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CD133、TROP-2在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究初探
目的:探讨肿瘤干细胞标志物CD133、人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigens 2,TROP-2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义.方法:用免疫组化、免疫荧光法检测CD133、TROP-2在NSCLC中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位和共定位.结果:①CD133、TROP-2在NSCLC组织中的阳性表达率分别为30.00％和41.25％,均明显高于癌周正常肺组织及肺良性病变组织(P＜0.01)；②细胞分化程度越低,CD133表达阳性率越高(P=0.024)；③CD133、TROP-2在有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组(P＜0.05),TROP-2的阳性表达率随着TNM分期的升高而升高(P＜0.05)；④CD133、TROP-2在NSCLC中的表达具有密切相关性(P＜0.001),且两种蛋白有共定位现象.结论:CD 133 、TROP-2的阳性表达均与NSCLC的侵袭、转移密切相关,初步证实二者在NSCLC组织中存在共定位关系,CD133联合TROP-2或许能成为NSCLC的肿瘤干细胞筛选标记物.
关键词： 非小细胞肺癌 肿瘤干细胞 CD133 人滋养层细胞表面抗原-2 -
抗人滋养层细胞表面抗原-2单抗的制备及免疫学特性分析
目的:利用杂交瘤技术制备抗人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblaat cell-surface antigen 2,Trop2)单克隆抗体并鉴定其免疫学特性.方法:以胰腺癌细胞系BxPC3免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合后制备单抗.通过酶联免疫法、免疫荧光、免疫沉淀和质谱分析、流式细胞术、免疫组织化学等方法,鉴定单抗的免疫学特性.结果:通过细胞的融合与筛选,获得了持续分泌抗Trop2单抗的杂交瘤细胞株,该抗体可以识别细胞表面的Trop2膜蛋白,也可用于免疫组化识别人肿瘤组织中的,Trop2蛋白,同时该抗体对乳腺癌细胞的生长具有一定的抑制作用.结论:该单抗具有作为Trop2阳性表达肿瘤靶向治疗的潜在应用价值.
关键词： 人滋养层细胞表面抗原-2 单克隆抗体 免疫组化 -
RNA干扰沉默Trop2表达对喉癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用
目的:研究siRNA沉默人滋养层细胞表面抗原-2(Trop2)基因对人喉癌裸鼠皮下移植瘤生长和对Trop2表达的抑制作用.方法:将与Trop2 mRNA互补的siRNA通过阳离子脂质体转染Hep-2细胞,以正常Hep-2细胞为对照组,将Hep-2组细胞和Hep-2-siRNA组细胞分别注射于裸鼠皮下,4周后处死裸鼠后测量移植瘤体积并称量移植瘤重量,分别采用免疫组织化学SP法、实时定量PCR和Western blot法检测Trop2 mRNA和蛋白的表达.结果:人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型建立成功后,Hep-2-siRNA组裸鼠皮下移植瘤的体积增长明显落后于Hep-2对照组,瘤体质量下降(P＜0.05);Hep-2-siRNA组裸鼠裸鼠皮下移植瘤中Trop2 mRNA和蛋白表达较Hep-2组明显下降(P＜0.05).结论:siRNA沉默Trop2基因可以下调裸鼠移植瘤中Trop2表达,抑制肿瘤生长.RNA干扰技术可能成为治疗喉癌的一种新途径.
关键词： 喉肿瘤 人滋养层细胞表面抗原-2 RNA干扰 裸鼠 Hep-2细胞
