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  • 不同种属TRIM5αB30.2基因克隆与原核表达及纯化的研究

    作者:李岚;吴昊;焦艳梅

    目的 对人、恒河猴和非洲绿猴的TRIM5α B30.2基因进行克隆、原核表达及纯化.方法 用PCR技术从人、恒河猴、非洲绿猴TRIM5α全基因序列中扩增B30.2片段,约660 bp,翻译成相对分子质量约为23×103的蛋白质.将测序鉴定过的不同种属TRIM5α B30.2基因克隆到原核表达载体A64上,以可溶的形式在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,经TEV酶切、纯化后,用SDS-PAGE方法鉴定表达蛋白.结果 获得了高纯度可溶的TRIM5α B30.2蛋白,纯度可达90%以上.结论 成功的获得不同种属TRIM5α B30.2蛋白,为蛋白结构的研究奠定基础.

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