0.368 5.结论 在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率高,在血小板输注中应加以重视.
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山东汉族人群血小板特异性抗原基因的多态性研究
目的研究山东汉族人群血小板特异性抗原(HPA)1～5和15系统基因多态性分布特点.方法采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对234例无血缘关系,汉族,血小板志愿捐献者进行HPA-1～5和HPA-15系统基因分型,计算等位基因频率、基因型频率并与其他种族、地区人群相关资料比较.结果等位基因频率由高到低依次为HPA-4a、-1a、-5a、-2a、-3a、-15a、-15b、-3b、-2b、-5b、-1b,未检到HPA-4b.基因型频率由高到低依次为HPA-4a4a、-1a1a、-5a5a、-2a2a、-15a15b、-3a3b、-3a3a、-15a15a、-3b3b、-15b15b、-2a2b、-5a5b、-1a1b,未检到HPA-1b1b、-5b5b和HPA-2b2b.与报道的东方人群比较,有显著性差异的系统有HPA-2、-3、-5(P<0.005);与西方人群比较,HPA-1、-2、-3、-5系统有显著性差异(P<0.005),HPA-4无种族间显著性差异.HPA-15系统的基因分布与越南、德国、奥地利人近似,而与印地安人有较大差异(P<0.005).结论 HPA存在明显的种族和地域性差异.山东汉族人发生HPA同种免疫的可能风险抗原基因主要有HPA-3a,-3b,-2b,-5b,-1b,其次为HPA-15a、-15b.
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甘肃人群人类血小板抗原HPA-15多态性调查
目的:研究甘肃人群人类血小板抗原HPA-15系统多态性,评估其在血小板配型输注中的作用.方法:采用PCR-SSP技术对201名健康无血缘关系的血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型.结果:HPA-15a和15b基因频率分别为0.6194和0.3806;同国内其它9个地区人群的HPA-15分布相比较,与7个地区人群有显著性差异.在随机输血中HPA-15a和15b抗原不配合的机会分别为0.1239和0.2365,a、b抗原不配合率合计为0.3604.结论:本调查数据表明,随机输血中供受者HPA-15抗原不配合比例在甘肃人群中高达36.04％,这对研究血小板同种免疫性疾病和开展相合血小板输注具有指导意义.
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甘肃人群人类血小板抗原HPA-3多态性调查
目的:研究甘肃人群人类血小板抗原HPA-3系统多态性,评估其在血小板配型输注中的作用.方法:采用PCR-SSP技术对201名健康无血缘关系的血小板捐献者进行HPA-3系统基因分型.结果:HPA-3a和3b基因频率分别为0.6368和0.3632;同国内其它9个地区人群的HPA-3分布相比较,与5个地区人群有显著性差异.在随机输血中HPA-3a和3b抗原不配合的机会分别为0.1145和0.2411,a、b抗原不配合率合计为0.3556.结论:调查数据表明,随机输血中供受者HPA-3抗原不配合比例在甘肃人群中高达35.56％,这对研究血小板同种免疫性疾病和开展相合血小板输注具有指导意义.
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HPA1-6,15基因遗传多态性在血小板输注中的应用研究
目的:调查浙江地区人群HPA系统遗传多态性特点,探讨临床血小板输注中HPA配型输注的应用效果.方法:采用PCR-SSP方法对400例献血员及54例血小板抗体筛检阳性患者进行血小板抗原HPA1-6,15系统基因分型,对54例患者进行分组血小板输注治疗效果分析.结果:血小板抗原HPA1-6,15系统中HPA-3的b基因频率0.51,系统b基因高,HPA-15的杂合度0.33,系统杂合度高,其余系统均以aa纯合子基因分型占绝对优势,超过90％.血小板HPA配型输注组CCI、PPR均明显优于ABO随机输注组.结论:在血小板临床输注治疗中应用HPA配型血小板可防止输注无效的发生率,从而有效提高血小板输注疗效和安全性,值得推广和应用.
