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1种新的国产风疹病毒IgG抗体化学发光检测试剂的性能评价
目的 评价一种新的国产风疹病毒IgG抗体化学发光检测试剂的检测性能.方法 收集临床血液样本350份,同时用评价试剂和比对试剂盲法检测风疹病毒IgG抗体.以此新的国产风疹病毒IgG抗体化学发光测定试剂作为评价试剂,以意大利索灵风疹病毒IgG抗体检测试剂盒(化学发光法)为比对试剂,2种试剂检测结果不一致者以第三方试剂Trinity风疹病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)验证,对临床血液样本进行等效性评价.结果 评价试剂和比对试剂测定结果阳性符合率为98.06％ [95％ CI:95.84％,99.11％],阴性符合率为100.00％ [95％ CI:91.24％,100.00％],总符合率为98.29％ [95％ CI:87.47％,100.00％],不一致者以第三方试剂验证后可得灵敏度为98.06％[95％CI:95.84％,99.29％],特异性为100.00％ [95％CI:91.19％,100.00％],阳性预测值为100.00％ [95％CI:98.79％,100.00％],阴性预测值为86.96％ [95％CI:73.74％,95.06％].评价试剂和比对试剂的ROC曲线下面积分别为0.998和1.000,诊断效能与比对试剂无统计学差异.Passing-Bablok回归分析显示两者存在显著的线性关系.结论 该新的国产风疹病毒IgG抗体化学发光测定试剂敏感性和特异性很高,能为临床风疹病毒IgG抗体的检测提供可靠的实验室诊断依据.
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青海省2007年一起风疹暴发的血清学诊断和基因型别鉴定
[目的]调查2007年4月青海省互助地区中小学发生的疑似风疹暴发流行,并确定引起此次暴发的风疹病毒的基因型别. [方法]采集风疹急性期患者的血标本和咽拭子标本,使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测风疹IgM抗体对本次疫情进行证实,使用Vero/SLAM细胞对采集的咽拭子进行病毒分离,随后采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)和序列测定的方法对分离的风疹病毒进行基因定型. [结果]对采集的20份疑似风疹血清标本进行风疹IgM抗体检测,其中14份为阳性结果,阳性率为70%,证实为风疹暴发;并成功分离到9株风疹病毒,全部鉴定为1E基因型,同时基因亲缘性关系树显示,该9株病毒在型内又形成两个小分支. [结论]从流行病学上来看,此次暴发是由至少两个不同传播链的1E基因型风疹病毒引起的.
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2014-2015年银川市24株风疹病毒基因型流行特征分析
目的 对2014-2015年银川市流行的风疹病毒进行分离鉴定,确定其基因型,并进行基因与氨基酸的特征分析.方法 采用Real-time PCR法对采集的疑似风疹病例的咽拭子标本进行初筛,阳性标本使用Vero/SLAM细胞进行病毒分离,采用RT-PCR法对病毒培养物进行风疹病毒株E1基因的标准靶核苷酸序列扩增,并对扩增产物进行序列测定与分析.结果 2014-2015年银川市共分离到24株风疹病毒株,进化树结果显示均为2B基因型;24株分离株之间的核苷酸与氨基酸同源性分别为98.1％～100.0％和97.5％～ 100.0％.对核苷酸编码的氨基酸序列进行比对,尽管出现了多个氨基酸的突变位点,但关键位点如N-型糖基化位点、血凝抑制位点、中和位点以及重要的抗原表位均未发生变化.结论 2014-2015年银川市流行的风疹病毒主要是2B基因型,与国内其他地区普遍流行的基因型(1E基因型)不一致.虽然出现了氨基酸的变异,但关键位点的氨基酸序列高度保守,病毒抗原性较稳定.
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风疹病毒宫内感染的实验诊断研究
目的:建立准确、快速的风疹病毒内感染实验诊断方法.方法:将疫苗株病毒稀释后接种Vero细胞,收集不同时段培养上清液和细胞,RT-PCR法检测风疹病毒RNA(培养RT-PCR法).用直接RT-PCR法和培养RT-PCR检测可疑风疹病毒感染的胎儿组织和羊水标本.结果:直接RT-PCR法可检测模拟羊水标本中15 TCID50/ml风疹病毒RNA.培养RT-PCR法在10 TCID50的病毒感染后6h的V细胞和感染后24h的培养上清液中检出风疹病毒RNA.直接RT-PCR法和培养RT-PCR法检测4例足月产胎儿羊水均阴性;1例引产胎儿羊水直接RT-PCR法阴性,培养RT-PCR法在接种细胞后24h检出风疹病毒RNA.结论:培养RT-PCR法是一个快速、特异、灵敏的实验室诊断风疹病毒宫内感染的方法.
