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细胞分裂周期蛋白2文献资料
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小脑微量注射cdc2-siRNA对C型尼曼-匹克病小鼠共济运动的影响
目的 观察抑制cdc2基因的异常激活对C型尼曼-匹克病(Niemann-Pick disease type C,NPC)小鼠共济运动的影响.方法 包装携带cdc2-siRNA的重组腺相关病毒(rAAV),将该病毒注射至2周龄npc-/-小鼠的小脑中,8周龄时采用足印实验、垂直屏实验检查小鼠的共济运动,并用HE染色及蛋白免疫印迹法分别检查小脑浦肯野细胞数量及微管相关蛋白Tau的磷酸化(由PHF-1抗体识别)情况.结果 (1)足印实验显示cdc2-siRNA npc-/-组的步长[(4.92±0.31) cm]比空载体npc-/-组[(4.05±0.19) cm]显著增加(R0.05).(2)垂直屏实验显示cdc2-siRNA npc-/-组小鼠转头向上、爬至网屏上边缘的时间[(26.01±1.82)s、(50.93±1.98)s]分别比空载体npc-/-组[(31.96±3.47)s、(56.89±2.97)s]明显缩短(均P＜0.05).(3)cdc2-siRNA npc-/-组小鼠小脑浦肯野细胞数目[(11.0±2.5)个]较空载体npc-/-组[(5.1±2.2)个]显著增加(P＜0.05).(4) cdc2-siRNA npc-/-组小鼠cdc2及磷酸化Tau蛋白免疫反应条带相对灰度值(1.42土0.22、0.95±0.31)分别较空载体npc-/-组(2.11±0.29、2.61±0.62)明显降低(均P＜0.05).结论 抑制cdc2基因的异常激活可通过挽救浦肯野细胞的脱失和减轻小脑Tau蛋白的过度磷酸化以改善npc-/-小鼠的共济运动.