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肇庆地区普通人群血小板基因HPA1～6和15基因多态性及CD36抗原缺失分析
目的 对肇庆地区普通人群进行血小板特异性抗原(HPA)1 ～6、15基因多态性和CD36抗原缺失调查,评估其对临床上血小板输注疗效以及相关疾病的风险度.方法 通过采用PCR-SSP方法对肇庆地区100例体检和血小板捐献者样本进行HPA1～6、15系统分型,同时检测CD36抗原缺失相关的10种基因突变,并统计其频率.结果 95例标本CD36基因无异常,5例(5％)标本检测出可致CD36抗原缺失的基因突变,3例为329delGC,1例为C268T,1例同时出现329 delGC和C268T.初步得出肇庆地区普通人群CD36抗原缺失率(5％)；HPA3、15基因多态性较普遍,杂合程度高,其中3a、3b、15Gova、15Govb的等位基因频率分别为0.45、0.55、0.47和0.52.结论 肇庆地区的HPA3、15基因频率多态性较普遍,CD36抗原缺失率和突变点与广州地区较一致,是本地区在临床输血实践中是较为重要的血小板抗原系统.
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南宁地区HLA、HPA已知基因型血小板供者资料库的设计及建立
目的 设计和建立适合南宁地区人群的HLA、HPA已知基因型血小板供者资料库,为免疫性PTR和血小板减少症患者的治疗提供保障.方法 以4 243名无血缘关系的南宁地区健康供者为对象,研究和分析南宁地区人群HPA基因多态性,以7 001名南宁地区骨髓库供者的HL4基因分型检测数据,分析这些供者的HL4-A,-B基因多态性,并以此为数据基础,预测所建立血小板供者资料库的库容.以预测的佳库容为设计目标,建立南宁地区HLA、HPA已知型血小板供者资料库.供者的HPA-1-17w,HLA-A,-B基因分别使用PCR-SSP、PCR-SSO等基因分型方法.结果 根据对南宁地区人群HPA-1-17w(n=4 243)和HLA-A,-B(n=7 001)基因多态性研究分析,计算推导得到当血小板供者资料库库容为283人时,约有95％的患者能在该库中找到≥1名HPA-1-17w基因型全匹配的供者;当血小板供者资料库库容为819人时,约有80％的患者能在该库中找到≥1名HLA-A,-B CREG全匹配的供者;当血小板供者资料库库容为1 781人时,约有90％的患者能在该库中找到≥1名HLA-A,-B CREG全匹配的供者,如果需要考虑ABO同型血小板输注时,则按人群的ABO血型分布频率将该库容量做相应测算和列出各自库容量的变化.目前所建立的南宁地区HLA、HPA已知基因型血小板供者资料库,包含1 072名献血者数据,按本研究设计的佳库容量预测方案评估,在不考虑ABO同型的情况下,约98.58％患者能在该资料库中找到≥1名HPA基因型全匹配的供者,约83.49％患者能在该血小板供者资料库中找到≥1名HLA-A,-B CREG全匹配的供者.结论 本研究为血小板抗原和/或抗原基因已知型血小板供者资料库的建立提供了设计思路,并已建立了适合南宁地区人群的含1 072名HLA和HPA献血者已知基因型的血小板供者资料库.
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贵州黔东南州苗族人群HPA-1～5、15多态性调查
目的 调查贵州省黔东南州苗族健康随机献血人群人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA) 1-5、15系统基因多态性分布特点.方法 采用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对贵州省黔东南州无血缘关系苗族随机献血人群100例血样进行HPA-1～5、15系统基因分型.结果 贵州省黔东南州苗族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0.950、0.900、0.830、0.985、0.975、0.585,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0.050、0.100、0.170、0.015、0.025、0.4150;与其他研究比较:HPA-1与新疆维吾尔族、海南黎族、中国汉族相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-2与新疆维吾尔族、海南黎族、菲律宾、泰国相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-3与我国其它研究相比较差异均有统计学意义(P＜0.05);HPA-4与其它研究相比较差异无统计学意义(P＞0.05);HPA-5与国内新疆维吾尔族相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-15与新疆维吾尔族、海南黎族族、印度尼西亚相比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 贵州省黔东南州苗族人群HPA分布具有本地人群特点.本组HPA数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,可以作为贵州省黔东南州苗族HPA基因分布频率数据库和血小板供者HPA资料库.
