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miR-133b 对骨肉瘤细胞 MG-63增殖的抑制作用及其机制
目的:探讨 miR-133b 是否通过下调 KLF4抑制骨肉瘤细胞系 MG-63的增殖。方法将 MG-63细胞分为对照组、miR-NC 组和 miR-133bmimic 组,对照组不做干预,miR-NC 组转染 miR-NC,miR-133bmimic 组转染 miR-133bmimic。24 h 后,Western blotting 法检测 MG-63细胞中与细胞增殖相关的蛋白 p21、p27、PCNA、Ki-67以及 KLF4的表达,12、24、48 h 后,MTT 法观察细胞增殖活力,利用荧光素酶试验验证 KLF4是 miR-133b 的靶基因;将 MG-63细胞随机分为 miR-133b 组、miR-133b +KLF4组、miR-133b +空质粒组,分别转染 miR-133bmimic、miR-133bmimic +KLF4过表达质粒、miR-133bmimic +空质粒。检测 MG-63细胞中 p21、p27、PCNA、Ki-67、KLF4的表达,并观察细胞增殖情况。结果相比于 miR-NC 组,miR-133bmimic 组中,24、48 h MG-63细胞的增殖活力降低(P 均<0.01), PCNA、Ki-67、KLF4的表达减少,p21、p27表达增加(P 均<0.05或<0.01)。荧光素酶试验结果显示,miR-133b 能够显著降低 KLF4-3′-UTR 质粒的荧光素活性(P <0.05);相比于 miR-133b +空质粒组,miR-133+KLF4组 MG-63细胞中 PCNA、Ki-67表达增加(P 均<0.05),p21、p27表达减少(P 均<0.01),细胞增殖率升高(P <0.01)。结论miR-133b 通过下调 KLF4表达从而抑制骨肉瘤细胞系 MG-63的增殖。
关键词: 骨肉瘤 miRNA-133b Kruppel 样因子 4 细胞增殖