关键词： 风疹病毒 宫内感染/先天感染/先天性感染 RT-PCR 细胞培养 诊断 -
新疆伊犁地区汉族、维吾尔族、哈萨克族育龄妇女风疹免疫抗体(RV-IgG)水平调查
[目的]通过对新疆伊犁州市区及县乡汉族、维吾尔族、哈萨克族3个主体民族育龄妇女风疹抗体水平的调查,了解育龄妇女对风疹病毒的免疫力状况和不同民族闻风疹免疫情况的差异,为制定适合本地区风疹控制策略提供科学依据.[方法]采用定量ELISA方法对3个不同民族育龄妇女(16-25岁)共1617人进行风疹病毒抗体(RV-IgG)水平检测.[结果]检测表明:(1)汉、维、哈3个民族育龄妇女接种前风疹病毒抗体(RV-IgG)阳性率分别为73.01%、58.20%和55.26%.平均61.78%,风疹易感人群占38.22%,汉族与维吾尔族及哈萨克族之间、市区与县乡之间自然免疫的风疹抗体水平差异有统计学意义(P值均<0.01).(2)接种和复种风疹疫苗后,RV-IgG阳性率上升,易感人群下降至10.57%,各民族之间经主动免疫后风疹抗体水平的阳转率经检验,差异无统计学意义(P>0.05).[结论]伊犁州市区及县乡主体民族中超过1/3的育龄妇女对风疹病毒无免疫保护力,且市区与县乡之闻自然免疫水平有统计学差异,因此,建议将育龄妇女风疹疫苗接种纳入免疫程序,以控制风疹发生与流行后的潜在危险,并作为减少和预防先天性风疹综合症(CRS)的有效措施.
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郑州市1665例育龄妇女TORCH感染情况的调查
目的 探讨郑州市育龄妇女中TORCH的感染现状,为预防TORCH感染和做好优生优育工作提供依据.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2012年6月-2013年5月间来某院进行孕前咨询的育龄妇女1 666名进行TORCH感染的特异性IgM及IgG抗体检测.结果 1666例育龄妇女TORCH IgM抗体阳性99例,总阳性率为5.9％,其中RV IgM抗体阳性率高(3.2％),其次HSV(1.3％).在IgG抗体方面,CMV IgG抗体阳性率高(94.2％),其次为HSV IgG (91.7％),而RV IgG抗体阳性率为47.9％,Tox IgG为0.7％.在育龄人群年龄间TORCH感染分布方面,20～ 29岁组的育龄妇女中TORCH各病原体的IgM抗体阳性率普遍较高;而TORCH各病原体的IgG抗体阳性率随着年龄的增长普遍呈现上升趋势.结论 郑州市育龄妇女人群中存在一定比例的TORCH现状感染及较低RV IgG阳性率,建议育龄妇女孕前应进行TORCH筛查,以便尽早采取相应措施,避免由TORCH感染导致出生缺陷婴儿的发生.
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2010-2013年河北省麻疹疑似病例病原学检测结果分析
目的 分析河北省2010-2013年麻疹疑似病原学检测结果,了解河北省麻疹/风疹病毒基因型特征,为预防和控制麻疹/风疹提供分子流行病学数据方法采用病毒分离结合荧光定量PCR方法鉴定出麻疹病毒和风疹病毒阳性毒株,并进一步进行序列测定和分析.方法 从636份咽拭子标本中分离出44株麻疹阳性毒株,均为H1基因型;分离出24株风疹阳性毒株,除1株为2B基因型外,其余23株均为1E基因型.结果 河北省2010-2013年麻疹野病毒流行优势株为H1基因型,风疹野病毒流行优势株为1E基因型,未发现病毒有较大变异,未发现输入病例.
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Real-time PCR检测风疹病毒方法学建立及临床应用
为了建立一种能广泛应用于临床快速、简便、灵敏度和特异性较好的风疹病毒(RV)定量诊断方法.针对RV基因保守序列设计两对引物和一条荧光双标记探针.将PCR扩增所得到的产物片段克隆,作为定量检测的标准品, 进行Real-time PCR检测,绘制标准曲线.将此方法和ELISA试剂盒平行检测50份孕妇血清,评估两种方法检出阳性率的差异显著性.Real-time PCR法能较好地检出RV cDNA载量.曲线的相关系数(r)为0.998,可检测线性范围大约在103～109 copies/μl,灵敏度接近103 copies/μl;批间、批内CV值分别为3.36%、0.94%;也有较好的特异性.与经典的ELISA方法相比,有显著性差异.Real-time PCR方法操作简单、快速,并能避免PCR后处理导致的假阳性污染,实现实时定量.此方法对RV感染的临床诊断和疗效判断等方面有较大的指导意义.
