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ACS:180发光免疫分析系统原理与常见故障维修
拜尔ACS:180全自动化学发光免疫分析系统是近几年才发展起来的一项新技术.它是依托磁性微粒子分离技术和直接化学发光技术,以吖啶酯为发光标记物,通过双抗夹心法和竞争法来实现对甲状腺、贫血、癌标、性激素、心血管、胰腺等项目的检测.其临床意义已日渐显现出来.
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甘胆酸化学发光定量免疫分析方法的建立
目的 建立甘胆酸(CG)化学发光免疫检测方法.方法 采用竞争法,固相微孔L板包被技术,通过与参比试剂盒临床结果相关性的比较,保证其具有同等的临床诊断价值.结果 本试剂盒的线性范围为0.25～ 40 μg/mL,灵敏度为0.05μg/mL,批内精密度分别为7.1％和7.4％;批间精密度为11.3％和15.74％;样品的回收率在85％～115％之间.与透明质酸、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原氨端肽、层粘连蛋白、胆酸以及鹅脱氧胆酸的交叉反应率在0.010％～1.480％之间,均不会对CG的正常测定构成干扰.通过临床样品正常值的测定确定了正常值范围,与有关文献报道基本一致.同时,与北京北方生物技术研究所的放免药盒临床结果进行科学比较,两组结果的相关系数r为0.947.结论 该试剂盒与参比试剂盒的测定结果具有较高的符合率,应用于临床,可为慢性肝炎复发、轻度肝硬变、肝癌、肝胆胃肠消化系统疾病的研究诊断提供可靠的指标.同时,肝胆酸与血清Ⅳ型胶原、透明质酸和前白蛋白(PA)动态联检对于肝硬化的诊断、疗效及预后判断具有重要的临床意义.
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血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸化学发光定量免疫分析方法的建立
目的 建立血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸(T3)化学发光定量免疫分析方法.方法 采用固相竞争法,96孔微孔板包被T3抗体,辣根过氧化物酶标记T3,鲁米诺为发光底物,建立T3化学发光定量免疫分析方法.结果 本方法的线性范围为0.5 ～8.0ng/mL;分析灵敏度为0.18ng/mL;批内变异系数为4.4％ ～6.6％,批间变异系数为5.5％～10.6％;回收率为90.0％～113.3％;高值T3血清样品经系列倍比稀释后的测定值与稀释度呈线性关系,相关系数为0.9922;与T4、γT3的交叉率分别为0.35％、0.54％;与罗氏电化学发光分析法的测定值具有较好的相关性.结论 本方法具有分析灵敏度高、特异性好和操作简便快速的特点,适用于临床检测和科研应用.
关键词： 竞争法 3 5 3'—三碘甲腺原氨酸(T3) 化学发光免疫分析 -
雅培全自动化学发光免疫分析仪i2000SR故障维修一例
0 引言全自动化学发光免疫分析仪是医院检验科常用设备之一,大连大学附属中山医院使用的是美国雅培公司i2000SR全自动化学发光免疫分析仪,可同时检测25个项目,每小时能完成200个测试,具有较高的工作效率及准确性和灵敏度.化学发光免疫分析(chemilumineseent immunoassay,CLIA)是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物直接标志抗体或抗原的数量,进而对抗体或抗原进行特定量检测的一类免疫分析法.检测技术中检测小分子抗原使用竞争法,检测大分子抗原用夹心法.i2000SR全自动免疫发光分析仪中肝炎检测项目优势明显,在肝炎定量检测方面属于全球金标准测试,其中的HbsAg和HbsAb为全定量检测,HbeAg、HbeAb、HBcAb为半定量检测.i2000SR全自动免疫发光分析仪对甲状腺的检测项目中促甲状腺素(thyroid Stimulating Hormone,TSH)具有优灵敏度.
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230例甲胎蛋白阳性原发性肝癌病人血清HBV抗原抗体模式分析
原发性肝癌(PH C)与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性已较明确，为探讨肝癌病人HBV感染状态，我们对230例甲胎蛋白(AFP)阳性确诊为PH C病人的HBV血清标志物进行了检测与分析。 1 材料和方法 230例PHC患者中，男200例，女30例，年龄28～77岁，平均52.84岁，为解放军302医院1995年至1998收治的病例，根据肝癌诊断标准，经临床、B超及CT证实且AFP阳性的PHC病人。AFP的检测采用放射免疫测定法，以AFP>400ng／ml判定为阳性；HBsAg、HBeAg、HBsAb的检测用双抗体夹心法。HBeAb及HBcAb的检测用竞争法。试剂盒由解放军302医院生产。
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如何正确认识HBeAg和抗-HBe同时阳性
编辑同志:阅读<中华检验医学杂志>2008年第31卷第1期专家答疑栏目中毛远丽教授撰写的"为何在临床工作中会遇见同一份标本的对应抗原、抗体同时阳性,如何解释?"一文~[1],文中毛远丽将HBeAg和抗-HBe同时阳性仅归于检测敏感度的提高,笔者认为此说法是不全面的.被检测血清中存在高浓度的HBeAg,其浓度范围处于剂量-反应曲线的下降区域,此时可检出HBeAg.同时平行的竞争法ELISA检测抗-HBe的试验中,由于混入了含有高浓度HBeAg的中和试剂,混合样本中的HBeAg总剂量就可接近或超过高剂量钩状效应的临界浓度,出现反应信号降低或无反应信号.
