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新型胰岛分离液对小鼠胰岛分离效果的研究
目的 探讨新型胰岛分离液(IPS液)在小鼠胰岛分离中的分离效率及胰岛保护作用.方法 将消化后的小鼠胰腺按体积平均分为两组(IPS组和UW组),分别应用IPS-Optiprep液及UW-Optiprep液进行连续梯度密度离心分离胰岛,比较两组分离液的分离纯化效率和分离后的胰岛活性.将诱导成功的糖尿病小鼠随机分为3组:实验组(n=10),接受采用IPS-Optiprep液分离纯化的胰岛移植;对照组(n=10),接受采用UW-Optiprep液分离纯化的胰岛移植;假性移植组(n=5),仅给予手术但并不进行胰岛移植.分析3组小鼠术后血糖水平以及测实验组和对照组小鼠术后21 d的腹腔葡萄糖耐量试验的血糖水平.比较两种分离液的配制成本.结果 与UW组相比,IPS组的IPS-Optiprep液可提供更高的胰岛当量(IEQ)、胰岛纯度、回收率及胰岛完整度.胰岛形态观察可见,IPS组胰岛被膜完整,直径明显大于UW组.UW组纯化后的胰岛活性率高于IPS组[(88±5)%比(84±3)%,P<0.01].与UW-Optiprep液相比,IPS-Optiprep液可获得相当的在体胰岛功能.IPS-Optiprep液可显著降低胰岛分离纯化成本.结论 新型胰岛分离液IPS-Optiprep液在胰岛分离提纯中显示出较好的分离效率,增加了胰岛的纯度、完整度与回收率,并显著降低了纯化成本,但对胰岛细胞活性的保护作用稍逊,可能与胰岛的高完整度及IPS-Optiprep液中的内毒素有关.