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46,XX,t(6；8)(p10；p10)伴反复自然流产一例
患者 女,29岁,身高160 cm,体重56 kg,表型及智力正常.婚后3年自然流产3次,均在孕40～ 60 d.孕期无感冒史、无服药史、无有害化学物质及放射线接触史.对患者进行风疹病毒、巨细胞病毒、弓形体、单纯疱疹Ⅱ型病毒IgM检查均为阴性.夫妇非近亲结婚,双方家族中无类似死胎流产史患者,其它检查未见异常.
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46,XY,t(2;3)伴自然流产一例
患者 男,26岁,汉族,身高1.70 m,体重68 kg,表型及智力正常.婚后3年,其妻自然流产3次,均发生在孕3～5月内.夫妻非近亲结婚,妻孕期无患病及服药史、无有害化学物质及放射线接触史,妻产科检查及实验室弓形虫(Toxoplasma,T)、风疹病毒(rebulla virus,RV)、巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)和单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)抗体检查均未见异常.双方家族中无类似自然流产史患者.
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46,XX,t(4;13)伴自然流产一例
患者女,29岁,汉族.婚后3年自然流产4次,均在孕1月至孕2月间.查体:身高155 cm,体重45 kg,表型及智力正常.对患者进行风疹病毒、巨细胞病毒、弓形体、单纯疱疹Ⅱ型病毒IgM检查均为阴性,孕期无服药史,无有害化学物质及放射线接触史.夫妇非近结婚,双方家族中无类似死胎流产史患者,其它检查未见异常.
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一例46,XX,t(5;20)伴自然流产
患者 女,28岁,汉族.婚后4年自然流产3次,均在孕1月至孕2月间.身高1.56 m,体重47 kg,表型及智力正常,对患者进行风疹病毒、巨细胞病毒、弓形体、单纯疱疹Ⅱ型病毒IgM检查均为阴性,孕期无服药史,无有害化学物质及放射线接触史.夫妇非近亲结婚,双方家族中无类似死胎流产史患者,其它检查未见异常.
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46,XX,t(8;11)伴自然流产一例
患者女,24岁,汉族.婚后3年自然流产3次,均在孕70～90天.身高1.54 m,体重54 kg,表型及智力正常,对患者进行风疹病毒、巨细胞病毒、弓形体、单纯疱疹Ⅱ型病毒IgM检查均为阴性,孕期无服药史,无有害化学物质及放射线接触史.夫妇非近亲结婚,双方家族中无类似死胎、流产史患者,其它检查未见异常.
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襄樊地区婴儿弓形虫、风疹、巨细胞病毒感染血清学检测
妊娠期间活动性TOX(弓形虫)、RV(风疹病毒)、CMV(巨细胞病毒)感染,可通过胎盘传给胎儿,使其获得先天性感染,孕妇感染缺乏特异的临床表现或为隐性感染,但可导致流产、早产、死胎、畸型等,存活者中80%有精神障碍,50%有视力障碍[1],有关婴儿感染情况报道尚不多见,为了摸清本地区婴儿感染情况,对落实优生优育,提高人口质量有着重要的意义,现将本区婴儿血清检测结果报道如下:
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6018例孕前及孕早期妇女风疹及巨细胞病毒感染状况的分析
目的:了解在我院就诊的孕前及孕早期妇女风疹及巨细胞病毒的感染状况,为制定孕前及孕早期保健措施提供依据.方法:从2010年9月至2012年6月,在四川省妇幼保健院进行孕前检查和孕早期建卡的妇女,经知情同意,共6018例妇女进行了风疹病毒IgG和IgM,巨细胞病毒IgG和IgM的检测.根据定量检测的结果,按受检妇女的年龄段和风疹病毒、巨细胞病毒IgG(+/-)和IgM(+/-及不确定)状况分别统计例数.并采用SPSS软件进行统计分析.结果:受检人群风疹的总体易感率为12.63％(IgG-/IgM-),不同年龄段易感率差异有统计学意义(P ＜0.01),年龄在35～39岁易感率高,为22.53％,25 ～ 29岁易感率为11.80％.巨细胞病毒的总体易感率为4.85％,不同年龄段间易感率差异无统计学意义(P＞0.05),25～ 29岁易感率为5.36％.结论:育龄期妇女巨细胞病毒易感率较低,筛查时应当客观分析,风疹病毒易感率较高,在不同年龄段差异明显,应加强对高危年龄段孕妇的筛查.