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流式细胞术检测红细胞结合IgG及临床应用
我们建立了应用流式细胞术(FCM)检测红细胞结合IgG(EBIgG)的方法,对自身免疫性溶血性贫血(AIHA)和其他血液疾病患者进行检测,并与直接抗人球蛋白试验(DAT)和ELISA竞争法的结果作了比较,探讨FCM在AIHA实验诊断及预后估计中的意义.
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固相板酶免法测定人血清游离三碘甲状腺原氨酸
目的:探讨游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的酶免疫测定法对于诊断甲状腺功能亢进和监测甲状腺激素补充治疗效果及预后情况的重要意义.方法:采用聚苯乙烯96孔板作为固相载体,利用亲和纯化的兔抗T3抗体和T3-β-半乳糖苷酶标记物,建立了固相板竞争法.结果:可测范围为0.48～45.0 ng/L,灵敏度0.13 ng/L,平均批内变异系数为(n=20)6.4%,平均批间变异系数为(n=8)12.4%,正常参考范围4.14±0.97 ng/L.正常人与甲亢病人能明显分开.结论:酶免法测定血清FT3,其灵敏度、精密度均达到放免水平,且可避免同位素污染.
关键词： 游离三碘甲状腺原氨酸 酶免疫测定 竞争法 -
磁性分离酶联免疫测定方法应注意的事项
磁性分离酶标免疫技术是80年代中期Serono(史朗洛)诊断中心发明的一种非同位素免疫检测的先进技术,称为磁性抗体免疫技术,它采用标本抗原,酶标单克隆抗体(原),荧光素标单克隆抗体夹心法(竞争法)形成免疫复合物.磁珠联接的抗荧光素抗体与免疫复合物中的荧光素结合,经磁场分离,洗涤,加底物后测定酶促反应成色结果可计算出标本抗原含量.此方法具有操作简便,无放射危害,多波长同时检测,
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血清抗-HBcIgG单阳性者HBV DNA含量的分析
乙肝核心抗体(抗-HBc)包括乙肝核心抗体IgM和乙肝核心抗体IgG,常用竞争法检测.HBV感染后多数人血清中能检出此抗体,它是一种敏感的血清学标志,也是乙型肝炎急性感染的早期标志,在血清中存在的时间很长,有些人滴度很高.
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慢性肺心病患者血清肿瘤坏死因子α测定的临床意义
采用放射免疫液相竞争法测定62例不同程度肺心病患者血清中的(TNF)-α肿瘤坏死因子,结果明显高于对照组,并随着肺心病心功不全加重而增加.TNF-α可能参与慢性肺心病的发病过程.
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狨猴肝HAAg检测抗HAV-Ig:M的临床研究
1978年在急性期甲型病毒性肝炎(甲肝)患者的粪中发现了甲肝病毒抗原(ⅡAag)[1].随后发展了各种检测甲肝抗体的血清学试验(如OF[2]、IAHA[3]、SPRIA或ELISA的竞争法等[4]).近年来国内报道ELISA检测抗-HA-IgM时,多采用粪提取HAAg[5,6],结果不很理想.本文采用从感染甲肝的狨猴肝脏中提取的HAAg检测抗-HA-IgM,并动态观察了甲肝患者血清抗-HA-IgM的变化,报告如下.
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夹心与竞争化学发光免疫分析检测人血清透明质酸的比较分析
目的:比较人血清透明质酸(HA)夹心化学发光免疫分析和竞争化学发光免疫分析,对两种方法的相关性、线性范围和检测效果进行评价.方法:分别应用人血清HA夹心和竞争化学发光免疫分析对197例血清样本进行HA含量检测,并对检测结果进行分析,同时对两种方法的精密度、回收率和灵敏度进行比较.结果:夹心法的准确性和精密度都要高于竞争法,在95%可信限下其检测灵敏度能达到0.66 μg/L,而竞争法只能达到7.26 μg/L,两种方法均能准确测定血清中HA含量,其相关性良好,线性关系为y=1.1893x-25.974(r=0.9871),两组数据之间没有显著性差异(t=1.966,P>0.05).结论:两种方法都能准确测量人血清中HA含量,但夹心化学发光免疫分析的灵敏度、重复性、回收率都优于竞争法.