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贵州省黔东南州侗族献血人群HPA-1～5多态性分析及随机输血不配合率研究
目的 调查贵州省侗族健康随机献血人群人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)1～5系统基因多态性分布特点.方法 采用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对贵州省无血缘关系侗族随机献血人154例血样进行HPA-1～5系统基因分型.结果 贵州省黔东南州侗族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、基因频率分别是0.942、0.741、0.926、0.954、0.773,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、基因频率分别是0.058、0.286、0.084、0.045、0.227;经,检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.随机输血HPA不配合的发生率依次为:HPA-4:49.11％,HPA-2:32.％,HPA-5:28.94％,HPA-3:14.35％,HPA-1:10.33％.与其他研究比较:贵州省侗族人群HPA-1～5系统基因频率与不同人群相比较:HPA-1与中国汉族、海南黎族、新疆维吾尔族相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-2与贵州省黔东南州苗族、中国汉族、新疆柯尔克孜族、海南黎族、西藏藏族、浙江畲族、美国白人相比较均差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-3、4与贵州省黔东南州苗族、中国汉族、新疆维吾尔族、新疆柯尔克孜族、海南黎族、西藏藏族、浙江畲族、广西瑶族、美国黑人、美国白人相比较差异有统计学意义(P ＜0.05);HPA-5与贵州省黔东南州苗族、中国汉族、新疆柯尔克孜族、海南黎族、淅江畲族、广西瑶族、美国白人相比较均差异有统计学意义(P＜0.05).结论 贵州省侗族献血人群HPA-1～5系统基因具有独特的分布频率和群体结构特点,且不配合率较高,应建立本地区的血小板献血者基因分型数据库.
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分子生物学技术在血小板特异性抗原基因分型中的应用
血小板特异性抗原(human platelet antigens,HPA)位于血小板膜糖蛋白上.目前,通过血清学方法已确认了24个HPA,其中的12个被分成6个HPA系统(HPA-1—5、15).
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血小板特异性抗原基因与职业性慢性苯中毒的相关性分析
目的 探讨血小板特异性抗原HPA-1-6,15基因多态性与职业性慢性苯中毒的相关性.方法 采用FLOW-SSO法和PCR-SSP法对32名职业性慢性苯中毒患者(病例组)做HPA-1-6,15基因分型,并将之与中国汉族人群(对照组,n=245 8)的数据比较.结果 HPA-3b等位基因频率、HPA-3基因型分布,病例组与对照组分别为0.593 7 vs 0.441 4(P ＜0.05)及0.750 0 vs 0.506 9(P ＜0.01);HPA-3b等位基因相关ab/bb基因型,实验组与对照组分别为96.88％ (31/32) vs 69.49％(1 708/2 458)(P＜0.01).HPA-1,2,4,5,6,15等位基因频率和基因型分布,2组比较均无明显差异(P＞0.05).结论职业性慢性苯中毒可能与HPA-3基因多态性有关.
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血小板特异性抗原HPA-17bw基因分型及基因频率调查
目的 对HPA-17bw基因分型并调查其在部分汉族人群中的分布.方法 采用PCR-SSP方法 对无亲缘关系的健康无偿献血者HPA-17bw进行基因分型,采用基因计数法进行基因频率、基因型频率的计算.结果 259名正常人的HPA-17bw基因频率为0.000; HPA-17 bw/bw的基因型频率为0.000.结论 HPA-17bw为低频抗原,259份汉族样本中尚检测不出HPA-17bw.
关键词： 血小板特异性抗原 基因频率 聚合酶链反应-序列特异性引物