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北京地区282例早孕妇女宫内感染的调查
宫内感染又称之先天性感染,是指孕妇在妊娠期间受到感染而引起胎儿的宫内感染[1].孕妇发生宫内感染后可造成流产、先天性畸形、死产及新生儿感染等一系列不良后果[2].国内调查发现在我国新生儿中先天性感染的发生率高达10%左右,其危害十分严重[3].所以如何预防或减少宫内感染的发生已成为做好母婴保健工作和提高我国出生人口素质的一项重要措施.为了调查北京地区早孕妇女中宫内感染的发生状况,我们利用酶联免疫吸附实验(ELISA)技术对282例北京地区早孕妇女血中的巨细胞病毒(CMV),风疹病毒(RV),单纯疱疹病毒1型(HSV-1),单纯疱疹病毒2型(HSV-2)和弓型虫(Toxo)的IgM抗体进行了测定,现将研究初步结果报告如下.
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温岭地区孕妇TORCH感染及妊娠结局分析
TORCH是一组能引起胎儿及孕妇感染的病原体.包括:弓形体(TO)、风疹病毒(RUV)、巨细胞病毒(CMV),单纯泡疹病毒(HSV)等病原体的总体,它们是孕期中病毒感染的主要病原微生物.当孕妇感染时,病原体可经过胎盘引起母婴垂直传播,从而导致宫内胎儿流产、死胎、早产、先天畸形等甚至可影响到出生后婴幼儿的智力发育,临床上统称为TORCH综合症.本文就温岭市计划生育技术指导站2000年1月至2000年12月间,对温岭地区4260例孕妇女进行TORCH感染的检测,现报告如下:
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国产风疹病毒免疫球蛋白M抗体检测试剂与进口试剂的性能比较
目的 比较一种新的国产风疹病毒(rubella virus,RV)免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)抗体化学发光检测试剂和进口化学发光检测试剂的检测性能.方法 2014年1月-3月收集临床血液样本356例,同时用国产试剂(评价试剂)和进口试剂(比对试剂)的RV IgM抗体化学发光检测试剂,检测血清中RV IgM抗体水平,按各自的操作说明书进行测定,检测结果不一致者以第三方试剂Trinity Biotech Plc的RV IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附测定法)验证,对临床样本进行等效性评价.结果 评价试剂和比对试剂同时检测了356例RV IgM样本,312例为阴性,38例为阳性.评价试剂和比对试剂测定结果阳性符合率为100.00％ [95％CI (90.82％,100.00％)],阴性符合率为98.11％ [95％CI (95.95％,99.13％)],总符合率为98.31％ [95％CI (87.59％,100.00％)],不一致的6例以第三方试剂验证后可得灵敏度为100.00％ [95％CI (90.82％,100.00％)],特异度为98.11％ [95％CI (95.95％,99.13％)],阳性预测值为86.36％ [95％CI (72.65％,94.83％)],阴性预测值为100.00％[95％CI (98.82％,100.00％)].评价试剂和比对试剂的受试者工作特征曲线下面积分别为0.991和1.000,诊断效能比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 该国产RV IgM抗体化学发光检测试剂盒具有较好的敏感性和特异性,能为临床RV IgM抗体的检测提供可靠的实验室诊断依据.
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7184例妇女TORCH检测结果分析
目的:分析妇女中血清弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒特异性IgG、IgM抗体检出率及不同人群中检出率和临床意义.方法:收集2013年1月～2014年6月,2015年1月～12月就诊的孕妇,共计7184例.对2015年孕前1087例、1737例孕妇、116例流产、不良妊娠94例及不孕症305例进行了血清TOX、RV、CMV、HSVⅡIgG、IgM抗体检测并对检测结果进行统计学分析.结果:2015年各组受检者与孕前组P＞0.05,由于流产组、不良妊娠与不孕组病例有限,TOX、RV、CMV、HSV感染而致出现异常的临床价值尚待进一步积累资料观察和分析.通过对7184例孕期妇女TORCH检测,TOX、CMV、HSVⅡIgM阳性检出率无明显增长趋势;RV、CMV IgG阳性率均高于文献的RV IgG 94.5％和CMVIgG88.93％～96.74％的报道.结论:按《孕前和孕期保健指南(2012)》建议孕前筛查或孕期有针对性的筛查,对降低出生缺陷的发生、提高人口质量及优生优育有一定意义.
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贵州省农村地区健康人群风疹抗体水平调查
风疹是由风疹病毒引起的一种常见急性传染病,以发热、全身皮疹为特征,人类普遍易感,常见于4～10岁儿童,一般感染后临床症状较轻,并发症少,但如果妊娠早期感染风疹病毒,则容易引起流产,死胎或婴儿出生后出现以多器官严重损伤为主要表现的先天性风疹综合征(congenital rubella syndrome,CRS)[1-2],给患儿及其家庭和社会造成沉重的负担,因此CRS是风疹病毒引起的严重的危害.
