您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
小分子干扰RAN文献资料
-
抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA设计、合成及活性鉴定
目的设计、合成及筛选高效抗肝纤维化关键基因--结缔组织生长因子(CTGF)的小分子干扰RNA(siRNA).方法应用RNA设计软件,模拟SD大鼠CTGF mRNA二级结构,设计并合成针对CTGF mRNA 483、885及946位点的三对21核苷酸(nt)siRNA,转染肝星状细胞系(HSC T6),以空白及转染非特异siRNA(与CTGF mRNA无同源性的21nt siRNA)作为对照,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSC T6细胞CTGF mRNA表达.结果与对照相比,转染siRNA的HSC T6细胞CTGF mRNA明显下调,在50～200nmol/L范围,CTGF mRNA下调幅度呈浓度依赖性增加,以483 siRNA 200nmol/L显著,转染非特异siRNA的HSC T6细胞CTGF mRNA表达水平无明显变化.转染483 siRNA的HSC T6细胞24、48及72 h CTGF mRNA分别较对照下调91%±2%、65%±3%(t=78.82,37.53,P均＜0.01)和10%±7%(t=2.55,P=0.06),在24～72 h范围,CTGF mRNA下调幅度呈时间依赖性降低.结论成功筛选到能高效阻抑CTGF表达的483 siRNA,其有效阻抑时间约72 h,有望通过介导CTGF mRNA剪切而抑制肝纤维化的发生与发展,可发展为新一代防治肝纤维化的核酸药物.