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辉瑞因涉嫌不正当竞争而遭欧委会和制药协会联手抨击
据世界医药新闻杂志(Scrip)10月18日报道,欧洲制药协会(EAEPC)和欧委会(European Commission)日前联手将辉瑞公司告上法庭,状告其违反欧盟竞争法,实行双重价格体系,并阻碍西班牙向欧盟其它国家出口药品.
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总甲状腺素时间分辨荧光免疫分析方法的建立
目的 建立总甲状腺素(TT4)时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)竞争检测法.方法 用羊抗鼠IgG包板,对应的抗T4抗体(Anti-T4)为竞争抑制抗体,用Eu3+标记T4-BSA做标记物,以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,竞争法TrFIA检测人血清中的TT4.结果 TT4-TrFIA的灵敏度达6.895 nmol/L(1.000 nmol/L=0.7778 ng/ml);批内CV为4.12%～5.62%,批间CV为5.58%～8.61%;特异性好;平均回收率为99.16%;线性范围在11.0～300.0 nmol/L之间;热稳定性好;与TT4微粒子酶免疫分析技术(MEIA)比对,相关系数达0.9544.结论 建立的TT4-TrFIA法具有灵敏度高,特异性强,稳定性好,测定范围宽,检测时间短和非放射性等优点,具有良好的应用价值.
关键词： 甲状腺素 时间分辨荧光免疫分析 竞争法 -
不同加样方式对竞争ELISA法检测抗HBc的影响
目的 探讨不同加样方式对竞争ELISA法结果的影响.方法 收集乙肝病毒标志物(HBV M)62份常见阳性模式(A组)、45份单项抗HBe阳性(B组)、36份HBVM全阴性(C组)及89份随机收集的血清标本,用竞争ELISA法以2种加样方式检测抗HBc,以夹心ELISA法检测抗HBc为对照.结果 3组血清标本用竞争法2种加样方式检测的抗HBc结果A值均存在统计学差异(t=2.887～6.096,P=0.00～0.009),且B组的2种方式定性结果符合率仅为86.7%;对随机收集的89份血清标本,加样方式一与夹心法结果存在统计学差异(X2=5.56,P<0.05).结论 不同加样方式对竞争ELISA法结果的影响应引起重视.
关键词： 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎病毒核心抗体 竞争法 夹心法 -
保健品和化妆品中雌二醇免疫法测定溶剂的选择
随着含动物激素的保健品药物及化妆品不断地开发、使用,保健品、药物、化妆品中性激素含量的测定越来越必要.由于液相色谱测定性激素操作繁杂,费用昂贵,所以多选用免疫法进行测定.免疫法通常为竞争法,因试管壁对抗原的吸附作用,存在着空白值过高的问题,严重影响结果的准确[1].我们以雌二醇为例,为克服溶剂空白值过高,并使雌二醇达到理想的溶解度(雌二醇不溶于水),配制了多种溶剂,经反复试验.选择的溶剂能够满足测定的需要.
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ACS:180SE化学发光仪的初步评价
ACS:180SE型全自动化学发光免疫分析仪能检测原用放射免疫测定的一些项目.笔者使用一年半来,对该产品所测项目的准确度、精密度、携带污染率方面较满意.本文分别用夹心法测定的AFP、HCG与用竞争法测定的FT3、FT4等常见项目对仪器进行评价.
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海洛因依赖者尿吗啡测定时间在临床上的意义
海洛因、吗啡和可待因等鸦片类毒品是罂粟胶质中的提取物或衍生物,海洛因和可待因在体内经过代谢可以转变成吗啡代谢物.因此尿液中吗啡和吗啡代谢物的存在表明尿样提供者体内存在鸦片类毒品.许多检测方法可以用来检测人体中毒品的存在,其中免疫法由于速度快,反应灵敏,操作简便而被广泛用于初步筛选性的检查.SureStepTM吗啡检测盒应用免疫竞争法的原理,对人体尿液中的毒品进行鉴定,其分析结果瞬即呈现,肉眼就可以观察出定性结果,检测临界浓度为300ng/ml.
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自制"临界值"质控物在抗-HBc检验(ELISA)中的应用观察
目前,国内绝大多数实验室采用ELISA竞争法定性检测乙肝标志物抗-HBc,虽然国内专家对ELISA检测乙肝标志物的室内质控进行了一些探讨[1,2],但尚未统一和推广,多数实验室仍采用阴性及阳性对照血清进行控制.因各实验室所用仪器和试剂不一,以及人为操作造成的各种误差,致使同一病人在同一时间由不同的实验室测得结果各异[1,2].
