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青藤碱对骨肉瘤细胞增殖的影响及其抑瘤作用观察
目的 观察青藤碱对骨肉瘤细胞增殖的影响及其抑瘤作用,探讨其可能的机制.方法 ①取传至3～7代的人骨肉瘤MG-63细胞,随机分为四组,空白组不予处理,50 mmol/L青藤碱组、100 mmol/L青藤碱组、200 mmol/L青藤碱组分别给予50、100、200 mmol/L青藤碱干预24 h.干预后各组细胞均再培养12、24、36、48 h,采用MTT法检测细胞增殖能力,Western blotting法检测KLF4蛋白相对表达量.②采用背部皮下注射MG-63细胞的方法构建骨肉瘤裸鼠模型20只,随机分为青藤碱组和对照组各10只,分别腹腔注射青藤碱20mg/(kg·d)和同等剂量的生理盐水.3周后处死裸鼠取出瘤体,记录瘤体质量、瘤体体积,计算青藤碱抑瘤率;分别采用real-time PCR法、Western blotting法检测两组肿瘤组织KLF4 mRNA和蛋白相对表达量.结果 ①随培养时间的延长,各组细胞增殖能力均呈逐渐升高趋势.培养36、48 h,空白组、50 mmol/L青藤碱组、100 mmol/L青藤碱组、200 mmol/L青藤碱组细胞增殖能力依次降低,两两比较P均<0.05.对照组、50 mmol/L青藤碱组、100 mmol/L青藤碱组、200 mmol/L青藤碱组KLF4蛋白相对表达量依次降低,两两比较P均<0.05.②青藤碱组瘤体质量、瘤体体积均低于对照组(P均<0.05),青藤碱抑瘤率为62.51％;青藤碱组肿瘤组织KLF4 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05).结论 青藤碱可抑制骨肉瘤细胞增殖及骨肉瘤生长,其作用呈浓度依赖性;下调肿瘤细胞或肿瘤组织KLF4表达是其可能的机制.
关键词： 骨肉瘤 青藤碱 细胞增殖 Krappel样因子4 裸鼠
