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  • 抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建

    作者:何颖;黄力;章亚男;黎怀星;陈蕊雯;孙树汉

    目的:将淀粉样蛋白N端的抗原表位基因以4种不同的组合与小鼠IgG重链区基因融合,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒.方法:通过RT-PCR技术从小鼠脾组织中克隆IgG重链区cDNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在5′端引物中,然后以克隆出的小鼠IgG重链区cDNA为模板,用PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和IgG重链区基因融合在一起的序列,并插入到pVAX质粒载体中.结果:扩增出来的4种不同组合的抗原表位基因和IgG重链区基因融合序列大小分别为999、1 020、1 005、1 026 bp,均与GenBank上登录的相符;pVAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到pVAX载体中,全自动测序亦显示抗原表位基因和IgG重链区基因为所需基因,接头序列也完全正确.结论:成功构建了抗阿尔茨海默病的4种表位基因-IgG重链区融合表达的重组质粒,为探索防治阿尔茨海默病打下基础.

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