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海藻糖水替代机制对冻干红细胞保护作用的探讨
目的 探讨海藻糖对冻干红细胞复水回收率和残余水含量的影响及其对红细胞膜的保护机制.方法 将红细胞分别与100、200、400、600、800、1 000 mmol/L海藻糖负载溶液孵育,共6组,并设置对照组,用海藻糖检测试剂盒特异性检测红细胞中海藻糖加载量;用冷冻干燥机对红细胞做冷冻干燥,Karl-Fisher滴定法结合卡式炉法测定冻干红细胞中残余水含量;细胞计数仪检测复水后红细胞数目.结果 随着负载海藻糖溶液浓度的上升,冻干红细胞复水回收率先平稳后上升,当负载溶液浓度达到800 mmol/L时回收率高;残余水含量先保持不变,然后下降,当负载溶液浓度达到800和1 000 mmol/L时,残余水含量(％)3.47±0.21和2.43±0.18.此外,冻干红细胞组与冻干血影细胞组残余水相同.结论 初步证实了海藻糖通过水替代作用保护红细胞膜.
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甘油浓度对红细胞冻干保存效果的影响
目的 探讨甘油浓度浓度对红细胞冷冻干燥保存的回收率、溶血率及残余水含量的关系.方法 以甘油浓度分别为3％、6％、9％、12％、15％、18％ 、21％ (w/v)的冻干保护剂处理红细胞,冻干,用显微镜观察细胞形态、血细胞计数仪检测细胞数、分光光度计测定游离血红蛋白量,分析细胞复水后红细胞计数、溶血情况.用热重法测定冻干红细胞水分含量,分析不同保护剂组红细胞的水分含量变化情况.结果 复水后红细胞形态正常,甘油浓度为9％、12％、15％时,红细胞回收率分别为(77.08±9.41)％、(84.37±3.42)％、(80.21±9.20)％,红细胞溶血率分别为(19.82±2.23)％、(17.66±1.17)％、(15.86±2.23)％,相应的冻干红细胞残余水分含量为(19.43±1.36)％、(22.89±1.57)％、(26.17±1.09)％.结论 保护剂中甘油浓度影响红细胞冻干保存的效果;甘油浓度为(9-15)％时对冻干保存的红细胞损伤较小;冻干红细胞残余水分含量随保护剂中甘油浓度的增高而增高.
