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蛋白激酶D-2文献资料
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银杏酚酸通过抑制PKD-2活性提高Tca8113细胞对化疗药物的敏感性
目的 探讨蛋白激酶D-2( protein kinase D-2,PKD-2)在银杏酚酸(ginkgolic acid,GA)提高舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113对化疗药物敏感性过程中的作用.方法 通过MTT方法检测GA对Tca8113的增殖抑制及提高Tca8113对化疗药物敏感性;Western blot检测在GA不同作用时间下PKD-2在Tca8113中的表达及磷酸化特性;利用shRNA干扰技术基因沉默Tca8113中的PKD-2基因;利用佛波酯(PMA)诱导Tca8113中的PKD-2高磷酸化;以MTT方法检测经shRNA干扰后的Tca8113和及经PMA诱导后的Tca8113细胞对GA及化疗药物的敏感性.结果 GA抑制Tca8113生长的半数抑制浓度( IC50)为20 mg/L,GA明显提高Tca8113对化疗药物卡铂(CBP)和紫杉醇(PTX)的敏感性,分别提高4.37倍和39.20倍(P＜0.05);在野生型Tca8113中与非磷酸化PKD-2蛋白质表达相比较,GA对Tca8113中磷酸化PKD-2蛋白质的表达呈时间依赖性抑制作用(P＜0.05);经shRNA沉默后的Tca8113细胞建立稳定细胞株,同与GA联合用药作用相似,PKD-2基因沉默后的Tca8113细胞对CBP和PTX的敏感性明显提高,分别提高1.6517倍和1.5016倍(P＜0.05);PMA激活Tca8113中的PKD-2后,Tca8113对CBP和PTX的敏感性明显降低,同时发现GA能明显拮抗PMA作用.结论 GA通过抑制PKD-2活性途径提高Tca8113对化疗药物的敏感.
